1.

REVISION DE LITERATURA

1.1.

LA GLANDULA MAMARIA

El tejido mamario se origina en el ectodermo embrionario a travs de la lnea mamaria en el

abdomen ventral, es una glndula sudorpara modificada. En el bovino, consta de lbulos
irregulares provistos de conductos excretorios radiados hacia las cisternas de la glndula y
el pezn. Las partes secretoras, los conductos alveolares y los alvolos constan de una
membrana basal, una capa de clulas mioepiteliales y sobre la superficie interna, una capa
de clulas columnares glandulares. En los bovinos, la glndula mamaria consta de cuatro
cuartos totalmente independientes, que producen una secrecin lctea con un 11 a un 13%
de slidos totales (Cuningham, 1994; Sandholm y cols, 1995; Blowey y Edmonson, 1995;
Smith, 1996).

1.2. MASTITIS
El trmino mastitis deriva de las palabras griegas mastos, que significa mamas o pechos, e
itis, que significa inflamacin, por lo tanto, la mastitis es definida como la inflamacin de la
glndula mamaria independiente de su causa, caracterizndose por alteraciones del tejido
glandular y por modificaciones fsicas, qumicas y casi siempre bacteriolgicas de la leche
(Schalm, 1971; Blood y Radostits, 1992; Sandholm y cols, 1995).

11

1.3. IMPORTANCIA DE LA MASTITIS

La mastitis bovina es considerada la enfermedad ms costosa de los hatos lecheros; las
prdidas causadas por esta entidad fueron estimadas en 1984 en Estados Unidos, en dos
billones de dlares (Fetrow y Anderson, 1987; Cullor, 1993) y en 7500 millones de pesos
en 1988 en Colombia (Andrade y Cely, 1986). Los costos incluyen disminuciones en la
produccin de leche y descartes de la misma, descarte de animales, trabajo adicional,
consultas mdicas, tratamientos y penalidades impuestas por altos conteos de clulas
somticas y bacterias o por deteccin de inhibidores. Adicionalmente, la mastitis causada
por Mycobacterium spp, Brucella spp y Leptospira spp representa un verdadero problema
ya que esta leche sirve como fuente de contaminacin para el humano (Andrade y Cely,
1986; Fetrow y Anderson, 1987; Giraldo, 1989; Rodrguez, 1987; Blood y Radostits, 1992,
Cullor, 1993; DeGraves y Fetrow, 1993; Kirk y cols, 1994; Steward y cols, 1995; Rebhum
y cols, 1995, Lin y cols, 1995; Owens y cols, 1997; Bailey y Roberson, 1999). Los
procesadores y consumidores tambin participan de estas prdidas por la disminucin en la
calidad de la leche (Erskine, 1992, Gilson, 1995; Novoa, 1998).
Lobo y cols, citados por Andrade y Cely en 1986, clasificaron a la mastitis en sexto lugar
de importancia econmica en Colombia (1-Infeccin por garrapatas, Anaplasma y Babesia,
2-Helmintos, 3-Tripanosomiasis, 4-Hematuria vesical, 5-Fiebre aftosa).
Cotrino citado por Garca en 1984, reporta una incidencia de mastitis del 42.6% para vacas
y del 26.5% para cuartos en fincas de la Sabana de Bogot, lo que representa una prdida
total anual de cerca de cuatro millones de pesos con precios de comienzos de 1983. En
zonas de alta produccin, se pierde como mnimo un 14% de la produccin a la vez que se
incrementa el costo de reemplazos y el valor de tratamientos; hallazgos similares son
reportados por Rodrguez en 1987. Sumando las prdidas por mastitis, se sabe que en
nuestro medio superan fcilmente los 50.000 millones de pesos.
Segn Philpot en 1979; Fetrow y Anderson en 1987 y Blood y Radostits en 1992, las
prdidas econmicas originadas por mastitis se deben a:
12

1. Muerte y descarte prematuro: 14%.

2. Leche descartada: 8%.
3. Tratamientos: 8%.
4. Disminucin en la produccin: 70-80%.
Adicionalmente a la disminucin en la produccin, hay cambios en su composicin que
disminuyen los rendimientos industriales.
La mastitis subclnica es el principal problema de las explotaciones lecheras, segn regin y
explotacin, hasta un 50% de las vacas padecen mastitis que en su gran mayora cursa de
forma subclnica. Andrade y Cely en 1986, reportan una incidencia de mastitis subclnica
del 60% para la Sabana de Bogot. Se ha encontrado que por cada 40 vacas que presentan
mastitis subclnica solo una presenta la forma clnica (Giraldo, 1989). Prez y cols, citados
por Cortz y Parrado en 1989, encontraron en el piedemonte caqueteo un 30% de mastitis
subclnica contra un 1% de mastitis clnica.
Segn Schalm en 1971, Philpot en 1979 y 1984 y Rebhum y cols en 1995, la mastitis
subclnica tiene relevancia por varias razones:
1. Es de 15 a 40 veces ms predominante que la forma clnica.
2. Generalmente precede a la mastitis clnica
3. Es de larga duracin.
4. No se identifica fcilmente.
5. Reduce la produccin de leche (Tablas 1 y 2).
6. Afecta la calidad de la misma.
7. Constituye un depsito de microorganismos que a menudo provocan infeccin en otros
animales del rebao.
Estos autores concluyen que los esfuerzos por controlar la mastitis se deben concentrar en
los casos subclnicos.

13

Tabla 1. Descensos en la produccin de leche segn la prueba de California para mastitis.

Prdidas en Produccin de Leche

Prdidas en Produccin de Leche

(Rodrguez, 1991)

(Gray y Schalm, 1962; Schalm, 1971; Philpot,1979)

CMT

T
1
2
3

Por cuarto %

Por vaca y lactancia %

Por cuarto %

Por vaca y lactancia %

15.1
32.4
52.8
86.3

3.8
8.1
13.2
21.6

6
10
16
24

3
11
26
46

De un total de 3200 millones de litros de leche producidos en Colombia en 1989, se dejan

de producir aproximadamente 390 millones de litros a causa de mastitis (Rodrguez, 1991).
Investigaciones en Cornell determinaron que cada cuarto infectado produjo 1600 lb de
leche menos por lactancia que los no infectados, resultados similares a los obtenidos en
Nueva Zelandia (Philpot, citado por Rodrguez en 1987; Giraldo, 1989).
Tabla 2. Conteo de clulas somticas y prdidas en produccin de leche en vacas
individuales y hatos (National Mastitis Council, 1987; Degraves y Fetrow, 1993).
CCS por vaca

Prdida de leche por

CCS del hato

Prdida de leche del

(clulasx103)
25
50
100
200
400
800
1600

lactancia (Kg/Vaca)
0
0
180
360
540
720
900

(clulasx103)
69
120
209
363
631
1096
1905

hato (Kg)
0
190
380
570
760
950
1140

Las prdidas en produccin de leche de vacas con mastitis y las prdidas econmicas
asociadas a esta entidad, comienzan a presentarse a medida que el recuento celular se eleva
por encima de 50000 clulas por ml de leche e incrementa dramticamente cada vez que
dobla este valor hasta llegar a 400000 clulas, por encima de este nivel las prdidas en
produccin continan pero en un aumento no tan dramtico (Rebhum y cols, 1995).
14

Raubertas y Shoock, observaron que cada vez que hay un aumento de dos veces el recuento
de clulas somticas por encima de 50000, se asocia con una prdida de la produccin de
400 lb de leche/lactancia/vaca adulta y de 200 lb de leche/lactancia/novilla (Smith, 1996).
Otros estudios predicen el promedio de disminucin en la produccin mensual de leche
como un 5.3% para cada incremento del CMT, como un 2.5% por cada 100000 clulas de
incremento en el CCS o como un 6.1% por cada unidad de incremento en el marcador
lineal de clulas somticas; las prdidas en produccin de leche segn el marcador de
clulas somticas se presentan en la Tabla 3 (Schalm, 1971; Rodrguez, 1987; DeGraves y
Fetrow, 1993; Blowey y Edmonson, 1995) .
Tabla 3. Prdidas porcentuales en la produccin de leche segn conteo de clulas somticas
(Gilson, 1995).
Marcador lineal CCS
Rango CCS
Prdida diaria estimada de leche %
0
0-18.000
0
1
19.000-35.000
0
2
36.000-71.000
0
3
72.000-141.000
1.5
4
142.000-283.000
3
5
284.000-565.000
4.5
6
566.000-1.130.000
6
7
1.131.000-2,262.000
7.5
8
2.263.000-4.523.000
9
9
4.524.000-9.999.999
10.5
En lo referente a otras prdidas asociadas a mastitis, del 7 al 15% de las vacas de leche
afectadas son descartadas y el 1% muere a causa de la enfermedad (Smith, 1996; Bascom y
Young, 1998). Rodrguez en 1987, encontr una correlacin del 90% entre el descarte por
disminucin en la produccin y la presentacin de mastitis.

1.4. CLASIFICACION
La mastitis es una entidad compleja con diferentes causas, grados de intensidad y
variaciones en la duracin y efectos residuales (Schalm, 1971; Jain, 1979). La severidad
15

est determinada por la naturaleza del patgeno invasor, por los mecanismos naturales de
defensa del animal y por algunas circunstancias que originan un estado de estrs en el
individuo como prcticas de ordeo y factores ambientales (Smith, 1996).
Schalm en 1971, Jain en 1979, Francis y Somner en 1987, Faull y Hughes en 1987, Phelps
en 1993, Gilson en 1995, Sandholm y cols en 1995, Blowey y Edmonson en 1995 y Smith
en 1996, clasifican las mastitis segn la presencia de signos clnicos como:
1. Mastitis clnica: Hace referencia a casos de mastitis en los cuales algunos de los
siguientes sntomas son aparentes: sntomas generales: (fiebre, anorexia), sntomas locales
(aumento de temperatura, inflamacin, dolor), cambios macroscpicos en la leche del
cuarto afectado (secrecin serosa, taches, grumos).
Los casos clnicos de mastitis se pueden clasificar adicionalmente en:

Mastitis hiperaguda o peraguda: Donde adems de las alteraciones clnicas de la ubre y

la leche, hay manifestaciones sistmicas como depresin, inapetencia y fiebre de inicio

sbito.

Mastitis aguda: En donde se presentan alteraciones tanto a nivel de la ubre como de la

leche pero con un menor efecto sistmico.

Mastitis subaguda: En ella no hay manifestaciones sistmicas en el animal y los

cambios en la leche y la ubre son menos marcados.

Mastitis crnica: cuando la infeccin persiste por semanas o meses generando una

acumulacin de tejido fibroso como resultado del proceso inflamatorio, que va

reemplazando gradualmente al tejido secretor ocasionando la atrofia del cuarto afectado y
la disminucin en la produccin de leche. Se estima que el 90% de los casos persisten
durante meses y an aos (Gilson, 1995).

16

2. Mastitis subclnica: En los casos de mastitis subclnica la inflamacin de la ubre

persiste sin poder erradicar el microorganismo secuestrado en el tejido, la red de citoquinas
disminuye la regulacin de la respuesta inflamatoria creando un grado de no reactividad o
tolerancia clnica; por lo cual la mastitis solo es detectable por pruebas aplicadas a la leche
para la deteccin de productos inflamatorios.

1.5. ETIOLOGIA
A nivel mundial se ha reconocido como principal etiologa de los casos de mastitis la
infeccin por microorganismos, ya que aproximadamente el 80% de los casos se deben a la
invasin de grmenes patgenos a la ubre (Rodrguez, 1991).
Philpot en 1979, reporta que la mastitis de tipo infeccioso puede ser provocada por 90 tipos
de microorganismos diferentes, Watts citado por Duval en 1998 identific 137 especies y
subespecies de bacterias que pueden estar asociadas a la glndula mamaria de la vaca,
mientras que Blowey y Edmonson en 1995 reportan un total de 200 microorganismos. A
pesar de esta gran variedad de patgenos, el 90 o 95% de los casos de mastitis se deben a
los cuatro ms comunes: Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Streptococcus
dysgalactiae y Streptococcus uberis (Philpot, 1979; Degraves y Fetrow, 1993; Jaramillo,
1994; Blowey y Edmonson, 1995).
Epidemiolgicamente, segn Faull y Hughes en 1987, Phelps en 1993, MMMC en 1993,
Rebhum y cols en 1995 y Blowey y Edmonson en 1995, las mastitis infecciosas podran ser
clasificadas como:
1. Contagiosas: Ocasionadas por microorganismos cuya fuente primaria es la ubre de las
vacas infectadas, a partir de la cual se diseminan por medio de las mquinas de ordeo y los
ordeadores. Incluyen microorganismos como: Streptococcus agalactiae, Streptococcus
dysgalactiae, Staphylococcus aureus y Mycoplasma spp.

17

2. Medioambientales: Originadas por microorganismos cuya fuente primaria es el medio

ambiente de la vaca; incluyen bacterias Gram negativas como coliformes (Escherichia coli,
Klebsiella spp, Enterobacter spp), cocos Gram positivos (Staphylococcus coagulasa
negativos, Streptococcus medioambientales), bacilos Gram positivos (Actynomices spp,
Corynebacterium bovis), hongos y levaduras.
Con pocas excepciones, el Streptococcus agalactiae y/o Staphylococcus aureus son los
patgenos contagiosos identificados en hatos con problemas de mastitis subclnica, de
hecho, aproximadamente el 80% de las infecciones por Staphylococcus aureus son
subclnicas (Erskine, 1992; Vestweber y Leipold, 1994).
En los pases que han adelantado prcticas de control de mastitis contagiosa, la posicin
predominante del Streptococcus agalactiae como causa de mastitis, le ha sido arrebatada
por el Staphylococcus aureus, a diferencia de Colombia, donde el Streptococcus agalactiae
continua siendo el principal patgeno de todos los hatos estudiados, a este microorganismo
se le atribuyen aproximadamente el 60% de las infecciones. El segundo patgeno en
importancia en nuestro medio es el Staphylococcus aureus con un 13.6% de las infecciones
(Giraldo, 1989); hallazgos similares son reportados por Rodrguez en 1987.
Otros microorganismos aislados en casos de mastitis son: Corynebacterium spp,
Pseudomonas spp, Candida spp, Nocardia spp, Mycobacterium spp, Prototheca spp,
Listeria monocytogenes, Proteus spp, Bacilus cereus, Serratia spp, Pasteurella spp,
Actinobacillus spp, Fusobacterium spp, Citrobacter spp, Salmonella spp, Moraxella spp,
Clostridium perfringes, Yersinia pseudotuberculosis, Haemophilus somnus (National
Mastitis Council, 1987; Consejo Nacional de Mastitis, 1990; Blood y Radostits, 1992; Kirk
y cols, 1994; Sandholm y cols, 1995).

1.6. MECANISMOS DE DEFENSA NO ESPECFICA DE LA UBRE

18

1.6.1. Piel del pezn: Es cuatro veces ms delgada que la piel de otras superficies
corporales, no tiene folculos pilosos, glndulas sudorparas o sebceas, por lo cual es
particularmente susceptible al resecamiento y cuarteamiento, aunque cuando esta intacta es
un medio hostil para las bacterias, entre otras razones porque cuenta con cidos grasos que
tienen cierta actividad bactericida (Blowey y Edmonson, 1995).

1.6.2. Esfnter del pezn: Normalmente impide la penetracin de microorganismos a la

glndula mamaria, pero durante y hasta dos horas despus del ordeo, su relajacin puede
facilitar la infeccin (Jain, 1979; Nickerson, 1987; Grindall y Hillerton, 1991; Daz y
Santiago, 1992; Vestweber y Leipold, 1993; Sordillo y cols, 1997).

1.6.3. Conducto del pezn: Representa una barrera fsica a la penetracin de

microorganismos al estar recubierto por un epitelio escamoso estratificado que es
reemplazado continuamente, generando clulas queratinizadas en la superficie que
posteriormente se descaman dentro del lumen del canal (Jain, 1997; Nickerson, 1987;
Consejo Nacional de Mastitis, 1990; Grindal y Hillerton, 1991; Sandholm y cols, 1995;
Blowey y Edmonson, 1995; Smith, 1996; Sordillo y cols, 1997; Amorena y Prez, 1997).
Se han propuesto tres mecanismos de defensa del canal del pezn: (1) adsorcin de las
bacterias a la queratina, (2) descamacin de la queratina cubierta de bacterias y (3)
propiedades bacteriostticas y bactericidas. Los cidos grasos esterificados y no
esterificados presentes en la queratina, como los cidos mirstico, palmitolico y linolico,
son bacteriostticos y an bactericidas in vitro contra Staphylococcus aureus,
Staphylococcus

hyicus,

Streptococcus

agalactiae

Corynebacterium

bovis.

Adicionalmente, las protenas catinicas en el canal pueden ligar electrostticamente ciertos

patgenos, lo cual altera la pared celular bacteriana causando lisis y muerte por inhabilidad
para mantener la osmolaridad (Nickerson, 1987; Daz y Santiago, 1992; Tyler y cols, 1993;
Smith, 1996; Sordillo y cols, 1997).

19

El adelgazamiento o la remocin de la capa de queratina predispone a mastitis, de hecho, la

ubre es susceptible a nuevas infecciones intramamarias durante los primeros das del
periodo seco y hasta que el canal del pezn forma un grueso tapn de queratina (Schalm,
1971; Nickerson, 1987; Daz y Santiago, 1992; Tyler y cols, 1993; Rebhum y cols, 1995;
Amorena y Prez, 1997).

1.6.4. Ordeo: La accin de lavado ocasionado por la leche durante el proceso de ordeo
ayuda a eliminar las bacterias que pueden haber colonizado el canal o el orificio del pezn
(Daz y Santiago, 1992; Tyler y cols, 1993; Vestweber, 1993; Blowey y Edmonson, 1995;
Smith, 1996).

1.6.5. Mecanismos celulares: Los neutrfilos y los macrfagos constituyen ms del 80%
de las defensas no especficas de la glndula mamaria. En una glndula no infectada se
encuentra un promedio de 50000 a 200000 clulas/ml de leche, siendo los macrfagos el
tipo celular predominante, mientras que los neutrfilos varan del 5 al 20% (McDonald y
Anderson, 1981; Amorena y Prez, 1997).
Tanto macrfagos como neutrfilos sufren reduccin de sus capacidades fagocticas y
bactericidas cuando se encuentran en leche, principalmente durante el periparto (Paape y
Wergin, 1977; Miller y cols, 1988; Saad y stenson, 1990; Tyler y cols, 1993; Sandholm y
cols, 1995; Sordillo y cols, 1997; Amorena y Prez, 1997).

Macrfagos: Los macrfagos de la glndula mamaria funcionan como un sistema de

deteccin temprana en los inicios del proceso inflamatorio, fagocitan y destruyen bacterias,
procesan antgenos para el sistema inmune y regulan la funcin de los linfocitos y de la
cascada inflamatoria por medio de la secrecin de varias citoquinas y otros mediadores. Los
macrfagos se acumulan durante la involucin de la glndula mamaria fagocitando la leche
residual, los desechos tisulares y las bacterias (Jain, 1979; Consejo Nacional de Mastitis,
1990; Daz y Santiago, 1992;

Burvenich y cols; Sandholm y cols, 1995; Blowey y

20

Edmonson, 1995). Estas clulas producen IL-1 y mediadores tipo lpido y estn ubicadas en
sitios primarios de defensa como los conductos. El LTB4 producido por los macrfagos es
uno de los ms potentes quimoatrayentes in vitro (Jensen y Eberhart, 1975; Paape y Wergin,
1977; Smith, 1996; Sordillo y cols, 1997; Amorena y Prez, 1997).

Neutrfilos (PMNs): Durante los estados iniciales de inflamacin, los neutrfilos

constituyen el tipo celular predominante (hasta el 90% del total de leucocitos), y su proceso
de migracin tiene como ruta preferencial la parte distal del pezn, viajando a travs del
parnquima para atravesar el tejido conectivo subepitelial y el epitelio, hasta acumularse en
la superficie del conducto (Lin y cols, 1995; Sandholm y cols, 1995).
Debido a que los neutrfilos sufren un gran debilitamiento en la leche a comparacin de la
sangre, cuando ocurre una infeccin, se requiere un gran nmero de neutrfilos en la ubre
(Schalm y cols, 1976; Sears, 1984; Nickerson y cols, 1987; Burvenich y cols; Smith, 1996).
Esta disminucin en la capacidad de los PMNs para matar bacterias en la leche comparada
con la sangre ha sido atribuida a varios factores: la ausencia de glucosa en la leche; la
disminucin de glicgeno en los PMNs (en leche cuentan con 38% menos glicgeno que en
la sangre); la deficiencia de opsoninas y complemento; el revestimiento de la superficie de
los PMNs con casena; la prdida de pseudpodos debido a la ingestin de grasa y casena y
la baja tensin de O2 en la leche (100 veces menor que en sangre) (Schalm, 1977; Norcross,
1977; Paape y Wergin, 1977; Jain, 1979; Ziv y cols, 1983; Sears, 1984; Nickeson y cols,
1985; Lintner y Eberhart, 1990; Consejo Nacional de Mastitis, 1990; Blowey y Edmonson,
1995; Sandholm y cols, 1995; Smith, 1996; Hurley y Morin, 1999).
Dos sistemas antimicrobiales contribuyen a la muerte de microorganismos por PMNs:
1. Dependientes de O2: La funcin de los PMNs de muerte bacteriana dependiente de O 2
se caracteriza por el estallido respiratorio a travs del sistema NADPH-oxidasamieloperoxidasa, que es crticamente bajo desde el primer mes de gestacin y hasta el
primer mes de lactancia haciendo a la glndula ms susceptible a la infeccin.

21

2. Independientes de O2: Incluyen varias protenas granulares de las que se presume

cumplen actividades antimicrobianas tales como la catepsina G o protena catinica similar
a la quimotripsina (CLCP). Una familia completamente separada de los polipptidos
bactericidas/bacteriostticos fue descrita originalmente como pptidos catinicos
lisosomales y posteriormente denominada defensinas; su espectro antimicrobiano
incluye bacterias Gram positivas y Gram negativas tanto aerobias como anaerobias, varios
hongos y virus, otras molculas similares a las defensinas denominadas Defensinas han
demostrado efectividad in vitro contra un panel de patgenos de mastitis bovina. La
indolicina, otro producto antimicrobiano de los PMNs, ha sido identificada hasta el
momento nicamente en bovinos (Sandholm y cols, 1995; Smith, 1996; Sordillo y cols,
1997).
Mltiples estudios reportan alteraciones en las funciones defensivas de los PMNs: Kehrli y
cols en 1989 encontraron incrementos significantes en la migracin al azar de neutrfilos,
iodinacin y quemiluminiscencia dos semanas antes del parto, que posteriormente
disminuyeron dramticamente durante la primera semana posparto en vacas clnicamente
normales. Cai y cols en 1993, encontraron que la actividad de la mieloperoxidasa y la
citotoxicidad mediada por clulas y dependiente de anticuerpos, disminua despus del
parto en vacas sanas, mientras que la habilidad para ingerir bacterias y la migracin al azar
aumentaban; igualmente, encontraron que antes del parto la quemotaxis producida por
neutrfilos en vacas con mastitis era significativamente menor, indicando que un defecto en
la funcin de estas clulas puede ser un factor predisponente en el desarrollo de mastitis.
Lee y cols en 1998 reportaron una baja expresin de molculas CD62L en los neutrfilos de
vacas posparto, lo cual puede afectar la migracin de estas y por lo tanto asociarse a un
incremento en la susceptibilidad a infecciones. Shuster y cols en 1996 y Kimura y cols en
1999, reportaron alteraciones en la expresin de molculas de adhesin y en la actividad de
la mieloperoxidasa en los neutrfilos durante el periodo periparto, sugiriendo que el estrs
metablico de la lactancia exacerba la inmunosupresin ocurrida durante el parto.

Clulas asesinas: Las clulas asesinas tambin ejercen una funcin defensiva de forma

inespecfica. Sordillo y cols en 1997 encontraron un incremento en su habilidad para

22

eliminar Staphylococcus aureus, sugiriendo que pueden jugar un papel importante en la

destruccin de bacterias durante mastitis.

1.6.6. Mecanismos humorales: Estn representados por diferentes protenas que tienen
efectos bactericidas y bacteriostticos:

Lactoferrina: La lactoferrina producida por clulas epiteliales y leucocitos es la ms

importante protena ligadora de hierro encontrada en secreciones como la leche, en

presencia de bicarbonato liga hierro hacindolo menos disponible para el crecimiento de las
bacterias, principalmente coliformes y Staphylococcus spp. La concentracin de
lactoferrina aumenta en la ubre de la vaca seca y durante procesos inflamatorios ayudando a
prevenir nuevas infecciones intramamarias. A medida que se aproxima el parto y el calostro
es secretado dentro de la ubre, aumenta el citrato que compite con la lactoferrina por el
hierro y forma un complejo que permite que este elemento este disponible para las bacterias
aumentando la susceptibilidad del animal (Schalm, 1971; Smith y Schanbacher, 1977; Jain,
1979; Sears, 1984; Consejo Nacional de Mastitis, 1990; Daz y Santiago, 1992; Rebhum y
cols, 1995; Sandholm y cols, 1995; Blowey y Edmonson, 1995; Smith, 1996; Sordillo y
cols, 1997; Amorena y Prez, 1997). El efecto de la lactoferrina es principalmente
bacteriosttico, pero puede ser bactericida dependiendo del estado de saturacin de hierro y
el grado de unin proteoltica. La lactoferrina y sus pptidos derivados se ligan a la pared
de las bacterias Gram negativas daando sus estructuras de superficie y alterando el
metabolismo bacteriano. Adicionalmente la lactoferrina tiene un efecto opsonizante, ya sea
sola o junto con inmunoglobulinas (Sandholm y cols, 1995).

Lisozima: Es una protena bsica de bajo peso molecular (N-acetilmuramilhidrolasa,

15.000 daltons) que hidroliza las uniones entre el cido murmico y la

N-acetilglucosaminidasa dentro de la estructura de peptidoglican de la pared bacteriana,
causando lisis osmtica. En comparacin con la sangre y otras secreciones, el contenido de
lisozima en la leche bovina es bajo y su efecto bacterioltico directo es dbil. La lisozima
incrementa la bacteriolisis mediada por anticuerpos y complemento, estimula la
23

opsonizacin y unin del complejo bacteria-IgM a los fagocitos e intensifica el efecto de la

lactoferrina. Adicionalmente el pptido muramil liberado de la pared bacteriana por la
lisozima acta como un inmunoadyuvante (Sandholm y col, 1995; Sordillo y cols, 1997;
Amorena y Prez, 1997). Algunos autores aseguran que vacas con niveles bajos de lisozima
en su leche son ms propensas a sufrir mastitis que vacas con niveles normales (Schalm,
1971; Smith y Schanbacher, 1977; Rebhum y cols, 1995; Smith, 1996).

