Exemple dhydrolyse acide : hydrolyse acide de l'amidon

Objectif :
Comparer les conditions de l'hydrolyse enzymatique celles de l'hydrolyse acide afin d'introduire le mode
d'action des enzymes.
Protocole exprimental :
12 tubes contenant chacun 10 mL d'empois d'amidon 1 % sont mis au bain marie bouillant.

Au dbut de l'exprience, 3 mL d'acide chlorhydrique concentr sont verss le plus

simultanment possible dans chacun des tubes, sauf dans les deux derniers o l'on
mettra 3 mL d'eau distille. Ces tubes serviront de tmoin.
Afin de pouvoir raliser cette tape de la manipulation en quelques secondes, il faut
auparavant, prparer 10 tubes spars avec 3 mL d'acide (H3O+ + Cl-) chacun.
Ensuite, toutes les deux minutes, deux tubes sont retirs du bain marie. Dans l'un on
ajoute du ractif de Fehling, la coloration se fait immdiatement car le tube est chaud.
L'autre tube est refroidi sous un filet d'eau du robinet puis le test l'eau iode est ralis
en versant quelques gouttes de ce ractif dans le tube. Il est parfois ncessaire de
diluer le contenu du tube pour bien voir la nuance de couleur apparue.

Rsultats exprimentaux :

Rsultats avec le test au ractif de Fehling.

Ici les colorations intermdiaires sont dues la
synthse additive des couleurs bleue du ractif de
Fehling initiale et orange du prcipit rouge brique
avec le glucose final.

Rsultats avec le test l'eau iode.

Le changement de coloration met ici bien en
vidence les composs intermdiaires notamment
les dextrines colores en rouge bordeaux par ce
ractif.
http://www.didiersvt.com/cd_1s/html/c8/c8a1p2.htm

Exemple dhydrolyse enzymatique : hydrolyse de l'amidon par la maxilase

Objectif :
Prciser le rle de l'enzyme lors d'une raction d'hydrolyse.
Protocole exprimental :
Deux tubes essai sont placs dans un bain marie 37 C comme le montre la photographie ci-dessous.
Ils contiennent chacun 15 mL d'empois d'amidon 1 %.

Bain marie rgl sur 37 C avec les deux tubes essai

o
o

o
o

On prlve 2 mL dans chacun des tubes en dbut d'exprience et un test au ractif de Fehling
est ralis sur les deux prlvements.
Prparation de la solution de maxilase : dissoudre l'enveloppe d'un cachet de Maxilase achet
en pharmacie en le malaxant sous un filet d'eau. Quand il ne reste que l'intrieur du cachet,
broyer celui-ci dans 100 mL d'eau distille pour obtenir la solution d'enzymes.
Dposer 1 mL de solution de maxilase dans le tube 2 uniquement.
Immdiatement puis toutes les trois minutes, prlever deux trois gouttes dans chaque tube,
les dposer dans les cavits d'une plaquette test, et colorer avec une goutte d'eau iode.
Raliser ce test pendant 15 20 minutes. (rsultats photo 1)
En fin d'exprience, refaire le test au ractif de Fehling sur un prlvement des deux tubes.

Rsultats exprimentaux :

Photo 1

Rsultats du test au ractif de

Fehling la fin de l'exprience.
gauche en l'absence de
maxilase, droite en
prsence de maxilase.
http://www.didiersvt.com/cd_1s/html/c8/c8a1p2.htm

Rsultats du test sur le tube 2 en

fin d'exprience, l'eau iode
droite et au ractif de Fehling
gauche.