Espectrometria de Absoro Atmica (AA)

(ou Atomic Absorption Spectrometry AAS)

Mtodos espectromtricos: abrangem um grupo de mtodos analticos

baseados na espectrometria atmica e molecular;
Espectrometria de Absoro Atmica: pertence categoria da
espectroscopia atmica;
1) Histrico e Fundamentao da Tcnica
Absoro Atmica (AA): proposta no incio de 1955 por Walsh
tcnica de anlise qumica para determinar metais;
O fenmeno de AA foi observado inicialmente por Wollaston e
Fraunhofer e explicado por Kirchoff e Bunsen;
Como tcnica analtica tornou-se aceita na dcada de 60, aps a
introduo do primeiro instrumento comercial em 1959.
A espectroscopia atmica a principal ferramenta da qumica analtica:
alta sensibilidade, capacidade de executar anlise multielementares
simultaneamente e facilidade de automao;
Podem ser medidas concentraes dos constituintes em ppm ou ppb;
A absoro atmica permite detectar mais de 60 metais ou
metalides;

 A espectroscopia de AA se baseia na quantidade de radiao absorvida

pelos tomos neutros no estado fundamental do elemento de interesse, os
quais so produzidos na chama.
A passagem de radiao atravs de um meio constitudo de partculas
monoatmicas (p. Exemplo: sdio gasoso) provoca absoro da radiao
em algumas freqncias bem definidas gerao de espectros de
absoro tpico.

Neste caso excitao eletrnica ocorre somente num processo

eletrnico um ou mais eltrons dos tomos so levados para nveis de
energia mais altos (figura 6-17) gera o espectro de absoro da figura
6-19 dois picos de absoro, resultantes da excitao do eltron 3s
para dois estados 3p.
2) Viso Geral da AA Etapas:
1) Uma amostra

lquida aspirada (sugada) para a chama (cuja

temperatura de 2.000 a 3.000 K) processo de nebulizao:

transformao em fino aerosol e misturada com os gases combustvel
e oxidante que produzem a chama.
2) O lquido evapora e o slido remanescente atomizado (quebrado em
tomos) na chama (que substitui a cubeta na espectrofotometria
convencional).
Para criar as freqncias especficas da luz que so absorvidas,
so utilizadas lmpadas de ctodo oco.

3) A fonte de radiao (lmpadas de ctodo oco) bombardeia a amostra

com a radiao no comprimento de onda necessrio para ocorrer o
processo de transio eletrnica do tomo de interesse.
4) A radiao que no absorvida passa pela chama, passa pelo
monocromador (separa os comprimentos de onda) e chega at o
detector.

O nmero de tomos livres no percurso da radiao aumenta a

absoro da mesma e a com a medida da radiao absorvida pode-se

determinar a concentrao da espcie de interesse. A diferena entre a
quantidade de radiao emitida pela fonte e a quantidade de radiao
que chega ao detector proporcional concentrao de tomos no
estado gasoso determinao da concentrao do elemento de
interesse.

O uso de fontes de emisso de radiao luminosa e a seleo de

comprimento de onda permitem a determinao de diversos elementos.

Tcnicas de Atomizao de Amostras

a) Atomizao por chama
b) Atomizao por forno de grafite

a) Atomizao por Chama

Os processos que ocorrem durante a atomizao da amostra

processos complexos

etapa

mais crtica na espectroscopia de

chama e que limita a preciso deste mtodo.

Na atomizao por chama: uma soluo da amostra

nebulizada por um fluxo de oxidante gasoso, misturada com um

combustvel gasoso, e levada chama onde ocorre a atomizao;
Na chama ocorre um conjunto de processos complexos, desde a
formao do aerossol molecular, dissociao das molculas

transformao dos constituintes da amostra em estado de vapor,

decomposio dos constituintes em tomos ou molculas simples e
excitao eletrnica de uma frao de tomos ou molculas
resultantes;
Existem vrios tipos de combustveis e oxidantes usados em
espectrometria de absoro atmica;
Da combinao de tipos de oxidantes e combustveis obtm-se
diferentes faixas de temperatura;
Exemplos:
Combustvel

Oxidante

Temperatura, oC
4

Acetileno
Acetileno
Acetileno
Gs natural

Oxignio
Ar
xido nitroso
Ar

3.050 3.150
2.100 2.400
2.600 2.800
1.700 1.900

Para cada tipo de elemento qumico a ser determinado, escolhe-

se uma combinao de combustvel/oxidante.

