These Toulouse 2004

THSE
prsente
LINSTITUT NATIONAL DES SCIENCES APPLIQUES DE TOULOUSE

En vue de lobtention du
DOCTORAT
SCIENCES DES PROCDS
SPCIALIT : GNIE DES PROCDS DE LENVIRONNEMENT
par
ANTHONY MASS
BIORACTEUR A MEMBRANES IMMERGES POUR

LE TRAITEMENT DES EAUX RSIDUAIRES URBAINES:
SPCIFICITS PHYSICO-CHIMIQUES DU MILIEU
BIOLOGIQUE ET COLMATAGE
Soutenu le 15 dcembre 2004
M. R. WIESNER
Professeur Universit Rice (USA)
Prsident
A. GRASMICK
Professeur Universit Montpellier II
Rapporteur
M. MIETTON-PEUCHOT
Professeur Universit Bordeaux II
Rapporteur
C. ALBASI
Charg de recherche CNRS, HDR, UPS Toulouse
Examinateur
P. BALDONI-ANDREY
Ingnieur de Recherche, Docteur, Mont/Lacq TPF
Examinateur
C. CABASSUD
Professeur, INSA, Toulouse
Directrice
M. SPRANDIO
Matre de confrences, INSA, Toulouse
Co-Directeur
REMERCIEMENTS
Cette thse a t ralise au sein du Laboratoire dIngnierie des Procds et de
lEnvironnement (LIPE) de lInstitut National des Sciences Appliques (INSA) de Toulouse.
Je remercie M WIESNER davoir accept la prsidence du jury et particip lvaluation de
ce travail.
Je remercie galement :
- Mme MIETTON-PEUCHOT et M. GRASMICK pour avoir accept dtre les
rapporteurs de ma thse et pour la pertinence de leurs critiques.
- Mme ALBASI et M. BALDONI-ANDREY pour lattention quils ont bien voulu
porter ce travail et la qualit de leurs remarques durant la discussion ayant pris place
la fin de ma soutenance.
Au terme de cette thse, je mesure ltendue du chemin parcouru et des progrs raliss. Je le
dois en partie aux comptences scientifiques et qualits humaines de Corinne CABASSUD et
Mathieu SPERANDIO. Merci notamment davoir apport la couleur mes prsentations et
analyses.
Cette thse naurait pas abouti sans les comptences techniques, laide et la disponibilit
dEvrard MENGELLE et Aldo MORO. Merci vous. Le JUDA vous salue bien bas.
Jaimerais galement remercier Ana ORALLO et Rmi BARRIER, deux tudiants qui ont
contribu cette thse. Je vous remercie du soin apport vos analyses, de votre disponibilit
et de votre motivation.
Je remercie ensuite tous mes amis de la team membrane :
La reine de la salsa et des pistes de danse, Marie-Carmen,
Le talentueux DJ PJ. Cest bien toi le roi de la galjade et du bon mot. Je me souviendrais
toujours des bons moments passs ensemble au bureau et aux congrs,
Seb, alors amoureux ? Plein destime pour mon pote,
Encore une reine, celle du Tiramisu, Christelle. Merci pour ton aide et tes conseils lis
ma thse. Avec toi, toujours partant pour un tournoi de tennis, un repas, un cin, voire
un congrs,
Nico, si les Bretons sont sympas et serviables alors il ne fait aucun doute que tu en es un.
Merci, va breur Brezhoneg,
Julie, le rayon de soleil du bureau. Garde ta gentillesse et ton naturel. Keep cool,
Merci galement Manuel, David et Galle.
Jaimerais galement remercier ma technicienne prfre, Eugnie BADORC pour son aide et
sa serviabilit durant les TP ainsi que Danile CORRADI pour son aide administrative. Je
noublie pas Bernard REBOUL pour ses dpannages et pour son immense sympathie.
Merci ma petite Sarah et Aymeric de rester les mmes et dtre encore l chaque fois que
je rentre. Vous tes loin des yeux mais prs de mon cur. Merci Nia pour ton soutien ;
Sache que tu es quelquun de bien et souviens toi toujours des mots du petit gnie. Merci
Romuald pour ta formation culinaire ; Ton entrecte est grave jamais dans ma mmoire.
Jai galement une pense pour mes amis du labo : Adrian (la gentillesse sera toujours
rcompense), Vincent (un petit homme au grand cur), Adil (merci pour laide sur mes
transparents), Vatea et Feriel (ma Tahitienne et Tunisienne prfres), Pierre, Laure,
Nathalie, Carole, Pisut, Juan-Gabrielle, Thing, Eduardo, Sam et puis les petits derniers
Anglique, Julien, Marlne (bien sr que je tadore) et Julie qui je souhaite bon vent (cest
parce que je suis breton). Merci galement mes grands frres et amis du foot Olivier,
Denis, Hassen.
Je remercie galement Alain (vous tes sr que Platini ait t le meilleur buteur de lEuro
84 ?), Marie-Hlne (merci de ta gentillesse), Dominique, Pascal, Gilles, Xavier, Dominique,
Louis, Marie-Eve, Etienne, Stphane, Jean Stphane, Sandrine, Jean-Nol, Jrme pour leur
soutien et leur sympathie.
Merci galement ceux qui mont initi la recherche et que je noublie pas : Marie-Pierre
BELLEVILLE et Delphine PAOLLUCCI-JEAN JEAN.
Enfin, the last but not the least.

Merci toute ma famille. Merci mon frre, David, de toujours me montrer lexemple. Merci
de faire le plus beau mtier du monde : lintelligence du cur cest ce quil y a de plus beau.
Je noublie pas Fabienne et la remercie pour sa gentillesse.
Merci galement mes parents pour tout ce quils me transmettent et minculquent. Sil y a
une chose dont je suis fier, cest bien dtre votre fils.
TABLE DES MATIERES
NOMENCLATURE
11
INTRODUCTION GENERALE
CHAPITRE I : SYNTHESE BIBLIOGRAPHIQUE

I. Caractrisation des boues biologiques
15
16
1.Caractrisation des flocs: les EPSlis

a. Description de l'organisation d'un floc
16
b. Description des EPSlis: rle, origine, composition
17
c. Paramtres influenant la production d'EPS
24
c.1 Les paramtres environnementaux
25
c.2 Les paramtres opratoires - l'ge de boues
28
c.3 Perturbations et dysfonctionnements des racteurs
30
d. Influence de la composition en EPSlis sur les proprits des flocs
31
d.1 La floculation/dcantation
32
d.2 Proprits de surface des flocs - Charge de surface et hydrophobicit
34
d.3 Granulomtrie
37
2.Les produits microbiens solubles (PMS)
40
a. Description des PMS: composition, origine
40
b. Mcanismes de production des PMS
42
c. Les paramtres influenant la production de PMS
45
II. Etude des mcanismes de production de boues

1.Production de boues et mtabolisme cellulaire
47
48
a. L'hydrolyse
49
b. La croissance cellulaire
50
c. Le mtabolisme de dcroissance
51
c.1 Le concept de maintenance
52
c.2 La respiration endogne
54
c.3 Le concept de mort rgnration (croissance cryptique)
54
2.Paramtres influant sur la production de boues
55
a. Effet des paramtres opratoires - l'ge des boues
55
b. Rle jou par les micro-organismes suprieurs
57
c. Influence des caractristiques de l'eau traiter
58
d. Rle de la membrane
59
III. Caractrisation du colmatage
60
1.Description des mcanismes de colmatage
61
2.Paramtres influenant le colmatage
67
a. Influence des conditions de filtration
67
a.1 Nature chimique et physique de la membrane
67
a.2 Les conditions opratoires de filtration
69
b. Influence des caractristiques chimiques et physico-chimiques du milieu

biologique
73
b.1 Nature et composition de l'effluent traiter
73
b.2 Importance relative des matires particulaires et solubles - les produits

microbiens
74
b.3 Distribution de la taille des particules et flocs
78
b.4 Proprits de surface des flocs
79
c. Etat physiologique de la biomasse et charge applique
81
c.1 Viabilit et carences nutritives
81
c.2 Age de la boue
83
IV. Conlusion
84
CHAPITRE II : MATERIEL ET METHODES

I. Description des procds biologiques
86
1.Le pilote boues actives
86
2.Le bioracteur membranes immerges (BAMI)
87
3.Rcapitulatif des conditions opratoires
89
II. Caractristiques de l'eau rsiduaire urbaine
90
III. Techniques analytiques mises en uvre
91
1.DCO/MES/MVS
91
2.Indice de boue
91
3.Analyse granulomtrique
92
4.Evaluation de la filtrabilit d'une boue
95
a. Calcul de la vitesse de colmatage
96
b. Calcul du produit .C
99
5.Extraction et dosage des EPSlis et EPSsolubles
100
a. Protocole d'extraction retenu
100
b. Protocole de dosage des EPS
103
b.1 Dosage des protines et substances humiques
103
b.2 Dosage des polysaccharides
105
6.Dtermination de la production de boues
105
CHAPITRE
III :
ANALYSE
COMPARATIVE
DUN
PROCEDE
BIOREACTEUR A MEMBRANES IMMERGEES ET DUN PROCEDE A
BOUES ACTIVEES
I. Performances d'limination de la DCO
107
1. Performances globales
107
2. Rle de la rtention membranaire: tude dynamique
109
113
3. Etude de l'limination des EPS solubles

a. Bilan matire sur le BAMI
113
b. Bilan matire sur le procd boues actives
117
120
1. Comparaison des procds et effet de l'ge des boues
120
2. Modlisation de la production de boue
123
III. Conclusion
127
CHAPITRE IV : INFLUENCE DE LA SEPARATION MEMBRANAIRE SUR

LES PROPRITS PHYSICO-CHIMIQUES DUN MILIEU BIOLOGIQUE
I. Evolution des matires en suspension
129
II. Caractrisation des flocs
133
1.EPS des flocs
133
2.Evolution de la taille des flocs
137
3. Dcantabilit et paississement de la boue
141
III. Caractrisation du surnageant des boues
142
IV. Conclusion et discussion
147
CHAPITRE V : ANALYSE DU
BIOLOGIQUE DANS UN BAMI
COLMATAGE
PAR
UN
MILIEU
I. Identification des paramtres influenant le colmatage long terme
151
1.Evolution de la pression transmembranaire au cours du temps
152
2.Observation du faisceau de fibres - colmatage du faisceau
156
3.Influence des caractristiques du milieu biologique
157
II. Rversibilit du colmatage
162
III. Identification des paramtres influenant le colmatage court terme
164
1.Colmatage court terme ge de boues faibles (9 jours)
166
2.Influence des proprits du fluide biologique sur le colmatage court terme
170
IV. Mcanismes de colmatage par un milieu biologique dans un BAMI
176
V. Conclusion
180
CONCLUSION GENERALE
182
REFERENCES BIBLIOGRAPHQIUES
186
ANNEXE
196
NOMENCLATURE
Nomenclature
ABREVIATIONS
Abs
Absorbance
ADN
Acide Dsoxyribonuclique
ARN
Acide Ribonuclique
ASM
Activated sludge model modle des procds biologique
ATP
Adnosine triphosphate
ATR-FTIR
Spectrophotomtre transform de fourrier - rflexion total attnue
BA
Bioracteur boues actives
BAM
Bioracteur membranes
BAMI
Bioracteur membranes immerges
BAME
Bioracteur membranes externes
BRT
Bioracteur textile
CFSR
Continuous flow stirred reactor (racteur mlang flux continu)
Df
Dimension fractale
EDTA
Acide Ethylne Diamine Ttra actique
EPS
Exopolymres
ERU
Eau Rsiduaire Urbaine
GAL
Gradual Area Loss (chute progressive de la surface membranaire)
GPC
Gradual Pore Closure (rtrcissement progressif du pore)
LIPE
Laboratoire dIngnierie des Procds de lEnvironnement
M(R)
Masse dun agrgat
np
Nombre de pores
Indice de rfraction
NF
Nanofiltration
PN
Protines
PS
Polysaccharides
PAC
Poudre de charbon actif
PMS
Produits microbiens solubles
Nomenclature
PMSH
Produits microbiens solubles issus de lhydrolyse
PMSC
Produits microbiens solubles issus de la croissance bactrienne
PMSL
Produits microbiens solubles issus de la lyse bactrienne
Taille dun agrgat
SBR
Sequencing Batch Reactor racteur discontinu squenc
SH
Substances Humiques
UF
Ultrafiltration
LETTRES LATINES
T-1
Constante de dcroissance cellulaire
Quantit de matire dpose sur la membrane par unit de volume
Cma
Charge massique applique
T-1
Cme
Charge massique limine
T-1
Cva
Charge volumique applique
M.L-3.T-1
Cve
Charge volumique limine
M.L-3.T-1
COT
Concentration en carbone organique total
M.L-3
Csolut
Concentration en solut dans la solution
M.L-3
Da
Dalton
DBO
Demande biologique en oxygne
M.L-3
DCO
Demande chimique en oxygne
M.L-3
%DCOlim
Pourcentage de DCO limin dans le systme
DCOe
Concentration en DCO lentre
M.L-3
DCOs
Concentration en DCO dans la sortie
M.L-3
DCOtotale
Concentration en DCO totale
M.L-3
DCOsoluble
Concentration en DCO soluble
M.L-3
M.mol-1
DCOparticulaire Concentration en DCO particulaire

EPSlis
M.L-3
Teneur en exopolymres au sein des flocs

7
M.L-3
-
Nomenclature
M.L-3
EPSsolubles
Concentration en polymres au sein du surnageant des boues
F/M
Concentration en DCO de lERU sur la concentration en MES des

boues
fp
Fraction de biomasse lyse non biodgradable
Fp
Flux de permat
L.T-1
Fpcrit
Flux de permat limite
L.T-1
Fplim
Flux de permat critique
L.T-1
fXi
Fraction de DCO inerte dans la DCO totale de lERU
IB
Indice de boue
L.M-1
Jp
Flux de permat dans un pore
L.T-1
k1
Constante de proportionnalit
k2
Constante de proportionnalit
kd
Constante de dcs
T-1
kH
Constante dhydrolyse
T-1
KH
Constante dhydrolyse
T-1
KS
Constante de demi saturation
M.L-3
KX
Constante de demi saturation
Lp
Permabilit de la membrane
M-1.T.L2
Masse molaire
M.mol-1
Masse de composs interagissant avec la membrane
ms
Vitesse spcifique de consommation du substrat pour la maintenance
T-1
MES
Concentration des matires en suspension
%MESelim
Pourcentage de MES limin dans le procd
MESe
Concentration en MES l'entre
M.L-3
MESp
Concentration en MES des purges
M.L-3
MESr
Concentration en MES au sein du racteur
M.L-3
MESs
Concentration en MES dans la sortie
M.L-3
MEStest
Concentration en MES du test
M.L-3
MM
Concentration en matires minrales en suspension
M.L-3
M.L-3
%
Nomenclature
MS
Concentration en matires sches
M.L-3
MVS
Concentration en matires volatiles en suspension
M.L-3
MVSp
Concentration en matires volatiles en suspension dans la purge
M.L-3
MVSs
Concentration en matires volatiles en suspension en sortie
M.L-3
MVSr
Concentration en matires volatiles en suspension dans le racteur
M.L-3
PTM
Pression transmembranaire
M.L-1.T-2
PTM0
Valeur initiale de la pression transmembranaire chaque

changement de flux de permat
M.L-1.T-2
Px
Production de boue cumule
Vecteur donde
Dbit volumique
L3.T-1
Qe
Dbit volumique d'entre
L3.T-1
Qs
Dbit volumique de sortie
L3.T-1
Qp
Dbit volumique de purge
L3.T-1
rpm
Rotation par minute
tr.T-1
Rc
Rsistance de colmatage
L-1
Rm
Rsistance de la membrane
L-1
Surface de la membrane
L2
Concentration en substrat
M.L-3
S0
Concentration initiale en substrat dans lERU
M.L-3
Si
Concentration en DCO soluble non biodgradable
M.L-3
SOUR
Specific oxygen uptake rate vitesse de consommation de loxygne
T-1
Sp
Section dun pore
L2
SRT
Age des boues
SS
Concentration en DCO facilement biodgrdable
Temps
tf
Temps de filtration
tR
Temps de relaxation
Temprature
M.T-1
M.L-3
Nomenclature
TSB
Temps de sjour des boues
TSH
Temps de sjour hydraulique
Volume de filtrat recueilli
L3
Vc
Vitesse de colmatage
Vp
Volume de purge
L3
Vr
Volume du racteur
L3
V30
Volume du dcantat aprs 30 minutes de filtration
L3
Concentration en biomasse
M.L-3
X0
Concentration initiale en biomasse
M.L-3
XH
Concentration en biomasse htrotrophe
M.L-3
Xp
Concentration en DCO non biodgradable scrte par la biomasse
M.L-3
Xi
Concentration en DCO non biodgradable
M.L-3
Xs
Concentration en DCO hydrolysable
M.L-3
Xsto
Concentration en substrat stock
M.L-3
YH
Taux de conversion intrinsque du substrat en biomasse
Yobs
Production de boue observe
L-1.T-1
LETTRES GRECQUES
L.M-1
Rsistance spcifique du colmatage
Longueur donde
Angle de dispersion
Viscosit du permat
M.L-1.T-1
max
Taux de croissance maximal
T-1
10
INTRODUCTION
Introduction
Le traitement des eaux uses urbaines est ralis le plus couramment par des procds boues
actives constitus par un bassin biologique ar dont la surverse alimente un dcanteur. Les
dysfonctionnements rencontrs notamment au niveau de la dcantation ont facilit
lmergence de techniques de substitution telles que les bioracteurs membranes (BAM).
Ces systmes couplent une dgradation biologique une sparation par membranes dultra ou
de microfiltration: les micro-organismes oxydent et/ou assimilent la pollution organique
(voire azote) entrante et sont totalement spars de l'eau traite grce la membrane. Les
BAM permettent dobtenir une excellente qualit deau traite (Xing et al. 2000 ;
Praderie 1996) et sont trs souvent compacts et robustes. Le temps de sjour hydraulique et
lge des boues sont totalement dcoupls et offrent donc aux BAM une grande flexibilit
dopration.
Du fait de ces avantages, lusage des bioracteurs membranes pour le traitement des eaux
domestiques est de plus en plus important et de nombreuses installations industrielles ont t
ralises ou sont en cours de projet.
A lheure actuelle, la plupart des avances obtenues concernent le bioracteur membranes
immerges (BAMI) propos par Yamamoto en 1989. Dans cette configuration, la membrane
est directement immerge au sein du milieu biologique et le permat est aspir travers les
membranes (Figure A). En comparaison avec la premire gnration de bioracteurs
membranes, les bioracteurs membranes externes (BAME) dans lesquels les modules de
filtration sont placs lextrieur du bioracteur et le concentrt recircul, le systme
immerg permet une consommation dnergie moindre et donc un cot opratoire rduit.
Permat
Recirculation
Effluent
Effluent
Permat
Bioracteur
Permat
Membrane
Schma (a)
Bioracteur
Schma (b)
Figure A : Schma du bioracteur membranes externes (a) et du bioracteur membranes immerges (b)
Cependant, et pour reprendre les termes parus dans une enqute effectue par le Club Franais
des Membranes et lADEME en avril 2002, des freins et des verrous subsistent la
pntration des technologies membranaires. Outre, des freins culturels, commerciaux et
11
Introduction
conomiques, cette enqute fait ressortir des freins lis au colmatage et la mise en uvre des
techniques membranaires. Ce rapport dresse notamment les constats suivants :
-
"besoin impratif de raliser des essais pralables avant de valider la faisabilit

dun traitement par un BAMI et de dimensionner une installation",
"incomprhension et difficult de prvision du phnomne de colmatage (pas de

matrise de la cintique du colmatage et donc pas doutil de prvision du
colmatage) ".
En consquence, aujourdhui le dimensionnement, la conduite et loptimisation de ce type de

procd sont difficiles en raison de connaissances insuffisantes sur les mcanismes de
colmatage et sur le comportement biologique dune biomasse de ce type de racteur.
Pour progresser dans ces domaines du Gnie des Procds, il est important de mieux
connatre les interactions entre le procd, la membrane et le milieu biologique (Figure B). En
effet, il semble vident que lors de la filtration dun milieu biologique, le colmatage des
membranes va dpendre, la fois, de la membrane, du milieu biologique et des conditions
opratoires adoptes.
Procd
Hydrodynamique,
conditions opratoires
Membrane
Matriau, structure,
charge de surface,
porosit, gomtrie, paisseur
Milieu Biologique
Composition, concentration, pH,
T, force ionique,
charge de surface,
Figure B : Paramtres influenant les performances hydrauliques d'un BAM
La plupart des tudes ralises ont propos de relier la nature et ltendue du colmatage des
critres globaux de caractrisation de la biomasse (taille des flocs, concentration en MES,
12
Introduction
DCO, viscosit) ou des paramtres opratoires tels que le dbit daration, la vitesse de
recirculation, le cycle de filtration.
Ce travail est focalis sur ltude des interactions entre une membrane et un milieu biologique
dans le cadre prcis dune membrane de microfiltration fonctionnant dans un BAMI, et dun
milieu biologique caractristique dun traitement deffluent domestique. Deux questions
essentielles sont au cur de ce manuscrit :
1. Comment le milieu biologique influence-t-il le comportement de la filtration et
quels sont les paramtres physico-chimiques pertinents prendre en compte pour
dcrire le colmatage ?
2. Lintroduction dune membrane dans le milieu biologique modifie-t-elle
les
caractristiques de la boue ? et si oui lesquelles ?

Ce travail a donc pour objectif de rpondre ces deux questions. Le manuscrit qui en dcoule
est organis en 5 chapitres :
- Le premier chapitre recense les diffrents paramtres permettant de caractriser le
milieu biologique et le comportement de la filtration. Ces caractristiques ont t
tudies suivant le mode de conduite du procd biologique et la composition de
leffluent traiter.
- Le deuxime chapitre dfinit les moyens mis en uvre dans cette tude pour pouvoir
tudier les interactions entre le milieu biologique et la membrane. Le matriel et les
mthodes utiliss sont donc prsents.
- Le troisime chapitre, value les performances dun BAM oprant sur le long terme
(320 jours de fonctionnement). Lefficacit dpuration et la production de boues dun
BAMI sont compares celles du procd conventionnel boues actives,
fonctionnant mme ge de boues. Des informations importantes sur la rtention des
diffrents exopolymres solubles (polysaccharides, protines et acides humiques) et
sur leur accumulation dans le systme seront apportes.
- Le quatrime chapitre prsente les rsultats exprimentaux caractrisant linfluence
dun procd de filtration sur les proprits du milieu biologique. Dans cette partie, les
caractristiques physico-chimiques du milieu biologique issu dun bioracteur
13
Introduction
membranes immerges sont compares celles dune boue venant dun procd
conventionnel boues actives, les deux racteurs tant aliments en parallle et
fonctionnant dans les mmes conditions. Le rle de la membrane et de la filtration sur
les proprits physico-chimiques du fluide biologique sera donc discut.
- Le cinquime et dernier chapitre analyse les spcificits du colmatage obtenu par un
milieu biologique de type BAMI. Ici, une distinction entre colmatage court terme et
colmatage long terme est effectue. Il sagit didentifier les paramtres du milieu
biologique affectant le colmatage. Le rle dun paramtre opratoire, lge de boues
sera aussi tudi.
Enfin, les principaux rsultats obtenus au cours de cette tude sont rassembls dans la
conclusion de ce mmoire qui ouvre la discussion sur les perspectives de ce travail.
14
CHAPITRE I
SYNTHESE BIBLIOGRAPHIQUE
Chapitre I : Synthse bibliographique : Caractrisation des boues biologiques
I. Caractrisation des boues biologiques

Dans ce chapitre nous dcrivons les caractristiques dun milieu biologique en vue de
relier les proprits du milieu au colmatage et aux performances puratoires du procd.
Lobjectif du chapitre IV de cette thse sera dtudier la composition et la structure dune
boue ainsi que les relations existant entre les composs (Figure I.1).
Description dune boue biologique

Composition chimique, physique,
proprits morphologiques,
structure, organisation
LE SURNAGEANT
LES FLOCS
. Influence de la composition de leffluent et

du mode de conduite du procd sur les
caractristiques dune boue?
. Relations entre proprits
dune boue et teneur en EPSlis?
. Mcanismes de production des EPS?
. Paramtres influenant la production de polymres ?
. Liens entre EPSlis et EPSsolubles?
Choix des paramtres biologiques

tudier
CARACTRISATION DE LA BOUE
Figure I.1: Dmarche adopte pour comprendre les interactions dans un milieu biologique
La caractrisation du milieu biologique passe par la caractrisation du surnageant et des flocs.

Nous allons dans ce chapitre bibliographique considrer sparment le surnageant et les flocs
de la boue.
Plusieurs tudes montrent que les polymres prsents dans les flocs et le surnageant jouent un
rle essentiel dans le comportement de la filtration (Lee et al. 2003, Nagaoka et al. 1998) et la
structuration de la boue (Urbain 1992, Dignac 1998). Nous avons donc choisi dorienter plus
particulirement la description de la boue vers les polymres du surnageant (EPSsolubles) et
ceux prsents lintrieur des flocs (EPSlis). Les paramtres influenant leur scrtion seront
tudis. Dans lensemble de cette tude, la terminologie EPSlis (polymres extra-cellulaires)
est utilise pour dfinir les exopolymres prsents au sein du floc. Les polymres du
surnageant sont nots PMS (produits microbiens solubles) sils se rfrent aux produits
scrts par la biomasse ou plus gnralement EPSsolubles, si lorigine des polymres nest pas
spcifie. Par exemple, si les polymres solubles comprennent des substances humiques, le
terme EPSsolubles sera utilis plutt que PMS car ces substances ne sont pas produites par les
micro-organismes mais rsultent en grande partie de la percolation de leau travers les sols.
15
Enfin, lutilisation du terme EPS, sans prciser sil sagit de ceux prsents dans les flocs ou le
surnageant, se rfre lensemble des polymres du milieu biologique c'est--dire les EPS lis
et les EPS solubles. Par ailleurs, les EPS spcifiques correspondent aux polymres (protines,
polysaccharides et substances humiques) pris sparment, alors que les EPS totaux se rfrent
la somme de tous les EPS spcifiques.
Au terme de cette partie, lidentification des mcanismes de production des polymres
permettra ensuite de lier cette production aux caractristiques du colmatage. Enfin ce chapitre
doit fournir les bases utiles la comparaison de boues biologiques et la comprhension des
liens unissant les proprits du milieu biologique, aux performances hydrauliques de filtration
(colmatage) et puratoires du procd.
1. Caractrisation des flocs : les EPSlis

a. Description de lorganisation dun floc
Les boues actives sont constitues de micro-organismes (essentiellement des

bactries mais galement des mtazoaires, des champignons et des algues), de particules
inorganiques (silicates, phosphates de calcium, oxydes de fer), de cations multivalents ainsi
que de polymres exocellulaires de masse molculaire leve.
Les micro-organismes se trouvent majoritairement sous forme dagrgats, appels flocs,
constitus de micro-colonies de lordre de 5 15 m (Li et Ganczarczyk, 1990 ; Jorand et al.
1995). Ces flocs bactriens se forment par pontage cellules-EPS-cations (pontages
lectrostatiques) (Urbain et al. 1992) ou par interactions physiques (Pavoni et al. 1972). Les
flocs prsentent une structure peu dense et htrogne (densit comprise entre 1,02 et 1,06,
daprs Dammel et Schroeder, 1991) dont la cohsion est assure par des liaisons entre les
ions et les exopolymres, ces liaisons sont de type hydrogne et de type Van Der Waals. Il
existe galement des interactions lectrostatiques (rpulsives ou attractives), hydrophobeshydrophobes, hydrophiles-hydrophiles (Figure I.2).
16
C 2+
C 2+
C2+
C 2+
n
Particules minrales
Zones hydrophobes
C 2+ Cations divalents
nPO4
COO
Polymres exocellulaires
+
N
OH
Figure I.2: Reprsentation schmatique du floc biologique dans les boues actives
Parmi tous les composs contribuant la structuration du floc, les exopolymres (EPS) jouent
un rle majeur.
b. Description des EPSlis : rle, origine, composition
Les EPSlis sont des composs forte densit de charges ngatives pouvant tre
limins des micro-organismes sans entraner la rupture des cellules et sans lesquels les
micro-organismes sont encore viables (Azeredo et al. 1998). Les EPS produits par des
bactries isoles forment lenveloppe externe des cellules (Figure I.3) et peuvent se trouver
sous deux formes :
-
sous forme de matriel visqueux ou mucilage qui se rpartit autour des cellules sans
leur tre attach. La prsence du mucilage dans les boues entrane une augmentation
de leur viscosit,
sous forme de capsules ou micro-capsules qui adhrent la cellule bactrienne et

