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Manual de Prcticas de
Laboratorio Clnico 2012 2013
Directorio
Lic. Adriana Del Pilar Ortiz Lanz
Rectora
Dra. Xchitl Georgina Poot Lpez
Directora
M.A.D. Taymi Esperanza Padilla Rodrguez
Secretaria Acadmica
Dr. Eduardo Gabriel R de la Gala Guerrero
Coordinador de Carrera
Q.F.B. Miguel Pia Quijano M. en F
Responsable Laboratorio Clnico
PRLOGO
El nico medio para establecer un diagnstico correcto es practicar una exploracin del
enfermo con un mtodo perfecto. Slo as cubriremos adecuadamente las cuatro etapas
fundamentales del diagnstico. Es preciso que aclaremos, paso a paso, estas etapas,
indagando ante todo el trastorno funcional (etapa funcional), para localizar luego el rgano
enfermo (etapa anatmica); despus precisaremos el mecanismo productor del trastorno
(etapa patognica). Para ello disponemos de tres mtodos de exploracin: el interrogatorio,
la exploracin objetiva del enfermo y las exploraciones complementarias. A los dos
primeros se les considera como dos fases del mtodo clnico. Los segundos son mtodos de
anlisis fisicoqumicos, aplicados unos directamente al enfermo y otros a sus humores o
secreciones. A estos ltimos se les acostumbra calificar como mtodos de laboratorio.
En muchsimas enfermedades, los exmenes de laboratorio son decisivos para el
diagnstico, hasta tal punto que el desconocimiento de los datos de auscultacin sera un
defecto tan grande como el desconocimiento de los datos de auscultacin de un cardaco, o
de los interrogatorios de un dispptico. Como todos los signos de exploracin, los datos de
laboratorio tienen su jerarqua y es preciso situarlos en el plano que les corresponde al
hacer el razonamiento diagnstico. Lo importante es recordar que ese diagnstico jams
ser la suma resultante de todos ellos, aunque a estos se aadan, como sumandos, los datos
de exploracin clnica. Ello es as porque el diagnstico no es una suma, sino una sntesis.
Lo primero lo podra hacer una mquina, lo segundo slo puede hacerlo el mdico. Para
ello el mdico necesita tener sentido clnico, cosa que slo se puede adquirir con la
experiencia propia. Por eso, nosotros solemos decir que el diagnstico es una sntesis
plena de sentido. Esta sntesis ser tanto ms perfecta cuantos ms datos se hayan
analizado para llevarla a cabo. Entre estos datos, los de laboratorio cumplen un papel
importantsimo y es necesaria su ordenacin adecuada para su perfecta aplicacin.
M. Soriano. Jimnez.
REGLAMENTO DE LABORATORIO
1. Asistir con puntualidad (TOLERANCIA DE 10 min.)
2. Usar bata, lentes de seguridad, guantes y cubre bocas, siempre que se acuda al
laboratorio a realizar prcticas.
3. Leer las instrucciones de la prctica antes de asistir al laboratorio.
4. Seguir las recomendaciones dadas por el maestro, a fin de obtener un mejor resultado
de la prctica y para evitar prdida de tiempo, desperdicio de materiales y reactivos o
bien algn accidente.
5. Las prcticas no son sustituibles, reprogramables o recuperables por
inasistencia.
6. Traer la (las) muestra (s) biolgica (s) por estudiar.
7. Evitar los juegos y bromas en el interior del laboratorio.
8. Todo material roto por descuido, deber ser repuesto por el causante.
9. No introducir alimentos en el laboratorio.
10. Aplicar las consideraciones generales establecidas para el tratamiento de muestras
de desecho y lavado de materiales, (anexos).
11. Aplicar las normas de separacin y envasado de residuos peligrosos biolgico
infecciosos de acuerdo a sus caractersticas fsicas y biolgicas infecciosas, (anexos).
12. Al trmino de la prctica, limpiar y ordenar las mesas, materiales y bancos.
NOTA: EL ALUMNO QUE NO SE SUJETE AL PRESENTE REGLAMENTO SERA
SANCIONADO O EN SU DEFECTO, EXPULSADO DEL LABORATORIO
TEMPORAL O DEFINITIVAMENTE.
.
Contenido
BIOMETRA HEMTICA: ................................................................................................. 1
GRUPOS SANGUINEOS Y RH ......................................................................................... 11
TIEMPO DE PROTROMBINA (TP) ................................................................................. 16
TIEMPO PARCIAL DE TROMBOPLASTINA (TPT) ............................................................. 19
DETERMINACIN DE GLUCOSA .................................................................................... 21
DETERMINACIN DE CREATININA Y DEPURACIN DE CREATININA ............................... 24
DETERMINACIN DE UREA ......................................................................................... 29
LDL-COLESTEROL, HDL-COLESTEROL ............................................................................. 32
DETERMINACIN DE COLESTEROL TOTAL ..................................................................... 35
DETERMINACIN DE TRIGLICERIDOS ............................................................................ 37
DETERMINACIN DE ASPARTATO AMINOTRANSFERASA (AST) ..................................... 40
DETERMINACIN DE ALANINO AMINOTRANSFERASA (ALT) ......................................... 42
DETERMINACIN DE BILIRRUBINA TOTAL Y DIRECTA .................................................. 44
FOSFATASA ALCALINA ................................................................................................. 47
PROTENAS TOTALES Y ALBMINA:.............................................................................. 49
REACCIONES FEBRILES ................................................................................................. 53
ANTIESTREPTOLISINAS................................................................................................. 56
DETERMINACIN DE PROTEINA C REACTIVA .............................................................. 58
DETECCIN DE FACTOR REUMATOIDE.......................................................................... 60
PRUEBA DE EMBARAZO ............................................................................................... 62
COPROPARASITOSCPICO ........................................................................................... 66
EXAMEN GENERAL DE ORINA....................................................................................... 76
ANEXOS....................................................................................................................... 94
I.- CONSIDERACIONES GENERALES PARA EL TRATAMIENTO DE MUESTRAS DE DESECHO Y
LAVADO DE MATERIALES. .................................................................................................... 94
BIOMETRA HEMTICA:
INTRODUCCIN:
La sangre esta formada por dos partes fundamentales, una parte lquida constituida por el
plasma y otra parte slida que corresponde a los elementos figurados suspendidos en ella,
dichos elementos son los eritrocitos, leucocitos y plaquetas, cuando la sangre se coagula, el
lquido que queda despus de separa el cogulo, recibe el nombre de suero. Cuando se
utiliza anticoagulante la parte lquida que se separa de los elementos celulares se denomina
plasma, la diferencia fundamental entre plasma y suero, consiste en que el suero pierde el
fibringeno proteico que se convierte en filamento insoluble de fibrina en el curso de la
coagulacin.
La biometra hemtica es una ciencia de los mtodos estadsticos aplicada a estructuras y
funciones de los seres vivos, al recuento y medicin de las clulas, especficamente las
sanguneas.1,2
Fundamentalmente este estudio se halla divido en dos partes:
I. FRMULA ROJA:
Esta se halla conformada de los siguientes parmetros:
Hb. La hemoglobina, componente principal de los glbulos rojos, es una protena
conjugada que sirve de vehculo para el transporte de oxgeno y de carbono.
Hto. El hematocrito representa la proporcin de glbulos rojos a plasma en la sangre
circulante y se expresa en volmenes por ciento. Aproximadamente, la cifra del
hematocrito nos indica el nmero de hemates por milmetro cbico para lo cual se le suma
el 10% de su valor y se expresa en millones. El valor del hematocrito depende, en primer
lugar, del nmero de hemates circulantes, pero tambin de su forma y tamao.
VCM. El volumen corpuscular medio. Para conocer las dimensiones, en el espacio, de los
eritrocitos, no basta la determinacin del tamao de los hemates por la medicin
microscpica de su dimetro, dadas la morfologa discoidea de estas clulas y las
variaciones de unas a otras. Por lo que se recurre al VCM que es el volumen medio de los
hemates individuales en micras cbicas (3) o femtolitros (fl).
CCMH. Es la concentracin de hemoglobina por eritrocito en %.
VG. El contenido hemoglobnico de los hemates puede expresarse de diversas formas. El
ms sencillo y conocido es el valor globular o cromemia (CI= ndice de color).
HCM. La hemoglobina corpuscular media, es el contenido (peso) de hemoglobina en un
hemate individual medio, en microgammas () o picogramos (pg).
RDW ADE. La amplitud de distribucin eritrocitaria es el recuento diferencial de
tamaos y grado de dispersin de los hemates.1,2,3,4
SEMIOLOGA MORFOLGICA ERITROCITARIA.4
1. Poiquilocitosis: Desigualdad de forma, que no es circular, sino piriforme o abigarrada
entre los hemates. Suele aparecer en las anemias hipocromas y en sndromes
mieloproliferativos (mielosclersis primaria con metaplasia mieloide), y en el cncer
metastsico seo.
OBJETIVO:
Realizar la frmula roja y la determinacin adecuada de los parmetros que la conforman:
Hemoglobina (Hb), hematocrito (Hto), Volumen corpuscular medio (VCM), Concentracin
corpuscular media de hemoglobina (CCMH), Valor globular (VG), Hemoglobina
corpuscular media (HCM), Amplitud de distribucin eritrocitaria (RDW ADE), y
establecer la relacin de sus valores con su importancia clnica.
MATERIAL Y EQUIPO:
Jeringa con aguja hipodrmica de 3 mL.
Torundas de algodn
Alcohol desnaturalizado
Tubos de 13 x 100mm.
Tapones
Gradilla
Cnulas
Tubos de Wintrobe
Pipeta de Sahl
Boquillas
Gasas
E.D.T.A.
Cianometahemoglobina
Sangre venosa anticuagulada. (Se extraer en el Laboratorio)
Centrfuga
Espectrofotmetro
PROCEDIMIENTOS:
Toma de muestra. Extraer aproximadamente de 3-5mL de sangre (ver anexos) y depositar
en un tubo de ensayo con EDTA, mezclar suavemente.
a) Determinacin de hemoglobina.
1. Con ayuda de una boquilla llenar una pipeta de Sahl hasta la marca de 20 cmm. con
sangre venosa previamente anticuagulada y mezclada. (no deben formarse burbujas de
aire).
2. En un tubo de ensayo con 5 mL de cianometahemoglobina diluir la muestra de sangre de
forma homognea.
3. Dejar en reposo durante 10min. y leer en el espectrofotmetro a 540 nm. Ajustando a
100% de transmitancia cero de absorbancia con solucin de cianometahemoglobina.
VALORES DE REFERENCIA:
Hombres : 13.2 17 g/100mL
Mujeres : 12 16 g/100mL
Promedio general: 14.5 g/100mL
VALORES DE REFERENCIA:
Normal de 32 a 36 %. En las anemias ferroprivas se encuentran valores bajos (de 20
30%), en las anemias macrociticas la CCMH es normal o ligeramente baja.
f) Hemoglobina Corpuscular Media.
Se determina por clculo mediante el empleo de la frmula siguiente:
HCM =
Hemoglobina
------------------------------------------------------------------------- x 100
Dos primeras cifras del recuento de hemates
VALORES DE REFERENCIA:
Normal de 27 33 pg.
Las anemias hipocromas (ferropenicas, etc.) ofrecen valores inferiores a 27 y las
hipercromas, superiores a 32 (megalocitarias: perniciosa y otras macrocitarias).
g) Valor globular.
Se determina por clculo mediante el empleo de la frmula siguiente:
VG =
Hemoglobina encontrada
--------------------------------Hemoglobina normal
-----------------------------------------# de hemates encontrados
----------------------------------# de hemates normales
VALORES DE REFERENCIA:
Normalmente el VG es 1, con oscilaciones entre 0.9 y 1.1, un volumen VG bajo inferior a
0.9 se observa en las anemias hipocromas y alto superior a 1.1 en las hipercromas,
perniciosas, etc.
h) Amplitud de distribucin eritrocitaria.
Este parmetro puede registrarse con histogramas de recuento diferencial de tamaos y
grado de dispersin con ayuda de modernos aparatos electrnicos. La RDW ADE normal
es de 11.5 14.5 %. La isocitosis y anisocitosis as comprobadas pueden ser un criterio
para el diagnstico hematolgico de las anemias:
CURVA DE PRICE-JONES
Microcitosis
30
%
de
clulas
Isocitosis
20
Macrocitosis
10
4
6
8
10
Dimetro de hemates en m
12
VALORES DE REFERENCIA:
Dimetro promedio de Hemates :
5.5 8.8 m
6 15 m
2 4 m
ADE normal
ADE alta
VCM normal
Enfermedad crnica
Hemorragia aguda
Esferocitosis hereditaria
Anemia sideroblstica
Anemia drepanocitica
Mielofibrosis
VCM bajo
Talasemia minor
HbE
Anemia ferropnica
Hb-H
VCM alto
Talasemia aplsica
Alcoholismo
Sndrome mielodisplsico
II.-FRMULA BLANCA:
Durante las infecciones y en toda reaccin general de agresin, la frmula blanca muestra
variaciones segn la fase en el tiempo, la virulencia del agente y la resistencia del
organismo. Schilling ha establecido una curva leucocitaria biolgica, tpica y comn al
sndrome general parainflamatorio: la primera fase, de lucha, consiste en una leucocitosis
neutrfila, con desviacin a la izquierda (formas inmaduras) y granulaciones txicas;
aneosinoflia y linfo y monopenia. En la segunda fase, de defensa, aparece una monocitosis
y en la tercera, de curacin, una linfocitosis con reaparicin de los eosinfilos. Se apartan
de este patrn determinadas infecciones bacterianas. P.ejm. tifoidea, y la viriasis, que
cursan generalmente con leucopenia.
