Ao de la Inversin para el Desarrollo Rural y la

Seguridad Alimentaria

UNIVERSIDAD NACIONAL SANTIAGO

ANTUNEZ DE MAYOLO

FACULTAD DE CIENCIAS DEL AMBIENTE

Escuela Acadmico Profesional de Ingeniera Ambiental
TEMA:
DETERMINACION
DE
MICROROGANISMOS
PATOGENOS
TRANSMITIDOS POR LA MUSCA DOMESTICA L(Dptera: Muscidae)

CURSO:
MICROBIOLOGIA AMBIENTAL
DOCENTE:
Blga. Rosario Adriana Polo Salazar
INTEGRANTES:
Ramrez Figueroa Michael
Roshimary flores romero

Huaraz 24/09/2013

INDICE:
I.

INTRODUCCIN

II.

OBJETIVOS
2.1 Objetivo general
2.2 Objetivos especficos

III.

MARCO TERICO
3.1 bases tericas.
3.2 Definicin de trminos.

IV.

MATERIALES Y MTODOS
4.1 Equipos
4.2 Medios de cultivo

V.

PROCEDIMIENTO
5.1 Preparacin de los medios de cultivo
5.2 procedimiento para realizar el muestreo

VI.

RESULTADOS E INTERPRETACIN

VII.

DISCUSIN

VIII.

CONCLUSIONES

IX.

RECOMENDACIONES

X.

REFERENCIA BIBLIOGRFICA

XI.

ANEXOS

I)INTRODUCCIN
En La naturaleza existen al menos 500000 especies microbianas
probablemente ms. Solamente unos cuantos cientos de especies estn
catalogadas como patgenos humanos. La mayor parte de ellos llevan a
cabo funciones esenciales para la vida de otros organismos, muchos de ellos
estableciendo fuertes y estables relaciones de beneficio mutuo con plantas y
animales.

Sin

embargo,

las

especies

patgenas

tienen

efectos

tremendamente negativo en los organismos hospedadores.

Los microorganismos son causantes de diversas enfermedades tanto para el
hombre como para los animales, estos se pueden transmitir mediante
contacto directo de persona a persona o indirecta a travs de objetos
contaminados (grifera en los servicios higinicos, las monedas, los lapiceros,
etc.).
Por ello en el siguiente trabajo de investigacin presentaremos una gran
importancia el uso de desinfectantes para el cuidado de la salud, debido a
que se determinara la existencia y cantidad de colonias de microorganismos
en las reas evaluadas
domestico

con diferentes productos de limpieza comn y

II)

OBJETIVOS:
2.1) Objetivo general:

Determinar la presencia de microorganismos, en el rea tratada con

diferentes tipos de desinfectantes.

2.2) Objetivo especfico:

Determinar la cantidad de microorganismos patgenos que se obtuvo

despus del uso de desinfectantes.

Comparar la eficiencia de cada producto de desinfeccin usados en

las reas tratadas.

III) MARCO TEORICO:

3.1 bases tericas.
STAPHYLOCOCCUS
Los estafilococos son cocos Gram positivos de 0.8 1 um de dimetro que se
dividen en diversos planos dando lugar a grupos irregulares. Los estafilococos
son bacterias no esporuladas pero resistentes a la desecacin y por ello
fcilmente dispersables por las partculas de polvo a travs del aire y las
superficies. En humanos hay dos especies importantes staphylococcus
epidermidis, una forma no pigmentada que se encuentra habitualmente sobre
la piel o membrana mucosas, y staphylococcus aureus, una forma con color
amarillo. Ambas especies son patgenos potenciales.
STREPTOCOCCUS
El gneroStreptococcus es un grupo de bacterias formado por
cocosGramnegativos,
no
esporulados,
homofermentativos,
anaerobios
aerotolerantes, pertenecientes al filofirmicutesy al grupo de las bacterias cido
lcticas. Estas bacterias crecen en cadenas o pares, donde cada divisin celular
ocurre a lo largo de un eje. De all que su nombre, del Griegostreptos, significa

que se dobla o retuerce con facilidad, como una cadena. Los Streptococcusson
oxidasa y catalasanegativos.
Las especies de estreptococos que producen enfermedades son:
Estreptococos del grupo
amigdalitis e imptigo.