As chamas de ar/acetileno e xido nitroso/acetileno so as mais

utilizadas em AA.

3) Instrumentao
Os instrumentos atuais de AA permitem obter resultados analticos
precisos com relativa facilidade de operao;
Os constituintes bsicos do espectrofotmetro de absoro atmica
so: a) fonte de emisso de radiao, b) sistema de nebulizaoqueima, c) sistema tico e d) sistema de decteo/leitura.

a) Fonte de emisso de radiao:

5

 Lmpadas de ctodo oco : so excelentes, eficientes e

econmicas fontes de radiao para a maioria dos elementos
determinados por absoro atmica;
constituda de um tubo selado de vidro com janela de quartzo,
transparente radiao emitida;
Possui atmosfera rarefeita de gases nobres (nenio ou argnio) a
baixa presso ( aproximad. 10-5 mbar). O ctodo oco ,
normalmente, uma cavidade cilndrica feita do metal do elemento
em anlise. O nodo de nquel ou tungstnio;
A aplicao de uma diferena de potencial entre o ctodo e o
nodo produz uma descarga eltrica que promove a ionizao do
gs de enchimento;
As partculas carregadas positivamente so aceleradas e incidem
sobre o ctodo de carga oposta;
Este fenmeno provoca o deslocamento dos tomos constituintes
do ctodo que, por coliso com o gs ionizado, so excitados. Ao
retornarem ao estado fundamental, os tomos emitem energia que
ser absorvida pelos tomos de mesmo tipo contidos na chama.
As lmpadas de ctodo oco tm um tempo de vida finito: a
absoro do gs de preenchimento pelas superfcies da lmpada
a principal causa do fim da sua vida;
A vida mdia de uma lmpada de ctodo oco de cerca de 1.000
horas.
6

b) Sistema de Nebulizao-Queima
Pode ser considerado como sendo um dos componentes mais simples
e de maior importncia no instrumento de AA.
Nele, a amostra nebulizada e atomizada no caminho tico do feixe de
luz proveniente da fonte de radiao.
Uma das principais diferenas entre os diferentes tipos de instrumentos
a cmara de nebulizao;
Cada fabricante procura encontrar sistemas visando melhor eficincia
de nebulizao.
Os principais sistemas de nebulizao so:
a) sistema prola de vidro b) sistema Mixing vanes c) sistema ultrasom.
i)

sistema prola de vidro

Sistema simples e de alta eficincia;

Na parte inicial de cmara de nebulizao h um tipo de anteparo

denominado prola de vidro (glass bead), onde o fluxo da amostra sofre

impacto, resultando no aumento do nmero de minsculas gotculas;

As partculas maiores que se condensam na periferia da cmara

de nebulizao so drenadas, enquanto que as menores seguem para

o queimador.
ii)

Queimadores

Alm da cmara de nebulizao o sistema possui um queimador, s

vezes denominado atomizador;
7

 Existem dois tipos principais de queimadores construdos de ao

inoxidvel ou de titnio, escolhidos conforme a mistura de gases a ser
empregada na anlise;
Para a chama de ar/acetileno queimador de ao inoxidvel, de 10
cm de comprimento e fenda de 1 mm de espessura;
Para a chama de xido nitroso/acetileno queimador de titnio, com 5
cm de comprimento e 1 mm de espessura da fenda.
iii) Queimadores de Pr-mistura
Neste sistema a formao de pequenas gotculas ocorre na cmara de
nebulizao com anteparos de ao inox impedem que gotas maiores
cheguem chama elas se chocam nos anteparos e so drenadas; o
excesso de lquido coletado no fundo da cmara e retirado por um
dreno;
O aerossol que alcana chama contm somente cerca de 5 % da
amostra inicial.
C) Sistema tico
Fotmetro: conduz a luz proveniente da fonte at o monocromador.
Filtros:

dispositivos

que

transmitem

radiao

de

determinados

comprimentos de onda, absorvendo total ou parcialmente outros

comprimentos de onda.
Monocromadores: formado por prisma ou rede de difrao, permitem
isolar uma banda de comprimento de onda bem mais estreita do que a
obtida pelo filtro.
D) Sistema Eletrnico de Deteco e Leitura
8

 O comprimento de onda da luz isolada pelo monocromador

direcionado para o detector, o qual serve de uma espcie de olho do
instrumento.
O componente que faz esta deteco o tubo fotomultiplicador: a
corrente eltrica amplificada neste tubo atravs de choques dos eltrons:
este chocam-se com a parede do tubo geram vrios eltrons. Esta
corrente eltrica amplificada gera um sinal, o qual representa a medida da
atenuao da luz sofrida na amostra. Este sinal convertido diretamente
em unidades de concentrao.

