UNIVERSIDAD NACIONAL HERMILIO VALDIZAN HUANUCO - FACULTAD DE

CIENCIAS AGRARIAS - E.A.P. INGENIERA AGROINDUSTRIAL

A O DE LAS CUMBRES MUNDIALES EN EL PER

INFORME N ----- 2007

- DOCENTE.

-----------------------------------------------

ASUNTO

Avance del trabajo de investigacin; Evaluacin de la

capacidad funcional del Chincho (Tagetes elptica)

REFERENCIA

Oficio Mult. N

FECHA

PILCOMARCA, 18 DE DICIEMBRE DEL 2008.

- 2008 - UNHEVAL

Mediante el presente me dirijo a usted, con la finalidad de expresarle mis cordiales saludos
y a la vez informarle sobre el avance del desarrollo del trabajo de investigacin;
Evaluacin de la capacidad funcional del Chincho

(Tagetes elptica), a

continuacin se expone la determinacin de la concentracin de catequinas en el

Chicncho por HPLC.

DETERMINACIN

DE

LA CONCENTRACIN

CHICNCHO (Tagetes elptica)

POR

DE

CATEQUINAS

EN

EL

CROMATOGRAFA LIQUIDA DE ALTA

PERFORMANCE.
I. INTRODUCCIN:
Se determino la concentracin de catequinas por cromatografa liquida de alta
performance HPLC, utilizando el mtodo descrito por Ding et al., 1999, la muestra fue
chincho (Tagetes elptica) procedente del mercado de Hunuco en estado fresco, se
anexa a este informe una gua de prctica y un panel fotogrfica.
II. OBJETIVO:
Determinar la concentracin de catequina en el chincho (Tagetes elptica) en
extraccin acuosa.

III. FUNDAMENTO TERICO:

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A. ANTIOXIDANTES NATURALES
Aspectos generales
Los antioxidantes son compuestos que inhiben o retrasan la oxidacin de otras
molculas mediante la inhibicin de la propagacin de la reaccin de oxidacin
(MartnezValverde et al., 2000). Se considera como antioxidante a toda sustancia que
hallndose presente a bajas concentraciones con respecto a las de un sustrato
oxidable (biomolcula), retarda o previene la oxidacin de dicho sustrato (Halliwell et
al., 1987a).
Una gran parte lo componen los compuestos fenlicos que intervienen como
antioxidantes naturales en alimentos de origen vegetal, por lo que la obtencin y
preparacin de alimentos con un alto contenido en estos compuestos, supone una
reduccin en la utilizacin de aditivos antioxidantes, a la vez que se obtienen alimentos
ms saludables (MartnezValverde et al., 2000).
Efectos Benficos
Los efectos benficos de los antioxidantes naturales, bsicamente estn dados por su
capacidad de inhibir radicales libres ejerciendo accin en todos los procesos en los
que se reduce o detiene el proceso de oxidacin como: 1) hidrlisis enzimtica de
enlaces steres para remover cidos grasos peroxidados de lpidos, 2) quelamiento de
iones metlicos de transicin y 3) reduccin de perxidos por catlisis enzimtica
(Thomas, 2000).
Los radicales libres son molculas que en su estructura atmica presentan un electrn
desapareado o impar en el orbital externo y que pueden existir independientemente
(Clarckson y Thompson, 2000), que los hace muy inestable, extraordinariamente
reactivos y de vida corta (Guerra, 2001), con una enorme capacidad para combinarse
inespecficamente (Halliwell et al., 1995) en la mayora de los casos con la diversidad
de molculas integrantes de estructuras celulares: carbohidratos, lpidos, protenas,
cidos nucleicos y derivados de cada uno de ellos (Rodrguez et al., 2001).
Se forman en condiciones fisiolgicas normales o por factores exgenos en
proporciones controlables por los mecanismos de defensas celulares (GonzlezTorres
et

al.,

2000).

En

situaciones

patolgicas

esta

produccin

se

incrementa

substancialmente, ingresando al estado del estrs oxidativo (Thomas, 2000).

Los radicales libres pueden capturar el electrn que les falta de las molculas que
estn a su alrededor, y as tornarse estables (Clarckson y Thompson, 2000). La