A:

Streptococcus

pyogenes

producen

Estreptococos del grupo B: Streptococcus agalactiae producen

meningitis en neonatos y trastornos del embarazo en la mujer.
Neumococo: Streptococcus pneumoniae es la principal causa de
neumona adquirida en la comunidad.
Streptococcus viridans es una causa importante de endocarditis y de
abscesos dentales.
Streptococcus mutans causa importante de caries dental. Pertenece al
grupo de estreptococos viridans.
Algunas especies de los grupos C y G tienen en su pared la protena G,
que, por su capacidad de unin a anticuerpos, tiene importantes
aplicaciones en biotecnologa.
MICROORGANISMOS PATOGENOS
Algunos microorganismos son capaces de penetrar y multiplicarse en
otros seres vivos, a los que perjudican, originando una infeccin; son los
denominados microorganismos patgenos. Los problemas que causa una
infeccin dependen del tipo de patgeno, el modo en que se transfiere,
dosis
o
concentracin
de
patgenos,
persistencia
de
los
microorganismos y la resistencia del organismo infectado, dentro de los
microorganismos estn los virus, bacterias patgenas, los parsitos y
algunos hongos.

Los virus: Son microorganismos mucho ms pequeos que

las bacterias. Se desarrollan dentro de las clulas vivas y
cuando estn adentro controlan todos los procesos que se
llevan a cabo dentro de ella. Se multiplican rpidamente y
favorecen que la clula produzca toxinas o sea sustancias
dainas para el organismo.

Los virus viajan a travs de fluidos como la sangre, la saliva, el semen o

la orina de personas infectadas y por medio de ellos se transmiten a
otras. Son causantes de muchas enfermedades como la gripe, las
paperas, el sarampin, la rabia, la poliomielitis y otras que pueden
prevenirse por medio de la aplicacin de vacunas. Sin embargo hay otras

enfermedades que son muy peligrosas, difciles de controlar y algunas

de ellas pueden ser mortales como la hepatitis B o el SIDA.

Las bacterias: Fueron los primeros microorganismos que

se conocieron gracias al invento del microscopio. Son
unicelulares y adoptan diferentes formas. Si son como
bastones se llaman bacilos, si tienen forma esfrica, son
cocos y si son como espirales, se llaman espiroquetas.

Algunas bacterias son benficas, ayudan al crecimiento de las plantas,

otras forman parte de la flora intestinal normal y en la industria y la
investigacin juega un importante papel.
Las bacterias patgenas, o sea las que causan enfermedades producen
sustancias venenosas que se llaman toxinas. Entre las enfermedades
causadas por bacterias estn: el clera, la neumona o pulmona, la
tuberculosis, algunas enfermedades de transmisin sexual y las
infecciones en la garganta entre otras.

Los parsitos: Son organismos muy peligrosos porque

viven a expensas de los dems, es decir, encima o dentro
de otro organismo que los hospeda. Los parsitos privan de
sus nutrimentos, envenenan o destruyen los tejidos de sus
huspedes, al hacerlo adems de producir enfermedades
diversas, causan desnutricin y como tambin se alimentan
de sangre, provocan anemia o sea la disminucin de
glbulos rojos.

Algunos parsitos se propagan a travs de insectos u otros animales

portadores llamados vectores, un caso conocido es el del paludismo o
el del dengue, enfermedades transmitidas por mosquitos. Los parsitos
ms conocidos son las lombrices intestinales, pueden ser cilndricas o
planas y hay algunas que llegan a medir hasta 10 metros, como la tena
o solitaria y otras que se reproducen tanto que llegan a viajar dentro del
sistema digestivo y pueden llegar a las vas respiratorias y hasta al
cerebro, ocasionando enfermedades graves.
Los jvenes, personas mayores y enfermos de otras patologas son los
menos resistentes a las enfermedades y por lo tanto son ms frgiles.
Cuando una persona es infectada, los patgenos se multiplican en el
husped, y esto supone un riesgo de infeccin o enfermedad. No todas
las personas infectadas por patgenos enferman. Las personas que
enferman pueden contagiar y extender la enfermedad mediante las

secreciones y mediante contacto directo de alguna manera con la

mucosa del infectado.

