FOSFORILACIN OXIDATIVA

a) Reacciones de transferencia de electrones

en las mitocondrias
b) Sntesis de ATP

LOCALIZACIN Y ESTRUCTURA DE LAS MITOCONDRIAS

LA FOSFORILACIN OXIDATIVA SE LLEVA A CABO EN LA MEMBRANA

INTERNA MITOCONDRIAL
Membrana externa
Espacio
intermembranal

PERMEABLE A MOLCULAS PEQUEAS E IONES

Membrana interna
EXISTEN TRANSPORTADORES ESPECFICOS
Y ALOJA A LOS COMPONENTES DE LA CADENA
RESPIRATORIA Y LA ATP SINTASA

Matriz
CONTIENE AL COMPLEJO DE LA PIRUVATO
DESHIDROGENASA Y LOS ENZIMAS DEL CICLO DE KREBS
Y DE OTRAS RUTAS (
-OXIDACIN DE CIDOS GRASOS Y
OXIDACIN DE AMINOCIDOS)

RESPIRACIN AERBICA: INCLUYE GLUCLISIS, CICLO DEL CIDO CTRICO

Y FOSFORILACIN OXIDATIVA

CICLO DEL CIDO

CTRICO

FOSFORILACIN OXIDATIVA

LA FOSFORILACIN OXIDATIVA COMIENZA CON LA

ENTRADA DE ELECTRONES EN
LA CADENA RESPIRATORIA

DE DNDE VIENEN LOS ELECTRONES?

LA MAYOR PARTE DE LOS ELECTRONES PROVIENEN
DE LA ACCIN DE DESHIDROGENASAS
QUE CAPTAN e- DE VAS CATABLICAS

LOS ELECTRONES GENERADOS DURANTE

LA GLUCLISIS Y
EL CICLO DEL CIDO CTRICO
SON CANALIZADOS HACIA

LA CADENA
TRANSPORTADORA
DE ELECTRONES
(CADENA RESPIRATORIA)

LOS ELECTRONES SE CAPTAN A TRAVS DE

ACEPTORES UNIVERSALES DE ELECTRONES
REDUCIDO NMERO DE
TRANSPORTADORES
DE ELECTRONES
Nucletidos de
Nicotinamida:
NAD+, NADP+

Quinonas

Citocromos

Nucletidos de
Flavina:
FMN, FAD

Protenas
Ferro-sulfuradas

LOS NUCLETIDOS DE NICOTINAMIDA.- Las deshidrogenasas ligadas

a NAD+ eliminan dos tomos de hidrgeno de sus sustratos

DESHIDROGENACIN

SUSTRATO REDUCIDO + NAD+

SUSTRATO OXIDADO + NADH + H+

TANTO EL NADH COMO EL NADPH SON TRANSPORTADORES

ELECTRNICOS HIDROSOLUBLES QUE SE ASOCIAN
REVERSIBLEMENTE CON DESHIDROGENASAS

LOS NUCLETIDOS DE FLAVINA.- La forma oxidada puede aceptar un

Electrn (formando un semiquinona) o dos electrones

Se encuentran fuertemente
unidos a las FLAVOPROTENAS
GRUPOS PROSTTICOS
Eo depende de su entorno

LOS ELECTRONES SE CAPTAN A TRAVS DE

ACEPTORES UNIVERSALES DE ELECTRONES
TRANSPORTADORES UNIDOS A MEMBRANA
(INTERNA MITOCONDRIAL)
Nucletidos de
Nicotinamida:
NAD+, NADP+

Quinonas

Citocromos

Nucletidos de
Flavina:
FMN, FAD

Protenas
Ferro-sulfuradas

LA UBIQUINONA, COENZIMA Q, Q
(benzoquinona liposoluble
con una larga
cadena lateral
isoprenoide)
ES HIDROFBICA

Puede actuar
como puente
entre un dador
de dos e- y un
aceptor de un
electrn

LOS CITOCROMOS SON PROTENAS QUE TIENEN COMO

COFACTORES A LOS GRUPOS HEMO (Fe)
TRES CLASES DE CITOCROMOS.- De acuerdo a diferencias en su
espectro de absorcin de la luz

a 600 nm
b 560 nm
c 550 nm

No covalente

Eo depende de su
interaccin con la protena

Covalente (Cys)