peuvent stendre lextrieur sur 0,1 m 10 m.
17
Ca
-SO
4
O O
++
H2
N
-SO
4
H
O
H2 O
N C
OO
C
H
O
H2
C
Ca
O
O O
O
C
C
Ca
OO
C
++
C H 2O
N
H2
CHO
2 H
Capsule ou mucilage
O
O
-
Ca
C
H
2
O
H
N
H+
COOH
Membrane
C
O
O-
CYTOPLASME
CHOH
2
Fe +++
Na +
C
O
O
C
O
O
O
O
Ca
Mg
++
Na +
Fe +++
Cl -
-SO
4
Figure I.3:Reprsentation schmatique d'une cellule bactrienne
Les EPS reprsentent, avec leau et les micro-organismes, les composs majoritaires des
boues actives (Li et Ganczarczyk 1990). Frolund et al. (1996) considrent que les EPS
peuvent reprsenter jusqu 60% (en masse) de la fraction organique dune boue, contre 1015% (en masse) pour les cellules microbiennes.
Lorigine des EPSlis est multiple. Ils proviennent de:
-
la scrtion de composs au cours du mtabolisme cellulaire,
la perte de matriels venant de la paroi cellulaire (peptidoglycane),
la lyse cellulaire (polymres intracellulaires),
ladsorption de composs apports par les eaux uses (cellulose, acides humiques,
etc).
Dans ce dernier cas, les substances ne sont pas des molcules excrtes par les microorganismes du procd, mais elles sont en pratique difficilement dissociables des produits
microbiens. Ainsi, lorigine diffrente de ces EPSlis peut se traduire par des caractristiques et
des localisations sur le floc bactrien galement diffrentes (Nielsen et Keiding 1998). Par
exemple, les polymres amens par leau use seraient faiblement lis au floc et situs en
priphrie de celui-ci. Ils sont donc trs sensibles aux variations de stabilit du floc.
Les EPS peuvent agir comme purateur des eaux par fixation de cations mtalliques, comme
substances responsables de lhydratation des boues (les exopolymres constituent une couche
de gel trs hydrat qui protge les cellules et qui rend difficile llimination de leau lors du
18
traitement des boues) ou comme agent floculant des boues (Wiln et al. 2003). Cette capacit
de floculation est surtout gouverne par la charge de surface, lhydrophobicit et la
composition, plutt que par la quantit totale dEPS (Liao et al. 2001). Les EPS participent
galement ladhsion des cellules microbiennes sur des supports, laccumulation
denzymes ou de nutriments proximit des cellules et la formation dune couche
protectrice des cellules contre les biocides ou autres toxiques. Par exemple, la couche
dEPSlis autour de la cellule influence significativement la diffusion de diffrentes molcules
vers lintrieur ou vers lextrieur de la cellule et limite leffet dagents toxiques et antimicrobiens sur les cellules.
Les travaux effectus sur les exopolymres de boues actives montrent que leur extraction et
quantification est dlicate. Leur composition varie en fonction de lorigine et de la
composition de la boue et des eaux uses (Urbain 1992 ; Bura et al. 1998 ; Durmaz et al.
2001), ainsi que des paramtres de fonctionnement du procd dpuration. La mthode
dextraction employe (extraction thermique, par solvant, au glutaraldhyde, avec une rsine
changeuse dions) aura galement une importance sur la quantit de polymres extraits et
donc sur la reprsentativit des quantits dexopolymres values (Tableau I.1). De faon
gnrale, la plus grande fraction de polymres observs au sein des flocs bactriens
correspond aux protines.
19
Alimentation
Municipale
Municipale
Municipale
60%Municipal + 40%laiterie
Municipale
Municipale
Municipale
Municipale
Municipale
Municipale
Municipale
Rfrences
Liu (2002)
Liu (2002)(e)
Reid (2004)
Reid (2004)
Reid (2004)
Jorand (1994)
Dignac (1998)
Urbain (1993)
Liu (2002)
Wuertz (2001)
Brown (1980)
BA
BA
BA
BA
BA
BAMI
BAMI
BAMI
BA
BA
Type de
procd
15,07
17,9
18,8
MES
(g.L-1)
10
10
TSH
(h)
12,3
7,9
Centrifugation
Protines
(mg.gMVS-1)
15,9
7,7
Polysaccharides
(mg.gMVS-1)
13
30-50
29
35
10,9(a)
8,89(a)
38,8(a)
39,23(a)
6,1-97,8
127,0
239
10
20
171,7
30,0
22,9
Extraction lEDTA
22,4
4,3
12,4
3,5-15,6
9,5
45
9,8(a)
34,1(a)
Extraction aux ultrasons
20
26
26
Extraction la chaleur + solvant
13
13
TSB
(j)
59,2
10,9
6,4
Acides Humiques
(mg.gMVS-1)
Tableau I.1: Concentrations en EPSlis trouves dans diffrents travaux
6,1
0,47
5-17,7
25
0,07
0,06
ADN
(mg.gMVS-1)
200,2
34,3
146,8
15,6-131,1
136,5
319
49,7
25,7
Total
(mg.gMVS-1)
7,66
6,98
1,85
3,81-27,94
13,37
5,31
4,41
3,5
3,5
0,77
1,0 3
Ratio
PN/PS(g)
Alimentation
Industrie du vin
Papier
Textile
Ptrochimie
Municipale
Synthtique
Synthtique
Synthtique
Synthtique
Municipale
Municipale
Municipale
Municipale
Rfrences
Sponza (2003)
Sponza (2003)
Sponza (2003)
Sponza (2003)
Sponza (2003)
Lee (2003)
Lee (2003)
Lee (2003)
Kim(1998)
Frolund (1996)
Liu (2002)(e)
Frolund (1996)
Brown (1980)
BA
BA
BA
BA
BA
BAMI
BAMI
BAMI
BA
BA
BA
BA
BA
Type de
procd
5,5
7-9
13
7-9
6-8
60
40
20
2,8(b)
4,4
12
14
10
10
15
TSB
(j)
2,9
2,4
2,1
2,5
4,5
MES
(g.L-1)
Protines
(mg.gMVS-1)
71
42
39
40
70
121
7,1-11,0
35,52,1
35,72,5
29,92,4
21
757,6
96
54,6
Extraction NaOH
10
12-24
7,8
7,8
7,8
Extraction thermique
1,43
1,35
1,27
1,36
1,20
96,0
22
40,5
21,8-31,7
29
34
32,7
17
17
27
30
17
Polysaccharides
(mg.gMVS-1)
Extraction au glutaraldhyde
TSH
(h)
50,4
Acides Humiques
(mg.gMVS-1)
18,7
0,35
6,5
11
10
17
6,2
ADN
(mg.gMVS-1)
872,3
118
164,9
129
94,5
70
76
87
93,2
Total
(mg.gMVS-1)
7,89
4,36
1,35
15,12
0,2-0,5
1,22
1,05
0,91
4,2
2,47
1,44
1,33
4,12
Ratio
PN/PS(g)
Alimentation
Municipale
Municipale
Municipale
Municipale
Municipale
Municipale
Municipale
Municipale
Distillerie
Municipale
Synthtique
Municipale
Municipale
Glucose
Rfrences
Liu (2002)(e)
Jorand (1994)
Rudd (1984)
Frolund (1994)
Frolund (1995)
Nielsen (1996)
Frolund (1996)
Jorand (1998)
Jorand (1998)
Dignac (d)
Bura (1998)
Wuertz (2001)
Martin-C (2001)(d)
Liao (2001)
SBR
BA
BA
SBR
BA
BA
BA
BA
BA
BA
BA
BA
BA
BA
Type de
procd
MES
(g.L-1)
10
TSH
(h)
123
20,4
Ultrasons
Protines
(mg.gMVS-1)
15
28,9
Polysaccharides
(mg.gMVS-1)
4-20
7-9
30-35
6,2
18,4(a)
62,1(a)
22
9,5-16
50-51
97,1
20-106
3,5-7,5
21-24
15,7
28-58
11,4
27,5(a)
90,3(a)
242,0
48
40,0
6,8-8,8
19,2-21,8
243
212,0
410-510
64-75
83-92
Extraction par rsine changeuse de cations
13
TSB
(j)
18-20
126
101,0
130-205
18,9
Acides Humiques
(mg.gMVS-1)
0,8-1,2
23-25
0,3-6,5
14-20
119-123
112,8
114,9
47,1
80,5
117,8
423,1
6,1(c)
-
372,9
16,0
540-715
74,1-87,3
3,2-3,3(c)
-
185,5-324
143
77,9
Total
(mg.gMVS-1)
0,13
ADN
(mg.gMVS-1)
1,27-4,57
2,08-2,43
6,18
0,34-3,78
21,23
3,4
3,3
5,1
5,3
7,27-11,03
3,81-4,79
8,2
0,71
Ratio
PN/PS(g)
Synthtique
Domestique + Industriel
Municipale
Domestique
Domestique
Synthtique
Synthtique
Synthtique
Durmaz (2002)
Mikkelsen (2002)
Cadoret (2002)
Wiln (2003)
Wiln (2003)
Cho (2004)
Cho (2004)
Cho (2004)
BAMI
BAMI
BAMI
BA
BA
BA
BA
BA
BA
Type de
procd
8,0
4,0
2,5
TSB
(j)
TSH
(h)
Protines
(mg.gMVS-1)
Polysaccharides
(mg.gMVS-1)
80
20
18
13
4,5
4,5
4,5
10
254
353
89
64
12,2-38,4
11,94,5(a)
7632(a)
27,3-131,8
2,2-2,4
12,7
6,5-6,7
17,6
Extraction par rsine changeuse de cations (suite)
MES
(g.L-1)
127
191
6,2-25,2
4239(a)
16,4
Acides Humiques
(mg.gMVS-1)
15
22
0,14
ADN
(mg.gMVS-1)
2,8
-
20-80(f)
20-50(f)
20-40(f)
5,5
2,2-4,0
6,38
2,7-3,0
1,39
Ratio
PN/PS(g)
57,8
Total
(mg.gMVS-1)
23
La somme totale des EPS dpasse parfois la somme des polysaccharides, protines, acides humiques et ADN car dautres EPS ont pu tre pris en compte (acide uronique, les EPS non mesurs
spcifiquement).
Exprim en mg.gMES-1 (b) en gMVS.L-1 (c) acide uronique (d) des ultrasons prcdent ltape de rsine (e) Du formaldhyde a t utilis pour la fixation des cellules avant lextraction
(f)
en mgCOT.gMVS-1 (g) PN : protines PS : polysaccharides
Municipale
Liu (2002)
(a)
Alimentation
Rfrences
A partir dune analyse chimique des EPSlis plusieurs auteurs montrent que :
-
les polysaccharides sont principalement constitus par des hexoses, des sucres amins,
des pentoses et des acides uroniques (Dignac 1998). Ces polymres sont
principalement hydrophiles (Jorand et al. 1998),
les protines sont les composs majoritaires des polymres exocellulaires (Brookes et
al. 2003 ; Reid et al. 2004 ; Cadoret et al. 2002 ; Dignac 1998 ; Bura et al. 1998 ;
Mikkelsen et al 2002). Ce sont trs souvent des polymres dacides amins tels que les
acides aspartiques et les acides glutamiques (Dignac, 1998). Les acides amins
aromatiques ou aliphatiques de certaines protines leur confrent des proprits
hydrophobes (Jorand et al. 1998). Ces protines peuvent galement tre des exoenzymes prsentes notamment dans le liquide interstitiel des flocs et servant
hydrolyser la matire organique (Durmaz et Sanin 2001),
les acides nucliques (ADN et ARN) constituent une minorit au sein des EPSlis ;
prsents en fortes quantits, ils peuvent tre lindice dune importante lyse cellulaire,
les lipides sont principalement des triglycrides et des acides gras libres insaturs
intervenant dans les interactions de type hydrophobe,
les substances humiques proviennent directement des eaux uses.
Lanalyse des masses molculaires des EPS lis aux flocs montre que la distribution
granulomtrique des EPSlis dune boue municipale, varie avec la concentration en MES et au
cours du fonctionnement du BAM, mme lorsque celui ci est en rgime tabli (variation au
moins hebdomadaire)(Brookes et al. 2003). Frolund et Keiding (1994) dterminent les tailles
des exopolymres par sparation sur gel en HPLC (chromatographie liquide haute pression).
Ils constatent que les EPSlis ont une masse molculaire comprise entre 104 et 2.106 Da avec
des proportions relatives qui varient avec le type de boue.
c. Paramtres influenant la production dEPS
Lors de la conduite dun procd biologique des facteurs environnementaux et

opratoires vont agir sur les proprits du milieu biologique. Les proprits morphologiques
et physiques, la composition chimique et biologique, ltat physiologique de la boue peuvent
ainsi tre modifis. Ce chapitre sattache donc recenser quelques facteurs pouvant modifier
les proprits du milieu biologique.
24
c.1 Les paramtres environnementaux
Les paramtres environnementaux tudis ici concernent la composition de leffluent

traiter et la concentration en oxygne dissous.
Composition de leffluent traiter
La composition de leffluent traiter (en terme de biodgradabilit du substrat mais
galement en terme de proportion en substrats carbons, azots et phosphors) influence le
type de micro-organismes prsents dans le milieu biologique et les mcanismes de scrtion
des exopolymres.
Ainsi, en rgle gnrale, les boues ont une concentration en EPSlis dautant plus importante
que les effluents ont une fraction leve de substrats facilement biodgradables. Pour cette
raison, les effluents industriels difficilement biodgradables (ptrochimie, textile)
conduisent des teneurs plus faibles en exo-polymres (Tableau I.1). Cependant, la prsence
de composs inertes voire de toxines, comme cest souvent le cas dans les effluents industriels
(industrie du cuir, chimique, colorant) provoque une perte de viabilit des micro-organismes
et/ou une lyse cellulaire induisant la libration dADN intracellulaire (Sponza 2003).
La qualit de lalimentation en terme de biodgradabilit est donc importante mais doit
galement tre tudie en terme nutritionnel. En effet, une limitation en substrat provoque une
modification des distributions relatives en exopolymres des flocs.
- effet du rapport DCO/NH4 (Tableau I.2): lorsque ce ratio augmente, il est
gnralement observ une diminution de la proportion de protines par rapport celle
des polysaccharides.
Ainsi, pour une limitation en substrat carbon (DCO/NH4 < 20), la proportion de
protines augmente lorsque le rapport DCO/NH4 diminue. Brown et al. (1977)
rappellent que les cellules ont tendance produire des exopolymres quand elles sont
cultives sous limitation en carbone. Lors dune carence en substrat carbon, les
cellules utilisent prfrentiellement ce substrat pour subvenir leurs besoins en
nergie de maintenance. La faible quantit de substrat restant est alors utilise pour la
synthse de polysaccharides.
Dans le cas dune diminution de la concentration en azote, et sous limitation en azote
(DCO/NH4 > 20), la quantit relative de protines diminue. Cependant, en comparant
les rsultats de Durmaz et Sanin (2001) et Bura et al. (1998), il apparat que les
mcanismes de production des EPS ne sont pas les mmes dans les deux tudes. En
effet, laugmentation du rapport DCO/NH4 se traduit par une augmentation de la
concentration en polysaccharides et une diminution en protines pour Durmaz et Sanin
25
(2001) alors que pour Bura et al. (1998) il ny a que la quantit de protines qui varie.
Notons que les substrats carbons sont diffrents dune tude lautre.
Tableau I.2: Influence du rapport DCO/NH4 sur la production des EPSlis
EPSprotines
EPSpolysaccharides
(mg.gMVS-1)
(mg.gMVS-1)
20
85,0
28,2
3,0
100
20,3
28,1
0,7
32,0
7,7
4,3
17,5
20,3
15,2
1,3
40
11,8
44,2
0,2
3,3
0,26
Shufang
0,24
(2004)
10
0,21
20
0,19
Rfrences
DCO/NH4
Bura et al.
(1998)
Durmaz et Sanin
(2001)
EPSPN/PS
PN : Protines PS : Polysaccharides
- effet du rapport DCO/P (Tableau I.3): une augmentation du ratio DCO/P provoque
une diminution du rapport Protines/Polysaccharides et une augmentation de la concentration
en ADN (Bura et al. 1998). Au-del dun ratio DCO/P de 500 le rapport
protines/polysaccharides ne semble plus fluctuer.
Tableau I.3: Effet d'une carence en phosphore sur la production des EPSlis
Rfrences
Bura (1998)
EPSprotines
EPSpolysaccharides
ADN
(mg.gMVS-1)
(mg.gMVS-1)
(mg.gMVS-1)
100
85,0
28,2
0,52
3,0
500
98,8
58,3
0,94
1,7
106,0
50,0
6,50
2,1
DCO/P
EPSPN/PS
PN : Protines PS : Polysaccharides
Au final, il apparat que la nature et la composition de leffluent trait agissent sur la quantit
des polymres scrts. Le type deffluent trait dtermine galement le type de flore
microbienne prsent au sein des boues. Par suite, le type dEPS produit est diffrent. Ainsi,
26
des bactries Gram (+) ou Gram (-) du fait dune structure membranaire diffrente et donc
dun mtabolisme diffrent nauront pas les mmes mcanismes de production dEPS et les
mmes exopolymres scrts.
Les bactries Gram (+) ont une paroi bactrienne paisse et homogne (10 80 nm)
compose essentiellement de peptidoglycanes. Leurs parois sont galement riches en
osamines (ose dont une des fonctions hydroxyles est substitue par une fonction amine) mais
pauvres en lipides. A linverse, la paroi bactrienne des Gram (-) est plus fine et plus
complexe, riche en lipides et contient moins dosamines ; la couche de peptidoglycanes ne
dpasse pas 5 nm et est entoure dune membrane externe. Les nutriments ou les produits
microbiens doivent donc traverser la couche de peptidoglycanes (par diffusion ou sur des
rcepteurs) et franchir la membrane plasmique chez les bactries Gram (+) ; la membrane
externe, le peptidoglycane et la membrane plasmique chez les bactries Gram (-).
Ainsi, la taille des polymres scrts par les deux types de bactries mais galement leur
nature seront diffrentes parce que les mcanismes de transports travers les membranes
cellulaires et les membranes elles-mmes sont diffrentes. Par ailleurs, la prsence dune
quantit leve de polysaccharides au sein dun floc peut tre lie la prsence de bactries
Gram (+) car leur paroi cellulaire en est riche (Sponza 2003).
Toutefois, le type de bactries prsentes au sein des bioracteurs membranes reste peu
tudi. Witzig et al. (2002) estiment que 10% des bactries de la boue dun BAMI (Age
de boue infini) sont Gram (+). Cicek et al. (2001) observent galement une minorit de
bactries Gram (+) dans un BAME, indpendamment de lge des boues compris entre 2
et 30 jours.
La concentration en oxygne
Shin et al. (2001) comparent les performances de 3 racteurs de type SBR. Ils
montrent que pour une concentration leve en oxygne dissous (concentration non spcifie)
la production dEPSlis sous forme de polysaccharides augmente et celle des protines reste
inchange avec le temps alors qu faible concentration en oxygne les productions en
protines et polysaccharides restent inchanges.
27
c.2 Les paramtres opratoires lge de boues
Leffet de lge des boues sur la quantit dEPS prsents au sein des flocs est
controvers. La disparit des rsultats provient de diffrences :
- dans les techniques dextraction employes (suivant les mthodes dextraction
utilises, la quantit extraite nest pas reprsentative de celle rellement prsente au
sein des flocs),
- dans les mthodes de dosage (par exemple, dosage des protines avec ou sans
correction des interfrences dues aux substances humiques),
- dans les conditions de culture,
- dans la composition de lalimentation ou la gamme dge de boues tudie, etc...
Lanalyse du tableau I.1 montre deux types dinfluence de lge des boues sur la composition
en EPSlis :
- pas dinfluence : Liao et al. (2001) ou Lee et al. (2003) nobservent aucune influence
de lge des boues lorsque celui-ci est compris respectivement entre 4 et 20 jours et
entre 20 et 60 jours,
- influence ngative : Gulas et al. (1979) obtiennent une baisse de la concentration en
EPSlis de 60 20 puis 15 mg.gMVS-1 lorsque respectivement lge de boues augmente
de 2 6 puis 16 jours. Chang et Lee (1998) constatent que, dans un SBR aliment en
effluent synthtique, la concentration en EPSlis passe de 268 244 puis
213 mgMVS.gMES-1 lorsque lge des boues augmente de 3 8 puis 33 jours. Dans un
BAMI traitant de leau synthtique, Cho et al. (2004) observent galement une baisse
de la concentration en EPSlis lorsque lge des boues augmente de 8 20 jours cest-dire lorsque la concentration en MES augmente. Cependant, au-del de 20 jours dge
de boues, la concentration en EPSlis reste pratiquement stable entre 20 et
40 mgCOT.gMVS-1. Ils observent galement qu faible ge de boues (8 jours), les carts
de concentration en EPSlis sont plus levs que pour un ge de boues suprieur.
En dfinitive, aucune relation claire nexiste entre la quantit totale dexopolymres
prsents au sein des flocs et lge de la boue. En revanche, lvolution des EPSlis pris
individuellement (polysaccharides, protines, substances humiques) en fonction de lge des
boues semble suivre une tendance plus marque. Ces rsultats bibliographiques seront
ultrieurement compars avec ceux obtenus au cours des expriences ralises durant ce
travail.
Lorsque lge des boues augmente, la quantit de protines au sein des flocs a tendance
augmenter. En effet, dans ce cas, les bactries librent des protines et de lADN
28
intracellulaires cause de la lyse cellulaire ou de la respiration endogne. Quel que soit lge
des boues, lvolution de la concentration en protines suit trs souvent celle de lADN (Liao
et al. 2001). La lyse cellulaire a lieu lors de laugmentation de lge des boues mais peut
galement intervenir lors dune carence en carbone par exemple. Ainsi, Lee et al. (2003)
constatent une augmentation de la quantit de protines extraites par une mthode thermique
(de 29,9 35,5 mgprotines.gMVS-1) lors de laugmentation de lge des boues de 20 60 jours,
lactivit bactrienne tant alors rduite (Tableau I.4).
Tableau I.4 :Effet de lge des boues sur lactivit et la quantit dEPSlis (daprs Lee et al. 2003)
Age des boues (j)

20
40
60
14,6
12,4
11,7
Protines (mg.gMVS )
29,9
35,7
35,5
Polysaccharides (mg.gMVS-1)
32,7
34
29
Protines/Polysaccharides
0,9
1,0
1,2
SOUR* (mgO2.gMVS-1.h-1)
-1
* Specific oxygen uptake rate-vitesse de consommation de loxygne
En ce qui concerne les polysaccharides, en rgle gnrale, une augmentation de lge des
boues se traduit par une diminution de leur concentration (Brookes et al. 2003 ; Liao et
al. 2001). En effet, fort ge de boues, la relativement faible quantit de substrat carbon est
prfrentiellement utilise pour la synthse cellulaire et lnergie de maintenance. La petite
quantit de substrat carbon restante ne permet quune production de polysaccharides minime
(Durmaz et Sanin 2001 ; Liu et Fang 2003 ; Liao et al. 2001). La production de
polysaccharides est dailleurs trs dpendante de lactivit respiratoire des bactries
htrotrophes (Shufang, 2004). Une activit leve entrane une production de
polysaccharides leve.
A faible ge des boues, les micro-organismes utilisent lexcs de substrat pour la synthse des
cellules et aussi pour la production de polysaccharides extracellulaires.
29
Dans ce cas la quantit de polysaccharides est accrue (Tableau I .5).

Tableau I.5: Effet de l'ge des boues sur la quantit d'EPSlis (d'aprs Liao et al. 2001)
Age des boues (j)
12
16
20
Protines (mg.gMVS-1)
9,7
9,7
15,5
12,8
13,1
Polysaccharides (mg.gMVS-1)
7,5
4,1
3,1
3,4
3,1
Protines/Polysaccharides
1,3
2,4
5,0
4,2
4,2
Liao et al. (2001) rappellent galement quun changement dge de boues provoque un
changement de composition de la communaut microbienne et par suite cre une
modification de la composition des polymres produits.
c.3 Perturbations et dysfonctionnements des racteurs
Effet des toxiques

La prsence occasionnelle dagents toxiques provoque souvent la lyse des cellules et
donc la libration de polymres. Ainsi, Sponza (2003) explique que la plus grande quantit
dADN trouv dans les flocs de boues venant de lindustrie du cuir, des colorants et de la
chimie drive de la plus grande quantit de substances toxiques dans ces boues. En effet, les
substances toxiques entranent une perte de viabilit des micro-organismes puis leur lyse
cellulaire. La lyse saccompagne alors de la dgradation de lADN lintrieur des cellules.
Witzig et al. (2002) pensent galement quune plus grande scrtion de polysaccharides
pourrait avoir lieu ds que les micro-organismes sont en prsence de substances inertes ou
toxiques.
Moussage des boues
Bura et al. (1998) constatent une augmentation de la concentration en polysaccharides
et protines chaque fois quinterviennent des problmes de moussage et de foisonnement
dune boue active. Ainsi, la teneur en polysaccharides passe de 6-8 mg.gMVS-1 lors du
fonctionnement normal des installations 11-19 mg.gMVS-1 lors des dysfonctionnements.
Quant la concentration en protines, elle passe de 55-66 51-88 mg.gMVS-1.
30
d. Influence de la composition en EPSlis sur les proprits des

flocs
Les paragraphes prcdents ont permis de souligner linfluence du mode de conduite

et de la composition de leffluent sur la production dEPS. Par suite, un changement pourrait
avoir lieu dans la structuration des flocs et leurs proprits telles que la charge de surface, la
taille, et la compacit. Mikkelsen et Keiding (2002) laide dune analyse multi-variable
rsument linfluence que peuvent avoir les EPSlis, concentration comprise entre 0 et
260 mg.gMES-1, sur les caractristiques des flocs (Figure I.4) :
Composition
Caractristiques
- 0,24
+ 0,23
EPST
+ 0,50
+ 0,82
+ 0,85
MVS/MES
k SC
+0,76
+0,01
+ 0,71
CS Boue
+ 0,42
+ 0,54
Sp
Dshydratabilit
DD
+ 0,61
+ 0,95
RSF
+ 0,64
CS EPS
- 0,41
TMSG
+ 0,61
Zta
EPSP
EPSH
EPS
PS
Figure I.4: Interactions entre divers paramtres de caractrisation d'une boue (Mikkelsen et Keiding 2002)
Les chiffres expriment le coefficient de corrlation liant deux paramtres
(MVS : matires volatiles en suspension ; MES : matires en suspension ; EPST : EPS totaux ; EPSP : EPS
protines ; EPSH : EPS substances humiques ; EPSPS : EPS polysaccharides ; d : diamtre des flocs ; Zta :
potentiel zta ; CSEPS : Charge de surface des EPS ; kSC : sensibilit au cisaillement ; DD : degr de dispersion ;
TMSG : teneur en matire sche du gteau ; RSF : rsistance spcifique la filtration ; Sp : surface des
particules ; CSboue : charge de surface des flocs)
Les rsultats indiquent que la quantit dEPS dans les flocs est le paramtre le plus important
dans la structuration du floc. Avec une augmentation de la teneur en EPS, les boues ont une
plus faible sensibilit au cisaillement ainsi quun degr de dispersion (concentration massique
des solides disperss/quantit de solide totale) moindre. De plus, la filtrabilit des boues est
amliore (faible rsistance la filtration). Cependant la limite de cette approche est de ne pas
diffrencier leffet des protines de celui des polysaccharides. De plus, une augmentation de
la concentration en EPSlis augmente la charge ngative des flocs. Au final, il apparat que les
exopolymres influent fortement sur les caractristiques des flocs. Il semble donc judicieux de
31
les analyser en vue de caractriser les flocs dans le bioracteur membranes et de voir si le
type de racteur influence galement les caractristiques des flocs.
Les paragraphes qui suivent dtaillent ltat des connaissances sur linfluence des EPS sur la
floculation/dcantation, les proprits de surface et enfin sur la taille des flocs.
d.1 La floculation/dcantation
La bonne floculation des boues est primordiale dans les procds conventionnels dpuration
biologique (bassin arobie + dcanteur) car elle dtermine lefficacit de la dcantation. La
cohsion du floc est donc un paramtre clef de lpuration biologique par boues actives.
La dcantabilit dune boue est gnralement dtermine par des mesures dindice de boue
(IB), de masse volumique ou de dimension fractale des flocs :
-lindice de boue (IB) reprsente le volume occup par un gramme de boue aprs
trente minutes de dcantation dans une prouvette dun litre. Une faible valeur de
lindice de boue indique une capacit leve la dcantation et la compaction.
-la dtermination de la masse volumique dun floc demeure dlicate du fait de leur
fragilit. Dammel et Schroeder (1991) obtiennent des valeurs de densit comprises
entre 1,02 et 1,06 pour divers chantillons de boues actives.
-Li et Ganczarczyk (1989) tudient la structure fractale des flocs (capacit dun objet
remplir lespace). Plus la dimension fractale est faible plus lagrgat est poreux. Ils
estiment que la dimension fractale des flocs gnrs dans les procds de traitement
des eaux uses est comprise entre 1,4 et 2,8.
Dans ce paragraphe, la dcantabilit de la boue sera surtout relie son indice de boue, qui
demeure un paramtre trs utilis dans ltude de la sdimentation.
Tout dabord, il est maintenant vident que la propension dcanter dune boue nest pas
seulement fonction de la taille des flocs (Tableau I.6).
Tableau I.6 : Dcantabilit et diamtre des flocs de boues venant de diffrents procds boues actives
(Sponza 2003)
Industries
IB (mL.g-1)
Diamtre des flocs (m)
Papetire
13819
365
Textile
14018
1405
Ptrochimie
13231
12511
Municipale
1009
765
Distillerie
874
895
32
Ainsi, une boue venant de lindustrie ptrochimique peut moins bien dcanter quune boue de
distillerie alors que la taille des flocs est respectivement de 125 m et 89 m. Les proprits
de surface des flocs et donc la concentration en EPSlis semblent mieux corrles avec la
capacit des boues dcanter. Plusieurs tudes aboutissent des conclusions diffrentes sur le
lien existant entre la quantit dEPSlis et la dcantation dune boue. Les units utilises pour
exprimer les concentrations en EPS, les mthodes dextraction et les gammes de mesure de
lindice de Mohlman (IB) sont souvent diffrentes et permettent difficilement une
comparaison entre les tudes. La figure I.5 prsente quelques rsultats de la littrature.
-1
IB (mL.gMES )
600
500
400
300
200
100
0
0
20
40
60
80
EPSlis (mg.gMVS-1 ou mg.gMES-1)
100
120
Kiff (1978) - EPS en mg.gMES-1
Eriksson et Alm (1991) - EPS en mg.gMES -1
Urbain (1992) - EPS en mg.gMVS -1
Bura et al. (1998) - EPS en mg.gMVS -1
Yun et al. (2000) - EPS en mg.gMVS -1
Liao et al. (2001) - EPS en mg.gMVS -1
Hoa et al. (2003) - EPS en mg.gMES -1

