INTRODUCCIN AL

DISEO DE REACTORES
BIOLGICOS

REACTORES BIOLGICOS
Concepto

Es un tanque o recipiente que mantiene un ambiente

biolgicamente adecuado, y en el cual se lleva a cabo un
proceso unitario en la que se involucran fenmenos
biotransformacin asociados a transferencia de momentum,
calor y masa.
Su diseo debe asegurar un ambiente uniforme y adecuado para
la reproduccin y actividad de los microorganismos.
Su escala est sujeta a su
aplicacin el cual puede ser a
nivel laboratorio, planta
piloto e industrial.

REACTORES BIOLGICOS
Funcin
o

o
o
o

Mantener las clulas uniformemente distribuidas en todo

el volumen del cultivo a fin de prevenir la sedimentacin
o la flotacin.
Mantener constante la temperatura.
Minimizar los gradientes de concentracin de nutrientes.
Suministrar oxigeno a una velocidad tal, que satisfaga el
consumo.
El diseo debe ser tal que permita mantener el cultivo
puro sin contaminantes.
3

BIOPROCESOS
Esquema
Materias
primas

de un bioproceso
Tratamiento
fsico

Productos

Materias
primas

Proceso Biolgico o
Bioqumico con reaccin

Procesos de
separacin

Productos

Salida = f (Entrada, Modelo de contacto y

la cintica de reaccin enzimtica o microbiana)

EN DNDE

ENCONTRAMOS

BIOPROCESOS O SUS PRODUCTOS?

Sectores

Farmacutico
Alimentario
Cervecera
Fermentaciones
Cosmticos
Agropecuario y agrcola
Biocombustibles
Tratamiento de aguas residuales
Tratamiento de residuos slidos
Tratamiento de gases contaminantes
Salud pblica
En las posadas ??
5

REVISIN DE
CONCEPTOS
FUNDAMENTALES

TASA DE REACCIN
Qu es una tasa?
Es el cambio de variables en funcin del tiempo.
La tasa de reaccin es una propiedad intensiva, definida en
cada punto de la mezcla reaccionante, por lo que cambia con
la posicin, de acuerdo a cambios de concentracin y
temperatura principalmente.
Considerando la reaccin general:
k
S

La velocidad o tasa de reaccin en una aproximacin de

estado cuasi-estacionario, se define como:

dS dP

rs rp
dt
dt

Donde:
S= Concentracin molar del
sustrato, mol L-1
P= Concentracin molar del
producto, mol L-1
t = tiempo

TASA DE REACCIN
En estudios cinticos experimentales se busca tener
reactores bien agitados, sin problemas de mezclado, de tal
forma que se elimine la dependencia de la tasa de reaccin
con el volumen del reactor.
Un tipo de experimento para medir reacciones enzimticas
es medir la velocidad inicial de reaccin de tal forma que:

dS
dt t

dP

dt

rp rs

Donde: t=to, S= So, P=0 @ t=0

8

Diferencia entre catalizadores biolgicos y qumicos

Existe una gran similitud entre las reacciones catalticas qumicas y las enzimticas
bioqumicas y una metodologa en comn, pero existen diferencias:

BIOLGICOS

Reacciones bajo condiciones suaves,

temperaturas menores a 100C, presin
atmosfrica y pH casi neutro.
Raramente generan productos
indeseables, por su alta especificidad.

QUMICOS

Requieren temperatura y presin

elevada, pH extremo para ser eficaces.

Casi siempre se obtienen productos

colaterales.

Fenmenos de Desactivacin en catlisis enzimtica y

qumica
Fenmenos de prdida de actividad cataltica, y sus causas, en enzimas y catalizadores qumicos
Fenmeno

Causa
Catalizador qumico

Inhibicin por producto (reversible)

El producto acumulado ocupa sitios activos

Envenenamiento (irreversible)

Algunos sitios activos reaccionaron con sustancias que dan

lugar a un sitio inactivo.

Sinterizacin (irreversible)

Una gran rea del catalizador pierde superficie activa

disminuyendo el nmero de sitios activos por volumen de
catalizador.
Catalizador enzimtico o microbiano

Inhibicin por producto (reversible)

El producto acumulado ocupa sitios activos

Envenenamiento (irreversible)

Algunos sitios activos reaccionaron con sustancias que dan

lugar a un sitio inactivo.