Lactoperoxidasa: A diferencia de la leche de otros mamferos, la del bovino cuenta con

una alta actividad de la lactoperoxidasa, sin embargo, su contenido en el calostro es bajo.

La actividad de la lactoperoxidasa requiere tiocianato y perxido de hidrgeno como
sustratos, su mecanismo antibacterial se basa en la oxidacin de estructuras enzimticas
sensibles dentro de la pared bacteriana, para lo cual los productos intermedios del proceso
oxidativo como el hipocianato parecen ser los oxidantes principales. La funcin del sistema
de lactoperoxidasa depende de la concentracin de sus sustratos: el tiocianato que en la
leche varia con el rgimen alimenticio y el perxido de hidrgeno que es producido por
fagocitos activados cuando hay suficiente oxigeno disponible (la presin de oxgeno dentro
de la glndula mamaria es tan baja que no favorece la formacin de perxidos,
adicionalmente el oxgeno disminuye en forma considerable durante la mastitis) (Consejo
Nacional de Mastitis, 1990; Daz y Santiago, 1992; Vestweber, 1993; Rebhum y cols, 1995;
Blowey y Edmonson, 1995; Sordillo y cols, 1997; Amorena y Prez, 1997).

Transferrina: La transferrina es la protena ligadora de hierro ms importante en los

fluidos corporales circulantes, durante eventos inflamatorios el hgado aumenta la

produccin de esta protena que llega a la leche por el incremento en la permeabilidad de la
ubre.

Complemento: El sistema de complemento es un conjunto de protenas presentes en

suero sanguneo y leche, que funciona en concierto con anticuerpos especficos causando
lisis de las bacterias invasoras, el propsito del sistema es reconocer y destruir microbios y
dirigir a los fagocitos a sus blancos (opsonizacin y quimiotaxis). Las concentraciones de
complemento son mayores en el calostro, en glndulas mamarias inflamadas y durante la
24

involucin (Jain, 1979; Sandholm y cols, 1995; Blowey y Edmonson, 1995; Sordillo y cols,
1997; Amorena y Prez, 1997).

1.7. MECANISMOS DE DEFENSA ESPECFICA DE LA UBRE

1.7.1. Mecanismos celulares: La respuesta inmune especfica mediada por clulas esta
basada en la lnea celular linfoide. Se encuentran dos tipos de linfocitos en leche: linfocitos
T y linfocitos B. Los linfocitos T pueden ser subdivididos en la serie que incluyen los
linfocitos CD4+ (ayudadores) y CD8+ (citotxicos o supresores) y la serie Sordillo y
cols, 1995).
Los linfocitos T ayudadores (CD4+) producen citoquinas en respuesta al reconocimiento de
un antgeno sobre los linfocitos B y los macrfagos, estas citoquinas activan a todas las
clulas que participan en la respuesta inmune. Los linfocitos T citotxicos (CD8+)
reconocen y eliminan clulas somticas alteradas cuya presencia podra aumentar la
susceptibilidad de la glndula mamaria a las infecciones. Los linfocitos T supresores
(CD8+) controlan o modulan la respuesta inmune suprimiendo las respuestas proliferativas
de los linfocitos ayudadores (Sears, 1984; Consejo Nacional de Mastitis, 1990; Sandholm y
cols, 1995).
Los linfocitos CD8+ (citotxicos y supresores) parecen predominar tanto en tejidos como
en secreciones de glndulas mamarias sanas con respecto a los linfocitos CD4+
(ayudadores), comportamiento inverso al observado en sangre. El papel inmunoregulador
de los linfocitos CD8+ depende del estado de la lactancia, los estudios indican que
inmediatamente despus del parto estos linfocitos son del tipo supresor, pero durante la
lactancia media y tarda predominan los de naturaleza citotxica (Sordillo y cols, 1997;
Yamaguchi y cols, 1999).
Los linfocitos B internalizan, procesan y presentan antgenos a los linfocitos T ayudadores,
quienes producen interleukina 2, la cual a su vez induce la proliferacin y diferenciacin de

25

los linfocitos B en clulas plasmticas para producir anticuerpos y clulas de memoria

(Amorena y Prez, 1997; Sordillo y cols, 1997).
Los linfocitos pueden mediar actividad citotxica y de clulas Natural Killer, al parecer
su objetivo es destruir clulas epiteliales alteradas. Se ha encontrado que este tipo de
linfocitos T disminuye significativamente en el parnquima mamario durante el periparto,
sugiriendo que puede constituir una lnea esencial de defensa contra los patgenos (Sordillo
y cols 1997; Yamaguchi y cols, 1999).
Kehrli y cols en 1989, encontraron que durante la primer semana despus del parto, la
blastognesis de los linfocitos esta marcadamente deprimida. Smith en 1996 encontr que
los linfocitos recuperados de cuartos infectados con Staphylococcus aureus demostraron
una marcada depresin de la blastognesis in vitro durante la infeccin.

1.7.2. Mecanismos humorales: Las inmunoglobulinas son protenas producidas por

linfocitos B activados que proliferan y se diferencian en clulas plasmticas. Los
anticuerpos en la leche son producto de la sntesis local y del transporte selectivo o por
transudado. Cuatro clases de inmunoglobulinas participan en las defensas de la glndula
mamaria contra las bacterias causantes de mastitis: IgG1, IgG2, IgA e IgM, cuyas
concentraciones varan segn la etapa de lactancia y el estado de infeccin de la glndula
(Tabla 4) .
Tabla 4. Factores antibacterianos de la leche de vacas sanas (CCS<300000/ml) y vacas con
mastitis (CCS>300000/ml) (Sandholm y cols, 1995).
Factor
Leche de vacas sanas (mg/L) Leche de vacas con mastitis (mg/L)
Lactoferrina
130.0
256.0
Lactoperoxidasa
14.8
18.3
Lisozima
0.1
0.4
Inmunoglobulinas
1100*
2900*
IgG1
700
1700
26

IgG2
IgM
IgA

100
120
100

450
350
250

Las inmunoglobulinas se encuentran en bajas concentraciones durante la lactancia, se

elevan durante el periodo no lactante y su concentracin pico se alcanza durante la
calostrognesis cuando llegan a 100 mg/ml para descender durante la primera semana de
lactancia a menos de 1 mg/ml como se presenta en la Tabla 5. En rumiantes, la IgG 1 es la
predominante en leche, siendo transferida activamente por el epitelio mamario a travs de
mecanismos receptores (Schalm, 1971; Sasaki y cols, 1977; Consejo Nacional de Mastitis,
1990; Daz y Santiago, 1992; Sandholm y cols, 1995; Blowey y Edmonson, 1995; Smith,
1996; Sordillo y cols, 1997).

Tabla 5. Concentracin de inmunoglobulinas en suero sanguneo, calostro y leche de vaca

(Norcross, 1977; Sandholm y cols, 1995).
Inmunoglobulina
IgM
IgG1
IgG2
IgA
Total

Suero (mg/ml)
2.5
13
8
0.5
24

Calostro (mg/ml)*
4.5
40
3
2-4
50.5

Leche (mg/ml)
0.05
0.3-0.5
0.03
0.1-0.2
0.63

* El contenido total de inmunoglobulinas en la secrecin de vacas no lactantes puede llegar a 80 mg/ml

La caracterstica ms importante de los anticuerpos en la leche (inmunoglobulinas G 1, G2 y

M) es su habilidad opsonizante, aunque ocasionalmente son bactericidas en forma directa, a
travs del efecto combinado con el sistema de complemento o a travs de la accin
concertada del complemento y la lisozima, sin embargo, la eliminacin bacteriana que tiene
lugar a travs de la fagocitosis, es considerada como el mecanismo antibacterial ms
27

importante de la ubre. La IgA acta neutralizando toxinas bacterianas y aglutinando los

cuerpos bacteriales, hecho que facilita su eliminacin durante el ordeo, previene la
adherencia a las superficies epiteliales y limita la multiplicacin bacteriana (Norcross,
1977; Miller y cols, 1988; Daz y Santiago, 1992; Sandholm y cols, 1995).
La actividad de la IgA se ve limitada debido a que hay relativamente pocas clulas
plasmticas formadoras de IgA en el epitelio de la ubre de los bovinos y a que esta
inmunoglobulina es altamente hidrofbica, lo cual hace que se asocie con los glbulos de
grasa en la crema y con los micelios de casena, permitiendo que muy poca IgA sea
encontrada en el suero de la leche. (Sears, 1984; Vestweber, 1994; Rebhum y cols, 1995;
Smith, 1996).

1.8. FACTORES PREDISPONENTES Y PATOGNESIS DE LA MASTITIS

La mastitis ocurre cuando factores medioambientales y de manejo interactan aumentando
la exposicin de la ubre a los microorganismos, reduciendo la resistencia de la vaca o
ayudando a los patgenos a atravesar el canal del pezn, as, el desarrollo de la mastitis
depende de tres factores esenciales: el hospedador, el agente infeccioso y el medio (Schalm,
1971; Philpot, 1979 y 1984):

1.8.1. El hospedador: La susceptibilidad de la vaca lechera depende de:

1. Factores genticos: Se reporta una relacin desfavorable entre la produccin de leche y
la presentacin de mastitis. Grindall y Hillerton en 1991, reportan una frecuencia de
infecciones 12 veces mayor en cuartos con flujos de leche superiores a 1.6 Kg/min contra
cuartos con flujos de 0.8 Kg/min, este hecho al parecer esta asociado al tamao y/o
relajacin del conducto del pezn lo cual determinara la facilidad de ordeo de un animal;
28

igualmente, vacas con pezones en forma cilndrica e invertidos se consideran con mayor
riesgo ante las infecciones intramamarias como resultado de fallas en la interaccin con las
pezoneras durante el ordeo y por la mayor contaminacin de la punta del pezn
respectivamente (Consejo Nacional de mastitis, 1990; MMMC, 1993). Para Detilleux y
cols en 1995 la heredabilidad de mastitis en el ganado de leche ha sido calculada entre el 1
y el 48%. Shook en 1993 encontr una correlacin positiva entre la produccin de leche y
la presentacin de mastitis clnica.
2. Etapa de produccin: La tasa de nuevas infecciones intramamarias vara segn la etapa
de lactancia, as, durante el periodo seco aumenta de 2 a 12 veces con respecto al periodo
lactante (McDonald y Anderson, 1981); igualmente, Rojano asegura que durante el periodo
de vaca seca se adquieren de un 40 a un 50% de las infecciones intramamarias.
Durante el periparto, los animales sufren marcados cambios fisiolgicos que deprimen los
mecanismos de defensa y aumentan la susceptibilidad a infecciones de la glndula mamaria
(Phelps, 1993; MMMC, 1993; Smith y Hogan, 1993; Kirk y cols, 1994; Shuster y cols,
1996; Lee y Kehrli, 1998; Kimura y cols, 1999), se cree que entre los factores que pueden
generar esta susceptibilidad se encuentran los cambios endocrinos asociados con el parto y
el estrs metablico relacionado con la lactognesis y ms especficamente por las
concentraciones plasmticas de esteroides y metabolitos del cido araquidnico presentes
durante el periparto (Jain, 1979; Francis y Somner, 1987; Nickerson y cols, 1989; Kehrli y
cols, 1989; Consejo Nacional de Mastitis, 1990; Daz y Santiago, 1992; Cai y cols, 1994;
Giraldo; Detilleux y cols, 1995; Kimura y cols, 1999; Shafer-Weaver, 1999; Hurley y
Morin, 1999).
Las dos primeras y las dos ltimas semanas del periodo seco (promedio de 60 das) son las
de mayor susceptibilidad a la infeccin intramamaria por diferentes razones: durante la
parte inicial de este periodo, la glndula continua produciendo leche con un pico mximo
de acumulacin a los dos o tres das, esta presin hace que se dilate el esfnter del pezn
permitiendo el acceso de bacterias; adicionalmente, el enjuague del ordeo y el sellado
han sido interrumpidos y los fagocitos estn comprometidos en la remocin de grasa y
29

casena por lo cual no eliminan eficientemente bacterias. En el periodo intermedio, se

genera cierto equilibrio, pero durante el final del periodo seco o calostrognesis
nuevamente se dilata el canal del pezn por la acumulacin de calostro en la glndula,
disminuye la funcin de la lactoferrina por el aumento en la concentracin de citrato y
aumentan las concentraciones de esteroides (Snchez, 1988).
En las primeras semanas de la lactancia el riesgo de infeccin es alto debido a que hay
alteraciones en los mecanismos bactericidas de los neutrfilos y en la blastogensis de los
linfocitos, adicionalmente hay disminucin del complemento srico, de la fagocitosis, la
proliferacin celular, la produccin de anticuerpos, de citoquinas y la expresin de
L-Selectina (Kehrli y cols en 1989; Lee y Kehrli en 1998; Hurley y Morin en 1999; ShaferWeaver y cols en 1999).
Adems del parto, varios factores de manejo pueden generar estrs, ocasionando un
aumento en los niveles de corticoides, hecho que inhibe la transformacin blastoide, las
reacciones de cultivo mixto de linfocitos, la respuesta in vitro a sensibilidad con antgenos y
la migracin de las clulas de defensa in vitro (Daz y Santiago, 1992).
3. Estado de la ubre: Entre los factores asociados al estado de la ubre que pueden
aumentar la susceptibilidad de la vaca ante la presentacin de mastitis se encuentran la
forma pndula, que puede facilitar la contaminacin de los pezones y que aumenta el riesgo
de lesin de los mismos y de la ubre en general, tambin las lesiones de tipo infeccioso,
mecnico y qumico en los pezones, que interfieren con el proceso de ordeo, debilitan los
mecanismos de defensa propios del pezn y sirven como foco de diseminacin de
microorganismos patgenos (Philpot, 1979; Sieber y Farnsworth, 1984; Faull y Hughes,
1987; Consejo Nacional de Mastitis, 1990; Shook, 1993; Jaramillo, 1994; Blowey y
Edmonson, 1995; Farnsworth, 1996; Burmeister y cols, 1998).

Lesiones de tipo infeccioso: Ocasionadas por virus (Papiloma bovino, Pseudocowpox,

Cowpox y Herpes Bovino) y bacterias, de hecho cualquier lesin en los pezones es

susceptible de contaminacin por bacterias como Streptococcus agalactiae, Streptococcus
30

dysgalactiae y Staphylococcus aureus, sirviendo como focos de diseminacin de estos

patgenos y aumentando el riesgo de infeccin intramamaria. Nickerson y cols en 1987
reportan al Staphylococcus xylosus y al Staphylococcus hyicus subespecie chromogenes
como microorganismos predominantes en la piel del pezn.

Lesiones ocasionadas por influencias medioambientales: Cuarteaduras, congelamiento y

quemaduras de sol (Sieber y Farnsworth, 1984).

Heridas traumticas: Varan desde pequeas laceraciones hasta la ablacin total del

pezn, ocurren con mayor frecuencia en animales de ubre pndula (Sieber y Farnsworth,
1984).

Lesiones ocasionadas por mal funcionamiento del equipo de ordeo o por tcnicas

incorrectas en el procedimiento del mismo: Fallas en la pulsacin que ocasionen una

inadecuada fase de masaje, altos niveles de vaco o fluctuaciones del mismo, pezoneras en
mal estado, sobreordeo, excesivo peso de la unidad de ordeo y retiro de la misma sin
cortar el vaco pueden inducir cambios como edema, hemorragias, erosin, hiperqueratosis
y prolapso del esfnter del pezn que pueden modificar la integridad del mismo y favorecer
la contaminacin por patgenos causantes de mastitis (Sieber y Farnsworth, 1984; Erskine,
1992; Zecconi y cols, 1994). Philpot en 1979 y Phelps en 1993 encontraron 10 veces mayor
nmero de casos de mastitis clnicas en cuartos con lesiones en la punta del pezn, a
diferencia de cuartos con pezones sanos.

Lesiones por contacto con sustancias qumicas: Se han reportado como consecuencia de

la incorrecta mezcla o preparacin de los productos de sellado, por el congelamiento de

estos o por la aplicacin accidental en los pezones de los productos empleados en la
limpieza del equipo de ordeo (Sieber y Farnsworth, 1984; Pankey, 1984). En un estudio en
1998, Burmeister y cols encontraron que los productos de presellado y sellado sin
acondicionadores se encontraban 5.3 veces ms asociados al cuarteamiento de pezones que
los productos que contenan acondicionadores.

31

1.8.2. El agente infeccioso: Numerosos microorganismos pueden estar involucrados en el

desarrollo de la mastitis, estos organismos llegan a los tejidos mamarios a travs del
conducto del pezn, la sangre o la linfa, sin embargo, normalmente la infeccin es exgena
y penetra a travs del canal del pezn (Schalm, 1971; Nickerson, 1987). Philpot en 1979,
reporta que la mastitis de tipo infeccioso puede ser provocada por 90 tipos de
microorganismos diferentes, Watts citado por Duval en 1998 identific 137 especies y
subespecies de bacterias que pueden estar asociados a la glndula mamaria de la vaca,
mientras que Blowey y Edmonson en 1995 reportan un total de 200 microorganismos.

1.8.3. El ambiente: Las interacciones entre el agente infeccioso y el hospedador estn

afectadas en grado variable, directa e indirectamente por factores ambientales como la
alimentacin, estabulacin, clima, condiciones de higiene, equipos y rutinas de ordeo
(Schalm, 1971; Jain, 1979; Jarret, 1984; Nickerson, 1987; Hurley y Morin, 1999).
Jarret, 1984; Francis y Sumner en 1987; Consejo Nacional de Mastitis en 1990, Grindall y
Hillerton, 1991; Erskine en 1992, MMMC en 1993, Blowey y Edmonson en 1995 y Hurley
y Morin en 1999 reportan un aporte pequeo (5%) pero significante del equipo de ordeo
en la proporcin de infecciones intramamarias:

Como fmite, por medio de pezoneras contaminadas: Un estudio demostr la

diseminacin de Staphylococcus aureus en 6 a 8 vacas ordeadas despus de emplear las

pezoneras en una vaca infectada.

Fluctuaciones en el nivel de vaco por el resbalamiento y cada de pezoneras y el

retirado de las mismas sin cortar el vaco, pueden favorecer la colonizacin bacteriana por
la propulsin de los microorganismos desde el conducto hacia la cisterna del pezn a travs
del "Impacto de leche", este mecanismo puede favorecer la diseminacin de patgenos
entre cuartos de una misma vaca o entre diferentes vacas.

32

Fallas en la tasa y radio de pulsacin, el sobreordeo y el retirado de las pezoneras sin

cortar el vaco pueden ocasionar alteracin de los pezones como congestin, edema,
hemorragias petequiales e intersticiales, engrosamiento del conducto del pezn,
hiperqueratosis y prolapso del esfnter.

1.8.4. Fases de la patogensis: La patognesis de la mastitis comprende tres etapas:

1. Invasin: Generalmente, la mastitis inicia como resultado de la penetracin de bacterias
patgenas a travs del conducto del pezn, hecho que puede ocurrir como resultado del
crecimiento de los microoganismos a travs del canal del pezn, por movimiento mecnico
o por propulsin de los mismos del exterior al interior de la glndula. La ocurrencia de
mastitis en la vaca aumenta por factores de manejo que favorecen las altas concentraciones
de microorganismos y su diseminacin entre animales, principalmente durante el ordeo
(Schalm, 1971; Philpot, 1979; Nickerson, 1987; Fox y Gay, 1993; Phelps, 1993; Blowey y
Edmonson, 1995).
2. Infeccin: Luego de la invasin, la permanencia y colonizacin de los microorganismos
en el interior de la ubre, y por lo tanto la tasa de infecciones intramamarias, se ven
afectadas por factores de virulencia como la adherencia de los patgenos al epitelio de la
glndula y la interaccin de los microorganismos y sus productos con los mecanismos de
defensa especficos y no especficos, un ejemplo de esto es la alta tasa de infecciones
crnicas en casos de mastitis por Streptococcus agalactiae y Staphylococcus aureus como
resultado de sus factores de adherencia. (Schalm, 1971; Nickerson, 1987; Consejo Nacional
de Mastitis, 1990; Fox y Gay, 1993; Blowey y Edmonson, 1995).
3. Inflamacin. La inflamacin es la respuesta del organismo ante una sustancia extraa o
ante un evento de dao tisular, teniendo como objetivos resolver la infeccin y restaurar la
funcin del tejido afectado.

33

Las clulas de alarma, principalmente macrfagos, reconocen el material extrao presente

en la ubre (microorganismos, subproductos del crecimiento y metabolismo bacteriano,
detritus y otros) y reaccionan produciendo mediadores qumicos que disparan la respuesta
inflamatoria, esta respuesta incluye el paso de albmina srica desde la sangre como un
resultado directo del incremento de la permeabilidad capilar; el cloruro y el bicarbonato de
sodio aumentan causando una variacin en el pH hacia la alcalinidad; enzimas como la
NGAasa, entre otras, son liberadas al espacio intracelular; la sntesis de lactosa es
deprimida en proporcin al incremento de cloruro de sodio que entra a la leche (siendo este
un mecanismo diseado para mantener la isotonicidad); igualmente, la funcin de las
clulas productoras de leche es deprimida, reduciendo la produccin de casena y grasa y
por lo tanto la concentracin de slidos en la leche (Schalm, 1971 y 1977; Consejo
Nacional de Mastitis, 1990; DeGraves y Fetrow, 1993; Hurley y Morin, 1999).
Los leucocitos migran extensamente a travs del organismo para mediar la respuesta
inmune ante el cuerpo extrao, este proceso es regulado por molculas de adhesin
endoteliales. El endotelio de las vnulas postcapilares del tejido inflamado cuenta con sitios
de adhesin para diferentes leucocitos, por lo cual estas clulas fluyen por el fenmeno de
"rolling" en estrecho contacto con la pared de los vasos, luego de esto sufren diapdesis a
travs de las clulas endoteliales hasta el sitio de inflamacin. La selectividad de varias
protenas de adhesin endotelial hacia lneas especficas de leucocitos, y la expresin
cronolgica de algunas de estas protenas de adhesin resultan en la infiltracin selectiva de
granulocitos en la fase aguda de la inflamacin y de clulas mononucleares en la fase
crnica (Sandholm y cols, 1995). Mediadores inflamatorios como las prostaglandinas E 1 y
E2, leucotrienos C4, D4 y E4, histamina y kininas estimulan la contraccin de las clulas
endoteliales facilitando la migracin de los leucocitos atrados principalmente por factores
quemotcticos como LTB4, factores del complemento C3a y C5a y pptidos originados
durante la ruptura de casena y fibringeno. Cuando infiltran el tejido, los fagocitos
disuelven la matriz intercelular para lo cual liberan hidrolasas lisosomales y enzimas
proteolticas (Lin y cols, 1995). La migracin de los neutrfilos dentro de la glndula
mamaria puede ser demostrada a las tres horas de iniciado el proceso inflamatorio y
continua por largos periodos despus de que el agente ha sido neutralizado o destruido;
34

estas clulas reconocen a los antgenos cuando estn unidos a anticuerpos opsonizantes y a
protenas del complemento, de esta forma los antgenos son fagocitados y lisados (Schalm,
1977; Sandholm y cols, 1995).
Los efectos clnicos y patolgicos de la ubre en casos de mastitis infecciosa varan con el
tipo de patgeno. El Streptococcus agalactiae afecta principalmente el sistema de
conductos produciendo involucin, fibrosis y diminucin en la produccin, siendo causante
usualmente de mastitis subclnica de tipo crnico con episodios clnicos ocasionales,
mientras que el Staphylococcus aureus afecta con mayor severidad el tejido productor de
leche a travs de la produccin de toxinas, originando desde una leve inflamacin
parenquimatosa, pasando por la formacin de microabsesos, necrosis y tractos fistulosos,
hasta llegar a una mastitis de tipo gangrenoso, aunque en su gran mayora los casos de
mastitis por este microorganismo cursan de forma subclnica y crnica. Los coliformes
ocasionan mastitis agudas que comprometen el estado general del animal, aunque
usualmente, estos microorganismos generan mastitis con altas tasas de recuperacin
espontnea (Schalm, 1977; Consejo Nacional de Mastitis, 1990; Fox y Gay, 1993; Cullor,
1993).
1.9. DIAGNOSTICO
En los casos de mastitis clnica la identificacin de la entidad se hace a partir de los signos
observados en la leche y/o ubre, mientras que en los casos de mastitis subclnica el
diagnstico debe realizarse a partir de pruebas indirectas como la identificacin de los
cambios fsico-qumicos, de celularidad y bacteriologa de la leche.
Entre las alteraciones evaluadas en los casos de mastitis subclnica se encuentran:

Fsico-qumicas: Entre las que se incluyen la medicin de pH, cloruros, enzimas como

la NGAasa y componentes lcteos como protena y slidos totales.

Celularidad: Se puede medir en forma indirecta a travs de pruebas como Whiteside,

Brabant, Wisconsin o California Mastitis, o de forma directa a travs del examen

35

microscpico (mtodo de Breed's) o de mtodos automticos como el conteo de partculas y

el analizador fluoroptico de DNA.

Identificacin del patgeno: Se efecta por medio de cultivo y determinacin de

anticuerpos especficos (Schalm, 1971; Blood y Radostits, 1992; Gilson, 1995; Rebhum y
cols, 1995; Hurley y Morin, 1999).

1.9.1. Cuantificacin celular: El Conteo de Clulas Somticas (CCS) ha sido el ndice ms

ampliamente usado del nivel de infeccin tanto en vacas individuales como en hatos,
igualmente es el mejor parmetro para estimar las prdidas por disminucin en la
produccin de leche de la glndula mamaria (Cotrino, 1998).
La leche contiene clulas que derivan de la vaca (somticas), diariamente estas clulas son
producidas en una cantidad casi constante por una vaca sana; sin embargo, hay variaciones
en el nmero de estas clulas que dependen bsicamente de dos factores: incremento real
como consecuencia de irritacin de la ubre y/o el factor de dilucin con base en la
produccin de leche (Sandholm y cols, 1995; Blowey y Edmonson, 1995).
TIPOS DE CLULAS SOMTICAS
Las clulas somticas presentes en leche de un cuarto sano son principalmente de la serie
de macrfagos, solo cerca de un 1 a 2 % corresponden a clulas epiteliales (aunque estudios
basados en caracterizacin inmunolgica de citoqueratinas establecen que un 10 a 20% de
las clulas somticas corresponden a la lnea epitelial). En leche de cuartos con mastitis,
cerca de un 90% de las clulas somticas pertenecen a la poblacin de neutrfilos (Jensen y
Eberhart, 1975; Sandholm, 1995; Blowey y Edmonson, 1995).
Factores que afectan el recuento de clulas somticas:
1. Fracciones de la leche: Durante el ordeo se pueden identificar varias fracciones en la
leche:
36

Leche anterior estricta: Corresponde a los primeros chorros de leche que derivan

principalmente de la cisterna del pezn y parcialmente de la cisterna de la glndula.