Figure I.5: Relation liant lindice de boue et les EPS des flocs
Dans une gamme de concentration en EPS lis aux flocs comprise entre 15 et
120 mgEPS.gMVS-1, une meilleure dcantation est souvent observe ds lors que la quantit
dEPSlis totale diminue (Urbain 1992, Hoa et al. 2003).
Cependant, en dessous de 15 mgEPS.gMES-1, la baisse de la concentration en EPSlis ninflue
plus sur lindice de boue, voire dans certain cas laugmente (Hoa et al. 2003 ; Yun et al.
2000). Cela peut tre expliqu par le fait que, pour de faibles concentrations en EPSlis,
dautres mcanismes de structuration du floc interviennent et sont prpondrants pour leur
dcantation.
De plus, lindice de boue semble plus li la quantit des EPS pris individuellement qu leur
quantit totale. Ainsi, les teneurs en protines et en ADN dun floc sont corrles
respectivement positivement et ngativement avec sa dcantabilit (Sponza 2003 ; Bura et al.
1998). Les protines tant principalement hydrophobes, cela peut expliquer lamlioration de
la dcantation lorsquelles sont prsentes en grande quantit.
33
Urbain et al. (1993) trouvent que lindice de boue, compris entre 69 et 315 mL.gMES-1,
augmente lorsque la concentration en polysaccharides augmente. Les polysaccharides tant
principalement hydrophiles, une augmentation de leur concentration peut provoquer une
baisse de la dcantabilit des flocs.
Enfin, en comparant les boues issues dun procd boues actives classique et dun BAM, il
apparat que ces dernires dcantent en gnral plus difficilement (Cicek et al. 1999). Il sagit
probablement dun problme de dispersion.
d.2 Proprits de surface des flocs Charge de surface
et hydrophobicit
En rgle gnrale, la charge de surface et lhydrophobicit dun floc voluent en sens

inverse. Ainsi, une baisse des charges de surface entrane une augmentation de
lhydrophobicit du floc (Tableau I.7).
Tableau I.7: Charge de surface et hydrophobicit de boues actives
Rfrences
Sponza (2003)
Rfrences
Bura (1998)
Alimentation
Charge de surface
(meq.gMVS-1)
Hydrophobicit
(angle de contact* )
Papeterie
-0,17 -0,20
35 39
Textile
-0,21 -0,26
35 43
Ptrochimie
-0,09 -0,24
37 44
Vin
-0,40 -0,50
9 10
Municipale
-0,57 -0,64
68
Alimentation
Charge de surface
(meq.gMES-1)
Hydrophobicit
relative**
(%)
Ptrole
- 0,25
62,6
pomme de terre
- 0,37
57,4
Volaille
- 0,54
37,3
Municipale
- 0,34
32,0
mesure de langle form entre une goutte deau et le floc : angle de contact lev = hydrophobicit leve ;
test dadhsion au hydrocarbure :les celulles sont spares dans un systme biphasique eau-hydrocarbure. La
mesure compare la quantit de cellule dans la phase organique la quantit totale de cellules.
**
34
Charge de surface
Les flocs et les EPS sont, en rgle gnrale, chargs ngativement. En principe, la
diminution de la charge de surface du floc facilite sa floculation et permet une meilleure
dcantation (Urbain et al. 1993). Cependant, des auteurs comme McKinney (1956) trouvent
que la rduction de la charge ngative de la surface des flocs ne provoque pas obligatoirement
une amlioration de la formation du floc. Cela montre quen plus de la charge de surface,
dautres paramtres jouent sur la floculation des flocs biologiques.
Certains facteurs comme lge ou lorigine de la boue peuvent influencer la charge de surface
des flocs :
- Lee et al. (2003) constatent que la charge de surface dun floc augmente lorsque
lge de boue diminue. Cependant, la charge de surface des collodes et des solubles
(centrifugation 366 rad.s-1 pendant 5 minutes), mesure par le potentiel zta reste
constante environ 10 mV quelle que soit la valeur du temps de sjour des boues
(entre 20 et 60 jours).
- Sponza (2003) montre que lorigine de la boue et donc le type de substrat jouent un
rle important sur les proprits physico-chimiques de la surface des flocs. Les flocs
qui se forment sur des eaux uses forte proportion en substances organiques
biodgradables (eau use municipale) ont des charges de surface plus leves.
Hydrophobicit et angle de contact
Le floc bactrien et les EPS possdent la fois des zones hydrophobes et hydrophiles.
En rgle gnrale, laugmentation de lhydrophobicit dun floc amliore la floculation (Liao
et al. 2001) et la dcantation (Urbain et al. 1993). Par consquent, les carbohydrates
hydrophiles des EPSlis ont un effet ngatif sur la dcantation (Liao et al. 2001) alors que la
nature plutt hydrophobe des protines en fait les principales responsables de
lhydrophobicit du floc (Lee et al. 2003 ; Sponza 2003 ; Jorand et al. 1998). Elle permet
galement damliorer la dcantation (Shufang 2004).
Puisque lhydrophobicit du floc est en partie lie la concentration en exopolymres cela
signifie que tous les paramtres identifis comme agissant sur la concentration en
exopolymres agissent galement sur lhydrophobicit. Il est possible de citer :
- la concentration en oxygne dissous : daprs Palmgren et al. (1998) une limitation
en oxygne entrane une baisse de lhydrophobicit de 4 espces de bactries des
boues actives.
35
- le moussage des boues: Chang et Lee (1998) observent une hydrophobicit accrue
pour des boues moussantes. Ils rappellent que Goddard et al. (1987) montrent quune
boue moussante contient une plus grande quantit de lipides et de protines.
- le mtabolisme bactrien : des cellules en phase de croissance stationnaire sont
souvent plus hydrophobes que celles en phase exponentielle (Allison et al. 1990,
Hazen et al. 1986)
- le type de substrat : pour Jorand et al (1994) laddition de substrat facilement
assimilable tel que le glucose, ne change pas lhydrophobicit des bactries mais
augmente la production dEPSlis et lindice de boue. Sponza (2003) trouve dailleurs
que les flocs les plus hydrophiles et les plus ngativement chargs sont dans les boues
municipales et les boues alimentes par un effluent issu de lindustrie du vin. Ces
boues sont galement celles o la concentration en DCO facilement biodgradable est
la plus leve.
- le type de procd : une croissance bactrienne au sein dun biofilm ou en suspension
induit une hydrophobicit diffrente de la boue. Ainsi, Martin-Cereceda et al. (2001)
trouvent que lhydrophobicit des EPS dun biofilm prsent dans un racteur traitant
de leau use municipale est 2 fois suprieure celle des EPS prsents dans la boue
active. La quantit de protines exocellulaires du biofilm est trois fois plus importante
que dans la boue active. Par ailleurs, la quantit de substances humiques et de
polysaccharides extrait du biofilm est deux fois plus grande que dans la boue active.
- une carence en substrat : en rgle gnrale, une boue est considre exempte de
limitation nutritionnelle lorsque le ratio C/N/P est gal 100/5/1. Une carence en
carbone
ou
phosphore
peut
engendrer
des
diffrences
dans
les
valeurs
dhydrophobicit ou de charge de surface des flocs (Tableau I.8)

Tableau I.8: Effet d'une carence en azote, carbone ou phosphore sur lhydrophobicit et la charge de
surface des flocs
Rfrence
DCO/NH4
Charge de surface
(meq.gMVS-1)
Hydrophobicit relative
(%)
Bura et al.
(1998)
20
- 0,30
35
100
- 0,15
47
3,33
93
80
10
75
20
70
Shufang
(2004)
36
Rfrence
Bura et al.
(1998)
DCO/P
Charge de surface
(meq.gMVS-1)
Hydrophobicit relative
(%)
100
- 0,30
35
500
-0,13
27
Absence de P
-0,08
n.d
Ainsi, une augmentation du rapport DCO/NH4 de lalimentation (pour DCO/NH4 > 20

carence en azote) entrane une diminution de la charge de surface des flocs et une
augmentation de langle de contact.
Une carence accrue en carbone organique (DCO/NH4 < 20) provoque une
augmentation de lhydrophobicit des flocs car alors la production de polysaccharides
(hydrophiles) est souvent diminue (PN/PS augmente).
Une augmentation de la carence en phosphore (DCO/P>100) provoque une diminution
de la charge de surface et de lhydrophobicit du floc.
Bura et al. (1998) remarquent galement une corrlation forte entre la teneur en eau
lie et lhydrophobicit des flocs ; une augmentation de la teneur en eau lie (de 16
52 g.gMS-1) correspond une baisse de la valeur de langle de contact (de 47 27%).
d.3 Granulomtrie
La plupart des tudes menes sur la distribution de la taille des flocs de boues actives
saccordent pour les dcrire comme des entits dont la taille varie entre 1 500 m. Les flocs
constituent un agrgat dynamique en perptuelle modification de structure et de morphologie.
Les polysaccharides semblent tre les principaux polymres responsables de la structuration
et de la stabilit du floc. Shufang (2004) montre que des granules (1 mm) contiennent au
moins trois fois plus de polysaccharides que de protines.
Des facteurs comme la facilit daccs des nutriments, le type de substrat, les contraintes
hydrodynamiques et lge des boues influencent la rpartition granulomtrique.
Substrat et accepteurs dlectrons
Laccs aux substrats et aux ractifs, par exemple, comme les accepteurs dlectrons,
prend une part importante dans la structuration et la taille des flocs. Ainsi, une carence en
oxygne au sein des boues provoque gnralement une dfloculation (Srcu et Cetin 1989,
Nielsen et al. 1996, Wiln et Balmr 1998, Wiln et al. 2000).
37
Plusieurs explications sont avances :

-
augmentation de la croissance des bactries anarobies ou facultatives avec
suppression de la croissance des bactries arobies strictes lintrieur du floc

(Eikelboom et Van Buijsen, 1983),
-
rduction des ions Fe3+ par les bactries (Caccavo et al. 1996),
inhibition de la production dEPS (Starkey et Karr 1984),
hydrolyse des EPS (Nielsen et al. 1996),
Cette carence en oxygne saccompagne gnralement dune augmentation du nombre de

bactries filamenteuses et dune formation de flocs poreux. Par consquent, les boues
dcantent moins vite (Wiln et Balmr, 1999). Cette carence peut tre momentane
(squenage de laration) ou prolonge dans le temps. Lors dun squenage de laration
par exemple, 2H ar/4H non-ar (qui permet de maintenir une concentration en oxygne
dissous comprise entre 0 et 4 mg.L-1) Wiln et Balmr (1999) montrent que les flocs de boues
actives (Cm=0,97 gDCO.gMES-1.j-1) prsentent une taille moyenne plus leve la fin des
phases daration (d50 ar = 44 m contre d50 non-ar = 31 m pour une rpartition en volume).
Par comparaison avec un racteur fonctionnant dans les mmes conditions opratoires mais
avec une aration continue (oxygne dissous = 4 mg.L-1 ), la distribution de taille des
particules nvolue pas durant les 8 heures dexpriences et est centre sur 53 m (% en
volume). Les cycles de concentration en oxygne dans les boues provoquent donc une baisse
du diamtre moyen des particules.
Wiln et Balmr (1999), lors de la comparaison de deux boues dont les concentrations en
oxygne dissous sont respectivement de 2 et 5 mg.L-1 pour un mme ge de boues de 5 jours
observent de plus gros flocs et une turbidit du surnageant plus faible pour la boue ayant la
teneur en oxygne maximale. Ceci pourrait montrer limportance de la diffusion des ractifs
(O2, NOx, etc) dans la structuration du floc.
La granulomtrie peut galement changer avec le mtabolisme bactrien. Ainsi, linhibition
de lactivit arobie (conditions anarobies, baisse de la temprature) ou la stimulation de
lactivit anarobie (ajout dions sulfures, amlioration de la rduction du fer) favorisent le
dtachement de bactries et autres constituants des flocs.
Les contraintes hydrodynamiques
Les conditions hydrodynamiques qui rgnent au sein des procds agissent sur la taille
des flocs. La taille moyenne des flocs rsulte dun terme de croissance, dun terme de dcs
(lyse, hydrolyse et solubilisation), dun terme dagrgation et dun terme de rupture. Ces deux
derniers termes sont particulirement influencs par lhydrodynamique. On peut supposer que
38
les proprits de cohsion dpendent du mode de formation du floc et que des diffrences
majeures apparatront si la taille du floc rsulte majoritairement de processus de floculation
entre micro-flocs (aprs un choc hydrodynamique par exemple) ou dune croissance de
colonie bactrienne (ex : granulation). Ce dernier mcanisme sera favoris par un fort
potentiel diffusionnel (fortes teneurs en accepteurs dlectrons par exemple).
En ce qui concerne la taille des flocs dans les bioracteurs membranes, peu dtudes sont
disponibles. Zhang et al. (1997) ont obtenu une taille des flocs suprieure dans un BAM
immerg par rapport un BAM avec recirculation en boucle externe du fait des forces de
cisaillement plus leves dans la boucle externe (pompe, passage dans les circuits). Ainsi, la
rpartition granulomtrique des flocs est en partie lie aux conditions opratoires appliques
au procd. Zhang et al. (1997) montrent que la taille des flocs nest pas forcment
dpendante des conditions hydrodynamiques rgnant au sein du bassin biologique.
Influence du temps de sjour des boues (TSB)
Il ny a pas de liens simples entre lge de la boue et la taille moyenne des flocs (Tableau I.9).
Tableau I.9 : Taille moyenne des flocs suivant l'ge des boues (Huang et al. 2001)
Age des boues (j)
20
40
Diamtre moyen en volume (m)
15
48
31
Lee et al. (2003) constatent une influence de lge des boues sur la taille des flocs dun BAMI
aliment par la mme eau use synthtique. Les racteurs fonctionnent dans les mmes
conditions opratoires daration (3,3.10-4 m3.s-1.m-2membrane soit 4,7.10-3 m3.s-1.m-3racteur) et de
temps de sjour hydraulique (7,8 h) mais diffrents ges de boues. Ces auteurs observent
que la taille moyenne des collodes diminue de 0,4580,026 m 0,4200,023 m puis
0,3490,014 m lorsque lge des boues diminue de 60 40 puis 20 jours. Ils attribuent
cette dstructuration, au cisaillement accru des flocs par laration lorsque la concentration en
MES diminue (cest--dire lorsque lge des boues diminue). De plus, une rpartition par
masse molculaire des composs du surnageant montre que, quel que soit lge des boues,
lallure bimodale de la distribution est identique (entre 3 et 100 kDa).
39
2.Les produits microbiens solubles (PMS)

a. Description des PMS : composition, origine
Le terme de PMS correspond tous les polymres ayant une origine microbienne et
exclut ds lors les produits intermdiaires issus dune dgradation incomplte de substrats
organiques complexes (Noguera et al. 1994). Au contraire, les EPSsolubles font rfrence tous
les polymres prsents au sein de la phase liquide quelle que soit leur origine. Les polymres
sont dits solubles partir du moment o ils sont prsents dans le surnageant de boue.
Les polymres solubles qui sont communment prsents dans la plupart des cellules (acides
nucliques, peptidoglycanes et phospholipides) sont dgradables par beaucoup de microorganismes, contrairement aux polymres spcifiques et peu nombreux tels que les
htropolysaccharides extracellulaires (Hejzlar et Chudoba 1986a,b).
Les PMS constituent la majorit de la matire organique des effluents de procds de
traitement biologique (Chudoba et al. 1986 ; Noguera et al. 1994). Leur composition et leur
concentration sont variables. Ils regroupent les acides humiques et fulviques, les
polysaccharides, les protines, les acides nucliques, etc Les polysaccharides proviennent
majoritairement de la paroi cellulaire et des couches extrieures des bactries. Les protines
correspondent des enzymes ou du matriel intracellulaire alors que les substances humiques,
considres dans ce cas comme des EPSsolubles, sont directement amenes par leffluent
dentre.
La quantit dexopolymres solubles est gnralement dtermine par des analyses globales
(COT, DCO). Jarusutthirak et al. (2002) en fractionnant la matire organique des effluents de
sortie dune station dpuration observent que les fractions hydrophobes (obtenue sur rsine
XAD-8) et transphiliques (obtenue sur rsine XAD-4) sont principalement composes de
substances humiques (acide humique et fulvique). La fraction transphilique est de taille plus
petite que la fraction hydrophobe.
40
Le tableau I.10 regroupe des rsultats de la littrature concernant les concentrations en

exopolymres de surnageants de boues issues de BAMI.
Tableau I.10: Concentration en EPS solubles de boues de BAMI
Rfrences
TSB TSH
(j)
(h)
MES
(g.L-1)
PN
PS
(mg.L-1)
EPStotaux
Ratio
PN/PS
Lee et al. (2001)
0,9
1,8
2,7
0,5
Brookes et al. (2003)(f)(g)
4,6-12,2
0-4,5(a)
0,54-9,8(a)
0-0,5
Shin et Kang (2003)(d)(c)
20
3,1-4,1
0,4
Shin et Kang(2003) (d)(c)
6,5
<0,6
Cho et al. (2004)
4,5
2,5
25-30(b)
Cho et al. (2004)
20
4,5
4,0
20-25(b)
Cho et al. (2004)
80
4,5
8,0
10-15(b)
Lesjean et al. (2004)
11
7,1-11,3
5-10
Lesjean et al. (2004)
15
11
9,4-13,9
2-5
Reid et al. (2004)(h)
35
26
18,8
6,57(a)
3,25(a)
2,0
Reid et al. (2004) (h)
29
26
17,9
1,32(a)
0,56(a)
2,4
Reid et al. (2004) (h)
30-50
20
15,1
5,2(a)
0,54(a)
9,6
(a)
en mg.gMES- 1 (b ) en mgDCO.L-1 - (c) sparation par filtration sur 0,45m (d) Dosage par la mthode de Lowry (e)
Dosage par la mthode de Lowry modifie (f) centrifugation 5 minutes 5000 rpm (g) dtermin par absorbance
directe (h) centrifugation 10 minutes 5000 rpm- PN :protines - PS :polysaccharides
Ce tableau montre que les concentrations en EPS solubles ainsi que leur proportion sont
diffrentes dune tude une autre. Cela peut tre expliqu par lutilisation de mthodes de
sparation du surnageant et des flocs diffrentes ou de techniques de dosage diffrentes. Il
sera donc difficile par la suite de comparer nos rsultats avec ceux de la littrature.
En ce qui concerne la masse molculaire des PMS, celle-ci varie suivant le procd
biologique et le substrat utiliss, ainsi quavec les conditions opratoires adoptes. La masse
molculaire des PMS trouvs dans les BAM schelonne gnralement de 0,1 plus de
100 kDa.
41
Le tableau I.11 regroupe quelques rsultats issus de la littrature.

Tableau I.11: Distribution des masses molculaires (obtenue par filtration) des PMS de boues de BAM
Rfrences
Masse molculaire
Huang et al. (2000) (a)(c)
>100 kDa :16% ; 30-100kDa :9% ; 3-30kDa :23% ;

<3kDa :52%
Lee et al. (2003) (b)(d)
> 100 kDa:31%; 30-100 kDa:8%; 3-30 kDa:32%; <3

kDa:29%
Shin et Kang (2003) (a)(d)
> 100 kDa:20%; 30-100 kDa:37%; 10-30 kDa:12%;

1-10kDa:18% ;<1 kDa:13%
(a)
mesures effectues par COT (b) mesures effectues par DCO (c) centrifugation 15 minutes 4000rpm (d) filtration
sur 0,45m
La distribution de taille des molcules solubles est en gnral bimodale quel que soit lge des
boues (Huang et al. 2000 ; Lee et al. 2003).
Les PMS prsents au sein du surnageant des boues sont gnralement constitus de composs
hautes masses molculaires par rapport aux alimentations des procds biologiques
(< 0,5 kDa) (Barker et Stuckey 1999). Toutefois, la distribution des masses molculaires varie
au moins de faon hebdomadaire, en fonction de la concentration en MES et de lge des
boues (Brookes et al. 2003). Ces proprits pourront tre importantes en terme de capacit de
rtention des membranes et donc de nature du fluide biologique dans le BAM. En effet, dans
un bioracteur membranes, la barrire membranaire sera susceptible de retenir les composs
solubles dautant plus facilement que leur masse molculaire est leve.
b. Mcanismes de production des PMS
Les concentrations en PMS rsultent de mcanismes de production et de dgradation,

troitement lis la biomasse active et aux EPSlis (Figure I.6).
42
BIOMASSE
ACTIVE
Rfractaire
Biodgradable
LYSE
EPS lis
MATIERE
INERTE
CROISSANCE
SUBSTRAT
HYDROLYSE
PMSL
PMSH
Biodgradable
Rfractaire
PMSC
Biodgradable
Rfractaire
Biodgradable
Rfractaire
Figure I.6: Reprsentation schmatique des interactions existant entre PMS, EPSlis et biomasse dune boue
biologique
Les PMS ont trois origines majeures : la croissance cellulaire, la lyse cellulaire, lhydrolyse
des exopolymres lis. Pour commencer, la consommation dune partie du substrat, donneur
dlectrons, permet la synthse de la biomasse active, des EPSlis et des produits microbiens
solubles issus de la croissance cellulaire (PMSC).
Comme pour toutes les catgories de produits microbiens solubles, une partie des PMSC sera
biodgradable tandis que lautre partie sera rfractaire. Papore (1998) estime 96% la
biodgradabilit des PMSC aprs 71 jours de fonctionnement dun racteur discontinu
aliment en glucose. Ainsi, les PMS peuvent tre dgrads biologiquement mme si cela
requiert souvent un long temps dacclimatation (Shin et Kang 2003). La synthse dEPSlis est
fixe par la croissance de la biomasse et seffectue proportionnellement lutilisation du
substrat (Laspidou et Rittman 2002). Laspidou et Rittman (2002) proposent un modle o les
EPSlis sont uniquement produits par la consommation du substrat. En dautres termes, les
auteurs excluent lide dune polymrisation des PMS en EPSlis. Par ailleurs, les EPSlis sont
dissous ou hydrolyss lentement par les enzymes libres par les bactries pour donner des
produits microbiens solubles (PMSH). Ainsi, si lhydrolyse des EPSlis est plus lente que la
lyse des cellules, une concentration leve en EPSlis est possible lorsque la concentration en
43
biomasse active est faible. Un lien existe donc entre concentration en EPSlis et PMSH. En
revanche, Reid et al. (2004) ne trouvent aucune relation entre la totalit des EPSlis et la
totalit des PMS.
Le dcs puis la lyse naturelle ou provoque de la biomasse entranent la formation de
cellules mortes rsiduelles et de produits microbiens solubles (PMSL). Les PMS associs
une croissance cellulaire intense (lors dun rapport S0/X0 >100) ou une lyse cellulaire
intense en phase de jene par exemple, ont gnralement une masse molculaire suprieure
10 kDa (Hejzlar et Chudoba 1986a,b). Au final, la fraction rfractaire des boues est compose
de PMS, dEPSlis, dune fraction inerte du substrat et de composs particulaires inertes
produits par la biomasse.
Cette description des interactions entre les composants des boues permet de discerner les
PMS lis la croissance ou lutilisation de substrat et ceux lis au dcs (lyse) ou la
dstructuration (solubilisation des EPS) de la biomasse. Ainsi, les mcanismes entranant la
production de PMS peuvent tre dfinis selon que les PMS appartiennent lune ou lautre
des catgories (Barker et Stuckey 1999) :
PMS lis la croissance :
- Lquilibre des concentrations : les micro-organismes scrtent des PMS pour
maintenir un gradient de concentration des deux cts de la membrane cellulaire. Un
stress environnemental des micro-organismes tel quun changement de temprature ou
un choc osmotique peut donc entraner une libration de PMS.
- La croissance et le mtabolisme microbien : au cours de la phase de croissance
cellulaire, les micro-organismes renouvellent certains composants de la paroi cellulaire
(peptidoglycane, acide techoque) et les protines cellulaires. Ces composants sont
donc dgrads puis excrts dans le milieu. Mukai et al. (2000) montrent que, suivant
ltat de la phase de croissance des micro-organismes, les caractristiques des PMS
diffrent (Tableau I.12).
Tableau I.12 : Composition du surnageant (filtration sur filtre 0,45 m) dune boue active
(Mukai et al. 2000)
Phase de
croissance
Protines(a)
Sucres
COT
(mg.L-1)
(mg.L-1)
(mg.L-1)
Logarithmique
109,1
76,2
238,2
1,43
Stationnaire
53,1
36,3
39,8
1,46
Dcs
42,5
35,9
32,6
1,18
(a)
Protine/sucre
dosage des protines sans prendre en compte les interfrences des substances humiques.
44
Ainsi, la phase logarithmique de croissance est la plus riche en PMS (protine, sucre)
et en COT soluble. La permation sur gel montre galement que la masse molculaire
des PMS dune boue active augmente lorsque la phase de croissance passe de
logarithmique stationnaire puis de dcs.
PMS lis la perte de viabilit de la biomasse :
- Carence ou jene : durant une priode de carence en substrat les micro-organismes
ont besoin dnergie de maintenance. Elle peut tre fournie par la respiration endogne
ou loxydation des constituants cellulaires endognes et des produits de stockage.
Durant ce phnomne, les micro-organismes excrtent des PMS qui peuvent leur
tour servir dnergie de maintenance lors de la respiration endogne ou du
mtabolisme autochtone.
- Mort et lyse cellulaire : la mort (perte de viabilit ou dactivit cellulaire) puis la lyse
cellulaire (dfragmentation des cellules mortes) et enfin lhydrolyse des particules
microbiennes et EPS mnent la formation de PMS.
c. Les paramtres influenant la production de PMS
Certaines perturbations environnementales ou conditions opratoires vont influencer la

quantit et la qualit des PMS scrts :
Les paramtres environnementaux
- La prsence dune source dnergie : une augmentation de la concentration en
substrat exogne peut engendrer, en quelques minutes, lapparition de PMS dans le
milieu de culture (Jeong 1995). La production de PMS augmente gnralement quand
la concentration en substrat de linfluent augmente. Cela correspond une croissance
cellulaire maximale.
- MES stabilise : une forte concentration en biomasse saccompagne parfois dune
forte production en PMS. La vitesse de production en PMS est alors proportionnelle
la concentration en biomasse (Rittman et al. 1987; Hao et Lao 1988). Laspidou et
Rittman (2002) proposent un modle reposant plutt sur une production de PMS
dpendant de la concentration en substrat.
- Prsence de toxiques : lajout de toxiques provoque une plus grande lyse cellulaire et
une libration plus importante de PMS. Boero et al. (1991) observent une
augmentation de la production de PMS lorsquils remplacent le glucose par le phnol
en tant que substrat. Jeong (1995) explique cette augmentation par un phnomne
dinhibition li au substrat.
45
Les paramtres opratoires lge des boues

- Existence dun optimum dge de boues ou de charge organique pour lesquels la
production de PMS est minimale. Pour les systmes arobies, cet optimum se situerait
entre 2 et 15 jours pour lge des boues et entre 0,3 et 1,2 gDCO.gMES-1.j-1 pour la charge
organique (Figure I.7) (Baskir et Hansford, 1980 ; Rittmann et al. 1987 ; Hao et Lao,
1988 ; Pribyl et al ; 1997).
6
SBR
CFSR
5
4
3
COD (mg.L-1)
COD (mg.L-1)
2
1
0
5
10
15
Age de la boue (j)
20
5
4
3
2
SBR
CFSR
1
0
1
2
3
Cm (kgDCO.kgMES-1.j-1)
Figure I.7: Effet de l'ge des boues et de la charge organique sur la concentration en carbone
organique dissous (daprs Pribyl et al. 1997)
Ainsi, Bisogni et Lawrence (1971) constatent une augmentation de la quantit de

polysaccharides lorsque lge des boues dpasse 9 jours ; Murthy et al. (1998)
constatent une augmentation des polysaccharides solubles (<3 kDa) et des protines
collodales (0,45 m 30 kDa) quand lge des boues est suprieur 10 jours. Souza
Melo (1984) observe une augmentation de la concentration en acides humiques avec
lge des boues dun procd boues actives. En fait, pour une forte charge
organique ou un ge de boues faible, la biomasse est incapable dliminer toutes les
substances organiques en solution alors que pour une charge organique faible, les
micro-organismes dgradent la matire organique mais librent des PMS (Baskir et
Hansford 1980 ; Pribyl et al. 1997). En effet, les produits de la lyse cellulaire (PMSL)
sont prdominants pour des temps de sjour des boues levs o la croissance
biologique est faible, alors que ceux associs la rplication des cellules (PMSC) vont
tre prdominants des faibles valeurs dge de boues o la croissance observe est
plus importante.
46
Chapitre I : Synthse bibliographique : Etude de la production de boues

Horan (1990) estime que le traitement des boues peut reprsenter 25 60% des cots
globaux dune station dpuration. Il est donc intressant de pouvoir minimiser la production
de boues dans les systmes biologiques. Ce paragraphe a donc pour objectif principal
danalyser les mcanismes de production de boues et de comparer la production de boues
dun procd conventionnel de traitement des eaux (BA) avec un bioracteur membranes
(Figure I.8). Beaucoup de travaux dcrivent les bioracteurs membranes comme des
procds permettant de rduire la production de boues. Cependant, les raisons de cette
rduction sont rarement expliques et dmontres ; les motifs possibles sont dailleurs
nombreux tant les mcanismes de rduction de la production de boues le sont galement.
Cest pourquoi, dans un premier temps nous nous attachons dcrire les mcanismes de la
production de boues afin ensuite didentifier les facteurs influenant cette production.
Description des mcanismes de production de boue

Mtabolisme cellulaire
Identification des facteurs influenant

la production de boues
valuation du potentiel de minimisation

de la production de boue par un BAM
Figure I.8: Dmarche adopte pour comprendre les mcanismes de production de boues.
47
1. Production de boues et mtabolisme cellulaire

Le profil classique de croissance dune culture pure comprend gnralement une phase
de latence, une phase exponentielle, une phase stationnaire et une phase de dclin. Le modle
de Monod explicite une relation liant la quantit de biomasse produite (X) et la quantit de
substrat utilis (S) (Equations I.1 et I.2) :
X = YH . S
(I.1)
Do :
YH =
dX
dS
(I.2)
Avec YH : taux de conversion intrinsque du substrat en biomasse (kgMVS.kgDCO-1)

Cependant, ce taux de conversion reste un taux de conversion limite ou maximal et ne
reprsente pas la production de boues dun systme (Yobs). En effet, pour calculer la
production spcifique de boues, il faut prendre en compte:
- laccumulation de matires minrales en suspension,
- laccumulation de matires organiques non biodgradables (rfractaires),
- la production nette des micro-organismes rsultant de leur croissance sur les substrats
biodgradables et de leur dcroissance cellulaire lors du mtabolisme endogne, des
processus de maintenance et de la croissance cryptique.
La figure I.9 schmatise les diffrents processus biologiques et physiques lis la production
de boues (ASM1, Henze et al. 1986).
48
CO 2
XH
MES
XS
XP
Croissance
XI
Lyse
Dcantation
XS
SS
Hydrolyse
XP
XI
SI
XH
Eau use
X P : DCO non biodgradable produite lors du processus de mort rgnration X H : Biomasse
S I : DCO soluble non biodgradable de leau use S S : DCO facilement biodgradable
X S : DCO hydrolysable
X I : DCO non biodgradable de leau use
Figure I.9 : Conversion de la matire organique dans les procds biologiques (Salhi 2003)
Les composs lentement biodgradables subissent une hydrolyse pour conduire des
substances facilement assimilables par les bactries. Les molcules facilement biodgradables
sont partiellement oxydes par les micro-organismes htrotrophes et utilises pour la
croissance cellulaire. Lautre partie sera utilise dans les ractions de maintenance cellulaire.
Enfin, lors du dcs et de la lyse cellulaire, la biomasse est partiellement oxyde et conduit
galement une production de composs inertes (essentiellement particulaires). Les matires
en suspension sont donc au final constitues de biomasse, de DCO hydrolysable et de DCO
non biodgradable.
Dans les paragraphes suivants, les processus dhydrolyse, de croissance et de dcroissance
cellulaire sont dtaills.
a. Lhydrolyse
Cette raction permet de transformer des molcules hautes masses molculaires