Desnaturalizacin (irreversible o reversible)

La conformacin molecular de la enzima cambia ocultando o

inactivando sitios activos.

10

CLASIFICACIN DE LAS REACCIONES

Reacciones Homogneas

Reacciones No catalizadas

Reacciones Catalizadas

Reacciones en fase gasesosa

Muchas reacciones en fase

Combustion de gas

lquida
Reacciones
coloidales,

en

sistemas

microbianos

enzimticas, tratamiento de
agua

Reacciones Hetergeneas

Combustin de gasolina, diesel,

Hidrogenacin aceites

carbn, gas

Cracking

de

petrleo,

Fermentacin slida
11

COMPARACION DE LAS TASAS DE REACCION

Velocidad de las reacciones -rA=moles que desaparecen de A/ m3 de objeto*s

Hacer Ejemplo 1.1 y 1.2 Levenspiel 3 ed. 2006

12

TASA DE REACCIN

dCS dCP
rS rP

dt
dt
Reacciones heterogneas y homogneas
-rs = rp = f (Temperatura, pH, Concentracin, Inhibidores,
transferencia de calor y masa)

El cambio de densidad () debida a las presiones parciales es

muy importante

aA + bB rR + Ss

Para la mayora de los procesos biolgicos la densidad es

constante.
13

EXPRESIONES DE TASA DE REACCION

Tasa de desaparicin del sustrato S o aparicin del producto P

rs rp

dCs dCp

dt
dt

Para establecer la equivalencia de las tasas de reaccin,

ri =

1 dN
1
moles
=
volumen tiempo
V dt

despejamos

rii =

1 dN
1
moles
=
w dt
peso del catalizado r tiempo

dN
= -ri * V = -rii * w = -riii i * S= -riV * Vr
dt

1
1 dN
moles
-riii=
=
s dt
superficie tiempo

riv =

1 dN
1
moles
=
Vr dt Volumen del reactor tiempo

dN
:
dt

donde,
V: Volumen de reaccin

w: peso del catalizador

s: Superficie

Vr: volumen del reactor

14

REACCIONES ELEMENTALES
A

Reacciones en serie

Reacciones reversibles
k1

R
A

Reacciones simultneas
(Del tipo competitivo)

A+B

R+S
k2

-ra = k1 CaCb
A

Reacciones simultneas.

(Estas suceden en paralelo)

En el equilibrio la reaccin directa es

igual a la reaccin reversa
MUY IMPORTANTE:
La constante de afinidad en
bioprocesos, ks.
est definida como el inverso
(Reac/Prod o (k2/k1)
de la constante de equilibrio Keq

Entonces la constante de Equilibrio es la

relacin
de
productos
y
reactivos
(Prod/Reac) o la relacin de contantes de
formacin entre la de Disociacin entre
reactivos (k1/k2)

k1 CaCb = k2 CrCs
k1 Cr Cs
Keq = =
k2 CaCb

15

ORDEN DE REACCIN
r = k Caa Cbb
a y b son los exponentes a la cual estn elevadas las concentraciones
Tasa de reaccin de A es de orden a con respecto a la concentracin de Ca
Tasa de reaccin de B es de orden b con respecto a la concentracin de Cb

Orden Global de la Reaccin: G = a + b ... + z

Cules son las unidades del constante de reaccin k?
Sern las mismas para las tres rdenes de reaccin?

-ra = kCa1

-ra = k Ca

-ra = kCa3

orden 1

mol 1 mol
=
Vt
t V

Generalizacin del orden de reaccin (n):

mol 1 V mol 2
orden 2
=
Vt
t mol V 2

orden 3

mol 1 V mol
=
Vt
t mol 2 V 3

1 V n-1 1 mol 1-n

k= ( ) = ( )
t mol
t V

16

ANLISIS DE TASAS DE
REACCIN

CONTRIBUCIONES CLAVES A LA CINTICA

DE REACCIONES ENZIMTICAS

Irving Langmuir

Isotermas de Langmuir
18

CINTICA DE MICHAELIS-MENTEN

Leonor Michaelis

Maud Menten

George Edward Briggs

John Burdon
Sanderson Haldane

El modelo de Michaelis-Menten (1913) es un caso hipottico de reacciones catalizadas por enzimas.

