ESCUELA SUPERIOR POLITCNICA

DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE BIOQUMICA Y FARMACIA
INFORME DE LABORATORIO DE BIOLOGA CELULAR
PRACTICA # 7
TEMA: OBSERVACIN DE CLULAS PROCARIOTAS
(BACTERIAS)
INTEGRANTES:

CDIGO:

Miguel ngel Rivera

2860

Handerson Caiza

2834

NIVEL: PRIMERO
PARALELO: A

26-01-2015

1. TEMA: OBSERVACIN DE CLULAS PROCARIOTAS (BACTERIAS)

2. OBJETIVOS:
2.1.-GENERAL:

Realizar el estudio de una muestra de bacterias utilizando la tcnica de

la tincin Gram.

2.2.-ESPECIFICOS

Explicar sobre la importancia que tiene la coloracin de Gram en clulas

procariotas (bacterias)
Saber distinguir a las bacterias Gram positivas y a las Gram negativas

3. FUNDAMENTACION TERICA

Bacterias
Son organismos unicelulares microscpicos, sin ncleo ni clorofila, que pueden
presentarse desnudas o con una cpsula gelatinosa, aisladas o en grupos y
que pueden tener cilios o flagelos. La bacteria es el ms simple y abundante de
los organismos y puede vivir en tierra, agua, materia orgnica o en plantas y
animales. Tienen una gran importancia en la naturaleza, pues estn presentes
en los ciclos naturales del nitrgeno, del carbono, del fsforo, etc. y pueden
transformar sustancias orgnicas en inorgnicas y viceversa.
Son tambin muy importantes en las fermentaciones aprovechadas por la
industria y en la produccin de antibiticos. Desempean un factor importante
en la destruccin de plantas y animales muertos. En efecto, la vida en nuestro
planeta no existira sin bacterias, las cuales permiten muchas de las funciones
esenciales de los ecosistemas. Una bacteria de tamao tpico es tan pequea
que es completamente invisible a la vista.

Divisin Celular Bacteriana

La sntesis de la pared, el crecimiento bacteriano y la duplicacin del ADN

regulan la divisin celular. La bacteria da lugar a dos clulas hijas. La divisin
empieza en el centro de la bacteria por una invaginacin de la membrana
citoplasmtica que da origen a la formacin de un septo o tabique transversal.

La separacin de las dos clulas va acompaada de la segregacin en cada

una de ellas de uno de los dos genomas que proviene de la duplicacin del
ADN materno.

Nutricin y crecimiento bacterianos

Las bacterias necesitan de un aporte energtico para desarollarse. Se

distinguen distintos tipos nutricionales segn la fuente de energa utilizada: las
bacterias que utilizan la luz son fottrofas y las que utilizan los procesos de
oxirreduccin son quimitrofas. Las bacterias pueden utilizar un sustrato
mineral (littrofas) u orgnico (organtrofas). Las bacterias patgenas que
viven a expensas de la materia orgnica son quimioorgantrofas.

Gentica Bacteriana

Por la rapidez en su multiplicacin, se eligen las bacterias como material para

los estudios genticos. En un pequeo volumen forman enormes poblaciones
cuyo estudio evidencia la aparicin de individuos que tienen propiedades
nuevas. Se explica este fenmeno gracias a dos procesos comunes a todos los
s o, traducidas por la aparicin brusca eres vivos: las variaciones del
genotipo de un carcter transmisible a la descendencia, y las variaciones
fenotpicas, debidas al medio, no transmisibles y de las que no es apropiado
hablar en gentica. Las variaciones del genotipo pueden provenir de
mutaciones,
de
transferencias
genticas
y
de
modificaciones
extracromosmicas.

Los caracteres de las bacterias pueden ser objeto de mutaciones y ser

modificados de varias maneras.

Las mutaciones son raras: la tasa de mutacin oscila entre 10 y 100. Las
mutaciones aparecen en una sola vez, de golpe. Las mutaciones
son estables: un carcter adquirido no puede ser perdido salvo en caso de
mutacin reversible cuya frecuencia no es siempre idntica a las de las
mutaciones primitivas. Las mutaciones son espontneas:no son inducidas, sino
simplemente reveladas por el agente selectivo que evidencia los mutantes. Los
mutantes, por ltimo, son especficos: la mutacin de un carcter no afecta a la
de otro.