SON HIDROFBICAS, EXCEPTO EL CITOCROMO C

MITOCONDRIAL

PROTENAS FERRO-SULFURADAS.- El hierro est presente

No como grupo hemo sino en asociacin con tomos de
Azufre de residuos de Cys

Aconitasa

LA CADENA RESPIRATORIA
(FOSFORILACIN OXIDATIVA)
CONSTA DE UNA SERIE DE TRANSPORTADORES
ELECTRNICOS QUE ACTAN SECUENCIALMENTE,
LA MAYORA DE LOS CUALES SON
PROTENAS INTEGRALES CON GRUPOS PROSTTICOS
CAPAZ DE ACEPTAR Y DONAR UNO O DOS
ELECTRONES

LA INTERACCIN DE LOS TRANSPORTADORES DE ELECTRONES

CON LAS PROTENAS MODIFICA LOS POTENCIALES DE REDUCCIN
Transportador
de
electrones

Eo
Transportador
de
electrones

Eo

Eo

Eo

LOS TRANSPORTADORES DE ELECTRONES CEDEN,

A SU VEZ, LOS ELECTRONES A ACEPTORES
CON AFINIDAD POR LOS ELECTRONES

MS ELEVADA

POTENCIAL DE REDUCCIN ESTNDAR, Eo (V)

Es un parmetro que permite medir la afinidad del aceptor
por los electrones
FLUJO DE ELECTRONES:
EO BAJOS

EO MS ELEVADOS

A MEDIDA QUE LA GLUCOSA SE OXIDA ENZIMTICAMENTE,

LOS ELECTRONES LIBERADOS FLUYEN A TRAVS DE UNA
SERIE DE TRANSPORTADORES DE ELECTRONES
INTERMEDIOS HASTA EL O2
DONDE EL O2 TIENE UNA AFINIDAD MAYOR QUE LOS
TRANSPORTADORES INTERMEDIOS

DURANTE LA FOSFORILACIN OXIDATIVA SE LLEVAN A

CABO TRES TIPOS DE TRANSFERENCIA DE ELECTRONES:

1. Directamente como electrones.- Tal como sucede

en la reduccin de Fe3+ a Fe2+
2. En forma de tomos de hidrgeno
3. En forma de ion hidruro (:H-) portador de 2 e-

LA OXIDACIN DE GLUCOSA A DIXIDO DE CARBONO

REQUIERE DE TRANSPORTADORES DE ELECTRONES
ESPECIALIZADOS

10 NADH + 2FADH2
GAL3PDH
PiruvatoDH
isicitratoDH
-cetog DH
succDH
malDH

G=-2840 kJ/mol

POTENCIALES DE REDUCCIN ESTNDAR DE LOS

TRANSPORTADORES DE LA CADENA RESPIRATORIA

LOS TRANSPORTADORES DE ELECTRONES SE

ENCUENTRAN EN COMPLEJOS MULTIENZIMTICOS

(+) Espacio
intermembranal

E
-0.4
NADH

NAD+ (-0.315 V)
ADP+Pi

Complejo I (G= -69.5 kJ/mol)

-0.2

ATP
(+0.03V)
Succ FADH2

Complejo II

CoQ (0.045V)
ADP+Pi

Fum

Complejo III (G= -36.7 kJ/mol)

ATP

0.2
CytC (0.235V)
0.4

ADP+Pi

0.6

Complejo IV (G= -112 kJ/mol)

0.8

2H+ + O2

H2O (0.815 V)

ATP

REACCIN GLOBAL CATALIZADA POR LA CADENA

RESPIRATORIA MITOCONDRIAL
EO (v) -0.4

NADH

Rotenona
Q

-0.2
Cyt b

Antimicina A

0
Cyt c1

0.2

Cyt c

0.4
0.6
0.8

Cyt (a + a3)

CN- o CO
O2

COMPLEJO
ENZIMTICO/PROTENA

MASA
(kDa)

No. de
subunidades

I NADH deshidrogenasa

850

43 (14)

FMN, Fe-S

II Succinato deshidrogenasa

140

FAD, Fe-S

III Ubiquinona-citocromo c
oxidorreductasa

250

11

13

160

13 (3-4)

Citocromo c
IV Citocromo oxidasa

Grupo(s)
transportador(es) e-

Hemos, Fe-S

Hemo
Hemos, CuA, CuB

COMPLEJO I: NADH a Ubiquinona

4H+
43 subunidades

FMN

(4) Fe-S

Q
2H+

NADH

(2) QH2

Espacio
intermembranal
Membrana
interna
Matriz

FAD: Acil graso-CoA (

-oxidacin)
Glicerol-3-fosfato (hidrlisis de TG/ Gluclisis)