Posteriormente produndizado por George Edward Briggs y John Burdon Sanderson Haldane (1925)

19

Publicaciones emblemticas

20

Para concentracin de sustrato alta, la

tasa de reaccin es independiente de la
concentracin de sustrato; tasa de
reaccin de Orden Cero.
Para concentracin de sustrato baja, la
tasa de reaccin es de Primer Orden,
con respecto a la concentracin de
sustrato.

El proceso se ve afectado en todo momento por la concentracin total de enzima. Una

expresin que describe este proceso es:

rS rP

kC Eo C S

KmCS

(3)

21

Los 3 tipos de reactores ideales

Reactor por lote

o intermitente

Reactor continuo de
flujo mezclado

Reactor de flujo
piston

Salida = f (Entrada, Modelo de contacto y

la cintica de reaccin enzimtica/microbiana)

22

Conceptos importantes para las reacciones

Nso = nmero de moles iniciales
Ns = nmero de moles
Xs = Conversin, fraccin de reactante transformado

Expresada en trminos de moles Xs resulta.

Xs

NS 0 NS
NS 0
1
NSo
NS

Expresada en trminos de concentraciones Xs resulta.

Xs

CS 0 CS
C
1 S
CS 0
CS 0

Cs CS 0 (1 Xs )

dCs CS 0 dXs
0 < Xs < 1
0 ( significa que nada ha reaccionado).
1 ( significa que todo se ha transformado).
t = tiempo para consumir el 50% del reactante
Cs

Cambio de volumen con el avance de la reaccin

V = Vo ( 1 + s Xs )
Vo = volumen inicial
s Xs = factor de volumen entre el Vo y el V en funcin de Xs
Xs: avance de La reacccin
Para la mayora de la reacciones biolgicas en medio acuoso
la densidad (r) es constante por lo que el volumen es constante
En el tratamiento biolgico de gases podra haber
cambio de volumen

23

Reaccin de primer orden

k

SP
Expresando en trminos de conversin, Xs

dCs
kCs
dt
Cs

xS

dCs
Cso Cs k 0 dt

CS 0 C S
CS 0

Cs CS 0 (1 Xs )

dCs CS 0 dXs
Sustituyendo y rearreglando la expresin

Rearreglando la expresin

Cs

dCs
k dt
Cs 0

Integrando se llega a :

Cso
Ln
kt
Cs

Cso
kt
Cso(1 Xs )

Ln

1
kt
(1 Xs )
12

C
1
Ln S 0 Ln
CS
1 xS

kt

-Ln(Cs/Cso) -Ln(1-Xs)

Cso

Ln

10
8

K constante de
reaccin o
constante de
primer orden

6
4
2

24

0
0

10
t

15

Reaccin de segundo orden bimolecular

S+SP

r dCdt

r dCdt
S

dCP
kCs^2 kCS 02(1 Xs )^2
dt

kCs^2

Integrando de CSo a Cs:

1
1
1
Xs

kt
Cs Cso Cso (1 Xs )

10000
1000

xA/(1-xA)

100
10
m=CA0 k

1
1

10

100
t 1000 10000

25

Tasas de reaccin de orden n, para

n 1

Para reacciones de orden cero:

ra

dCa
kCan
dt

dC A
k
dt

(CA0 CA ) = k t

La forma general de Integracin es:

1 n

CA

1 n

C A0

C A0 C A
k

(n 1)kt
m= - k b = CAo

1 n

C
t A
(1 n)k

15
CA

Vlida solo cuando n 1

Si CA = 0 (cuando se agota el sustrato) entonces:

10

m= - k
b = CAo

5
0
0

10

26

Ejercicios Omnilibro Levenspiel

Cap 1. A6, A7, A8, A9
Cap2 . A1, A2, A3, A5, A6, A13.
Encontrar la expresin de velocidad de
B14B19
E36, E40

27

Reaccin de segundo orden

A+BC

rA

Se llega a

dC A
dCB

kCACB
dt
dt

dx A
C A0 k (1 x A )(M x A )
dt

a) El consumo de A es en las mismas proporciones que el consumo de B.