Leche anterior: Se refiere a la leche obtenida antes del ordeo, y despus de descartar la

leche anterior estricta.

Leche intermedia: Corresponde a la leche obtenida durante el ordeo.

Leche final: Como su nombre lo indica es la leche obtenida al final del ordeo.

Leche residual: Corresponde a la leche que permanece en la ubre despus del ordeo, o

que es colectada 3 a 4 horas despus de este.

Tanto en leche de vacas sanas como en leche de vacas con mastitis, y en orden de mayor a
menor concentracin de clulas somticas tenemos: leche residual, leche final, anterior
estricta, anterior e intermedia, (Schalm, 1971 y 1977; Rebhum y cols, 1995).
2. Intervalo de ordeo: Varias comparaciones de CCS en muestras de leche anterior han
mostrado generalmente altos conteos de clulas somticas en leche obtenida durante
intervalos cortos entre ordeos, esto se explica por el factor de dilucin que tiene lugar en
el volumen total de leche (Schalm, 1971 y 1977; Francis y Somner, 1987; Rebhum y cols,
1995).
3. Etapa de lactancia: El CCS es alto durante la primera semana de lactancia, luego
disminuye y permanece bajo por varias semanas, posteriormente ocurre un incremento
gradual hasta el final de la misma (el CCS incrementa cuando el volumen de leche
ordeada es inferior a cinco litros). El alto CCS en calostro puede tener la misma
explicacin Schalm, 1971 y 1977; Rebhum, 1995; Weller, 1998).

37

McDonald y Anderson en 1981, encontraron CCS de 1000000/ml en secreciones mamarias

bovinas desde los 25 das preparto hasta el parto, luego disminuyeron rpidamente hasta
llegar a 100000 clulas/ml diez das despus del parto.
4. Sistema de ordeo: El sobreordeo y las fluctuaciones en los niveles de vaco,
ocasionan en algunos casos un incremento en el conteo de clulas, mientras que en otros
casos no se observan cambios significativos (Schalm, 1971 y 1977; Gilson, 1995; Rebhum
y cols, 1995).
5. Nmero de lactancias: El promedio del CCS aumenta de una lactancia a la siguiente
debido principalmente a PMNs. Con base en el examen histopatolgico de las ubres, este
aumento en los PMNs se atribuye a un incremento en la extensin de la inflamacin crnica
de los ductos, as como a un aumento en la severidad de las lesiones lobulares (Schalm,
1971 y 1977; Gilson, 1995; Rebhum y cols, 1995; Blowey y Edmonson, 1995; Weller,
1998).
6. Estrs: Cualquier factor como el celo, cambios de manejo y presencia de enfermedades
que ocasionen estrs en el animal pueden generar disminuciones en la produccin de leche
y concentracin de las clulas somticas (Blowey y Edmonson, 1995).
7. Mastitis: El factor que afecta en mayor medida el CCS es la presencia de inflamacin
de la glndula mamaria. Los microorganismos contagiosos, y entre ellos principalmente el
Streptococcus agalactiae, elevan a un mayor nivel los conteos en leche de vacas con
mastitis (Schalm, 1971 y 1977; Shultz, 1977; Erskine y cols, 1987; Rebhum y cols, 1995;
Blowey y Edmonson, 1995; Smith, 1997; Keefe, 1997).
Aunque autores como Schalm en 1971 y 1977 y Rebhum y cols en 1995 proponen la
incidencia de diferentes factores en la variabilidad de los CCS, Shultz en 1977, Heald en
1996 y Laevens y cols en 1997 sugieren que factores diferentes a la infeccin de la glndula
mamaria con organismos patgenos y algunos no patgenos tienen influencias menores en
el CCS.
38

VALORES CONSIDERADOS COMO ACEPTABLES PARA LOS CCS

El CCS es alto inmediatamente despus del parto, pero en vacas sanas disminuye en 4 o 5
das a menos de 200000 clulas/ml, en la segunda semana el recuento cae a menos de
100000/ml (en novillas 50000 clulas/ml) y se mantiene as hasta la mitad de la lactancia, a
partir de la cual incrementa levemente cuando la produccin de leche es menor a 4 kg
(Schalm, 1977; Blood y Radostits, 1992; Sandholm y cols, 1995).
Aunque no hay un CCS establecido a partir del cual se defina una vaca como infectada, se
encuentran dos tendencias marcadas con respecto al nivel de clulas somticas propuesto
como aceptable:
1. CCS menores o iguales a 300000 clulas/ml de leche: Schalm en 1977 reporta CCS en
leche de cuartos sanos de 100000/ml; Bailey y Roberson en 1999 recomiendan que el 75%
de los animales de primera lactancia presenten CCS menores a 140000 y el 85% de los
animales de dos lactancias o ms tengan CCS menores a 282000. Steward y cols en 1995,
Bray y Shearer, 1996 y Crist y cols en 1997 proponen un nivel de 200000 clulas como
indicativo de mastitis, con una meta de menos de 283000 clulas para el 85% de las vacas
del hato. Blood y Radostits en 1992, Smith en 1997 y Leslie citado por Erskine en 1992
presentan un CCS de 250000 como indicador de inflamacin. Daz y Santiago en 1992 y
Stokes y Bourne reportan como normales aquellos CCS entre 100000 y 300000 clulas/ml
de leche.
2. CCS mayores o iguales a 400000 clulas/ml de leche: Shultz en 1977, Jain en 1979 y
Gilson en 1995 proponen que cuartos con CCS superiores a 500000/ml se consideren
infectados, mientras que Rebhum en 1995 consider que animales viejos con dos CCS
consecutivos mensuales por encima de 600000 (o novillas con CCS mayores a 400000) se
consideren con mastitis.

39

Schalm en 1971, reporta un estudio con base en 690 cuartos, en el cual se encontr que el
90% de las muestras de leche de vacas entre la primera semana y el sptimo mes de
lactancia tenan CCS menores a 250000 clulas/ml (al extender el rango, el 96% de las
muestras presentaban CCS menores a 500000 clulas/ml de leche). Las novillas de primer
parto presentaban CCS menores a 300000 clulas/ml. Hallazgos similares son reportados
por Shultz en 1977.
La evaluacin de los CCS de vacas individuales distribudos por etapa y nmero de
lactancias, son empleados en algunas granjas lecheras para tomar decisiones acerca del
descarte de animales, del secado precoz, del orden de las vacas durante el ordeo y para
monitorear la efectividad de los tratamientos realizados (Kirk, 1984; Sears y cols, 1993;
Steward y cols, 1995; Crist y cols, 1997; Bailey y Roberson, 1999).
El CCS en leche de tanque es reconocido como el mejor indicador del nivel de mastitis de
un hato (Tabla 6), principalmente de los casos subclnicos ocasionados por
microorganismos contagiosos, a pesar de algunas limitaciones en su interpretacin dadas
por el tamao del hato y el factor de dilucin de las clulas en la leche (Shultz, 1977;
Schukken y cols, 1990; Corlet y Turcinov, 1994; Heald, 1996; Smith, 1997; Crist y cols,
1997). Schukken y cols en 1990 reportan una correlacin no mayor a 0.5 entre el porcentaje
de cuartos infectados y el CCS de tanque, como resultado de las variaciones en la severidad
de la inflamacin, el estado de lactancia, el clima, el nmero de partos de las vacas del hato,
la variacin dentro y entre das, las diferencias de raza y los factores de manejo.
Tabla 6. Prevalencia de infeccin y prdidas en produccin de leche estimadas a partir del
conteo de clulas somticas en leche de tanque (National Mastitis Council, 1987).
CCS Tanque
200000
500000
1000000
1500000

Cuartos infectados %
6
16
32
48

40

Prdidas en produccin %
0
6
18
29

Blood y Radostits en 1992, reportan un nivel de 300000 clulas/ml en leche de tanque

como indicador de un alto nivel de mastitis en el rebao, Rebhum en 1995 cita un nivel de
500000 o ms clulas, como indicio de que ms del 50% de las vacas estn afectadas, y
propone como meta un nivel inferior a 300000, que no debe ser mayor a 200000 en hatos
bien manejados (este autor reporta CCS menores a 100000 en hatos con excelente manejo),
el Consejo Nacional de Mastitis en 1990, Kirk en 1994, Sandholm y cols en 1995, Blowey
y Edmonson en 1995, Smith en 1997 y Cotrino en 1998 proponen que hatos con CCS en
tanque menores o iguales a 250000 clulas/ml se encuentran en un estado satisfactorio en
cuanto a sanidad de la ubre.
Smith en 1997, reporta los CCS a nivel de tanque con relacin al porcentaje de cuartos
afectados por mastitis as: CCS de 200000, 400000, 750000 y 1000000 de clulas por ml de
leche equivalen a 6.2%, 12.8%, 24.3% y 32.6% cuartos con mastitis respectivamente.

CUANTIFICACIN DE CELULARIDAD EN LA LECHE

Las clulas somticas pueden ser cuantificadas por mtodos indirectos que estiman el CCS
segn la concentracin de DNA celular en la leche y por mtodos directos como
microscopa (mtodo de Breeds) y automatizados como Fossomatic y Coulter Counter.
(National Mastitis Council, 1987; Consejo Nacional de Mastitis, 1990; Sandholm y cols,
1995; Blowey y Edmonson, 1995; Rebhum y cols, 1995):

1.9.1.1. Prueba de California para mastitis

41

El California Mastitis Test (CMT) es una prueba indirecta que mide macroscpicamente
la cantidad de DNA, primariamente una funcin del nmero de clulas blancas nucleadas
en leche (Schalm, 1971; Consejo Nacional de Mastitis, 1990; Sandholm y cols, 1995).

Mecanismo de accin: El CMT esta basado en un detergente aninico llamado lauryl

sulfato de sodio a una concentracin del 3%, que disuelve las membranas celulares
permitiendo que el DNA sea liberado para formar un gel transitorio con el detergente. A
mayor cantidad de DNA en la muestra, mayor viscosidad del gel (Schalm, 1971; Sandholm
y cols, 1995; Blowey y Edmonson, 1995; Gilson, 1995; Hurley y Morin, 1999).
La proporcin reactivo:leche debe ser 1:1, as, poco reactivo excluye el desarrollo de
reacciones positivas plenas, mientras que un leve exceso no altera significativamente los
resultados. Los volmenes de reactivo y leche, separados para cada cuarto, son mezclados
en la placa de prueba, la formacin de gel es evaluada a medida que la placa es rotada
suavemente y el resultado es registrado despus de cinco segundos, algunos momentos
despus el gel se deteriora. Adicionalmente ciertos reactivos tienen incluido un indicador de
pH como el prpura de bromocresol (Schalm, 1971; Sandholm y cols, 1995).
El CMT es ms efectivo a pH de 7 o por encima de este, por lo cual y debido a que la
multiplicacin bacteriana en la leche comnmente conlleva a la produccin de cido, las
muestras de leche deben ser refrigeradas si la prueba no se realiza en el momento, para
procesarlas dentro de las 24 a 36 horas siguientes.
Es comn realizar el CMT con los primeros chorros de leche (leche anterior), de esta forma
las reacciones positivas son comnmente ms intensas; en algunos casos la leche anterior
puede ser negativa pero la leche final es positiva al CMT, esto es ms comnmente
encontrado en vacas jvenes y puede indicar que la mastitis an no ha envuelto grandes
reas del parnquima glandular; tambin se encuentra en estados convalecientes de mastitis.
Infrecuentemente la leche anterior es positiva y la final es negativa, esto sugiere que la
lesin inflamatoria esta posiblemente limitada al recubrimiento de la cisterna del pezn. La
leche residual provee la fraccin ms sensible, que revela de un 20 a 40% ms grados de
42

CMT positivos que la leche anterior, as, los porcentajes de grados positivos para mastitis al
CMT fueron 4.7%, 8% y 16% para la leche anterior, la leche final y la residual
respectivamente (Schalm, 1977).

Interpretacin: La Tabla 7 presenta los grados de la prueba de California para mastitis

con su interpretacin y los respectivos conteos de clulas somticas a que equivale

(Schalm, 1971; National Mastitis Council, 1987; Rebhum y cols, 1995; Gilson, 1995):
Tabla 7. Grados e interpretacin del CMT.
Smbolo

Significado

Reaccin

Interpretacin

N
T

Negativo
Trazas

Mezcla lquida
Leve formacin de viscosidad, tiende a

0-200000 cl/ml
150000-500000 cl/ml

1
2
3

desaparecer con el movimiento

Dbil
Viscosidad clara sin tendencia a formar gel 400000-1500000 cl/ml
Claramente positivo Formacin de gel, al movimiento deja ver 800000-5000000 cl/ml
Fuertemente

el fondo de la copa
El gel formado puede tener una superficie

positivo

convexa, tiende a adherirse al fondo

> 5000000 cl/ml

Sensibilidad y especificidad: Sandholm y cols en 1995, reportan un estudio en el cual

participaron 51 usuarios del CMT, donde solo el 4% de las muestras analizadas con ms de
300000 clulas/ml fueron clasificadas como normales, mientras que el 28% de las muestras
con menos de 300000 clulas/ml fueron clasificadas como leches de vacas con mastitis; los
mismos autores reportan un punto de corte de 250000 clulas/ml para dividir las muestras
de leche entre cuartos infectados y no infectados con un 80% de certeza.
Tabla 8. Sensibilidad y Especificidad del CMT (Gelvez y cols, 1998).
Parmetro
Sensibilidad
Especificidad
Valor predictivo positivo
Valor predictivo negativo
43

Valor %
45.79
78.86
59.64
35.84

1.9.1.2. Coulter Counter

Durante la mitad de la dcada de los 70s el empleo del CMT en laboratorio fue
reemplazado por mtodos de recuento electrnico, inicialmente con un contador de
partculas (Coulter Counter) y posteriormente con un analizador fluorptico de DNA
(Fossomatic) (Heald, 1996).
El mtodo electrnico Coulter Counter para el recuento de partculas se basa en el paso de
una muestra de leche fijada y diluida a travs de una apertura localizada entre dos
electrodos, las partculas presentes generan pulsos de voltaje proporcionales al volumen de
las partculas, de esta forma el nmero de pulsos indica el nmero de partculas presentes
por ml de leche (British Standard, 1997).
Los mtodos electrnicos presentan ventajas importantes ante otros mtodos de
cuantificacin de clulas somticas entre las que se encuentran: tiempo mnimo de anlisis,
las muestras pueden ser almacenadas despus de ser fijadas, el mtodo es objetivo, el
escaneo electrnico provee una alta exactitud estadstica y adicionalmente puede ofrecer
datos del tamao celular (Steward y cols, 1995; Gilson, 1995; Coulter Corporation, 1996).

Recoleccin y transporte de las muestras de leche: Las muestras de leche para conteo de

clulas somticas pueden ser obtenidas a partir de cuartos individuales, de varios cuartos de
una misma vaca o del tanque de enfriamiento de leche. Cuando las muestras son obtenidas
de un animal individual se deben tener en cuenta los factores que afectan las
concentraciones celulares descritos anteriormente, por lo que con fines prcticos y para
estandarizar el proceso, se prefiere emplear leche anterior para el CCS. Cuando las
muestras son obtenidas del tanque de enfriamiento, la leche debe ser completamente
homogenizada (mnimo 15 minutos de agitacin) con el fin de distribuir uniformemente las
clulas presentes en ella (Dinsmore y cols, 1995; Sandholm y cols, 1995; British Standard,
1998).
44

Aunque la cuantificacin de clulas somticas no exige la recoleccin de las muestras en

forma estril, se prefiere evitar al mximo la contaminacin de las mismas, principalmente
si su lectura se realiza por el mtodo Coulter Counter.
Las muestras de leche se deben procesar lo ms pronto posible luego de su recoleccin, de
lo contrario deben ser transportadas bajo refrigeracin a 4 oC o preservadas (Na-azide,
bronopol, dicromato; formalina) y ledas en el menor tiempo posible. El congelamiento de
las muestras de leche ocasiona fragmentacin de las clulas somticas, razn por la cual la
lectura de estas muestras ofrece resultados errneos.

Procesamiento de las muestras: El procedimiento para el recuento de clulas somticas

es reportado por Coulter Corporation en 1996 y British Standard en 1997:

Fijacin de las muestras a 60 oC por 10 minutos.

Dilucin 1:100 con Somotan (10 ml reactivo + 100 l leche).

Bao de agua a 80oC por 10 minutos.

Enfriamiento y transferencia a cubetas de lectura.

Lectura en Coulter Counter Z1 con un rango de apertura de 5 a 10 .

Registro de resultados en clulas por ml de leche.

Sensibilidad y especificidad: Rindsing y cols en 1979, citados por Erskine en 1992

seleccionaron el 53.1% de vacas realmente infectadas y el 25% de vacas no infectadas con

dos CCS mensuales por encima de 500000. Dohoo y cols en 1981 predijeron correctamente
el estado de infeccin en el 85.8% de las vacas por medio del CCS (Erskine, 1992). Shultz
en 1977 cita un estudio en el cual el 2.5% de las vacas sanas (promedio de 170000
clulas/ml de leche) y las vacas infectadas con microorganismos no patgenos (promedio
de 227000 clulas/ml de leche) sobrepasaron las 500000 clulas, y el 25% de las vacas
infectadas con microorganismos patgenos (promedio de 998000 clulas/ml de leche)
fueron menores a 500000 clulas. Sears y cols en 1993 reportan un mayor valor predictivo
45

de esta prueba en los casos de mastitis contagiosa a comparacin de los casos por
medioambientales. Kirk y cols en 1996 reportan valores de sensibilidad del 70 al 85% para
el conteo de clulas somticas. Estos estudios no aclaran la tcnica empleada para el conteo
celular.

1.9.2. Aislamiento e identificacin de patgenos en la leche

Los procedimientos microbiolgicos no son 100% seguros, pero se encuentra
aproximadamente un 90% de correlacin entre muestras colectadas consecutivamente del
mismo cuarto y entre interpretaciones del mismo cultivo por diferentes tcnicos (National
Mastitis Council, 1987). Keefe en 1997, reporta sensibilidades y especificidades del 95 al
100% para la identificacin de Streptococcus agalactiae por cultivo, mientras que Sears y
cols en 1993 reportan una sensibilidad del 75% para el aislamiento a partir de una muestra
de leche, valor que incrementa a 94% con dos muestras y a 98% para tres muestras
consecutivas.
Las recomendaciones para la recoleccin y el procesamiento de las muestras de leche para
aislamiento microbiolgico no presentan grandes variaciones entre pases y autores, los
pasos a seguir segn The National Mastitis Council, 1987 y 1990; Blood y Radostits, 1992;
Kirk y cols, 1994; Sandholm y cols, 1995, Smith, 1996; Crist y cols, 1997; The
Pennsylvania State University, 1999 y Hurley y Morin, 1999, son los siguientes:

Recoleccin de muestras: Aunque la calidad de las muestras es extremadamente

importante en cualquier procedimiento diagnstico, en el caso de mastitis este aspecto es

an ms crtico:
Preferiblemente emplear guantes. Lavar y secar las manos antes de la recoleccin de las

muestras.
Limpiar y secar los pezones.

46

Desinfectar la punta de cada pezn con una torunda de algodn empapada en alcohol al
70%, repitiendo este procedimiento hasta que el algodn resulte limpio. Si se toman
muestras de los cuatro cuartos se deben desinfectar inicialmente los pezones ms
lejanos y terminar con los ms prximos, invirtiendo el orden de manipulacin de los
mismos en el momento de la toma de muestras para evitar su contaminacin.

Descartar los primeros chorros de leche para eliminar los contaminantes del conducto
del pezn.

Recolectar 5 ml de leche en tubos de vidrio estriles, preferiblemente tapa rosca,

permitiendo que la leche llegue al tubo en un ngulo lo ms horizontal posible para
evitar la contaminacin de la muestra con material proveniente de la ubre. Ni la boca
del tubo ni el extremo interno de la tapa deben entrar en contacto con la ubre, las manos
u otra superficie por el riesgo de contaminacin.
Posterior a la recoleccin e identificacin de las muestras, estas deben ser almacenadas y
transportadas bajo refrigeracin entre 4 a 5 oC, manteniendo una temperatura estable; si las
muestras no pueden ser remitidas al laboratorio o procesadas durante las 24 horas
siguientes a su recoleccin, deben congelarse (-20oC); este hecho puede aumentar la tasa de
recuperacin de microorganismos contagiosos.

Procesamiento de las muestras: Se realiza un cultivo por agotamiento de 0.01 ml de

leche en placas de agar sangre de ovino al 5%. Para muestras de cuartos individuales, 0.01
ml de leche pueden ser cultivados en un cuadrante de la placa de agar; para muestras
compuestas, el mismo volumen de leche debe ser distribuido en media placa, mientras que
inculos mayores o leche proveniente de vacas con mastitis clnica deben cultivarse en
media a una placa de agar. La siembra del inculo debe hacer posible el crecimiento de
colonias aisladas. Posterior al cultivo se incuban las cajas de agar entre 35 y 37 oC durante
24 a 48 horas, momento en el cual se realiza la interpretacin de los resultados.

Interpretacin de resultados: Luego del periodo de incubacin se verifica si hay

crecimiento en las placas de agar y se procede a hacer la identificacin de los

microorganismos segn la morfologa de las colonias, la tincin de Gram y finalmente por
pruebas bioqumicas (The National Mastitis Council, 1987 y 1990).
47

Se pueden presentar algunas complicaciones en el momento de interpretar los resultados:

1. Contaminacin de las muestras: Al fluir a travs del conducto del pezn la leche se
puede contaminar con los microorganismos presentes, entre los cuales se reportan:
Micrococcus spp, Corynebacterium spp; Streptococcus spp, Staphylococcus spp, Bacillus
spp, Pseudomonas spp, enterobacterias, levaduras y hongos; estos contaminantes primarios
varan en nmero de 102 a 104 bacterias/ml de leche.
2. Presencia de antibiticos y antimicrobianos en la leche: Pueden suprimir el crecimiento
de los microorganismos causantes de mastitis, permitiendo que contaminantes no
susceptibles crezcan ocasionando errores en el diagnstico. Adicionalmente se pueden
encontrar productos de la inflamacin con propiedades "inhibidoras", estas sustancias
pueden dificultar el aislamiento de microorganismos a partir de la muestra.
3. Cultivos negativos: Algunos reportes indican que del 25 al 40% de las muestras de
leche obtenidas de casos clnicos de mastitis son negativas a aislamiento microbiolgico
como resultado de varios factores:

Bajos nmeros de microorganismos presentes en leche al momento de realizar el

cultivo, entre otras razones por el almacenamiento prolongado o indebido de las muestras.

Eliminacin del microorganismo por las defensas naturales o despus de tratamiento

antibitico, con persistencia de la inflamacin.

Microorganismos de vida intracelular.

Condiciones del cultivo no aptas para los microorganismos presentes en la muestra.

48

1.10. CONTROL
El control de las mastitis depende de dos factores principales: eliminacin de las
infecciones existentes y prevencin de la ocurrencia de nuevas infecciones intramamarias
(Philpot, 1979; Francis y Sumner, 1987; Fetrow y Anderson, 1987; Francis, 1989; Consejo
Nacional de Mastitis, 1990; Erskine, 1992; Smith y Hogan, 1993; Cullor, 1993; DeGraves y
Fetrow, 1993; Gilson, 1995; Rebhum y cols, 1995; Sandholm y cols, 1995; Blowey y
Edmonson, 1995; Crist y cols, 1997; Bray y Shearer, 1997):

1.10.1. Eliminacin de las infecciones existentes: Para eliminar las infecciones presentes
en el hato se requiere el tratamiento de los casos de mastitis durante la lactancia, el
tratamiento de vaca seca y el descarte de animales con infecciones crnicas o refractarias a
la terapia:

1.10.1.1. Tratamiento: Se deben tener en cuenta diferentes criterios para el tratamiento de

los casos de mastitis, dependiendo de la severidad de la enfermedad, de su cronicidad y del
tipo de microorganismo involucrado. En trminos generales, la terapia de enfermedades
infecciosas debe asistir las defensas del hospedador en la eliminacin de los patgenos
invasores o reducir las consecuencias patofisiolgicas de la infeccin sin alterar las
defensas del animal. En el caso de mastitis la terapia se ha enfocado en la eliminacin del
agente infeccioso por el uso de antimicrobianos (Erskine y cols, 1993) a tal grado que
Guterbock en 1992, Dinsmore y cols en 1995 y Morcillo en 1998, sealan que la mastitis es
la principal causa de administracin de antibiticos en vacas de leche.