Tiene inters pronstico seguir la evolucin de la frmula leucocitaria; una leucopenia con
abundantes granulaciones txicas y marcada desviacin a la izquierda en una sepsis o en
otra infeccin habitualmente leucocitaria supone malignidad del proceso.
OBJETIVO:
Aplicar los mtodos de Neubauer y Hemocolorante en una muestra sangunea problema, a
fin de contabilizar glbulos blancos y establecer la diferenciacin celular.
MATERIAL Y EQUIPO:
Jeringa con aguja hipodrmica de 3 mL.
Torundas de algodn
Alcohol desnaturalizado
Tubos de 13 x 100mm.
Tapones
Gradilla
Pipeta de Thoma
Cmara de Neubauer
Boquillas
Portaobjetos
Gasas
E.D.T.A.
Lquido de Turk
Kit de Hemocolrante
Aceite de inmersin
Microscopio
Sangre venosa anticoagulada (se extraer en el Laboratorio)
Contador de clulas
Contador diferencial de clulas
PROCEDIMIENTOS:
a) Recuento de leucocitos.
En el recuento de leucocitos totales no existe distincin entre los cinco tipos de clulas
normales. Para ello se emplea el llamado Reactivo de Turk a base de cido actico glacial,
agua destilada y violeta de genciana . Esta solucin hipotnica tiene por objeto destruir los
eritrocitos. El violeta de genciana permite reconocer fcilmente el lquido, y observar mejor
los glbulos blancos a los que tie ligeramente.
7
1. Con ayuda de una boquilla llenar con sangre la pipeta de Thoma hasta la marca de 0.5 y
limpiar la punta de la pipeta con una gasa para quitar el exceso de sangre. MANTENER EN
POSICIN HORIZONTAL.
2. En rpida posicin vertical, aspirar el liquido de Turk hasta la marca de 11,evitando que
se formen burbujas de aire en la pipeta, y regresar a la posicin anterior.
3. Tapar la pipeta de ambos lados para evitar que salga el contenido y agitar por 2 minutos
para hacer una mezcla homognea.
4. Desechar las dos primeras gotas y la tercera colocarla entre la cmara de Neubauer y el
cubreobjetos.
5. Observar al microscopio con el objetivo seco dbil (10 x /0.22) y contabilizar los
leucocitos en los 16 cuadros (sealado en el esquema) de los 4 cuadrantes de la cmara.
1
2
Observacin del campo
En el microscopio
6. Clculo:
VALORES DE REFERENCIA:
Leucocitos x mm3 : 5 000 a 10 000
portaobjetos
deslizar en
esta direccin
mantener fijo el portaobjetos
Gota de sangre pequea
VALORES DE REFERENCIA:
Neutrfilos segmentados
Neutrfilos en cayado
Esosinfilos
Basofilos
Monocitos
Linfocitos
55 65 %
3 - 5 %0
0.5 4 %
0 - 0.5 %
4 -8 %
25 - 35 %
BIBLIOGRAFA:
1. Todd-Sanford. Diagnstico Clnico por el Laboratorio.6. Edicin 1978. Editorial Salvat.
2. M.J. Lynch. et.al. Mtodos de Laboratorio. 2. Edicin 1977. editorial Interamericana.
3. Marcus A. Krupp.et.al. Manual de Diagnstico Clnico y de Laboratorio. 8.edicin
1985. Editorial Manual Moderno.
4.Alfonso Balcells. Ka Clnica y el Laboratorio 18a. Edicin 1999. Editorial Masson.
10
GRUPOS SANGUINEOS Y RH
INTRODUCCIN
La determinacin del grupo sanguneo a que pertenece el sujeto est indicada,
corrientemente, ante la inminencia de una transfusin sangunea, para evitar accidentes
inmediatos. Hoy se sabe que, adems del sistema ABO, existen otros muchos sistemas
MNSs, P, Q, Lutheran, Kell-Cellano, Lewis, Duffy, Sutter, Kidd y sobre todo, por su
importancia clnica, el Rh- independientes del primero y entre si, de modo que cada
individuo tiene unos caracteres hemticos constitucionales que le son propios y que
dependen de la combinacin gentica de los distintos factores.1,2
El primer sistema de grupos sanguneos se describi al inicio del siglo XIX por Karl
Landsteiner. El observ que los eritrocitos de algunos individuos se aglutinan cuando se
mezclan con el suero de otros, pero no con su propio suero. Mediante esta tcnica de
aglutinacin se calsifican a los eritrocitos individuales en cuatro tipos: A, B, AB, y O. Los
estudios realizados por Landsteiner, llevaron a establecer que solamente se necesitan dos
tipos de antgenos para explicar la presencia de los cuatro grupos sanguneos del sistema.
Los determinantes antignicos de este sistema, son molculas de carbohidratos, ubicados en
la superficie de la membrana eritrocitaria; su especificidad o diferenciacin reside en los
azcares terminales de un oligosacrido. La expresin de los determinantes antignicos
sigue un control gentico, que ocurre a travs de la produccin de enzimas transferasas que
conjugan los azcares terminales a un carbohidrato original. Por tanto, se ha establecido
que genes codifican a dichas enzimas par la manifestacin del antgeno especfico, siendo
los genes allicos A, B y H respectivamente los que determinan la conjugacin de los
azcares. El gen H codifica para la enzima fucosiltransferasa que efecta la adicin de la
fucosa a la cadena precursora y completa la cadena original de la cual se derivan los otros
antgenos.
El gen A codifica a la transferasa que va a conjugar la N-acetilgalactosamina a la cadena
original completa, producindose as antgeno de tipo A. Las transferasas del grupo B
conjugan a la cadena original la galactosa terminal expresando as el antgeno B.
Existe tambin en el sistema el gen O que no produce transferasa por lo tanto no modifica
la sustancia H o cadena original:
GlucNac
Gal
GlcNac
Gal
ANTGENO A
Fuc
11
Gal
Gal
GlcNac
Gal
ANTGENO B
GlcNac
Gal
ANTGENO H
Fuc
Gal
Fuc
12
Naturalmente, esto tiene lugar porque el padre es Rh-positivo, ante la consulta de una
mujer, a resultas de una determinacin prematrimonial de los grupos sanguneos, sobre la
conveniencia eugensica de tal enlace, tngase en cuenta que la concepcin de los hijos que
incurran en la eritroblastosis fetal es slo una posibilidad remota y desde luego dependiente
del carcter homocigtico o heterocigtico del padre. En este ltimo caso, el 50% de los
hijos sern Rh-positivos y, por otra parte, un nmero relativamente pequeo entre los
matrimonios Rh+ /Rh- tienen hijos con eritoblastosis fetal .1,2
El primer hijo suele quedar indemne, y el segundo, aunque sufra la enfermedad, por lo
general sobrevive. Hay casos, sin embargo, en que el primognito nace muerto, lo cual
obedece probablemente a que la madre esta previamente sensibilizada por transfusiones de
sangre del grupo Rh-positivo. Por esto es inadmisible, actualmente, utilizar dadores Rh
positivos para las nias y mujeres antes del climaterio sin averiguacin previa de sus grupos
sanguneos.1,2
El enjuiciamiento serolgico de una gestante requiere, no obstante, ciertas cautelas. Aunque
un ascenso del ttulo de anticuerpos Rh en los ltimos meses del embarazo corresponde
verosmilmente a la incompatibilidad maternofetal, puede tratarse todava de una reaccin
inespecfica, anamnsica, por parte de la madre Rh-negativa, ante estmulos
intercurrentes desconocidos. Por tanto, no es sensato hacer pronstico absoluto ante partum
en relacin al feto a resultas de los anticuerpos maternos (Wolman). Estos pueden deberse a
transfusiones anteriores al presente embarazo. El feto actual puede ser Rh-negativo como la
madre y no afectarse por aquellos anticuerpos (Wolman). Sin embargo, como advierte
Vives Ma, la comprobacin de anticuerpos incompletos monovalentes, mediante test de
Coombs Indirecto, en la sangre de la madre y a ttulo progresivo, en los ltimos meses del
embarazo, hace posible la presentacin de accidentes en el nio.1,2
La conducta que hay que seguir ante un posible caso de incompatibilidad materno fetal es
la siguiente:1,2
1. Averiguar el Rh de la madre. Esto debiera generalizarse a toda mujer embarazada; y es
ms, toda mujer debiera conocer su Rh.
2. Si la madre es Rh-negativa, debe averiguarse tambin el Rh del marido. Si se es
positivo, el problema est en potencia.
1. Practicar con el suero de la madre frente a hemates grupo O Rh-positivos el test
de Coombs Indirecto. Si es positivo, la madre est inmunizada, bien por el nio que
va a nacer, bien por anteriores transfusiones Rh positivas, etc..
2. Practicar durante el embarzo, especialmente los ltimos meses, la titulacin de
anticuerpos. Un ttulo alto aislado tiene menos valor que un ttulo bajo, pero
creciente, en relacin al pronstico.
3. Apenas nazca el nio, debe averiguarse su Rh (si es negativo no hay problema). Si
es positivo, debe practicarse un test de Coombs directo, que nos dir si los hemates
del nio estn recubiertos de anticuerpos bloqueantes.
4. Bilirrubinemia en el nio; con el test de Coombs Directo y la cifra de bilirrubina
sabremos si es necesaria una exanguinotransfusin.
5. Averiguar si el padre es homocigtico o heterocigtico, con vistas al pronstico en
futuros embarazos.
13
OBJETIVO:
Determinar mediante reacciones antgeno-anticuerpo el tipo sanguneo y factor Rh de una
muestra hemtica.
MATERIAL Y EQUIPO:
Jeringa con aguja hipodermica
Torundas de algodn
Alcohol desnaturalizado
Tubos de 13 x 100mm.
Tapones
Gradilla
Portaobjetos o placas cncavas
Aplicadores de madera
E.D.T.A.
Lancetas
Suero Anti-A
Suero Anti-B
Suero Anti-Rh o D
Solucin salina 0.9%
Sangre capilar o venosa (se extraer en laboratorio)
PROCEDIMIENTOS:
a) Mtodo de portaobjetos.
1.-Depositar una gota de sangre anticuagulada en 3 pozos de una placa cncava
respectivamente.
2. Agregar una gota de suero anti-A , anti B y anti D Rh (una para cada pozo
respectivamente).
3.-Mezclar con un aplicador de madera y agitar con movimientos de balanceo por unos
segundos y observar resultados como mximo a los dos minutos.
14
4. INTERPRETACIN:
GRUPO
A, Rh positivo
A, Rh negativo
B, Rh positivo
B, Rh negativo
AB, Rh positivo
Anti-A
+
+
+
Anti-B
+
+
+
Anti-D Rh
+
+
+
AB, Rh negativo
O, Rh positivo
O, Rh negativo
+
-
+
-
+
-
BIBLIOGRAFA:
1. M.J. Lynch. et.al. Mtodos de Laboratorio. 2. Edicin 1977. editorial Interamericana.
2 .Alfonso Balcells. La Clnica y el Laboratorio 18a. Edicin 1999. Editorial Masson.
3. Tesina de Banco de Sangre del Seminario de Titulacin de la Carrera de Q.F.B.
Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas de la Universidad Autnoma de Campeche. 2001
15
sensible a las deficiencias de todos estos factores excepto el IX, se ha probado que es til en
el monitoreo de la terapia anticoagulante oral y como prueba funcional heptica.
OBJETIVO:
Determinar el tiempo de protrombina de una muestra sangunea problema a fin de
establecer su correlacin clnica con algunos trastornos de la coagulacin sangunea.
MATERIAL Y EQUIPO:
Citrato de sodio al 3.8%
Jeringa con aguja hipodrmica
Tubos de ensayo 13x100mm
Pipetas de 1mL
Pipetas Pasteur
Bao de Mara
Cronmetro
Soluplastin (un vial)
Gasas
Preparacin de la muestra:
Obtenga la muestra en condiciones aspticas.
Mezcle 0.2mL de citrato de sodio con 1.8mL. de sangre venosa
Centrifugue la muestra a 3400rpm por 3min.
Retire el plasma y colquelo en otro tubo.
PROCEDIMIENTO
Colocar el plasma en bao de agua a 37C durante 2-3min
En un tubo de ensayo colocar0.2mL de soluplastin reconstituido y preincubar a 37C
durante 2-3min.
Pipetear 100L de plasma preincubado y agregar rpidamente al tubo conteniendo 0.2mL
de soluplastin, disparando simultneamente el cronmetro.
Mantener el tubo dentro del bao y cerca de una fuente de luz. Previo al tiempo estimado
de coagulacin, sacar el tubo del bao, inclinar suavemente una o dos veces por segundo y
detener el cronmetro en el momento de la aparicin del cogulo.
Reporte los resultados como tiempo de protrombina en segundos.
VALORES NORMALES
El rango normal es de 11 a 13.5 segundos, sin embargo, el concepto de "normal" vara de
un laboratorio a otro.
El tiempo de protrombina ser ms prolongado en personas que toman anticoagulantes.
Significado de los resultados anormales
El aumento en los tiempos TP puede deberse a:
Obstruccin de las vas biliares
Cirrosis
Coagulacin intravascular diseminada
Hepatitis
17
Sndrome de Malabsorcin
Deficiencia de vitamina K
Terapia con cumadina (warfarina)
BIBLIOGRAFA
1. http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003652.htm
2. Quick, A.J.Haemorragic diseases. Philadelphia. Lea & Febiger- 1957
3. http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003652.htm
4. Ferri FF. Ferris Clinical Advisor: Instant Diagnosis and Treatment. 2005 ed. St.
Louis, Mo: Mosby; 2005:1365.