C A0 x A C A C A0

CB 0 xB CB CB 0

Integrando:

CB CB0 (1 XB)
1 xB
M xA
Ln
Ln
(CB 0 CA0)kt
1 x A
M (1 x A )

En todo momento se cumple que:

C A0 x A C B 0 x B

Sustituyendo dCA por

C A0

en la siguiente expresin:

dx A
kCA0 1 x A C B 0 (1 x B )
dt

Considerque que a t=0

Sustituyendo XB

C
M B0
C A0
xB

C A0 x A
CB0

C A0 dx A

Ln ((1-xB)/(1-xA))

CA CA0 (1 XA)

10000
1000
100
m = (CB0-CA0)kt

10
1
1

100

10000

28

Modelos de DRB para una sola reaccin

Densidad constante

29

ECUACIN DE MICHAELIS-MENTEN

Leonor Michaelis

Maud Menten

El

modelo de Michaelis-Menten (1913) es un caso

hipottico de reacciones catalizadas por enzimas.

30

Considrese la siguiente reaccin:

Evidencia experimental muestra que:

Zona I. Dependencia
de r con Cs.

Dependencia
de r con CE en todo momento
Zona III. Independencia
de r con Cs.
31

Para concentracin de sustrato alta, la

tasa de reaccin es independiente de la
concentracin de sustrato; tasa de
reaccin de Orden Cero.
Para concentracin de sustrato baja, la
tasa de reaccin es de Primer Orden,
con respecto a la concentracin de
sustrato.

El proceso se ve afectado en todo momento por la concentracin total de enzima. Una

expresin que describe este proceso es:

rS rP

kC Eo C S

KmCS

(3)

32

Los mecanismos elementales se pueden explicar tomando en consideracin:

(4)
De donde:

El avance de la reaccin se puede caracterizar considerando la formacin y

desaparicin del sustrato, el complejo enzima-sustrato y el producto. De manera
que se pueden escribir, para la tasa de reaccin, las siguientes ecuaciones.

33

ECUACIN DE MICHAELIS-MENTEN

k2
k1

Los trminos k 3CE 0 y

se definen como
Respectivamente, la ecuacin (27) se escribe:

r max CS
rs rP
KM CS

r max

KS

28

Que es la ecuacin de Michaelis-Menten.

El trmino KS resulta de una condicin de equilibrio

rpido.
KM proviene de considerar un estado pseudoestacionario,
utilizndose ambas de forma indistinta.
34

ECUACIN DE MICHAELIS-MENTEN

Grfico de la ecuacin de Michaelis-Menten

35

CONCEPTO IMPORTANTES DE LA
ECUACIN DE MICHAELIS-MENTEN
La velocidad de reaccin se acerca asintticamente, hacia un
valor mximo rmax.
La mitad del valor de rmax se alcanza a una concentracin de
sustrato conocida como la constante de Michaelis, ya sea KM o
KS segn el caso.
Este parmetro se considera como una medida de la afinidad de
la enzima por el sustrato, a menor valor de KM mayor afinidad.
La tasa de reaccin se puede aproximar a rmax cuando se tienen
concentraciones de sustrato mucho mayores a KM , y se tiene una
cintica de orden cero con respecto al sustrato.
A concentracin de sustrato ms bajas que KM se tiene una
cintica de primer orden, con respecto al sustrato, y la grfica de
la tasa de reaccin es una lnea recta en esa zona.

36

TASA ESPECFICA DE
CRECIMIENTO MICROBIANO
La tasa especfica de crecimiento () es una velocidad a la
cual se duplica una poblacin microbiana en un tiempo
determinado.
Es una tasa especfica porque se define por unidad de
biomasa.
representa el estado fisiolgico del cultivo microbiano.
Depende de la concentracin del nutriente limitante.

La ecuacin de Monod describe la relacin

entre la velocidad especfica de crecimiento,
, y la concentracin del nutriente limitante,
S, en un cultivo microbiano.
37

TASA ESPECFICA DE CRECIMIENTO

El modelo de Monod expresa:

dx
x
dt

max S
Ks S

La ecuacin b est representada en la siguiente figura en donde

se grafica como funcin de la concentracin del sustrato. El
valor de Ks se obtiene cuando =0.5 max.
Las condiciones ambientales
tienen una gran influencia en
el crecimiento microbiano, de
manera que:
=f ( T, pH, naturaleza y
composicin de nutrientes,
fuerza inica, etc.).
38

Otros modelos propuestos para crecimiento

microbiano
Substrate inhibition:

Product inhibition:

or

max

s
s / Ki s K s

max

s
1
s K s 1 p / Ki

max

s
s Ks

Name
Tessier

(7.19)

p
1

p max

(7.20)