(collodes et composs particulaires) en molcules plus simples pouvant traverser la
membrane cellulaire et tre assimiles par les micro-organismes. Ces substrats sont dans un
premier temps adsorbs la surface du floc bactrien puis hydrolyss par des enzymes
extracellulaires et enfin assimils. Une boue biologique tant compose dune grande
proportion de micro-organismes, les substrats hydrolysables sont totalement adsorbs. Par
consquent, lhydrolyse est souvent ltape limitante par rapport ladsorption ou
lassimilation des composs lentement biodgradables.
49
La vitesse dhydrolyse est gnralement dcrite par lquation suivante :

XS
dXS
XH
= - kH
. XH
X
dt
S
KX +
XH
-1
Avec kH : constante dhydrolyse (j )
(I.3)
KX : constante de demi saturation (-)

XS : concentration en substrat hydrolysable (gDCO.L-1)
XH : concentration en biomasse (gMVS.L-1)
- Dans le cas o la concentration en substrat (XS) est nettement suprieure celle de la
biomasse (XH), XS/XH devient trs suprieur KX et lquation I.3 scrit alors :
dXS
= - kH . XH
dt
(I.4)
La vitesse dhydrolyse est maximale et indpendante de la concentration en substrat

(XS). Lhydrolyse est alors considre comme un processus limit par la surface
ractionnelle.
- Dans le cas des boues actives, la concentration en substrat hydrolysable est
gnralement trs infrieure celle de la biomasse. Un excs denzymes
extracellulaires est alors constat et lquation I.3 scrit :
dXS
= - K H . XS
dt
(I.5)
La vitesse dhydrolyse est alors indpendante de la concentration en biomasse.

b. La croissance cellulaire
Les composs facilement biodgradables (SS) sont directement assimils par les microorganismes. Loxydation du substrat (le catabolisme) permet le stockage dnergie sous forme
de molcules dadnosine triphosphate (ATP).
50
Lnergie libre sert ensuite aux ractions de synthse cellulaire (anabolisme) et celles de
maintenance (Figure I.10)
ATP
Substrat
Catabolisme
CO2+ H O
2
Biomasse
Anabolisme
ADP + P
Substrat
ENERGIE
Ractions de maintenance
Figure I.10: Couplage nergtique entre catabolisme et anabolisme extrait de Chudoba (1991)
Il est possible dintervenir sur le mtabolisme cellulaire afin dobtenir un dcouplage

nergtique en vue dune minimisation de la production de boues. Linhibition de la
croissance (prsence de toxique, forte concentration en biomasse, etc), laugmentation des
besoins nergtiques pour la maintenance (changement des conditions osmotiques par
exemple) ou des perturbations sur lquilibre ATPADP (passage en anarobiose par
exemple) peut avoir pour consquence la rduction de la production de boues.
Gnralement, les modles de cintiques de croissance cellulaire sont dordre 1 par rapport
la concentration en biomasse active et scrivent selon lquation I.6 :
SS
dX H
XH
=
max
SS + K S
dt
(I.6)
Avec KS : constante de demi saturation (g DCO.L-1)

max : taux de croissance maximal (j-1)
SS : concentration en substrat facilement biodgradable (gDCO.L-1)

XH : concentration de la biomasse (gMVS.L-1)
c. Le mtabolisme de dcroissance
Ce paragraphe regroupe trois concepts permettant dexpliquer et de dcrire la

diminution de production de boues : la respiration endogne, la croissance cryptique et le
mcanisme de maintenance. Ces trois concepts dcrivent des mcanismes qui diffrent
essentiellement par lorigine de leurs substrats. Le processus de maintenance est surtout
51
consommateur de substrat exogne alors que les deux autres mcanismes utilisent plutt le
substrat stock ou libr par les micro-organismes.
Quel que soit le mtabolisme de dcroissance, la vitesse de perte de concentration en
biomasse active est souvent assimile une cintique dordre un par rapport la
concentration en biomasse (Equation I.7) :
dX H
= - b . XH
dt
(I.7)
Avec b : constante de dcroissance cellulaire (j-1)

c.1 Le concept de maintenance
Lors du mtabolisme cellulaire, le substrat carbon (gnralement le substrat

initialement prsent dans linfluent) est en partie consomm et fournit lnergie (sous forme
dATP) ncessaire aux cellules lors du catabolisme et de lanabolisme. Le catabolisme
transforme la pollution carbone en nergie et mtabolites. Lnergie sert alors satisfaire les
fonctions de maintenance cellulaire et participe lanabolisme de nouvelles cellules partir
des mtabolites scrts. Les fonctions de maintenance comprennent le renouvellement du
matriel cellulaire, le travail osmotique pour maintenir les gradients de concentration de part
et dautre de la cellule et la mobilit de la cellule.
Pirt (1965) propose quune partie du substrat carbon soit consomm pour la maintenance
cellulaire et une autre utilise pour lanabolisme. Si tout le substrat tait consomm pour
lanabolisme alors la production de boues observe serait maximale et gale au rendement
rel de croissance YH. Pour un tat stable avec une concentration donne en biomasse, la
vitesse laquelle est consomm le substrat pour la maintenance, mS, est suppose constante ;
ainsi la production de boues observe sexprime suivant lquation I.8 :
1
Y
obs
m
1
+ s
Y
(I.8)
Avec :
Yobs
: rendement de production de boues (gMVS.gDCOlimine-1)
YH
: rendement maximum de croissance pour le mtabolisme htrotrophe (gMVS.gDCO-1)
mS
: vitesse spcifique de consommation du substrat pour la maintenance (gDCO.gMVS-1.h-1)
: vitesse spcifique de croissance (h-1)
52
A ltat stabilis, la vitesse spcifique de croissance peut galement tre exprime en fonction
de lge de la boue :
=
1
TSB
(I.9)
Avec :
TSB : ge de la boue (h)
: vitesse spcifique de croissance (h-1)
Ainsi, pour un ge de boue maximum ( petit) la production de boues observe est minimale.
Par ailleurs, si lapport dnergie quivaut aux besoins en maintenance (S0/X0 faible), la
croissance nette de la biomasse tendra vers zro.
Ainsi, Lobos et al. (2004) montrent que dans des conditions de carence en substrat
(S0/X0 = 0,3), les micro-organismes prsents au sein dun racteur discontinu aliment en
actate rsident dans un tat physiologique ne permettant pas la division cellulaire mais
autorisant la dgradation du substrat pour satisfaire leur exigence en nergie de maintenance.
Ceci correspond typiquement aux procds o rgnent une limitation par le substrat, comme
dans les BAM qui fonctionnent avec des temps de sjour levs. Strange et al. (1963)
soulignent galement les avantages oprer en limitation en substrat. Ils constatent un
renouvellement rapide des rserves endognes, ainsi quune rapide consommation dATP
lorsque la culture dAerobacter aerogenes est prive de substrat. Dans ce cas, le substrat est
prfrentiellement utilis comme nergie de maintenance plutt que pour la croissance
cellulaire ; la quantit dnergie restante sert alors la biosynthse. Par consquent, si tout le
substrat est employ pour la maintenance, la croissance cellulaire est nulle.
Avec cette mme ide de dcouplage nergtique, Chudoba (1991) montre que lintroduction
dune zone anarobie dans la boucle de recirculation dun systme boue active classique
permet de rduire la production de boues de 0,28-0,47 mgMES.mgDCOlimine-1
0,13-0,29 mgMES.mgDCOlimine-1. Dans ce cas, les micro-organismes gnrent de lATP lors de
loxydation du substrat en phase arobie. Lors du passage en zone anarobie, les microorganismes se trouvent en carence de substrat exogne et utilisent cette nergie pour la
maintenance cellulaire. De retour en zone arobie, les micro-organismes sont obligs de
reconstituer leurs rserves en ATP car la synthse cellulaire ne peut se faire sans un stock
minimal. La synthse cellulaire est alors moins importante et la production de boues moindre.
Cependant, annuler la croissance de la biomasse active ne garantit pas labsence de
production de boues. Comme dcrit en introduction, dans les concepts rcents dcrivant le
comportement des boues actives (les modles ASM1 et ASM3, bass sur les concepts de
53
mort rgnration ou de respiration endogne), la fraction organique particulaire inerte (Xi)

joue un rle important dans la production de boues.
La question reste pose, notamment fort ge de boues : quelle quantit de matire
particulaire organique provenant soit de leau use, soit du dcs bactrien, peut tre
considre non biodgradable et saccumule ainsi dans le systme biologique ?
c.2 La respiration endogne
Le mtabolisme endogne correspond loxydation des composants cellulaires par les

micro-organismes eux-mmes (Figure I.11). En labsence de substrat exogne, Dawes et
Ribbons (1964) montrent que le mtabolisme endogne est en partie li la conversion de
polymres de rserve intracellulaires pour assurer les besoins de maintenance.
XS
Hydrolyse
Stockage
XSto
SS
Croissance
XH
Respiration
Endogne
XP
Figure I.11: Schmatisation du concept de respiration endogne
Avec XS : substrat hydrolysable

SS : substrat facilement biodgradable
XSto : substrat stock
XH : biomasse
Xp : substrat non biodgradable
Une partie de la respiration endogne et de la minralisation des boues est aussi assure par la
prsence de prdateurs tels que les protozoaires.
c.3 Le concept de mort rgnration (croissance cryptique)
Ce concept correspond la mort cellulaire (perte dactivit et diminution du nombre

de cellules) et la consommation des rsidus cellulaires autochtones pour la formation de
biomasse. Le substrat correspond ici celui form dans le procd, il est donc diffrent de
celui prsent dans lERU. Dans ce cas le substrat est de nature extracellulaire (Figure I.12).
XS
Hydrolyse
Croissance
SS
XH
Mort
Figure I.12: Schmatisation du concept de mort-rgnration
54
XP
Pour un mme procd biologique, cette "constante" de dcs peut varier en fonction des
conditions daration (Nowak et al. 1999). La prsence de protozoaires peut galement
augmenter cette constante de dcs (Ghyoot et Verstraete 1999).
2. Paramtres influant sur la production de boues

La plupart des travaux rpertoris font tat dune rduction de la production de boues
lors de lutilisation dun BAM. Le fonctionnement des BAM un ge de boues lev entrane
une diminution de la production de boues. Cependant, une question importante subsiste : la
rduction de la production de boues est-elle uniquement lie laugmentation de lge des
boues ou y a-t-il dautres mcanismes ayant un rle significatif ?
Les mcanismes responsables de la rduction de production de boues ne sont pas forcment
les mmes selon le type de bioracteur membranes. Par exemple, dans les systmes
filtration tangentielle les contraintes de cisaillement leves modifient la structuration des
flocs, probablement leur composition et donc la production de boues. La nature des effluents
(urbain, synthtique, industriel) peut galement modifier considrablement les stchiomtries
de production de boues. La composition microbienne des boues intervient galement. Tous
ces aspects sont dvelopps dans cette partie.
a. Effet des paramtres opratoires lge des boues
Il est vident que laugmentation du temps de sjour des boues ou la rduction de la

charge massique dun procd provoque la rduction de la production de boues
(Tableau I.13) :
Tableau I.13 : Production de boues observe pour diffrents ges de boues (Cicek et al. 2001)
TSB (j)
Yobs (gMVS.gDCOlimine-1)
30
0,27
20
0,30
10
0,32
0,37
0,46
55
Les procds membranaires sont capables de fonctionner de forts ges de boues. Il est donc
frquent de voir des productions de boues infrieures dans les BAM par rapport aux procds
classiques (bassin biologique + dcanteur). Ainsi, Rosenberger et al. (2002) ou Pollice et al
(2004) ont tudi des systmes rtention totale de boues traitant des eaux uses
domestiques. Ils obtiennent des rendements de production de boues proches de 0 pour
Rosenberger et al. (2002) et 0,12 gMVS.gDCO-1limine pour Pollice et al. (2004). En comparaison,
un systme boues actives classique fonctionnant faible charge produit environ
0,15-0,3 gMVS.gDCO-1. (Ekama et Marais, 1984 ; Daigger et Buttz, 1992). Stephenson et al
(2000) aprs une tude bibliographique concluent que peu, voire aucune boue nest produite
par un BAM ds lors que la charge massique applique est infrieure 0,01 kgDCO.kgMES-1.j-1.
Lge des boues lev entrane une baisse importante de la fraction active de la boue et de
lactivit microbienne spcifique (Lee et al. 2003). Dans ces conditions de rtention extrme il
faut alors tenir compte de la biomasse inactive pour estimer la production de boues.
Toutefois, est-ce que la diffrence de production de boues entre les procds biologiques tient
seulement la diffrence dge des boues ? En effet, le fait dintroduire une sparation
membranaire au sein du milieu biologique pourrait-il modifier les cintiques de production de
boues ? Sur de faibles ges de boues, un bioracteur membranes et un procd
conventionnel boues actives aliments par le mme effluent synthtique semblent avoir des
productions de boues similaires (Figure I.13).
Yobs (gMVS.gDCO-1)
0,50
0,40
0,30
0,20
BA
0,10
BAMi
0
0
3
Age de boue (j)
Figure I.13: Comparaison entre BA et BAM de la production de boues (Ng et Hermanowicz 2004)
Peu de travaux comparent la production de boues engendre par des racteurs fonctionnant
dans les mmes conditions et aliments avec la mme eau use alors que cela est primordial,
en particulier forts ges de boues. La comparaison des travaux de la littrature montre que
lge de boues nest pas le seul paramtre influant sur la production de boues. Cicek et al.
(1999), par exemple, obtiennent une production de boues infrieure (0,22 kgMVS.kgDCO-1) dans
un BA dge des boues de 20 jours compar un BAME fonctionnant 30 jours dge des
56
boues (0,27 kgMVS.kgDCO-1). Le taux de dcroissance dans le BAM est donc plus faible que
dans le racteur boues actives alors quil fonctionne un ge de boues plus lev. Lge de
boues nest donc pas le seul paramtre influant sur la production de boues. Pour
comprendre les phnomnes impliqus dans la production de boues, il faut donc
galement claircir le rle respectif de la typologie de leffluent, de lcosystme
biologique et de la membrane.
b. Rle jou par les micro-organismes suprieurs
Parmi les micro-organismes suprieurs, les protozoaires sont des micro-organismes

unicellulaires eucaryotes. Toutes les formes de nutrition existent chez les protozoaires.
Toutefois, la majorit des espces est htrotrophe. Ils ingrent la matire organique ou
agissent comme prdateurs des bactries, des algues microscopiques ou dautres protozoaires.
Pour la plupart dentre eux, les bactries constituent la base de la ration alimentaire. Ainsi,
Luxmy et al. (2000) montrent que dans un BAM une augmentation du nombre de prdateurs
correspond une diminution du nombre de flocs de 10 m et une diminution de la
population bactrienne de 1 m. En dautres termes, les petits flocs (<10 m) contenant les
petites bactries (1m) sont les plus sujets la prdation. Les protozoaires participent donc
la clarification de leau et peuvent intervenir dans la production de boues.
Ghyoot et Verstraete (1999) obtiennent une production de boues de 20 30% moins
importante avec un racteur configur en BAM (racteur bi-tag) alors que celui-ci
fonctionne la mme charge massique et au mme ge de boues (TSB=24-25 jours et
Cm=0,23-0,24 gDCO.gMES-1.j-1), quun racteur boues actives bi-tag. Cette baisse de
production de boues est relie la prsence en quantit plus importante de protozoaires et de
mtazoaires au sein du milieu biologique du BAM ; les phnomnes de prdation, o les
bactries actives ou inertes sont utilises dans des ractions trophiques (comme source de
nourriture) sont alors augments. La lyse des cellules libre le matriel intracellulaire dans le
milieu biologique et fournit ainsi un substrat autochtone pour le mtabolisme bactrien : la
production de boues observe est alors rduite.
Ratsak et al. (1994) rapportent ainsi une baisse de production de boues de 12% 43% lors de
lemploi de Tetrahymena pyriformis cili (protozoaire) comme prdateur de Pseudomonas
fluorescens. Cicek et al. (1999) observent une plus grande quantit de cilies (protozoaires) et
de Nmatodes dans les boues venant dun racteur boues actives (ge de boues de 20 jours)
que dans un BAME (ge de boues de 30 jours). Au final, ils trouvent une production de boues
moindre avec le racteur boues actives et lexpliquent par la prsence en plus grand
nombre de bactries cilies.
57
c. Influence des caractristiques de leau traiter
Les caractristiques de leau traiter influencent les valeurs de production de boues. Ainsi,
Ekama et Marais (1984) mettent en vidence limportance de la teneur en matire organique
particulaire dans leau use sur le rendement de production de boues. Ils constatent, par
exemple, que le traitement moyenne charge dune eau use non-dcante entrane une
production de boues de 0,8 1,0 mgMES.mgDBO5-1 contre 0,6 0,8 mgMES.mgDBO5-1 pour une
eau use dcante.
Salhi (2003), lors de la simulation dun procd biologique rtention de biomasse par un
modle de mort/rgnration (ASM1), a tudi linfluence de la fraction inerte des ERU (fXi)
-1
Yobs (gDCOboue.gDCOlimine )
sur la production de boues (Figure I.14).

0,6
0,5
0,4
0,3
fXi = 20%
0,2
fXi = 10%
0,1
fXi = 0%
0
0
10
15
Age de boue (j)
20
25
30
Figure I.14 : Evolution du rendement de production des boues en fonction de lge de boues pour diffrentes
teneurs en matire organique inerte (Xi) dans leau traiter fXi = DCOinerteERU/DCOtotERU
Pour un ge de boues de 12 jours, une eau contenant 20% de composs inertes (Xi) conduit
un Yobs de 0,43 gDCO.gDCOlimine-1 contre seulement 0,35 gDCO.gDCOlimine-1 si leau use ne
contient que 10% de Xi. Il en ressort que la production de boues dpend du type deffluent et
donc du substrat traiter. La fraction "inerte" a notamment une influence majeure.
Concernant les matires minrales particulaires, cette fraction de la boue est souvent estime
par bilan matire entre les matires minrales entrantes et celles purges avec les boues. Ceci
conduit thoriquement une augmentation de la fraction minrale des MES avec lge des
boues. Toutefois, Pollice et al. (2004) constatent que le rapport MMentre / MMboue (MM tant
les matires minrales en suspension) reste gal 44% sur toute la dure de fonctionnement
dun BAM aliment en eau use municipale prdcante. Ils concluent que la fraction de
composs minraux inertes entrant dans le racteur ne saccumule pas dans les boues et est
probablement solubilise en produisant des composs ayant une taille molculaire leur
58
permettant de passer travers la membrane. Rosenberger et al. (2002) constatent galement

un ratio MVS/MES constant et gal 70% durant tout le fonctionnement dun BAM.
Afin de solubiliser les matires particulaires prsentes dans les boues, plusieurs auteurs ont
utilis une dsintgration physique ou chimique de la matire. La solubilisation de la matire
organique est associe soit une lyse cellulaire soit une dstabilisation de la matire
particulaire difficilement hydrolysable. Ainsi, des mthodes thermiques (hydrolyse),
mcaniques (ultrasons, homognisateur haute pression), chimiques et thermochimiques
(hydrolyse avec de lacide sulfurique ou de la soude, oxydation) ou biologiques (hydrolyse
enzymatique) ont dmontr leur efficacit en matire de rduction de la production de boues
(Salhi 2003). Cependant, ces mthodes engendrent parfois un cot lev, une chute des
performances dpuration et surtout la formation de sous-produits.
d. Rle de la membrane
La prsence de la membrane permet aux BAM de fonctionner avec des ges de boues
plus levs que dans les procds classiques dpuration. La production de boues est donc
rduite. On peut galement se demander si la membrane permet de retenir des enzymes qui
sont lessives dans les procds conventionnels. En effet, Cicek et al. (1999) observent en
rgime stabilis une activit enzymatique des boues venant dun BAME suprieure celles
des boues dun racteur boues actives. Aucune activit enzymatique nest dtecte dans
leffluent du BAME contrairement leffluent du racteur boues actives. Une partie de
lactivit enzymatique est donc perdue dans la fraction non dcantable du racteur boues
actives contrairement au BAME. Ces auteurs montrent que les boues du BAME dgradent la
totalit des 96 substrats carbons, contre 84% avec une boue du racteur boues actives. Le
BAME est donc capable de dgrader une plus large varit de substrats carbons, ce qui peut
modifier les rendements de production de biomasse.
Signalons galement que la membrane permet laccumulation de substances organiques de
petite taille (collodalles et solubles) qui peuvent inhiber une partie de lactivit enzymatique
de la deshydrognase (activit dtermine par mesure de labsorbance lors de la rduction du
2,3,5 triphnyltetrazolium chloride (TTC)) (Huang et al. 2000).
59
Chapitre I : Synthse bibliographique : Caractrisation du colmatage
III. Caractrisation du colmatage

Ce paragraphe a pour objectif de faire le point sur ltat des connaissances sur les phnomnes
de colmatage dans les bioracteurs membranes (Figure I.15). Pour cela, nous dcrivons dans
un premier temps les mcanismes de colmatage. Quels pourraient tre les composs qui
colmatent, dans quels cas et comment le feraient-ils ? Dans un deuxime temps, nous nous
attachons dcrire linfluence de quelques paramtres sur le colmatage. Pour chaque
paramtre tudi, nous dcrivons sur quels mcanismes de colmatage celui-ci va agir. A
terme, ce chapitre doit aider au choix des paramtres analyser pour dcrire le colmatage, ce
qui fera lobjet du chapitre V de ce manuscrit, et fournir les lments essentiels pour le
caractriser.
Comprhension du phnomne de
colmatage
chelle macroscopique
(Dpt, membrane)
. Diffrentes formes de colmatage?

. Composs qui colmatent?
chelle microscopique
(tude des interactions
membrane-composs)
chelle du procd
(Productivit du systme)
. Influence des conditions de filtration?

. Influence des caractristiques du milieu biologique?
. Influence de ltat physiologique de la biomasse?
Description des paramtres

influenant le colmatage
Choix des paramtres biologiques

et opratoires tudier
CARACTERISATION DU COLMATAGE
Figure I.15: Dmarche suivie pour valuer les possibilits de minimiser le colmatage
60
1. Description des mcanismes de colmatage

Les bioracteurs membranes les plus tudis reposent sur lutilisation de membranes
dultrafiltration ou de microfiltration. La permation est assure en appliquant un gradient de
pression de part et dautre de la membrane. Il sagit donc dun procd de filtration dit
"baromtrique".
Pour ces procds, lors de la filtration dun solvant pur (eau) le flux de permat est reli la
pression transmembranaire (pression diffrentielle de part et dautre de la membrane) par la
loi de Darcy :
Fp =
Avec
PTM
.Rm
(I.10)
Fp : flux de permat (m3.m-2s-1)

PTM : pression transmembranaire (Pa)
: viscosit du permat la temprature de filtration (Pas)
Rm : rsistance hydraulique de la membrane (m-1)
Cependant, lutilisation dun milieu poreux comme les membranes est limite par le
phnomne de colmatage, en particulier pour le traitement des eaux uses. Le colmatage se
traduit par une diminution du flux de permat pour une filtration pression constante, ou une
augmentation du gradient de pression lors dune filtration flux de permat constant. Lors de
la filtration dun fluide biologique, le colmatage intervient souvent ds les premires minutes
de filtration (Ueda et Horan 2000) et modifie la slectivit de la membrane. Ueda et Horan
(2000) observent ainsi une augmentation rapide de llimination des virus (au bout de 10 min)
alors que leur taille est infrieure celle des pores de la membrane (0,2 m pour les virus
contre 0,4 m pour les pores de la membrane).
Le colmatage rsulte dinteractions physiques, chimiques et biologiques entre le milieu
biologique et le matriau membranaire et peut tre de nature inorganique (dpt de particules,
formation de struvite, de CaCO3, de prcipit de sels) et/ou organique (biofilm, EPS)
(Judd 2004 ; Ognier et al. 2002).
Le colmatage se traduit par un cart la linarit entre le flux de permat et la pression
transmembranaire. La loi de Darcy nest donc plus vrifie. Ce phnomne est visible aprs
les premires minutes de filtration (Figure I.16).
61
Flux de permat
(L.h-1.m-2)
Solvant pur
Fplim
Fluide rel
Fpcrit
Pression
transmembranaire (bar)
PTMcrit
Figure I.16: Flux de permat et pression transmembranaire pour un solvant pur et pour un fluide rel
Le comportement dun fluide rel lors dune ultrafiltration ou micro-filtration est donc
diffrent dun solvant pur. Ds quun fluide rel est filtr, deux valeurs de flux peuvent tre
dfinies :
-
un flux limite (Fplim) indpendant de la pression transmembranaire. Ce flux est le

flux maximal quil est possible datteindre.
un flux critique (Fpcrit) correspondant au flux au del duquel commence

apparatre le colmatage. Pour certains auteurs, le flux critique correspond au flux
partir duquel une baisse de la permabilit des membranes est observe, c'est-dire le flux en dessous duquel le rapport Flux/PTM reste constant (Field et al.
1995 ; Cho et Fane 2002a,b).
Il apparat que la notion de flux critique est diffrente suivant les auteurs. De plus, cette
notion est critiquable ds lors que la filtration concerne des suspensions biologiques ou une
filtration frontale car le colmatage est alors invitable et le flux critique tend vers 0. La
tendance actuelle est de considrer un flux soutenable, cest--dire le flux quil est possible de
maintenir au cours de la filtration, en jouant sur certains paramtres opratoires (Howell
2004).
Lors de lapparition du colmatage, une rsistance additionnelle celle de la membrane
apparat. Le flux de permat peut alors tre dcrit en utilisant le modle des rsistances en
srie (I.11) :
Fp =
PTM
. (R m + R c )
(I.11)
Avec Rc : rsistance de colmatage (m-1)

Il existe diffrentes formes de colmatage selon la nature de la matire colmatante et son mode
dinteraction avec la membrane (Figure I.17).
62
dpt de
particules
Membrane
blocage des pores
adsorption
Figure I.17: Description des diffrents mcanismes de colmatage
Le dpt en surface de la membrane: les matires en suspension au sein de la liqueur mixte

(particules, bactries, etc) sont soumises diffrentes forces entranant leur dpt sur la
membrane ou au contraire provoquant leur rtrotransport (force de gravit, force de Van der
Waals, force de convection, force de flottabilit, etc). Le dpt est constitu de macroparticules ou de micro-particules et peut piger en son sein des composs solubles adsorbs
ou non qui relient des particules entre elles par des interactions de type lectrostatique. Des
tudes rcentes ont montr que le dpt peut se structurer au cours de la filtration (croissance
dun biofilm, compression du dpt, etc)( Wiesner et al. 2004). Le dpt forme une
deuxime couche filtrante, dont la taille des pores peut tre infrieure celle de la membrane
et dont la rsistance sajoute celle de la membrane (Rm). Le dpt contribue donc la fois
limiter la permabilit de la membrane et augmenter la rtention de certains composs.
Ainsi, Huang et al. (2000) notent la prsence de substances solubles de masse molaire
infrieure 3 kDa, cest--dire prsentant un diamtre molculaire entre 0,001 et 0,01 m,
dans le surnageant des boues dun BAM quip de membranes de 0,1 m de diamtre des
pores.
En filtration frontale et en labsence de prvention contre le colmatage, la rsistance la
filtration due au dpt (exclusion strique ou adsorption sur gteau) est souvent suprieure
celle due ladsorption sur la membrane (Chang et al. 2001). Dans le cas de Chang et al.
(2001), cest--dire lors dune filtration frontale dune boue (ge de boues = 10 jours ;
F/M = 0,19 kgDCO.kgMES-1.j-1) sous 1,4 bars, dans une cellule de filtration agite (140 rpm), le
dpt engendre une rsistance denviron 30.1011 m-1 contre environ 0,4.1011 m-1 pour
ladsorption sur le matriau membranaire.
63
Par ailleurs, dans le cas spcifique de la filtration dune eau use, un dpt de type biologique
est observ. Sa force dadhsion et sa morphologie dpendent dun grand nombre de facteurs
lis la membrane (hydrophobicit, matriau, porosit, etc), aux micro-organismes
(espces, hydrophobicit, phase de croissance, etc) et aux conditions physico-chimiques et
hydrodynamiques (pH, temprature, pression, vitesse dcoulement, etc). Le dpt form
est issu de la colonisation par les micro-organismes de la surface de la membrane et provoque
la formation dun biofilm. Flemming et Schaule (1988) rappellent que mme lorsquune
cellule bactrienne est morte, elle peut adhrer au matriau membranaire. Dans ce cas, la
"colonisation" de la membrane par les bactries ne seffectue plus grce la croissance
bactrienne, mais par des mcanismes tels que ladsorption.
Les espces microbiennes du biofilm peuvent tre diffrentes de celles de la liqueur mixte
(Jinhua et al. 2004). Les micro-organismes du biofilm scrtent des exopolymres qui tendent
structurer le dpt et facilitent son adhsion au matriau membranaire. Ainsi, Jinhua et al.
(2004) mettent en vidence la prsence de lespce Xanthomonas au sein du biofilm, alors
quelle est absente de la solution filtre. On observe alors une production de gomme de
Xanthan, polysaccharide haute masse molculaire responsable de la cohsion, de la
structuration et de ladhsion du biofilm. Ces exopolymres sinsrent dans les interstices
entre les particules du dpt et augmentent sa rsistance la filtration (Hodgson et al. 1993).
Le blocage de pores : il sagit ici dune obstruction des pores de la membrane par des espces
particulaires ou collodales, de faon partielle ou totale. Il peut se produire lintrieur des
pores par des composs de taille infrieure ou voisine celle des pores et concerne
uniquement les membranes de microfiltration. Le blocage des pores dpend de la taille et de
la forme relative des particules et des pores ainsi que des conditions hydrodynamiques au
voisinage des pores et au sein du milieu biologique.
Ladsorption : elle est due aux interactions dordre physico-chimiques entre certaines espces
et la membrane. Elle correspond la formation dune ou plusieurs couches molculaires la
surface du matriau membranaire ou sur/dans le gteau de filtration. Il y a alors un
changement de densit et de taille des pores do une modification du transfert de solut au
travers du milieu filtrant. Ce type de colmatage est dit irrversible car il ne peut tre limin
de la membrane par des mthodes hydrauliques. Les interactions rencontres ici sont
gnralement fortes et ncessitent des lavages chimiques pour la rgnration des membranes.
64
Les paramtres influenant ladsorption monocouche ou multicouche correspondent

gnralement ceux qui rduisent la stabilit des molcules et du matriau :
-la nature du matriau : ladsorption des soluts sur le matriau membranaire est
souvent plus importante pour une membrane hydrophobe compare une membrane
hydrophile (Chang et al. 2001). Crozes et al. (1994), en comparant la filtration dune
solution 30 mg.L-1 de dextran avec celle dune solution 30 mg.L-1 en acide
tannique, montrent quune membrane hydrophobe est plus sensible ladsorption des
composs organiques quune membrane hydrophile,
-la polarit des molcules : Crozes et al. (1993) observent une adsorption de
T10 dextran dix fois plus faible que celle dacide tannique lorsquils filtrent de telles
solutions des concentrations allant de 10 40 mg.L-1,
-la concentration en lectrolytes : labsence ou la trop grande concentration
dlectrolytes conduit des modifications de lintensit de ladsorption,
-le pH : une modification du pH de la solution change galement la charge de surface
des molcules et de la membrane,
-la polarisation de concentration : ce facteur dplace les quilibres dadsorption et
acclre leurs cintiques (voir dfinition en fin de paragraphe).
Aux phnomnes de colmatage se superpose un autre mcanisme pouvant modifier le
transfert de matire dans les membranes dultrafiltration. Il sagit de la polarisation de
concentration. Ce phnomne rsulte de laccumulation de soluts (substances dissoutes tels

que des sels, des macromolcules) la surface de la membrane induisant ds le dbut de la
filtration un gradient de concentration entre la paroi de la membrane et la solution ; un
quilibre entre lapport de matire par le flux convectif (sous laction du flux de permat) et la
rtrodiffusion (sous leffet du gradient de diffusion) stablit pour donner lieu la polarisation
de concentration. Si la concentration en solut au voisinage de la membrane atteint la limite
de solubilit, ces molcules prcipitent et forment un dpt ou un gel suivant le type de
molcules. Par consquent, tout paramtre modifiant la limite de solubilit de lespce (pH,
temprature, etc) aura une rpercussion sur la polarisation de concentration.
Le colmatage est donc provoqu par diffrentes espces, avec des mcanismes varis, et
induit des changements importants des proprits filtrantes de la membrane. Deux types de
colmatage sont dfinis:
Colmatage rversible : ce colmatage est limin par simple lavage hydraulique
ou lair, ou par rtrolavage leau (passage du fluide en sens inverse de celui