5. Hoffman R, Benz EJ, Shattil SS, et al. Hematology: Basic Principles and Practice.
4th ed. Orlando, Fl: Churchill Livingstone; 2005:2004-2005.
6. 4. Alfonso Balcells. La Clnica y el Laboratorio 18a. Edicin 1999. Editorial
Masson.
7. Wiener Lab. Soluplastin. Instructivo 2000.
8. G.J. Ruiz Arguelles. Fundamentos de Hematologa.Edicin 1995.Editorial
Panamericana
18
PRUEBAS DE COAGULACIN
TIEMPO PARCIAL DE TROMBOPLASTINA (TPT)
INTRUDUCCIN
Llamado tambin Tiempo de tromboplastina parcial activado (TTPA) Tiempo de
Cefalina, es una prueba sensible a la deficiencia de factores procoagulantes del plasma as
como a la presencia de ciertos factores de la coagulacin, examina el tiempo que le toma a
la sangre coagularse y puede ayudar a establecer si una persona tiene problemas de
sangrado o coagulacin, en s este mtodo sirve para comprobar la existencia de todos los
factores de la va intrnseca (XII, XI, IX y VIII), as como los de la va comn ( X,V,
Protrombina(II) y fibringeno(I) ), el factor Fletcher, no siendo as con los trastornos
plaquetarios, las deficiencias de los factores VII y XIII, ni los problemas vasculares.
La prueba es muy adecuada para determinar problemas de sangrado o coagulacin de la
sangre, as como para el control de la teraputica anticoagulante por heparina. Tambin
permite la identificacin rpida de hemoflicos en potencia, a fin de poder someterlos a
tratamientos preventivos pre quirrgicos y evitar problemas hemorrgicos.
Este examen generalmente se hace junto con otros exmenes, como un examen de
protrombina.
OBJETIVO
Determinar el tiempo parcial de tromboplastina de una muestra sangunea problema a fin de
establecer su correlacin clnica con algunos trastornos de la coagulacin sangunea.
MATERIAL Y EQUIPO
Citrato de sodio al 3.8%
Jeringa con aguja hipodrmica
Tubos de ensayo 13x100mm
Pipetas de 1mL
Pipeta Pasteur
Bao de Mara
Cronmetro
APTTest
Cloruro de calcio 0.025mol/L
Plasma humano
Gasas
Preparacin de la muestra:
Obtenga la muestra por venopuncin
Mezcle 0.2mLde citrato de sodio con 1.8mL. de sangre venosa
Centrifugue la muestra a 3400rpm por 3min.
Retire el plasma y colquelo en otro tubo.
PROCEDIMIENTO
19
20
QUMICA SANGUNEA
DETERMINACIN DE GLUCOSA
INTRODUCCIN:
La glucosa es un substrato hidrosoluble que constituye el principal alimento energtico de
las clulas. Es absorbida, casi siempre, bajo la forma de polisacridos (almidn,
glucgeno), o de disacridos (sacarosa, lactosa, maltosa). Estas substancias son degradadas
parcialmente por la accin de la amilasa salivar y posteriormente por una hidrlisis cida en
el estmago. Los oligsidos liberados son escindidos por las amilasas pancreticas y los
disacridos intestinales en monosacridos, de los cuales el principal es la glucosa. La
absorcin de la glucosa a nivel de tubo digestivo es un mecanismo de transporte activo que,
una vez entrado en circulacin, se reparte entre los diferentes compartimentos: circulatorio
(sanguneo, linftico), intestinal y tisular. A nivel del hgado y de los msculos, la forma
primaria de almacenamiento de la glucosa es el glucgeno (polmero de almacenaje). La
glucosa circulante es captada por las clulas de los diferentes rganos y les sirve de
substrato energtico principal (gluclisis). En caso de necesidad energtica anormal
(esfuerzo), hay una movilizacin de glucgeno (glucogenlisis) y/o una biosntesis de
glucosa (neoglucogenlisis). La correlacin con el estudio del metabolismo de la glucosa es
esencial para poder apreciar las variaciones en la concentracin sangunea de la glucosa que
pueden reflejar alteraciones primarias del metabolismo de los carbohidratos al igual que ser
manifestaciones secundarias que acompaan a otras enfermedades. Tras la absorcin de
glucosa a la sangre, los niveles normales en ayunas, que oscilan entre 60 y 90 mg/100
mL.de sangre, se elevan a 120 150mg /100mL. o incluso ms. En los sujetos normales,
estos niveles de glucosa bajan enseguida de sus valores mximos, de manera que tras de
1:30hs.a 2 hs, se vuelven a alcanzar los niveles que en ayunas. Sin embargo, el diabtico es
incapaz de utilizar de manera eficiente la glucosa administrada y los niveles hemticos
despus de la ingestin de glucosa retornan al nivel basal slo despus de un perodo
prolongado de tiempo. El mantenimiento de la glucemia en unos valores normales asegura
una aportacin energtica permanente a las clulas.
Normalmente de 80 a 120 mg/100mL, segn los mtodos clsicos de Hagedorn-Jensen,
Folin, etc. En la actualidad, con las tcnicas enzimticas, se determina la glucemia
verdadera, y su concentracin normal en sangre oscila entre 60 y 100mg/100mL. Para
equivalencias en la glucemia: 100mg/100mL. = 5.5 mmol/L. Existe una diferencia de 10 a
20 mg/100mL. Entre la glucemia de la sangre capilar y de la venosa, en sta menos.
OBJETIVO:
Determinar la concentracin de glucosa sangunea central y perifrica, para correlacionar su
importancia clnica.
21
MATERIAL Y EQUIPO:
Jeringa con aguja hipodrmica de 3 mL.
Torundas de algodn
Alcohol desnaturalizado
Tubos de 13 x 100mm.
Pipetas de 1 y 5 mL.
Micropipeta de Volumen variable
Puntillas para micropipeta
Gradilla
Centrfuga
Espectrofotmetro
Bao Mara
Tiras reactivas de Glucosa Accu-Chek
Kit de Glucosa SPINREACT
ACCU-CHEK, SENSOR
E.D.T.A.
* Plasma suero
* Sangre capilar
* Se extraern al mismo paciente en el laboratorio
PROCEDIMIENTO:
PREPARACIN DEL REACTIVO
Reactivo de trabajo (RT): Disolver ( ) el contenido de un vial de R 2 Enzimas en un frasco
de R 1 Tampn.
Tapar y mezclar suavemente hasta disolver su contenido.
Estabilidad: 1 mes en nevera (2-8C) o 7 das a Temperatura
ambiente (15-25C)
PROCEDIMIENTO
Condiciones del ensayo:
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . 505 nm (490-550)
Temperatura. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37C / 15-25C
Ajuste a cero el espectrofotmetro con blanco de reactivo
Pipetear en tres tubos:
PATRN
MUESTRA
REACTIVO (RT)
BLANCO
1.0 mL.
PATRN
10 L.
1.0 mL
MUESTRA
10 L.
1.0 mL
22
VALORES DE REFERENCIA:
De 60 a 110 mg/dL
BIBLIOGRAFA:
1. Todd-Sanford. Diagnstico Clnico por el Laboratorio.6. Edicin 1978. Editorial Salvat.
2. M.J. Lynch. et.al. Mtodos de Laboratorio. 2. Edicin 1977. editorial Interamericana.
3. Marcus A. Krupp.et.al. Manual de Diagnstico Clnico y de Laboratorio. 8.edicin
1985. Editorial Manual Moderno.
4.Alfonso Balcells. Ka Clnica y el Laboratorio 18a. Edicin 1999. Editorial Masson.
5.SPINREACT, Test GOD-POP. SPINREACT,S.A.U. Ctra.Santa Coloma. SPAIN.
23
24
Pruebas de Depuracin. Estas pruebas se han ideado para medir la capacidad de los riones
para depurar la sangre de productos de desecho o materiales extraos (inulina, yodopiracet,
etc.) y excretadas en la orina. Si se conoce la concentracin sangunea del material de
prueba y la cantidad eliminada en orina, se puede determinar la depuracin en trminos de
mililitros de sangre depurada por unidad de tiempo. La creatinina se filtra a nivel del
glomrulo. En condiciones normales, la depuracin de creatinina endgena se acerca a la
tasa de filtracin glomerular.
En resumen podemos decir que la eliminacin de creatinina es un intervalo de 24Hs en un
valor muy constante, dependiente principalmente de la masa muscular del individuo, y es
que por otro lado el clculo del aclaramiento de la creatinina ser un parmetro directo del
funcionalismo renal. Se pueden usar perodos de depuracin de 2 a 6 hs. Para el perodo de
depuracin corto es preferible que el enfermo se encuentre en ayunas. Se obtiene una
muestra urinaria correspondiente a 2 6 hs. y se toma una muestra de sangre
aproximadamente en el punto medio del perodo de recoleccin de la orina. Para el clculo
de la depuracin se determina las concentraciones de creatinina en plasma y orina, as como
el volumen urinario.
Es esencial el cuidado en las determinaciones qumicas de la creatinina. Pueden observarse
falsos resultados bajos de depuracin, debido a la presencia del cromgeno no creatinnico
plasmtico, como ocurre en algunos enfermos con cardiopatas. En caso de insuficiencia
renal avanzada, la secrecin tubular de creatinina es la responsable de una proporcin
significativa del total de creatinina excretada. En presencia de insuficiencia renal crnica, la
depuracin de creatinina, da valores ms altos que los de inulina.
OBJETIVO:
Cuantificar la concentracin de Creatinina y Depuracin en una muestra problema,
mediante el empleo de una prueba cintico-calorimtrica a fin de establecer su importancia
en el diagnstico clnico de patologas relacionadas con el funcionamiento renal.
MATERIAL Y EQUIPO:
Tubos de ensaye de 13 x 100 mm
Probeta
Gradilla
Pipetas Pasteur
Pipetas graduadas de 2mL
Micropipetas de volumen variable
Puntas para micropipeta
Centrfuga
Espectrofotmetro
Kit cintico-colorimtrico de Creatinina, MEXLAB
Suero y Orina de 24hs. Problema
25
TCNICA:
a) Preparacin de reactivo y muestra
1. Mezclar a partes iguales los reactivos R1 y R2, segn la necesidad.
2. En el caso de la orina, diluir esta 1:10 con agua destilada y multiplicar el resultado x 10.
b) Mtodo
Standard
Muestra
Suero u orina diluida
-100L
Standard
100L
-Mezcla reactiva
1.0mL
1.0mL
Mezclar y poner en marcha el cronmetro.
Anotar la Absorbancia (A) a los 30seg. (A1), y a los 90 seg. (A2)
Lectura a 505 nm (490 520)
c) Nomogramas para la determinacin de la superficie corporal de nios y adultos:
26
d) Clculos
(A2 - A1) muestra
mg/dL creatinina = ---------------------------- x 1.5
(A2 - A1) standard
Depuracin de Creatinina
27
V x O
CL = -----------S x 1440
CL = Depuracin de creatinina (mL/min)
V = volumen de orina de 24hs (mL)
O = Concentracin creatinina en orina (mg/dL)
e) Valores de referencia:
Creatinina:
BIBLIOGRAFA:
1. Todd Sanford. Diagnstico Clnico por el Laboratorio. 6. Edicin. Editorial Salvat.
28
DETERMINACIN DE UREA
INTRODUCCIN:
La urea es el principal componente nitrogenado de la orina y producto del metabolismo
proteico.
Los aminocidos absorbidos en las vellosidades intestinales pasan de la vena porta al
hgado, son desaminados, esto es, pierden sus grupos amino nitrogenados que son
transformados en amoniaco. Este ltimo es muy txico especialmente para el cerebro, razn
por la cual debe ser eliminada con la misma rapidez con que se forma. En el hgado el
amoniaco se combina con bixido de carbono para formar urea, que es liberada en la sangre
y secretada al final en la orina.
La urea se forma principalmente en el hgado (de menor cantidad en el rin) a partir del
amoniaco, de ciertos grupos aminos y del CO2, en presencia de ATP, por medio de una
secuencia cclica de reacciones enzimticas mismas que pueden esquematizarse:
Ornitina
Citrulina + NH3
Arginina + H2O
arginasa
------------- Ornitina
Arginina
Urea
La urea, producto final del metabolismo proteico, se excreta por el rin, en el filtrado
glomerular, la concentracin de urea es la misma que la del plasma. La resorcin tubular
de la urea vara en forma inversamente proporcional a la velocidad de flujo urinario. Por
esto, la urea es una medida de la filtracin glomerular menos til que la creatinina, ya que
esta ltima no se resorbe. El nitrgeno de la urea sangunea vara directamente con la
ingestin proteica e inversamente con la tasa de excrecin de la urea.
El valor srico se halla elevado en los casos siguientes:
a) Insuficiencia renal: nefritis, aguda y crnica, insuficiencia renal aguda (necrosis tubular) obstruccin de las
vas urinarias.
b) Aumento del metabolismo nitrogenado asociado con disminucin del flujo renal
sanguneo o funcin renal alterada. Deshidratacin de cualquier ndole, hemorragia
gastrointestinal (combinacin de una absorcin proteica elevada por la ingestin de la
sangre, junto con disminucin del flujo renal)
c) Disminucin del flujo sanguneo renal:
ocasionalmente insuficiencia cardiaca congestiva.
Choque,
insuficiencia
suprarrenal,
29
25/30/37C
340nm
1 cm
frente al blanco de reactivo.