Kinetic expression

max 1 e s / K

Moser

max

Contois

max

Blackman

Logistic law

Villadsen et al 2011

(7.18)

sn
sn Ks
s
s Ks x

; s 2K s
max

2K s

; s 2K s
max

x
max 1
Kx

39

CONDICONES DE CULTIVO
PARA LA ECUACION DE MONOD
o
o

o
o

Inoculo viable
Nutriente limitante bien definido
Medio de cultivo balanceado
Ausencia de condiciones adversas (Temperatura, pH,
inhibidores, entre otros).
La tasa de crecimiento () depende de la mxima que puede
alcanzar el microorganismo, de la concentracin de sustrato y
de un valor Ks que representa la concentracin de sustrato a
la que se alcanza una tasa de crecimiento igual a la mitad de
la mxima.
40

TASA ESPECFICA DE CRECIMIENTO

Constantes de saturacin (Ks) para diferentes sustratos y

microorganismos

Organismo
(Gnero)
Escherichia
Escherichia
Escherichia
Candida
Candida
Candida
Saccharomyces
Aspergillus
Klebsiella
Klebsiella

Sustrato
(limitante)
Glucosa
Glucosa
Manitol
Glicerol
Oxgeno
Oxgeno
Glucosa
Glucosa
Iones magnesio
Iones potasio

Ks
(mg/L)
(10-5 M)
6.8 x 10-2 3.8 x 10-2
4
2.2
2
1.1
4.5
4.9
4.5 x 10-1
1.4
4.2 x 10-2 1.3 x 10-1
25
14
5
2.8
5.6 x 10-1
2.3
3.9 x 10-1
1

Escherichia

41

Klebsiella

Saccharomyces

Aspergillus

Candida

TIEMPO DE DUPLICACIN

El tiempo de duplicacin (td) es el perodo que requieren las

clulas de una poblacin microbiana para crecer, dividirse, y dar
lugar a dos nuevas clulas por cada una de las que existan
anteriormente.
El tiempo de duplicacin vara dependiendo de la especie
microbiana y de las condiciones de crecimiento de la poblacin.
El tiempo de duplicacin es, aproximadamente, el mismo para
todas las clulas de una determinada poblacin.
Td no cambia hasta que se agotan los nutrientes o comienzan a
acumularse los productos metablicos txicos.

42

TIEMPO DE DUPLICACIN
Si se integra la ecuacin 1 entre los lmites siguientes:

x2

x1

Donde:

td

dx
dt
dt
0

x 2 2x1
Td= tiempo de duplicacin

Se obtiene que:

td

ln 2

La ecuacin 3 es de gran importancia biolgica pues si se tabulan

los tiempos de duplicacin mxima para bacterias, levaduras,
mohos y protozoarios, se observa que estos tiempos se agrupan,
siendo las bacterias las que tienen un td menor y los protozoarios
mucho mayor.

43

TIEMPO DE DUPLICACIN

Distribucin de los tiempos mximos de duplicacin para microorganismos

Efecto de la temperatura en el crecimiento

44

Ejemplos de tiempo de duplicacin

Microorganismo
1. Bacillus stearothermophilus
2. Escherichia coli
3. Bacillus subtilis
4. Bacillus mycoides
5. Streptococcus lactis
6. Staphylococcus aureus
7. Pseudomonas putida
8. Lactobacillus acidophilus
9. Vibrio marinus
10. Mycobacterium tuberculosis
11. Bradyrhizobium japonicum
12. Nostoc japonicum
13. Anabaena cylindrica
14. Treponema pallidum

14

12

Temperatura (C)
60
37
37
37
37
37
30
37
15
37
25
25
25
37

10

Tiempo de duplicacin
(min)
11
20
27
28
30
28
45
75
80
360
400
570
840
1980

45

13

11

CRECIMIENTO CELULAR POR

LA RESPIRACION
La funcin logstica, curva logstica o curva en forma de S es una funcin
matemtica que aparece en diversos modelos de crecimiento de
poblaciones; incluye la fase de adaptacin, exponencial, crecimiento
acelerado y estacionario.
Est ecuacin es usada para estimar el crecimiento microbiano

dx x 1 x

dt
x
max

x max
x
x max x 0

1
exp( t )
x0

46

ECUACIN GOMPERTZ PARA

ESTIMAR CRECIMIENTO
En FMS es mas fcil medir la respiracin que la biomasa

Modelo de Gompertz

dX kXLn X max
X
dt
X X max exp( b exp( kt)
t 0; Xo X max exp( b)