TRATAMIENTO DURANTE LA LACTANCIA

1. Mastitis clnica: La mastitis clnica implica alteraciones obvias sobre la produccin de
leche, el estado de la ubre y en algunos casos sobre el estado general de la vaca, por lo cual
49

su tratamiento es inmediato en la mayora de los casos. Comnmente, las mastitis clnicas

son tratadas con antibiticos, pero en realidad esta decisin debera ser tomada de acuerdo a
los microorganismos de mayor prevalencia en el hato. Los coliformes tienen una tasa de
recuperacin espontnea cercana al 90%, y en la mayora de los casos la deteccin de la
enfermedad se hace en el momento en que las bacterias ya han sido eliminadas de la ubre y
el efecto que persiste es la irritacin por el lipopolisacrido (LPS), segn lo cual la terapia
antimicrobiana en estos casos no ejercera mayor efecto, algunos autores sostienen incluso
que podra resultar perjudicial si su actividad bactericida favorece la liberacin del LPS
(Erskine y cols, 1991; Sandholm y cols; 1995).
A diferencia de los coliformes, las mastitis ocasionadas por Streptococcus spp y
Staphylococcus aureus presentan bajos niveles de recuperacin espontnea (20-25% y 1520% de los casos respectivamente), lo cual hace necesaria la administracin de antibiticos
(Sandholm y cols, 1995).
Philpot en 1979, reporta tasas de curacin de mastitis clnica por Staphylococcus aureus del
24.8%, por Streptococcus agalactiae del 51.6%, por otros Streptococcus del 36% y por
coliformes del 71.4% luego de tratamiento antibitico, niveles que al sobreponerse a las
tasas de curacin espontnea ponen en evidencia una efectividad mucho menor de la terapia
antimicrobiana. Esta limitada efectividad de los antibiticos esta influenciada por diversos
factores, como el tipo de producto empleado (propiedades farmacocinticas), el protocolo
teraputico (dosis, intervalo, va de administracin y duracin del tratamiento), el tiempo de
evolucin de la enfermedad y el microorganismo involucrado (factores de virulencia y
sensibilidad antimicrobiana).
Con respecto al producto empleado, este no debe ser irritante para la ubre, debe requerir
una concentracin inhibitoria mnima (CIM) baja, el grado de unin a las protenas ha de
ser mnimo, debe experimentar una rpida liberacin a partir del vehculo, y eliminarse
rpidamente de la leche (Snchez, 1988). El protocolo teraputico debe respetar dosis, va e
intervalo de aplicacin; los casos de mastitis subclnica, mastitis crnica y mastitis clnica
leve se pueden tratar por va intramamaria, mientras que los casos clnicos severos se
50

prefieren tratar por va parenteral, para contrarrestar la baja difusin del producto observada
luego de las aplicaciones intra mamarias como resultado del acumulo de productos
inflamatorios en la ubre (Ziv, 1980). En la aplicacin intramamaria se recomienda la
desinfeccin previa del conducto del pezn y el mtodo de insercin parcial para la
aplicacin del producto, lo cual mejora las tasas de curacin y disminuye los riesgos de
infecciones iatrognicas (Nickerson y cols, 1987; Kirk y cols, 1994). El ltimo punto a
tener en cuenta en el protocolo de tratamiento es la duracin, que no debe ser menor de 3 o
4 das para evitar la persistencia de las infecciones (Francis y Sumner, 1987).
Al evaluar el efecto del diagnstico y tratamiento precoz sobre las tasas de curacin en
mastitis, Milner y cols en 1997 encontraron que cuanto ms oportuna es la terapia, mayor
es la disminucin en la severidad de la enfermedad, el retraso en la aparicin de los signos
clnicos, y son menores la depresin en la produccin de leche y el aumento del CCS;
igualmente el retorno del CCS al nivel de 400000 clulas toma menor tiempo, la curacin
bacteriolgica es casi total y se emplea un 50% menos antibitico.
Finalmente, el patgeno involucrado juega un papel muy importante en la resolucin de la
enfermedad, obteniendo las mayores tasas de recuperacin en las infecciones intramamarias
ocasionadas por microorganismos ambientales, seguidas por los microorganismos
contagiosos como Streptococcus agalactiae y con los ms bajos niveles de curacin para el
Staphylococcus aureus, como resultado de sus factores de virulencia.

2. Mastitis subclnica: El tratamiento de los casos de mastitis subclnica durante la

lactancia persigue tres objetivos:

Evitar la cronicidad de la enfermedad, pues esto aumenta el nmero de casos

refractarios al tratamiento y la diseminacin de la infeccin a los animales del hato

(Francis, 1989; Erskine y cols, 1993).

51

Aquellos animales permanentemente infectados son susceptibles de descarte prematuro,

ya sea por servir como focos de infeccin o por un bajo nivel de produccin y altos conteos
de clulas somticas.

Las vacas con mastitis subclnica disminuyen la calidad de la leche y por lo tanto su

valor comercial (Gutierrez y cols, 1982; Francis, 1989; Erskine y cols, 1993; Kirk y cols,
1994; Cullor, 1995; Sol y cols, 1997).
En aquellos hatos donde la prevalencia de infeccin intramamaria por Streptococcus
agalactiae es superior al 25% de los cuartos, se ha propuesto el tratamiento ciego de todos
los animales con el fin de eliminar este microorganismo que presenta alta sensibilidad a los
antibiticos (Kirk y cols, 1994). Autores como Fetrow y Anderson en 1987 confirman el
tratamiento de los casos de Streptococcus agalactiae como nico tratamiento costo-efectivo
durante la lactancia.
El estudio de Yamagata y cols en 1987, demostr el beneficio econmico del tratamiento de
mastitis subclnica por Streptococcus agalactiae en vacas lactantes a travs de la
comparacin de la produccin esperada con la actual, donde encontr un beneficio neto de
396 dlares por vaca para animales tratados en la lactancia temprana y 237 dlares por
vaca, para animales tratados en la lactancia media; para vacas tratadas durante el final de la
lactancia se encontr una pequea prdida neta. Igualmente, Erskine y Eberhart en 1990
encontraron una relacin beneficio-costo de 2.28:1 al tratar todas las vacas lactantes
positivas a aislamiento de Streptococcus agalactiae, esta relacin disminuy a 2.18:1 al
tratar vacas lactantes segn el CCS (CCS mayores a 283000) y se obtuvo el menor valor al
tratar todas las vacas lactantes sin ningn proceso de seleccin 1.26:1; concluyeron como
viable el tratamiento durante la lactancia de animales infectados con Streptococcus
agalactiae en hatos con una prevalencia mayor o igual al 25% de infecciones
intramamarias por este patgeno, cuando el tratamiento va asociado al sellado de los
pezones postordeo y al tratamiento de vaca seca en todos los animales.

52

Pueden observarse incrementos en la respuesta al tratamiento de mastitis subclnica durante

la lactancia de casi el 50% cuando se emplean antibiticos de larga retencin en la ubre,
aunque es menor la efectividad cuando la terapia se realiza hacia el final de la lactancia
(Philpot, 1979; Francis, 1989; Consejo Nacional de Mastitis, 1990; Kirk y cols, 1994).

TRATAMIENTO DURANTE EL PERIODO DE VACA SECA

La terapia de vaca seca presenta las siguientes ventajas al compararla con la terapia durante
la lactancia (Philpot, 1979; Buddle y Cooper, 1980; Pankey y cols, 1982; Snchez, 1988;
Blowey y Edmonson, 1995; Vitulich y cols, 1996):

Mayor porcentaje de efectividad: Se reportan tasas de curacin del 88 al 95% para

Streptococcus spp y del 30 al 87% para Staphylococcus aureus con diferentes antibiticos
durante el periodo seco.

Se evita el descarte de leche o las penalizaciones impuestas por la presencia de

antibiticos en la misma.
El protocolo teraputico ideal debe incluir a todas las vacas del hato, pues el tratamiento
selectivo de vaca seca se ha asociado a altas prevalencias de Streptococcus agalactiae,
reflejando la inhabilidad para identificar todos los cuartos infectados (Erskine, 1992).

EXPLICACIN DEL FRACASO EN LA TERAPIA ANTIBITICA DE MASTITIS

Los factores presentados a continuacin determinan la respuesta desfavorable de los casos
de mastitis a la terapia antibitica (Philpot, 1979; Sears y cols, 1984; Francis, 1989;
Guterbock, 1992; Vestweber, 1994; Blowey y Edmonson, 1995; Milner, 1997; Keefe,
1997):

53

1. Los agentes antibiticos no alcanzan el sitio de la infeccin en concentraciones

adecuadas por:

Inhabilidad para mantener niveles adecuados de antibitico por el tiempo requerido

para eliminar la infeccin durante la lactancia.

Limitaciones farmacocinticas debidas a la absorcin, disposicin de drogas,

ionizacin, difusin, barrera sangre-leche, adhesin y organismos intracelulares.

Formacin de microabsesos y fibrosis.

Edema de la ubre o bloqueo de los conductos por productos de la inflamacin.

2. Bacterias refractarias a la terapia por:

Resistencia a antibiticos.

Latencia bacteriana; las bacterias que no se multiplican no son sensibles a muchos

agentes antibiticos.

Formas L bacterianas. Bacterias deficientes de pared celular que no son sensibles a

antibiticos -lactmicos.
3. Reinfeccin: El hospedador falla para eliminar la infeccin suprimida por el agente
antibitico; la reinfeccin ocurre desde el canal del pezn, o porque hay un aumento de
la susceptibilidad debido a inflamacin de la glndula.
4. Efectos nocivos sobre la fagocitosis. Varios agentes antibacterianos pueden afectar
procesos metablicos comunes tanto a los microorganismos como al hospedador. Se
han encontrado alteraciones significativas en las caractersticas morfolgicas celulares
normales in vitro de los PMNs cultivados con tetraciclina, nitrofurantona, eritromicina,
polimixina B, rifampicina, penicilina-noboviocina, cloranfenicol, tiamulina y aceite de
cacahuate. La viabilidad de los PMNs cultivados con cloranfenicol, penicilinanoboviocina o tiamulina, se redujo significativamente en comparacin a los controles.
La adicin de Staphylococcus aureus aument las alteraciones morfolgicas y redujo la
viabilidad de los PMNs . La fagocitosis del Staphylococcus aureus por los PMNs
disminuy significativamente en presencia de penicilina-noboviocina, cloxacilina
benzatnica, amikacina, rifampicina, cefapirina benzatnica, dihidroestreptomicina54

penicilina procanica G, cloranfenicol, tiamulina o aceite de cacahuate a comparacin

de los controles (Nickerson y cols, 1985; Lintner y Eberhart, 1990). Hoeben y cols en
1997, encontraron alteraciones en la concentracin y funciones de los neutrfilos luego
de administracin local y repetida de varios antibiticos en la glndula mamaria. Ziv y
cols en 1983, obtuvieron hallazgos similares, indicando nuevamente que ciertos
antibiticos y vehculos tienen un efecto de supresin sobre los PMNs en leche bovina.
La terapia con antibiticos no es una panacea, esta no puede constituir ms que un solo
componente del control, el cual tiene que basarse en la prevencin de nuevas infecciones.
Desafortunadamente, el manejo en relacin con mastitis es muy complejo. En Estados
Unidos, el mayor avance con respecto a la terapia antibitica en mastitis ha sido ms
filosfico que cientfico, pues actualmente prima el consenso creciente entre veterinarios y
ganaderos acerca del papel limitado que juegan los antibiticos en los programas de
tratamiento y control de mastitis. La terapia antibitica debe ser restringida a casos en los
cuales estn aseguradas tanto la eficacia teraputica como el beneficio econmico y la
produccin y venta de leche y carne sin residuos. La pregunta realizada por practicantes e
investigadores ha cambiado de Qu antibitico debo usar? a Estn indicados los
antibiticos? (Erskine y cols, 1992 y 1993; Roberson, 1996).
Guterbock en 1992 reporta un estudio en el cual se encontr un 87% de curacin en casos
leves de mastitis clnica no tratados con antibiticos. Elvinger y cols en 1994 no
encontraron diferencias significativas en las tasas de curacin encontradas en varios casos
de mastitis clnica, siendo del 40% en animales tratados con antibitico y del 35% en
animales que presentaron recuperacin espontnea. Wilson y cols en 1999, en un estudio
retrospectivo que incluy 9.007 casos de mastitis subclnica durante la lactancia, reportaron
tasas de curacin bacteriolgica del 75% en casos tratados con antibitico, contra un 65%
en casos no tratados.
Guterbock en 1992 y 1994, Erskine en 1992 y 1993, Kirk y cols 1994 y Crist y cols en
1997 ponen en duda la eficacia del empleo de antibiticos en el tratamiento de mastitis
originadas por coliformes, adicionalmente aclaran que el xito teraputico para algunas
55

infecciones puede ser mejor evaluado por la reduccin de los sntomas clnicos, ms que
por la eliminacin total del patgeno, finalmente, proponen como principales medidas de
eficacia teraputica la comercializacin de la leche y la sobrevivencia de los animales a
largo plazo.
Por las deficiencias reportadas en la terapia antibitica de los casos de mastitis y por la
inconveniente eliminacin en leche de estos productos, se debe estimular la bsqueda de
nuevas opciones teraputicas de igual o mayor efectividad que los antimicrobianos y que
puedan emplearse durante la lactancia (Hamann, 1992; Morcillo, 1998; Malinowski y cols,
1999).

INMUNOTERAPIA EN MASTITIS
Factores asociados con el intenso manejo del ganado de leche pueden afectar
profundamente la inmunidad de la glndula mamaria y su habilidad de defensa en contra de
la mastitis. En aos recientes, considerables esfuerzos de algunos investigadores han sido
encaminados al aumento de los mecanismos de defensa naturales de la glndula mamaria
durante los periodos de mayor riesgo de enfermedad, proponiendo diferentes prcticas para
buscar una mejor respuesta del sistema inmune (Smith y Schanbacher, 1977; Ziv y cols,
1983; Daz y Santiago, 1992; Timms y cols, 1994; Sordillo y cols, 1997; Malinowski y
cols, 1994 y 1998; Zecconi y cols, 1999).
La inmunoterapia, basada en el empleo de medicamentos inmunomoduladores, tambin
llamados inmunoestimulantes o modificadores de la respuesta biolgica, modula la
respuesta inmune local inespecfica a travs de la estimulacin de la fagocitosis por
macrfagos y neutrfilos y del incremento en la produccin de anticuerpos y citoquinas
(Daz y Santiago, 1992; ISGNAS,1997; Halliwey y Gorman; Zecconi y cols, 1999)
Los modificadores de la respuesta biolgica podran dividirse en dos grupos (Zecconi y
cols, 1999):
56

1. Sustancias que inducen reacciones inmunes, tambin denominados inductores de

parainmunidad.
2. Sustancias que sustituyen reacciones inmunes primarias, entre ellas las citoquinas.
Como potenciales inmunoteraputicos no especficos han sido investigados varios agentes
como los Factores Estimulantes de Colonia (de granulocitos, de macrfagos y de
granulocitos-macrfagos), preparaciones de solucin salina con glicgeno al 1%,
Propionibacterium acnes, levamisole, thiabendazol, avridina, isoprinosina, glucn, cido
ascrbico, endotoxinas, niacina y lisostafina (Paape y cols, 1977; Torrence, 1985; Blood y
Henderson, 1992; Tyler y cols, 1993; Dinsmore y cols, 1995; Halliwey y Gorman).
Numerosas citoquinas que regulan la funcin celular durante procesos inmunes e
inflamatorios, han sido recientemente identificadas y purificadas, las que han demostrado
ser prometedoras en la prevencin o tratamiento de mastitis bovina son la interleukina-1
(IL-1), interleukina-2 (IL-2), interferones, factor estimulante de colonias y factor de
necrosis tumoral (Erskine y cols, 1993; Sandholm y cols, 1995; Halliwey y Gorman).
Reportes sobre el empleo de diferentes inmunomoduladores en el tratamiento de mastitis
bovina (algunos de los reportes presentados no cuentan con suficiente rigor cientfico):

Saad y stensson en 1990 reportan incrementos marcados en los conteos de clulas

somticas con predominio de PMNs, aunque tambin se encontraron incrementos en el

nmero de linfocitos y macrfagos, luego de la infusin de endotoxina a la glndula
mamaria.

Daley y cols en 1991 encontraron incrementos en la diapdesis de PMNs, produccin

de superxido y fagocitosis en la glndula mamaria luego de la estimulacin con

interleuquinas 1B y 2. Ensayos en campo demostraron tasas de curacin del 38 y 42% para
glndulas infectadas con Staphylococcus aureus y tratadas intracisternalmente con IL-1B y
IL-2 recombinantes (Erskine, 1993).
57

Kehrli y cols en 1991 demostraron un incremento en el nmero y actividad de los

neutrfilos y una disminucin en la duracin de la infeccin intramamaria con Klebsiella

pneumoniae en vacas tratadas con el Factor Estimulante de Colonias de granulocitos luego
de la infeccin experimental.

Sordillo y Babiuk en 1991, contrarrestaron los efectos de supresin de las secreciones

mamarias luego de la exposicin in vitro a Interferon- recombinante bovino durante el

periparto (Sordillo y cols, 1992).

Sordillo y cols en 1992 en experimentos in vitro, encontraron que neutrfilos tratados

con el Factor Estimulante de Colonias de Granulocitos Macrfagos recombinante,

mostraron significativamente mayor actividad quemotctica y bactericida con tendencia a
producir mayor anin superxido que los controles. La produccin de anin superxido y la
actividad bacteriana de los neutrfilos de la glndula mamaria fueron consistentemente
mayores que para los neutrfilos de sangre.

Timms y cols en 1994, evaluaron la eficacia de un inmunoestimulante a base de

Propionibacterium acnes en la terapia de mastitis subclnica. Treinta vacas con CCS

mayores a 400000 clulas/ml fueron divididas en dos grupos pareados, uno de ellos control,
al finalizar el estudio no se encontraron diferencias significativas en la tasa de curacin
bacteriana o en los CCS de los das 0, 4, 28 y posteriores entre los dos grupos. Los CCS de
los das 7 y 14 fueron significativamente menores en las vacas tratadas.

Malinowski y cols en 1994 al evaluar 305 vacas con mastitis distribuidas en tres grupos

de tratamiento: primer grupo 37 vacas (51 cuartos) con mastitis clnica y 187 vacas (323
cuartos) con mastitis subclnica, tratadas con una dosis de 0.02 mg/kg del dimero lisozima
(Lydium-KLP); segundo grupo, 34 vacas (45 cuartos) con mastitis clnica tratadas con una
dosis de 0.01 mg/kg de Lydium-KLP y antibitico y el tercer grupo, 46 vacas tratadas con
antibitico nicamente; obtuvieron una recuperacin del 37.3% de los cuartos afectados
con mastitis clnica y del 71.2% de los cuartos afectados por mastitis subclnica en el grupo
58

1; una disminucin del CCS al da 5 postratamiento del 59.5% de los cuartos tratados
(<500000clulas/ml) en el grupo 2 y una respuesta similar a la del grupo 2 para el da 14
postratamiento en el grupo 3.

Canfield en 1994, luego de estudiar el Factor Hiperinmune Lcteo (HIMF: Hyper-

Immune Milk Factor, molcula con actividades antiinflamatorias presente en leche de vacas
hiperinmunizadas), concluye que tiene un uso potencial en la reversin de reacciones
inflamatorias en mastitis.

Pighetti y Sordillo en 1994 y 1995 luego de realizar dos ensayos, sugieren que la

inmunizacin con IL-2 como adyuvante puede ser ms efectiva que el adyuvante
incompleto de Freunds en aumentar la inmunidad especfica en la glndula mamaria.
Ensayos similares son reportados por Amorena y Prez en 1997.

Dinsmore y cols en 1995 evaluaron una preparacin de Propionibacterium acnes en 51

vacas lactantes con mastitis crnica por Staphylococcus aureus, 24 vacas recibieron 1 ml de
inmunoestimulante dos veces a la semana por cuatro semanas y las vacas restantes
permanecieron como controles. Al finalizar el estudio, tras la evaluacin de la leche de los
animales por CCS y cultivo, el 36.7% de los cuartos del grupo tratado contra el 32.2% de
los cuartos del grupo control se recuperaron, sin ser esta diferencia estadsticamente
significativa. El tratamiento no tuvo efecto sobre el CCS del total de los cuartos tratados,
pero los CCS de los cuartos recuperados de la infeccin por Staphylococcus aureus en el
grupo tratado presentaban una tendencia a ser menores con respecto al grupo no tratado.

Pighetti y Sordillo en 1996 concluyeron que el Interferon bovino recombinante puede

ser un adyuvante efectivo en protocolos de inmunizacin de mastitis a travs del aumento

de la inmunidad especfica en la glndula mamaria bovina.

Miller en 1998, luego del tratamiento de 188 casos de mastitis aguda, subclnica y

crnica encontr mejores tasas de curacin (estadsticamente significativas) para los

59

animales tratados con antibiticos y gamaglobulinas a diferencia de los animales tratados

nicamente con antibiticos.

Boudjellab y cols en 1998, encontraron que la lnea celular MAC-T del epitelio de la

glndula mamaria secreta IL-8 en respuesta a la estimulacin con LPS.

Malinowski y cols en 1998, evaluaron 99 vacas con mastitis purulenta crnica, 30 vacas

(45 cuartos) tratadas con antibitico sistmico y las 69 restantes (117 cuartos) con LydiumKLP (lizosima) adicional al antibitico. Las tasas de curacin fueron del 42.2 y del 70.1%
respectivamente.

Zecconi y cols en 1999, observaron que el tratamiento durante el secado con un

modificador de la respuesta biolgica conteniendo Parapox ovis (Baypamun) redujo

significativamente la prevalencia de infeccin con Staphylococcus aureus en vacas durante
el periparto (6%) con respecto a los controles (11.4%).
INMUNOCEL
Desde 1900, la inmunoterapia con productos virales y bacterianos ha sido empleada con el
fin de estimular la respuesta inmune no especfica del hospedador (Torrence, 1985). Los
modificadores de la respuesta biolgica derivados de microorganismos se han empleado
desde el inicio de la dcada de los 70s como agentes quimioteraputicos para el
tratamiento del cncer o para aumentar la resistencia general a agentes infecciosos por
medio de la activacin de macrfagos que subsecuentemente liberan mediadores como
Factores de Crecimiento y citoquinas, promueven la hematopoyesis y aumentan la funcin
de las clulas inmunes (Dinsmore y cols, 1995; ISGNAS, 1997; Kirk y cols, 1998).
El Inmunocel1 es un producto inmunomodulador cuya informacin farmacutica se
presenta a continuacin:

Inmunocel. Laboratorios Calier. S. A.

60

Composicin: Es un preparado compuesto por LPS de cadena corta de una cepa

apatgena de Escherichia coli (hexosamidas 2.5 mol/100 ml) y por clulas inactivadas de
Propionibacterium granulosum (0.95 X 10 12/ 100 ml).

Indicaciones: Estimulante de la inmunidad inespecfica.

Mecanismo de accin: Activa los mecanismos de defensa local en la glndula mamaria

por medio de la estimulacin de macrfagos, proliferacin de linfocitos B, sntesis local de

inmunoglobulinas A y G2, activacin de linfocitos T, incremento en la sntesis de enzimas,
generacin de radicales txicos de O2 por los fagocitos, estimulacin de la sntesis de
protenas de fase aguda y transferrina a nivel heptico y liberacin de citoquinas en la
glndula mamaria.
Torrence en 1985 cita al Propionibacterium spp y al LPS como inmunomoduladores o
inmunoestimulantes comnmente reconocidos. Hardie y cols en 1990, reportan algunos
efectos del LPS, entre los que se encuentran la interaccin con las clulas inflamatorias,
(principalmente macrfagos), plaquetas y endotelio vascular, tambin estimulan la
liberacin de citoquinas (principalmente FNT e IL-1) y mediadores lipdicos (tromboxano,
prostaciclina, leucotrienos y PAF), genera citotoxicidad directamente o por medio de
mediadores, induce la formacin de radicales de O2 y la liberacin de enzimas lisozomales.
El lipopolisacrido o endotoxina se encuentra en la pared externa de todas las bacterias
Gram negativas y esta compuesto por lpidos, polisacridos y porciones de protena. Entre
estos componentes, el ms consistente es la porcin lipdica (lpido A), responsable de las
propiedades txicas de la molcula. Los componentes polisacridos determinan la
antigenicidad del LPS, la porcin interna es constante entre los diferentes grupos de
bacterias, mientras que el antgeno O difiere entre cepas. La porcin proteica del LPS vara
segn la bacteria y el mtodo de obtencin de la endotoxina. Muchos aislamientos de
bacterias Gram negativas han demostrado reactividad cruzada con anticuerpos que
reconocen antgenos centrales homlogos, esta reactividad cruzada es an ms pronunciada

61

contra la endotoxina qumicamente purificada (Hardie y cols, 1990; Tyler y cols, 1993,
Kirk y cols, 1994).
Especies del gnero Propionibacterium, entre ellas el Propionibacterium acnes
anteriormente conocido como Corynebacterium parvum, han sido empleados ampliamente
en medicina humana como inmunopotenciadores, y especficamente como adyuvantes
(Rojas, 1988). En medicina veterinaria ha sido empleado en el tratamiento de pioderma
canino y en enfermedades respiratorias equinas (Becker y cols, 1989, citados por Dinsmore
y cols, 1995).

Precauciones: No se debe administrar conjuntamente con inmunosupresores.

Residuos: No produce residuos en carne o leche.

Reportes sobre el empleo de INMUNOCEL:

Sisquella y cols en 1997 evaluaron su efecto en aves infectadas experimentalmente con

el virus de la enfermedad de Marek encontrando un menor porcentaje de afeccin en las

aves vacunadas y tratadas con este producto, a diferencia de las aves que nicamente fueron
vacunadas.

Alvarez y cols en 1997, en estudios in vitro detectaron incrementos en la expresin de

CD25, CD14 (receptores de LPS), IL-1A, FNT e INT en clulas de defensa de porcinos
luego de su exposicin al producto.

Ortiz y cols, luego de administrar el producto a cerdas gestantes, evaluaron las

concentraciones de inmunoglobulinas en el calostro, encontrando diferencias alrededor del

50% entre el grupo tratado y el control, a favor de los animales tratados.
62

Romeo y cols en 1998 reportan menores niveles de infeccin intramamaria y menores

CCS en ovejas tratadas frente a las no tratadas (la diferencia en los CCS entre los grupos de
tratamiento fue significativa por la prueba de Duncan pero no para el anlisis de varianza).

Laboratorios Calier en 1998 evaluaron nueve explotaciones lecheras por CCS en leche

de tanque, tras el tratamiento de los animales con 15 ml de Inmunocel, a intervalo de 30

das y Decomoton (este ltimo induce contracciones en la musculatura de la ubre para
vaciarla de leche y desprender las clulas muertas del epitelio). El promedio de CCS
pretratamiento de las nueve fincas fue de 560555 clulas/ml mientras que para el da 60
postratamiento, el CCS en tanque haba disminuido a 301111 clulas/ml de leche.

HOMEOPATIA EN EL TRATAMIENTO DE MASTITIS

Principios homeopticos: La palabra homeopata deriva del griego homoios que

significa semejante y pathos que significa enfermedad. Fue creada y desarrollada entre
1790 y 1843 por Samuel Hanneman, cuyo mtodo teraputico se basa en cuatro principios
fundamentales (De Medio, 1993):
1. Ley de semejanza: El poder curativo de los medicamentos depende de su propiedad
patogentica, de hacer nacer sntomas semejantes a los de la enfermedad a tratar, pero
superior en fuerza a esta.
2. Uso de medicamentos atenuados y dinamizados: Se refiere al empleo de medicamentos
en dosis infinitesimales obtenidas a partir de diluciones sucesivas en agua o alcohol, con
posterior dinamizacin consistente en agitar de una forma especial las soluciones despus
de cada dilucin.
63

3. Experimentacin de las drogas en el hombre sano: Investigar por la experimentacin

en el hombre sano los efectos propios y caractersticos de los medicamentos y las
modificaciones que ellos determinan, para deducir de esto, cuales son las enfermedades o
estados mrbidos que cada medicamento es capaz de curar.
4. Medicamento nico: En el curso de todo tratamiento dirigido a la curacin, en ningn
caso es necesario -y por eso mismo es inadmisible- utilizar en un enfermo ms de una
sustancia medicinal simple a la vez.