Pipetear en 3 tubos:
BLANCO
PATRN
MUESTRA
REACTIVO (RT)
1mL
1mL
1mL
PATRN
10 L
MUESTRA
10 L
Mezclar y anotar la disminucin de extincin entre los 30 y los 90 segundos ( extincin)
30
c) Clculos
A= A1 A2
Con las diferencias de extincin anotadas, aplicar la siguiente ecuacin:
extincin muestra
------------------------ extincin patrn
50 = Conc. Muestra
d) Valores de referencia:
Suero: de 15 a 45 mg/dL
Orina: de 20 a 35 gr/24hs.
BIBLIOGRAFA:
1. Todd Sanford. Diagnstico Clnico por el Laboratorio. 6. Edicin. Editorial Salvat.
31
LPIDOS
LDL-COLESTEROL, HDL-COLESTEROL
INTRODUCCIN
32
Las afecciones adicionales bajo las cuales se puede llevar a cabo el examen son:
Arterioesclerosis de las extremidades, Disbetalipoproteinemia familiar, Hipercolesterolemia
familiar, Hipotiroidismo primario, Hipotiroidismo secundario, Diabetes tipo I o tipo II,
Cirrosis biliar primaria
Significado de los resultados anormales.
En general, un valor de colesterol total por encima de 200 mg/dL puede significar que la
persona est en mayor riesgo de sufrir una cardiopata. Sin embargo, los niveles de LDL
son una mejor manera de predecir la cardiopata y determinan cmo se debe tratar el
colesterol alto.
Los niveles altos de colesterol total pueden ser causados por:
Cirrosis biliar, Hiperlipidemias familiares, Dieta alta en grasa, Hipotiroidismo, Sndrome
nefrtico, Diabetes no controlada.
Los niveles bajos de colesterol puede ser causados por:
Hipertiroidismo, Enfermedad heptica, Malabsorcin (absorcin inadecuada de nutrientes
desde el tracto intestinal), Desnutricin, Anemia perniciosa, Sepsis .
OBJETIVO
Cuantificar la concentracin de lipoprotenas de alta y baja densidad en una muestra de
suero problema, a fin de establecer su relacin e importancia clnica con los trastornos
cardiovasculares.
MATERIALES Y EQUIPO
Jeringa con aguja hipodrmica de 3 mL.
Torundas de algodn
Alcohol desnaturalizado
Tubos de 13 x 100mm.
Pipetas de 1 y 5 mL.
Micropipeta de Volumen variable
Puntillas para micropipeta
Gradilla
Centrfuga
Espectrofotmetro
Bao Mara
Kit ELI-Tech COLESTEROL HDL DIRECTO
Kit ELI-Tech COLESTEROL
Kit ELI-Tech TRIGLICERIDOS
Calibrador HDL-Colesterol. ELI-Tech.
Paciente o suero problema
33
PROCEDIMIENTO:
Longitud de onda............................600 nm (hasta 700)
Temperatura.................................... 37 C
Cubeta ............................................. 1 cm. Paso de luz
Leer contra blanco de reactivo
Pipetear en tres tubos:
BLANCO
CALIBRADOR
MUESTRA
REACTIVO 1
270L
270 L.
270L
AGUA DEST.
3L
CALIBRADOR
3L
MUESTRA
3L
Mezclar, esperar cuatro minutos, realizar la lectura de la densidad ptica y aadir 90L de
REACTIVO 2, mezclar y, tras una incubacin de cinco minutos, medir la densidad ptica.
Clculo HDL:
D.O. muestra
-------------------- x n
D.O. calibrador
VLDL = TRIGLICERIDOS/5
Indice aterognico:
COL TOT / HDL
BIBLIOGRAFA:
1. Todd-Sanford. Diagnstico Clnico por el Laboratorio.6. Edicin 1978. Editorial Salvat.
2. M.J. Lynch. et.al. Mtodos de Laboratorio. 2. Edicin 1977. editorial Interamericana.
3. www.nutriscitech.com/chldx.htm
4.Alfonso Balcells. Ka Clnica y el Laboratorio 18a. Edicin 1999. Editorial Masson.
5. Bayer. ELI-Tech, COLESTEROL HDL DIRECTO Argentina.
6. www.tuotromedico.com/temas/COLESTEROL_en_suero.htm
34
OBJETIVO:
Cuantificar la concentracin de Colesterol total en una muestra problema, mediante el
empleo de una prueba enzimtica a fin de establecer su importancia en el diagnstico
clnico de patologas relacionadas.
35
MATERIAL Y EQUIPO:
Tubos de ensaye de 13 x 100 mm
Gradilla
Pipeta de 1 mL.
Micropipetas de volumen variable
Puntas para micropipeta
Espectrofotmetro
Kit enzimtico de colesterol, SPINREACT.
Suero sanguneo problema
Bao Mara
PREPARACION DEL REACTIVO
Reactivo de trabajo (RT): Disolver ( ) el contenido de un vial de R 2
Enzimas en 1 frasco de R 1 Tampn.
Tapar y mezclar suavemente hasta disolver su contenido.
Estabilidad (RT): 4 meses en nevera (2-8C) o 40 das 15-25C
PROCEDIMIENTO:
Longitud de onda............................505 nm (490 550)
Temperatura.................................... 37 C
Cubeta ............................................. 1 cm. Paso de luz
Pipetear en tres tubos:
Blanco
Standard
Muestra
Patrn
-10L
-Muestra
--10L
Reactivo de uso
1.0 mL
1.0 mL
1.0 mL
Mezclar e incubar 5 min a 37C Ajustar el espectrofotmetro a 0 con el blanco de
reactivos. Leer contra blanco de reactivo
La coloracin es estable a 60 min.
Clculo
(A) muestra
----------------------- x 200
(A) patrn
VALORES DE REFERENCIA:
Menor a 200 mgdL
BIBLIOGRAFA:
1. Hamilton M.B. Rose. DIAGNOSTICO CLINICO.- 1 Edicin Editorial Interamericana,
Mxico 1985.
2. Lynch Mattew J. Mtodos de Laboratorio Vol. 1. 2 edicin. Editorial Manual Moderno.
Impreso en Mxico, 1987
3. Alfonso Balcells. La Clnica y el Laboratorio. 18.Edicin. Editorial Masson.
4. Bayer.Test enzimtico-colorimtrico Colesterol ELI-Tech. Argentina.
36
DETERMINACIN DE TRIGLICERIDOS
INTRODUCCIN
Los Triacilglicridos son steres de glicerol y de tres cidos grasos, por lo regular esterico,
oleico y palmtico. Constituyen alrededor del 95 % del tejido adiposo y representan la
principal forma de almacenamiento de lpidos en el humano.
Los triglicridos sricos estn dispuestos en varios agregados o complejos lpidos,
fundamentalmente quilomicrones y protenas de muy baja densidad (VLDL), cuya funcin
principal es el transporte celular de los triglicridos de los alimentos. Los quilomicrones
son grandes partculas producidas en el intestino, muy ricos en triglicridos de origen
exgeno mientras que las protenas de muy baja densidad (VLDL) son algo ms pequeas y
ricas en triglicridos en menor proporcin son de origen endgeno principalmente heptico.
El metabolismo de lpidos se lleva a cabo en tres fases:
Fase intraluminal. La mayor parte de la digestin de la grasa alimentara tiene lugar en el
intestino mediante las enzimas intestinales, pancreticas y de los cidos biliares. Las sales
biliares son de importancia en la degradacin de las grasas debido a sus propiedades
anfipticas : por ser altamente hidrfila y altamente hidrfoba al mismo tiempo. Debido a
sus propiedades activas de superficie, encapsula a las grasas y las emulsiona, produciendo
partculas que pueden ser rpidamente modificadas por las enzimas digestivas. En el lumen
intestinal, la accin de la lipasa pancretica sobre la grasa ingerida da por resultado una
mezcla compleja de triglicridos, diglicridos, monoglicridos y cidos grasos libres.
Continuando con una fase oleosa y una acuosa.
Fase celular. Despus de los monoglicridos y los cidos grasos se ingresan al retculo
endoplsmico de las clulas mucosas, presumiblemente por difusin, los monoglicridos y
cidos grasos son reesterificado a triglicridos.
Fase de transporte. Una vez que se ha resintetizado los triglicridos en el interior de la
clula mucosa intestinal, estas sustancias son acumuladas en el retculo endoplsmico de la
clula mucosa y en el aparato de Golgi en la forma de macromolculas hidrosolubles, los
quilomicrones, y, hasta un cierto grado, de lipoprotenas de muy baja densidad (VLDL).
Las lipoprotenas intestinales abandonan las clulas mucosas mediante un mecanismo de
pinocitosis inversa. Estos complejos aparecen inicialmente en los vasos linfticos de la
regin abdominal y ms tarde en la circulacin sistmica. Los complejos lipoproteicos ms
voluminosos son mezcla de triglicridos, algunas protenas, pequeas cantidades de
colesterol y fosfolpidos. La circulacin sangunea transporta quilomicrones y VLDL a
todos los tejidos del organismo, incluyendo el tejido adiposo que representa su principal
sitio de incorporacin. Los quilomicrones y los triglicridos de las VLDL son hidrolizados
por una enzima lipoprotena lipasa y tiene un sitio de actividad, es la superficie de las
clulas endoteliales. Los cidos grasos derivados de los triglicridos ingresan a las clulas
del tejido adiposo, en donde puede ser almacenado mientras que el glicerol es liberado a la
circulacin.
37
OBJETIVO:
Cuantificar la concentracin de Trigliceridos en una muestra problema, mediante el empleo
de una prueba enzimtica a fin de establecer su importancia en el diagnstico clnico de
patologas relacionadas con el metabolismo de lpidos.
MATERIAL Y EQUIPO:
Tubos de ensaye de 13 x 100 mm
Gradilla
Pipetas Pasteur
Pipetas graduadas de 2mL
Micropipetas de volumen variable
Puntas para micropipeta
Espectrofotmetro
Bao Mara
Kit enzimtico de Triglicridos, SPINREACT
Suero sanguneo problema
PROCEDIMIENTO:
a) Mtodo
Pipetear en tres tubos de ensayo:
Muestra
Blanco
-
Estndar
-
Muestra
10L
Estndar
10L
Agua destilada
10L
Reactivo
1 mL
1 mL
1 mL
Mezclar e incubar a 37 C durante 5 minutos. Leer absorbancia de la muestra (A muestra) y
la del standar (A estndar) frente al blanco de reactivo.
38
b) Clculo
A muestra
-------------- x 200 = Triglicridos mg/dL
A standar
VALORES REFERENCIA
BIBLIOGRAFA:
1. Hamilton, H.K. Diagnstico Clnico. Editorial Interamericana. Impreso en Mxico,1985.
2. Kaplan, Lawrance A. Qumica Clnica. Editorial Mdica Panamericana. Impreso en
Argentina, 1988.
3. SPINREACT, S.A. Enzimtico Triglicridos. Ctra. Santa Coloma. Espaa.
39
Espectrofotmetro
Kit cintico de TGO, MEXLAB
Suero problema
TCNICA
a). Preparacin del reactivo de trabajo
Mezclar 1mL de R1 con 200 L
b). Mtodo
Temperatura ................................... 37C
Longitud de onda ........................... 340nm
Cubeta ............................................ 1 cm paso de luz
Lectura frente agua destilada
COLOCAR EN UN TUBO
Reactivo al uso
1.0 mL
Muestra
100L
Mezclar, incubar a 37C 1 minuto. Anotar la lectura y poner
en marcha el cronmetro. Repetir la lectura a 1, 2 y 3
minutos. Calcular el valor promedio de los incrementos de
absorvancia por minuto (A/min)
c) Clculo
A/min x 1768 = U/L
d) Valor de referencia
HASTA 40 U/L
BIBLIOGRAFA:
1. M.J. Lynch, et.al., Mtodos de Laboratorio.2a. Edicin. Editorial Interamericana.
41
Reactivo al uso
1.0 mL
Muestra
100L
Mezclar, incubar 1 minuto a 37C. Anotar la lectura y
poner en marcha el cronmetro. Repetir la lectura a 1, 2 y 3
minutos. Calcular el valor promedio de los incrementos de
absorbancia por minuto (A/min)
c) Clculo
A/min x 1768 = U/L
d) Valor de referencia
HASTA 45 U/L
BIBLIOGRAFA:
1. M.J. Lynch, et.al., Mtodos de Laboratorio.2a. Edicin. Editorial Interamericana.
43
44
MATERIAL Y EQUIPO:
Tubos de ensaye de 13 x 100 mm
Gradilla
Pipetas Pasteur
Micropipetas de volumen variable
Puntas para micropipeta
Centrfuga
Espectrofotmetro
Kit Bilirrubina DMSO Total y Directa, MEXLAB.
Suero Humano reciente
TCNICA:
Longitud de onda ...............................560nm ( 540 600)
Temperatura .......................................37C
Cubeta .................................................1cm paso de luz
Lectura ................................................frente a blanco de reactivo
BLANCO
TOTAL
--1.0 mL
1gota
TOTAL
--1.0 mL
1gota
BLANCO
DIRECTA
1.0 mL
--1gota
DIRECTA
1.0 mL
--1gota
Notas:
1. Utilice muestras recientes, protegidas de la luz.
2. No utilice muestras hemolizadas.
VALORES NORMALES:
Bilirrubina Total: 0.1 a 1.2 mg/dL
Bilirrubina Directa: 0 a 0.3 mg/dL
BIBLIOGRAFA:
1. Hamilton, H.K. Diagnstico Clnico. Editorial Interamericana. 1985.
2. Kaplan, Lawrance A. Qumica Clnica. Editorial Mdica Panamericana. 988.
3. Lynch Mattew J.Mtodos de laboratorio Vol 1.Segundaedicin.Editorial
Interamericana.1987.