47
Zwietering et al 1990, 1992

ECUACIN DE GOMPERTZ PARA

MODELAR EL CRECIMIENTO MICROBIANO

Grfico del modelo de Gompertz

48

Efecto de las caractersticas del crecimiento

microbiano en el DRB
1/ rp = 1/dP, 1/rX = 1/dX,
1/-rs = -1/dS

5
4
3
2
1

dP

18

10

15

20

25

30

So-Sf=P

14

1.6

30

12

1.4

25

dP, dX , -dS

Formacion X o P ,
Consumo de S (g/l)

16

1.8

20
15
10

10

1.2
1.0

dP

0.8
0.6
0.4

0.2

0.0

10

20
Tiem po (h)

30

40

1/ rp = 1/dP, 1/rX = 1/dX,

1/-rs = -1/dS

35

8
6
4
2
0

10

20
Tiem po

30

40

10

15

20

25

30

So-Sf = P

49

EFECTO SIMULTNEO DE PH
Y TEMPERATURA SOBRE LA

ACTIVIDAD ENZIMTICA Y
MICROBIANA

EFECTO DEL PH
La

mayora de las enzimas poseen un pH

caracterstico al cual su actividad es mxima.
Por enzima o por debajo del pH ptimo la actividad
disminuye.
La relacin entre el pH y la actividad de cualquier
enzima depende del comportamiento acido-base de la
enzima y del sustrato, as como de muchos otros
factores.
La forma de la curva de actividad-pH vara con la
concentracin de sustrato, ya que el valor de Km de
muchas enzimas vara con el pH.
51

ACTIVIDAD DE ENZIMAS CON RESPECTO AL PH

Como podemos simular este comportamiento ?

52

MODELOS QUE DESCRIBEN

EL EFECTO DEL PH
Modelos clsicos basados en de reacciones cido-base
Henderson-Hasselback pH = pK + log [cido/base]

Modelo de Michaelis Menten del pH. Se pueden obtener

formas tiles para representar los efectos del pH en la actividad
cataltica de la enzima usando el siguiente modelo del estado de
ionizacin del sitio activo:

En estas reacciones cido-base, E- denota la forma activa

de la enzima, mientras que E y E= son formas inactivas
obtenidas por protonacin y desprotonacin del sitio activo
53
de la enzima, respectivamente.
K1 y K2 son las constantes de equilibrio de las reacciones.

EFECTO DEL PH EN LA ECUACION DE MICHAELIS MENTEN

La protonacin y desprotonacin son procesos muy rpidos

comparados con la mayora de las reacciones en solucin, por lo
tanto, puede asumirse que la fraccin de la enzima en el estado
inico activo es Y- siempre que la enzima este actuando como
catalizador.
Consecuentemente. La influencia en la velocidad mxima de
reaccin Vmax se puede obtener al multiplicar la concentracin de
enzima total ET por la fraccin de la forma activa de la enzima Y-:

VmxCS
kcat[ ETY ]Cs
rS v

K S CS
K S CS

V max kcat[ ETY ]

54

Despus de escribir las relaciones de equilibrio para las dos reacciones:

E E H

E E H

EH
K1
E

EH
K2
E

E K1
H
E K 2 EK1 K 2

H
[ H ]2
E

La enzima total esta dada presente, por:

ETOTAL E E E

La fraccin para cada tipo de enzima esta dado por :

E
Y
E E E
Y

1
K
KK
1 1 1 22
H
[H ]

Y
Y

E
E E E
1

H K2
1

K1 H

Donde pK1 y pK2 es definido como

log K1; log K2

E E E

1
H [ H ]2
1

K 2 K1 K 2

1
pH (ptimo ) ( pK1 pK 2)
2

55

EFECTO DEL PH
rS v

VmxCS
kcat[ ETY ]Cs

K S CS
K S CS

H K2
1

K1 H

V max kcat[ ETY ]