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molcula atacada (que ahora no tiene un electrn) se convertir entonces en un radical

libre y de este modo se inicia una reaccin en cadena que daar muchas clulas y
puede ser indefinida si los antioxidantes no intervienen (GonzlezTorres et al., 2000).
Desde el punto de vista nutricional, la actividad antioxidante, se asocia con su papel
protector contra enfermedades cardiovasculares y el cncer; y consecuentemente en
los procesos de envejecimiento (Vasconcellos, 2000).
Polifenoles como antioxidante
Los polifenoles son metabolitos secundarios de las plantas distribuidos ampliamente en
alimentos de origen vegetal frutas, cereales, hortalizas y bebidas (Richelle et al.,
2001). Poseen diferentes estructuras qumicas y actividad (MartnezValverde, 2000).
Gran parte de ellos presentan accin potencialmente beneficiosa para la salud humana
(Cadenas, 2001), asociados con el consumo de alimentos y bebidas ricos en
polifenoles (Scalbert, 2000).
Los

polifenoles

que

poseen

actividad

antioxidante

son

conocidos

por

ser

principalmente cidos fenlicos y flavonoides (MartnezValverde et al., 2000). Los

cidos fenlicos han sido repetidamente implicados como antioxidantes naturales en
frutas, hortalizas y otras plantas, por ejemplo, el cido cafeico, ferlico y vanlico estn
ampliamente distribuidos en el reino vegetal (Zheng y Wang, 2001). Los flavonoides,
quienes tienen el mismo carbono C15 (C6C3C6) ejercen actividad antioxidante en
una variedad de compuestos fcilmente oxidables. En muchas plantas los principales
flavonoides son las flavonolaglyconas tales como la quercetina, myricetin (Fiorani et
al., 2002), kaempferol y sus glicsidos (Figura 1). En general, los flavonoides que
contienen grupos hidroxilos tienen elevada actividad antioxidante frente a radicales
peroxilos ms que los cidos fenlicos (Zhen y Wang, 2001).
La actividad antioxidante de los polifenoles se debe principalmente a sus propiedades
redox, la cual les permite actuar como agentes reductores, donadores de hidrgeno y
secuestradores del oxgeno singulete; adems de tener potencial para quelar metales
(Hopia et al., 1999), inhibir la lipoxigenasa y secuestrar radicales libres (Martnez
Valverde et al., 2000).
Catequinas
Pertenece al grupo de los polifenoles, es considerado un buen antioxidante, pueden
ayudar al sistema inmunolgico y reducir el cncer. Muchos estudios las han
relacionado Ts, cerezas.

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FIGURA 1 Estructura qumica bsica de las catequinas.

IV. MATERIALES Y MTODOS:

A. Materiales y Equipos:
Muestra a investigar: Extracto de Chincho.
Equipos; HPLC, Centrifuga, Agitador, plancha trmica, balanza, micro pipetas, filtro al
vacio, refrigerador.
Materiales; Vasos precipitados, tubos de ensayos, fiolas, mortero, filtros, etc.
Reactivos; Catequina estndar, metanol, acido actico, agua.
B. Mtodos:
El mtodo con lo que se trabajo es el descrito por Ding et al., 1999, la cual se
presenta en la gua que se anexa.
V. RESULTADOS Y DISCUSIN.
Figura 2: Descripcin de la ecuacin de la curva patrn

y=3726.x-7824.
R = 0.997
Donde:
Y = rea
X = Concentracin. (ug/ml)
Figura 3: Cromatograma - rea del pico obtenida del chincho

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rea del pico

rea obtenida = 361670

A 8.302 minutos de tiempo de corrida
La concentracin de catequinas en el chicnho es de 99.166 ug/ml de extracto diluido
1:4 agua
Por tanto la concentracin de catequinas del extracto acuoso puro del chincho es de
396.665 ug/ml de extracto.
Segn Kaufmann K* (2005), la concentracin de catequinas totales en el extracto
acuoso (Infusin) a 80 C del t verde es de 1227.73 ug/ml determinados por HPLC.
Comparando nuestro resultado para el chicho, se observa que la concentracin de
catequinas en el

t verde es mucho mayor aun ms si lo consideramos que el

extracto del t verde se obtuvo a nivel de infusin diluida.

VI.CONCLUSIN:
La concentracin de catequinas del extracto acuoso puro del chincho es de 396.665
ug/ml de extracto, determinadas por cromatografa liquida de alta performance - HPLC
VII. RECOMENDACIN:
Seguir con la investigacin en el chincho con otros componentes activos de inters.
VIII.

BIBLIOGRAFA:
DING, M.; YANG H.; XIAO,SH. 1999, Rapid, Direct Dertermination of Polyphenols
in Tea by Reversed Phase Column Liquid Chromatography. Journal of
Chromatography A. 849: 637 640.

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Kaufmann K*, Periago MJ*, Snchez-Siles LM**, Serrano P**, Ros G*. 2005,
Estabilidad y Actividad Antioxidante de Catequinas en Infusiones de T Verde en
Funcin de la Temperatura, *Departamento de Tecnologa de Alimentos, Nutricin y
Bromatologa, Universidad de Murcia. **Departamento de I+D, Juver
Alimentacin, S.A.
Mukhtar y cols. (2000). Am J Clin Nutr 71 (suppl.), 1698S-1702S.
Wang y cos (2003). Food Chem 81, 307-312.
Bhm y cols. (2002). J Agric Food Chem 50, 221-226.
Frei y cols. (2003). J Nutr 133, 3275S-3284S.
Su y cols. (2003). Food Chem 83, 189-195.

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