La homeopata en Medicina Veterinaria: La medicina veterinaria homeoptica naci con

el mismo Hanneman cuando cur a su propio caballo. Ernest Ruckert, discpulo directo de
Hanneman, fue tal vez el primero en aplicar medicamentos homeopticos como Aconitum,
Bryonia y Dulcamara en animales domsticos. En 1829, Brusner public un tratado Sobre
el Sistema Homeoptico para la curacin de los equinos. En 1833, Lux, un veterinario
report los xitos obtenidos con dos nosodes. Ruffier y Martelet publicaron en Brasil en
1873 un Diccionario de Medicina Homeoptica Veterinaria. En 1910, Alvarez Toledo
public un libro que inclua un captulo de Veterinaria Homeoptica para curar caballos,
toros, vacas carneros, cerdos, perros y aves de corral, en 1940 Nilo Cairo cre La Gua
Prctica de Veterinaria Homeoptica

En 1976, Gengoux public el Manual de

Homeopathie Veterinaire. En 1983, Lizon edit La Homeopata para el perro, el gato y el

caballo y Quiquandon public Homeopathie Veterinaire-Biotherapie. En 1985, fueron
publicados Omeopatia Veterinaria por Del Franco, The treatment of cattle by
homeopathy y The treatment of horses by homeopathy por Mac Leod y The treatment
of cats y The treatment of dogs by homeopathy por Sheppar (De Medio, 1993).
En Bogot, dieron comienzo en 1992 los cursos de homeopata destinados a veterinarios, en
el Instituto Luis G. Pez, entidad rectora de la homeopata colombiana (De Medio, 1993).

64

Empleo de medicamentos homeopticos en el tratamiento de mastitis en bovinos:

Hamman en 1992, Duval en 1997 y Morcillo en 1998 resumen en tres las aproximaciones
de la homeopata en el manejo de la mastitis bovina:
1. Prevencin por medio del empleo de nosodes (fragmentos de clulas patognicas que
aumentan la respuesta inmune) preparados deacuerdo a las especies bacterianas causantes
del problema en el hato.
2. Empleo de complejos o mezclas de medicamentos: Mac Leod en 1981, recomienda
combinaciones de Belladona, Bryonia y Urtica; Urens, Phylotaca y Sulphur, o Silicea y
Carbo vegetabilis.
3. Empleo de tratamientos especficos seleccionados de acuerdo a los sntomas: Mac
Leod, Quiquandon y Mettler en 1980, Wolter en 1981, Hamalcik en 1988, Merck,
Sonnenwald y Rollwage en 1989, Spath en 1990 y Dorenkamp en 1991, reportan el empleo
de los siguientes medicamentos en forma individual: Belladona, Aconitum, Apis mellifica,
Bryonia alba, Arnica montana, Belia perennis, Phylotaca, Urtica urens, Sulphur, Silica,
Carbo vegetabilis, Hepar sulfuris, Silicea, Ipeca, Lachesis, Carbolicum acidum, Vipera redi,
Conium maculatum, Plumbum iodanum, Mercurius solubilis, Aconitum, Asa foetida,
Calendula,

Chelidonium,

Collibacillinum,

Echinacea,

Hipericum,

Nux

vomica,

Phellandrium, pyrogenium, Veratrum, Silicea.

Las preparaciones homeopticas para mastitis son usadas frecuentemente en muchas
granjas de leche irlandesas para el tratamiento y la prevencin de mastitis y para reducir el
recuento de clulas somticas (Sller, 1998 y Cooper, 1996). Sin embargo, los promotores
de estas preparaciones proveen pocos datos objetivos que sustenten las afirmaciones hechas
sobre su eficacia (Egan, 1995).
Reportes sobre el empleo de medicamentos homeopticos en el tratamiento de mastitis:

65

Algunos de los reportes presentados a continuacin no cuentan con el rigor cientfico

requerido para dar una conclusin definitiva sobre la eficacia de los productos
homeopticos en el tratamiento de mastitis:

Otto en 1982 evalu algunos casos de mastitis clnica aguda por recuento

semicuantitativo de bacterias en tres grupos de tratamiento. El primero de 131 animales

tratados con Phylotacca, Aconitum y Echinacea miniplex, el segundo grupo de 129
animales tratados con Phylotaca y Echinaea miniplex, el tercer grupo de 40 animales
tratados con Phylotacca, Echinacea miniplex y Apis. Se reporta un 87% de curacin. No se
realiz ningn tratamiento estadstico de los datos (Morcillo, 1998).

Sonnenwald y cols en 1986 estudiaron 100 casos de mastitis clnica aguda en dos

grupos, el primero con un tratamiento homeoptico inicial a base de Aconitum y Phylotacca

o Aconitum, Phylotacca y Bryonia y un tratamiento adicional a base de Bryonia,
Phylotacca, Lachesis y/o Mercurius; el segundo grupo fue tratado con antibiticos. Los
resultados, evaluados por los signos clnicos, CCS y cultivo, fueron de recuperacin del
34% para el primer grupo contra un 26% para el segundo grupo, con una especial eficacia
de los medicamentos homeopticos ante Gram negativos y de los antibiticos ante cocos
Gram positivos (Hamann, 1992; Morcillo, 1998).

Velke en 1988 reportan mejora de 16 casos de mastitis subclnica por recuento

semicuantitativo de bacterias Gram negativas, luego del tratamiento con Traumeel. No se

realiz ningn tratamiento estadstico de los datos (Morcillo, 1998).

Tiefenthaler en 1991 evalu 41 casos de mastitis aguda por CMT y bacteriologa

manejando tres grupos de tratamiento, el primero con medicamentos homeopticos, el

segundo con antibiticos, y el tercero con una combinacin de los dos anteriores, no se
aclara el tipo de medicamento homeoptico empleado. Los grupos no se diferencian entre
si, por lo tanto los resultados no son claros (Morcillo, 1998).

66

Dorenkamp en 1992 evalu 218 casos de mastitis clnica aguda por medio de la

determinacin del CCS con papel indicador de pH luego del tratamiento de los animales
con Belladona-Homaccord y Lachesis compositum; despus de tres das, la tasa de curacin
fue del 100%, con recidiva del 2.28% a las ocho semanas (Hamann, 1992).

Dorenkamp en 1992 evalu 580 casos de mastitis subclnica por signos y CCS con

papel indicador de pH luego del tratamiento con Traumeel, Lachesis compositum y

Phylotacca, despus de cuatro das, la tasa de curacin fue del 97.9% con una recidiva del
4.83% de los casos a las ocho semanas (Hamann, 1992).

Day en 1992 evalu la eficiencia profilctica de un nosode en dos grupos de 41 vacas

cada uno, siendo uno de ellos el grupo control, los resultados arrojaron la ocurrencia de un
caso de mastitis en el grupo tratado contra 19 casos en el grupo control (Hamann, 1992).

Briones y Hebel evaluaron por CMT un grupo de 26 vacas divididas en dos grupos de

tratamiento, uno de ellos control y el otro tratado con Bryonia, Lachesis, Mercurius
solubilis y Phylotacca. Una semana despus del tratamiento, se produjo un aumento del
porcentaje de cuartos sanos, significativamente mayor en las vacas tratadas (83.33%) con
relacin a los controles, esta diferencia disminuy hasta llegar a valores similares al final
del estudio (De Medio, 1993).

May y Reinhart en 1993 evaluaron un hato de 280 animales con CCS en tanque de un

milln de clulas/ml de leche. Luego del tratamiento con Engystol, Belladona-Homaccord,

Echinacea compositum y diversos nosodes, el CCS en leche de tanque descendi a 400000
clulas/ml. Paralelamente se mejoraron el manejo y la tcnica e higiene de ordeo. No se
realiz tratamiento estadstico de los datos (Morcillo, 1998).

Meaney en 1993 evalu el tratamiento de mastitis con un nosode (Staphylococcus

albus, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus agalactiae,

Streptococcus dysgalactiae, Streptococcus uberis, Actynomices pyogenes, Escherichia coli
y Mycobacterium bovis) concluyendo que no se observa respuesta en la reduccin de los
67

niveles de clulas somticas o en la eliminacin de las infecciones subclnicas o clnicas

(Meaney, 1993).

Meaney en 1995 evalu diferentes tipos de mastitis por conteo celular (Fossomatic y

CMT) y bacteriologa en dos experimentos, en cada uno distribuy a los animales en dos
grupos tratando a un grupo de cada experimento con un nosode. Al interpretar los
resultados, los grupos no se diferencian entre si, tampoco se especific el medicamento
empleado y no se dio un tratamiento estadstico a los datos (Meaney, 1995; Morcillo,
1998).

Egan en 1995 realiz un estudio en mastitis subclnica que inclua la administracin por

va oral

de una preparacin a base de Phylotacca, Thuya, Ratanhia, Sulphur, Sticta,

Thymus, Zinziber, Huang Qi y Xia Ku Cao y el masaje de las ubres con una crema a base
de Rumex crispus, Hydrastis canadensis, Calendula officinalis, Galega officinalis y
Sanguinaria canadensis concluyendo que no hay ningn beneficio en la terapia tanto en la
eliminacin de bacterias como en la reduccin del conteo celular, aunque no fue dado un
anlisis estadstico a los datos (Hamann, 1992; Egan, 1995; Morcillo, 1998).

Andersson y cols en 1997 evaluaron 84 casos de mastitis subclnica distribuidos en seis

grupos de tratamiento (Echinacea, Mercurius corr., Phylotacca, Phellandrium, Silicea o

Lachesis), junto con un grupo control de 20 cuartos. Luego de la determinacin de CCS,
actividad de la LDH y bacteriologa, se encontr que nicamente los grupos tratados con
Lachesis y Silicea presentaron un efecto teraputico significativo y nicamente ante
Staphylococcus aureus (Andersson y cols, 1997; Morcillo, 1998).

Morcillo en 1998 evalu casos de mastitis subclnica en 295 vacas lecheras por medio

de CCS y actividad de la LDH luego de la administracin subcutnea o intramamaria de

Lachesis compositum y su combinacin con Traumeel, concluyendo que ninguno de los
tratamientos empleados mejora el estado sanitario de las ubres ni elimina los agentes
involucrados en la infeccin, aunque observa un posible efecto estabilizador de Lachesis
compositum y Traumeel (Morcillo, 1998).
68

DellOrto y cols en 1998, luego de incluir en la alimentacin de 42 vacas de leche una

mezcla homeoptica con base en Nux vmica, Pulsatilla nigricans, Natrum muriticum y
Sulfur (Natrumbior) y de un tratamiento adicional con Sulphur, Calcarea carbnica y
Lycopodium clavatum (Eubior), encontraron que la produccin de leche fue casi un 45%
mayor y las clulas somticas fueron significativamente ms bajas que en el grupo no
tratado.
Como lo mencionan Hamann en 1992 y Blowey y Edmonson en 1995, an hoy, la
informacin cientfica sobre la efectividad de los medicamentos homeopticos en el control
de mastitis bovina es limitada para justificar una conclusin definitiva, y en muchos casos
no ceida al rigor cientfico, principalmente se encuentran observaciones de campo,
evaluaciones ms o menos subjetivas que describen tratamientos exitosos en casos de
mastitis clnica y subclnica, por esta razn es obvia la necesidad de estudios detallados
antes de poder dar un punto de vista definitivo sobre la eficiencia del tratamiento
homeoptico para mastitis.

MASTIPIS-H2
Sarmiento y cols en 1995; el Instituto de Medicina Veterinaria Experimental Hlinkova, en
1996 y el Laboratorio Socolour de Blgica reportan la siguiente informacin con respecto
al producto Mastipis-H:

Definicin: El Mastipis-H es un gel lquido de naturaleza homeoptica, soluble en

leche y agua.

Mastipis-H. Socolaur Colombia.

69

Composicin e indicaciones:

Tabla 9. Mastipis-H, composicin e indicaciones.

Sustancia
Hepar sulphur
Silicea
Causticum DHahneman
Sepia officinalis
Thuya occidentalis
Calcrea phosphorica
Pulsatilla
Iodium

Dilucin
10-6
10-6
10-6
10-6
10-6
10-6
10-6
10-6

Indicacin
Supuraciones agudas
Accin sobre tejido glandular
Erupciones vesculo purulentas
Accin sobre tejidos elsticos
Inflamacin e hipertrofia glandular
Astenia por prdida de lquidos orgnicos
Engrosamiento de capilares venosos
Inflamacin crnica de mucosas
70

Phosphorus
Cantharis
Baptisia tinctoria
Echinacea angustifolia
Nitricum acidum
Phellendrium aquaticum
Arica montana
Bryonia dioica
Excipientes

10-1
10-1
10-1
10-1
10-1
10-1
10-1
10-1
1000 ml

Congestin e inflamacin local

Irritacin e inflamacin
Inflamacin aguda
Infeccin generalizada
Irritacin de piel y mucosas
Inflamacin de canales galactforos
Inflamacin muscular
Inflamacin de la ubre
-

El Mastipis-H se indica en el tratamiento de mastitis clnica y subclnica y en la

prevencin de mastitis al secado, en bovinos afectados por microorganismos Gram
positivos y Gram negativos, principalmente Streptococcus spp, Staphylococcus spp,
Escherichia coli y Proteus spp. Tambin ha sido eficiente en infecciones persistentes.

Contraindicaciones: Ninguna conocida.

Efectos secundarios y tolerancia: El producto es bien tolerado por la glndula mamaria

sin inducir reacciones locales o generales significativas. Cuartos sanos en lactancia y al

secado han tolerado bien el producto sin ninguna reaccin local. En un ensayo realizado
con cinco vacas libres de mastitis, se observ un incremento en la temperatura de la ubre y
de la leche y se encontr una inflamacin leve en los cuatro cuartos tres horas despus de la
aplicacin del producto, estos sntomas desaparecieron despus de 4 a 6 horas. En el
siguiente ordeo, la prueba NK fue negativa en tres vacas y sospechosa en dos, y doce
horas despus, la prueba era negativa en los cinco animales.
En cuartos con mastitis, se ha observado que de dos a tres horas despus de la aplicacin
del producto la temperatura de ubre y de la leche se incrementan presentando una
inflamacin leve, estos sntomas desaparecen despus de 4 a 7 horas, persistiendo hasta el
siguiente ordeo en los casos ms severos. En pocos casos se ha detectado la aparicin de
grumos en la leche que desaparecen en el curso de 20 horas.

71

No se ha encontrado incompatibilidad con otros productos empleados en el tratamiento de

mastitis.

Mecanismo de accin: Los minerales y los componentes orgnicos estimulan los

mecanismos de defensa del cuarto tratado. La curacin se valora por la desaparicin de los
signos clnicos, incluyendo la normalizacin de la secrecin lctea, y la curacin
bacteriolgica.

Periodo de retiro: No se han detectado residuos en muestras de leche (o carne), tomadas

durante el segundo ordeo despus de la ltima aplicacin de Mastipis-H, tras su anlisis

por la prueba de yogourth; la leche preserva sus propiedades organolpticas normales.

Sensibilidad bacteriana: Sarmiento y cols en 1995 reportan un halo de inhibicin de

crecimiento estrecho pero muy similar para Streptococcus agalactiae, Staphylococcus

aureus, Escherichia coli y Klebsiella oxytoca (12, 13, 11 y 8 mm respectivamente).

Se encontr falla en la efectividad o recuperacin parcial en animales con infecciones

crnicas (tuberculosis, leucosis bovina, parasitismo...), as como en formas recurrentes de

mastitis por las alteraciones estructurales en el parnquima de la glndula mamaria. Sin
embargo, todos los cuartos tratados mostraron algn tipo de reaccin a la aplicacin de
Mastipis-H.

Ensayos clnicos para la evaluacin del MASTIPIS-H:

MASTITIS CLINICA

El Instituto de Medicina Veterinaria Experimental Hlinkova en 1996 realiz un estudio

donde se trataron 64 cuartos con mastitis subaguda y 33 con mastitis aguda administrando
una jeringa (30 ml) del producto por cuarto, luego de cada ordeo durante 2 a 3 das; al
final del estudio (7 a 10 das postratamiento), se obtuvo una efectividad por cuartos del
72

81.3% y 72.7% en mastitis subaguda y aguda respectivamente (evaluacin por examen

clnico de la ubre y la leche, prueba NK, examen bacteriolgico y CCS en leche).

El Laboratorio Socolour de Blgica en 1998 encabez el tratamiento de 90 cuartos de

72 vacas con una dosis promedio de 2.1 jeringas por cuarto (1 a 6 jeringas, cada una de
30ml), despus de cada ordeo. En el muestreo pretratamiento se identificaron 68
infecciones simples, tres mixtas con dos especies bacterianas y una mixta con tres especies
bacterianas. En el muestreo postratamiento, 62 infecciones simples (91%) y tres infecciones
mixtas (75%) fueron eliminadas, con una tasa de curacin por patgenos del 82.8% para
Staphylococcus spp, 90.7% para Streptococcus spp y 80% para otros patgenos y una
recuperacin del 91.11% para el total de cuartos.
MASTITIS SUBCLINICA

El Instituto de Medicina Veterinaria Experimental Hlinkova en 1996 evalu 17 casos de

mastitis subclnica, luego de su tratamiento con cuatro jeringas del producto administradas
durante cuatro ordeos consecutivos. De los 17 cuartos, 10 presentaban mastitis por
Streptococcus uberis y los siete restantes por Streptococcus hemolticos; al final del
estudio (10 y 21 das postratamiento), se comprob por bacteriologa la eliminacin de la
totalidad de las infecciones.

El Laboratorio Socolour de Blgica en 1998 dirigi un experimento en el cual se

trataron 30 cuartos de 24 vacas con una jeringa del producto por cuarto; a los 7 10, 21 y
28 das postratamiento se obtuvo una curacin del 93.3% de los cuartos por conductividad
elctrica y del 96.7% de los cuartos por bacterologa.

TRATAMIENTO DE LAS VACAS AL SECADO

El Laboratorio Socolour de Blgica en 1998 administr a 28 vacas una dosis de media

jeringa de 30 ml por cuarto. En el muestreo preparto, 18 de las 28 vacas se encontraban

73

libres de infeccin intramamaria y las restantes 10 vacas presentaban 16 cuartos infectados.

En el posparto, 110 de 112 cuartos permanecieron sanos, la proteccin se calcul en un
98.2%, de los 16 cuartos infectados pretratamiento, 15 se declararon curados tanto clnica
como bacteriolgicamente (93.8%).

OTROS ESTUDIOS

Sarmiento y cols en 1995 seleccionaron un hato de bovinos en produccin en la Sabana

de Bogot con un nivel de infeccin de la glndula mamaria del 94.72%, se conformaron

12 grupos de tratamiento en los cuales se consideraron cuartos con mastitis, cuartos sin
mastitis y cuartos tomados como controles, para la comparacin de dos productos
alopticos (eritromicina y penicilina-noboviocina) con un producto homeoptico (MastipisH). Mediante observaciones practicadas los das 4, -1, 0, 4, 7, 14, 21 y 28 se recopilaron
datos de produccin y muestras para CMT, CCS y cultivo. Al final del estudio se concluy
que tanto los productos alopticos como el homeoptico se comportaron de forma similar
en el control de mastitis (Sarmiento y cols, 1995; Rodrguez y cols, 1996).

El Laboratorio Socolour en 1998 seleccion 28 vacas de un hato de 100 animales con

historia de mastitis, estos animales fueron tratados con el producto durante dos das
consecutivos; tres semanas despus de finalizado el tratamiento se midi el CCS
obteniendo descensos del 13.45 al 99.55% en 24 de 28 vacas, los cuatro animales restantes
presentaron incrementos en sus CCS. El promedio del CCS al inicio del estudio fue de
1612785.71 clulas/ml de leche y descendi a 400107.14 clulas/ml de leche al final del
tratamiento.

1.10.1.2. Descarte y recuperacin espontnea: Otra forma de reducir el nivel mastitis

presente en el hato, es el descarte de las vacas que presentan infecciones crnicas y/o
refractarias al tratamiento. Smith en 1996, Bascom y Young en 1998 reportan descartes de
un 7 a 15% de las vacas de leche afectadas. Vestweber en 1994, recomienda esta estrategia
74

como el mtodo ms efectivo de disminuir la prevalencia de Staphylococcus aureus en el

hato.
La recuperacin espontnea ocurre a niveles variables dependiendo del sistema de manejo,
los mecanismos de defensa del animal y el microorganismo involucrado en la mastitis,
convirtindose en una forma importante de reduccin de las infecciones originadas por
coliformes y otros patgenos medioambientales, pero de menor validez en las mastitis de
tipo contagioso (Erskine y cols, 1992; Erskine, 1993).

1.10.2. Prevencin de la ocurrencia de nuevas infecciones: Debido a que la tasa de

nuevas infecciones intramamarias est altamente relacionada a la carga de patgenos
presente en el medio, se deben poner en prctica dos estrategias: disminuir sus reservorios y
aumentar la resistencia del sistema inmune de la glndula mamaria:

1.10.2.1. Reduccin de la carga de patgenos intramamarios:

Microrganismos medioambientales: La carga de microorganismos medioambientales

puede ser reducida si se asegura un ambiente limpio y seco para los animales entre y
durante ordeos (Bushnell, 1984; Pankey y Drechler, 1993; Kirk y cols 1994; Hurley y
Morin, 1999). Cullor en 1993 reporta un incremento en el nmero de casos clnicos
originados por coliformes cuando hay un nivel igual o mayor a 1 X 10 6 bacterias/gr en la
cama; en general materiales inertes como la arena no favorecen la proliferacin bacteriana a
diferencia de la viruta y otros compuestos orgnicos. Guterbock en 1984, reporta un
aumento de la probabilidad de infeccin por microorganismos como coliformes,
Pseudomonas spp, Serratia marcescens, levaduras Streptococcus CAMP negativos y otros
microorganismos que crecen en pelculas de leche formadas en el equipo de ordeo cuando
no se realiza un estricto lavado de este.
Bushnell en 1984 reporta la eliminacin de coliformes de origen fecal, de suelos y aguas,
Streptococcus spp, Bacillus spp, levaduras, hongos y Staphylococcus epidermidis luego de
75

procedimientos adecuados de higiene en los pezones. En algunas granjas se ha

implementado la suplementacin alimenticia durante 30 minutos despus del ordeo para
evitar que los animales se acuesten y contaminen sus pezones, lo cual aumentara la
probabilidad de infeccin de la glndula mamaria (Cullor, 1993).

Microorganismos contagiosos. Debido a la naturaleza de los microorganismos

contagiosos, el control de su diseminacin esta enfocado en la glndula mamaria y sus

secreciones, por lo tanto todo factor que disminuya la prevalencia de infeccin
intramamaria por estos patgenos, reducir tambin el riesgo de infeccin de otros
animales. Se deben cumplir varios pasos para reducir los focos de diseminacin de
microorganismos contagiosos:
1. Eliminacin de las infecciones intramamarias presentes: Esto se logra por el tratamiento
de los casos de mastitis durante la lactancia y para mayor efectividad durante el periodo de
vaca seca, y por el descarte de los animales que no responden a la terapia. Estos puntos
fueron revisados anteriormente.
2. Manejo de hatos cerrados o compra de animales libres de mastitis (Kirk y cols, 1994).
3. Desinfeccin de los pezones al finalizar el ordeo: Su importancia es evidente al
analizar el hallazgo de Roberson y cols en 1994, segn el cual hay un riesgo de
presentacin de mastitis 3.34 veces mayor en cuartos cuyos pezones han sido colonizados
por Staphylococcus aureus a diferencia de los pezones no colonizados.
Entre los productos de efectividad demostrada en la desinfeccin de pezones antes y
despus del ordeo se encuentran: clorhexidina al 0.5%, yodados entre el 0.5 y 1%,
hipoclorito al 4%, cido cloroso/dixido de Cl, cido dodecil bencil sulfonado al 1.94% y
ambicina (Crist y cols, 1997). La clorhexidina al 0.5% redujo en un 73.2% las infecciones
intramamarias por Staphylococcus aureus y en un 53.9% por Streptococcus agalactiae. El
yodo al 1% redujo en un 75.6% las nuevas infecciones por Staphylococcus aureus y en un
53.5% por Streptococcus agalactiae; los dos productos redujeron la incidencia de mastitis
76

clnica (Boddie y cols, 1997). Poutrel y cols en 1990 encontraron una reduccin en la tasa
de nuevas infecciones intramamarias del 18.8% y una reduccin en los casos de mastitis
clnica del 33.3% al emplear cido cloroso-dixido de Cl como sellador. Erkine en 1992
reporta una disminucin del 50% en la tasa de nuevas infecciones y una disminucin del
14% en la prevalencia de mastitis al realizar el sellado de los pezones postordeo.
La desinfeccin de los pezones al final del ordeo disminuye los casos de mastitis
ocasionados principalmente por microorganismos contagiosos, pero se ha reportado una
disminucin en la incidencia de casos de mastitis por microorganismos medioambientales,
principalmente por coliformes, cuando se emplean el cido dodecil bencil sulfonado y
algunos selladores de barrera (Pankey, 1984).
El empleo de productos sin emolientes puede irritar la piel de los pezones, aumentando la
carga bacteriana por la contaminacin de las lesiones e incrementando por tanto el riesgo de
infeccin intramamaria, adicionalmente se sabe que la concentracin de estos emolientes no
deben ser mayor al 10 o 12% para no disminuir la efectividad bactericida del producto
(Pankey, 1984). Pankey en 1984 y Kirk y cols en 1994 recomiendan la aplicacin del
sellador en toda la longitud el pezn inmediatamente se retire la unidad de ordeo.
Kingwill y cols en 1970, citados por Erskine en 1992 reportan una disminucin en la
prevalencia de Streptococcus spp y Staphylococcus aureus del 29.3 a 14.2% en un ao y a
9.7% en dos aos de empleo del sellador, mientras que otros autores encontraron
disminuciones en la prevalencia de infeccin por cuartos del 28.1 al 7.1% luego de 3 aos
de uso de sellador.
4. Algunos autores reportan beneficios cuando se crea un orden para el ordeo de los
animales, comenzando por novillas y vacas sanas,

novillas y vacas recin paridas y

finalizando por las novillas y vacas enfermas, tambin se reportan beneficios por la
segregacin de los animales infectados en grupos de ordeo diferentes (Kirk y cols, 1994).