pK1=4 y pK2=7

pK1=4.5 y pK2=5.5
Efecto del pH y pK en la forma activa E

1.2000

1.2000

1.0000

1.0000

0.8000

0.6000

0.4000

Y`

Y, Y`, Y``

Y, Y`, Y``

Efecto del pH y pK en la forma activa E

0.8000

0.6000

0.4000

Y`

0.2000

0.2000

0.0000

0.0000

10

pH

Hacer grfica para pK1 = 4 y pK2 = 7

Hacer grfica para pK1 = 5.5 y pK2 = 6.5
2<pH<9, DpH = 0.2 unidades

10

pH

56

EFECTO DE LA TEMPERATURA
La velocidad de las reacciones catalizadas por enzimas se
incrementan en general con la temperatura, dentro del intervalo
donde la enzima es estable y permanece totalmente activa.
Las enzimas, al ser protenas se desnaturalizan por la accin del
calor y se inactivan cuando la elevacin de la temperatura
sobrepasa un cierto punto.
La temperatura ptima de una enzima es el resultado de dos
procesos:
1) El incremento habitual de la velocidad de reaccin con la
temperatura.
2) El incremento de la velocidad de desnaturalizacin trmica de
la enzima al sobrepasar un temperatura crtica.

57

Para describir el efecto de la temperatura sobre la cintica

enzimtica se recurre a la ecuacin de Arrhenius:
EA
V max max kcat A exp
RT

Donde:
Ea= energa de activacin
R= Constante de los gases
T= Temperatura en K

A= Factor frecuencia
1.987 cal/mol K; 8.314J/mol K

Ecuacin de Arrhenius
limitada a la zona de
activacin

Actividad

(1)

EA
Lnv Lnk LnA
RT

Ln(k)

Ln(A)
m = -Ea/R

58

20

30

40

Temperatura

1/T(K)

APLICACIN DE LA ECUACIN DE ARRHENIUS EN 2

PUNTOS

kcat 2

EA
A exp

RT
2

EA
kcat1 A exp

RT
1

T2 > T1

Tomando logaritmos y dividiendo la segunda expresin entre la primera se llega

k2 EA 1 1
Ln

k1
R T2 T1

Cal.
EA

mol

Difusin

Que informacin adicional podemos obtener ??

EA

k
RT2T1
Ln 2
T2 T1
k1

EA

Q10

6,000

1.4

Procesos biolgicos

12, 600

Qumicos

50, 000

15.5

RT2T1
LnQ10
10

La estimacin de Q10 ?? Puede dar indicios de limitaciones de transferencia de masa

EJERCICIOS Cap 1 OMNILIBRO Levenspiel
B10, B11, B12, B13, B16, B18, B19, B21, B22

59

EFECTO DE LA TEMPERATURA
Como podemos simular este comportamiento ?
Esener y Roels desarrollaron una ecuacin basada en una reaccin
reversible de la forme actva e inactiva de la enzima en funcin de la
temperatura
E activa
E inactiva

Actividad

Temperatura

20

30

E
A * exp A1
RT

E
1 B exp A 2
RT

40

Aplicacin a la FMS
de yuca por A. niger
60

SE PODR SIMULAR EL EFECTO SIMULTNEO DE

DE LA TEMPERATURA Y DEL PH ??
Recordemos lo que ya sabemos

VmxCS
kcat[ ETY ]Cs
rS v

K S CS
K S CS

0.20
0.18
0.16
0.14
0.12
0.10

Efecto del pH

0.08
0.06

Hacer grfica 3D Opcional

0.2 unidades calificacin final

Temperatura
40

0.10-0.12
0.08-0.10
0.06-0.08
0.04-0.06
0.00-0.02

61

30

0.12-0.14

0.02-0.04

Actividad

20

0.14-0.16

0.00

Efecto de la temperatura

A * exp E A1 / RT
kcat
1 B exp E A2 / RT

0.16-0.18

0.02

C65

C57

C49

C41

C33

C25

C9

C17

45.00

50.00
C1

40.00

30.00

H
K2
1

K1 H

35.00

25.00

15.00

20.00

0.04

0.18-0.20

CONCEPTOS
IMPORTANTES PARA
REACTORES DE FLUJO
CONTINUO

CULTIVO CONTINUO
Un cultivo continuo es un sistema abierto con volumen
constante, al que continuamente se aade medio fresco de un
reservorio y al que se le retira medio usado que contiene
microorganismos y sustancias de desecho a una velocidad
constante.

