EL CULTIVO IN VITRO COMO HERRAMIENTA PARA EL APROVECHAMIENTO,
MEJORAMIENTO Y CONSERVACIN DE ESPECIES DEL GNERO AGAVE
La importancia del agave abarca tres aspectos:
Valor ecolgico Valor econmico Valor cultural
Cabe considerar que es uno de los vegetales ms representativos en Mxico, pero
a su vez muchas de sus especies han sido descuidadas; el agave es un recurso natural de suma importancia para la regin del altiplano. Es por ello que con la llegada de los conquistadores espaoles, el cultivo de los agaves fue llevado a otras regiones de Norteamrica, e incluso a otros continentes. Un ejemplo de esto es la especie Agave americana, llevada por los europeos a las islas Azores, Canarias y gran parte de la cuenca del Mediterrneo, en donde se convirti en una especie ornamental muy importante. Actualmente, los tallos (pias), quiotes (inflorescencias inmaduras), bases de las hojas y flores son an parte de la dieta en muchas regiones del pas, mientras que las hojas se usan como forraje para el ganado. El aguamiel, obtenido de la pia y de la base del quiote de varias especies de Agave, ha sido un complemento muy importante en la dieta de los pobladores de las zonas ridas. Asimismo es la base de una industria, ya que puede fermentarse para obtener pulque, concentrarse para obtener miel de maguey, as como ser procesada para obtener fructosa. La NOM-059-ECOL-2001 reconoce la existencia de 18 especies dentro del gnero cuya supervivencia se ve severamente amenazada en estos momentos. Esta situacin se debe, principalmente, a la sobreexplotacin de poblaciones silvestres, el saqueo ilegal de plantas jvenes para ser usadas como ornamentales y la destruccin de su hbitat. El crecimiento muy lento de estas plantas, as como sus bajas tasas de reproduccin asexual y reproduccin sexual limitada por problemas de polinizacin y viabilidad de las semillas, son factores que hacen a los agaves difciles de multiplicar masivamente por mtodos convencionales. Una alternativa para la resolucin de estos problemas es la aplicacin en estas especies de las tcnicas de propagacin y mejoramiento derivadas de la Biotecnologa Vegetal. En estos momentos, la tcnica ms usada en este campo es la llamada micro propagacin o in vitro, misma que consiste en la propagacin asexual de plantas utilizando las tcnicas de cultivo de tejidos vegetales.
Las ventajas que ofrece la micropropagacin con respecto a los mtodos
convencionales: a) Se trata de un sistema de propagacin clonal, es decir, que mantiene todas las caractersticas genotpicas del material inicial seleccionado. b) Debido a que se realiza todo el proceso en un laboratorio bajo ambientes controlados se trata de un sistema totalmente independiente de las condiciones externas, por lo que no se ve afectado por las estaciones del ao, sequas, heladas, altas temperaturas u otros factores ambientales. c) El nmero de plantas que se puede obtener mediante micropropagacin es por su naturaleza prcticamente ilimitado. d) El espacio que se requiere es mnimo, y el tiempo en que puede realizarse el proceso es relativamente corto. e) Las plantas que se obtienen estn libres de bacterias, hongos y nemtodos fitopatgenos, y con tcnicas ms especficas se pueden liberar incluso de virus y viroides. En el caso particular de los agaves, la propagacin asexual por hijuelos tiene la desventaja de que stos llevan de inicio los patgenos que pudieran estar afectando a la planta madre. La biotecnologa tiene otras tcnicas, en las que destacan los marcadores moleculares o de ADN y la transformacin gentica. La regeneracin in vitro se ha alcanzado a travs de la obtencin de brotes a partir de meristemos auxilares localizados en el segmento basal de las plantas, o bien a travs de organognesis o embriognesis somtica indirecta, es decir, a partir de tejido calloso generado tambin in vitro. En lo que respecta al mejoramiento de las plantas, la Biotecnologa ofrece la transformacin gentica. En el caso del agave Flores-Benitez (2007) reportan la transformacin gentica del Agave salmiana a travs de dos tcnicas diferentes, cocultivo con Agrobacterium tumefaciens y bombardeo con micropartculas cargadas con ADN. Se usaron slo genes reporteros y marcadores y la regeneracin de plantas transgnicas se hizo a travs de embriognesis somtica. Por su parte, Rodrguez-Hernndez y col. (2007) generaron races transformadas de esta misma especie (A. salmiana) a travs del cocultivo con Agrobacterium rhizogenes, y demostraron la capacidad de estas races para ser colonizadas por el hongo micorrcico Glomus intraradices. Otra rea en la que se estn iniciando los estudios con las plantas del gnero Agave, es la Biotecnologa de Alimentos. En este campo, son de especial inters los estudios acerca de los fructanos, carbohidratos no reductores solubles en
agua, compuestos de unidades de fructosa, que usualmente contienen una
molcula de glucosa terminal. Su estructura puede ser en forma lineal o ramificada y en menor grado cclica. Son los principales productos fotosintticos generados por los agaves. En el Centro de Ciencias Bsicas de la Universidad Autnoma de Aguascalientes se han desarrollado proyectos dirigidos al establecimiento de metodologas que permitan el cultivo y propagacin in vitro de varias especies del gnero Agave. Se han seleccionado especies importantes para la produccin de mezcal y pulque, como lo son A. cupreata, A. karwinskii, A. palmeri, A. potatorum y A. salmiana. Tambin se seleccionaron algunas especies silvestres, amenazadas y con alto valor ornamental, como A. bracteosa, A. chiapensis, A. difformis, A. nizandensis, A. obscura, A. ornithobroma, A. peacockii, A. titanota y A. victoria-reginae. Se ha alcanzado la propagacin in vitro de todas estas especies a travs de la produccin de brotes en meristemos basales. Cada uno de los brotes formados puede enraizarse para generar una nueva planta, o bien, puede ser usado para obtener ms explantes para un nuevo ciclo de propagacin. Las tasas de proliferacin obtenidas en la mayora de las especies indican que bajo sistemas de propagacin masiva podran obtenerse entre 10 000 y 1 000 000 de brotes partiendo de un solo explante y sometindolo a cinco ciclos de proliferacin in vitro (menos de un ao en tiempo). Con los mtodos antes descritos, se han generado plantas que muestran una apariencia y desarrollo normales en suelo. Otra va de regenera cin que se ha probado con algunas de las especies mencionadas, es la organognesis indirecta. sta consiste en una primera fase en la que se genera tejido calloso al inocular explantes basales, o segmentos de hoja, en medios de cultivo con reguladores del crecimiento en dosis ms altas que las requeridas para la propagacin a partir de meristemos. Otro aspecto que se ha trabajado, es la conservacin in vitro de estas especies de Agave, esto a travs de la conservacin de un banco de germoplasma de las mismas. Se han definido ya algunos medios de cultivo que retardan significativamente el crecimiento de los tejidos sin causar efectos negativos en la viabilidad de los mismos.