4. Todd-Sanford. Diagnstico Clnico por el Laboratorio. 6. Edicin. Editorial Salvat.
5. Instructivo Bilirrubina DMSO Total y Directa. MEXLAB
46
FOSFATASA ALCALINA
INTRODUCCIN
La fosfatasa alcalina, es una protena que se encuentra en todos los tejidos corporales.
Se origina principalmente en los huesos y accesoriamente en el hgado, aunque para
algunos es segregada slo por osteoclastos y el hgado es apenas el rgano de excrecin.
Est bien establecida la relacin que existe entre esta enzima, los osteoclastos y la
formacin sea. El ritmo rpido del incremento seo infantil, corre paralelo con las dosis
elevadas. Si el crecimiento se bloquea, la concentracin baja a cifras similares como en el
adulto.
Cuando hay deficiencia de vitamina D, raquitismo, enfermedad de Paget,
hiperparatiroidismo, fracturas en consolidacin y en metstasis seas, sus niveles
aumentan. Igualmente, durante el embarazo los niveles pueden ser hasta el triple de lo
normal y persisten hasta por 2 meses despus del parto.
Presta utilidad en las ictericias donde sirve para diferenciar la obstructiva de la
parenquimatosa, pues cuando es de origen mecnico sus cifras son mucho ms elevadas. En
el absceso heptico sus cifras se encuentran aumentadas y sin cabios ictricos. En el
embarazo, cuando sus niveles descienden, hay compatibilidad con feto muerto intrauterino.
Los tejidos con cantidades particularmente altas de FA abarcan el hgado, las vas biliares y
los huesos.
Este examen se hace para diagnosticar enfermedad del hgado y del hueso o para ver si los
tratamientos para dichas enfermedades estn funcionando. Puede incluirse como parte de
las pruebas de la funcin heptica de rutina.
Los valores normales pueden variar de un laboratorio a otro, segn la tcnica empleada, al
igual con la edad y el sexo de la persona. Los niveles altos de FA normalmente se observan
en nios que presentan un aumento repentino en su crecimiento y en las mujeres
embarazadas.
Los niveles de la fosfatasa alcalina superiores a los normales pueden deberse a:
Anemia, Obstruccin biliar, Enfermedad sea, Consolidacin de una fractura, Hepatitis,
Hiperparatiroidismo, Leucemia, Enfermedad heptica, Cnceres seos osteoblsticos,
Osteomalacia, Enfermedad de Paget, Raquitismo.
Los niveles de la fosfatasa alcalina (hipofosfatasemia) inferiores a los normales pueden
deberse a: Desnutricin, Deficiencia de protena.
Algunas afecciones adicionales bajo las cuales se puede hacer el examen son:
Enfermedad heptica alcohlica (hepatitis/cirrosis), Alcoholismo, Estenosis biliar, Arteritis
de clulas gigantes (temporal, craneal), Neoplasia endocrina mltiple (NEM) II Carcinoma
de clulas renales.
OBJETIVO.
Determinar la concentracin srica de fosfatasa alcalina en una muestra problema, a fin de
establecer su importancia clnica en los trastornos hepticos y del hueso principalmente.
47
MATERIAL Y EQUIPO:
Tubos de ensaye de 13 x 100 mm
Gradilla
Pipeta de 1 mL.
Micropipetas de volumen variable
Puntas para micropipeta
Espectrofotmetro
Kit cintico de Fosfatasa Alcalina, MEXLAB.
Suero sanguneo problema
Bao Mara
PROCEDIMIENTO:
Longitud de onda............................405 nm
Temperatura.................................... 37 C
Cubeta............................................. 1 cm. Paso de luz
Leer contra blanco de agua destilada.
Pipetear en un tubo:
Muestra
Reactivo de uso
25L
1.0 mL
Clculo:
Actividad (U/L) = A/min x 2180
VALORES DE REFERENCIA
30 125 UI/L
BIBLIOGRAFIA
1. http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003470.htm.
2. G. Angel M. / M. Angel R. Interpretacin clnica del laboratorio. 5. Edicin. Editorial
Panamericana.1996.
3. Alfonzo Balcells. La Clnica y el Laboratorio. 18. Edicin. Editorial Masson. 2001.
4. Bayer.Test cintico de Fosfatasa alcalina MEXLAB.
48
49
OBJETIVO:
Determinar la concentracin de protenas totales y albmina sricas en una muestra
problema mediante la aplicacin de los mtodos de Biuret y Verde de Bromocresol y
correlacionarla con su importancia clnica.
MATERIAL Y EQUIPO:
Tubos de 13 x 100mm.
Pipetas de 1, 5 y 10 mL.
Micropipeta de Volumen variable
Puntillas para micropipeta
Centrfuga
Espectrofotmetro
Bao de Mara
Termmetro
Kit de Protenas totales y Albmina, ELI-Tech.
Suero sanguneo problema
PROCEDIMIENTOS:
a) Protenas Totales (Mtodo de Biuret)
Las uniones peptdicas reaccionan con el sulfato de cobre en solucin alcalina y producen
un color violeta proporcional a su concentracin.
Longitud de onda............................550 nm (546)
Temperatura.................................... 37 C
Cubeta ............................................. 1 cm. Paso de luz
Leer contra blanco de reactivo
1. Marcar 3 tubos de ensayo blanco, muestra, standard y agregar:
Agua Destilada
Muestra
Standard
Reactivo de Biuret
BLANCO
10L
1.0mL
STANDARD
10L
1.0mL
MUESTRA
10L
1.0mL
Absorbancia de la muestra
----------------------------------- x
Absorbancia del standard
50
Reactivo de albmina
Standard
Muestra
BLANCO
1.0mL
-
STANDARD
1.0mL
25L
-
MUESTRA
1.0mL
25L
3. Clculos:
Verificar la concentracin del standard en la etiqueta del frasco includo con cada kit.
FACTOR = Concentracin standard
Absorbancia Standard
Albmina(g/dl) =Factor x Absorbancia desconocido
NOTAS:
La reaccin es lineal hasta 8.0 g/dl
Para valores superiores, es recomendable diluir (1:3) la muestra con solucin fisiolgica y
determinar nuevamente, multiplicando el resultado por el factor de la dilucin .
51
El valor de las globulinas (g/dL) se obtiene restando de las protenas totales, el valor de la
albmina.
La relacin A/G (albmina/globulina), se obtienen dividiendo la concentracin de la
albmina entre la concentracin de la globulina.
VALORES DE REFERENCIA:
BIBLIOGRAFA:
1. Todd-Sanford. Diagnstico Clnico por el Laboratorio.6. Edicin 1978. Editorial Salvat.
2. M.J. Lynch. et.al. Mtodos de Laboratorio. 2. Edicin 1977. editorial Interamericana.
3. Marcus A. Krupp.et.al. Manual de Diagnstico Clnico y de Laboratorio. 8.edicin
1985. Editorial Manual Moderno.
4. Protenas Totales y Albmina. ELI-Tech.
52
REACCIONES FEBRILES
INTRODUCCIN
La infeccin causada por microorganismos de diversas especies produce entre otros
sntomas una marcada elevacin de la temperatura, tal es el caso de la fiebre tifoidea
causada por Salmonella Typhi, S. enteritis, as como las paratifoideas causadas por S.
paratyphi A y B; y el Tifo causado por el genero Rickettsias. La infeccin por estos
microorganismos induce a una respuesta inmune de tipo humoral con la produccin de
anticuerpos que puede ser detectados con el antgeno especfico.
La reaccin de Widal es un mtodo serolgico usado comnmente en el diagnstico de las
fiebres tifoidea, entrica y ondulante, la reaccin mide el ttulo del suero contra la
suspensin de microorganismos conocidos.
El gnero salmonella comprende diferentes bacilos no esporulados aerobios, gram
negativos serolgicamente relacionados, cada uno tiene antgenos flagelares y somticos y
dos o mas organismos pueden tener el mismo antgeno O y varios antgenos H similares,
por lo que la reaccin de Widal no es especfica 100% de fiebre tifoidea, ya que puede ser
positiva en otras salmonelosis, por tanto, se debe considerar como un signo semiolgico
ms de la fiebre tifoidea y tener en cuenta que este tipo de anticuerpo aglutinante, se pone
de manifiesto con intensidad diagnstica, despus del dcimo da de iniciarse la
enfermedad. Existen tres especies clnicamente importantes de Salmonella S. enteritidis, S.
Choleraesuis y S. typhi, resultando tambin en tres sndromes ocasionados por infeccin
por Salmonella: gastroenteritis (forma ms comn), fiebre tifoidea y septicemia.
Debido a la dificultad existente para el aislamiento de las Rikettsia sp, el antgeno
empleado para la determinacin de anticuerpos es el de Proteus OX-19 el cual presenta una
reaccin cruzada con bacterias del gnero Rikettsia, dado que posee componentes
antignicos idnticos (glucolpidos). La reaccin se hace positiva a partir del 5-7 da de la
enfermedad, con mayor frecuencia en el da 12; los anticuerpos permanecen elevados
despus durante los primeros 5 meses de la convalecencia y por lo tanto es positiva en
ttulos decrecientes hasta su negativizacin. Las especies de rickettsia son cocobacilos
pequeos pleomrficos que funcionan como parsitos intracelulares. La inmunidad por lo
general es de larga duracin, con algunas excepciones: el tifus endmico puede causar
reacaidas 10 20 aos despus de la aparente recuperacin (enfermedad de Brill Zinsser),
la fiebre de las trincheras se caracteriza por las recadas.
La reaccin de Huddleson es un mtodo serolgico que detecta anticuerpos contra B.
abortus, B. melitensis y B.
suis, agentes causales de la brucelosis tambin conocida como fiebre de malta o fiebre
ondulante por el cuadro febril caracterstico que se presenta; es una enfermedad aguda o
crnica que se manifiesta principalmente por escalofros, fiebre y debiliad.
La prueba se basa en una reaccin inmunolgica entre los anticuerpos sricos y el antgeno
correspondiente produciendo una reaccin de aglutinacin macroscpica.
53
OBJETIVO:
Determinar cualitativa y cuantitativamente la presencia de anticuerpos contra los gneros
Salmonella, Riketsia y Brucella en una muestra srica problema mediante el empleo de
reacciones antgeno - anticuerpo, a fin de establecer su correlacin clnica.
MATERIAL Y EQUIPO:
8 Tubos de 10 x 75mm.
1 Micropipeta 10 100 L
Puntillas para micropipeta
1 placa de reaccin
Aplicadores de madera
Vortex
Kit de Antgenos Febriles LICON
Suero sanguneo problema (Preferentemente obtenido en pico febril)
PROCEDIMIENTO
a) Cualitativo
Lleve los reactivos y el suero problema a temperatura ambiente antes de realizar la prueba.
1. Depositar una gota de suero en cada valo de la placa reactiva.
2. Aadir una de gota de antgeno segn corresponda.
3. Mezclar con ayuda de un aplicador
4. Agitar en un vortex a 120rpm durante 2 minutos.
5. Realizar lectura macroscpica utilizando una fuente de luz directa.
6. Aglutinacin : positiva ; no aglutinacin: negativa
54
b) Cuantitativo
1. Depositar en los valos de la placa: 0.08mL, 0.04mL, 0.02mL, 0.01mL y 0.005mL de
suero problema.
2.Aadir 30L del antgeno respectivo (el gotero incluido, proporciona una gota de 30 40L).
4. Mezclar con ayuda de un aplicador
5. Agitar en un vortex a 120rpm durante 2 minutos.
6. Realizar lectura macroscpica utilizando una fuente de luz directa.
7. El ttulo del suero ser la inversa de la dilucin ms alta en donde se observa una
aglutinacin del 50% , segn:
BIBLIOGRAFIA.
55
ANTIESTREPTOLISINAS
INTRODUCCIN
Los estreptococos tipo A, producen una enzima denominada estreptolisina O que tiene la
capacidad de lisar los hemates, comportndose como antgeno. El organismo reacciona
produciendo un anticuerpo neutralizante, antiestreptolisina (ASO), el que aparece entre 8 a
30 das despus del comienzo de infeccin, los valores ms elevados se dan en la tercera
semana de la infeccin y es cuando pueden aparecer las enfermedades secundarias a esta
infeccin (glomerulonefrtis, una fiebre reumtica, una endocarditis bacteriana o una
escarlatina) pero no son especficos de ninguna de ellas. Deben ser diagnosticadas cada una
de ellas por la clnica o por otros estudios diagnsticos.
Ttulos elevados indican que las secuelas por infeccin estreptoccica est presente. Entre
el 80 al 85% de pacientes con fiebre reumtica y el 95% de pacientes con glomerulonefrtis
aguda, presentan ttulos representativos. En endocarditis bacteriana y escarlatina, los ttulos
se modifican.
Ttulos altos no son especficos para determinada enfermedad. Solo indica infeccin por
estreptococo A. Los ttulos se modifican en la convalecencia, siendo inferiores cuando el
tratamiento es acertado. Los niveles altos de beta-lipoprotena dan falsos resultados
elevados por inhibicin de la estreptolisina; los antibiticos y adrenocorticoides, bajos, (son
enmascarados). En amigdalitis, sepsis puerperal y erisipela por estreptococo A, los ttulos
estn elevados.
Los niveles aumentados de ASLO pueden indicar:
Infeccin por estreptococos beta hemolticos del tipo A, glomerulonefrtis, fiebre
reumtica, endocarditis bacteriana, escarlatina, pioderma por estreptococo beta hemoltico
del tipo A.
