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SANTIAGO DE CHILE
2012
DEDICATORIA
"Comprender las cosas que nos rodean es la mejor preparacin para comprender las
cosas que hay ms all."
Hipatia de Alejandra (370 - 415) Filsofa y matemtica egipcia.
ii
AGRADECIMIENTOS
Quiero agradecer:
Gracias.
iii
NDICE
DEDICATORIA ................................................................................................................... ii
AGRADECIMIENTOS ....................................................................................................... iii
NDICE .............................................................................................................................. iv
NDICE DE FIGURAS ....................................................................................................... vi
NDICE DE TABLAS ....................................................................................................... viii
RESUMEN ........................................................................................................................ ix
SUMMARY ......................................................................................................................... x
1.
INTRODUCCIN ........................................................................................................ 1
1.1 GENERALIDADES ................................................................................................... 1
1.2 EXTRACCIN CON FLUIDOS SUPERCRTICOS (EFS) ...................................... 2
1.2.1
Fundamentos ............................................................................................... 2
1.2.2
HIPTESIS ............................................................................................................... 10
3.
OBJETIVOS .............................................................................................................. 10
3.1 OBJETIVO GENERAL............................................................................................ 10
3.2 OBJETIVOS ESPECFICOS .................................................................................. 10
4.
5.
METODOLOGA ....................................................................................................... 14
5.1 PROCEDIMIENTO PARA LA OBTENCIN DE POLVO DE TARA ..................... 14
5.2 TRATAMIENTO DEL POLVO DE VT .................................................................... 15
5.3 DETERMINACIN DEL TAMAO DE PARTCULA ............................................. 15
5.4 OBTENCIN DEL EXTRACTO SUPERCRTICO DE VT ..................................... 16
5.4.1
5.4.2
5.4.3
Extraccin:.................................................................................................. 19
6.3.2
6.3.3
6.3.4
CONCLUSIONES. .................................................................................................... 48
8.
REFERENCIAS......................................................................................................... 49
ANEXOS .......................................................................................................................... 52
NDICE DE FIGURAS
Figura 1. Diagrama de temperatura versus presin de una sustancia para conocer las
condiciones de punto triple y punto crtico (Vsquez, 2008). ........................................... 3
Figura 2. rbol de tara.. .................................................................................................... 5
Figura 3. Vainas y semillas de tara. .................................................................................. 5
Figura 4. Relacin qumica entre los taninos: galotaninos y elagitaninos. ...................... 8
Figura 5. 3,4,5-tri-O-galoil cido qunico........................................................................... 9
Figura 6. Grfico del contenido de polifenoles totales acumulados en el tiempo.
Condiciones de extraccin: 70C, 450 bar y 10% de etanol. ......................................... 28
Figura 7. Grfico del contenido de polifenoles totales acumulados en el tiempo.
Condiciones de extraccin: 35C, 550 bar y 5% de etanol. ............................................ 29
Figura 8. Efecto de la adicin de 0,5 g de celite o arena en 1 g de muestra sobre la
extraccin de polifenoles totales a 35C, 450 bar y 10% de etanol. ............................... 30
Figura 9. . Efecto de la adicin de 1,25 g de celite o arena en 2,5 g de muestra sobre la
extraccin de polifenoles totales a 35C, 450 bar y 10% de etanol. ............................... 31
Figura 10. Grfico de Superficie de Respuesta: Temperatura y Presin versus
Polifenoles totales. ........................................................................................................... 34
Figura 11. Grfico de Superficie de Respuesta: Temperatura y Etanol versus
Polifenoles totales. ........................................................................................................... 35
Figura 12. Grfico de Superficie de Respuesta: Presin y Etanol versus Polifenoles