Por lo tanto el medio se renueva y su composicin no cambia a

lo largo del tiempo, lo que permite mantener le crecimiento
microbiano de la poblacin de forma indefinida, una vez
alcanzado el estado de equilibrio.

Todas las teoras de cultivo continuo se basan en el

modelo de Monod

Existen dos formas bsicas de cultivo continuo: el cultivo

de flujo tapn y el reactor continuo de tanque agitado o
quimiostato .

63

CULTIVO CONTINUO

Flujo tapn

En este tipo de fermentacin continua la solucin de cultivo fluye a

travs de un reactor tubular sin mezclado. La composicin de la
solucin de nutrientes, el nmero de clulas, la transferencia de
masa (suministro de O2) y la productividad varan en distintas
posiciones dentro del sistema.
A la entrada del reactor las clulas deben aadirse continuamente
junto con la solucin de nutrientes.

Quimiostato

Un quimiostato consiste en un tanque agitado

con una suspensin de biomasa perfectamente
mezclada y homognea, a la que se alimenta
con medio fresco a una tasa constante; el
caldo de fermentacin es extrado a la misma
velocidad de modo que el volumen
permanece constante.

64

VENTAJAS DEL CULTIVO CONTINUO

La velocidad especfica de crecimiento puede establecerse
(dentro de los lmites del microorganismo) de acuerdo con
las necesidades de la experiencia. Se puede seleccionar un
estado de actividad metablico particular de acuerdo a las
condiciones de operacin del reactor.
Se pueden obtener clulas en un estado definido
independientemente del tiempo.

Con equipo de laboratorio se puede producir,

comparativamente grandes cantidades de material celular
definido.

65

TIEMPO DE RETENCIN HIDRULICA

En el quimiostato idealmente el mezclado debe ser perfecto,
es decir que cuando una gota del medio entre al reactor
instantneamente deber quedar uniformemente distribuida
en el cultivo.
Esto significa en la prctica que el tiempo requerido para
mezclar un pequeo volumen del medio con el cultivo ser
tambin pequeo comparado con el tiempo de retencin.

Tiempo de retencin hidrulico (TRH): es el tiempo que

tarda en renovarse todo el volumen del reactor.

Volumen V
TRH

Flujo
F
66

TASA DE DILUCIN

En cultivo continuo se denomina Tasa de dilucin (D) a la

entrada del medio a una concentracin So y a un flujo
volumtrico constante, F, divida por el volumen del cultivo
(clulas, medio, gas).

Flujo
F
D

Volumen V

La tasa de dilucin representa la tasa de flujo por unidad de

volumen

67

RELACIN TRH, D Y

El tiempo de retencin hidrulico es inversamente proporcional

con la tasa de dilucin por lo que:

1 1
TRH
D

68

Conceptos importantes para los reactores ideales

Nso = nmero de moles iniciales
Ns = nmero de moles
Xs = Conversin, fraccin de reactante transformado

Expresada en trminos de moles Xs resulta.

Xs

NS 0 NS
NS
1
NSo
NS 0

Expresada en trminos de concentraciones Xs resulta.

Xs

CS 0 CS
C
1 S
CS 0
CS 0

Cs CS 0 (1 Xs )

dCs CS 0 dXs
0 < Xs < 1
0 ( significa que nada ha reaccionado).
1 ( significa que todo se ha transformado).
t = tiempo para consumir el 50% del reactante
Cs

Cambio de volumen con el avance de la reaccin

V = Vo ( 1 + s Xs )
Vo = volumen inicial
s Xs = factor de volumen entre el Vo y el V en funcin de Xs
Xs: avance de La reacccin
Para la mayora de la reacciones biolgicas en medio acuoso
La densidad (r) es constante por lo que el volumen es constante
En el tratamiento biolgico de gases podra haber
cambio de volumen

69

Conceptos importantes para los reactores de flujo

Flujo de moles de S la unidad de tiempo (Fs,Fso)
Fs

moles _ de _ S _ a lim entados

t

V VCso

vO
Fso

Flujo volumtrico por unidad de tiempo (vf, vo)

v

m3de _ fluido _ que _ entran _ al _ reactor

t

VCso m3moles / m3

[]t
Fso
moles / t

CSo = concentracin de S en la alimentacin.

V
[] t
vO

Tiempo de Residencia Hidralica

Indica el tiempo promedio que permanece un elemento de
volumen (gotita) en el reactor.

70