77

5. Lavado de unidades de ordeo entre vacas: El lavado manual o mecnico de las

pezoneras entre vacas disminuy el nmero de bacterias en un 98% y redujo 6.1 veces la
tasa de nuevas infecciones por Staphylococcus coagulasa negativos en un estudio en
Kentucky, no se obtuvieron los mismos resultados en Pensilvania (Erskine, 1992; Kirk y
cols en 1994). Phelps en 1993 no reporta beneficios por la desinfeccin de pezoneras entre
vacas.
6. Control de la diseminacin de microorganismos patgenos a travs de las manos de los
ordeadores, implementos de limpieza, equipo de ordeo y moscas (Nickerson y cols,
1987; Hurley y Morin, 1999).
7. El cumplimiento rutinario de los procedimientos de ordeo apropiados puede reducir el
riesgo de diseminacin de microorganismos patgenos a la ubre y favorecer la eliminacin
de las infecciones existentes Philpot en 1979, Fetrow y Anderson en 1987; The National
Mastitis Council en 1990 y 1993, Phelps en 1993, Kirk y cols en 1994; Gilson en 1995 y
Crist y cols en 1997 recomiendan:

Ofrecer a los animales un ambiente limpio y libre de estrs.

Antes de cada ordeo observar la ubre en busca de inflamacin o heridas y despuntar

los primeros chorros de leche en un fondo negro (no en las manos del ordeador), buscando
taches, grumos y consistencia de la secrecin. Phelps en 1993 reporta que el no revisar los
primeros chorros de leche de las vacas antes del ordeo implica pasar por alto un 50% de

los casos clnicos leves.

Lavado/presellado de los pezones: Hoy se coincide en la necesidad de lavar los pezones
(no toda la ubre) con una mezcla agua/desinfectante; Burmeister y cols en 1998 reportan
una mayor efectividad germicida del presellado, para lo cual se debe aplicar el producto en
pezones sin suciedad visible, permitiendo 30 segundos de contacto con la piel de los
pezones para que acte. The National Mastitis Council en 1993, Cullor en 1993 y Crist y
cols, 1997 reportan una disminucin del 50% de mastitis de origen medioambiental durante
78

la lactancia cuando se realiza el presellado. Galton y cols en 1984 y Pankey y cols en 1987,
citados por Blowey y Collins en 1992 reportan una disminucin del 50% en la incidencia
de mastitis por patgenos mayores al realizar presellado con un yodado de baja
concentracin. Blowey y Collins reportan como resultado de su estudio una disminucin
del 57% en la incidencia de mastitis clnica, del 70% en el conteo total de bacterias y del
32% sobre el recuento de termodricos (el nico valor estadsticamente significativo fue el
recuento de bacterias).

Secar completamente los pezones con toallas de papel individuales para cada vaca: Se
debe asegurar siempre el ordeo de pezones limpios y secos (Pankey y Drechsler, 1993).

Colocar las pezoneras un minuto despus de iniciado el estmulo de ordeo,

ajustndolas de forma que el alineamiento sea correcto y evitando al mximo las
admisiones de aire.

Evitar el sobreordeo.

Cortar el vaco antes de remover las pezoneras.

Aplicar el producto de sellado a los pezones asegurando un mximo cubrimiento

inmediatamente despus de retirar las pezoneras.

1.10.2.2. Optimizacin de los mecanismos de defensa del hospedador

Nutricin: Aunque el estudio de los efectos especficos de cada nutriente es complicado

por la multiplicidad de sus funciones y la compleja interaccin que ocurre entre ellos, los
investigadores han logrado definir de forma muy completa el papel de muchos
micronutrientes en el proceso de infeccin e inmunidad; entre los que se revisten de
importancia a nivel de glndula mamaria se encuentran algunas vitaminas (E, A y
79

caroteno) y minerales (Cu, Zn y Cr) (Erskine, 1991 y 1993; The National Mastitis
Council, 1994; Sordillo y cols, 1997).

Inmunoprofilaxis: El empleo de las vacunas se basa en el hecho de que la infeccin

induce inmunidad de tipo humoral o celular que sirve para curar la enfermedad, pero que
por otra parte, deja clulas de memoria que reaccionan rpida y activamente ante un nuevo
ataque del mismo microorganismo (Rojas, 1988; Geib, 1997).
De las vacunas contra mastitis se espera que eliminen las infecciones crnicas, que
prevengan el establecimiento de nuevas infecciones y que reduzcan la severidad de los
casos clnicos, hasta el momento, las vacunas disponibles solo reducen de forma consistente
la incidencia de mastitis clnica (Sears, 1984; Sordillo y cols, 1997).
Williams y cols en 1966 y 1975 encontraron una disminucin en la prevalencia de
aislamientos positivos en los animales vacunados con una bacterina de Staphylococcus
aureus a comparacin de los controles (7.7% y 45.6% respectivamente) (Tyler y cols,
1993).
Packer en 1977 reporta beneficios limitados en ensayos de inmunizacin con bacterinas y
toxoides contra Actynomices pygenes.
Sears y cols en 1990 encontraron que novillas inmunizadas contra Staphylococcus aureus
fueron 2.8 veces menos propensas a desarrollar infeccin intramamaria con respecto a los
controles (Fox y Gay, 1993).
Cullor en 1991, Gonzlez y cols en 1989 y Hogan y cols en 1992 reportan disminucin en
la incidencia y la severidad de los signos de mastitis clnica, existiendo un beneficio
econmico para la aplicacin de la vacuna de Escherichia coli cuando ms del 1% de las
mastitis del hato corresponden a casos de coliformes (Tyler y cols, 1993; Kirk y cols,1994).
Giraudo y cols en 1997 observaron que la frecuencia de infecciones intramamarias por
Staphylococcus aureus disminuy a 6.7% en novillas durante el preparto y a 6% en novillas
80

durante el postparto contra 18.8% en las novillas control, al emplear una vacuna compuesta
por clulas de Staphylococcus aureus inactivado y encapsulado, extracto crudo de
exopolisacridos, Staphylococus aureus inactivado no encapsulado y Streptococcus spp.
Calzolari y cols en 1997 reportan disminucin de la incidencia de infecciones
intramamarias por Staphylococcus aureus, del recuento de colonias bacterianas en leche y
de los recuentos de clulas somticas en los animales vacunados con diferencias
significativas frente a los no vacunados (fue empleada la vacuna del reporte anterior).
La inmunizacin no ha dado resultados satisfactorios por diferentes causas, entre las que se
destacan la gran diversidad de antgenos, el conocimiento incompleto de los factores de
virulencia de los microorganismos, la va y el momento de administracin ms indicados de
la vacuna y la baja inmunogenicidad de patgenos como el Streptococcus agalactiae
(Norcross, 1977; Pankey, 1977; Sears, 1984; Faull y Hughes, 1987; Miller y cols, 1988;
Consejo Nacional de Mastitis, 1990; Daz y Santiago, 1992; Fox y Gay, 1993).
Adicionalmente, Vestweber y Leipold en 1993 citan otras limitantes para la inmunizacin
en la glndula mamaria: relativa escasez de fagocitos, linfocitos, complemento e
inmunoglobulinas en la leche, inhibicin de los mecanismos de defensa por la grasa y la
casena, gran extensin del epitelio mamario para lo cual se requiere una respuesta inmune
muy extensa y finalmente aclaran que la leche es un excelente medio de crecimiento para
los microorganismos.
El Consejo Nacional de Mastitis de Estados Unidos en 1990, Fetrow y Anderson en 1987,
Cullor en 1993, Gilson en 1995 y Crist y cols en 1997 han establecido que niveles menores
del 1% para mastitis clnica, 10% para mastitis subclnica, 3% para descartes y 1% para
muerte por mastitis, junto con CCS en tanque inferiores o iguales a 200000 clulas son
aceptables. En lo que respecta a la prevalencia de Streptococcus agalactie, se considera que
por la susceptibilidad a los antibiticos, la alta tasa de curaciones despus del tratamiento
durante la lactancia y el periodo seco y el hecho de tener como nica fuente de
diseminacin la ubre y la leche de las vacas infectadas puede ser erradicado de los hatos;

81

para el caso de Staphylococcus aureus la prevalencia podra reducirse a menos del 5% o

incluso ser erradicado.

82

2. METODOLOGIA DE LA INVESTIGACION.

2.1. MATERIALES Y METODOS

2.1.1. Diseo del estudio: Se realiz un estudio clnico con asignacin al azar, para la
evaluacin de dos medicamentos con respecto a la recuperacin espontnea en la terapia de
mastitis subclnica, tomndose como unidad experimental el cuarto mamario.

2.1.2. Tamao de la muestra: Para calcular el tamao de la muestra se emplearon las

metodologas de Martn y cols, 1987 y Schukken y Deluyker, 1995. Fue utilizada una tasa de
curacin espontnea de mastitis subclnica durante la lactancia del 32.2% (Dinsmore y cols,
1995) y el promedio de las tasas de curacin de animales tratados con Mastipis-H (93.3%,
Laboratorio Socolour), y Propionibacterium acnes (36.7 %, Dinsmore y cols, 1995) al no
contar con reportes para el Inmunocel; el promedio de estas tasas de curacin es igual a
65%. Las metodologas indican, que en un experimento para evaluar si el medicamento a
probar es similar o mejor que el utilizado en el grupo control (en este caso hara referencia a
la recuperacin espontnea), la siguiente frmula debe ser utilizada para estimar el tamao de
la muestra:

83

__
n= [Z (2 PQ) - Z(Pn Qn + Pe Qe) ]2
(Pn Pe)
donde:

n = Tamao de la muestra por grupo de tratamiento

P = Proporcin de curacin, Q= 1- P
Pn = Proporcin de curacin del tratamiento a probar Qn = 1- Pn
Pe = Proporcin de curacin espontnea Qe= 1- Pe
Pn = 0.65

Qn = 0,35

Pe = 0.322

Qe = 0.678

P = (Pn +Pe)/2 = 0.486

Q = 1- P= 0.514

Z = 1.96 para un o error tipo I de 0.05 en una curva de 2 extremos

Z = - 0.84 para un o error tipo II de 0.2 en el extremo menor de una
curva normal
El tamao estimado de la muestra para cada uno de los grupos de tratamiento fue de 35
cuartos. Se formaron tres grupos experimentales as: grupo Control (curacin espontnea),
grupo tratado con Mastipis-H y grupo tratado con Inmunocel.

2.1.3. Poblacin del estudio: En el estudio se incluyeron 105 cuartos de 81 vacas, dos de
ellas de la raza Pardo Suizo, una de la raza Jersey y las 78 restantes de la raza Holstein,
pertenecientes a 12 lecheras comerciales de la Sabana de Bogot. Estos animales entraron al
estudio en un perodo comprendido entre el 3 de mayo de 1999 y el 21 de mayo del 2000.

2.1.4. Criterios de inclusin: Se tuvieron en cuenta los siguientes criterios de inclusin de

los cuartos para el estudio:
1. CMT positivo (calificaciones 1, 2 y 3).

84

2. Mastitis subclnica (ausencia de signos clnicos tanto agudos como crnicos en la

glndula mamaria y / o leche) con conteo de clulas somticas (CCS) por el mtodo Coulter
Counter igual o mayor a un milln por ml de leche.
3. Lactancia menor o igual a 180 das.
Durante el examen inicial (da 2), en cada finca se realiz la prueba de CMT a todas las
vacas del hato y se tomaron muestras de leche para cultivo y CCS de aquellos animales
positivos a mastitis por CMT, siguiendo el procedimiento descrito por el Consejo Nacional
de Mastitis de Estados Unidos en 1987 y 1990; adicionalmente se tom una muestra de
leche del tanque de enfriamiento o en su defecto de la cantina de recoleccin.

2.1.5. Tratamientos: Durante la segunda visita (da 0), las vacas fueron asignadas al azar a
cada uno de los tres grupos de tratamiento hasta completar el nmero de muestra calculado,
incluyendo en el estudio mximo dos cuartos por vaca. Los tratamientos correspondientes a
los tres grupos, fueron administrados y monitoreados posteriormente por el autor.
1. Grupo control: El tratamiento de este grupo, aplicado a 28 vacas (35 cuartos), consisti en
la administracin de 10 ml de solucin salina fisiolgica como placebo, por va intramuscular
en el anca.
2. Grupo Mastipis-H: El tratamiento de este grupo, aplicado a 28 vacas (35 cuartos),
consisti en la administracin de dos jeringas de MastipisH1 por cuarto, cada una con 30cc
del producto, por va intramamaria con intervalo de 24 horas.
Los cuartos tratados con Mastipis-H recibieron las infusiones intramamarias previo
escurrido del cuarto y desinfeccin del esfnter del pezn con algodn humedecido en
alcohol al 70%; despus de la administracin del producto por el mtodo de insercin
parcial de la cnula se realiz un masaje a la ubre para mejorar la distribucin del producto
y se sumergieron los pezones en la solucin antisptica de sellado utilizada en cada finca.
1

Mastipis-H. Socolaur Colombia. Rg. ICA 4131 DB

85

3. Grupo Inmunocel: El tratamiento de este grupo aplicado a 25 vacas (35 cuartos) consisti
en la administracin de dos dosis, cada una de 15 ml de Inmunocel 2 por va intramuscular,
con intervalo de 14 das.
Luego de los tratamientos, los animales asistieron normalmente a los dos ordeos diarios
(tres para el caso de la finca nmero 12) sin ser necesario el descarte de su leche.

2.1.6. Recoleccin de las muestras de leche: Durante las visitas de monitoreo (das 7, 14,
21, 28 y 35), despus de la preparacin de rutina de la ubre para el ordeo, se realiz la
prueba de California para mastitis (CMT) en todos los cuartos empleando lauryl sulfato de
sodio al 3% y siguiendo la metodologa recomendada por Schalm en 1971. Posterior a la
prueba de CMT se tomaron muestras de 5 ml de leche por cada cuarto en tubos de vidrio
con dos gotas de Somafix (fijador a base de formalina) luego de limpiar el extremo del
pezn con una torunda de algodn humedecida en alcohol al 70% para realizar el CCS
(British Standard, 1997).
Luego de su recoleccin, las muestras de leche fueron mantenidas bajo refrigeracin entre 4 a
5 oC antes de ser procesadas.
Aquellos animales que desarrollaron mastitis clnica durante el estudio se consideraron
fracasos de la terapia o la recuperacin espontnea; en estos casos fue suspendido su
monitoreo e instaurado el protocolo teraputico para mastitis clnica de cada finca.

2.1.7. Procesamiento de las muestras: Los cultivos a partir de las muestras de leche fueron
realizados en el laboratorio de microbiologa de CORPOICA-CEISA (Corporacin
Colombiana de Investigacin Agropecuaria-Centro de Investigacin en Salud AnimalPrograma Nacional de Salud Animal) y en el Laboratorio Mdico Veterinario (LMV) en
2

Inmunocel . Laboratorios Calier S.A. Rg. ICA 4668 DB

86

Bogot, durante las 18 y 24 horas posteriores a su obtencin. Las muestras de leche para
conteo de clulas somticas fueron procesadas en el Coulter Counter Z1 del Laboratorio
Mdico Veterinario de Bogot durante las 18 horas siguientes a su recoleccin.
Todas las pruebas fueron realizadas por la misma persona a lo largo del estudio para
disminuir sesgos.

PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS PARA CONTEO DE CELULAS

SOMATICAS
El procedimiento para el conteo de clulas somticas es el reportado por Coulter Corporation
en 1996 y The British Standard En ISO 13366-2 en 1997:
Fijacin de las muestras a 60 oC por 10 minutos.
Dilucin 1:100 con Somotan (10 ml reactivo + 100 l leche).
Bao de agua a 80oC por 10 minutos.
Enfriamiento y transferencia a cubetas de lectura.
Lectura en Coulter Counter Z1 con un rango de apertura de 5 a 10 .
Registro de resultados en clulas por ml de leche.

PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS PARA MICROBIOLOGIA

87

Incubacin a 37oC
por 24horas

Cultivo de leche por

agotamiento en agar
sangre
Incubacin a 37oC por
24horas

Tincin de Gram

Bacilos Gram +

Cocos Gram +

Bacilos Gram Lactosa

Utilizacin de azcares

Catalasa

Urea
Utilizacin de azcares

+
Staphylococcus

Coagulasa
Utilizacin de azcares

Streptococcus

CAMP/esculina
Utilizacin de azcares

2.2. ANALISIS ESTADISTICO

Se realiz un estudio clnico con asignacin al azar, para la evaluacin de dos medicamentos
empleados en la terapia de mastitis subclnica durante la lactancia, un producto homeoptico
(Mastipis-H) y un inmunomodulador (Inmunocel), contra la curacin espontnea (grupo
Control). Para el anlisis de datos se utilizaron los programas, EPIINFO 6,1, STATISTIX
versin 4.0 y EPISCOPE 1991.
Se realiz estadstica descriptiva de la distribucin de las vacas por fincas, por das de
lactancia y cuarto afectado, y de los microorganismos aislados. Igualmente se describieron los
resultados de las pruebas de California para mastitis (CMT) y Conteo de Clulas Somticas
(CCS) para el diagnstico y los cinco muestreos postratamiento. Los resultados de palpacin
88

de la ubre al final de estudio y las reacciones observadas tras el tratamiento de los animales
con Mastipis-H tambin fueron descritas.
Se calcul el acuerdo entre las pruebas diagnsticas CMT y CCS (valor conocido como
Kappa), se estableci la asociacin entre las mismas pruebas por Chi-cuadrado y se hallaron
las correlaciones de Pearson. Adicionalmente se calcul la relacin entre estas pruebas
diagnsticas y la presencia de enfermedad, por los parmetros de sensibilidad, especificidad y
valores predictivos positivo y negativo para el CMT con respecto al CCS (prueba de oro).
Para evaluar las diferencias entre grupos de tratamiento y dentro de cada grupo de tratamiento
a diferentes das de muestreo por CCS y por las tasas de curacin, se efectuaron las pruebas de
Kruskall Wallis, Anlisis de Varianza y Chi cuadrado.
Finalmente fueron establecidas las asociaciones entre algunas variables de manejo de las
fincas, por medio de Chi-cuadrado, y se crearon modelos de regresin logstica para aquellas
variables significativamente relacionadas a la presentacin de CMT positivo o conteos
celulares mayores a 250000.

89

3. RESULTADOS

3.1. DESCRIPCION DE LAS FINCAS INCLUIDAS DENTRO DEL ESTUDIO

La informacin correspondiente a las doce fincas incluidas en el estudio se agrup en las
Tablas 10 a 12.
Tabla 10. Informacin general de las fincas incluidas en el estudio.
Finca
1*
2
3
4*
5*
6
7*
8
9
10
11
12*

Ubicacin N de animales en ordeo N de ordeadores

Sala de ordeo**
Villapinzn
61
2
Porttil
Sopo
52
2
Fijo, brete a la par
Zipaquir
81
2
Fijo, tandem
Cogua
105
2
Fijo, espina de pescado
Cogua
67
3
Fijo, tandem
Guasca
40
1
Fijo, brete a la par
Sopo
61
2
Fijo, espina de pescado
Cogua
23
2
Fijo, tandem
Simijaca
127
2
Fijo, brete a la par
Sesquil
57
2
Fijo, brete a la par
Guachet
55
2
Porttil
Sopo
98
2
Fijo, espina de pescado

* Fincas que manejan dos hatos de ordeo segn produccin de leche y etapa de
gestacin.
** Arango, 1998.

90

La rutina de ordeo vara entre las 12 fincas incluidas en el estudio, sin estar organizada o
supervisada por un profesional capacitado en la mayora de los casos. En cuanto a la
preparacin de los animales previa al ordeo, es bastante deficiente tanto en higiene como
en estimulacin, al igual que la identificacin de los casos clnicos. Todos los animales
incluidos en el estudio son ordeados con equipo (ordeo mecnico).
Es comn el sobreordeo de los animales con un tiempo de ordeo mximo detectado de 32
minutos en la finca 8. En 7 de las 12 fincas se practica el escurrido ejerciendo tensin sobre
el colector, en las fincas 8 y 12 se suma el escurrido manual al mecnico.
La produccin por vaca oscila entre 10 a 19 litros de leche en promedios por finca.

91

La Tabla 11 resume las diferentes rutinas de ordeo en las doce fincas muestreadas.
Tabla 11. Rutinas de ordeo.
FINCA

Prcticas

PREPARACIN
Limpieza de
Secado

adicionales

la ubre

Maneas

Lavado con agua

Despunte

Peridico

ORDEO
Tiempo Escurrido

Al pasto o a las

Corte pelo de

SELLADO

5/7min

Si

Sellodyne

botas

cola
2

Guantes
Corte pelo de

Presellado,

Peridico

Al piso

5/6min

Si

Theratec

3
4

cola
No
No

clorado
Lavado con agua
Presellado,

Peridico
P.industrial

Ocasional al piso
Recipiente fondo

5/9min
4/5min

No
No

Mastydine
4XLA

5
6
7

No
No
No

Tego
No
Lavado con agua
Presellado,

No
No
Peridico

negro
No
No
Recipiente fondo

7/11min
6/7min
4/5min

Si
Si
No

Cutysan
Theratec
Sellodyne

No

Tego
Presellado,

Peridico

negro
Al piso

7/15min

Si

Sellodyne

Corte pelo de

Sellodyne
Presellado,

Peridico

Recipiente fondo

5/7min

No

Theratec

10
11

cola y ubres
No
Corte pelo de

Theratec
Lavado con agua
Presellado,

Peridico
Peridico

negro
Al pasto
No

6/8min
3/4min

Si
Si

Mastydine
Sellodyne

12

cola y ubres
No

Sellodyne
Presellado,

Peridico

Al piso

6/8min

Si

Clorado

Sellodyne

Productos de presellado y/o sellado:

Yodados: Sellodyne, Mastidyne, Cutysan, Theratec.
Dodecil

dietilendiaminoglicina,

dodecilaminopropilglicina,

propilenglicol,

alcohol

benclico: Tego 51.

Acido cloroso / Dixido de Cl: 4XLA.
Clorado: Emplean diferentes productos a base de hipoclorito, diluyndolos a una
concentracin aproximada de 50 ppm.
En cuanto al nivel de mastitis establecido durante la visita inicial a cada finca, la mastitis
subclnica se presenta en niveles iguales o mayores al 10% por la prueba de CMT y la

92

mastitis clnica en niveles que varan del 1 al 4%, sin encontrarse ningn caso en las fincas
8 y 9. Estos y otros datos se presentan en la Tabla 12.

M.CLNICA(%)

CUARTOS PERDIDOS
(%)

NEGATIVOS(%)

20

15

53

399000

Mastipis-H

Secamil,

10

13

12

63

552000

Mastipis-H

Nafpenzal
Cloxacum

89

394000

Regix
Tilosina

Nafpenzal
No

422000
503000

Pen. Benzat.
Suanovil
Pirsue

Nafpenzal
Cloxacum

4
5

7
10

4
4

3
4

2
2

0
1

84
79

TRATAMIENTOVACA
SECA

CMT 3(%)

TRATAMIENTO
MASTITIS CLINICA

CMT 2(%)

CCS TANQUE (cl/ml)

CMT 1(%)

FINCA

Tabla 12. Nivel de mastitis y tratamientos de las fincas incluidas en el estudio.

6
7

13
9

10
4

6
4

1
4

0
2

70
77

435000
462000

Pen.Benzat.
Tilosina

Neosec
No
Nafpenzal

8
9

12
8

3
4

2
3

0
0

0
0

83
85

443000
560000

Spectrazole
Mastivem
Neomicina

Cepravine
No
Secamil

10
11
12

11
5
7

4
4
11

28
5
11

1
3
4

0
1
2

56
82
65

479000
387000
519200

Mastivem
Lincomicina
Penicilina

Cloxacum
No
No
Cloxacum

3.2. DISTRIBUCIN DE LOS CUARTOS MAMARIOS POR GRUPOS DE

TRATAMIENTO
Los cuartos que cumplieron los parmetros de inclusin fueron asignados al azar a cada uno
de los grupos de tratamiento como se presenta en la Tabla 13.
93

Tabla 13. Distribucin de los cuartos por fincas para cada grupo de tratamiento.
CONTROL
FINCA

Frecuencia

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
TOTAL 35

6
2
5
4
1
1
0
1
1
8
2
4

MASTIPIS-H
Frecuencia

%
17.1
5.7
14.3
11.4
2.9
2.9
0
2.9
2.9
22.9
5.7
11.4
100%

3
3
3
3
2
2
2
2
2
5
4
4
35

INMUNOCEL

%
8.6
8.6
8.6
8.6
5.7
5.7
5.7
5.7
5.7
14.3
11.4
11.4
100%

Frecuencia

2
1
3
4
0
2
3
2
5
5
4
4
35

TOTAL

Frecuencia

5.7
2.9
8.6
11.4
0
5.7
8.6
5.7
14.3
14.3
11.4
11.4
100%

11
6
11
11
3
5
5
5
8
18
10
12

10.5
5.7
10.5
10.5
2.9
4.8
4.8
4.8
7.6
17.1
9.5
11.4
100%

105

Se observan diferencias en el nmero de cuartos asignados a cada grupo de tratamiento en

las fincas ya que algunos animales fueron descartados del estudio durante la primera y
segunda semanas debido a tratamiento con antibiticos por causas diferentes a mastitis y
por venta o traslado a otras fincas.
Los animales incluidos dentro del estudio presentan un comportamiento similar en cuanto a
das de lactancia y nmero de partos, al comparar los valores de la media para cada grupo
de tratamiento, como se presenta en la Tabla 14.
Tabla 14. Das de lactancia y nmero de partos para cada grupo de tratamiento.

GRUPO
CONTROL
MASTIPIS-H
INMUNOCEL
TOTAL

DIAS DE LACTANCIA
MEDIA
RANGO
107.64
91.53
107.8
102.12

3-180
15-180
4-180
3-180
94

NUMERO DE PARTOS
MEDIA
RANGO
3.39
3.82
4.44
3.86

1-8
1-11
2-11
1-11

3.3. MICROORGANISMOS AISLADOS DURANTE LA VISITA INICIAL

De las 105 muestras tomadas el da -2, 97 (92.38%) mostraron crecimiento bacteriano. De
estos 97 aislamientos realizados, 2 (2.06%) corresponden a infecciones mixtas y los 95
restantes (97.93%) a infecciones simples; 69 aislamientos fueron clasificados por gnero y
especie. La Tabla 15 presenta los microorganismos identificados en las 105 muestras
distribuidas por grupos de tratamiento.

Tabla 15. Prevalencia de microorganismos.