totales. .............................................................................................................................. 36
Figura 13. Grfico de efectos principales. ...................................................................... 36
Figura 14. Grfico de las cantidades de polifenoles totales acumulados en el tiempo . 38
Figura 15. Cintica de DPPH de la muestra extrada a los 5 minutos. .......................... 42
Figura 16. Cintica de DPPH de la muestra extrada a los 15 minutos......................... 43
Figura 17. Cintica de DPPH de la muestra extrada a los 35 minutos......................... 43
Figura 18. Grfico muestra extrada a los 5 min. .......................................................... 45
Figura 19. Grfico muestra extrada a los 15 min. ......................................................... 45
Figura 20. Grfico muestra extrada a los 35 min .......................................................... 45
Figura 21. Grfico promedio. .......................................................................................... 45
Figura 22. Grfico de Pareto........................................................................................... 56
vi
vii
NDICE DE TABLAS
Tabla 1. Variables originales y codificadas en un Diseo Factorial Completo 2 3. ......... 17
Tabla 2. Diseo Factorial Completo 23 con Dos Puntos Centrales para la EFS-VT de
componentes bioactivos. ................................................................................................. 18
Tabla 3. Volmenes utilizados en el mtodo de DPPH. ................................................. 25
Tabla 4. Resultados y clculo del tamao de partcula promedio. ................................. 26
Tabla 5. Contenido de carbohidratos por gramo de VT. ................................................ 27
Tabla 6. Contenido de polifenoles totales extrados desde VT aplicando un diseo
factorial completo 23. ........................................................................................................ 32
Tabla 7. Anlisis de la varianza para polifenoles de polvo de VT. ................................. 33
Tabla 8. Cintica de extraccin en el tiempo. Los datos corresponden a polifenoles
totales (g EAG por gramo de VT). ................................................................................. 37
Tabla 9. Ajuste de la cintica de extraccin .................................................................... 39
Tabla 10. Porcentaje de decoloracin mxima versus concentracin de polifenoles
totales. .............................................................................................................................. 44
Tabla 11. EC50 de las distintas tres muestras. ................................................................ 46
Tabla 12. Densidad y fase del CO2 segn temperatura y presin ................................. 54
Tabla 13. Flujos de CO2 y etanol segn condiciones experimentales ........................... 54
Tabla 14. Preparacin curva de calibracin con cido glico ........................................ 62
Tabla 15. Datos curva de calibracin mtodo Antrona. .................................................. 64
Tabla 16. Tabla de absorbancias para la muestra de 5 min .......................................... 65
Tabla 17. Tabla de absorbancias para la muestra de 15 min ........................................ 66
Tabla 18. Tabla de absorbancias para la muestra de 15 min ........................................ 67
viii
RESUMEN
Las VT fueron recolectadas en el vivero Leliant del cerro San Cristbal, Regin
Metropolitana, Chile. Las vainas sin semillas se molieron en un molinillo Ufesa hasta
pulverizacin, tamao de partcula 173 m. Previo a la EFS, se realiz un
pretratamiento con NaOH al 0,75% para la eliminacin de los carbohidratos.
Se aplic un diseo factorial completo 2 3 con dos puntos centrales; las variables
fueron: presin (450-550 bar), temperatura (35-70C), co-solvente etanol (5-10%). La
VT present un contenido total de polifenoles de 3937 g de equivalente a cido glico
(EAG) por gramo de VT en las condiciones ptimas de extraccin (70C, 550 bar, 10%
etanol). El rendimiento de extraccin de los polifenoles present una relacin directa
con la presin y la temperatura. Se estudi la curva de extraccin de polifenoles en el
tiempo y se determin la actividad antioxidante del extracto supercrtico por DPPH y
Folin-Ciocalteau.
ix
SUMMARY
The aim of this thesis was to study the effect of the supercritical extraction
variables (pressure, temperature and co-solvent) in obtaining polyphenols from tara
pod. Also, it was studied the polyphenols extraction curve in the optimized terms and
the antioxidant capacity was determined in the supercritical extract.
Tara pods were collected in the Leliant greenhouse at the San Cristbal Hill,
RM, Chile. The pods without seeds were grounded in an Ufesa grinder, reaching a 173
m of particle average size. A pre-treatment using NaOH 0.75% was carried out before
SFE in order to eliminate carbohydrates.