Importancia De Las Bacterias

Los miembros pertenecientes a los dominios Bacteria y Archaea son las formas
ms abundantes en el planeta. Las bacterias constituyen una proporcin
significativa por lo que respecta al peso corporal de los diferentes hospederos
(desde 0.5 k hasta unos 2.5 k). Su biomasa total lleg a estimarse en 3.5
1014 kg de carbono. Sin embargo, en 2008 solo se aceptaban ~7,000 especies
microbianas, versus 300 000 especies de plantas y 1 250 000 de animales, lo
cual no refleja la biodiversidad total de las bacterias. (Achtman et al., 2008).
La Bacteriologa es una disciplina de la Microbiologa, que ha estado presente
a lo largo de la historia de la humanidad. Las bacterias son responsables de
millones de muertes de personas a nivel mundial. Entre algunas enfermedades
infecciosas bacterianas, causantes de grandes epidemias que han mermado la
poblacin, se encuentran: la difteria, clera, tuberculosis, sfilis, ttanos, tos
ferina, y fiebre tifoidea. Sin embargo, tambin existen infecciones bacterianas
que aunque estn asociadas en menor frecuencia como causa de muerte, son
un problema de salud pblica en pases en vas de desarrollo como el nuestro,
entre
las
que
podemos
mencionar:
diarreas
(causadas
por Shigella o Escherichia
coli),
infecciones
de
vas
urinarias,
faringoamigdalitis, gonorrea, tracoma y brucelosis.

4.-PARTE EXPERIMENTAL
4.1.-Materiales
Microscopio compuesto
Placas porta objetos
Guantes, mascarilla y gorro
Hisopos
4.2.- Reactivos

Aceite de inmersin
Colorante: Cristal violera
Mordiente: Lugol
Decolorante: Alcohol-Acetona
Colorante: Safranina o Fucsina

4.3.- Procedimiento

Raspar la mucosa bucal y

colocar la muestra
obtenida en una placa
porta objetos.

Dejar por 3 minutos y

secar la muestra fijandola
con ayuda del mechero.

Cubrir la muestra con

cristal violeta por un
minuto y lavar con agua.

Cubrir la muestra con

Lugol por un minuto y
lavar con agua.

Cubrir la muestra con

alcohol o acetona por 30
segundos y lavar con
agua.
Cubrir la muestra con
Safranina por un minuto,
lavar con agua y dejar
secar.
Colocar una gota de aceite
de inmersion y observar al
microscopio con el lente
de 100x.

Dibujar lo observado e
identificar las bacterias

4.4.-Observaciones

Grafico #1

40x Bacilos

Grafico #1

40x Cocos

En el Grafico #1 se puede observar hembras estas hebras son bacilos y son

de menor tamao comparado a las de la clula estn teidas de color azul y se
puede deducir que son bacterias Gram positivas

En el Grafico #2 se puede observar la presencia de cocos que se encuentran

en mayor nmero esparcidos y alrededor de la placa estn teidos de color
rosado por lo cual se dice que son bacterias Gram negativas

4.5.-CONCLUSIONES
- La tincin de Gram es un tipo de tincin
en bacteriologa para la visualizacin de bacterias

diferencial

empleado

Una de las principales utilidades de la tincin Gram es la clasificacin siendo de

gran utilidad para elegir un antimicrobiano
- Las Gram positivas se teirn de azul o violeta y las Gram negativas de
rosado tenue debido a sus distintas membranas

5.- BIBLIOGRAFA
(1)
CLULAS PROCARIOTAS-MICROBIOLOGA (visto el 15/06/2014),
Disponible
en:
http://www.monografias.com/trabajos95/celulasprocariotas/celulas-procariotas.shtml
(2)
WEB
CONSULTAS
(Visto
el
15/06/2014),
Disponible
http://www.webconsultas.com/pruebas-medicas/tincion-de-gram-13399

en:

(4) ESTRUCTURA Y FUNCIN CELULAR BACTERIANA (Visto el

15/06/2014),
Disponible
en:
http://estructurayfuncioncelularbacteriana.wikispaces.com/Mesosomas

(5) RIBOSOMAS-POLIRRIBOSOMAS (Visto el 15/06/2014), Disponible en:

http://www.botanica.cnba.uba.ar/Pakete/3er/LaCelula/Ribosomas.htm

6.- CUESTIONARIO.
1. Qu son las clulas procariotas? Esquematice su clasificacin
Se llama procariota a las clulas sin ncleo celular definido, es decir,
cuyo material gentico se encuentra disperso en el citoplasma, reunido
en una zona denominada nucleoide (3).
Metanogenas.Metanogenas.- son
son
organismos
procariotes
organismos procariotes
que
en medios
que viven
viven en
medios
anaerobios
anaerobios y
y obtienen
obtienen
energia
del gas
gas natural
natural
energia del
Archaea.- son
microorganismos
unicelulares primitivos.
Carecen
de nucleo
nucleo a
Carecen de
a
diferencia
de las
las
diferencia de
bacterias
mas
bacterias son
son mas
parecidas
a los
los
parecidas a
eucariotas
eucariotas

Hipertermofilas.Hipertermofilas.- viven
viven
yy se
se desarrollan
desarrollan en
en
temperaturas
temperaturas y
y ph
ph
extremos.
sitios con
extremos. en
en sitios
con
actividad
volcanica
actividad volcanica

Clasificacin
de las
Clasificacin de
las
celulas procariotas
procariotas
celulas

Bacterias.Bacterias.- son
son
organismos
organismos
microscopicos
microscopicos formados
formados
pro
pro celulas
celulas procariotas
procariotas
mas
evolucionados
mas evolucionados

2.