65
utilis lors de la filtration) et permet surtout dliminer le dpt en surface

(lorsque les forces dadhsion sont faibles) et le bouchage des pores.
Colmatage "irrversible" : il ne peut tre limin que par une modification
importante des proprits thermodynamiques du systme, cest--dire, un

apport
dnergie
chimique
pour
rompre
les
liaisons
molcules
adsorbes/membranes.
Il est noter que les mcanismes de colmatage pourraient galement tre diffrencis suivant
le type dinteractions (hydrophobe, lectrostatique, etc) entre les composs et le matriau
membranaire. Tsuneda et al. (2003) donnent un exemple dinteractions pouvant exister entre
membrane et particules aprs avoir tudi les relations existantes entre les proprits de 27
souches de bactries htrotrophes et leur adhsion sur des billes de verre de 0,1 mm. Mme
si les interactions dcrites ici ne concernent pas les membranes, cet exemple permet de rendre
compte du type de liens pouvant exister entre un matriau et un milieu biologique. Tsuneda et
al. (2003) constatent que suivant la quantit dEPSlis prsents au sein des souches, deux
modes dinteractions entre billes de verre et cellules peuvent exister :
-interactions lectrostatiques : ce type dinteraction a lieu ds lors que la quantit en
EPSlis est faible. Une relation linaire est obtenue entre le potentiel zta des cellules et
le pourcentage de cellules retenues sur les billes. Les billes tant charges
ngativement (-29 mV) lorsque le potentiel zta passe de 50 0 mV, le pourcentage
de cellules retenues par les billes passe de 10 50%.
-interactions polymriques : ce type dinteractions intervient surtout lorsque la quantit
dEPS est leve (suprieure 100 mg.gcellules-1). Une forte corrlation existe entre la
quantit dhexose et de pentose, cest--dire les polysaccharides, et le pourcentage de
cellules adhres. Les polysaccharides la surface des cellules agissent alors comme
des polylectrolytes adsorbs la surface des cellules. Les groupements hydrophobes
et polaires des EPS pourraient alors intervenir dans ce type dinteractions.
Lors de la description des interactions intervenant dans le colmatage, nous nous sommes
surtout focaliss sur celles existant entre le matriau membranaire et le milieu biologique. Il
faut galement rappeler que ces mmes interactions peuvent exister entre "particules" et
participer la structuration du dpt.
66
2. Paramtres influenant le colmatage

Le colmatage est li un ensemble dinteractions faisant intervenir le milieu
biologique (les dbris cellulaires, les exopolymres, les bactries libres, les flocs, les
prcipits) et la membrane (nature chimique, porosit, gomtrie). Ltendue et lintensit des
interactions dpendent galement des conditions opratoires de filtration et de
lhydrodynamique du systme. Ce paragraphe traite donc successivement de linfluence des
caractristiques de la membrane et des conditions opratoires (partie procd) puis de
linfluence des caractristiques du milieu biologique (partie bio-chimie) sur le colmatage.
a.Influence des conditions de filtration
a.1 Nature chimique et physique de la membrane
La nature chimique du matriau membranaire ainsi que sa porosit ou sa gomtrie ont

une influence sur les mcanismes de colmatage.
Lhydrophobicit du matriau apparat notamment comme un paramtre cl pour la rtention
de composs et lintensit du colmatage. Ainsi, Chang et Lee (1998) lors de la filtration
pression constante (1,4 bar) et sous agitation (140 rpm) de boues ayant des temps de sjour
diffrents, montrent que la rsistance du colmatage externe par une boue active est lie aux
proprits de surface du matriau membranaire (filtration des boues dont la concentration en
MES a t ajuste 3,5 g.L-1 filtration jusqu un facteur de concentration volumique de 5)
(Tableau I.14).
Tableau I.14: Lien entre rsistance du gteau et proprits de surface d'une membrane lors de la filtration d'une
boue (Chang et Lee 1998)
Rsistance du gteau (*1011 m-1)

Membrane YM30
Membrane PM30
(30 kDa)
(30 kDa)
72
110
31
45
33
22
Age de boues (j)
Hydrophobicit : YM30 : membrane totalement mouille PM30 : angle de contact de 66
67
Ainsi, quel que soit lge des boues entre 3 et 33 jours, la rsistance du gteau de filtration est
la plus leve pour la membrane la plus hydrophobe. Chang et Lee (1998), lors de la filtration
dune boue moussante (foaming), observent galement une rsistance du gteau suprieure
pour la membrane la plus hydrophobe. La quantit de matire dpose et/ou la structuration
du dpt sont donc diffrentes suivant la nature chimique de la membrane. Augmenter le taux
de rtention de composs peut entraner une structuration diffrente du dpt, en particulier
dans le cas de dpts compressibles et rciproquement, changer les caractristiques du dpt
peut modifier le taux de rtention de certains composs. Ainsi, Chang et al (2001), avec la
mme cellule de filtration et les mmes conditions opratoires que prcdemment (voir cidessus) et des membranes de mme seuil de coupure (30 kDa), constatent que lors de la
filtration de boues ayant des tats physiologiques diffrents (boue moussante, foisonnement
des boues, boue en phase de croissance exponentielle, boue en phase endogne, etc), la
membrane la plus hydrophobe (angle de contact gal 66) prsente un taux de rtention de la
DCO soluble suprieur la membrane trs hydrophile (lors du dpt dune goutte deau sur la
membrane celle-ci est totalement mouille).
Lhydrophobicit de la membrane peut donc modifier les performances dun procd
membranaire et la nature chimique de la membrane peut dterminer en partie la propension
dune membrane colmater.
La taille des pores de la membrane a galement une influence sur le colmatage. En effet, le
diamtre des pores de la membrane dtermine le taux de rtention des composs. Ainsi,
lutilisation dune membrane dultrafiltration la place dune membrane de microfiltration
peut provoquer la rtention de plus petits composs. Leffet du diamtre des pores sur le
colmatage est donc, a priori, surtout visible dans les premiers instants de la filtration car
ensuite la rtention est surtout dicte par les caractristiques du dpt. Hong et al. (2002), lors
de la filtration dune suspension biologique avec des membranes fibres creuses en polysulfone
constatent une vitesse initiale de chute du flux de permat accrue quand le diamtre moyen
des pores augmente (0,01m ; 0,1m ; 10kDa et 30kDa). Cette chute rapide est due au
blocage des pores durant la phase initiale de filtration.
De mme que le diamtre des pores, la configuration des membranes modifie les mcanismes
de colmatage. Ainsi, Hong et al. (2002) constatent que, lors de la filtration externe/interne
avec un faisceau de fibres tendues, la chute initiale du flux de permat est plus leve quavec
le mme faisceau o les fibres sont libres et peuvent bouger. Lutilisation dune membrane
68
plane la place dune membrane fibre creuse entrane galement une diffrence de colmatage,
cause de la diffrence des proprits hydrauliques au voisinage de la membrane.
En conclusion, beaucoup de facteurs lis la nature chimique, physique de la membrane et
sa configuration influencent les mcanismes et lintensit du colmatage. Le choix des
caractristiques de la membrane dans le but de minimiser le colmatage reste dlicat. Ce choix
doit se faire au cas par cas et dpend des caractristiques du milieu biologique et des
conditions opratoires adoptes.
a.2 Les conditions opratoires de filtration
Pour sopposer au colmatage, des actions curatives ou prventives doivent tre

effectues. La prvention du colmatage passe notamment par le choix difficile des conditions
opratoires de filtration. Loin dtre exhaustif, ce paragraphe dgage les principaux
paramtres opratoires devant tre optimiss ou influant sur le colmatage. Loptimisation des
paramtres doit permettre dviter ou de retarder le colmatage tout en prservant la viabilit
conomique du procd.
Choix du flux de permation
Le choix de ce paramtre savre primordial pour loptimisation du procd (Germain
et al. 2004 ; Gui et al. 2002). Il influence notamment la dynamique du colmatage court
terme et long terme (vitesse de colmatage). Dans un BAMI, lors des phases de filtration,
toute leau entrant dans le systme est limine sous forme de permat. Toutes les particules
et collodes et une partie des composs solubles sont retenues par lensemble membrane +
dpt. Il y a donc lors de la filtration une accumulation de matire qui gnre un colmatage
croissant au cours du temps. Pour une filtration flux constant ceci peut se traduire par une
augmentation de pression transmembranaire au cours de la filtration.
Plus le flux de permat impos est grand, plus laccumulation de matire est forte et donc plus
le colmatage sera important, les autres conditions opratoires tant constantes.
Certains auteurs ont clairement montr que, pour un milieu biologique donn, la vitesse de
colmatage augmente avec le flux de permat (Ognier et al. 2002, Germain et al. 2004). Par
exemple, Gui et al. (2002) trouvent que pour des concentrations en MES, de 1 g.L-1 ou de
10 g.L-1, le facteur influenant le plus la vitesse de colmatage dans un BAMI traitant de leau
use domestique est le flux de permat : augmenter le flux de 3 10 L.h-1.m-2 augmente la
vitesse de colmatage. Cependant, des flux levs, le colmatage interne peut avoir lieu plus
rapidement.
69
Pour de faibles flux (aux alentours de 10 L.h-1.m-2 dans le cas de Germain et al. 2004 avec une
membrane de diamtre de pores de 0,1 m (Figure I.18), le transfert par convection de la
biomasse vers la membrane peut dans certains cas devenir ngligeable et le colmatage
Vitesse de colmatage (mbar.min-1)
progressif est alors essentiellement d aux composs solubles, aux prcipits et au biofilm.
4
3
Ug = 0,07 m.s-1 y = 0,014e0,145x
R2 = 0,913
Ug = 0,10 m.s-1 y = 0,008e0,155x
R2 = 0,802
Ug = 0,13 m.s-1 y = 0,016e0,111x
R2 = 0,838
2
1
0
10
15
20
25
-1
30
35
-2
Flux de permat (L.h .m )

Figure I.18: Evolution de la vitesse de colmatage en fonction du flux de permat (Germain et al. 2004)
Ug : vitesse de lair filtration pendant 15 minutes
En outre, travailler des flux extrmes entrane une perte de productivit du procd :
- faible flux : colmatage souvent retard mais flux global faible, donc procd extensif,
- flux lev : flux instantan lev mais ncessit darrts frquents de la production
pour dcolmater.
Depuis quelques annes, la tendance est de faire fonctionner les BAM plutt de faibles flux
de manire limiter le colmatage. Les conditions de permation recherches sont alors des
conditions dites "sous-critiques". Le flux critique correspond au flux en dessous duquel aucun
colmatage nest observ.
En pratique, dans les BAMI pour des eaux rsiduaires urbaines les flux critiques sont trs
faibles (entre 2 et 10 L.h-1.m-2) et souvent de lordre de grandeur de la prcision sur la mesure
du flux de permat.
Germain et al. (2004) trouvent quau-dessus dun flux critique ou flux transitoire (flux partir
duquel laugmentation de la vitesse de colmatage devient exponentielle), 40% de la variation
de la vitesse de colmatage est explique par le flux de permat (Fp en L.h-1.m-2), la
concentration en MES (MES en g.L-1), la concentration en carbohydrates des EPSlis
(EPScarbohydrate en mg.gMES-1) et la vitesse superficielle de lair (Ug en m.s-1) (Equation I.12).
Vit colmatage = -3,26 + (0,11 Fp) + (0,09 MES) + (0,11 EPScarbohydrate) (8,53 Ug)
70
(I.12)
Au-dessous de ce flux transitoire, ils nobtiennent aucune relation entre les diffrents
paramtres et la vitesse de colmatage. De faon gnrale, la connaissance des comportements
pour des flux "sous-critiques, reste assez mconnue. Le flux de permat doit tre optimis afin
de maintenir en relation avec dautres paramtres du procd (en particulier laration) une
productivit satisfaisante du procd, cest--dire que lon vise maintenant atteindre des
objectifs de flux dits "soutenables".
Choix de lintensit de laration
Linjection dair sous forme de grosses bulles dans le compartiment concentrat est
rgulirement employe pour limiter ou prvenir le colmatage des membranes.
Cette aration agit sur le colmatage externe, cest--dire sur le colmatage plutt rversible
(Hong et al. 2002). Leffet de laration est donc fortement corrle avec la concentration en
MES et le flux de permat ; limpact de laration augmente lorsque la concentration en MES
(Gui et al. 2002) et le flux transmembranaire augmentent (Figure I.18), ces deux paramtres
favorisant un colmatage par dpt de particules.
A faible concentration en MES (1g.L-1 pour Gui et al. 2002) ou faible flux de permat (entre 5
et 10 L.h-1.m-2 pour Germain et al. 2004), le colmatage est surtout d aux composs solubles,
cest--dire relve plutt dun mcanisme dadsorption ou de blocage des pores. Par
consquent, dans ces conditions laration influence peu la vitesse de colmatage.
En revanche, pour des flux de permat levs (33 L.h-1.m-2), Germain et al. (2004) constatent
quaugmenter la vitesse daration de 0,07 m.s-1 0,13 m.s-1 entrane une baisse de la vitesse
de colmatage de 10,6 kPa.h-1 1,98 kPa.h-1. Pour leur part, Hong et al. (2002) filtrent dans un
BAMI, pendant 350 minutes, une suspension biologique (5 gMES.L-1) travers une membrane
fibres creuses en polysulfone (0,1m). Laugmentation du dbit dair de 1,2 m3.m-2membrane.h-1
5,0 m3.m-2 membrane.h-1 permet de maintenir un flux de permat environ 35 L.h-1.m-2 contre
20 L.h-1.m-2 pour lancien dbit.
Gui et al. (2002), dans un BAMI quip de chicanes, trouvent un dbit dair optimum de
70,6 m3.m-2membrane.h-1 permettant de minimiser la vitesse de colmatage (filtration pendant 24h
avec un BAMI aliment par de leau use domestique fonctionnant 10 gMES.L-1). En
revanche, en dessous de ce dbit dair, les forces de cisaillement et le rtrotransport des
particules la surface de la membrane diminuent et favorisent le dpt des particules.
71
Cependant, une augmentation du dbit daration, mme pour de fortes concentrations en

MES, nest pas forcment synonyme dune baisse du colmatage. En effet, le dbit daration
doit tre optimis car au-del dun certain niveau, qui est diffrent dune installation une
autre, aucune baisse de la vitesse de colmatage nest obtenue (Hong et al. 2002). Au contraire,
au-del dun dbit daration, il est parfois constat un colmatage accru (Gui et al. 2002). Ceci
peut tre d deux phnomnes diffrents :
- une mauvaise rpartition de lair avec des zones dcoulement prfrentiel qui
conduisent un mauvais dcolmatage dune partie du module,
- un cassage des flocs par les forces de cisaillement.
Choix du temps de filtration et de relaxation
Le fait de stopper squentiellement la filtration (ou succion) peut ralentir le
phnomne de colmatage. Le dure durant laquelle la filtration est arrte est appele temps
de relaxation. Les dures de relaxation et de filtration classiquement utilises avec les BAM
de traitement des eaux rsiduaires urbaines varient respectivement entre 2-15 minutes et 1045 minutes (Ahn et al. (2000), Albasi et al. (2002), Hong et al. (2002)).
Lors de larrt de la filtration, certaines particules peuvent tre rtrotransportes grce au
gradient de concentration ou laration la surface de la membrane. Par exemple, Hong et
al. (2002), lors dune filtration intermittente 20 kPa (45 min de succion 20 kPa / 15 min
darrt) dune boue 4,00,2 gMES.L-1, observent une chute initiale du flux de permation
moins importante que lors de la filtration continue (les conditions opratoires sont identiques
pour les deux expriences). La succion intermittente fait chuter le flux de permat de 90
40 L.h-1.m-2 alors que la succion continue entrane une chute de 90 environ 20 L.h-1.m-2. Le
flux stabilis est dailleurs infrieur pour une filtration continue.
En rsum, laugmentation du temps de filtration ou la diminution du temps de relaxation
provoquent une augmentation de la vitesse de colmatage (Gui et al. 2002). Le squenage de
la filtration doit donc tre optimis. De plus, mme un ratio identique entre le temps de
filtration (tf) et le temps de relaxation (tR) peut conduire des vitesses de colmatage
diffrentes comme Ahn et Song (2000) le dmontrent dans une exprience de filtration par
intermittence 20 L.h-1.m-2. Lors dune premire exprience, la boue a t filtre durant
10 minutes suivies par un arrt de la filtration durant 0,5 minute. Lors de la deuxime
exprience, la boue est filtre durant 30 minutes suivie par 2 minutes de relaxation. Au cours
de ces expriences, la liqueur mixte, continuellement agite 350 rpm est filtre dans un
BAMI quip de fibres creuses de microfiltration (diamtre moyen des pores de 0,1 m) en
72
polythylne. Dans les 2 expriences le ratio entre le temps de relaxation (tR) et celui de
filtration (tf) est gal 0,05-0,06. Cependant, le temps de succion maximal entrane une
augmentation de la PTM plus rapide. En effet, au bout de 20 minutes de filtration, la pression
transmembranaire est denviron 80 kPa pour lexprience avec le temps de succion maximal
contre environ 15 kPa pour lautre. Deux conclusions ressortent de ces expriences :
-
le ratio tR/tf nest pas le paramtre optimiser pour limiter le colmatage.
un temps de filtration trop long engendre probablement une restructuration du

dpt la surface de la membrane et rend difficile son limination.
En conclusion, afin de limiter le colmatage dans un BAM, lutilisation dune filtration

intermittente peut tre une solution partielle. Cependant, les temps de relaxation et de
filtration devront tre optimiss.
b. Influence des caractristiques chimiques et physico-chimiques
du milieu biologique
Au-del des conditions de filtration, les proprits intrinsques du milieu biologique

agissent sur le colmatage. Pour preuve, Flemming et Schaule (1988) observent que les
bactries Pseudomonas fluorecsens adhrent plus lentement sur les membranes en
polysulfone, polyamide et actate de cellulose que Pseudomonas vesicularis. Laffinit entre
bactries et matriau membranaire dpend donc galement de lespce bactrienne concerne.
Par extension, elle dpend donc des caractristiques du milieu biologique.
b.1 Nature et composition de leffluent traiter
Le paragraphe I.I sur la caractrisation du milieu biologique montre notamment que

lorigine et la composition de leffluent traiter influencent les proprits des flocs. Par suite,
cela influence galement le colmatage. Ainsi Chang et Lee (1998) montrent quune boue
limite en apport en azote possde une rsistance au colmatage infrieure une boue ordinaire
alors que la distribution granulomtrique est quasiment la mme. Ils expliquent ce rsultat par
les quantits diffrentes en EPS dans ces deux types de boues. La boue limite en azote
possde une concentration en EPS moindre par rapport lautre boue.
73
b.2 Importance relative des matires particulaires et

solubles les produits microbiens
Lors de la filtration dune eau use, il est intressant de connatre quelle fraction de la
boue participe prioritairement au colmatage. En effet, savoir quel est, du surnageant ou des
flocs, celui qui est le principal responsable du colmatage, permet de prdire les mcanismes
de colmatage intervenant et donc dy remdier.
Cependant, il semble difficile de connatre par avance le principal responsable du colmatage,
tant les conditions opratoires des BAM et les mthodes de dtermination du colmatage sont
diverses. Ainsi, beaucoup dtudes aboutissent des rsultats en apparence contradictoires
(Tableau I.15).
Tableau I.15: Part de chaque constituant dune boue dans la rsistance du colmatage
Age de la boue
(j)
Solubles
(%)
Collodes
(%)
Flocs
(%)
Bouhabila (1999)
20
26
50
24
Defrance et al. (2000)
60
30
65
Ognier et al. (2002)
3,5
3-15
85-97
Dans le cas de Bouhabila (1999) la fraction soluble est obtenue par addition de 250 mg.L-1
dAl2(SO4)3 au surnageant dune centrifugation 4500 rpm pendant 1 minute. Dans le cas de
Defrance et al. (2000), la fraction soluble est obtenue par addition de 0,4 g.L-1 de FeCl3 au
surnageant dune boue ayant dcante. Enfin, Ognier et al. (2002) obtiennent le surnageant
des boues par centrifugation 2 G. En outre, la dfinition donne chacune des fractions
change suivant les auteurs ; les mthodes et les conditions opratoires pour dterminer la
rsistance au colmatage sont diffrentes (filtration dans une cellule de filtration ou dans un
BAM, agitation du milieu biologique ou non, membranes diffrentes, etc). Au final, il
apparat que la comparaison entre des expriences visant dterminer la contribution des
constituants dune boue au colmatage savre trs dlicate. Il faut galement noter quil est
difficile dapprcier lintensit du colmatage due une fraction de la boue. En effet, le
colmatage fait intervenir des interactions entre composs ; cest pourquoi la rsistance la
filtration dun constituant pris isolment nest pas la mme que celle de ce mme constituant
au sein de la boue. Enfin, un colmatage par les flocs semble moins problmatique lheure
actuelle car ce colmatage, principalement externe, peut tre plus facilement limit.
74
Il semble possible de distinguer deux mcanismes de colmatage suivant la concentration en

MES des boues :
-
A faible concentration en MES, le principal colmatage est engendr par les

composs solubles et est essentiellement d ladsorption. Ainsi des auteurs
comme Hong et al. (2002), filtrant des boues actives dans un BAMI (membrane
en polysulfone de 0,1 m de diamtre de pores) oprant 20 kPa, ne trouvent
aucune relation entre MES et colmatage. En effet, laugmentation de la
concentration dune boue, de 3,6 8,4 gMES.L-1, nentrane pas de diffrence dans
la chute du flux de permat. Dans ce cas prcis, le colmatage nest visible qu
long terme et est engendr principalement par les composs solubles.
A concentration en MES leve, le colmatage est principalement externe. Shimizu

et al. (1996) constatent une chute importante du flux de permat (de 8,3
0,8 L.h-1.m-2) lorsque la concentration en MES passe de 5 20 g.L-1 (succion
30 kPa, dbit dair sous la membrane tubulaire de diamtre de pores gal 0,1 m,
de 7,2 m3.m-2.h-1). De mme, Gui et al. (2002) lors de la filtration dune boue
1 gMES.L-1 et 10 gMES.L-1 montrent que le flux critique (flux partir duquel ils
observent une augmentation soudaine de la vitesse de colmatage) passe
respectivement de 8 5 L.h-1.m-2 (membrane en polythylne de diamtre de pores
gal 0,1 m).
Le surnageant et les flocs participent donc tous les deux au colmatage. La prpondrance de
lune ou lautre des fractions sur le colmatage dpendra entre autre de la concentration en
MES, du flux de permat appliqu, et des conditions opratoires du systme. Parmi les
composs prsents la fois dans le surnageant et dans les flocs, les exopolymres semblent
jouer un rle important sur le colmatage.
Les exopolymres facilitent ladhsion des bactries sur la membrane et structurent le dpt.
En effet, les micro-organismes adsorbs sur le matriau membranaire se rpliquent et
scrtent des exopolymres qui lient les cellules entre elles (Lewandowski et Beyenal 2004).
La rsistance engendre par ce biofilm est gnralement suprieure celle dun dpt sans
exopolymre. En effet, Hodgson et al (1993), aprs traitement de bactries lEDTA
(lEDTA limine les substances extracellulaires telles que les protines et les
polysaccharides), constatent que la rsistance au colmatage est infrieure celle du dpt de
bactries non traites.
75
En ce qui concerne les EPS prsents au sein des flocs de la suspension biologique, leur
relation avec le colmatage semble complique. En effet, alors que des auteurs comme Reid et
al. (2004) ou Rosenberger et al. (2002) ne trouvent aucune relation liant la filtrabilit des
boues et la teneur en EPS des flocs, dautres comme Mikkelsen et Keiding (2002) montrent
par des analyses multi-variables que la filtrabilit des boues est amliore lorsque la
concentration en EPS des flocs augmente. Au final, les relations liant les EPSlis au colmatage
sont assez dlicates tablir. Les mthodes dextraction, les gammes de concentration en
EPS, les conditions de filtration sont diffrentes et ne permettent pas de dterminer de
corrlations ni de rgles gnrales.
En ce qui concerne les EPS solubles, leur participation au colmatage est galement discutable.
Des auteurs comme Bouhabila (1999), par comparaison de la filtrabilit dune boue et de son
surnageant, les considrent comme les principaux responsables : pour eux, une augmentation
de la teneur en polymres dans le surnageant se traduit souvent par une augmentation du
pouvoir colmatant des boues. Par contre, Lee et al. (2003) ne trouvent aucun paramtre
(quantit totale en EPS solubles, carbone organique dissous, angle de contact) influant sur le
potentiel colmatant du surnageant, dans les conditions de filtration tudies.
Certain auteurs relient le colmatage des paramtres globaux de caractrisation du surnageant
comme le COT (Carbone Organique Total). Huang et al. (2000) suivent lvolution de la
filtrabilit de boues prises dans un BAMI aliment en eau use synthtique. Deux litres de
boue sont directement introduits dans un module de filtration quip dune membrane plane
(0,1 m ; 0,03 m) puis une pression constante est applique sur la liqueur mixte (25
40 kPa). Durant les 30 minutes de filtration, le permat est rintroduit au sein de la liqueur
mixte et son dbit enregistr. Le BAMI est stabilis en biomasse avec une boue en teneur en
MES constante (3 4 g.L-1). Huang et al. (2000) observent une corrlation entre la valeur du
flux de permat quasiment stabilis aprs 20 minutes de filtration, et la teneur en COT du
surnageant obtenu par centrifugation 4000 rpm pendant 15 minutes suivie par une filtration
sur filtre 0,45 m (Figure I.19).
76
Flux J20C (L.m-2.h-1)
25
20
15
10
5
0
20
40
60
80
100
COT surnageant (mg.L-1)

Figure I.19: Relation entre le flux stabilis et la concentration en COT du surnageant (Huang et al. 2000)
Ces expriences montrent donc que laccumulation de substances solubles au sein de la

liqueur mixte a un effet ngatif sur la permabilit de la membrane (substances qui sont entre
autre composes dEPS solubles).
Parmi les EPS solubles, les protines semblent jouer un rle important. Muka et al. (2000)
filtrent le surnageant de diverses cultures biologiques se trouvant en phase de croissance
stationnaire (Boue active, S.natans KRN-A2, S.natans SY-1). Suivant le type de culture, le
surnageant est obtenu par centrifugation 6000 ou 8000 rpm pendant 20 30 minutes puis
filtration sur 0,45 m. Ils constatent que plus la rtention de protines solubles par la
membrane est leve, plus le colmatage est important (membrane polysulfone, 50 kDa).
Ainsi, le flux stabilis obtenu lors de la filtration de la boue active est infrieur celui des
deux autres cultures (flux de permat relatif gal 0,24 pour KRN-A2, 0,32 pour SY-1 et 0,20
pour la boue active). Il serait donc intressant de savoir si cette rtention leve des protines
est due leur masse molculaire et/ou leurs proprits de surface.
Cependant, les protines ne sont pas les seules responsables du colmatage par les composs
solubles. Pour preuve, Lesjean et al. (2004) tablissent une relation linaire liant la vitesse de
colmatage dans un BAMI et la concentration en polysaccharides, mesure en quivalent
glucose, du surnageant (Figure I.20).
77
Vitesse de colmatage (1010m-1.j-1)
20
15
10
5
0
5
10
15
-1
Polysaccharides Glucose (mg.L )
BAMi 1 (mode pr-denitrification)

BAMI
BAMi 2 (mode post-dnitrification)