It was used a Complete Factorial Design 2 3 with 2 central points; variables were:
pressure (450-550 bar), temperature (35-70C), ethanol as co-solvent (5-10%). The
tara pods showed a total polyphenol content of 3937 mg of galic acid equivalent (GAE)
by gram in the optimal conditions of extraction (70C, 550 bar, 10% ethanol). The
extraction yield of polyphenols showed a direct relationship with pressure and
temperature. The polyphenol extraction curve over time was studied and the antioxidant
activity of supercritical extract by DPPH and Folin-Ciocalteau was determined.
x
1.
INTRODUCCIN
1.1 GENERALIDADES
1.2.1
Fundamentos
Figura 1. Diagrama de temperatura versus presin de una sustancia para conocer las
condiciones de punto triple y punto crtico (Vsquez, 2008).
1.2.2
debido a su alta volatilidad (Daz-Reinoso et al., 2006). Otra de las ventajas es que el
poder de extraccin del CO2 y otros fluidos supercrticos puede ser ajustado por
pequeos cambios en la presin y temperatura de extraccin (Pereira y Meireles,
2007).
1.3 LA TARA
Los taninos hidrolizables estn compuestos por una molcula glcida, sobre la
que se fijan diferentes cuerpos fenlicos (Ribereau-Gayon et al., 1980). Son fcilmente
hidrolizados por cidos (o enzimas) en un azcar o polihidroalcohol relacionado y en un
cido carboxlico fenlico. Como lo muestra la Figura 4, dependiendo de la naturaleza
del cido carboxlico fenlico, los taninos hidrolizables usualmente se subdividen en
galotaninos y elagitaninos. La hidrlisis de los galotaninos produce cido glico,
mientras que la de los elagitaninos produce cido hexahidroxidifnico, el cual se asla
normalmente como su dilactona estable: el cido elgico.
taninos
condensados,
tambin
llamados
proantocianidinas,
son
2.
HIPTESIS
3.
OBJETIVOS
3.2.1
3.2.2
3.2.3
3.2.4
11
4.
MATERIALES Y EQUIPOS
4.1 MATERIALES
12
4.2 EQUIPOS
13
5.
METODOLOGA
Procedimiento experimental:
14
en
una
extraccin
alcalina
efectuada
de
la
siguiente
manera:
Procedimiento experimental:
Una variante en la tcnica de separacin consiste en separar las partculas de mayor tamao mediante una malla
(colador); la solucin no retenida se centrifuga a 2000 rpm por 10 minutos. Luego de lo anterior, las partculas ms
finas resultantes de la centrifugacin se incorporan con las partculas filtradas en la malla, obteniendo una torta, la cual
es secada de acuerdo a como se explic anteriormente.
15
16
Parmetros
originales
-1
Temperatura (T, C)
35
52,5
70
450
500
550
7,5
10
17
Tabla 2. Diseo Factorial Completo 23 con Dos Puntos Centrales para la EFS-VT de
componentes bioactivos.
Experimento
Variable Codificada
x1
x2
x3
-1
-1
-1
-1
-1
-1
-1
-1
-1
-1
-1
-1
C1
C2
5.4.1
presin, temperatura y co-solvente dentro del rango del diseo utilizado. En los
ensayos preliminares se analizaron muestras obtenidas cada 20 30 minutos para
obtener grficas del tipo tiempo v/s extraccin acumulada de polifenoles, donde se
observ que en el tiempo se alcanz un valor constante, es decir, se alcanz un estado
estacionario.
De acuerdo a la definicin clsica de Optimizacin, hay que tener en cuenta
que al optimizar un proceso tratamos de tomar una decisin ptima para maximizar
(ganancias, velocidad, eficiencia, etc.) o minimizar un criterio determinado (costo,
tiempo, riesgo, error, etc.). Las restricciones significan que no cualquier decisin es
posible. En este sentido, no es recomendable usar tiempos de extraccin muy
extensos, ya que estos involucran gastos en trabajo y recursos materiales, disminucin
de la eficiencia y la velocidad, aumento del tiempo y de la posibilidad de cometer
errores. Tomando como criterio estos dos puntos (ensayos preliminares y optimizacin
clsica) se decidi como tiempo de extraccin al resultado de la adicin de 20 minutos
(para evitar errores) al tiempo donde ya no se extrajeron ms polifenoles totales.