4) Otimizao das Anlises em Absoro Atmica

Existem muitos parmetros que afetam a eficincia da AA.
Alguns so caractersticos do instrumento e outros dependem do
operador.
Um operador deve sempre considerar o alinhamento do queimador, a
temperatura da chama, a vazo da entrada da amostra (taxa de
aspirao), a corrente da lmpada, o comprimento de onda da linha de
ressonncia.
Antes da determinao, o instrumento deve ser otimizado. Isto feito
em dois estgios: no primeiro, a transmisso otimizada pela seleo da
corrente da lmpada, comprimento de onda, largura da banda espectral e
pelo alinhamento da lmpada.
No segundo estgio, aciona-se a chama e se otimiza a absoro.
4.1) Acertos do Queimador
9

 Alinhar a fenda do queimador com o caminho tico da fonte da

emisso;
Verificar a caracterstica da chama para o elemento a ser determinado:
oxidante, neutra ou redutora;
Acertar a chama, aspirar a soluo e calibrar para a mxima
absorbncia, utilizando os botes de ajuste horizontal, vertical e
rotacional do queimador.
5) Interferncias em AA
Considera-se interferncia em AA qualquer efeito capaz de alterar a
concentrao de tomos no estado fundamental na chama e, em
conseqncia, a absoro.
Como a AA uma tcnica onde a amostra comparada a uma srie de
padres, deve-se ter a certeza de que a amostra e padres reagem do
mesmo modo, caso contrrio o resultado afetado.
As eventuais interferncias devem ser reduzidas, utilizando-se
amostras e padres semelhantes, e identicamente nebulizados e
atomizados.
As interferncias podem ser de vrios tipos, geralmente classificadas
como espectrais e qumicas.
5.1) Interferncia Espectral
aquela observada quando a medida da radiao absorvida
erroneamente mais elevada devido absoro de uma espcie que
no seja o elemento de interesse.
10

 Ocorre interferncia deste tipo sempre que qualquer radiao se

sobreponha a do elemento em determinao.
A radiao interferente pode ser uma linha de emisso de outro
elemento, um espectro de banda de um radical ou de uma molcula ou
radiao de fundo proveniente da chama, do solvente ou da amostra.
A absoro

de background ou radiao de fundo resultado da

atomizao incompleta dos elementos que compem a matriz.

Os tomos possuem linhas de absoro muito estreitas, que dispersam
a radiao numa ampla regio de comprimento de onda, sobrepondose a um comprimento de onda especfico de um analito.
Outra causa da absoro de fundo a absoro de radiao
proveniente das lmpadas de emisso de radiao por molculas
presentes na chama.
Para compensar este tipo de interferncia, utilizam-se corretores de
fundo que permitem a medida deste tipo de absoro para que possa
ser subtrada da total. Neste caso utiliza-se uma lmpada de deutrio,
A lmpada de deutrio e a lmpada de ctodo oco (LCO) emitem
radiao alternativamente sobre a amostra, sendo que apenas as
molculas da matriz da amostra absorvam, sendo ento a diferena de
absoro subtrada da energia emitida pela LCO, obtendo-se apenas a
radiao absorvida pelos tomos de interesse.

5.2) Interferncia Qumica

11

A interferncia qumica afeta a eficincia da dissociao da amostra na

chama durante a formao dos tomos no estado fundamental. Na
etapa de atomizao, se uma quantidade suficiente de energia no for
fornecida,

os

componentes

termicamente

estveis

no

sero

decompostos e interferncias qumicas ocorrem.

Uma forma de compensar este tipo de interferncia atravs da adio

de um outro elemento ou composto que ir formar um composto
termicamente estvel com o interferente.

Uma segunda maneira atravs do aumento da temperatura da

chama.

Interferncia da Matriz: interferncias devido aos efeitos fsicos da

matriz so aquelas que modificam a resposta do instrumento devido
variao de parmetros fsicos da soluo nebulizada, tais como
concentrao e viscosidade.