El no tratar o tratar inadecuadamente una infeccin por el estreptococo beta hemoltico del
tipo A, puede tener las siguientes complicaciones: absceso periamigdalino, fiebre
reumtica, glomerulonefrtis. Escarlatina.
OBJETIVO:
Determinar cualitativa y cuantitativamente la presencia de Antiestreptolisinas en una
muestra srica problema mediante el empleo de reacciones antgeno - anticuerpo, a fin
de establecer su importancia clnica como apoyo al diagnstico de enfermedades
causadas por estreptococos del grupo A.
MATERIAL Y EQUIPO:
Tubos de 10 x 75mm.
Micropipeta 10 100 L
Puntillas para micropipeta
placa de reaccin
Aplicadores de madera
Vortex
Kit BioAEstrept. MEXLAB.
Solucin salina isotnica
Suero sanguneo problema
56
PROCEDIMIENTO
a) Cualitativo
1. Colocar una gota de suero del paciente (40L) en un valo de la placa, de igual
manera los controles positivo y negativo.
2. Agregar una gota de reactivo ltex a cada uno (30L) mezclar por todo el valo.
3. Agitar la placa en el vortex durante 3 min.
4. Observar macroscpicamente
Interpretacin de resultados:
POSITIVO: presencia de aglutinacin visible por formacin de grandes agregados y un
fondo claro.
NEGATIVO: ausencia de aglutinacin visible.
b) Semicuantitativo
DILUCIONES
1/2
Suero muestra
100 L
Sol. Salina
100 L
1/4
1/8
1/16
100 L
100 L
100 L
100 L
100 L
100 L
50 L
50 L
50 L
De cada dilucin
Colocar en
portaobjetos
50 L
200 x 2
200 x 4
200 x 8
200 x 16
400
800
1600
3200
VALORES:
Los valores normales de antiestreptolisina-O pueden variar con la edad, estacin del ao y
rea geogrfica. El valor normal en nios y jvenes es entre 166 y 250 IU/ml. Un promedio
se ha establecido por debajo de los 200 IU/ml.
BIBLIOGRAFA
1. www.tuotromedico.com/temas/antiestreptolisinas.htm
2. Gilberto ngel/Mauricio ngel R. Interpretacin Clnica del Laboratorio. 5. Edicin
1998. Editorial Mdica Panamericana.
3. Instructivo Estreptoex. Laboratorio LAFON, S.A.de C.V., Mxico, D.F.
57
OBJETIVO:
Determinacin cualitativa y cuantitativa de la Protena C Reactiva en una muestra srica problema, a fin de
correlacionar su importancia clnica en los procesos inflamatorios o patologas afines como son: infecciones
agudas bacterianas y aquellas con destruccin de tejidos.
MATERIAL Y EQUIPO:
Tubos de ensaye de 13 x 100 mm
Gradilla
Pipetas Pasteur
Micropipetas de volumen variable
Puntas para micropipeta
Centrfuga
Vortex
Kit de PCR/CRP ltex, BIO-MEXLAB
Suero problema
TECNICA:
a) Mtodo Cualitativo:
1. Poner a temperatura ambiente los reactivos y homogenizarlos.
2. Colocar una gota del suero en un crculo del portaobjetos (del equipo) sin diluir. Realizar lo mismo con los
controles positivo y negativo.
58
3. Aadir una gota de PCR ltex a un lado de cada una de las anteriores (muestra y
controles).
4. Mezclar con un aplicador de madera extendiendo por todo el crculo.
5. Colocar el portaobjetos en el vortex y agitar por 2 min.
6. Interpretacin: La presencia de aglutinacin (positivo), indica un nivel de PCR igual o
superior a 1.2mg/l00mL en la muestra. La ausencia de aglutinacin indica un nivel de PCR
inferior a 1.2mg/l00mL en la muestra.
b) Mtodo Cuantitativo
Siguiendo la metdica cualitativa, se proceder con diluciones de suero muestra con solucin salina (NaCl
9g/l).
DILUCIONES
1/2
Suero muestra
100 L
Sol. Salina
100 L
1/4
1/8
1/16
100 L
100 L
100 L
100 L
100 L
100 L
50 L
50 L
50 L
De cada dilucin
50 L
Colocar en
portaobjetos
1.2 x 2
1.2 x 4
1.2 x 8
1.2 x 16
2.4
4.8
9.6
19.2
c) VALORES NORMALES:
BIBLIOGRAFA:
1. Todd-Sanford. Diagnstico Clnico por el Laboratorio. 6. Edicin. Editorial Salvat.
2.M.J. Lynch et.al. Mtodos de Laboratorio. 2. Edicin. Editorial interamericana.
3.Alfonso Balcells. La Clnica y el Laboratorio. 18. Edicin. Editorial Masson.1999.
4. 5. Instructivo PCR Latex. MEXLAB
59
MATERIAL Y EQUIPO:
Tubos de ensaye de 13 x 100 mm
Gradilla
Pipetas Pasteur
Placa de vidrio con valos
Micropipetas de volumen variable
Puntas para micropipeta
Centrfuga
Vortex
Kit de REUMATEX, Lafon, S.A. de C.V.
Suero problema
TCNICA:
a) mtodo cualitativo
1. Poner en un tubo de ensayo 1mL de sol. Reguladora glicina-salina, (diluida 1:10 a partir
de la solucin concentrada), aadir una gota de suero problema, mezclar y agitar.
2. Colocar una gota de la mezcla anterior en un valo de la placa de vidrio.
3. Agregar una gota de latex-globulina, mezclar con un aplicador.
60
DILUCIN
1:20
1:40
1:80
1:160
1:320
1:640
1:1280
1:2560
1:5120
6. Colocar una gota de cada dilucin en cada valo de la placa de vidrio y aadir una gota de latex-globulina,
continuar con el mismo procedimiento que para la prueba cualitativa arriba mencionada.
61
PRUEBA DE EMBARAZO
INTRODUCCIN:
El termino prueba de embarazo es de hecho un termino errneo, ya que la mayora de estos
procedimientos lo que miden es la presencia de gonadotropina corinica humana (HCG) y
no la de un feto. La HCG es una glucoprotena producida por las clulas trofoblsticas del
blastocisto en desarrollo despus de aproximadamente 10 das de la concepcin, mas tarde
se produce en el corin y la placenta.. Es un dmero compuesto de subunidades y . Las
subunidades no son especficas, siendo compartidas con las de la hormona luteinizante
(LH), la hormona estimulante del folculo (FSH) y la hormona estimulante del tiroides
(TSH). Las subunidades son especficas de la placenta.
Despus de la concepcin, se produce un rpido aumento en la cantidad de HCG en la orina
aproximadamente a las 5 semanas de gestacin (5 semanas despus del ltimo perodo
menstrual), que alcanza los niveles mximos en un tiempo aproximado de 10 semanas de
gestacin. Las semanas de gestacin se refieren a las semanas transcurridas despus del
ltimo perodo menstrual ms que a las semanas despus de la concepcin, ya que sta
fecha es ms difcil de determinar con certeza. A medida que la produccin de estrgeno y
progesterona por la placenta aumenta durante el segundo trimestre, los niveles de HCG
descienden. Este nivel constituye la medida ms lgica para la pronta confirmacin de un
embarazo; por el contrario, el estriol es ms til para la evaluacin de problemas del feto
durante el tercer trimestre.
La eliminacin de la HCG se incrementa a parte del embarazo en la mola idatiforme y en el
coriepiteloma hasta cifras enormes. Los quistes lutenicos dan aumentos menores. En el
varn, en ciertos teratomas y en tumores malignos testiculares. Disminuye en los casos de
peligro de aborto o el aumento es muy lento. En el embarazo ectpico, despus de un
ascenso la .HCG permanece en valores de meseta, o curva plana.1,3,4
OBJETIVO.
Determinar cualitativa y cuantitativamente la presencia de la hormona gonadotropina
corinica humana (HCG) en muestras problema de sangre y orina a fin de correlacionar su
importancia clnica.
MATERIAL Y EQUIPO:
Tubos de ensayo de 13 x 100mm
Gradilla
Pipeta de 5mL
Pipetas Pasteur
Embudo de cristal
Torundas de algodn
Papel filtro
Agitador de vidrio
Acido clorhdrico
Acetona
Solucin fisiolgica
Alcohol desnaturalizado
Kit Prenatest Beta Monoclonal
Centrfuga
Suero sanguneo y Orina de 24hs.
PROCEDIMIENTOS:
a) Determinacin Cualitativa de HCG. (Inhibicin de hemaglutinacin)3
1.Enfriar la orina (precipitacin del material insoluble)
2. Filtrar o centrifugar (3000 a 4000 rpm) la orina x 5 a 10 min.
3. En un tubo de ensayo poner dos gotas de suero Anti-HCG monoclonal.
4. Agregar 2 gotas de orina y mezcle.
5.Dejar caer en el fondo del tubo una gota de eritrocitos HCG previamente resuspendidos y
mezclar.
6. Colocar en una gradilla y poner en un lugar libre de vibraciones y calor excesivo.
7. Observar los resultados positivos en una hora y los negativos en 1 a 2 Hs.
POSITIVO
NEGATIVO
63
64
7. Interpretacin. (Ejemp.)
1:2
1:4
dilucin final 1:48
1:8
1:16
1:32
1:64
1:128
CALCULOS:
Sensibilidad del reactivo: detecta desde 1000 U.I./litro
En orina: H.C.G. (U.I./mL) = vol. De orina de 24 Hs (mL) X reciproco de la dilucin final
X sensibilidad del reactivo.
En suero: : H.C.G. (U.I./mL) = dilucin final X sensibilidad del reactivo.
BIBLIOGRAFA:
1. Todd-Sanford. Diagnstico Clnico por el Laboratorio.6. Edicin 1978. Editorial Salvat.
2. M.J. Lynch. et.al. Mtodos de Laboratorio. 2. Edicin 1977. editorial Interamericana.
3. Laboratorios Lafon, S.A. de C.V.. Prenatest Beta Monoclonal..
4. .Alfonso Balcells. Ka Clnica y el Laboratorio 18a. Edicin 1999. Editorial Masson.
65
COPROPARASITOSCPICO
INTRODUCCIN.La parasitologa estudia los seres que viven momentneamente o permanentemente sobre
otros organismos vivientes o dentro de ellos y obtienen de los mismos sus alimentos, as
como las relaciones entre dichos seres y sus huspedes.
La gran mayora de las enfermedades parasitarias que se conocen desde la antigedad no
han logrado ser erradicadas, a diferencia de otros padecimientos infecciosos, por la
ignorancia, negligencia e indiferencia humana que han impedido la visualizacin del grave
problema de Salud Pblica que constituyen.
El examen de heces tiene su mxima indicacin clnica en las diarreas crnicas, y en
general interesa en aquellos procesos que cursan con insuficiencia digestiva o en aquellos
en que se busca el germen parsito de la enfermedad.
Comprende la observacin directa, macroscpica y el anlisis parasitolgico de la
deposicin.
CARACTERES MACROSCPICOS:
a). CONSISTENCIA.- Normalmente debe ser slida y formada, es decir, cilndrica y
consistente. Los estreidos eliminan deposiciones pequeas, duras y a menudo en bolas o
caprinas. Las falsas diarreas de los constipados se caracterizan por la deposicin mixta,
compacta la primera parte y pastosa la final. Son fluidas, pastosas o lquidas las heces en
las diarreas. En el clera se han comparado con la sopa de arroz, y en la tifoidea con el
pur de guisantes. En los enfermos con insuficiencia gstrica descompensada parece una
papilla. Es cremosa y pegajosa, como mantequilla, en las esteatorreas de origen biliar,
pancretico o entrico. En el caso de las melenas ( hemorragias digestivas altas) las heces
son pegajosas y oscuras como el alquitrn. Espumosa en la llamada dispepsia de
fermentacin. Pueden apreciarse restos toscos de alimentos en la lientera por trnsito
rpido, especialmente en la insuficiencia gstrica.
b) COLOR.- Normalmente y con dieta mixta, la deposicin es de color pardo ms o
menos oscuro en el adulto, oscurecindose a medida que pasa el tiempo expuesta al aire.
Con la dieta lctea y en los lactantes es de color amarillo canario. Con dieta crnica se
torna de color castao oscuro. Una alimentacin rica en verduras tie las heces de color
verdoso, en tanto que, si predominan las patatas y el pan las heces se aclaran hacia un
castao amarillento. En general las heces duras de los estreimientos son ms oscuras de
lo normal, y las deposiciones diarreicas suelen ser mas claras. En la acolia de las ictericias
obstructivas las heces son de color blanco grisceas. Son de color amarillento en las
diarreas de fermentacin, en las esteatorreas del esprue, en la insuficiencia pancretica. Son
rojizas las que contienen sangre no transformada de origen bajo (hemorroides, tumores de
colon, etc.). La hematina y rifampicina pueden dar una coloracin pardo-rojizo a las
heces. Negruzcas son las heces en las melenas (hemorragias digestivas altas) o por la
ingesta de alimentos como morcilla, moras, uvas, vino tinto, etc. O bien por ingestin de
preparados de carbn, hierro, bismuto, sales de plata, etc.
66
c). OLOR. El olor fecal, caracterstico, se hace ftido en todos los procesos que cursan con
putrefaccin de las protenas ingeridas o endgenas (lo cual puede ocurrir, aunque no
siempre, en pacientes con insuficiencia gstrica, biliar o pancretica, colitis, cncer, etc.), y
sobre todo en las melenas, en el cncer de colon,
en el absceso abierto en el intestino grueso. En la acolia es desagradable, pero no
hediondo. El olor rancio, agrio es de las diarreas de fermentacin con trnsito rpido a
partir del ciego. Inodoras se vuelven las deposiciones durante las curas con antibiticos
intestinales. De olor amoniacal son las diarreas urmicas y en las fstulas rectovesicales.