5.4.2
Adicin de co-solvente:
5.4.3
Extraccin:
Para la determinacin de los fenoles totales se utiliz el mtodo de FolinCiocalteau. El procedimiento consiste en una adaptacin del mtodo descrito por
Gutfinger (1981). Este mtodo se refiere a una mezcla de cido fosfotngstico
(H3PW 12O40) y cido fosfomolbdico (H3PMo12O40), que se reduce; por accin de los
fenoles, a una mezcla de xidos azules de tungsteno (W 8O23) y de molibdeno (Mo8O23).
La coloracin azul producida posee una absorcin mxima a aproximadamente 765 nm
y es proporcional al contenido de compuestos fenlicos (Ribreau-Gayon et al., 1980).
Procedimiento experimental:
20
f.
Curva de calibracin:
21
Procedimiento experimental:
Curva de Calibracin:
23
Procedimiento experimental:
presentara
una
absorbancia
entre
550
650 medida
en
un
24
Blanco
Control de
(L)
muestra (L)
reactivo (L)
Muestra
750
750
DPPH
1500
1500
Metanol
1500
750
Volumen total
2250
2250
2250
Donde:
Ac es la absorbancia de la muestra a 517 nm.
Ab es la absorbancia de la solucin de DPPH frente al blanco a 517nm.
f. Por cada muestra y cada porcentaje de decoloracin y su correspondiente
concentracin de polifenoles se realiz una regresin lineal til para calcular la
concentracin de extracto necesaria para disminuir la concentracin inicial de
DPPH en un 50% (EC50). Un valor de EC50 igual a 100 corresponde a la mxima
capacidad atrapadora de radicales libres y un valor cercano a 0 indica una
reducida capacidad. El grado de decoloracin indica la eficiencia de las
sustancias como atrapadoras de radicales libres.
25
6.
RESULTADOS Y DISCUSIONES
Peso de la
% del
Luz de malla
Luz de malla
Promedio
muestra (g)
Total
promedio (mm)
ponderado (mm)
10
0,0
0,0
2,000
20
0,3
0,6
0,850
1,425
0,0088
30
1,3
2,7
0,600
0,725
0,0193
50
6,2
12,7
0,300
0,450
0,0572
60
0,4
0,8
0,250
0,275
0,0023
80
3,6
7,4
0,180
0,215
0,0159
100
0,9
1,8
0,150
0,165
0,0030
120
5,3
10,9
0,125
0,138
0,0149
140
12,4
25,4
0,106
0,116
0,0293
200
0,7
1,4
0,075
0,091
0,0013
400
17,7
36,3
0,038
0,057
0,0205
Tamao peso
48,8
promedio:
0,1725 mm
26
Carbohidratos %p/p
Grueso
5,74
Mediano
2,63
Fino
1,87
Como conclusin, los datos sealan que no existi una categora de polvo que
tuviera en su composicin una cantidad traza de carbohidratos, por lo que finalmente
se trabaj con el polvo de tara sin hacer separaciones de tamao de partcula y
aplicando posteriormente el tratamiento para eliminacin de carbohidratos con
hidrlisis alcalina.
27
6.3.1
4000
3000
2000
1000
0
0
50
100
150
200
Tiempo (minutos)
28
3000
2000
1000
50
100
150
200
Tiempo (minutos)
6.3.2
29
debido
2000
1600
1528
1200
800
400
181
221
Celite
Tipo de aditivo
Arena
0
Sin adicin
30
2000
1600
1359
1200
800
473
401
Celite
Arena
400
0
Sin adicin
Tipo de aditivo
Figura 9. . Efecto de la adicin de 1,25 g de celite o arena en 2,5 g de muestra sobre la
extraccin de polifenoles totales a 35C, 450 bar y 10% de etanol.
Las Figuras 8 y 9 muestran que la adicin de celite o arena disminuy el
contenido de polifenoles totales extrados, perjudicando el rendimiento. Estos
resultados fueron contrarios a los reportados por otros autores (King et al., 1992; Liza
et al., 2010). Esta diferencia podra atribuirse a una mayor compactacin del polvo de
vaina de tara con los aditivos por efecto de la presin ejercida, impidiendo el libre flujo
del CO2 supercrtico, entorpeciendo su accin como solvente y disminuyendo el
rendimiento.