O efeito da matriz pode ser compensado:

Igualando-se ao mximo possvel, a composio dos padres em

relao amostra, atravs da adio de cidos reagentes ou outros
elementos presentes na amostra para manter as caractersticas fsicas
do padro em relao s amostras.

Por exemplo, se uma amostra for tratada com hidrxido de sdio, tanto
o branco como o padro devem conter o hidrxido de sdio.

A anlise de amostras orgnicas devem ser realizadas usando-se

padres preparados com sal de organometlicos e se possvel, com os
reagentes utilizados na preparao da amostra.

Exemplo: para um mesmo teor, por exemplo 1 mg/L de cobre em

soluo aquosa ou em metil-isobutil-cetona (MIBC) a soluo de MIBC
exibir um sinal de absoro trs vezes maior do que a soluo
12

aquosa, devido viscosidade, tenso superficial e temperatura da

chama.

6) Preparo da Amostra e das solues de Referncia (Solues

Padres ou Soluo Estoque)
6.1) Preparo da Amostra
O preparo da amostra uma das etapas mais importantes no
processo de anlise por AA;
Depende de uma srie de fatores: tipo de amostra (estado fsico:
slido, lquido), origem e natureza da amostra (orgnica ou
inorgnica - mineral, vegetal, animal), concentrao do analito e tipo
de analito, necessidade de conservao da amostra, entre outros.
Tempo total gasto numa anlise qumica (mdia de todas as
tcnicas):
- Coleta da amostra: 6%
- Preparo da amostra: 61%
- Anlise da amostra: 6%
- Processamento dos dados: 27%
Para cada tipo de amostra e de analito procedimentos diferentes
para a coleta e preparo da amostra;

13

 Existem procedimentos padres para cada amostra e analitos j

desenvolvidos e padronizados

disponveis na literatura

protocolos e procedimentos de preparo, coleta e anlises de

amostras ambientais, guas e alimentos, plantas, medicamentos,
etc.
Exemplos:
Anlise de guas e efluentes:
- AMERICAN PUBLIC HELTH ASSOCIATION APHA. Standard
methods for the examination os water and wastewater. 19 ed.
Washington, D.C. 1995.
- EPA Environmental Protection Agency (EUA): www.epa.gov
- Companhia de Tecnologia de Saneamento Ambiental CETESB
So Paulo.
Anlise de alimentos, plantas, minerais, medicamentos, etc.:
- A.O.A.C. - ASSOCIATION OF OFFICIAL ANALYTICAL CHEMISTS.
Official methods of analysis of the Association of Official Analytical
Chemists. Washington, D. C.
Anlise de alimentos e medicamentos:
- FDA - Food and Drug Administration - (EUA).

14

 Exemplos

de Aplicaes

de

Protocolos

de

Anlise

ou

Protocolos Modificados:
Peridicos da rea Ambiental:
- Environmental Science Technol.
- International Journal Environm. Pollution.
- Analytical Chemistry.
- Enrironmental Chemistry.
- Etc.
Peridicos Nacionais da rea de Qumica e de Sade:
- Qumica Nova.
- Cadernos de Sade Pblica
- Revista Sade Pblica
Busca de assuntos gerais e especficos em todos os peridicos
internacionais mundiais (todas as reas da Qumica):
- Chemical Abstracts: resumos dos artigos de peridicos. Disponvel
em material impresso (volumes mais antigos) e em

CD-ROM

(volumes mais recentes) disponvel na biblioteca da UEM Maring.

Internet:
- Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa: legislao.
Endereo eletrnico: www.anvisa.gov.br
15

 Portal para busca de artigos:

- Scielo: www.scielo.br
Sistema de Busca de Peridicos (em bibliotecas): em todas as
bibliotecas Nacionais: sistema COMUT Localizao e envio de
artigos em peridicos de qualquer rea do conhecimento servio
realizado mediante cobrana de taxa (todas as bibliotecas nacionais).
Livro que apresenta detalhadamente todas os fundamentos e
tcnicas

de

preparo

de

amostras

(procedimentos

gerais)

disponvel na biblioteca da UNIPAR:

- SETTLE, Frank A. Handbook of Instrumental techniques for analytical
Chemistry. New Jersey: Prentice-Hall, 1997.