CONTROL
MICROORGANISMO
Staphylococcus aureus
Streptococcus spp
Streptococcus agalactiae
Streptococcus dysgalactiae
No crecimiento
Staphylococcus spp
Actynomices pygenes
Staphylococcus epidermidis
Corynebacterium bovis
Staphylococcus simulans
Bacilo Gram- no clasificado

MASTIPIS-H

INMUNOCEL

TOTAL

Frecuencia

Frecuencia

Frecuencia

Frecuencia

8
3
7
5
4
1
0
1
1
0
1

22.9
8.6
20
14.3
11.4
2.9
0
2.9
2.9
0
2.9

12
6
2
2
2
3
2
0
2
1
1

34.3
17.1
5.7
5.7
5.7
8.6
5.7
0
5.7
2.9
2.9

10
7
3
1
2
3
1
2
0
2
1

28.6
20
8.6
2.9
5.7
8.6
2.9
5.7
0
5.7
2.9

30
16
12
8
8
7
3
3
3
3
3

28.6
15.2
11.4
7.6
7.6
6.7
2.9
2.9
2.9
2.9
2.9

95

Streptococcus uberis
Staphylococcus intermedius
Citrobacter freundii
Aeromonas hydrophila
Staphylococcus hominis
S.aureus/S.agalactiae
A.pygenes/S.agalactiae
TOTAL

1
1
1
0
1
0
0
35

2.9
2.9
2.9
0
2.9
0
0
100%

1
0
0
0
0
1
0
35

2.9
0
0
0
0
2.9
0
100%

0
1
0
1
0
0
1
35

0
2.9
0
2.9
0
0
2.9
100%

2
2
1
1
1
1
1
105

1.9
1.9
1
1
1
1
1
100%

De 97 aislamientos microbiolgicos obtenidos, segn la clasificacin expuesta por Rebhum

y cols en 1995, 51 corresponden a microorganismos contagiosos: Streptococcus agalactiae
(12), Streptococcus dysgalactiae (8), Staphylococcus aureus (30) y un cultivo mixto por
Staphylococcus

aureus

Streptococcus

agalactiae;

22

microorganismos

medioambientales: Streptococcus spp (2), Staphylococcus spp (9), Actynomyces pyogenes

(3), Corynebacterium bovis (3) y bacilos Gram negativos no clasificados (5), y un
aislamiento mixto por un microorganismo contagioso y uno medioambiental; los 23
aislamientos restantes son cocos Gram +: Streptococcus spp (16) y Staphylococcus spp (7)
sin identificacin de especie y que por lo tanto no pueden ser distribuidos en esta
clasificacin; esta informacin es ilustrada en la grfica 1.
Grafica 1. Prevalencia de microorganismos contagiosos y medioambientales.

Contagiosos
7,61%

Sin especie

0,95%

20,95%

Medio ambiental
48,57%
No crecimiento
Contagioso/Medio
ambiental

21,90%

96

3.4. RESULTADOS DEL CALIFORNIA MASTITIS TEST

Para el grupo control, el nmero de cuartos negativos por la prueba de CMT se increment
gradualmente desde el da 7 al 28 postratamiento. Entre los das 7 y 28 postratamiento se
detectaron 7 casos de mastitis clnica como resultado del fracaso de la terapia. Los
porcentajes de las calificaciones de la prueba de California para mastitis durante cada
muestreo del grupo control se ilustran en la grfica 2.

Grfica 2. Comportamiento del CMT para el grupo Control durante el estudio.

97

CMT1

M.CLINICA

7/31
5/31
6/28
2/31

1/32

10

1/33

2/35

15

5/28
7/28

10/28

12/31
5/31

6/32

10/32

11/32
4/32
9/33
6/33

9/35

10/35

4/33

20

6/35

25

8/35

30
7/35

PORCENTAJES

12/35

45

35

CMT3

13/33

50

40

CMT2

16/35

CMT0

0
DIA -2

DIA 7

DIA 14

DIA 21

DIA 28

DIA 35

DIA DE MUESTREO

Para el grupo Mastipis-H, la calificacin de cero por la prueba de CMT permaneci en

niveles similares del da 7 al 35. Entre los das 14 y 28 postratamiento fueron detectados 7
casos de mastitis clnica, resultado del fracaso de la terapia. Los porcentajes de las
calificaciones del CMT durante cada muestreo se ilustran en la grfica 3.

Grfica 3. Comportamiento del CMT para el grupo Mastipis-H durante el estudio.

98

CMT0

CMT2

CMT3

M.CLINICA

18/35

60

CMT1

11/28

50

7/28

8/28

2/28

1/35

10

3/34
3/34

4/35

9/34
8/34

11/34
7/34

9/34
9/34
9/34

10/35
10/35
10/35

10/35

9/35
10/35
6/35

20

10/35

30

7/35

PORCENTAJES

40

0
DIA -2

DIA 7

DIA 14

DIA 21

DIA 28

DIA 35

DIA DE MUESTREO

Para el grupo Inmunocel, el porcentaje de cuartos negativos a la prueba de CMT

permaneci en niveles similares del da 7 al 28 y ascendi a 38.7% para el da 35. Los das
7, 14 y 21 fueron detectados 4 casos de mastitis clnica, sin encontrarse ninguno durante los
dos muestreos finales del estudio. Los porcentajes de las calificaciones del CMT son
ilustrados en la grfica 4.

Grfica 4. Comportamiento del CMT para el grupo Inmunocel durante el estudio.

99

CMT 3

M.CLINICA

12/31

13/31
1/33

6/31
6/31
7/31

6/31

1/32

3/32

4/33

4/31

8/32

8/31

10/32

10/32

12/33

2/35

2/35

4/35

20

8/33

30

8/33

9/35
5/35

PORCENTAJES

14/35

50

10

CMT 2

15/35

60

40

CMT 1

19/35

CMT 0

0
DIA -2

DIA 7

DIA 14

DIA 21

DIA 28

DIA 35

DIA DE MUESTREO

3.5. CONTEOS DE CELULAS SOMATICAS

A travs del estudio se observa una disminucin en los promedios de CCS para los tres
grupos de tratamiento, encontrndose reducciones del 61.4% para el grupo Control, del
37.1% para el grupo Mastipis-H y del 64.1% para el grupo Inmunocel entre la visita inicial
y el da 35 postratamiento como se muestra en la grfica 5.

100

Grfica 5. Conteo de clulas somticas para los tres grupos de tratamiento durante el
estudio

5,571

CONTROL

1,999

1,634

1,313

3,139

1,391

3,334
2,658

2,122
2,266

1,652

2,076
1,738

2,292

2,799

2,6

3,399

CELULAS EN MILLONES/ml

INMUNOCEL

4,546

MASTIPIS-H

0
DIA -2

DIA 7

DIA 14

DIA 21

DIA 28

DIA 35

DIA DE MUESTREO

3.6. TASAS DE CURACION

Las tasas de curacin por grupo de tratamiento, expresadas como el porcentaje de cuartos
con un CCS menor o igual a 250000 clulas/ml de leche para cada da de muestreo
postratamiento se presentan en la Tabla 16.

Tabla 16. Tasas de curacin por grupos de tratamiento.

101

Muestreo
Da 7
Da 14
Da 21
Da 28
Da 35

Control
2/35
5.71%
1/35
2.85%
0/35
0%
4/35 11.42%
1/34
2.94%

Mastipis-H
1/35
2.85%
3/35
8.57%
4/35
11.42%
4/35
11.42%
3/32
9.37%

Inmunocel
3/35
8.57%
3/35
8.57%
3/35
8.57%
2/35
5.71%
5/35
14.28%

Los CCS encontrados en los cuartos curados para cada grupo de tratamiento al final del
estudio (da 35), muestran los mayores recuentos en el grupo Control (menor tasa de
curacin) y los menores recuentos en el grupo Inmunocel (mayor tasa de curacin);
mientras que en los cuartos no curados, los menores recuentos son para el grupo Control y
los mayores para el grupo Inmunocel. El grupo Mastipis-H se encuentra en un punto
intermedio en los dos casos. Estos datos se presentan en la grfica 6.

102

Grfica 6. Conteos de clulas somticas para los cuartos curados (<=250000) y no curados

CCS>250000
1808

CCS<250000

1353

2500
2000
1500

133,56

500

183,433

1000
209

CELULAS EN MILLONES/ml

2358

(>250000).

0
CONTROL

MASTIPIS-H

INMUNOCEL

GRUPO DE TRATAMIENTO

3.7. MICROORGANISMOS AISLADOS DURANTE LA VISITA INICIAL PARA

LOS CUARTOS CURADOS Y NO CURADOS
Ningn cuarto infectado por Streptococcus agalactiae, Staphylococcus epidermidis,
Staphylococcus

hominis,

Staphylococcus

simulans,

Staphylococcus

intermedius,

Streptococcus uberis, Corynebacterium bovis, Citrobacter freundii, Aeromonas hydrophila

y Staphylococcus spp, e igualmente ningn cuarto con infeccin mixta o sin crecimiento
microbiano a partir de leche, present un CCS menor a 250000 clulas/ml de leche el da
35 postratamiento, mientras que 2 de 30 cuartos (6.66%) infectados por Staphylococcus
aureus, 2 de 8 (25%) infectados por Streptococcus dysgalactiae, 2 de 3 (66.66%) por
Actynomices pyogenes, 1 de 3 (33.33%) por bacilos Gram negativos y 2 de 16 (12.5%) por
Streptococcus spp, presentaron CCS por debajo de 250000 clulas/ml de leche al final del
estudio.

103

3.8. CUARTOS QUE PRESENTARON REACCION LUEGO DEL TRATAMIENTO

CON MASTIPIS-H
Cinco de 35 cuartos del grupo Mastipis-H, distribuidos en las fincas 1 y 3, con infeccin
intramamaria por Actynomices pyogenes (dos cuartos), Streptococcus dysgalactiae (dos
cuartos) y Streptococcus uberis (un cuarto) luego de iniciar el tratamiento, presentaron
taches o grumos en la leche durante uno o dos ordeos, reaccin similar a la reportada por
la casa productora del medicamento y descrita anteriormente.

3.9. CUARTOS EN QUE SE DETECTO FIBROSIS AL FINAL DEL ESTUDIO

De un total de 30 cuartos (28.5%) en los cuales se detect fibrosis al final del estudio, 22
(73.3%) presentaron fibrosis difusa leve, 7 (23.3%) fibrosis difusa moderada y 1 (3.3%)
fibrosis nodular. Trece de 30 cuartos se encontraban en el grupo Control, nueve en el grupo
Mastipis-H y ocho en el grupo Inmunocel.
De estos 30 cuartos, 10 presentaban infeccin por Staphylococcus aureus, tres por
Streptococcus dysgalactiae, seis por Streptococcus agalactiae, seis por Streptococcus spp,
dos por Staphylococcus spp y uno por un bacilo Gram negativo, a partir de los dos cuartos
restantes no se obtuvo crecimiento.

3.10. EVALUACIN DE LAS PRUEBAS DIAGNOSTICAS

Con base en los resultados de las pruebas diagnsticas empleadas a lo largo de este estudio
(Conteo de Clulas Somticas por el mtodo Coulter Counter y California Mastitis Test) se
calcularon las proporciones de acuerdo potencial ms all del azar, valor conocido como
Kappa.
104

El acuerdo entre las pruebas de CMT y CCS estimado a partir de un recuento de 500000
clulas/ml de leche como punto de corte entre cuartos con y sin mastitis y con los valores 1,
2 y 3 de CMT como positivos a mastitis fue de 0.6.
Los parmetros de sensibilidad, especificidad y valores predictivos positivo y negativo para
el CMT con respecto al CCS (Coulter Counter) se presentan en la Tabla 17.
Tabla 17. Sensibilidad y especificidad del CMT.
Parmetro
Sensibilidad (%)
Especificidad (%)
Valor predictivo + (%)
Valor predictivo (%)

Valor
87.99
78.57
93.73
64.23

Lmite inferior
84.84
70.97
91.31
56.21

Lmite superior
91.14
86.17
96.16
72.26

Por medio de Chi-cuadrado se obtuvo asociacin significativa (P<0.05) entre las pruebas
diagnsticas, encontrando que animales con un CMT positivo (calificaciones 1, 2 y 3),
tienen 26.4 veces mayor probabilidad de presentar un CCS superior a 500000 al comparar
los resultados de los cinco muestreos realizados. Los valores se presentan en la Tabla 18.

Tabla 18. Chi-cuadrado y Odds Ratio para el CCS con respecto al CMT.
Muestra
CCS General
CCS da 7
CCS da 14
CCS da 21
CCS da 28
CCS da 35

P-Fisher
< 0.0001
-

P-Yates
< 0.0001
< 0.0001
< 0.0001
< 0.0001
< 0.0001
< 0.0001

105

OR
26.40
11.30
34.67
28.20
24.23
74.55

Rango OR
14.87-47.19
3.29-40.38
8.83-148.63
6.98-125.29
6.20-103.79
15.50-418.16

Otra forma de calcular el acuerdo del diagnstico de mastitis por CMT y por CCS para cada
da de muestreo y para el total de las muestras es por medio de las correlaciones de Pearson.
Los valores se presentan en la Tabla 19.
Tabla 19. Correlaciones de Pearson.
Variables
CCS General
CCS da 7
CCS da 14
CCS da 21
CCS da 28
CCS da 35

CMT General

0.6204
-

CMT da 7 CMT da 14 CMT da 21 CMT da 28 CMT da 35

0.4691
-

0.6657
-

0.6138
-

0.5902
-

0.7642

Si se comparan dos pruebas diagnsticas con resultados idnticos, el valor de la correlacin

ser uno (1), para el caso de la comparacin entre CMT y CCS la mxima correlacin entre
positividad (muestras con ms de 500000 clulas somticas en leche) se encuentra el da 35
postratamiento con un valor de 0.7642.
3.1. DIFERENCIAS ENTRE GRUPOS DE TRATAMIENTO
Al evaluar las diferencias entre grupos de tratamiento, comparando los CCS por la prueba
no paramtrica de Kruskall Wallis y por Anlisis de varianza y las tasas de curacin por Chi
cuadrado, no se encontraron diferencias estadsticamente significativas (P<0.05).
Al evaluar las diferencias dentro de los grupos de tratamiento para cada da de muestreo, se
encontraron los siguientes resultados:
Por la prueba de Kruskall Wallis se encuentran diferencias significativas entre los CCS del
da 2 con los CCS de los das 7, 28 y 35 (P=0.003) para el grupo Control; entre los CCS
del da 2 y los CCS de los das 14 y 28 (P=0.015) para el grupo Mastipis-H y entre los
CCS del da 2 y los CCS de los das 14, 21 y 35 (P=0.003) para el grupo Inmunocel.

106

Por el Anlisis de Varianza se encuentran diferencias significativas entre los CCS del da
2 y los CCS de los das 28 y 35 (P=0.006) para el grupo Control; entre los CCS de los das
2 y 28 (P=0.018) para el grupo Mastipis-H y entre los CCS del da 2 y los CCS de los
das 14, 21 y 35 (P=0.005) para el grupo Inmunocel.
Por la prueba de Chi cuadrado no se encontraron diferencias significativas en las tasas de
curacin dentro de cada grupo de tratamiento para los diferentes das de muestreo.

3.2. ASOCIACIONES ESTADSTICAS Y MAGNITUD DE ASOCIACIN

Se encontr significancia (P<0.05) en las asociaciones entre algunas variables y los
resultados de CMT positivo y/o CCS superiores a 250000, sin tener en cuenta el grupo de
tratamiento. Los resultados son presentados en las Tablas 20 y 21.

Tabla 20. Variables asociadas con la presentacin de CMT positivo y su magnitud de

asociacin.

Variable
Presellado
Sellador yodado
Sellador 4XLA
Sellador clorado

P-Fisher P-Yates
CMT DIA 7

OR

Rango OR

0.0420544
0.0308697

3.36
0.00
-

1.17-9.84
0.00-0.54
-

3.0
0.33

1.07-8.60
0.12-0.93

0.32

0.11-0.89

0.01966888
0.00583816
-

CMT DIA 21
Mastitis contagiosa
Mastitis medioambiental

0.03270399
0.03270399

CMT DIA 35
Corte de pelo colas/ubres

0.02573060

En la Tabla 20 todas las variables se presentan como factores protectores para la

presentacin de CMT positivo a diferentes das del muestreo segn lo expresa el valor del
107

OR (<1), a excepcin de las variables presellado y mastitis contagiosa, cuya exposicin se

considera de riesgo (OR>1), as, los animales con mastitis contagiosa tienen una
probabilidad tres veces mayor de presentar un CMT positivo el da 21 postratamiento a
diferencia de los animales que presentan mastitis medioambientales o sin aislamiento
microbiolgico.

Tabla 21. Variables asociadas con la presentacin de CCS superiores a 250000 y su

magnitud de asociacin.

Variable
Mastitis contagiosa

P-Fisher
CCS DIA 7
0.0180133

OR

Rango OR

7.71

1.19-62.83

0.13
0.10

0.02-0.88
0.01-0.56

0.16
6.40

0.02-0.88
1.14-47.19

CCS DIA 14
Tres o ms partos

0.0165247

CCS DIA 28
Mastitis sin aislamiento
Corte de pelo colas/ubres

0.0274631
0.0021480

CCS DIA 35
Lactancia menor o igual 90 das 0.0142784
Lactancia mayor a 90 das
0.0327039*
* P-Yates

Todas las variables presentadas en la Tabla 21 se consideran factores protectores para la

presentacin de CCS mayores a 250000 segn lo expresa el valor del Odds Ratio (<1), a
excepcin de las variables tres o ms partos y lactancia mayor a 90 das, cuya exposicin se
considera de riesgo (OR>1) para la presentacin de un CCS alto; as, los animales con tres

108

o ms partos tienen 7.71 veces mayor probabilidad e presentar un CCS mayor a 250000 al
da 14 postratamiento, a diferencia de aquellos animales con uno o dos partos.

3.13. REGRESIN LOGISTICA

Para la regresin logstica se tuvieron en cuenta 7 variables que se encontraron asociadas
por Chi-cuadrado (P<0.05) a la presentacin de mastitis, diagnosticada por CMT y 6
variables asociadas al diagnstico de mastitis por CCS. Estas asociaciones fueron
controladas por la variable vaca debido a que los cuartos mamarios no son independientes.
Ninguna de las variables asociadas por Chi-cuadrado a la presentacin de CMT positivo o
CCS mayor a 250000 estuvo asociada significativamente a estos mismos resultados por
regresin logstica.

109

4. DISCUSION

Se obtuvo crecimiento bacteriano a partir de 97 de las 105 muestras tomadas; de estas 97

muestras, 74 pueden ser distribuidas en la clasificacin de microorganismos contagiosos y
medioambientales: 51 aislamientos (68.91%) corresponden a patgenos contagiosos, 22
(29.72%) a patgenos medioambientales y 1 (1.35%) presenta crecimiento mixto por un
microorganismo contagioso y uno medioambiental. La alta prevalencia de los
microorganismos contagiosos (Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae y
Streptococcus dysgalactiae) como causa de mastitis subclnica en este estudio difiere de la
prevalencia actual de estos patgenos en otros pases, en donde los microorganismos
ambientales han adquirido mayor importancia debido a que los programas de control de
mastitis se han enfocado hacia la mastitis contagiosa, con la inclusin y riguroso
cumplimiento de estrategias como la terapia indiscriminada de vaca seca y el sellado de los
pezones al finalizar el ordeo. Esto incluso ha llevado a la erradicacin del Streptococcus
agalactiae (organismo altamente sensible a antibiticos), posicionando al Staphylococcus
aureus como el microorganismo contagioso ms prevalente en estos hatos (Erskine y cols,
1991; Cullor, 1993).
Los patgenos encontrados con mayor frecuencia en este estudio fueron Staphylococcus
aureus (40.54%) y Streptococcus agalactiae (16.21%), hallazgo que coincide con los
reportes para la Sabana de Bogot por Andrade y cols en 1986, Rodrguez en 1987 y
Sarmiento y cols en 1995 y para otros pases por Blood y Radostits en 1992 y Rebhum y
cols en 1995, quienes califican a estos dos microorganismos contagiosos como los
principales causantes de mastitis subclnica.

110

La identificacin del Staphylococcus aureus en un 40.53% de 74 muestras, coincide con los

hallazgos de varios autores quienes consideran a este microorganismo como el principal
patgeno de la ubre en casos de mastitis subclnica, aunque con prevalencias menores. Se
reportan las siguientes prevalencias: En Colombia, para la Sabana de Bogot, Len y
Morales en 1993 (28%) y Castelblanco y cols en 1997 (29.1%); para el Valle de Ubat,
Contreras y cols (32.50%). En otros pases: Saxena y cols en 1993 (27.6%), Fabre y cols en
1997 (29%), Langoni y cols en 1991 (32%) y Tuteja y cols en 1993 (44.3%). Vecht y cols
en 1989 citan igualmente al Staphylococcus aureus como el principal patgeno de la ubre.
El Streptococcus agalactiae se encontr en un 16.21% de aislamientos, considerndose una
prevalencia alta, a diferencia de otros estudios en los que no se ha aislado o se ha
identificado en prevalencias bajas. En la Sabana de Bogot, en el estudio de Casteblanco y
cols en 1997, el 3.3% de los aislamientos correspondieron a Streptococcus agalactie,
mientras que Gmez y cols en 1987, reportan una prevalencia del 10.9%. En otros pases
se reportan prevalencias del 0.34% (Petrovic y cols, 1997) y 2.63% (Topolko y Benic,
1997), Sandholm y cols en 1995 reportan igualmente al Streptococcus agalactiae como un
aislamiento poco comn en Finlandia, Suecia y Noruega, con prevalencias menores al 1%.
Contreras y cols en el Valle de Ubat y Len y Morales en 1993 en la Sabana de Bogot,
reportan prevalencias mucho ms altas (35.4 y 43% respectivamente) a la del estudio
actual.
El Streptococcus dysgalactiae se aisl de un 10.81% de las muestras, una prevalencia ms
alta a la reportada por Gmez y cols en 1987 (7.6%) para la Sabana de Bogot y en otros
pases por Lagoni y cols en 1991, con un 5.3% de aislamientos. Sandholm y cols en 1995
reportan prevalencias de hasta un 20 a 25% de este patgeno en mastitis subclnica y clnica
en los pases Nrdicos.
Anteriormente, Rodrguez en 1987 y Giraldo en 1989 describieron al Streptococcus
agalactiae como el principal patgeno de mastitis subclnica en la Sabana de Bogot al cual
se le atribuan el 60% de las infecciones, contra un 13.6% para el Staphylococcus aureus.
El cambio de tendencia observado en este estudio, se puede atribuir a la inclusin de
111

prcticas como el tratamiento de vaca seca en siete de las 12 fincas muestreadas, hecho que
favorece la reduccin del Streptococcus agalactiae debido a su alta sensibilidad a los
antibiticos.
El nivel de mastitis subclnica ocasionada por microorganismos de origen medioambiental,
fue del 29.72%. Esta tasa se estima como baja al compararla con las prevalencias de otros
pases en los cuales alcanza el 47.8% (Langoni y cols, 1991), el 53% (Fabre y cols, 1997) e
incluso ms del 66.2% (Saxena y cols, 1993). Para la Sabana de Bogot, la prevalencia de
estos patgenos en mastitis subclnica es alta y podra corresponder con la tendencia actual
del incremento de estos microorganismos (en conjunto con la disminucin de los
microorganismos contagiosos) en la patogenia de mastitis tanto clnica como subclnica
para aquellos hatos en que se asegura la correcta realizacin de prcticas para el control de
mastitis contagiosa y donde los animales son manejados en confinamiento aumentando la
carga de patgenos medioambientales y por lo tanto el riesgo de infeccin intramamaria
con estos microorganismos (Erskine y cols, 1991; Sandholm y cols, 1995).
En este estudio se identific infeccin intramamaria por Staphylococcus intermedius en el
2.7% de los cuartos, su reporte en otros estudios es poco comn debido a que algunos
autores unifican a los Staphylococcus coagulasa positivos en un solo grupo (Sandholm y
cols, 1995). Roberson y cols en 1996, encontraron un 0.2% de mastitis por Staphylococcus
intermedius a partir de 487 muestras de leche positivas a Staphylococcus coagulasa
positivos, concluyendo que este microorganismo no parece ser de gran importancia en el
desarrollo de esta entidad.
La prevalencia de mastitis subclnica por Staphylococcus coagulasa negativos fue del
9.45% (Staphylococcus simulans, epidermidis y hominis). Esta prevalencia se considera
baja al compararla con el reporte de Gmez y cols en 1987 para la Sabana de Bogot,
quienes encontraron un 39,49% de Staphylococcus epidermidis en mastitis subclnica.
Estudios en otros pases tambin reportan altas tasas de aislamiento de estos
microorganismos: 23.4% (Saxena y cols, 1993) y 41% (Fabre y cols, 1997) en casos de
mastitis subclnica.
112