6.3.3
31
T (C)
P (bar)
Etanol (%)
35
450
792
70
450
2137
35
550
2072
70
550
3497
35
450
10
1437
70
450
10
2966
35
550
10
2865
70
550
10
3946
52,5
500
7,5
3198
52,5
500
7,5
3225
VT
32
Fuente
cuadrados
Cuadrado
Gl
medio
Valor F
Valor p
x1: Temperatura
3,61805E6
3,61805E6
11,68
0,0419
x2: Presin
3,18529E6
3,18529E6
10,28
0,0491
x3: Etanol
922082,0
922082,0
2,98
0,1829
x1x2
16928,0
16928,0
0,05
0,8302
x1x3
3200,0
3200,0
0,01
0,9255
x2x3
6728,0
6728,0
0,02
0,8922
Factor
Constante
x1: Temperatura
x2: Presin
x3: Etanol
Estimacin
-6732,5
38,43
12,62
135,8
33
35
Polifenoles Totales
450,0
550,0
Presin
5,0
10,0
Etanol
6.3.4
Cantidad de
polifenoles
extrados
0
Cantidad de
polifenoles
acumulado
0
2689 100
2689 100
10
108 4
2797 97
15
284 37
3081 71
20
188 14
3269 70
25
112 15
3381 78
30
74 64
3455 142
35
296 89
3751 69
40
77 67
3828 132
45
75 65
3903 133
50
34 59
3937 127
55
3937 127
60
Total
Extrado:
3937 127
3937 127
3937 127
Tiempo
(minutos)
CV
(%)
-
37
Cintica de Extraccin
5000
4000
3000
2000
1000
0
0
10
15
20
25
30
35
Tiempo [minutos]
40
45
50
55
60
38
Correlacin
R-cuadrado
Raz cuadrada de X
0,9826
96,55%
Multiplicativo
0,9820
96,43%
Logartmico de X
0,9764
95,33%
Lineal
0,9585
91,87%
Raz cuadrada de Y
0,9538
90,98%
Exponencial
0,9485
89,97%
Inverso de Y
-0,9361
87,62%
Doble inverso
0,9003
81,05%
Curva S
-0,8813
77,67%
Inverso de X
-0,8608
74,10%
Esta tabla muestra los resultados de ajuste a los datos de varios modelos
curvilneos. De los modelos ajustados, el modelo raz cuadrada de X presenta el valor
de R-cuadrado ms alto con 96,5524%.
La relacin entre Polifenoles y tiempo (t) qued descrita por el modelo ajustado
en la siguiente ecuacin:
Polifenoles = 2093,79 + 257,473*t
39
40
El mtodo utilizado correspondi a una modificacin del descrito por BrandWilliams et al. (1995), fundamentado en que el radical 2,2-difenil-1-picril hidrazilo
(DPPH) de color violeta intenso pierde su color caracterstico al ser capturado su
radical libre, por lo tanto, a mayor decoloracin, mayor poder antioxidante.
100
Decoloracin (%)
90
80
70
60
50
40
0
20
40
60
80
Tiempo (minutos)
100
120
42
100
Decoloracin (%)
90
80
70
60
50
40
0
20
40
60
80
Tiempo (minutos)
100
120
100
Decoloracin (%)
90
80
70
60
50
40
0
20
40
60
80
Tiempo (minutos)
100
120
43
Muestra
Muestra
Concentracin
5min
15min
35min
(g EAG/mL)
% de
% de
% de
decoloracin
decoloracin
decoloracin
0,5
40,72
41,45
39,32
40,50 1,08
2,7
0,8
45,87
46,14
45,41
45,81 0,37
0,8
1,1
51,10
50,55
50,16
50,60 0,47
0,9
1,4
55,34
54,57
53,66
54,53 0,84
1,5
Promedio
CV
(%)
44
Decoloracin (%)
Decoloracin (%)
60
40
y = 16,359x + 32,718
R = 0,9978
20
0
0
0,5
1,5
60
40
0
0
0,5
1,5
Decoloracin (%)
Decoloracin (%)
1,5
y = 15,921x + 32,014
R = 0,9856
0
0,5
60
50
40
30
20
10
0
y = 14,593x + 34,314
R = 0,9988
20
60
50
40
30
20
10
0
y = 15,625x + 33,015
R = 0,9956
0,5
1,5
Los resultados de los respectivos EC50 se muestran en la Tabla 11, con un valor
promedio de 1,09 ug de EAG/mL.