6.2) Algumas Observaes Sobre o Preparo de Amostras

a) Concentrao de Amostras
Para espcies em concentraes muito baixas pode ser
necessrio algum tipo de pr-concentrao da amostra.
Pode-se simplesmente evaporar o solvente.
Outro procedimento utilizado consiste na formao de quelato
com o analito e sua posterior extrao com solvente orgnico
imiscvel com a gua.
16

pirolidina

ditiocarbamato

de

amnio

(APDC),

8-

hidroxiquinolina, difeniltiocarbazona (DFTC) e a metil-isobutil-cetona

(MIBC) podem ser empregados. Este ltimo amplamente utilizado.
b) Amostras Biolgicas
Raramente existem amostras em condies de serem determinadas
diretamente na chama.
Quase sempre requerido algum tipo, mesmo que simples, de
tratamento preliminar na chama.
Amostras biolgicas contm protenas, como o soro sanguneo, so
viscosas e podem bloquear o nebulizador e o queimador. Elas devem
ser desproteinizadas por cido tricloroactico antes da determinao.
Tecido animal ou vegetal requer tratamento preliminar que inclui
secagem, calcinao, queima com mistura cida ou digesto em forno
de microondas.
Em todos os casos deve-se tomar precaues para se evitar a
contaminao e a perda do analito por volatilizao ou outro processo.
c) Amostras Inorgnicas
O tratamento de amostras desconhecidas varia segundo sua natureza.
Os metais e as ligas se dissolvem em cido, eliminando-se seu
excesso antes da medio.
Amostras geoqumicas, como minerais, rochas e amostras de
perfurao so tratadas com cido fluordrico para dissolver totalmente os
silicatos.
17

 Porm, a maioria dos metais pesados pode ser extrada por digesto
cida.
d) Anlise de gua
Algumas aplicaes tpicas fundamentais da absoro atmica so o
controle

de

qualidade

de

guas

potveis,

efluentes

industriais,

determinao de componentes metlicos em quantidades-trao na gua

do mar, rios, etc.
A determinao de traos de metais importantes, como cdmio, cobre,
ferro, chumbo e cromo em gua de rios, usa-se MIBC para extrair os
componentes metlicos da gua, previamente complexados por APDC
(pirolidina ditiocarbamato de amnio);
A seguir, a fase orgnica contendo os quelatos dos metais nebulizada
na absoro atmica com chama ar/acetileno.
Como referncia, usa-se sais de metais extrados pelo mesmo
procedimento e MIBC como branco.
6.3) Preparo de Solues de Referncia
Comercialmente so disponveis solues concentradas para preparar
estoques contendo de 100 a 1.000 g/mL (ppm) de diferentes ons.
As solues podem, tambm, ser preparadas pesando-se com
exatido um metal ou sal apropriado. Aps dissoluo adequada, esta
soluo diluda at um volume conhecido.
18

 Exemplo: soluo padro de cobre 1.000 ppm: dissolve-se 1,0000 g de

fio de cobre (pureza 99,99 %) e completa-se o volume com gua destilada
para 1 L.
A partir desta soluo estoque mais concentrada, so preparadas por
diluio as solues necessrias para a curva de calibrao.
Estas solues diludas devem ter as mesmas caractersticas de
composio da amostra.
Existem procedimentos na literatura que descrevem a correta
preparao destas solues.
No caso do espectrofotmetro de AA da GBC, o aparelho
acompanha um manual com o preparo de todos os padres de metais
que so determinados pelo aparelho.

7) Amostras para AA:

Podem ser analizadas amostras slidas, lquidas ou gasosas todas
devem ser convertidas em soluo para a anlise;
Quantidade de amostra: microlitros de lquidos ou miligramas de
amostra;
Tempo de anlise: 10 s para AA com chama e 2 minutos para forno de
grafite;

19

 Preciso: depende da complexidade da matriz 1%

8) Limitaes AA:
No fornece informaes sobre a forma qumica do metal (especiao);
A preparao de amostras pode ser demorada;
Tcnica limitada a metais e metalides;
Tcnica destrutiva da amostra;
Custo do aparelho: forno de grafite > chama;
9) Aplicaes da AA:
Amostras biolgicas:
Anlise de metais em soro sanguneo, em protenas, tecidos vegetais,
etc tcnicas de abertura adequadas;
Amostras inorgnicas:
Metais, ligas metlicas, amostras geoqumicas, solo digesto cida
para preparar a amostra;

20

 Anlise de gua: controle de qualidade de guas potveis, efluentes

industriais, determinao de componentes metlicos em quantidades-trao
na gua de rios, mares, lagos, etc.

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