El Streptococcus uberis fue aislado del 2.7% de las muestras de leche, valor similar al
reportado por Gmez y cols en 1987 (2.5%) para la Sabana de Bogot, pero inferior a los
reportados en otros pases por Saxena y cols en 1993 con una prevalencia del 9.6% o por
Fabre y cols en 1997 con un 12% para casos de mastitis subclnica, por lo cual este
patgeno se podra considerar de baja importancia en la Sabana.
La prevalencia de bacilos Gram positivos fue de 4.05% tanto para el Corynebacterium
bovis como para el Actynomices pyogenes, nivel superior al reportado en la Sabana de
Bogot por Gmez y cols en 1987 para Corynebacterium spp (2.52%), pero similar a lo
reportado en otros pases por Langoni y cols en 1991 con un 5.5% de aislamientos de
Corynebacterium bovis a partir de casos de mastitis subclnica o un 5.5% de aislamientos
de Corynebacterium spp en los estudios de Saxena y cols en 1993 y Tuteja y cols en el
mismo ao. Para el Actynomices pyogenes, no se han encontrado reportes de prevalencia en
mastitis subclnica.
Los bacilos Gram negativos fueron aislados en un 6.75% de los casos, una baja prevalencia
al compararla con los estudios de Ratnakumar y cols en 1996 (India) con una prevalencia
de mastitis subclnica por bacilos Gram negativos durante el inicio de la lactancia del
22.6%
El Citrobacter freundii, aislado en este estudio, es un bacilo Gram negativo de la familia de
las enterobacterias (Prescott y cols, 1990), ha sido reportado anteriormente como causante
de mastitis en bovinos aunque su aislamiento es poco comn (Blowey y Edmonson, 1995;
Sandholm, 1995). Andrade y cols (1986) en la Sabana de Bogot aislaron al Citrobacter
spp a partir de una de 242 muestras de leche (0.41%) de vacas con mastitis subclnica.
La Aeromonas hydrophila, es un bacilo Gram negativo cuya principal fuente es el agua, ha
sido hallada virtualmente en todos los ambientes acuticos. Siendo patgeno para reptiles,
anfibios y peces, ha sido reconocida como un importante patgeno humano; tambin se ha
asociado a un caso de septicemia en un perro, un aborto bovino y se ha encontrado en
113

alimentos frescos de origen animal como la leche cruda. Aunque fue aislado en este estudio
no se han encontrado reportes de casos de mastitis por este microorganismo en ninguna
especie animal (Wohlgemut y cols, 1972; Pierce y cols, 1973; Palumbo y cols, 1989;
Prescott y cols, 1990; Hernndez y Rodrguez, 1997). Sandholm y cols en 1995 reportan
como especies psicrotrofas a los microorganismos del gnero Aeromonas, los cuales se
multiplican cuando la leche cruda es insuficientemente refrigerada.
Se obtuvieron infecciones mixtas en dos de 105 aislamientos (1.9%), nivel muy inferior en
comparacin a los reportados en la Sabana de Bogot por Andrade y cols en 1986 (81.4%)y
Castelblanco y cols en 1996 (33.33%), mientras que Rodrguez, en 1987 reporta un nivel
ms bajo (5%). En India, Saxena y cols en 1993, reportan un 78.3% de infecciones mixtas
por dos o tres microorganismos. Es probable que aislamientos con ms de dos
microorganismos sean el resultado de la contaminacin de las muestras, al igual que
aquellos cultivos mixtos entre microorganismos contagiosos y medio ambientales como los
coliformes.
El hecho de no obtener aislamientos en el 7.6% de las muestras es similar a lo reportado por
Tuteja y cols (1993) en la India (7.7%), pero difiere de los reportes de Rodrguez en 1987
(15%) para la Sabana de Bogot, y para otros pases por Guterbock en 1992, Moren y
Constable en 1998 (15 a 40%) y por Detilleux y cols en 1995 (72%) para mastitis clnicas y
subclnicas. Las variaciones en estos reportes se pueden deber a: (1) La presencia de
infecciones con curacin bacteriolgica ya sea espontnea o por tratamiento con
persistencia de altos CCS, (2) La limitada eliminacin del patgeno en leche en el momento
de tomar la muestra (3) La eliminacin cclica de microorganismos como el
Staphylococcus aureus), (4) El origen no infeccioso de las mastitis (Schalm, 1977;
Sandholm y cols, 1995; Gilson, 1995; Sumano y cols, 1996; Pyrl y Pyrl, 1997).
Adicionalmente, el menor nmero de no aislamientos en este estudio se puede explicar por
la inclusin de cuartos con recuentos celulares mayores a un milln, lo que aumenta el
acuerdo diagnstico entre el CCS y el aislamiento, ya reportado anteriormente por autores
como Dohoo y cols en 1981 (citado por Erskine en 1992), quienes predijeron correctamente
el estado de infeccin en el 85.8% de las vacas por medio de altos recuentos celulares.
114

Debido a que no se encontraron diferencias significativas en las tasas de curacin dentro de

cada grupo de tratamiento a diferentes das de muestreo, se discutirn las tasas de curacin
obtenidas al da 35 postratamiento. Vale la pena aclarar que no hay estudios que presenten
tasas de curacin nicamente por CCS, aunque autores como Sears y cols en 1993 reportan
el empleo de este mtodo en la evaluacin de protocolos teraputicos durante la lactancia y
el periodo seco, por lo cual los resultados de este estudio se comparan principalmente con
datos de microbiologa y conductividad elctrica de otros estudios.
En el grupo Control se obtuvo al final del estudio la recuperacin de uno de 34 cuartos
(CCS menor a 250000), lo cual equivale a una tasa de curacin del 2.9%, siendo muy baja
para las reportadas en otros estudios. Dinsmore y cols en 1995 encontraron una tasa de
curacin espontnea por microbiologa del 32.2%, hasta por siete semanas de seguimiento
durante la lactancia, en cuartos con mastitis crnica por Staphylococcus aureus; esta tasa de
curacin espontnea puede ser el resultado del manejo aceptable de los hatos estudiados
(CCS en tanque de 200000 a 300000 clulas).
Wilson y cols en 1999 reportan una tasa de curacin espontnea del 65% (por bacteriologa,
durante un mes de seguimiento) en un estudio retrospectivo de 9007 casos de mastitis
subclnica, esta tasa de curacin puede deberse a que al evaluar la efectividad de un
tratamiento con un solo cultivo se corre el riesgo de obtener un alto nmero de falsos
negativos por el patrn de eliminacin cclico de microorganismos como el Staphylococcus
aureus (Vestweber y Leipold, 1993; Dinsmore y cols, 1995).
En el grupo Mastipis-H, 3 de 32 cuartos (9.37%) presentaron CCS inferior a 250000 clulas
a los 35 das de finalizado el tratamiento (dos dosis con diferencia de 24 horas),
considerndose una muy baja tasa de curacin. En un estudio realizado por Laboratorios
Socolour en Blgica en 1998, de 17 animales con CCS mayores a un milln, se observ en
8 de ellos (47%) una reduccin del CCS por debajo de 250000 clulas a las tres semanas de
finalizado el tratamiento (cuatro dosis con diferencia de 12 horas). Los porcentajes de
reduccin en los promedios de CCS a los 21 das postratamiento fueron de 33.3% para este

115

estudio contra 75.2% para el estudio en Blgica. Las diferencias en los resultados pueden
deberse al nmero e intervalo de dosis empleadas en cada estudio.
Otros estudios han encontrado tasas superiores de curacin en casos de mastitis subclnica
tratados con Mastipis-H (una dosis), entre ellos el estudio realizado por el Laboratorio
Socolour (1998) en el cual se encontraron tasas de curacin del 93.3% (28/30) de los
cuartos por conductividad elctrica a los 28 das postratamiento. La explicacin a estos
resultados puede ser dada por Woolford y cols en 1998, quienes describen un incremento
del 15 al 50% en los valores de conductividad elctrica contra un aumento de 10 veces en el
CCS para casos de mastitis, lo que podra sugerir una mayor sensibilidad del CCS para
evaluar la presencia de inflamacin en la ubre, por lo cual es probable que la tasa de
curacin evaluada por conductividad elctrica presente un alto nmero de falsos negativos.
The Institut of Experimental Veterinary Medicine en 1996, encontr una tasa de curacin
del 100% (por bacteriologa) a los das 10 y 21 luego del tratamiento de 17 cuartos (cuatro
dosis de Mastipis-H a intervalo de 12 horas); este porcentaje de curacin no es
comparable con la tasa de curacin de este estudio, pues el aislamiento de microorganismos
a partir de leche puede verse interrumpido si la tasa de su eliminacin es baja (Consejo
Nacional de Mastitis, 1990; Smith, 1996) a pesar de la persistencia de inflamacin y por lo
tanto de un alto CCS.
No se han encontrado ms reportes de la evaluacin de este producto en el tratamiento de
mastitis subclnica, aunque se cuenta con reportes en mastitis clnica, con curaciones por
bacteriologa del 91.11% para cuartos (Laboratorio Socolour, 1998) y en mastitis aguda y
subaguda con curaciones por bacteriologa del 72.2% y 81.3% respectivamente (Institut of
Experimental Veterinary Medicine).
En Colombia, el estudio de Sarmiento y cols en 1995 evalu la efectividad del MastipisH en el tratamiento de mastitis con respecto al efecto de antibiticos como eritromicina y
penicilina-noboviocina. Al evaluar los CCS por microscopa no se encontraron diferencias
significativas entre los grupos de tratamiento, nicamente en los CCS de los das 4 y 7
116

postratamiento para los animales tratados con Mastipis-H (Sarmiento y cols, 1995). En
este estudio, los resultados obtenidos para el grupo Mastipis-H, en CCS y tasas de curacin,
no difieren significativamente entre los diferentes das de muestreo, a excepcin de los CCS
de los das 14 y 28 por Kruskall Wallis y del da 28 por Anlisis de Varianza; hallazgos que
difieren de los reportados anteriormente por Sarmiento y cols en 1995.
A pesar de que estudios como el del Institut of Experimental Veterinary Medicine en 1996 y
el Laboratorio Socolour en 1998 reportan altas tasas de curacin por bacteriologa,
conductividad elctrica y clulas somticas para mastitis clnica y subclnica, y de que el
estudio de Sarmiento y cols en 1995 encontr inhibicin in vitro para Staphylococcus
aureus, Streptococcus agalactiae, Escherichia coli y Klebsiella oxytoca, el estudio actual
no encuentra beneficios en el tratamiento de mastitis subclnica (dosis de dos jeringas de
Mastipis-H con intervalo de 24 horas) al evaluar la terapia por el nmero de cuartos con
CCS menor a 250000 al da 35 postratamiento
Aunque los practicantes de la medicina homeoptica postulan como mecanismo de accin
de sus medicamentos la estimulacin de los mecanismos de defensa, no reportan estudios
cientficos acerca de este hecho, solo recientemente algunos autores han hecho esfuerzos
por profundizar en el conocimiento de los medicamentos homeopticos, es as, que se
encuentran artculos que evalan las propiedades de la familia Echinacea (uno de los
componentes del Mastipis-H ) sobre el sistema inmune, encontrando efectos como
aumento de la quemiluminiscencia e induccin del interfern (Schranner y cols, 1989;
Skwarek y cols, 1996; Sestakova y Turek, 1999), por lo cual es probable que estos y otros
componentes de los medicamentos homeopticos puedan ejercer efectos importantes sobre
el sistema inmune en la terapia de enfermedades infecciosas, siendo necesarios nuevos
estudios con protocolos o productos diferentes, empleando el mtodo cientfico.
En el grupo Inmunocel, 5 de 35 cuartos (14.3%) presentaron CCS inferiores a 250000
clulas/ml de leche al da 35 de iniciado el tratamiento, luego de dos dosis de 15 ml
administradas con intervalo de 14 das. Laboratorios Calier realiz un ensayo similar al
actual pero evaluando la leche a nivel de tanque, el promedio del CCS pretratamiento de las
117

9 fincas evaluadas fue de 560555 clulas/ml mientras que para el da 60 postratamiento, el

CCS en tanque haba disminuido a 301111 clulas/ml (reduccin del 46.3%) luego de tratar
a los animales con dos dosis de Inmunocel, cada una de 15ml, a intervalo de 30 das
(adicionalmente, los animales fueron tratados con Decomoton al iniciar el estudio para
estimular la eliminacin de las clulas somticas). En el estudio actual se encontr una
reduccin en las medias de los CCS del 64%, que aunque siendo mayor a la encontrada en
el estudio de Laboratorios Calier, no son comparables, pues ya que las clulas experimentan
dilucin en la leche, el verdadero efecto del producto se podra enmascarar en la leche de
tanque segn el nmero de vacas tratadas en el hato y del volumen de leche producido por
estos animales.
En este estudio, los CCS de los cuartos tratados con Inmunocel y recuperados de mastitis
fueron menores a los de los cuartos no tratados y recuperados, este mismo comportamiento
se encontr en el estudio de Dinsmore y cols en 1995, quienes evaluaron una preparacin
de Propionibacterium acnes en casos crnicos de mastitis por Staphylococcus aureus,
aunque al final del estudio no se encontraron diferencias significativas entre el grupo
control y el grupo tratado. El estudio de Timms y cols en 1994 reporta igualmente que no
hay diferencias significativas entre animales tratados y controles, aunque el grupo tratado
con Propionibacterium acnes present menores CCS a los das 7 y 14 postratamiento. Este
hecho junto con la similitud en el comportamiento de los CCS entre los grupos Control e
Inmunocel (grfica 5) y en las reducciones de los CCS del da 2 al 35 (61% grupo Control
y 64% grupo Inmunocel, a diferencia del grupo Mastipis-H con un 37%), son evidencia de
una reaccin semejante en las ubres de las vacas controles y en las tratadas con
Inmunocel, aunque en este ltimo grupo se observa una tendencia a presentar una mejor
respuesta expresada en: menores CCS al da 35 (133560 clulas / ml de leche), mayor
nmero de cuartos recuperados al da 35 postratamiento (14.3%), menor nmero de cuartos
que desarrollaron mastitis clnica a lo largo del estudio (4 cuartos) y menor nmero de
cuartos con fibrosis al da 35 (8 cuartos).
Romeo y cols en 1998, desarrollaron un estudio en ovejas con la aplicacin mensual de
2.5ml de Inmunocel durante un ao, al final de la evaluacin encontraron una
118

disminucin en la media de los CCS del 19%, reduccin significativa por la prueba de
Duncan pero no as por el Anlisis de Varianza, adicionalmente encontraron un menor
nmero de infecciones en los animales tratados a diferencia de los no tratados. Los
resultados del estudio de Romeo y cols son similares a los de este estudio donde tambin se
observan reducciones en los CCS, pero sin diferencias significativas entre los grupos de
tratamiento.
El tratamiento de mastitis subclnica con Propionibacterium acnes no ha mostrado efectos
significativos durante la lactancia (Dinsmore y cols, 1995; Timms y cols, 1994) o solo ha
dado mnimos beneficios durante la terapia de secado (Hogan y cols, 1994). Igualmente el
uso de LPS de bacterias Gram negativas durante el periodo seco (Nickerson y cols, 1992)
no ha mostrado resultados significativos. A pesar de esto, las investigaciones del uso de este
tipo de inmunoestimulantes en mastitis continan debido a los resultados positivos que se
han reportado (Markowska y cols, 1991; Zaugg y Lincoln, 1995; Zingher, 1996) en el
tratamiento de otras enfermedades infecciosas en bovinos, cerdos, felinos, caninos, equinos
y otras especies animales, obteniendo en algunos casos beneficios de importancia clnica
Aunque se observan reducciones importantes en los CCS en los grupos Control (61%) e
Inmunocel (64%), a diferencia del grupo Mastipis-H (34%); las tasas de curacin (2.94%,
14.28% y 9.37% respectivamente) no se consideran aceptables. Adicionalmente, con la
escasa diferencia encontrada entre las reducciones de las medias de los CCS para los grupos
Control e Inmunocel (61 a 63% respectivamente), no se considera viable econmicamente
el tratamiento de casos de mastitis subclnica como los incluidos en este estudio.
Al comparar los CCS de los grupos (Control, Mastipis-H e Inmunocel) por las pruebas de
Kruskall Wallis y Anlisis de Varianza, y las tasas de curacin por la prueba de Chi
cuadrado, no se encontraron diferencias significativas (P<0.05) entre tratamientos.
Cuando se proyect este estudio, autores como Kirk en 1984, Sears y cols en 1993, Steward
y cols en 1995; Crist y cols en 1997 y Bailey y Roberson en 1999, daban informacin sobre
la viabilidad del CCS como criterio para evaluar la efectividad de protocolos teraputicos
119

para mastitis, pero los resultados encontrados parecen concordar ms con autores como
Philpot en 1979, Gilson en 1995 y Pyrl y Pyrl en 1997 quienes reportan persistencias
por semanas y an meses de altos recuentos celulares, segn el microorganismo causante de
la mastitis, el dao tisular ocasionado y la respuesta del animal, factores que hacen poco
prctico su empleo. Schalm en 1977 encontr que la migracin de leucocitos continua por
largos periodos despus de que el irritante ha sido neutralizado o destruido, siendo posible
que estas clulas y sus productos sirvan como quemotcticos que perpetan el proceso
inflamatorio hasta que los inhibidores de la inflamacin predominan. Adicionalmente,
Shultz en 1977 y Smith en 1997 aclaran que la presencia de mastitis evaluada nicamente
por clulas somticas, conlleva a apreciaciones errneas por la naturaleza dinmica de este
componente de la leche, hallazgo confirmado en este estudio por las grandes fluctuaciones
observadas en los CCS semana a semana.
El empleo del CCS electrnico debera combinarse con el aislamiento microbiolgico en la
evaluacin de protocolos teraputicos, pues aunque Dohoo y cols en 1981 predijeron
correctamente el estado de infeccin en el 85.8% de las vacas por medio del CCS (Erskine,
1992), demostrando ser una prueba confiable, The National Mastitis Council en 1987 y
1990 encontraron aproximadamente un 90% de correlacin entre muestras colectadas
consecutivamente del mismo cuarto y entre interpretaciones del mismo cultivo por
diferentes tcnicos, indicando la superioridad de esta prueba en el diagnstico de infeccin
intramamaria, siendo este parmetro el de mayor inters para evaluar protocolos
teraputicos, pues a nivel de hato se presenta un mayor beneficio al eliminar las infecciones
que al disminuir los conteos celulares, ya que se reduce el riesgo de nuevas infecciones.
De 30 de los cuartos a partir de los cuales se aisl Staphylococcus aureus, 28 continuaron
con CCS mayores a 250000 (10 de ellos presentaron fibrosis al final del estudio junto con 2
de 7 cuartos infectados por Staphylococcus spp), confirmando los reportes de Degraves y
Fetrow, 1993; Vestweber, 1993; Rebhum y cols, 1995 y Cullor, 1993, quienes aclaran la
tendencia de este microorganismo a generar cronicidad, momento en el cual se dificulta an
ms su eliminacin.

120

De 8 cuartos positivos a Streptococcus dysgalactiae, 6 permanecieron con mastitis (tres de

estos cuartos desarrollaron fibrosis). De 16 cuartos infectados por Streptococcus spp, 14
permanecieron con conteos superiores a 250000 clulas (en 6 de ellos se detect fibrosis del
parnquima al final del estudio). En el caso del Streptococcus agalactiae, ningn cuarto se
recuper (6 de 12 cuartos afectados con este patgeno desarrollaron fibrosis). Estos
hallazgos corresponden con la descripcin de Sandholm, 1995; Rebhum, 1995 y Blowey y
Edmonson, 1995, quienes clasifican a las mastitis por Streptococcus contagiosos como de
curso crnico con cambios fibrticos del parnquima glandular.
Dos de 3 cuartos infectados con Actynomices pygenes se recuperaron del episodio de
mastitis, resultado no esperado segn la descripcin de Gutterbock en 1992, quien encontr
que este patgeno es refractario a la terapia, por lo cual recomienda el descarte de los
animales infectados.
Se aislaron bacilos Gram negativos en cinco cuartos, de los cuales uno present CCS
inferior a 250000; uno de los cuatro cuartos restantes desarroll fibrosis en la glndula
mamaria, pudiendo ser el resultado de la mastitis crnica ocasionada por el bacilo (Schalm ,
1977; Pyrl y Pyrl, 1997) o por una nueva infeccin con microorganismos
contagiosos obtenida a travs del estudio. La baja tasa de curacin para bacilos Gram
negativos puede ser el resultado de infecciones posteriores de estos cuartos con patgenos
contagiosos, ya que autores como Cullor en 1993, Kirk y cols en 1994 y Sumano y cols en
1996 reportan que la recuperacin espontnea es comn en casos de mastitis por coliformes
y su forma crnica es muy rara, aunque Sears y cols en 1993 reportan que un 13% de
infecciones por coliformes se prolongan por ms de 100 das.
El valor del Odds Ratio (menor a 1), indica que las variables: (1) Presentar mastitis de tipo
medioambiental o sin aislamiento, (2) Sellar los pezones con productos yodados,
(3) Cortar el pelo de colas y ubres, (4) Lactancias menores o iguales a 90 das y
(5) Presentar uno o dos partos, son efectos protectores ante la presentacin de altos conteos
celulares en la leche. Estos resultados coinciden con los reportes de autores como Roberson
y cols en 1994, segn los cuales hay un riesgo de presentacin de mastitis 3.34 veces mayor
121

en cuartos cuyos pezones han sido colonizados por Staphylococcus aureus a diferencia de
pezones no colonizados, demostrando con esto la importancia del empleo de un antisptico
de efectividad comprobada y en la forma adecuada luego del ordeo, para eliminar los
microorganismos presentes en la piel del pezn.
La desinfeccin de los pezones al final del ordeo disminuye los casos de mastitis
ocasionados principalmente por microorganismos contagiosos, pero se ha reportado una
disminucin en la incidencia de casos de mastitis por microorganismos medioambientales,
principalmente por coliformes, cuando se emplea el cido dodecil bencil sulfonado y
algunos selladores de barrera (Pankey y cols, 1984), as, la principal accin de los
selladores sobre los microorganismos contagiosos demuestra el efecto "protectivo" de esta
prctica ante la presentacin de alta celularidad en la leche, pues este tipo de
microorganismos, principalmente el Streptococcus agalactiae, genera los mayores
aumentos en los recuentos celulares (Schalm, 1971 y 1977; Schultz, 1977; Erskine y cols,
1987; Rebhum y cols, 1995; Blowey y Edmonson, 1995; Smith, 1997; Keefe, 1997).
Lactancias menores a 90 das tambin tienen un efecto "protectivo" sobre la presentacin
de CCS mayores a 250000. Schalm, 1977; Blood y Radostits, 1992 y Sandholm y cols,
1995 describen la dinmica de las concentraciones celulares en leche a travs de la
lactancia: El recuento celular en leche es alto inmediatamente despus del parto, disminuye
en la segunda semana y se mantiene as hasta la mitad de la lactancia, a partir de la cual
incrementa cuando la produccin de leche es menor a 4 Kg; Laevens y cols en 1997 aclaran
que esta influencia del periodo de lactancia sobre el CCS es clara en vacas con mastitis,
pero no en animales bacteriolgicamente negativos.
La carga de microorganismos medioambientales puede ser reducida si se asegura un
ambiente limpio y seco para los animales entre y durante ordeos (Bushnell, 1984; Pankey
y Drechler, 1993; Kirk y cols 1994; Hurley y Morin, 1999). Cullor en 1993 reporta un
incremento en el nmero de casos clnicos originados por coliformes cuando hay un nivel
igual o mayor a 1 X 106 bacterias/gr en la cama, as, de la misma forma en que la cama
puede favorecer la permanencia de microorganismos medioambientales cerca de la ubre, el
122

pelo de la cola y las ubres puede aumentar el nmero de patgenos que se encuentran en
estrecho contacto con la ubre, de hecho si se evita el acumulo de suciedad en estas partes,
se puede disminuir la suciedad de los pezones y/o facilitar su limpieza y desinfeccin
durante el ordeo.
A un mayor nmero de partos y/o la edad de las vacas, los conteos celulares tienden a
incrementar, ya que como resultado de un mayor tiempo de exposicin a microorganismos
patgenos, estos animales pueden tener ms altas tasas de infeccin. Autores como Blowey
y Edmonson en 1995, reportan como otras causas de este fenmeno el dao gradual en los
conductos de los pezones y un debilitamiento en las respuestas inmunes de vacas con un
mayor nmero de lactancias.
Bushnell en 1984 reporta la eliminacin de coliformes de origen fecal, de suelos y aguas,
Streptococcus spp, Bacillus spp, levaduras, hongos y Staphylococcus epidermidis con
procedimientos adecuados de higiene antes del ordeo (lavado de la ubre y/o presellado);
pero estas prcticas pueden convertirse en un arma de doble filo si no se realiza en la forma
adecuada, pues cuando no se secan bien los pezones, la humedad presente en ellos
contamina las pezoneras y las manos de los ordeadores, facilitando la diseminacin de
microorganismos entre cuartos y entre vacas. Los pezones humedos tambin facilitan el
resbalamiento de las pezoneras, aumentando el riesgo de infeccin de la ubre a travs del
impacto de leche ( Consejo Nacional de Mastitis, 1990; MMMC, 1993)
Erskine y cols en 1987 y Barkema y cols en 1998 encontraron que las prcticas de manejo
asociadas con altos CCS son: el sellado, la duracin del tratamiento de mastitis clnica, no
secar despus de presellar, el tratamiento de vaca seca, la higiene y la nutricin, hallazgos
que coinciden con los de este estudio.
Las tasas de curacin de mastitis tambin se ven afectadas por factores como la respuesta
individual en animales, las variaciones entre hatos, el tipo de microorganismo envuelto, su
localizacin en el tejido, el grado de inflamacin de la glndula mamaria, la duracin de la
infeccin y muchos otros factores an no definidos (Cullor, 1993). En este estudio adems
123

de los factores vistos anteriormente, hay otros que pudieron afectar la tasa de cuartos
recuperados, entre los que se encuentran el criterio de inclusin segn el cual se manejaron
cuartos con CCS mayores a un milln (siendo mastitis de menores tasas de curacin,
Vestweber, 1993) y la definicin de mastitis por CCS (cuartos con CCS superior a 250000).
El estudio actual estableci una sensibilidad del 87.99% y una especificidad de 78.57%
para la prueba de CMT con referencia en el CCS (prueba de oro). Glvez y cols en 1998,
reportan una sensibilidad del 45.79% y una especificidad del 78.86% para la prueba de
CMT con referencia al aislamiento microbiolgico, razn por la cual la sensibilidad
disminuye, puesto que no todos los cuartos infectados por un microorganismo presentan un
recuento de clulas somticas identificable por CMT (Vestweber y Leipold, 1993;
Sandholm, 1995), es por lo tanto entendible encontrar una mayor sensibilidad al comparar
una prueba diagnstica (CMT) con respecto a otra (CCS por Counter Coulter) que
cuantifica el mismo parmetro aunque de forma diferente y no enfrentando dos pruebas que
evalan parmetros diferentes (celularidad y aislamiento microbiolgico) . Este mismo
comportamiento se observa al evaluar el acuerdo entre dos pruebas diagnsticas, siendo de
0.61 (valor Kappa) para las pruebas de CMT y CCS electrnico (calculado en este estudio)
a diferencia de 0.23 para las pruebas de CMT y aislamiento microbiolgico (Glvez y cols,
1998).
Otra razn por la cual se obtuvieron estas tasas de sensibilidad y especificidad es porque se
enfrentaron la positividad del CMT (valores 1, 2 y 3) contra CCS mayores a 500000 (nivel
que abarca los conteos celulares de estas tres calificaciones del CMT) sin comparar
individualmente cada calificacin del CMT con el rango respectivo de recuento celular.
Las correlaciones de Pearson ofrecieron un acuerdo aceptable entre el CMT y el CCS
electrnico (0.620), resultado que junto con los parmetros de sensibilidad y especificidad,
avalan el empleo del CMT como prueba para diagnstico de mastitis en campo, aclarando
que se requieren pruebas adicionales para tomar decisiones acerca de tratamientos o
descartes debido a que la subjetividad de la prueba puede conllevar a subestimar o
sobrestimar el nivel de mastitis en un hato (Schalm, 1971 y 1977; Rebhum y cols, 1995).
124