45
Muestra
(g/mL)
1,06
1,07
1,13
Promedio
1,09 0,04
CV
3,48
Con los datos obtenidos de las 3 muestras y teniendo en cuenta que no hubo
diferencias significativas entre ellas, fue posible graficar la curva promedio de DPPH
(Figura 21), y determinar el EC50 promedio de estos anlisis.
Ya que el ndice EC50 es un buen predictor de la potencia antioxidante de los
extractos es un parmetro til de comparacin entre muestras de distintos orgenes, sin
embargo, es de vital consideracin que los estudios a comparar hayan sido llevados a
cabo con el mismo protocolo de reaccin de DPPH. Es decir, dos EC 50 no son
comparables si es que se aadieron distintas cantidades de microlitros de muestra y de
DPPH. Es por esto que para realizar una comparacin vlida entre los valores que se
obtuvieron en este estudio y valores de otros trabajos, los resultados se expresaron de
mejor manera sealando la cantidad necesaria (en masa) en microgramos de
polifenoles totales EAG para causar la disminucin del 50% de absorbancia de una
solucin de DPPH, en vez de expresarla en volmenes o concentraciones.
46
En el caso del extracto de polvo de tara, se obtuvo como resultado 1,1 g/mL
como EC50 (Tabla 11) esta concentracin, tomando en cuenta el volumen ocupado en
la reaccin, correspondieron a 0,75 g de polifenoles totales, presentando el extracto
supercrtico de polvo de tara un mayor poder antioxidante que el extracto de camucamu y organo, este ltimo conocido por su gran valor antioxidante. En la EFS-VT del
estudio de Fernndez et al. (2008), se obtuvo un valor menor (0,9 g), pero cercano al
de este trabajo usando la misma matriz vegetal.
47
7.
CONCLUSIONES.
48
8.
REFERENCIAS
400011&lng=en&nrm=iso>.
ISSN
0100-6762.
http://dx.doi.org/
10.1590/S0100-67622002000400011
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35. ZHENG, W., WANG, S. Antioxidant activity and phenolic compounds in
selected herbs. Journal of Agricultural Food Chemistry, 49 (11): 5165-170,
2001.
51
ANEXOS
52
ANEXO 1
Ya sabiendo la masa de CO2 que pasa por minuto, se determina el nuevo flujo en
volumen de acuerdo a la densidad correspondiente a la temperatura y presin que se
use. Por ejemplo, a 35C y a 450bar, el flujo de CO2 es de 4,460mL/min:
53
Presin (bar)
Densidad (kg/m3)
Fase
28
1,7661
Vapor
35
450
989,87
Supercrtico
35
550
1020,0
Supercrtico
70
450
882,37
Supercrtico
70
550
924,11
Supercrtico
52,5
500
955,22
Supercrtico
Sucesivamente se calculan los flujos para cada caso, los que son presentados
en la Tabla 11.
989,87
4,460
0,235
1020
4,328
0,228
989,87
4,460
0,496
1020
4,328
0,481
882,37
5,004
0,263
924,11
4,778
0,251
882,37
5,004
0,556
924,11
4,778
0,531
C1
955,22
4,622
0,375
C2
955,22
4,622
0,375
54
ANEXO 2
A: Temperatura
B: Presin
C: Etanol
Los errores estndar estn basados en un error total con 6 g.l. (grados de libertad).
Grados de
Cuadrado
cuadrados
libertad
medio
A: Temperatura
3,61805E6
B: Presin
3,18529E6
C: Etanol
Fuente
F-Ratio
Valor p
3,61805E6
22,71
0,0031
3,18529E6
19,99
0,0042
922082,0
922082,0
5,79
0,0529
Error Total
956079,0
159346,0
Total (corr.)