BAMI
Figure I.20: Relation entre vitesse de colmatage et concentration en polysaccharides du surnageant de boues de
BAMI fonctionnant 8 jours dge de boues (Lesjean et al. 2004)
Jarusutthirak et al. (2002) aprs filtration, 4,8 bar pour une membrane NF (0,2 kDa) et
3,4 bar pour une membrane UF (8 kDa), de la fraction collodale (fraction obtenue par
filtration sur membrane de dialyse de 3500 Da), puis analyse ATR-FTIR (Attenuated total
reflection-Fourier transform spectroscopy) de la membrane colmate montrent que le
"gteau/couche de gel" est principalement compos de protines, polysaccharides et sucres
amins. Le dpt obtenu aprs filtration de la fraction transphilique et hydrophobe montre
galement que celui-ci est compos de polysaccharides et de protines.
b.3 Distribution de la taille des particules et flocs
Il est certain que la taille des particules et des flocs influence les phnomnes de
colmatage. Suivant la taille des particules, lintensit de chacun des types de colmatage
(blocage des pores, adsorption, dpt) sera diffrente
Cicek et al. (1999) filtrent sous vide une boue venant dun BAM externe et dun procd
boues actives. Les boues du BAME ont un diamtre moyen denviron 4 m contre 20
120 m pour le procd boues actives. La rsistance spcifique de ces deux boues est de
2,4.1015 m.kg-1 pour la boue de BAM et 2,1.1012 m.kg-1 pour la boue du racteur boues
actives. Ces rsultats montrent que la diffrence de filtrabilit entre les deux boues pourrait
tre lie la taille des flocs. Toutefois, ces deux procds ne fonctionnent pas au mme ge de
boues (30 jours pour le BAM contre 20 jours pour le procd boues actives conventionnel),
et il est donc dlicat dattribuer uniquement la diffrence de rsistance la filtration la
diffrence de taille de particules.
78
Lim et Bai (2003) tudient linfluence de la taille et des caractristiques des flocs lors de
rapides tests de filtration dans un BAMI quip de membranes fibres creuses en PVDF de
0,1 m de diamtre de pores. Ils comparent ainsi la filtration pression constante dune boue
foisonnante avec une boue granulaire, issues de racteurs aliments en eau use synthtique,
fonctionnant des ges de boues de 10 jours. La concentration en MES de ces boues est de
3,5 g.L-1. Lvolution du flux de permat est reporte sur la figure I.21.
Flux de permat (L.H-1.m-2)
300
250
Boue granulaire
200
Boue bulking
foisonnante
150
100
50
100
200
300
Temps (min)
Figure I.21 : Chute du flux du permat lors de la filtration dune boue granulaire et dune
boue foisonnante (Lim et al. 2003).
La diffrence de performance de filtration de ces boues est attribue leur diffrence de
distribution granulomtrique. La boue foisonnante, avec une distribution granulomtrique
plus large (1-200 m) et centre sur environ 30 m, colmate beaucoup plus rapidement que la
boue granulaire (distribution granulomtrique entre 10 et 200m centre sur 100m). Ceci
met en vidence lintrt potentiel des boues granulaires ou flocules et montre clairement
que les MES contribuent de manire significative au colmatage.
Enfin, Reid et al. (2004) trouvent une relation linaire entre la permabilit des membranes
(diamtre de pores de 0,4 m) et la racine carre du diamtre moyen des flocs. Lorsque le
diamtre des flocs passe de 5 17 m, la permabilit des membranes passe de 300
600 L.h-1.m-2.bar-1.
b.4 Proprits de surface des flocs
Le colmatage rsulte dinteractions entre le matriau membranaire et la matire issue

du milieu biologique. Les proprits de surface des composs prsents au sein du milieu
biologique vont donc agir sur les forces dadhsion ou de rpulsion entre les composs et la
79
membrane. Tout facteur qui modifiera les proprits de surface des flocs modifiera donc les
mcanismes du colmatage.
Par exemple, la temprature et le pH dune solution peuvent agir sur le colmatage puisquils
influencent la charge de surface des particules et leur solubilit. Leau use est constitue
dune multitude de composs comme par exemple les protines. De part et dautre du point
isolectrique, la charge de surface et la configuration de ce type de molcules changent. Les
interactions lectrostatiques avec la membrane vont donc tre modifies ; par suite, la
structuration et le mcanisme de colmatage galement.
Ainsi, Shiau et al. (2004) lors de la filtration dune solution de protines (srum bovin
albumine) pH gal 5 constatent une augmentation soudaine de la pression au bout de 7
heures de filtration alors quau mme moment, la pression augmente progressivement avec
une solution "identique" pH gal 7. Une observation au microscope montre qu pH gal
5, le dpt la surface de la membrane volue au cours du temps et forme au bout de 6 heures
de filtration une couche uniforme. Le dpt pH gal 5 est donc compressible. En revanche,
pH gal 7, les photos au microscope montrent que le dpt est en permanence form
dagrgats. En rsum, pH gal 5, les protines sont proches de leur point isolectrique, les
forces de rpulsion lectrostatique sont donc plus faibles qu pH gal 7, le dpt de
protines peut donc plus facilement tre comprim. Cet exemple montre donc que le pH peut
influencer la structuration et la compressibilit dun dpt de particules car il en modifie
notamment les charges de surface.
De plus, le pH, au mme titre que la temprature peut galement entraner la dnaturation de
protines et donc modifier les mcanismes de colmatage. Il est noter que la modification des
proprits de surface des particules par la temprature ou le pH aura galement une
implication sur les cintiques dadsorption des composs sur la membrane. Enfin, le pH et la
temprature peuvent galement entraner une modification de la solubilit dune molcule. En
effet, Ognier et al. (2002) constatent que lors dune augmentation du pH ou de la temprature,
la pression transmembranaire augmente brutalement. Cette instabilit des performances
hydrauliques sexplique par la cristallisation puis le dpt de particules de CaCO3 la surface
de la membrane ou lentre des pores. En effet, la dnitrification qui prend place au sein du
racteur biologique produit des ions carbonates (CO32-) et hydroxydes (OH-) qui prcipitent
lors dune augmentation du pH ou de la temprature. Or, la solubilit de CaCO3 diminue
quand la temprature augmente. Cet exemple est trs intressant car il montre que lors du
lavage des membranes, pour liminer une partie du colmatage il faut trouver le couple pHtemprature optimal pour dissoudre les prcipits. Dans le cas de Ognier et al. (2002), ds lors
80
que des solutions acides ou pH sont utilises, elles permettent la dissolution des prcipits
inorganiques.
Enfin, une proprit de surface comme lhydrophobicit du floc va galement jouer sur le
mcanisme et lintensit du colmatage. Une analyse statistique permet Lee et al. (2003) de
lier lintensit du colmatage aux caractristiques des flocs prsents dans un BAMI aliment en
eau use synthtique (membrane en polypropylne de diamtre de pores 0,4m). Ils montrent
que laugmentation de la quantit de protines extraites (de 29,9 35,7 mg.gMVS-1), du rapport
protines extraites / carbohydrates extraits (de 0,91 1,22), de lhydrophobicit (dun angle
de contact de 34,4 44,4) ou de la charge de surface des flocs (de 0,43 0,66 mq.gMVS-1),
augmente la rsistance de colmatage due au flocs. Comme il a t vu dans le chapitre
prcdent, une augmentation de la concentration en protines dans les exopolymres des flocs
a pour consquence une augmentation de lhydrophobicit du floc. De mme, augmenter le
rapport protines/carbohydrates revient soit augmenter la quantit de protines, cest--dire
augmenter lhydrophobicit du floc, soit diminuer la quantit de carbohydrates (hydrophiles)
cest--dire diminuer lhydrophobicit du floc. En rsum, lhydrophobicit du floc apparat
comme un paramtre important du colmatage.
En conclusion, il apparat que les polymres solubles ou insolubles des boues interviennent
soit dans la structuration du gteau de filtration, soit lors de ladsorption sur le matriau
membranaire ou le dpt. Leur rle dans le colmatage reste cependant dfinir et prciser.
c. Etat physiologique de la biomasse et charge applique
c.1 Viabilit et carences nutritives
Une carence nutritive des micro-organismes influence leur capacit dadhsion au

matriau membranaire. En effet, Flemming et Schaule (1988) constatent que quel que soient
le matriau membranaire et le type de cellules testes (Ps. Vesicularis, Ac. Caldoacetidus,
Staph. Warneri), les cellules en carence nutritive montrent une plus faible tendance adhrer
la membrane que les cellules avec une alimentation normale. Par exemple, la mise en
contact durant 4h sans filtration, de Ps. Vesicularis avec des membranes en polysulfone,
polyethersulfone, polyamide ou polyetherure conduit une densit de cellules sur les
membranes comprise entre 105 7.105 cellules.cm-2 pour les cultures en carence nutritive, et
entre 3,7.106 et 7,6.106 cellules.cm-2 lorsquelles sont normalement alimentes. La capacit
dadhsion la membrane reste bien sr dpendante du type de cellule et de matriau. De
plus, les rsultats de Flemming et Schaule (1988) montrent que non seulement la masse de
81
bactries adsorbes est diffrente suivant ltat de carence nutritive de la culture, mais quen
plus la structure du dpt lest galement. En effet, les cultures souffrant dune carence
nutritive forment de petits agrgats la surface des membranes alors que les cultures sans
carence couvrent la totalit de la surface membranaire. Cependant, ces tests dadhsion ont t
effectus avec des cultures pralablement laves. Les ventuels polymres solubles sont donc
limins avant le test. Or, les polymres des flocs ou du surnageant participent au colmatage.
Il faut donc lier la phase de croissance des bactries la production de polymres et au
colmatage. Par exemple, une croissance en phase endogne est gnralement associe une
augmentation de la concentration en exopolymres des flocs (Chang et Lee 1998). Quelles
sont alors les rpercussions sur le colmatage ? Chang et Lee (1998) trouvent que lors de la
filtration sur membrane hydrophobe (angle de contact gal 66) dune boue en phase de
croissance endogne, la rsistance du gteau de filtration est de 82.1011 m-1 contre 42.1011 m-1
pour celle dune boue en phase de croissance logarithmique. Ils aboutissent aux mmes
conclusions avec une membrane hydrophile. La rsistance au colmatage serait donc plus
leve pour une boue en phase de croissance endogne ce qui est attribu une quantit plus
importante dEPSlis dans cette boue.
Par ailleurs, la diffrence dans lintensit du colmatage, dune boue se prsentant sous
diffrents tats de croissance, peut galement dpendre du surnageant de la boue. En effet,
Muka et al. (2000), lors de la filtration du surnageant de boues actives dans une cellule de
filtration pression constante (40 kPa), montrent que la chute initiale du flux de permat est
la moins brutale pour le surnageant de la boue en phase de croissance logarithmique (par
comparaison avec un surnageant de boue en phase de croissance stationnaire ou de dcs). Le
surnageant est obtenu par centrifugation 6000 ou 8000 rpm pendant 20 30 minutes puis
filtration sur membrane ,45 m. Le flux relatif de permat se stabilise galement des valeurs
plus leves que pour les autres surnageants : Fp
stabilis phase logarithmique
/ Fp
initial
= 0,5 ;
Fp stabilis phase stationnaire / Fp initial = 0,16 ; Fp stabilis phase dcs / Fp initial = 0,20.
Ils montrent ainsi que suivant ltat de croissance dune boue, la qualit de son surnageant
sera diffrente et engendrera un colmatage spcifique. La permation sur gel 220 nm
effectue sur le surnageant de la boue montre que dune phase de croissance une autre, la
distribution des masses molculaires des composs solubles fluctue. Ainsi, lors dune
filtration, la quantit en EPS solubles mais galement leur masse molculaire interviennent
dans le colmatage.
82
c.2 Age de la boue
Comme il a t vu dans le chapitre sur la caractrisation du milieu biologique, lge

dune boue va influencer la viabilit, le taux de croissance et la production dEPS des microorganismes et ceci pourra affecter le colmatage.
En rgle gnrale, pour des membranes dultrafiltration, lge de boues influence la rsistance
au colmatage principalement parce quelle influence le taux dEPS produit dans le milieu
biologique. Ainsi, Chang et Lee (1998) tudient les liens existant entre la rsistance du gteau
de filtration et lge dune boue, lors dune ultrafiltration dans une cellule pressurise
1,4 bar (agitation de 180 rpm) (Tableau I.16).
Tableau I.16: Lien entre rsistance du gteau de filtration et ge de la boue (Chang et al. 1998)
Rsistance du gteau (*1011.m-1)

Age de
la boue (j)
EPSlis
(mgMVS.gMES-1)**
Membrane YM30
(30 kDa) (membrane
Membrane XM50
Membrane PM30
totalement mouille)
(50 kDa) (angle de

contact de 59)*
(30 kDa) (angle de

contact de 66)*
268
72
95
110
244
31
33
45
33
213
11
22
Hydrophobicit de la membrane dtermine par mesure de langle de contact entre une goutte deau et la
surface de la membrane - ** extraction thermique des EPS lis (100C, 1h)
Plus lge des boues augmente, plus la rsistance du gteau de filtration diminue, quelle que
soit la membrane utilise (diamtre des pores compris entre 30 et 50 kDa pour les trois
membranes en cellulose YM30, copolymre acrylique XM50 ou polysulfone PM30). Passer
de 3 jours 33 jours dge de boues fait passer la rsistance du gteau de 110.1011
22.1011 m-1 pour la membrane la plus hydrophobe (mesure effectue lorsque la filtration
atteint un facteur de concentration volumique de 5).
Cependant les auteurs ne prcisent pas le temps dacclimatation de chaque boue aux nouvelles
conditions opratoires. Nous ne savons donc pas si les boues ont atteint un tat stable. Or,
pour un ge de boues donn, les caractristiques du milieu biologique et donc sa filtrabilit
voluent au cours du temps (Bouhabila 1999). Cela peut ventuellement expliquer que
certains auteurs constatent des variations de filtrabilit dun surnageant de boue lorsque son
temps de sjour varie. Les rsultats fournis par Bouhabila (1999) rejoignent ceux de Lee et al.
(2003) qui utilisent un BAMI pour valuer le rle de chaque constituant du milieu biologique
sur le colmatage des membranes. Ils diluent les boues avec leur surnageant afin de se ramener
une concentration en MES de 3g.L-1. Ils constatent que la rsistance au colmatage du
83
surnageant, obtenu par centrifugation 366 rad.s-1 durant 5 minutes, reste identique au
environ de 3.1011 m-1, quel que soit lge de la boue compris entre 20 et 60 jours
(Tableau I.17).
Tableau I.17 : Rsistances de diverses fractions de la boue diffrents temps de sjour (Lee et al. 2003)
Rsistance (m-1)
Age de boue (j)
Surnageant
Boue
20
2.9 . 1011
7.9 . 1011
40
2.6 . 1011
9.2 . 1011
60
3.1 . 1011
10.8 . 1011
Au contraire, plus lge de la boue augmente plus la rsistance au colmatage due la totalit
de la boue augmente. En conclusion, la contribution relative du surnageant sur le colmatage
de la membrane est plus leve faible temps de sjour des boues.
IV. Conclusion
Ce chapitre bibliographique a permis de retenir les paramtres analyser pour tudier les
interactions entre une membrane et le milieu biologique lors de leur mise en uvre pour le
traitement deaux uses domestiques dans un systme type bioracteur membranes
immerges ar. Dans cette tude nous allons nous focaliser sur les interactions
membrane/boue dans lobjectif de dterminer comment pour un systme donn (BAMI avec
un type de membrane fix) la membrane et les conditions opratoires du bioracteur et de la
filtration peuvent modifier les proprits physico-chimiques du milieu biologique et
comment, rciproquement les proprits du milieu biologique peuvent agir sur le colmatage.
Les aspects influence de la filtration sur lactivit biologique et influence de laration sur le
colmatage ne seront pas traits dans ce manuscrit. Ils font lobjet de la thse de Marie-Carmen
Espinosa-Bouchot en cours au LIPE actuellement.
Ltude bibliographique a permis de souligner limportance de certains paramtres :
-opratoires : ge de boues, flux de permat, pression transmembranaire, temprature
-physico-chimiques du milieu biologique : concentration en MES, DCO, taille des
flocs, EPS lis et solubles, pH, indice de boue ou dcantabilit des flocs.
Une analyse quotidienne de ces paramtres sera ralise. Cependant, pour pouvoir tudier les
spcificits du milieu biologique type BAMI, il faut le comparer avec une boue de rfrence.
84
Ainsi, afin dtudier linfluence de la membrane sur les proprits dune boue, le BAMI sera
compar avec un procd boues actives fonctionnant dans les mmes conditions (mme
ge de boues et mme concentration) et aliment avec le mme effluent.
Par ailleurs, ltude bibliographique, montre que les EPS lis et solubles semblent jouer un
rle important dans le colmatage et la structuration des flocs mais que les rsultats obtenus
dpendent fortement de la mthode danalyse tudie. Il est donc important quun protocole
de dtermination des EPSlis et des EPSsolubles soit mis en place. Il apparat galement que les
mcanismes de colmatage lis aux polymres sont encore inconnus. Plusieurs questions
restent donc en suspens : quel type dEPS agit sur le colmatage ? Est-ce que se sont les EPSlis
ou les EPSsolubles qui interviennent ? Sils interviennent, comment le font-ils ? Et enfin, est-ce
que la nature chimique des exopolymres (polysaccharides, protines, substances humiques)
est un facteur important dans le colmatage ?
Dautre part, les exopolymres sont galement responsables de la cohsion et de la
structuration des flocs et de leurs proprits de surface. Ils ont donc un rle majeur dans la
caractrisation du milieu biologique. Cependant, ltude bibliographique montre que les
relations qui lient les exopolymres, les caractristiques du floc et le colmatage restent floues.
Quels sont les liens entre les exopolymres et le diamtre des flocs ou lindice de boues ?
Lesquels de ces paramtres sont importants en terme de colmatage ? Les chapitres suivants
ont pour but damener des lments de rponse ces questions.
85
CHAPITRE II
MATERIEL ET METHODES
Chapitre II : Matriel et Mthodes
Ce chapitre dcrit les deux procds biologiques utiliss dans cette tude (bioracteur
membranes et procd boues actives) et les moyens mis en oeuvre pour analyser le
colmatage et les spcificits des boues. Le matriel et les mthodes analytiques utiliss sont
prsents ainsi que les caractristiques de leau use dentre.
I. Description des procds biologiques

Dans cette tude, deux procds sont tudis en parallle et ont ncessit la conception
et la ralisation de deux pilotes : un pilote boues actives et un pilote de type bioracteur
membranes immerges. Ces deux pilotes fonctionnent en parallle avec une alimentation
identique en eau rsiduaire urbaine dont les caractristiques seront dtailles au paragraphe
suivant.
1. Le pilote boues actives

Le pilote boues actives (BA) est constitu dun racteur cylindrique (16 L),
thermostat 20C et dun dcanteur cylindro-conique de 2,4 L (Figure II.1).
4C
Cuve rfrigre
ERU
Air
Dcanteur
Figure II.1: Schma du procd boues actives
Lalimentation du racteur en eau rsiduaire urbaine (ERU) seffectue au moyen dune pompe
pristaltique raison de 1 L.h-1. La surverse place dans le racteur permet de maintenir
constant le niveau de liquide tandis que le surplus de boue alimente le dcanteur. Le
surnageant de dcantation est limin par trop plein et les boues sont recircules dans le
racteur un dbit de 1,5 L.h-1. Le maintien dun ge de boues constant est alors assur par
une purge quotidienne des boues du racteur.
86
Le milieu biologique du racteur est agit par un agitateur 4 pales. Laration squence
(1h30 de fonctionnement puis 1h30 darrt) seffectue au moyen dun tube perc dispos en
spirale au fond du racteur. Le dbit daration est ajust pour maintenir une concentration en
oxygne dissous au sein des boues, comprise entre 0 et 6 mg.L-1. La concentration en oxygne
est nulle lorsque laration est stoppe et gale 6 mg.L-1 lorsquelle fonctionne. La
temprature, la concentration en oxygne ainsi que le pH sont enregistrs en permanence par
ordinateur.
2. Le bioracteur membranes immerges (BAMI)

Le BAMI (Figure II.2) est compos dun racteur (16 L) thermostat 20C dans
lequel sont immerges des fibres creuses disposes sous forme de U.
Eau traite
Capteur de
niveau
4C
Cuve rfrigre
Tube perfor
en inox
Air
Purge
Aration fines bulles
Aration grosses bulles

Figure II.2: Schma de principe du BAMI
La filtration est effectue de lextrieur des fibres vers lintrieur en aspirant un dbit de
1 L.h-1 le permat laide dune pompe pristaltique.
87
Lempotage des fibres (Tableau II.1) fournies par la socit Polymem est dispos au point
haut du racteur.
Tableau II.1: Caractristiques des membranes fibres creuses du BAMI
Polysulfone
Matriau
Permabilit 20C (L.h-1.m-.bar-1)
200
Surface membranaire (m)
0,2
Diamtre des pores (m)
0,2
Diamtre externe des fibres (mm)
0,72
Diamtre interne des fibres (mm)
0,38
Longueur des fibres (mm)
750
Nombre de fibres
68
Le dbit dalimentation est rgul partir de capteurs de niveau pour maintenir constant le
volume de liquide au sein du racteur.
Une aration squence (fonctionnement 1h30 / arrt 1h30) situe au bas du racteur permet
de fournir loxygne ncessaire aux micro-organismes. Le dbit daration est rgul
manuellement pour avoir une concentration en oxygne dissous au sein de la boue comprise
entre 1 et 6 mg.L-1. La concentration est gale environ 1 mg.L-1 lors de larrt de laration
et gale 6 mg.L-1 lors de son fonctionnement. Un deuxime systme daration est plac au
bas du racteur sous le faisceau de fibres : lair passant au travers de deux trous perfors le
long dun tube inox (Figure II.2) permet dobtenir en continu de grosses bulles (20 L.h-1 soit
2,8.10-5 m3.s-1.m-2membrane ou 3,5.10-4 m3.s-1.m-3racteur). Ces dbits sont relativement faibles par
rapport ce qui est habituellement trouv dans la littrature. Ainsi, Gander et al. (2000)
mentionnent des dbits de lordre de 6,9.10-4 m3.s-1.m-2membrane (9,5.10-3 m3.s-1.m-3racteur) ou
Lee et al. (2003) de 3,3.10-4 m3.s-1.m-2membrane (4,7.10-3 m3.s-1.m-3racteur). Ces bulles ont pour
objectif de lutter contre le colmatage en surface de la membrane.
La temprature, le pH, la concentration en oxygne, le dbit et la pression de succion sont
enregistrs en continus.
Durant toute cette tude, le pilote a fonctionn sans aucun rtrolavage automatis et
rgulier afin de pouvoir tudier les effets du colmatage sur le milieu biologique et la
filtration. Le BAMI fonctionne donc en filtration frontale externe/interne avec une
alimentation semi-continue dERU et sans rtrolavage squentiel. De plus, les purges
88
quotidiennes ont lieu lors des phases daration du racteur afin davoir une boue
homogne.
3. Rcapitulatif des conditions opratoires

Pour les diffrentes priodes de fonctionnement des racteurs, les valeurs moyennes de
la charge volumique applique et des temps de sjour des boues sont prsentes dans le
tableau II.2.
Tableau II.2: Rcapitulatif des conditions opratoires du BAMI et du BA ltat stabilis
Priode (j)
Systme
BA
BAMI
TSB** (j)
1-52
0,59
9,2
128-217
0,56
32,0
218-319
0,50
14,3
1-52
0,59
9,8
128-217
0,56
37,2
218-282
160,0
283-319
0,50
110,3
320-420
0,54
53,0
3
4
Cva* (kgDCO.m-3.j-1)
**
Cva : charge volumique applique TSB : temps de sjour des boues
Les deux racteurs (BA et BAMI) sont aliments en eau rsiduaire urbaine (ERU) avec le
mme dbit (1 L.h-1). Par consquent :
-
la charge volumique applique (CVa) est identique pour les deux racteurs lors
dune mme priode de fonctionnement (Tableau II.2),
le temps de sjour hydraulique est constant et gal 16 h durant toute ltude.
Par ailleurs, le BAMI et le BA sont totalement r-ensemencs au dmarrage des priodes 1 et

2, alors que la priode 3 est dans la continuit de la seconde priode car seul le dbit de purge
est modifi. Enfin, une 4me priode dbute pour le BAMI, aprs une vidange accidentelle de
60 70% des boues du racteur et son r-ensemencement partiel avec les boues du procd
boues actives.
Pour chaque nouvel ensemencement les boues proviennent dune station dpuration de
Toulouse (Ginestou) dont la concentration en MES est comprise entre 2,5 et 3 g.L-1.
89
II. Caractristiques de leau rsiduaire urbaine

Leau rsiduaire urbaine (ERU) alimentant les racteurs est prleve dans le rseau
dassainissement de la ville de Toulouse. Leau collecte deux fois par semaine (le mardi et le
vendredi 9 heures) subit un dgrillage (5-8 mm environ) et une dcantation statique de 30
minutes avant son stockage dans des cuves rfrigres 4C. Le tableau II.3 regroupe les
concentrations moyennes en MES, MVS et DCO de lERU durant toutes les priodes de
fonctionnement des racteurs.
Tableau II.3: Caractristiques moyennes de l'eau use d'entre
Priodes (J)
1-52
3/06-24/07
128-217
08/10-05/01
218-319
06/01-16/04
320-420
17/04-26/07
MES (mg.L-1)
15331*
16025
21228
18224
MVS (mg.L-1)
12829*
13326
18325
14815
MVS/MES
0,840,04
0,830,07
0,860,04
0,810,05
DCO totale (mg.L-1)
39539
37742
33531
36132
DCO particulaire (mg.L-1)
24639
20121
21939
22933
DCO soluble** (mg.L-1)
14917
17623
11634
13220
Moyenne effectue sur deux valeurs - **Boue filtre sur filtre 0,45 m
Les concentrations moyennes en MES, MVS et DCO varient sensiblement dune priode de
fonctionnement une autre et au sein dune mme priode. Leau use dalimentation tant de
leau use relle, ses caractristiques changent suivant lactivit humaine et les saisons. Le
rapport MVS/MES est gal 0,840,05 sur lensemble de ltude tandis que la DCO totale
moyenne est de 36459 mg.L-1. Par ailleurs, une concentration maximale en DCO ne
correspond pas obligatoirement une concentration maximale pour les MVS. Par exemple, en
hiver, priode du 218 au 319me jour, la concentration en MES et MVS augmente alors que la
DCO soluble ainsi que la DCO totale diminuent.
90
III. Techniques analytiques mises en oeuvre

1. DCO/MES/MVS
La mthode utilise pour dterminer la DCO se rfre la norme AFNOR NFT 90101. Dans cette tude, la DCO totale correspond la DCO dtermine sur lchantillon brut
alors que la DCO soluble se rfre un chantillon pralablement filtr (GF6 Glasfaser
Rundfilter chez Schleider & Schuell filtre 0,45 m).
La dtermination des MES et MVS est ralise suivant respectivement les normes AFNOR
90-105 et AFNOR 90-029. Si lchantillon est un effluent de sortie de racteur il est filtr sur
filtre de 0,45 m de diamtre moyen des pores (GF6 Glasfaser Rundfilter chez Schleider &
Schuell) ; si lchantillon est lERU ou la boue de racteur, il est centrifug pendant 15
minutes 4200 G et 20C.
2. Indice de boue
Lindice de boue (IB) ou indice de Mohlman (IM) reprsente le volume occup par une boue
aprs 30 minutes de dcantation et ramen la concentration en MES du test (Equation II.1).
IB =
V30
[MES]test
(II.1)
Avec : IB : indice de boue (mL.g-1)

V30 : volume du dcantat aprs 30 minutes de dcantation (mL)
[MES]test : concentration en MES du test (g.L-1)
Cette mesure est effectue dans une prouvette en verre de 1L en labsence de vibration. La
valeur de V30 doit tre infrieure 30% du volume initial de boue afin dviter toutes
interactions entre particules pendant la phase de dcantation (Jenkins et al. 1984). Si tel nest
pas le cas, les boues sont dilues avec le surnageant des boues. Une valeur dindice de boues
comprise entre 150 et 170 mL.g-1 est considre comme une limite maximale pouvant
caractriser une bonne dcantabilit (Forster 1985). Cependant, lindice de boues est un
paramtre "hybride" qui ne dpend pas que de la vitesse de chute mais caractrise aussi
lpaississement de la boue cest--dire la capacit du lit de boue se compacter (Figure II.3).
91
Hauteur de linterface
Clarification
Coalescence
Dcantation
en masse
Interface
Dcantation
en masse
Zone de
transition
Compression
Compression
Temps
Test de dcantation
Figure II.3: Rgimes de sdimentation
Quatre zones de sdimentation sont distingues :

1. Coalescence : dans cette zone la floculation des particules prend place.
2. Dcantation en masse : les flocs dcantent ensemble la mme vitesse, constante
au cours du temps.
3. Zone de transition : la densit des flocs devient importante, les flocs se rencontrent
lors de leur chute et ces interactions ralentissent la sdimentation des agrgats.
4. Compression : le milieu est trs concentr et lensemble des particules se comporte
comme un milieu poreux. Si la matire est compressible les boues se compactent en
liminant leau libre et leur concentration augmente. Cette phase caractrise donc la
capacit de la boue spaissir et est lie la densit et la dformabilit des flocs.
Enfin, directement aprs la fin des 30 minutes du test de sdimentation, la turbidit est
mesure sur le surnageant de la dcantation laide du turbidimtre HACH Ratio XR
Turbidimeter (Gamme de mesure 0-2000 NTU, incertitude de mesure gale 20% sur
lchelle 0-20 NTU ou 20-200 NTU ou 200-2000 NTU).
3. Analyse granulomtrique
La mesure de la taille des flocs est dtermine avec un granulomtre Mastersizer 2000
(MALVERN Instruments SA). Cette technique repose sur la proprit des matriaux
diffracter la lumire. Toutes les particules claires par un faisceau laser diffractent la lumire
dans toutes les directions avec une rpartition dintensit qui dpend de leur taille.
92
Les lois propres au phnomne de diffraction ne sont facilement applicables que dans
certaines conditions :
- les particules sont sphriques, homognes, isotropes,
- les mouvements des particules sont alatoires,
- les particules sont suffisamment loignes les unes des autres,
- le milieu est transparent et ne prsente pas dabsorption du faisceau laser.
Dans la pratique, un chantillon de boue dilue avec leau de sortie des racteurs
pralablement filtre sur 0,2 m, est inject dans une cellule de mesure claire par un
faisceau laser (Figure II.4). Lchantillon est aspir dans la cellule de mesure grce une
pompe pristaltique situe en aval de la cellule. Les boues ne sont donc pas soumises un
cisaillement d au pompage avant la mesure. La lumire diffracte par lchantillon est
collecte par une lentille et focalise sur un dtecteur plac dans le plan focal de cette lentille.
Pompe
pristaltique
Lentille
Lentille
laser
Dtecteur
Cellule de
mesure
Echantillon
Figure II.4: Schma de principe du granulomtre
Dans cette tude, lindice de rfraction du dispersant est considr gal 1,330 et correspond
lindice de rfraction de leau. Quant aux flocs biologiques, ils sont constitus
principalement de matire organique, cest pourquoi lindice de rfraction choisi ici est celui
utilis classiquement pour ces composs, soit 1,596 (Lambert S. 2000).
Pour tous les rsultats fournis, au minimum 3 analyses sur le mme chantillon sont
effectues. Le logiciel intgr lappareil (Mastersizer 2000) donne alors la distribution
granulomtrique en volume, en nombre ou en surface des flocs en considrant les particules
sphriques (Figure II.5).
93
Rpartition en volume (%)
10
8
6
4
2
dpic
0
1
10
100
1000
Taille des particules (m)
10000
Figure II.5: Exemple de distribution granulomtrique d'une boue de BA
Cette distribution permet dvaluer le diamtre correspondant au pic de la distribution et le

diamtre moyen. Les distributions granulomtriques obtenues sur nos chantillons de boues
taient pratiquement toutes symtriques et unimodales. Le diamtre correspondant au
maximum du pic est donc trs proche du diamtre moyen des flocs.
Par ailleurs, le granulomtre Mastersizer 2000 (Malvern) permet dobtenir la dimension
fractale des flocs. Elle correspond la capacit dun objet remplir lespace et est
classiquement comprise entre 1,7 et 2,5 pour des flocs biologiques. Une dimension fractale
leve correspond un floc compact alors quune faible valeur indique un floc plutt poreux.
La dimension fractale est lie la masse de lagrgat et sa taille (Equation II.2).
M(R) RDf
(II.2)
Avec M(R) : masse de lagrgat