3.2 Definicin de trminos:

Gram positiva: tipo de clula procaritica cuya pared
celular est compuesta bsicamente por peptidoglicano y
carece de membrana externa.

Gram negativa: tipo de clula procaritica cuya pared

celular contiene relativamente poco peptodoglicano y
presenta una membrana externa compuesta por
lipopolisacarido, lipoprotena y otras macromolculas
complejas.
Cultivo de enriquecimiento: mtodos para aislar
microorganismos usando medios de cultivo y condiciones
de incubacin especficas.

Medios de cultivo: Es una solucin de nutrientes en los

que los microorganismos crecen y se multiplican en el
laboratorio y el objetivo principal es el aislamiento de las
diferentes especies, proceder a su identificacin y realizar
estudios complementarios. Las condiciones para el
crecimiento de microorganismos debe implicar manejar
convenientemente el pH, potencial redox, temperatura,
humedad, presencia de oxgeno.

Agar: El agar es un elemento solidificante muy empleado

para la preparacin de medios de cultivo. Se lica
completamente a la temperatura del agua hirviendo y se
solidifica al enfriarse a 40 C. Con mnimas excepciones
no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no
es atacado por aquellas que crecen en l.

Colonia: Cuando una clula aislada e inmvil comienza a

crecer sobre un substrato slido, el resultado del
crecimiento al cabo del tiempo es una colonia.
Ecologa microbiana: estudia cmo se relaciona un
microorganismo con el ambiente que lo rodea, utilizando
los nutrientes que encuentra y produciendo desechos que
lo alteran de forma substancial. Esta alteracin del
ambiente puede tener valoraciones diferentes desde el
punto de vista humano: por un lado, la alteracin
producida por ciertos grupos bacterianos o fngicos son
de inters en la produccin de alimentos; mientras que
las producidas por otros grupos dan lugar a procesos
patolgicos. Ambos tipos de alteraciones, en cualquier
caso, slo tienen una valoracin desde el punto de vista
humano sin que se diferencien desde el punto de vista
ecolgico
Medios de Cultivos: Es el material alimenticio en el que
crecen los microorganismos. Para que las bacterias
crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial
debe reunir una serie de condiciones como son:
temperatura, grado de humedad y presin de oxgeno
adecuada, as como un grado correcto de acidez o
alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los
nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe
estar exento de todo microorganismo contaminante.
Unidad Formadora de Colonia (UFC): Se denomina a
una clula bacteriana viva y aislada que si se encuentra
en condiciones de substrato y ambientales adecuadas da
lugar a la produccin de una colonia en un breve lapso de
tiempo. En el caso de los hongos filamentosos que tienen
un crecimiento trfico no se producen colonias aisladas
sino formaciones ms difusas o miceliares.

IV) MATERIALES Y EQUIPOS PARA EL METODO DEL ISOPADO

4.1 Materiales y equipos:
Placa petri

matrazes
mechero de Bunsen.
Papel kraft.
marcador.
Probeta.
Tubos de ensayo
Hisopo
Pipeta
Gradilla
Autoclave.
Balanza analitica
incubadora
Alcohol yodado
Poet
Lega disuelta Clorox
Alcohol medicinal
Jabn liquido

4.2 Medios de cultivo

Agar MacConkey
Caldo azida
Caldo nutritivo
V) PROCEDIMIENTO:
5.1 preparacin de medio de cultivo:

Preparacin de agar macconkey:

a) Hacemos los clculos respectivos de cuanto de agar se necesitan para
30 ml de solucin
b) Una vez realizado los clculos. Se pesa 1.66g de agar en la balanza
analtica.