8,6815E6
55
-6732,5
A: Temperatura
38,4286
B: Presin
12,62
C: Etanol
135,8
56
Anlisis de la Varianza
Fuente
Sumas de
cuadrados
Gl
Cuadrado
medio
Entre grupos
249771,0
124886,0
Intra grupos
6,94502E6
33
210455,0
Total (Corr.)
7,19479E6
35
Valor F
Valor p
0,59
0,5582
Puesto que el p-valor del test F es superior o igual a 0,05, no hay diferencia
estadsticamente significativa entre las medias de las 3 variables a un 95,0%.
Anlisis de la Varianza
Fuente
Sumas de
cuadrados
Gl
Cuadrado
medio
Entre grupos
3,1232
1,5616
Intra grupos
332,432
36,9372
Total (Corr.)
335,558
11
Valor F
Valor p
0,04
0,9588
57
Puesto que el p-valor del test F es superior o igual a 0,05, no hay diferencia
estadsticamente significativa entre las medias de las 3 variables a un 95,0%.
Estadstico
estimacin
estndar
Ordenada
2093,79
Pendiente
257,473
Parmetro
Fuente
Valor p
87,7109
23,8716
0,0000
15,3855
16,7348
0,0000
Anlisis de la Varianza
Sumas de
Cuadrado
Gl
cuadrados
medio
Entre grupos
2,22344E6
2,22344E6
Intra grupos
79393,5
10
7939,35
Total (Corr.)
2,3028E6
11
Valor F
Valor p
280,05
0,0000
La salida muestra los resultados del ajuste al modelo raz cuadrada-X para
describir la relacin entre Polifenoles y Tiempo. La ecuacin del modelo ajustado es:
59
Correlacin R-Cuadrado
Raz cuadrada-X
0,9826
96,55%
Multiplicativo
0,9820
96,43%
Logartmico-X
0,9764
95,33%
Lineal
0,9585
91,87%
Raz cuadrada-Y
0,9538
90,98%
Exponencial
0,9485
89,97%
Inverso-Y
-0,9361
87,62%
Doble Inverso
0,9003
81,05%
Curva-S
-0,8813
77,67%
Inverso-X
-0,8608
74,10%
Logstico
Sin ajuste
Log Probit
Sin ajuste
Esta tabla muestra los resultados de ajuste a los datos de varios modelos
curvilneos. De los modelos ajustados, el modelo raz cuadrada-X procura el valor de
R-cuadrado ms alto con 96,5524%. Este es el modelo seleccionado actualmente.
60
ORDEN CERO
y = 24,32x + 2828,
R = 0,918
4500,00
4000,00
3500,00
3000,00
2500,00
2000,00
1500,00
1000,00
500,00
0,00
0
10
20
30
40
ORDEN UNO
50
60
y = -0,082x + 7,584
R = 0,879
8,00
7,00
6,00
5,00
4,00
3,00
2,00
1,00
0,00
0
10
15
20
61
25
30
35
40
45
ANEXO 3
Matraz
Concentracin
(mL)
(mL)
(mg/mL)
0,2
10
0,1010
0,130
0,4
10
0,2021
0,260
0,6
10
0,3031
0,359
0,8
10
0,4042
0,479
1,0
10
0,5052
0,590
1,2
10
0,6062
0,698
1,4
10
0,7073
0,792
Absorbancia
62
Absorbancia
y = 1,0933x + 0,0307
R = 0,9987
0,20
0,40
0,60
Concentracin [mg/ml]
63
0,80
ANEXO 4
Absorbancia
(mg/mL)
0,052
0,226
0,103
0,464
0,155
0,652
Absorbancia
Antrona
0,7
0,6
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0
0
0,05
0,1
[mg/ml]
y = 4,1342x + 0,0201
R2 = 0,9946
0,15
64
0,2
1,4
%A5
100,0
64,3
63,0
60,6
59,2
58,1
57,1
56,6
56,0
55,5
55,0
54,6
54,5
54,3
53,4
52,7
51,8
51,5
50,8
50,4
50,1
49,9
49,7
48,9
48,3
47,8
47,5
46,9
46,4
45,9
45,5
45,0
44,8
44,7
44,7
44,7