Entre los parsitos ms comnmente encontrados en el humano se hallan:
ASCARIS LUMBRICOIDES
Nematodo que se adelgaza en cono hacia los extremos, de color rosado-nacarado. Vive en
el intestino delgado del hombre, que es su husped exclusivo, ya sea libre en la luz
intestinal o bien fijos a la mucosa. Los huevecillos de los scaris no estn embrionados
cuando son expulsados con las materias fecales, pueden permanecer viables por mucho
tiempo en la tierra hmeda, a cubierta de los rayos directos del sol, sin que les afecte al
parecer el fro, la putrefaccin y la accin de algunas sustancias qumicas. El hombre se
infecta al ingerir estos huevos maduros a los que, al llegar al duodeno, son atacados por los
jugos intestinales. Las larvas comienzan a moverse en forma activa en el interior del huevo,
hasta que emergen por una pequea hendidura. Penetran activamente a la mucosa intestinal,
caen a la circulacin portal, atraviesan el hgado y llegan al corazn derecho. Desde aqu,
las larvas son impulsadas al pulmn, donde quedan atrapadas en los capilares pulmonares.
En este sitio, siguen el proceso de maduracin, hasta que rompen el
endotelio capilar y alveolar, pasando al aparato respiratorio, por el cual ascienden hasta
franquear la epiglotis. Llegan a la faringe, son deglutidas y vuelven as hasta su punto de
partida, el duodeno. Una vez en el intestino delgado, las larvas completan su maduracin.
La invasin de organismo humano por scaris, bien sea como adulto o como larvas, es la
ascariasis, la que puede ser causa de lesiones y trastornos de magnitud variable.
67
68
GIARDIA LAMBLIA
Protozoario flagelado predominante en los nios y caracterizado por la produccin de
cuadros gastrointestinales agudos y crnicos, de intensidad variable, en los adultos
comnmente es asintomtico. Se adquiere como consecuencia de las malas condiciones de
saneamiento ambiental (calidad de los medios de eliminacin de excretas y de basura, la
populacin de moscas, los grados de contaminacin del agua de bebida y de riego, con la
subsiguiente contaminacin de alimentos). Puede encontrarse en las heces como trofozioto
o quiste, el primero tiene forma semejante a una pera partida longitudinalmente, mientras
que los quistes tienen forma elipsoidal, tiene una membrana lisa y delgada, que envuelve al
citoplasma, incoloro y finamente granuloso en cuyo seno estn cuatro o ms ncleos.
Habita en el intestino delgado del hombre, sobre todo en el duodeno, se nutre por
imbibicin a travs de su membrana . Se le encuentra en la fase de trofozoito en las
materias fecales diarreicas y en la de quiste en las pastosas o formadas. Este parsito es
cosmopolita y es el ms comn de los flagelados intestinales del hombre, se le encuentra
69
entre el 5 y 54 % de las personas. Los quistes pueden ser capaces de resistir la accin de
varios factores que seran adversos para los trofozoitos. As los quistes permanecen viables
durante varios das en el agua potable, an en la que ha sido tratada corrientemente con el
cloro, pueden vivir en el intestino de las moscas por lo menos durante 24hs., en las
cucarachas viven hasta por doce das.
ENTAMOEBA HISTOLYTICA
Amiba que puede encontrarse en las heces bajo las formas de trofozoito, prequiste y quiste;
el trofozoito es la forma vegetativa activa, posee un ectoplasma que deriva en pseudpodos,
de aspecto hialino, ancho y transparente, posee un ncleo excntrico nico. Los prequistes
son clulas incoloras redondas u ovales ms pequeas que el trofozoito pero mayores que el
quiste, carecen de inclusiones de alimento. La formacin de seudpodos es bastante lenta y
el parsito no se desplaza. Los quistes son redondos u ovales, ligeramente asimtricos,
hialinos, con una pared lisa y refringente. El quiste inmaduro tiene un solo ncleo, mientras
que el maduro posee cuatro ncleos pequeos. La E. Histolytica es parsito obligatorio del
hombre. Habita en el colon en su luz y en el espesor de sus paredes, es ms abundante en el
ciego, en la porcin inicial del colon ascendente y en el recto. Se le puede encontrar
tambin en las dems porciones del intestino grueso, en la terminal del ileon y en el
apndice. Tambin puede vivir y multiplicarse en los tejidos del hgado, pulmones, cerebro,
vsceras y en la piel. La amiba absorbe sus alimentos en los tejidos disueltos por sus
enzimas citolticas e ingiere glbulos rojos, hemoglobina, sustancias parcialmente
sintetizadas parcialmente por el husped, fragmentos de tejido, todos ellos por inclusin de
un seudpodo. Puede ingerir bacterias y fragmentos de materias fecales del intestino. La
infeccin con E. Histolytica de cepas virulentas produce en el humano respectivo un
conjunto de lesiones y trastornos varios que se hacen patentes como enfermedad, la
amibiasis, mas comnmente en forma de colitis amibiana o amibiasis intestinal la cual
puede ser aguda, subaguda, y crnica. La infeccin amibiana del hgado y de otros rganos
suscita en ellos procesos patolgicos que a menudo conducen a la formacin de focos
70
TAENIA SOLIUM
La forma del cuerpo es la tpica de los cestodos, es decir, la de una cinta segmentada
transversalmente, de color blanco o levemente amarillenta, de longitud de 2 a 4 metros, por
lo general, an cuando puede llegar hasta 7 metros. Los huevecillos de los cestodos son
esferoidales u ovoidales y estn formados por el embrin u vulo fecundado, envuelto en
una membrana interna y en otra externa. Esta especie de tenia vive en las porciones
iniciales del intestino delgado, adherida a la mucosa mediante el rostelo con sus ganchos y
sus ventosas, por lo comn hay un solo parsito en cada husped, a lo que se debe el
nombre vulgar de solitaria, que se le ha dado a esta especie, pero en algunos casos se han
encontrado varios, hasta doce, en un solo individuo. El hombre es el nico husped
definitivo normal para la especie. El fecalismo humano es la principal circunstancia de
contaminacin del ambiente externo con elementos infectantes para los cerdos, sus
huspedes intermediarios normales. La costumbre de ingerir cruda o insuficientemente
cocida la carne de cerdo, cierra el ciclo para la infeccin humana por las tenias adultas, as
como la falta de higiene de frutas, verduras, manos o la presencia de vectores, dan ocasin
al riesgo de cisticercosis humana.
71
HYMENOLEPIS NANA
Los cestodos que forman esta familia se caracterizan por sus progltides que son casi
siempre ms anchos que largos, sus poros genitales son unilaterales y es escolex lleva una
sola corona de ganchitos. Los huevecillos son esferoidales u ovoidales envuelto en dos
membranas una interna y delgada con abultamiento en cada polo, del que emanan de 6 a 8
filamentos largos y ondulados, y la otra externa, gruesa y lisa. Habita en el tercio superior
del ileon, vive varias semanas. Los huspedes definitivos naturales son el hombre, los
ratones y las ratas. La transmisin depende del contacto directo, ya que los huevecillos,
poco resistentes, son sensibles al calor y a la desecacin y no puede sobrevivir fuera del
husped. Se transmite directamente de mano a boca y con menos frecuencia por agua y
alimentos contaminados, y tal vez por insectos como huspedes intermediarios. Los hbitos
poco higinicos de los nios pequeos favorecen la persistencia del parsito, en los grupos
de menor edad. La humanidad es la fuente principal de infeccin, pero en ocasiones puede
provenir de roedores. Generalmente no hay lesiones en la mucosa intestinal pero puede
producirse una enteritis, por infeccin masiva, las infecciones ligeras no ocasionan
sntomas o solo trastornos abdominales vagos. En infecciones masivas, los nios pueden
sufrir anorexia, dolores abdominales con diarrea o sin ella, vmitos y vrtigo.
72
STROGYLOIDES STERCOLARIS
Nematodo filariforme, pequeo, incoloro, semitransparente, con cutcula finamente
estriada, los gusanos se encuentran mas frecuentemente en duodeno y parte proximal de
yeyuno pero en infecciones intensas, tambin pueden ser afectados ploro, intestino delgado
y grueso, y vas biliares proximales y pancreticas. Esta especie se puede presentar en dos
formas distintas, la de vida libre y la parasitaria. La primera vive en el suelo y se la
considera como la forma natural en los lugares en que las condiciones del ambiente, sobre
todo la temperatura y humedad, son propicias para su vida y multiplicacin, se alimentan de
materia orgnica y se transforman en una larva filariforme, que es la forma infectante para
el hombre, permaneciendo en el suelo por perodos cercanos a los 50 das y, puesta en
contacto con la piel la penetra y alcanza la circulacin general por los vasos venosos y
linfticos; puede llegar a corazn derecho y pasar a pulmn, asciende por el rbol
respiratorio a travs de los bronquolos, los bronquios, la trquea, y la laringe, alcanza la
faringe, donde es deglutida, pasa al tubo digestivo, descendiendo hasta llegar al intestino
delgado, penetra la mucosa intestinal en donde comienza la postura de huevos,
completando as el ciclo biolgico. En los puntos por donde penetran las larvas en la piel,
producen prurito seguido de una pequea ppula y edema; a su paso por pulmn provoca la
formacin de pequeos focos de neumonitis; en el intestino puede producir inflamacin y
lcera superficial.
73
MATERIAL Y EQUIPO:
Microscopio
Portaobjetos y cubreobjetos
Aplicadores de madera
Abatelenguas
Cinta scotch
Solucin salina isotnica
Solucin de lugol
Materia fecal.
PROCEDIMIENTOS:
2. Colocar en un portaobjetos limpio una gota de solucin salina y en otro una gota de solucin de lugol.
3.Con ayuda de un aplicador de madera tomar una pequea porcin de material fecal y
mezclarla con las soluciones
4. Colocar cuidadosamente sobre la muestra un cubreobjetos.
5. Observar al microscopio con los objetivos de seco dbil (10/0.22) y seco fuerte (40/0.65).
74
NOTA:
Conviene hacer esta maniobra al despertar el paciente y antes del aseo matinal. El examen
se efecta diariamente, usando una placa, hasta completar 5 7 das en total.
BIBLIOGRAFA:
1. A. Atas, A. Neghme. Parasitologa Clnica. 2. Edicin 1984.Edit. Mediterrneo. p155.
2. Manuel Matnez Bez. Manual de Parasitologa Mdica 2. Edicin 1979. Edit. La Prensa
Medica Mexicana. p. 162, 165, 270-271.
3. Alfonso Balcells. La Clnica y el Laboratorio. 18. Edicin 1999. Edit. Masson. p 253258, 323
4. H.W. Brown. F.A. Neva. Parasitologa Clnica. 5a. Edicin. Edit. Interamericana. p 142.
75
76
77
son resorbidos por la circulacin portal, para se excretados por el hgado. Parte del
urobilingeno y del estercobilingeno resorbidos se excreta por la orina junto con el
mesobilirrubingeno. La urobilina, forma oxidada del urobilingeno, tambin se encuentra
en la orina normal.
La orina no deber ser expuesta a la accin de la luz solar. De esta manera se eliminan
resultados demasiados bajos o falsos negativos debido a la oxidacin. Resultados
demasiados altos o falsos positivos pueden ser causados por medicamentos que se tien de
rojo en la zona cida.
Bilirrubina: La bilirrubina es el resultado de la degradacin de la hemoglobina en el
sistema retculoendotelial. En los microsomas de los hepatocitos se conjuga la bilirrubina
con el cido glucurnico, formando el glucuronato de bilirrubina (bilirrubina directa), el
cual se excreta junto con la bilis al intestino en donde se transforma en estercobilingeno.
La bilirrubina conjugada o directa es susceptible de eliminarse por la orina, en tanto que la
bilirrubina indirecta no lo es. Normalmente en un individuo sano, no debe aparecer
bilirrubina en la orina, ya que la presencia de sta sugiere obstruccin parcial o completa
del sistema biliar intra o extra heptico y dao hepato-celular. La eliminacin de
bilirrubina en la orina, puede apreciarse en varios trastornos tales como diversas formas de
ictericia obstructiva (intra y extra heptica, as como en la parenquimatosa); en la hepatitis
aguda crnica, en la cirrosis heptica, colelitiasis, ictericia idioptica del embarazo,
carcinoma de la cabeza del pncreas, sndrome de Dubln-Johnson, y en algunas
intoxicaciones. La presencia de grandes cantidades de Vitamina C puede dar lugar a
resultados demasiados bajos o falsos negativos. La orina no deber ser expuesta a la luz
solar.