Halofilas.Halofilas.- organismos
organismos
procariotes que
que viven
procariotes
viven en
en
ambientes
ambientes
extremadamente
extremadamente salinos
salinos

cianobacterias.cianobacterias.- o
o
algas
azules son
algas verde
verde azules
son
eubacterias
que han
eubacterias que
han
vivido
vivido en
en nuestro
nuestro planeta
planeta
por
3mil millones
por mas
mas de
de 3mil
millones
de
aos
de aos

Dibuje una bacteria

con sus partes y hable
brevemente de cada
una de ellas

Las estructuras ms sobresalientes en la clula procariota:

Mesosomas.- Son estructuras membranosas intracitoplsmicas que se

observan en la mayor parte de las bacterias, constituidas por invaginaciones
de la membrana citoplsmica, por lo tanto su composicin es similar y
tambin poseen varias de las funciones de esta como transporte de
nutrientes, sntesis de algunos compuestos, etc (4).
Polirribosomas.- Las funciones de los ribosomas o polirribosomas es la de
sintetizar protenas o polipptido, necesario para la clula o para ser
transportadas fuera de ella (5).
Capas-S.- Capa bidimensional de protenas o glucoprotenas (baldosas).
Gram + peptidoglicano. Gram - lipopolisacrido.
FUNCIONES: Proteccin (C y fagocitosis). Adhesin. Rigidez estructural.
CAP
Plasmidos.- Son molculas de ADN extracromosmico circular o lineal que
se replican y transcriben independientes del ADN cromosmico}

3. Consulte la diferencia entre bacterias Gram negativas y Gram

negativas
Las bacterias Gram positivas a aquellas bacterias que se tien de azul
oscuro o violeta por la tincin de Gram: de aqu el nombre de "Grampositivas" o tambin "Gram positivas". Esta caracterstica est
ntimamente ligada a la estructura de la envoltura celular por lo que
refleja un tipo natural de organizacin bacteriana. Son uno de los
principales grupos de bacterias, y cuando se tratan como taxn se utiliza
tambin el nombre de Posibacteria (7).
Las bacterias Gram negativas a aquellas bacterias que no se tien de
azul oscuro o violeta por la tincin de Gram: de ah el nombre de "Gramnegativas" o tambin "Gram negativas". Esta caracterstica est
ntimamente ligada a la estructura de la envoltura celular, por lo que
refleja un tipo natural de organizacin bacteriana. Son uno de los
principales grupos de bacterias y cuando se tratan como taxn se utiliza
tambin el nombre de Negibacteria (7).

4. Realice un dibujo que esquematice la membrana celular de Gram

positivas y en otro la membrana de Gram negativas. Identifique en
ambos dibujos los componentes principales de cada una de ellas.

5.- Cul es el fundamento de la tincin de Gram?

La tcnica se basa en aplicar una serie de colorantes a una muestra de
cualquier origen (esputo, orina, pus, etctera) que supuestamente contenga
bacterias no identificadas. Los colorantes tien la pared de las bacterias de
color morado y, tras unos minutos, se realiza un lavado del colorante. Despus
de eso puede que el colorante permanezca en la pared bacteriana o que se
haya ido. En el primer caso permanecera el color morado, y se tratara de
bacterias Gram positivas y, en el segundo, la pared tendra un color rosado, y
seran Gram negativas (2).
6.- Qu tipo de bacterias son las ms patgenas para el hombre las
Gram positivas o las Gram negativas porque?

Por lo tanto con respecto a las Gram positivas, las bacterias Gram negativas
poseen una barrera de permeabilidad selectiva adicional y son por eso ms
resistentes frente a algunas sustancias desinfectantes y lticas del entorno.
Aprovechando esta caracterstica, se han diseado medios de cultivo selectivos
que permiten aislar y cultivar las especies Gram negativas inhibiendo el
crecimiento de las Gram positivas. Cuando se emplean antibiticos
betalactmicos para inhibir el crecimiento de las bacterias Gram negativas se
necesitan dosis ms altas para que atraviesen en cantidad suficiente la
membrana externa y alcancen la capa de peptidoglicano. Algunas
betalactamasas presentes en el periplasma inactivan adems parte de las
molculas de antibitico antes de que alcancen su objetivo.