R : taille de lagrgat
Df : dimension fractale
En pratique, lors du passage dune solution contenant des particules travers un faisceau
lumineux, les particules dispersent la lumire. Lintensit de la lumire disperse et les
valeurs du vecteur donde permettent alors dobtenir la dimension fractale (Equation II.3).
I(q) q-Df
Avec I : intensit disperse
q : vecteur donde
94
(II.3)
Le vecteur donde (q) est dfini daprs lquation II.4 :

q = 4 n/ sin (/2)
(II.4)
Avec n: indice de rfraction du floc

: longueur donde
: angle de dispersion (donn par la socit Malvern)
Ainsi, la dimension fractale est obtenue en traant lintensit disperse en fonction du vecteur
donde. La pente de la courbe reprsente alors la dimension fractale (Figure II.6).
2
Df
Log (I)
-1
-5
-4
-3
-2
Log (q)
-1
-2
0
Figure II.6: Exemple de calcul de la dimension fractale
Cette mthode destimation de la dimension fractale est correcte pour des flocs de taille
infrieure 200 m (Guan et al. 1998).
4. Evaluation de la filtrabilit dune boue

Le pouvoir colmatant des boues est dtermin laide dun systme de filtration
membranes immerges (Figure II.7) fonctionnant avec de petits volumes dchantillons de
boues (2L).
La boue biologique introduite dans le systme est are (2 L.min-1) au moyen dun petit fritt
situ au bas du racteur. Le racteur est thermostat la mme temprature (20C) que celle
rgnant dans le BAMI et le BA.
La succion travers les membranes identiques celles utilises dans le BAMI (Tableau II.4)
seffectue un dbit constant par une pompe pristaltique.
95
Tableau II.4: Caractristiques des membranes (Polymem)
Matriau
Polysulfone
Type
Fibres creuses
Permabilit 20C (L.h-1.m-.bar-1)
700
Surface membranaire (m)
0,1
Diamtre des pores (m)
0,2
Diamtre externe des fibres (mm)
0,72
Diamtre interne des fibres (mm)
0,38
Figure II.7: Photo du racteur

membranaire
a. Calcul de la vitesse de colmatage
La vitesse de colmatage est value en mesurant lvolution au cours du temps de la

pression transmembranaire pour diffrents flux de succion fixs. De faon pratique, un
nouveau dbit de succion est fix toutes les 10 minutes pendant lesquelles la pression
transmembranaire et la temprature du permat sont releves (Figure II.8a). A la fin des 10
minutes de filtration, le dbit de succion est directement augment.
Le flux de permation 20C est valu par mesure du dbit de permat (Equation II.5) et en
corrigeant la viscosit de leau en fonction de la temprature relle mesure (Texp) :
Fp ( 20C ) =
V (Texp)
*
S.t (20C)
Avec : Fp (20C) : flux de permation 20C (m3.m-2.s-1)

V : volume de filtrat recueilli pendant le temps t (m3)
t : temps (s)
S : surface de filtration (m)
: viscosit dynamique du permat (Pa.s)
96
(II.5)
La viscosit de leau une temprature donne (T en C), est value en utilisant la

formule II.6 (Serra 1996) :
(20 - T)
(T) = 1,002 exp 3,056
(T + 105)
(II.6)
Ensuite, connaissant tout moment, la valeur de la pression transmembranaire, il est possible

de calculer la valeur de la rsistance au colmatage en utilisant le modle des rsistances en
srie (Equation II.7). La rsistance initiale de la membrane a t dtermine pralablement
avec de leau ultrafiltre.
Fp (20 C) =
PTM
(20C) (R m + R C )
(II.7)
Avec : Fp (20C) : flux de succion 20C (m3.m-2.s-1)

(20C) : viscosit dynamique du permat 20C (Pa.s)
PTM : pression transmembranaire (Pa)
Rm et Rc : respectivement rsistance de la membrane et rsistance de
colmatage (m-1)
Ainsi, pour chaque flux de permat maintenu stable, une augmentation de la pression
transmembranaire traduit une augmentation de la rsistance de colmatage (Figure II.8b).
Durant les 10 minutes de filtration un flux donn constant, lvolution de la rsistance de
colmatage peut tre mesure. La vitesse de colmatage, dfinie ici comme la variation de la
rsistance de colmatage au cours du temps, est alors calcule par extrapolation de la courbe
donnant la variation de la rsistance de colmatage en fonction du temps (Equation II.8):
VC =
dRC
dt
Avec
VC : vitesse de colmatage (m-1.h-1)
Rc : rsistance de colmatage (m-1)
t : temps (h)
97
(II.8)
Durant une phase de 10 minutes de filtration, une vitesse moyenne (VC) de colmatage peut
tre dfinie partir de la rsistance de colmatage en tout dbut du cycle ( linstant t1) et de la
rsistance de colmatage en fin de cycle ( linstant t2) (Equation II.9).
RC
VC =
RC2 RC1
(II.9)
t2 t1
Ceci revient considrer que, sur des priodes de 10 minutes, la vitesse de colmatage volue
linairement ce qui est vrifi dans de nombreux cas (Figure II.8 c).
Fp
Fp3
RC
PTM
Fp3
Fp2
Fp2
Fp1
Fp1
temps
temps
RC
Fp1
Fp3
Fp2
Fp
c
Figure II.8: Mthode de dtermination du pouvoir colmatant dune boue
Cette mthode dite "par pallier de flux" permet dobtenir une caractristique de la filtrabilit
dun chantillon biologique dans un systme de rfrence. Chaque fluide pourra tre
caractris par une courbe qui prsente la vitesse moyenne de colmatage en fonction du flux
de permat.
98
b. Calcul du produit .C
Un modle de filtration sur gteau flux constant a t utilis afin de suivre lvolution de la
rsistance du dpt (Equation II.10):
dPTM =
Fp . . . C
S
dV
(II.10)
Avec Fp : flux de succion (m3.m-2.s-1)

: viscosit dynamique du permat (Pa.s)
: rsistance spcifique du gteau (m.kg-1)
C : quantit de matire dpose (kg/m3)

V : volume de filtrat (m3)
S : surface de filtration (m2)
La quantit de matire dpose (C) nest pas connue. On fonctionne en filtration frontale,
mais du fait de laration sous les membranes une partie des particules qui tait associe au
volume de boue, ne se dpose pas sur la membrane. Nous allons donc caractriser le produit
.C.
En considrant .C constant sur toute la priode de mesure, il est possible de dterminer la

valeur du produit .C pour chaque cycle en mesurant lvolution de la pression
transmembranaire en fonction du volume filtr et en calculant la pente de la droite
PTM = f(V) (Figure II.9).
PTM
Fp . . . C
S
Volume
filtr
Figure II.9: Mthode de dtermination du produit .C
99
Lorsquun nouveau cycle commence le flux de permat est augment. Le volume total de
filtrat recueilli la fin de ce cycle (i) est gal la somme des volumes de filtrat lors des cycles
prcdents (1
i-1) et du volume de filtrat pour ce cycle (i) (Equation II.11).
Vi = Fpi . S . (t) + Vi-1
(II.11)
Avec Vi: volume de filtrat au cycle i (m3)

Vi-1 : volume de filtrat recueilli aux cycles prcdents (m3)
Fpi : flux de permat au cycle i (m3.m-2.s-1)
S : surface de filtration (m2)
t : dure du cycle (s)
5. Extraction et dosage des EPSlis et EPSsolubles

a. Protocole dextraction retenu
Le protocole dvelopp permet de sparer les EPS prsents dans les flocs et ceux
prsents au sein du surnageant, dans lobjectif de les quantifier. Une mthode couple
sonication/rsine changeuse de cations est utilise. Les raisons qui ont conduit ce choix
sont expliques en annexe 1. Pour rsumer, lextraction des EPS des flocs est effectue de
manire quantifier les protines, les polysaccharides et les substances humiques tout en
vitant une lyse cellulaire.
Durant toutes les tapes dextraction des EPS les solutions sont conserves 4C dans de la
glace pile, afin dviter une lyse cellulaire et donc un relargage de polymres intracellulaires.
De mme, toutes les dilutions sont effectues avec un tampon phosphate (Na3PO4 2mM,
NaH2PO4 4mM, NaCl 9mM, KCl 1mM) de pH quasiment quivalent celui des boues
(pH=7). La pression osmotique des deux cts des parois des cellules est ainsi similaire ce qui
permet de prvenir la lyse cellulaire. Enfin, avant utilisation, la rsine est pralablement
lave : 1kg de rsine est plac sous agitation (180 rpm) avec 2L de tampon phosphate pendant
1 heure puis, aprs dcantation durant 5 minutes, le surnageant est limin ; la rsine est alors
laisse 1 nuit ltuve 30C. Le protocole dextraction est dcrit la figure II.10.
100
V0 de Boue
10 mL du
tampon
phosphate de
lavage de
lprouvette
(4C)
10 mL du
tampon
phosphate de
lavage de
lprouvette
(4C)
Centrifugation
(4200 G, 15 min, 4C)
Centrifugation
(4200 G, 15 min, 4C)
40 mL tampon
phosphate
(4C)
Surnageant
Surnageant
(4C)
(4C)
V0 boue
de Boue
V0 de
40 mL tampon
phosphate
(4C)
Culot
Culot
Culot
Culot
10 mL du tampon
phosphate ayant servi
laver
le tube de ltape de
sonication
Sonication
(20s, 37W, 4C)
Surnageant
Surnageant
(4C)
(4C)
Sonication
(20s, 37W, 4C)
Rsine (70g.gMVS-1 ,
500rpm,
500rpm,
4C,
4c,45min)
45min)
Dcantation
(5min, 4C)
Centrifugation surnageant
de dcantation
(20000g, 15 min, 4C)
Figure II.10 : Protocole d'extraction des EPSlis
101
Tout dabord un volume Vo de boue est prlev lprouvette gradue et plac dans un pot de
centrifugation. Ce volume est choisi par rapport la concentration en MVS (MVSr) de
lchantillon (Equation II.12) :
V0 =
0,1.103
MVSr
(II.12)
Avec V0 : volume dchantillon prlev (mL)

MVSr : concentration en MVS de lchantillon (la dtermination des
MVS ncessitant 24h la concentration prise ici est celle des
boues de la veille)(g.L-1)
Ce volume est donc diffrent au cours de ltude, la concentration en MVS des racteurs
fluctuant, mais permet davoir un volume et une concentration toujours identique ltape des
ultrasons. Lprouvette ayant servi au prlvement de lchantillon est ensuite nettoye avec
10 mL de tampon phosphate. Les eaux de lavage sont alors ajoutes la boue place dans les
pots de centrifugation.
Suit alors une tape de centrifugation (4200 G, 15 min, 4C) dont le but est de sparer les
exopolymres solubles prsents dans le surnageant, des exopolymres lis aux flocs et
prsents dans le culot de centrifugation. Les exopolymres solubles sont ensuite stocks dans
un flacon bouch et entour de glace pile pendant que lextraction des exopolymres lis aux
flocs continue.
Le culot de centrifugation est alors remis en suspension avec 40 mL de tampon phosphate.
Cette nouvelle solution est ensuite passe aux ultrasons (20s, 37W, 4C). Les conditions ont
t choisies pour viter une lyse cellulaire. Lors de cette tape il est important que le volume
et la concentration en MVS de la solution soient toujours les mmes dune extraction
lautre. En effet, pour pouvoir comparer les rsultats entre eux, lextraction doit toujours tre
mene de faon identique. Il faut donc que lefficacit des ultrasons soit toujours la mme.
Pour cette raison, le volume V0 du dpart est choisi de faon garantir une concentration en
MVS ltape des ultrasons gale 2,5 g.L-1. Durant cette tude il tait compris entre 20 et
60 mL.
Aprs sonication, la solution est ensuite introduite dans un bcher entour de glace pile. Les
10 mL de tampon phosphate qui servent laver le rcipient ayant contenu la solution sonice
sont ajouts dans le bcher ainsi que 70g de rsine / gMVS (Dowex G50*8, forme Na+, Merck
44445).
Le contenu du bcher est ensuite mis sous agitation 500 rpm pendant 45 minutes. Cette
tape permet de solubiliser les EPS. La dcantation (5 min 4C) qui suit permet de rcuprer
102
uniquement le surnageant qui est centrifug 20000 G pendant 15 minutes 4C. Le

surnageant de centrifugation contient alors les EPS qui au dpart taient lis aux agrgats
biologiques.
b. Protocole de dosage des EPS
En ce qui concerne le dosage des EPS, toutes les mthodes dcrites ci-dessous font
rfrences des mthodes classiques de dosages colorimtriques. Dans tous les cas, la lecture
des absorbances seffectue laide dun spectrophotomtre et les dosages sont rpts deux
fois. Lorsquil sagit dune concentration en exopolymres prsents dans le surnageant, celleci sexprime en mg dquivalent du produit talon par litre dchantillon. Pour les EPS lis,
elle est exprime en mg dquivalent du produit talon par gramme de MVS prsent
initialement dans lchantillon.
b.1 Dosage des protines et substances humiques
Les protines sont doses suivant la mthode de Lowry modifie par Frolund (1995).
Elle consiste former un complexe entre les liaisons peptidiques et le sulfate de cuivre
CuSO4, en milieu alcalin. Ce complexe rduit alors les acides phosphomolybdiques et
phosphotungstiques du ractif Phnol-Folin-Ciocalteau pour donner un second complexe de
couleur bleue, mesur au spectrophotomtre 750 nm. Toutefois, lors de lutilisation de cette
mthode, Davis (1988) met en vidence des interfrences lors de la lecture au
spectrophotomtre dues aux substances humiques. Frlund et al. (1995) ont modifi alors la
mthode tablie par Lowry pour prendre en compte les substances humiques dans la mesure
des protines. Cette mthode est base sur la mesure du dveloppement de couleur en
prsence et en labsence de CuSO4.
En prsence de CuSO4, aussi bien les protines que les substances humiques sont doses. En
labsence de CuSO4, le dveloppement de couleur est d aux composs humiques et aux
acides amins chromognes, alors que la coloration dveloppe par le BSA est rduite de 20%
(Frolund et al 1995). A partir des absorbances lues, il est alors possible de dterminer
labsorbance des protines et des substances humiques (Equations II.13 II.14) :
Abs totale avec CuSO4 = Abs protines + Abs substances humiques
(II.13)
Abs totale sans CuSO4 = 0,2*Abs protines + Abs substances humiques
(II.14)
103
Des deux premires quations, il vient :

Abs protines = 1,25* (Abs totale avec CuSO4 Abs totale sans CuSO4)
(II.15)
Abs substances humiques = Abs totale sans CuSO4 0,2*Abs protines
(II.16)
Le protocole opratoire de dosage des protines et des substances humiques est dcrit dans le
tableau II.5.
Tableau II.5 : Protocole de dosage des protines et substances humiques
En prsence de CuSO4
En absence de CuSO4
5 mL de (F)
5 mL de (H)
+ 1 mL dchantillon
+ 1 mL dchantillon
Homognisation au vortex
Repos pendant 10 minutes temprature
Repos pendant 10 minutes temprature
ambiante
ambiante
+ 0,5 mL de (G)
+ 0,5 mL de (G)
Repos 15 min lobscurit
Lecture 750nm contre un blanc ractif
Lecture 750nm contre un blanc ractif
(tampon phosphate)
(tampon phosphate)
Avec (A): CuSO4.5H2O (1% m/V)

(B): Tartrate de Potassium et de Sodium (2% m/V)
(C): NaOH (0,2M)
(D): Carbonate de Sodium (4% m/V)
(E): Ractif De Folin (2N)
(F): 49mL (D) + 49mL (C) + 1mL (A) + 1mL (B)
(G): (E) / 2
(H): 49mL (D) + 49mL (C) + 1mL eau + 1mL (B)
Les concentrations en protines et en substances humiques sont tablies partir de gammes
talons ralises, respectivement, avec du srum albumine bovin (Sigma A7906) et des acides
humiques (Fluka 53680).
104
b.2 Dosage des polysaccharides
La mthode colorimtrique utilise ici est celle tablie par Dubois et al. (1956).
Lchantillon est chauff en prsence dacide sulfurique et de phnol. Les polysaccharides
sont hydrolyss, durant le chauffage, par lacide sulfurique puis les monosaccharides sont
dshydrats par le phnol (coloration orange).
Le protocole opratoire de dosage des polysaccharides est dcrit dans le tableau II.6.
Tableau II.16: Protocole de dosage des polysaccharides
Polysaccharides
1 mL de Phnol 5% m/V
+ 1 mL dchantillon
5mL dH2SO4 concentr
Bain marie 100C pendant 5 min
Lecture 492nm contre un blanc ractif (tampon phosphate)
La concentration en polysaccharides des flocs est tablie partir dune gamme talon ralise
avec du glucose (D-glucose, anhydrique, 99%, Acros organics).
6. Dtermination de la production de boues

La production journalire de boue (Pxjour) est dtermine en prenant en compte la quantit de
boue purge, laccumulation de biomasse (MVS) au sein du racteur biologique et la
concentration en MVS en sortie (Equation II.17). La DCO limine quotidiennement est
estime laide de lquation II.18.
La DCO soluble de leffluent trait correspond au permat de lchantillon filtr sur filtre de
diamtre moyen des pores de 0,45 m.
105
Px
jour
= Q .MVS + V .MVS + Q .MVS

p
r
r
r
s
s
DCO
jour
(II.17)
(II.18)
= Q .DCO (Q + Q ).DCO
e
e
s
p
s.s
Avec :
Qe
: dbit dentre (L.j-1)
Qs
: dbit de sortie (L.j-1)
Qp
: dbit de purge (L.j-1)
DCOe
: DCO totale en entre (gDCO.L-1)
DCOs.s
: DCO soluble de sortie (gDCO.L-1)
MVSr
: variation de la concentration en matires volatiles en suspension

dans le racteur (g.L-1.j-1)
MVSr,s
: concentration en matires volatiles en suspension dans le

racteur ou en sortie (g.L-1)
Les valeurs de Pxjour et DCOjour permettent de calculer llimination de DCO cumule

(Equation II.19) ainsi que la production de boue cumule (Equation II.20).
DCO
Px
cumule
cumule
i
DCO jour
jour = 1
(II.19)
i
Px jour
jour = 1
(II.20)
Le rapport des pentes des droites ainsi traces reprsente alors le rendement de production de
400
Pxcumule (gMVS.j-1)
DCOlimine (gDCO.j-1)
boue en gMVSproduit.gDCOlimine-1 (Figure II.11).
300
200
100
0
10
20 30
Temps (j)
40
50
120
90
60
30
0
10
20 30
Temps (j)
Figure II.11 : Exemple destimation du rendement de production de boues
106
40
50
CHAPITRE III
ANALYSE COMPARATIVE DUN
PROCEDE BIOREACTEUR A
MEMBRANES IMMERGEES ET DUN
PROCEDE A BOUES ACTIVEES
Chapitre III : Analyse comparative dun procd bioracteur membranes immerges et dun procd boues actives
Lobjectif de ce chapitre est de comparer les performances obtenues avec le BAMI et

le procd boues actives lors de leur fonctionnement long terme, tous deux aliments par
une mme eau rsiduaire urbaine.
La premire partie de ce chapitre permet de comparer les performances globales dlimination
de la DCO et des EPS solubles spcifiques. Elle fournira des informations sur le rle de la
membrane dans la rtention des composs solubles. La stabilit des performances ainsi que
linfluence des conditions opratoires (ge des boues) sont discuts. Signalons ici que la
comparaison des activits biologiques et des cintiques de dgradation entre le BAMI et le
procd boues actives fait lobjet dune autre thse ralise au laboratoire (LIPE) par Mme
Espinosa-Bouchot.
Dautre part, la deuxime partie de ce chapitre analyse le potentiel de minimisation de la
production de boues par le BAMI et permettra de comparer la production de boues celle du
procd boues actives, et ce pour diffrents ges de boues.
I. Performances dlimination de la DCO

1. Performances globales
Les performances dpuration de la DCO par les deux procds pour diffrents ges de
boues sont regroupes sur la figure III.1. Le calcul des performances est ralis en considrant
750
100
600
80
450
60
300
40
150
20
0
0
50
100
150
200
250
Temps (j)
300
350
Rendement (%)
-1
DCO soluble (mg.L )
la DCO soluble de sortie des deux pilotes.
400
0
450
Figure III.1: Efficacit d'puration de la DCO par les deux procds

DCO totale ERU ( ) ; DCO soluble de sortie du BAMI ( ) du BA ( ) ; Rendement BAMI ( ) BA ( ).
BAMI (1:TSB=9,8 j / 2:TSB=37,2 j / 3:TSB=160,0 ;110,3 j / 4:TSB=53,0 j)
BA (1:TSB=9,2 j / 2:TSB=32,0 j / 3:TSB=14,3 j)
107
Quelle que soit la priode considre, vis vis des substances solubles en sortie du procd
les deux racteurs prsentent des rendements dlimination de la DCO quasiment quivalents
et en moyenne proche de 90%. Les concentrations en DCO soluble en sortie des deux
procds ne sont pas statistiquement diffrentes tant donn quelles sont majoritairement
comprises entre 20 et 40 mg.L-1, gamme o lerreur de mesure est de 20 25%.
Par ailleurs, pour les deux procds, une augmentation de la pollution organique de leau
use, comme par exemple les 44me, 409me jours ou durant la priode allant du 324 au
326me jour, ne se traduit pas ncessairement par une augmentation de la DCO soluble de
sortie.
Toutefois, si on intgre les matires en suspension dans ce bilan, et du fait des problmes
occasionnels survenant sur le dcanteur dans le procd boues actives, la DCO de sortie du
racteur boues actives est souvent suprieure la DCO soluble de sortie alors que dans le
BAMI la DCO totale reste gale la DCO soluble (Figure III.2).
300
-1) -1
DCO
(mg.L
DCO
ERU
(mg.L
)
DCO totale sortie BA

DCO soluble sortie BA
200
2
3
100
0
0
50
100
150
200
Temps (j)
250
300
350
Figure III.2: volution de la DCO la sortie du procd boues actives

BA (1:TSB=9,2 j / 2:TSB=32,0 j / 3:TSB=14,3 j)
Dans le procd boues actives, la prsence de DCO particulaire en sortie correspond une
fuite de MES dans le surnageant du dcanteur. Les dysfonctionnements de la dcantation sont
principalement dus une variation du dbit daration (chute du dbit daration entre le
147me et le 150me jour) ou lapparition dorganismes filamenteux (entre le 274me et le
284me jour).
108
2. Rle de la rtention membranaire : tude dynamique

Lors de lutilisation du procd boues actives, les concentrations en composs
solubles des boues sont identiques celles en sortie du dcanteur. En ce qui concerne le
bioracteur membranes, la membrane qui retient 100% des MES, peut galement retenir une
partie des composs solubles et collodaux. Nous avons donc compar les concentrations en
composs solubles dans le surnageant et le permat de manire valuer la capacit de
rtention de la membrane en composs solubles (Figure III.3).
300
DCO permat
2
-1
DCO (mg.L )
DCO surnageant de boue
200
100
0
0
50
100
150
200
250
Temps (j)
300
350
400
450
Figure III.3: Evolution de la DCO du surnageant des boues et du permat du BAMI

(1:TSB=9,8 j / 2:TSB=37,2 j / 3:TSB=160,0 ;110,3 j / 4:TSB=53,0 j)
Comme le montre la figure III.3, quel que soit lge des boues, lensemble membrane + dpt
retient une partie de la DCO du surnageant (mesure effectue sur lchantillon de boue filtre
sur filtre 0,45 m). Ce taux de rtention en DCO varie de 28 88%. Le BAMI atteint alors
des rendements dpuration en DCO suprieurs 75%. La plupart des travaux montrent que
les membranes utilises en traitement des eaux uses retiennent une partie de la matire
organique du surnageant (Lee et al. 2003, Huang et al. 2000, Reid et al. 2004). Ainsi, Lee et
al. (2003) avec un BAMI aliment en effluent synthtique a galement montr que 73 79%
de la DCO du surnageant (collodes + solubles) est retenue par la membrane colmate
(Tableau III.1). Ces rsultats ont t obtenus pour une gamme dge de boues plus faible et
pour une concentration en DCO dans le surnageant plus faible que celle que nous avons
obtenue (jusqu 270 mg.L-1).
109
Tableau III.1: Rle de la membrane dans l'puration des composs solubles