Sangre: En las personas sanas, normalmente se encuentran en la orina algunos eritrocitos,
los que entran en ella probablemente por diapdecis. La aparicin brusca de sangre o sus
pigmentos en la orina siempre es grave y por lo tanto, no deben omitirse esfuerzos para
determinar su origen y naturaleza. En trminos generales, la sangre se manifiesta en la
orina bajo 3 formas: Hematuria, Hemoglobinuria y Mioglobinuria. La hematuria es la
presencia de eritrocitos intactos en la orina; y se presenta bajos dos formas: Microhematuria
(no visible a simple vista) y Macrohematuria (visible a simple vista). La macrohematuria
puede ser inicial (origen uretral), completa (origen renal), final (de origen vesical) y su
presencia en la infancia sugiere: nefritis, pielonefritis, infeccin aguda o tumor del rin o
de vas urinarias, mientras que en los adultos sugiere: tumor, clculos, traumatismos,
tuberculosis. La hemoglobinuria se refiere al hallazgo en la orina de hemoglobina libre o
sus derivados qumicos inmediatos, los que son excretados por el rin. Se presenta cuando
existe una extensa o rpida destruccin de eritrocitos circulantes, de tal modo, que el
sistema reticuloendotelial es incapaz de metabolizar o almacenar las cantidades excesivas
de hemoglobina libre como en los casos: quemaduras extensas, traumatismo por
aplastamiento, transfusiones por sangre incompatible, paludismo, anemia hemoltica
congnita o adquirida. La mioglobinuria denota la presencia de mioglobina en la orina y se
presenta cuando los niveles plasmticos de 15 a 20mg% son rebasados; en general es
causada por lesiones o enfermedades que afectan los msculos estriados como: extenso
aplastamiento muscular, necrosis muscular, postquirrgico muscular, post-ejercicio intenso
en personas no entrenadas, dermatomiositis. En cuanto a la presencia de sangre en orina,
los valores normales indicados en el perfil urinario se refieren a eritrocitos intactos. El
79
Cilindros.- Se forman en la luz de los tbulos del rin por precipitacin o gelificacin de
la mucoprotena de Tamm-Horsfall, por agrupamiento de clulas o de otros materiales
dentro de una matriz proteica, por adherencia de clulas o de material a la matriz, o por
conglutinacin de material en el interior de la luz tubular. Algunos cilindros pueden
contener protenas plasmticas.
Los cilindros se disuelven en orinas alcalinas, en orinas neutras de densidad 1.003 o menos.
La presencia de cilindros en la orina se acompaa con proteinuria. Pueden estar presentes
en casos de dao glomerular, dao tubular, inflamacin renal, infeccin renal. Entre los
diversos tipos se encuentran: cilindros hialinos, eritrocitarios, leucocitarios, epiteliales,
granulosos, creos y grasos.
Estructuras Diversas.- Otras estructuras que pueden aparecer en la orina son: bacterias,
hongos, cilindroides, espermatozoides, moco, grasa, cristales de almidn, fibras, gotitas de
aceite.
Parsitos.- Ocasionalmente pueden encontrarse parsitos en la orina, ya sea porque el
tracto urinario ha sido contaminado por heces fecales o por contaminacin vaginal. Entre
los parsitos ms comunes se encuentran: Trichomonas vaginalis, Enterobius vermicularis,
Schistosoma haematobium, huevos de este mismo.
OBJETIVO:
Realizar el examen general de orina (fsico, qumico y microscpico) de una muestra
problema a fin de establecer la importancia clnica de cada uno de sus parmetros.
MATERIAL Y EQUIPO:
Tubos de ensaye de 13x100mm
Probeta de 100 mL
Probeta de 50 mL
Portaobjetos
Pipeta Pasteur
Cubreobjetos
Densmetro
Refractmetro
Centrfuga
Microscopio
Tiras reactivas Combur 10 Test
Orina problema.
81
PROCEDIMIENTOS:
I.- DETERMINACIN DE PARMETROS FSICOS:
a) Determinacin del color.
El espcimen deber ser examinado bajo buenas condiciones de luz y a travs del recipiente
contra un fondo blanco. La coloracin se reporta por la escala de VOGEL , siendo vogel I
el color amarillo plido, vogel II el color amarillo claro, vogel III el color mbar claro, y as
sucesivamente hasta llegar al color ms oscuro.
82
espcimen viejo o una infeccin en el tracto urinario, as como un olor frutal sugiere una
diabetes sacarina.
d) Determinacin de la Densidad o Gravedad Especfica (GE)
1. Uso del Densmetro
Vierta aproximadamente 40 ml de orina en una
probeta.
Descienda suavemente el Densmetro en la orina y
sultelo.
Espere a que el Densmetro se detenga.
No deber tocar las paredes, ni el fondo de la
probeta.
83
VALORES DE REFERENCIA:
GE normal: 1,020 (variacin normal: 1,010~1.025).
GE baja: menos de 1,010 (trastornos renales o endocrinos).
GE elevada: superior a 1,025 (glucosuria, proteinuria).
Una cifra reducida carece de importancia si el paciente ha ingerido una gran cantidad de
lquidos antes del ensayo.
84
Resultados:
Los resultados de las tiras reactivas son obtenidos en unidades clnicamente significativas
por comparacin directa con la carta de color cuando las tiras se usan visualmente. Podr
existir variabilidad clnica bajo ciertas condiciones.
85
Eritrocitos:
a) Intactos: pequeos discos
amarillentos,
ms
obscuros en los bordes
(8m).
b) Festoneados: con bordes
espinosos y dimetro
reducido (5 6 m)
c) Henchidos: crculos de
poco espesor y dimetro
aumentado (5 6 m)
86
Levaduras:
No se deben confundir con eritrocitos
Tamao: 5 a 12 m
Forma: Cuerpos redondeados u ovales
de varios tamaos, que se hallan juntos.
Se pueden observar brotes.
No son solubles en cido actico.
Tricomonas:
Tamao: 15 m
(equivalente a 2
eritrocitos)
Forma: Redonda, globular.
Movilidad: mviles en la orina fresca
(giran y se vuelven)
Membrana ondulante: lateral
Flagelos: 4 flagelos ms o menos visibles
Espermatozoides
Cabeza: muy pequea (5 m)
Flagelo: largo y flexible 50 m
Movilidad: mviles en la orina muy
fresca
Clulas Epiteliales:
Clulas Epiteliales Escamosas:
Grandes y rectangulares: provienen
de la descamacin
(desprendimiento de clulas del
epitelio de los conductos y rganos
urinarios)
Se originan en el urter o la vagina
87
Clulas renales:
Las clulas renales son pequeas
Aprox. Del doble de un leucocito.
Son granulosas, sus ncleos
refractan la luz y son claramente
visibles. Casi siempre se
encuentran con protenas
urinarias.
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Cilindros:
Se forman durante las enfermedades de los tbulos renales, son estructuras alargadas que
pueden contener eritrocitos, leucocitos, clulas y depsitos de sustancias qumicas.
Cilindros hialinos:
Son transparentes y refractan ligeramente
la luz; los extremos pueden ser
redondeados o delgados. Se pueden
encontrar en individuos sanos despus de
esfuerzos musculares intensos.
Cilindros granulosos:
Estos cilindros son ms bien cortos,
llenos de grnulos voluminosos, de
color amarillento y extremos
redondeados. Los grnulos
provienen de clulas epiteliales
degeneradas de los tbulos renales.
Cilindros sanguneos:
Estos cilindros se encuentran llenos
de eritrocitos ms o menos
degenerados, de color acastaado.
89
Cilindros de pus:
Los
verdaderos
se
llenan
completamente
de
leucocitos
degenerados (a). Los cilindros hialinos
pueden contener algunos leucocitos (b)
Cilindros grasos:
Son raros, refractan intensamente la luz,
son de color amarillento, bordes mellados
y claramente visibles de extremos
redondeados. Se encuentran en casos de
enfermedades renales graves.
Falsos cilindros:
No se deben confundir con cilindros.
Acumulaciones de cristales de
fosfatos que son pequeas y
claramente
delimitadas
(a).
Acumulaciones de moco translcido,
cuyos extremos se adelgazan hasta
tomar forma de hilos (b).
Diversas sustancias extraas:
El empleo de recipientes o
portaobjetos sucios, muestras
expuestas al aire, favorecen el
hallazgo de:
gotas de aceite que refractan la luz
(a), grnulos de almidn de color
negro-azulado (b), granos de polen
(c), pelos (d), fibras de algodn (e),
burbujas (f).
90
Cristales:
Oxalato de calcio:
Forma: semejan sobres de correo (a),
de1020m.
Forma: semejante a cacahuates enteros
(b), de 50 m, refractan intensamente la
luz.
cido rico:
Forma: variada ( cuadros, rombos, cubos
o formas de rosas), de 30 150 m, de
color: amarillo o rojo pardo.
Fosfatos triples:
Forma: rectangulares (1), o semejantes a
hojas de helecho o estrellas (2), de 30
150 m ,incoloros, refractan la luz.
Uratos:
Forma: semejan cactos (1) o haces de
agujas (2), de 20 m, de color amarillo,
refractan la luz.
91
Fosfatos amorfos:
Grnulos pequeos, blanquecinos,
frecuentemente dispersos.
Uratos amorfos:
Grnulos muy pequeos, de color
amarillento, agrupados en
racimos compactos.
92
Colesterol:
Laminillas cuadradas con escotaduras
en un lado, de 50 a 100 m, incoloras,
refractan intensamente la luz
Bilirrubina:
Cristales sumamente pequeos,
cuadrados, esfricos o en agujas de 5 m.
De color castao.
BIBLIOGRAFA:
1. Argeri Lopardo.- Anlisis de Orina. Fundamentos y Prctica. Editorial mdica
Panamericana. Mxico 1993.
2. Clinitek., Manual del Usuario, Mxico 1999.
Graff.-Analisis de Orina.-Atlas a color. 1 Reimpresin Editorial Mdica Panamericana.
Mxico 1987.
3. Iovine Selva Iovine.- El Laboratorio en l Diagnostico de la enfermedad. 10
Reimpresin Editorial Mdica Panamericana. Argentina 1988.
4. Iovine Selva Iovine.- El Laboratorio en la clnica.- 3 Edicin Editorial Mdica
Panamericana. Argentina 1985.
5. Organizacin Panamericana de la Salud.- Manual de Tcnicas Bsicas para un
Laboratorio de Salud.- Serie paltex para tcnicos medios y auxiliares. Publicacin
Cientfica No. 439 # 2. Washington D.C. E.U.A. 1983.
6. Hamilton/M.B. Rose. Diagnostico Clnico.- 1 Edicin Editorial Interamericana, Mxico
1985.
7. Kova Glastic Slide.- Instructivo.- Bayer de Mxico. 1999.
93
ANEXOS
DE
94
TIPO DE RESIDUOS
SANGRE.
La sangre y los componentes de
sta, slo en forma lquida, as
como los derivados no
comerciales (hemoderivados)
Recipientes desechables que
contengas sangre lquida (bolsas
de transfusin, jeringas, etc.).
Material de curacin, empapado,
saturado o goteando de
sangre/lquido sinovial,
pericrdico, lquido pleural,
cefalorraqudeo o peritoneal.
CULTIVOS Y CEPAS DE AGENTES
INFECCIOSOS.
ESTADO
FSICO
Lquidos
COLOR
Recipientes
Hermticos
ROJO
Bolsa de Polietileno
Slidos
Bolsa de Polietileno
Slidos
Lquidos
RESIDUOS NO ANATMICOS.
ENVASADO
ROJO
Recipientes
Hermticos
Bolsa de Polietileno
ROJO
Slido
Lquido
Recipientes
Hermticos
Slidos
Recipientes rgidos
de Polipropileno
ROJO
95
96
97
98
Importante:
Nunca se intente puncionar una vena por
un lado.
Nunca se introduzca la aguja con el bisel
hacia abajo.
99
100
101
102
La sangre debe fluir libremente, se desecha la primera gota, secndola con una torunda de
alcohol y se hace la toma.
BIBLIOGRAFA:
1. Aiquel. F. Analisis clinicos.-4 edicin, editorial mdica panamericana.1977.
2. Guerrero garca rafael.- manual de laboratorio de hematologa. Primera edicin.
Universidad veracruzana. Mxico, 1997.
3. Oppenheim.-manual para tecnicos de laboratorio.-1 reimpresin. Editorial mdica
panamericana. 1982.
4. Organizacin panamericana de la salud.- manual de tcnicas bsicas para un laboratorio
de salud.- serie paltex para tcnicos medios y auxiliares. Publicacin cientfica no. 439 # 2.
Washington D.C. E.U.A. 1983.
103
104
C.-LISTA DE COTEJO
NOMBRE DE LA PRCTICA:_______________________________________________
GRADO:___________GRUPO:_________FECHA:_______________________________
No. NOMBRES
1.
2.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
C.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 C
AFECTIVA
5%
PRCTICA
95%
105
106
5
Muestra ideas principales que hacen que
despierte el inters por leer (antecedentes,
contexto, procedimiento)
4
Se aportan pocas ideas que llaman la
atencin e invitan a seguir leyendo, el
contexto, procedimiento y
antecedentes
Se centra en la utilidad del trabajo y
la importancia de realizar la prctica
y est bien redactada.
JUSTIFICACIN
METODOLOGA
Se describe el procedimiento de
manera organizada y secuencial, poco
comprensible y justificable.
RESULTADOS
CONCLUSIN
3
Tiene ideas centrales muy
breves y poco claras, carece
de antecedentes, contexto y
procedimiento.
Refleja la importancia que
tiene la elaboracin de la
prctica, pero el texto no es
muy comprensible.
Se describe el procedimiento
con escasa secuencia y
coherencia, carece de
informacin relevante y
justificacin.
Se muestran resultados
breves, no incluyen
ilustraciones, clculos y
tablas.
Se expresa teora y
resultados sin contraste y
reflexin.
2
No establece ideas principales del
contenido, no despierta inters,
carece de elementos descritos.
No menciona la utilidad del
trabajo, solo se describen cosas
sin semejanza alguna.
Carece de claridad, se cantinflea,
no hay procedimiento y
justificacin.
PUNTAJE
25
20
15
10
NOMBRE DE LAP RCTICA:____________________________________________EQUIPO:______GRUPO:________FECHA:_____________________
107