c) Con una probeta se mide 30 ml de agua destilada y se vierte en un

matraz.
d) Verter el agar en el matraz que contiene el agua, homogenizar la
mezcla.
e) Tapar el matraz con algodn y papel kraff y autoclavar por 15 minutos.
f) Despus de autoclavar. Se plaque el agar en 2 placas petra (15ml en
cada placa) , esto se realiza frente a un mechero de bunsen para evitar
la contaminacin del medio de cultivo

Preparacin del caldo nutritivo:

a) Hacemos los clculos respectivos de cuanto de caldo nutritivo se
necesitan para 32 ml(8 tubos de 4ml cada uno) de solucin
b) Una vez realizado los clculos. Se pesa 0.4g de caldo nutritivo en la
balanza analtica.
c) Con una probeta se mide 32 ml de agua destilada y se vierte en un
matraz.
d) Verter el caldo nutritivo
homogenizar la mezcla.

en el matraz que contiene el agua,

e) Con una pipeta verter 4ml de caldo nutritivo en 8 tubos de ensayo.

f) Tapar bien los tubos para evitar el ingreso de vapor de agua.
g) Colocar los tubos en un recipiente y tapar con papel kraff
h) Autoclavar por 15 minutos.
i) Finalmente retirar los tubos de la autoclave.

Preparacin del caldo azida.

a) Hacemos los clculos respectivos de cuanto de caldo azida se
necesitan para 72ml (24 tubos de 3ml cada uno) de solucin
b) Una vez realizado los clculos. Se pesa 2.5g de caldo azida en la
balanza analtica.

c) Con una probeta se mide 72 ml de agua destilada y se vierte en un

matraz.
d) Verter el caldo azida en el matraz que contiene el agua, homogenizar
la mezcla.
e) Con una pipeta verter 3ml de caldo azida en 24 tubos de ensayo.
f) Tapar bien los tubos para evitar el ingreso de vapor de agua.
g) Colocar los tubos en un recipiente y tapar con papel kraff
h) Autoclavar por 15 minutos a 120c.
i) Finalmente retirar los tubos de la autoclave.

5.2 procedimiento para realizar el muestreo:

Rotular los tubos y placas, en el caso de las placas dividir en 5
partes iguales.
Escoger 5 reas iguales de 20cm x 20cm en la mesa de trabajo de
microbiologa para cada una de los productos trados para realizar
la limpieza con cada uno de ellos.
Mojar el hisopo en el caldo nutritivo. y limpiar con dicho hisopo las
reas tratadas por los productos de limpieza.
Luego sembrar por el mtodo de estras en la placa con agar
macconkey.
Dejar el hisopo usado, remojado en el tubo con caldo nutritivo.

Trabajo en el laboratorio:

 En el laboratorio hacer la siembra del microorganismo. esto se

realiza trasladando 1ml de caldo nutritivo (donde se encontraba el
hisopo usado en el muestreo) a 3 los tubos que contienen caldo
acida.
Realizar este procedimiento para los 5 tubos de caldo nutritivo.
Finalmente llenar los tubos con caldo acida en un recipiente y llevar
a la incubacin.
Dejar las placas sobre la incubadora para el crecimiento de
microorganismos.
Desechar los tubos con caldo nutritivo.
Despus de algunos das hacer las lecturas respectivas de los
resultados obtenidos en tubos y placas.

BIBLIOGRAFA USADA
http://www.sochinf.cl/sitio/templates/sochinf2008/documentos/presentacione
s_microbiologia_cli_2011/9_sr_Alarcon.pdf
http://www.higiene.edu.uy/cefa/2008/StreptococcusyEnterococcus.pdf
www.solociencia.com/.../microbiologa-microorganismos
http://www.revbiomed.uady.mx/pdf/rb061721.pdf
http://es.wikipedia.org/wiki/Microorganismos
http://www.consumoteca.com/diccionario/microorganismo-patogeno