COMPLEJO II:
Succinato a Ubiquinona
Fe-S
FAD
Succinato

Espacio
intermembranal

Q
2H+

QH2

Membrana
interna
Matriz

COMPLEJO II

4 subunidades

MATRIZ

COMPLEJO III:Ubiquinona a citocromo c Complejo

Citocromo bc1

4H+
Cyt c
Q

(2) QH2
Fe-S
Cyt b
QH2

Cyt c1

Espacio
intermembranal
Membrana
interna

.Q-

Matriz

2H+

COMPLEJO III:Ubiquinona a citocromo c Complejo

Citocromo bc1

EL UBIQUINOL (QH2) SE OXIDA A Q AL TIEMPO

QUE SE REDUCEN DOS MOLCULAS DE CITOCROMO c

COMPLEJO IV: Citocromo c al O2 Citocromo oxidasa

2H+
Cyt c

Espacio
intermembranal

CuA
Cyt a
Membrana
interna

Cyt a3
CuB

Matriz

O2
2H2O

FLUJO DE ELECTRONES Y PROTONES A TRAVS DE LA

CADENA RESPIRATORIA
4H+

2H+

4H+

Espacio
intermembranal

Cyt c

III

IV

Membrana
interna

Matriz

II
NADH + H+

NAD+

Succinato

1
2 O2

2H+

H2O

[H+] y en carga
ENERGA ALMACENADA
FUERZA PROTN-MOTRIZ
a) Energa qumica potencial pH
b) Energa elctrica potencial

FOSFORILACIN OXIDATIVA
Energa del flujo de esntesis ATP
transduccin de energa
Hiptesis quimiosmtica
Energa se conserva por bombeo protones al espacio
intermembranal: gradiente electroqumico.
Fuerza protn-motriz: sntesis ATP
+ + +

+ + + +

- - - -

+ + +

+ + + + +
Fo
- - - - - - - - - - - - - - - +
H
F1
+

ADP + Pi

ATP

Espacio
intermembranal
Membrana
interna
Matriz

HIPTESIS QUIMIOSMTICA
EXPLICA EL MECANISMO POR EL CUAL SE ACOPLA
EL FLUJO DE PROTONES CON LA FOSFORILACIN
1) LOS PROTONES GENERADOS DURANTE EL
PASO DE ELECTRONES POR LA CADENA RESPIRATORIA
(COMPLEJOS I AL IV)
2) DAN LUGAR A LA
FUERZA PROTN-MOTRIZ (pH,
)
3) QUE IMPULSA LA FOSFORILACIN DEL ADP
PARA FORMAR ATP

COMPLEJO DE LA ATP SINTASA MITOCONDRIAL

Es una ATPasa tipo F (factor de acoplamiento de energa)
Complejo V
Dos componentes: F1, una protena perifrica de membrana
Fo, una protena integral de membrana

F1

Fo

F1 Fo de la ATP sintasa

F1

Fo

9 Subunidades
de cinco tipos
distintos
3 3

3 Subunidades
a b2 c10-12

MODELO DE UNIN Y CAMBIO DE LA ATP SINTASA

La catlisis rotacional es clave en el mecanismo
de unin y cambio de la sntesis de ATP
impulsada por el
bombeo de H+

Conformacin -ADP
Une ADP y Pi
Conformacin -ATP
Une fuertemente ATP
Conformacin -vaca
Baja afinidad por
ATP

ESPACIO
INTERMEMBRANAL
(10 H+)

En F1: tres sitios con diferente conformacin

(INTERCONVERTIBLES)
L(oose) : unin dbil a sustratos (ADP y Pi)
T(ight) : unin fuerte (sntesis ATP)
O(pen) : sin unin (abierto: salida ATP)

SNTESIS ATP:
1. Translocacin protones : Fo
2. Formacin enlace fosfoanhdrido de
ATP: F1

Glucosa

1 glucosa:

2 ATP
10 NADH
2 FADH2
1 GTP
1 NADH : 3 ATP
1FADH2 : 2 ATP

Glucosa6P
2 GALD3P

2 NADH
2 1,3BiPglicerato
2 piruvato
2NAD+

2 NPDH
AD

10 NADH X 3 ATP= 30 ATP

2 FADH2 X 2 ATP = 4 ATP
Gluclisis =
2 ATP
TCA
=
1 GTP

TOTAL
2
2

36 ATP
1 GTP