(centrifugation 366 rad.s-1 pendant 5 minutes) (Lee et al. 2003)
Rfrences
Lee et al.
(2003)
(a)
MVS
DCO (mg.L-1)
TSB TSH
Rendement (%)
(g.L-1)
(j)
(h) Entre Surnageant Permat Procd(b) Membrane(a)
2,8
20
7,8
300
42,36,3
11,53,7
96
73
4,4
40
7,8
300
38,510,1
9,03,5
97
77
5,5
60
7,8
300
35,811,2
7,63,8
97
79
Elimination de la DCO soluble par la membrane (b) Elimination de la DCO soluble par le systme
Au final, le permat est pratiquement exempt de matires organiques et le procd atteint des
rendements dpuration de 90%, quel que soit lge des boues (Lee et al. 2003) ou quelle que
soit la charge volumique (0,4 1,0 kgDCO.m-3.j-1) (Orantes et al. 2003).
La figure III.3 montre galement qu chaque nouvel ensemencement du racteur, la teneur en
DCO du surnageant augmente dans un premier temps puis chute. Shin et al. (2003) observent
le mme type de rsultats lorsquils utilisent un BAM aliment par un effluent synthtique
(Figure III.4).
16
BAM
-1
DCO
COD
PMS (mg.L
(mgC.L-1) )
14
12
Temps (j)
10
8
Surnageant des boues
Sortie
4
2
0
0-50
50-170
TSB (j)
20
TSH (h)
OD* (mg.L-1)
>4
>4
pH
30
60
90
120
Temps (j)
150
180
6,6-7,1
OD: oxygne dissous
Figure III.4: Evolution de la concentration en carbone organique dissous des boues et des sorties dun BAM
(Shin et al. 2003)
Pour notre tude, lors dun nouvel ensemencement, les molcules organiques du surnageant
ont une conformation ou une masse molculaire leve ne leur permettant pas de traverser
lensemble membrane+dpt. Puis lhydrolyse de ces composs permet leur assimilation par
la biomasse et/ou leur passage travers la membrane, ce qui provoque ensuite une diminution
de leur concentration dans le surnageant.
Cette hypothse peut sappuyer sur les observations de Shin et al. (2003) qui ont observ lors
de la chute de la concentration en carbone organique du surnageant de leur BAM, une
110
diminution de la masse molculaire des composs solubles. La proportion des composs de

taille suprieure 30 kDa diminue alors que celle de taille infrieure 10 kDa augmente.
En rgle gnrale, les composs organiques solubles de masse molculaire leve
correspondent aux polymres. Aussi nous avons tudi spcifiquement lvolution dans le
BAMI des concentrations en polysaccharides, protines et DCO du surnageant pour la 4me
60
200
40
100
20
0
320
340
360
380
400
-1
300
EPS (mg.L )
-1
DCO (mg.L )
priode (jours 320 420) (Figure III.5).
0
420
Temps (j)
Figure III.5: Evolution de la concentration en DCO ( ), protines ( ) et polysaccharides ( ) du surnageant,
pour la 4me priode de fonctionnement du BAMI (TSB=53,0 j)
Lvolution de la DCO du surnageant est la mme que celle des polysaccharides et des
protines solubles. Par consquent, la membrane permet daccumuler ces produits microbiens
solubles qui sont lentement biodgradables. En revanche, aucune relation nest trouve entre
lvolution des substances humiques et celle de la DCO (rsultats non prsents). Comme le
confirmera le bilan matire effectu sur les polymres solubles (paragraphe III.3.a), les
substances humiques ne sont quasiment pas retenues par la membrane et ne saccumulent
donc pas dans le bioracteur.
Au final, lvolution de la DCO soluble devrait donc tre corrle la quantit de
polysaccharides et de protines (Figure III.6).
111
300
120
PN+PS
EPS
DCO
4
3
80
100
40
0
0
100
200
300
400
-1
200
PN + PS (mg.L )
-1
DCO (mg.L )
0
500
Temps (j)
Figure III.6: Evolution de la DCO et des EPS (protines (PN) + polysaccharides (PS)) du surnageant de BAMI
Il apparat effectivement que pour lensemble des expriences lvolution de la concentration

en DCO et celle reprsente par la somme des protines et des polysaccharides ont une allure
similaire.
Par ailleurs, il semble que lors dune augmentation du temps de sjour des boues
(Figure III.6) le temps de stabilisation (dure entre la monte et la chute de DCO) augmente
galement. Hejzlar et Chudoba (1986) ou Mukai et al. (2000) constatent que les PMS associs
une lyse cellulaire intense ou un dcs ont gnralement une masse molculaire leve. Il
est donc probable que ces polymres soient plus difficilement biodgradables que ceux
gnrs durant la croissance et ncessitent un temps de dgradation plus long. Le temps de
stabilisation de la DCO soluble serait donc plus lev.
Ainsi, il apparat clairement que la sparation membranaire permet de retenir des macromolcules et des collodes dont le temps de sjour peut alors tre reli au temps de sjour des
boues. La rtention plus importante de ces macro-molcules peut donner un avantage au
bioracteur membrane dans llimination de la matire organique, voire dans la production
de boues. Cela peut, par contre, tre un inconvnient en terme de colmatage. Ces aspects
seront discuts ultrieurement.
112
3 Etude de llimination des EPS solubles

a. Bilan matire sur le BAMI
Le suivi des concentrations en polymres solubles de leau use, du surnageant des

boues et de la sortie du BAMI a t effectu durant une semaine, du 253 au 260me jour. Le
pH des boues tait compris entre 5,8 et 6,6. La fraction soluble correspond au surnageant de
lchantillon centrifug pendant 15 minutes 4C, une vitesse de 4200 G. Les expriences
sont ralises 35 jours aprs le dbut de la 3me priode et correspondent un ge des boues de
160 jours. La concentration en MES durant ces analyses est comprise entre 5,6 g.L-1 et 7,5
g.L-1.
Les proportions au cours du temps de chacun des polymres solubles de leau use
dalimentation sont donnes la figure III.7.
15,9
15,4
12,6
15,3
17,7
18,7
9,1
13,3
19,7
17,9
14,6
12,7
67,6
74,9
71,3
67,6
66,8
67,6
68,5
254
255
256
257
Temps (j)
(j)
Temps
258
259
260
19,7
17,5
12,4
14,9
67,9
253
Figure III.7: Contribution (%) de chaque type de polymre dans les EPS totaux de lERU
[Substances humiques ( ), protines ( ), polysaccharides ( )]
Les caractristiques de leau use dalimentation varient au cours du temps. Ce comportement

rappelle que le BAMI est aliment avec de leau use naturelle et qu ce titre ses
caractristiques voluent. Par exemple, le 254me et le 257me jour, la concentration de chacun
des polymres augmente soudainement car le jour prcdent lERU a t renouvele dans les
cuves de stockage. Cependant, il apparat que pour ces deux jours les proportions en chacun
des polymres restent relativement constantes.
Les substances humiques constituent la majeure partie des polymres solubles de leau
rsiduaire urbaine (66,8 74,9% des polymres soit une concentration comprise entre 37,6 et
52,0 mg.L-1). Ils ont donc une influence prpondrante dans lvolution de la concentration en
EPS totaux.
Les protines reprsentent 9,1 19,7 % des polymres (5,6 15,1 mg.L-1 des exopolymres)
contre 12,6 19,7% (8,1 13,0 mg.L-1) pour les polysaccharides.
113
En ce qui concerne le surnageant des boues du BAMI, celui-ci prsente des proportions en
polymres diffrentes de celles de lERU (Figure III.8).
46,9
51,7
47,3
50,1
16,3
11,4
21,7
15,3
36,7
36,9
31,0
34,7
253
254
255
256
257
Temps
(j)
Temps (j)
47,6
43,2
10,3
42,2
51,3
7,8
56,8
258
41,0
259
260
Figure III.8: Contribution (%) de chaque type dexopolymres solubles dans les EPS totaux des boues du BAMI
Dans le surnageant des boues du BAMI 31,0 56,8% des exopolymres (23,6 53,6 mg.L-1)
sont des substances humiques, 0 21,7% (0 16,6 mg.L-1) des protines et 43,2 51,7%
(33,5 40,9 mg.L-1) des polysaccharides. Les polymres les plus reprsents dans le
surnageant de BAMI sont donc les polysaccharides puis les substances humiques.
Enfin, lanalyse des proportions en polymres du permat est reporte la figure III.9.
27,0
30,9
29,4
20,9
73,0
69,1
49,7
253
254
255
9,4
10,9
28,5
34,6
26,6
23,0
7,6
9,4
79,7
62,1
256
257
Temps
(j)
Temps (j)
65,4
73,4
69,4
258
259
260
Figure III.9: Contribution (%) de chaque type de polymres dans les EPS totaux du permat
Les substances humiques sont les composs majoritaires du permat et reprsentent jusqu
80% des polymres prsents. Les protines reprsentent 0 20,9 % (0 7,4 mg.L-1) des
polymres contre 9,4 34,6 % (2,4 11,4 mg.L-1) pour les polysaccharides.
Il apparat donc que les proportions en chacun des polymres varient selon le fluide analys.
Cela signifie que les concentrations changent galement (Figure III.10).
114
100
60
C (mg/L)
C (mg/L)
80
60
40
40
20
20
0
252
254
256
258
Temps (j)
0
252
260
(1) EPS totaux
254
256
258
Temps (j)
260
(2) Substances Humiques
20
60
C (mg/L)
C (mg/L)
16
12
8
40
20
4
0
252
254
256
258
Temps (j)
0
252
260
(3) Protines
254
256
258
Temps (j)
260
(4) Polysaccharides
Figure III.10: Suivi de l'volution de la concentration en EPS solubles dans

l'alimentation ( ), les boues ( ) et la sortie ( ) du BAMI
Concernant les substances humiques, leur concentration dans lERU est plus leve que dans
le surnageant des boues, except pour le 258me jour. Leur proportion diminue dans le
surnageant des boues (de 66,8 74,9% dans lERU contre 31,0 56,8% dans les boues). Ces
composs ne sont pas produits par les micro-organismes ; cest pourquoi leur adsorption sur
les flocs, leur limination par la purge quotidienne du pilote et leur passage travers la
membrane conduit la diminution de leur concentration au sein du surnageant des boues. La
rtention des substances humiques par lensemble (membrane + colmatage) est trs faible
puisque leur concentration dans le surnageant et la sortie sont proches.
115
Les taux de rtention par la membrane de chacun des polymres sont reports au tableau III.2.
Tableau III.2: Taux de rtention des exopolymres par la membrane
Temps (j)
253
254
255
256
257
258
259
260
Substances Humiques (%) 14,3
0,0
26,2
39,3
34,2
66,9
18,8
Protines (%)
100,0
100,0
55,6
79,2
63,0
100,0
Polysaccharides (%)
75,2
67,9
71,4
80,7
93,2
76,9
76,5
82,3
EPS Totaux (%)
56,9
46,1
54,0
66,1
65,2
71,2
54,7
Le taux de rtention des substances humiques par la membrane est donc denviron 22%
exception faites du 258me jours et confirme donc le passage de ces substances travers la
membrane.
Au contraire, la concentration en protines dans le surnageant des boues (8,9 mg.L-1 en
moyenne) est suprieure leur concentration en sortie du BAMI (1,8 mg.L-1). La rtention
des protines est donc significative (83 % en moyenne). Les protines apportes avec leau
rsiduaire urbaine et celles scrtes par la biomasse saccumulent donc dans le surnageant ;
dans le compartiment concentrat.
Enfin, la concentration en polysaccharides dans le surnageant des boues (34 41 mg.L-1) est 3
4 fois suprieure celle mesure dans le permat (10 mg.L-1). Ces rsultats dmontrent que
lensemble membrane + colmatage permet la rtention importante des polysaccharides (plus
de 68%). La concentration en polysaccharides dans le surnageant des boues du BAMI est
galement plus leve que celle des protines alors quelles taient quasiment identiques dans
leau use dentre. Cela suggre que les polysaccharides sont majoritairement produits dans
le procd et/ou que leur dgradation dans le surnageant est plus difficile que la dgradation
des protines. Une tude mene par Stricot (2004) sur la caractrisation des mcanismes de
scrtion des produits microbiens solubles lors du stockage arobie de boues issues dun
BAMI a montr que les cintiques de dgradation des protines extracellulaires sont plus
rapides que celles des exopolysaccharides. Cependant, les expriences de Stricot (2004) sont
ralises sans alimentation et donc sont relativement diffrentes des ntres. Dans notre cas,
laugmentation du pourcentage de polysaccharides dans le surnageant peut donc galement
venir de leur scrtion accrue par les microorganismes des boues.
116
Pour rsumer, les taux de rtention varient dun polymre lautre et au cours du temps. Les
plus forts taux de rtention sont globalement obtenus pour les protines (55,6 100%) puis les
polysaccharides (67,9 93,2%).
La forte rtention en protines pourrait tre explique par le fait que les protines soient
prsentes sous forme collodale et non soluble et galement par le fait que la slectivit du
procd nest pas due la membrane seule mais lensemble membrane + dpt.
Comparativement aux concentrations mesures dans lERU, celles mesures en sortie restent
relativement constantes durant la semaine danalyse. A nouveau, le bioracteur membranes
montre quil prsente une grande robustesse en garantissant une qualit de leau traite
constante malgr des pics de charge en entre.
b. Bilan matire sur le procd boues actives
De la mme faon que pour le BAMI, les exopolymres solubles du systme boues
actives conventionnel ont t analyss en entre, dans les boues et en sortie de procd.
Lge des boues durant ces analyses taient de 14,3 jours et la concentration en MES
comprise entre 3,9 et 4,5 g.L-1.
100
60
C (mg/L)
C (mg/L)
80
60
40
40
20
20
0
252
254
256
258
Temps (j)
0
252
260
(1) EPS totaux
254
256
258
Temps (j)
(2) Substances Humiques
117
260
16
16
12
12
C (mg/L)
C (mg/L)
0
252
0
252
254
256
258
Temps (j)
260
(3) Protines
254
256
258
Temps (j)
260
(4) Polysaccharides
Figure III.11: Suivi de l'volution des EPS solubles dans l'alimentation ( ), les boues ( ) et la sortie ( ) du BA
Les concentrations en polymres solubles de lERU sont les mmes que celles obtenues pour
le bioracteur membranes puisque ces expriences ont t ralises les mmes jours.
La figure III.11 montre que les concentrations en polymres du surnageant des boues sont
quasiment similaires celles de la sortie du racteur. Ainsi, la concentration en substances
humiques est de 10,9 24,2 mg.L-1, celle des polysaccharides de 6,2 12,3 mg.L-1 et celle des
protines de 0 6,9 mg.L-1. Par consquent, les proportions en exopolymres dans le
253
254
255
256
257
Temps (j)
258
259
28
64
Bo
ue
So
rti
e
28
16
56
30
68
Bo
ue
So
rti
e
33
65
59
15
26
Bo
ue
So
rti
e
17
52
17
47
31
32
8
60
Bo
ue
So
rti
e
32
66
36
Bo
ue
So
rti
e
32
9
59
23
46
30
Bo
ue
So
rti
e
34
15
51
26
74
Bo
ue
So
rti
e
29
71
9
63
28
15
56
29
Bo
ue
So
rti
e
surnageant de boue et la sortie sont quasiment similaires (Figure III.12).
260
Figure 0.1: Contribution (%) de chaque polymre soluble dans les EPS totaux des boues/de la sortie du BA
Les carts de concentration en polymres entre sortie et surnageant de boues sont en partie
dus lincertitude des mesures. Par ailleurs, la centrifugation des boues engendre peut-tre
une libration dexopolymres dans le surnageant due au cisaillement provoqu par
lacclration centrifuge. Ds lors, comme le montre la figure III.11, les concentrations
118
mesures seraient plus leves dans le surnageant des boues quen sortie de racteur. De plus,
tant donn notre mthode de sparation des flocs et des composs solubles (centrifugation)
pour lanalyse des polymres du surnageant, des polymres collodaux peuvent tre compts
comme solubles notamment dans le cas dun chantillon de boue. Lorsque la boue arrive dans
le dcanteur, une partie des collodes peuvent dcanter et entraner une concentration plus
faible en polymres dans la sortie. Par consquent, les plus gros carts de concentration en
polymres spcifiques, entre surnageant de boue et sortie, correspondraient aux polymres de
masse molculaire la plus leve.
Pour conclure, les concentrations moyennes obtenues sur lERU, les boues et les sorties de
chaque pilote sont compares (Figure III.13).
-1
Concentration moyenne (mg.L )
80
60
10
37
10
9
40
20
9
9
8
44
31
44
21
10
3
8
3
20
16
Boue
Sortie
0
ERU
Boue
Sortie
ERU
BAMIBAMI
(TSB=160 j)
BA
BA (TSB=14
j)
Figure III.13: Evolution des concentrations moyennes des polymres dans lERU, les boues et la sortie
Par comparaison des analyses ralises sur les 2 procds, il apparat que la concentration
totale en polymres du surnageant des boues est trs suprieure dans le BAMI (68,4
94,4 mg.L-1) par rapport celle du BA (28,8-39,5 mg.L-1). Les concentrations en EPS en
sortie des deux procds sont trs voisines. Une des spcificits du BAMI est donc que, du
fait de la prsence de la membrane, la nature du surnageant biologique est modifie. Une
accumulation de tous les EPS solubles est observe, par rapport au procd boues actives.
Laccumulation la plus forte est celle des polysaccharides, ce qui est expliqu la fois par leur
forte rtention par la membrane et par la plus lente vitesse de biodgradation de ces composs
par rapport notamment aux protines. Signalons cependant que, pour cette comparaison, les
119
deux pilotes ne fonctionnaient pas au mme ge de boues (160 jours pour le BAMI contre 14
jours pour le BA) et qu ce titre les cintiques de production/dgradation des polymres
taient probablement diffrentes.

1. Comparaison des procds et effet de lge des boues
On revendique souvent dans la littrature des valeurs de production de boues infrieures pour
les bioracteurs membranes compares celles des procds classiques dpuration.
Cependant, peu de travaux comparent les productions de boues dinstallations fonctionnant
dans les mmes conditions. Il est alors difficile de dterminer le mcanisme responsable de la
rduction de production de boues. La revue bibliographique a permis de rpertorier un grand
nombre de facteurs pouvant influer sur les mcanismes de production de boues. Ainsi, la
membrane de part sa capacit retenir toute une gamme de composs et/ou les conditions
opratoires telles que le temps de sjour des boues pourraient modifier les stchiomtries
fixant la production de boues.
En outre, pour comparer des rendements de production de boues entre deux systmes, il faut
se placer dans les mmes conditions de fonctionnement. Durant les expriences prsentes ici,
les deux racteurs sont aliments en parallle par le mme effluent urbain et fonctionnent
environ aux mmes ges des boues pour les deux premires priode de fonctionnement
(1re priode : ge de boues de 9,2 jours pour le BA et 9,8 jours pour le BAMI ; 2me priode :
ge de boues de 32,0 jours pour le BA et 37,2 jours pour le BAMI). Pour ces deux priodes
1 et 2, la figure III.14 prsente la stabilisation des concentrations en MES dans les deux boues
et les deux sorties de procds.
120
4
-1
MES (g.L )
-1
MES (g.L )
4
3
2
0
120
10
20 30 40
Temps (j)
50
60
140
160 180
Temps (j)
200
220
MES des boues

35
35
30
25
-1
MES (mg.L )
-1
MES (mg.L )
30
20
15
10
25
20
15
10
0
120 140 160 180 200 220
Temps (j)
10
20 30 40
Temps (j)
50
60
MES en sortie de procds

Figure III.14: Evolution des MES dans les boues et les sorties de BAMI ( ) et de BA ( )
BAMI (1:TSB=9,8 j / 2:TSB=37,2 j) BA (1:TSB=9,2 j / 2:TSB=32,0 j)
De faon similaire dans les deux procds, des pertes de MES par dbordement des boues du
racteur ont eu lieu au dbut de chacune de ces deux priodes. De nouvelles pertes de boues
ont t observes sur le procd boues actives au cours de son fonctionnement, conduisant
des concentrations en MES comprises entre 2,9 et 31,5 mg.L-1 en sortie du procd. Au
final, les concentrations en MES des boues se stabilisent des concentrations lgrement plus
faibles dans le procd boues actives. En considrant la fois les pertes de boues en sortie,
les flux de boues purgs et le terme daccumulation dans le racteur (Chapitre II), les
productions de boues calcules pour ces deux priodes sont pour le BAMI et le BA,
respectivement de 0,31 et 0,30 kgMVS.kgDCO-1 pour la 1re priode contre 0,21 et
0,24 kgMVS.kgDCO-1 pour la 2me priode. Les valeurs sont trs proches, et dmontrent donc que
pour un effluent similaire et un mme ge de boues, il ny a pas de diffrence importante entre
la production de boues dun procd boues actives et un bioracteur membranes
immerges. La capacit rduire la production de boues dun bioracteur membranes
immerges est donc principalement lie laugmentation potentielle du temps de sjour des
121
boues. Sur la figure III.15 sont reportes les valeurs de production de boues concernant notre
tude ainsi que celles trouves dans la littrature.
-1
Yobs (kg MVS.KgDCO )
0,5
0,4
0,3
Notre tude - BAMI
Notre tude - BA
Buisson (1998) - BAMI
Salhi (2003) - BA
Cicek (2001) - BAME
Dlris (2001) - BA
Camacho (2001) - BRT
0,2
0,1
0,0
0
20
40
60
80
100
Age de la boue (j)
120
140
160
Figure III.15: Effet de l'ge des boues sur la production de boues
La figure III.15 fait ressortir que, pour de faibles valeurs de temps de sjour des boues, la
production de boues est leve. Dans ce cas, la croissance de la biomasse est maximise et
mne donc une production de MVS proche du rendement intrinsque classique de
0,45 kgMVS.kgDCO-1 (Metcalf & Eddy 1991). Au contraire, des ges de boues levs, la
production de boues diminue car alors le dcs cellulaire, la lyse et lhydrolyse des macromolcules deviennent prpondrants (Chapitre I). La production de boues tend alors vers une
valeur proche de 0,1 0,12 kgMVS.kgDCO-1.
Il apparat galement que, pour un temps de sjour des boues infrieur 40 jours, la
production des boues dans le racteur membranaire est similaire voire lgrement suprieure
celle du procd classique. Les valeurs de production de boues lgrement plus fortes dans le
systme rtention membranaire peuvent sexpliquer par une meilleure rtention des microparticules, collodes et macro-molcules dont la dgradation est assez lente. A faible ge de
boues ces matires peuvent donc tre simplement accumules et seulement partiellement
dgrades conduisant une production de boues lgrement plus forte. Cette diffrence de
production avec le procd boues actives est cependant peu significative tant donnes les
incertitudes lis aux bilans matire.
Par ailleurs, avec une mme eau use, Salhi (2003) et Dlris (2001) obtiennent avec des
procds boues actives, des rendements de production de boues similaires aux ntres pour
des eaux uses prleves dans le mme rseau dassainissement toulousain et ayant subi le
mme protocole de prlvement. Les valeurs de production de boues trouves par Buisson et
122
al. (1998) (alimentation en eau rsiduaire urbaine dgrille) ou Cicek et al. (2001)
(alimentation en eau synthtique) semblent galement du mme ordre de grandeur. De mme
Ng et al. (2004) ne constatent pas de diffrence de production de boues entre un BAMI et un
procd boues actives fonctionnant de faon similaire des ges de boues infrieurs
5 jours.
Pour un ge de boues trs lev (110 jours) dans le BAMI, et lorsque le fonctionnement tend
vers une rtention totale de la biomasse, nos rsultats sont comparables ceux de
Pollice et al. (2004) qui dmontrent que la production de boues tend vers 0,12 kgMVS.kgDCO-1
en labsence de purge de boues. Par ailleurs, dans le cas dun ge des boues lev nous avons
observ quune population microbienne, les protozoaires notamment, pouvait se dvelopper
au sein du milieu biologique (Figure III.16).
Protozoaire
Figure III.16: Photo prise au microscope de la boue du BAMI fonctionnant 110 jours d'ge des boues
Selon ltude bibliographique les protozoaires pourraient jouer un rle dpurateur biologique
et donc participer au contrle de la production de boues.
2. Modlisation de la production de boue

Linfluence de lge des boues sur la production de biomasse peut tre dcrite par
diffrents modles (Chapitre I).
Selon le modle de Monod associ un concept de dcs cellulaire (ou dactivit endogne),
le rendement de production de boues sexprime comme indiqu lquation III.1 :
Yobs =
YH
1 + kd . TSB
Avec YH : rendement intrinsque de conversion du substrat en biomasse

kd : constante de dcs (bas sur la diminution des MVS) (j-1)
TSB : temps de sjour des boues (j)
123
(III.1)
Dans le modle de maintenance, dvelopp par Pirt (1965), une partie de lnergie est utilise
pour les besoins de croissance et une autre partie pour les besoins de maintenance. Le
coefficient de dcroissance cellulaire est alors proportionnel au rendement de conversion et
lexpression du rendement observ de production de boues devient celui de lquation III.2 :
Yobs =
YH
1 + ms . YH . TSB
(III.2)
Avec ms : taux spcifique de consommation du substrat pour la maintenance

(gDCO.gMVS-1.j-1)
Ces deux premiers modles sont mathmatiquement trs proches. En revanche le modle de
mort et rgnration introduit par Dold et al. (1980) et repris dans les modles ASM (Henze et
al., 1985), fait lhypothse quune fraction de la biomasse dcde est utilise par dautres
micro-organismes (croissance cryptique) et quune fraction de cette biomasse, note fp, est
inerte et saccumule dans la boue. Ceci conduit une expression relativement diffrente de la
production de boue :
Yobs =
YH (1 + b . fp . TSB)
1 + b . TSB (1-YH (1-fp))
(III.3)
Avec b : constante de dcs base sur la biomasse active (j-1)

fp : fraction de biomasse lyse non biodgradable
Pour finir, le modle de "fraction particulaire inerte de leau use" a t ajout dans les
modles ASM. Il est alors considr quune fraction de la DCO de leau use est trop
lentement biodgradable et peut tre considre inerte lchelle de temps du procd. En
association au concept de mort et rgnration, ce modle conduit :
Yobs = fXi + (1 - fXi) .
YH (1 + b . fp . TSB)
1 + b . TSB (1-YH (1-fp))
Avec fXi : la fraction particulaire inerte de la DCO limine du procd
124
(III.4)
Les valeurs des diffrentes constantes (issues de la bibliographie) utilises pour effectuer la
simulation des productions de boues sont regroupes dans le tableau III.3.
Tableau III.3: Valeurs des constantes cintiques et stoechiomtriques
utilises pour la simulation
kd:
0,05 j-1
Metcalf &Eddy (1991)
YH: 0,44 gMVS.gDCO-1
Metcalf &Eddy (1991)
ms : 0,1 j-1
-1
b:
0,62 j
fp:
0,08 gDCO.gDCO-1
Henze et al. (1987)
fXi :
0,1-0,2 gDCO.gDCO-1
Salhi (2003)
Henze et al. (1987)
La plupart de ces modles ont t dvelopps et utiliss dans la bibliographie pour prdire les
productions de boues pour des ges de boues relativement faibles (infrieurs 20 jours).
Lorsque les paramtres issus de la bibliographie sont utiliss, comme le montre la
figure III.17, aucun de ces modles ne prdit correctement la production de boues sur toute la
gamme explore et en particulier les modles de maintenance et de respiration endogne sousestiment la production de boue pour les ges de boues levs.
-1
Yobs (kg MVS.KgDCO )
0,5
Notre tude - BAMi

concept endogne
0,4
concept maintenance
concept mort-rgn., fxi=0,2
0,3
concept mort-rgn., fxi=0,1
0,2
0,1
0,0
0
20
40
60
80
Age de la boue (j)
100
120
140
Figure III.17: Estimation de la production de boues par diffrents modles
Les rsultats obtenus avec le dernier modle (modle de mort-rgnration) montrent que
lhypothse dune fraction inerte particulaire dans leau rsiduaire conduit minimiser
linfluence de lage de boues. En effet au dessus de 40 jours, selon ce modle, lge de boues
a une influence minime sur le rendement de la production de boues.
125
Plusieurs hypothses peuvent alors tre avances :

- la DCO particulaire considre inerte pour des ges de boues faibles est certainement
dgrade pour des ges de boues importants,
- forts ges de boues, il peut y avoir apparition et maintien de nouvelles populations
bactriennes : des micro-organismes taux de croissance faible peuvent se dvelopper
alors quils nen avaient pas la possibilit aux faibles temps de sjour,
- le rendement intrinsque de la biomasse (YH) pourrait diminuer forts ges de boues
puisque ltat physiologique de la biomasse, voire les populations, sont diffrents.
Les paramtres cintiques et stchiomtriques des 3 modles ont t calculs afin dajuster
les modles aux points exprimentaux.
0,5
-1
Yobs (KgMVS.KgDCO )
Notre tude - BAMi

Concept mort-rgn. fxi=0, b=0,1j-1
0,4
Concept endogne, kd=0,02 j-1

Concept maintenance, ms=0,043j-1
0,3
0,2
0,1
0,0
0
20
40
60
80
Age de la boue (j)
100
120
140
Figure III.18: Ajustement des diffrents modles aux donnes exprimentales
Les 3 modles ne permettent de prdire globalement les rendements de production de boues

dans des gammes dge de boues levs que lorsque les taux de diminution de la biomasse
sont rduit par rapport la bibliographie (fXi=0, b=0,1 j-1 / kd=0,052 j-1 / ms=0,043 j-1).
Il ny a donc pas de modle permettant de dcrire prcisment lensemble des donnes. La
prise en compte dune fraction trs lentement hydrolysable a dj t ralise avec succs par
Nowak et al. (1999) pour utiliser les modles ASM sur des gammes dge de boues plus
larges et semble tre lapproche la plus pertinente. Nous verrons dailleurs que certaines
fractions de la boue comme les exo-polymres (polysaccharides notamment) ont des taux de
disparition (hydrolyse) qui peuvent tre plus faibles que les taux de dcs de la biomasse
htrotrophe. Leur cintique dhydrolyse est donc probablement prpondrante ge de boues
lev.
126
III. Conclusion
Ce chapitre nous a permis de comparer le procd boues actives et le bioracteur
membranes en terme dlimination de la matire organique et de production de boues.
La sparation membranaire permet daccumuler une partie des macro-molcules et des
collodes tels que les polymres. A chaque nouvel ensemencement, les polysaccharides et les
protines de masse molculaire leve pourraient saccumuler au sein du surnageant. Dans un
deuxime temps leur concentration chute du fait de leur hydrolyse puis assimilation par la
biomasse et/ou leur passage travers la membrane. Laccumulation la plus importante
concerne les polysaccharides et pourrait tre explique par la rtention leve de ces
polymres associe une scrtion par la biomasse plus importante et/ou des cintiques de
dgradation de ces polymres plus lentes que pour les protines.
La comparaison des productions de boues obtenues pour des temps de sjour des boues
infrieurs 40 jours montre une production similaire entre le BAMI et le procd boues
actives ge de boue identique. Laugmentation de lge des boues permet de minimiser la
production de boues, ventuellement parce qu fort ge de boue des organismes tels que les
protozoaires se dveloppent. La modlisation des productions de boues avec les valeurs des
constantes stchiomtriques et cintiques de la littrature et avec des concepts de
mort/rgnration, de maintenance ou de dactivit endogne ne permet pas de prdire
efficacement les productions de boues relles pour les ges de boues levs :
-
les concepts de maintenance et dactivit endogne tendent sous-estimer la

production de boues,
le concept de mort rgnration tend sur-estimer la production de boues.
Afin de dvelopper un modle de production de boues pouvant modliser une large gamme
dge de boues, il semble pertinent de prendre en compte une fraction de DCO trs lentement
hydrolysable.
127
CHAPITRE IV
INFLUENCE DE LA SEPARATION
MEMBRANAIRE SUR LES
PROPRITS PHYSICO-CHIMIQUES
DUN MILIEU BIOLOGIQUE
Chapitre IV : Influence de la sparation membranaire sur les proprits physico-chimiques dun milieu biologique
Lobjectif de ce chapitre est dtudier linfluence du mode de sparation (dcantation

ou sparation membranaire) et des conditions opratoires sur les caractristiques du milieu
biologique (Figure IV.1).
Sparation
membranaire
Milieu Biologique
Conditions
opratoires
Figure IV.1: Objectif du chapitre IV
Ainsi, ce chapitre considre en particulier :

-linfluence de la mthode de sparation (dcantation ou filtration membranaire),
ge de boues identique (priode 1 et 2),
-linfluence dun ge des boues lev pour le BAMI (priode 3 et 4).
Les caractristiques des boues sont analyses travers les spcificits du surnageant et des
flocs. Ltude bibliographique a mis en vidence le rle important jou par les exopolymres
dans les caractristiques de ces deux fractions. Ce chapitre consacre donc une large place au
rle des EPS et en particulier leur influence dans la structuration des flocs (taille, forme,
compacit).
128
I. Evolution des matires en suspension (MES et MVS)

Au cours du fonctionnement des deux pilotes, la concentration en MES dans les boues
a t suivie durant 4 priodes distinctes (Figure IV.2).
10
-1
MES (g.L )
4
2
6
4
1
3
2
0
0
100
200
300
400
500
Temps (j)
5
-1
MES (g.L )
3
2
3
2
1
0
0
100
200
Temps (j)
300
400
Figure IV.2: Evolution des matires en suspensions dans le BAMI (1er graphique) et le BA (2me graphique)
BAMI (1:TSB=9,8 j / 2:TSB=37,2 j / 3:TSB=160,0 ; 110,3 j / 4:TSB=53,0 j)
BA (1:TSB=9,2 j / 2:TSB=32,0 j / 3:TSB=14,3 j)
Pour la plupart des priodes la concentration en MES volue dans un premier temps puis se
stabilise sauf pour les priodes 3 et 4 du BAMI. Il faut noter quhabituellement un racteur
biologique atteint un rgime de stabilisation aprs une dure de fonctionnement gale
environ 3 fois le temps de sjour des boues. Dans le cas dun ge de boues de 53 jours voire
110 jours pour le BAMI (priodes 4 et 3), il est donc peu probable que le racteur ait atteint
un rgime parfaitement stabilis.
129
A chaque ensemencement des priodes 1 et 2, un moussage (BAMI) ou une mauvaise

dcantation (BA) sont observs, provoquant une diminution de la concentration en MES.
Puis, aprs 20 jours dadaptation de la biomasse aux nouvelles conditions opratoires, les
concentrations des MES dans les boues augmentent et se stabilisent.
Pour le BAMI, les concentrations atteintes la fin des priodes 1 4 sont respectivement
denviron 2 g.L-1, 4 g.L-1, 7,5 g.L-1 et 6 g.L-1. Pour le racteur boues actives, les
concentrations en MES la fin des priodes 1 3 sont respectivement de 1,6 g.L-1, 3 g.L-1 et
2 g.L-1. Par ailleurs, alors que lge de boues est le mme pour les racteurs durant les deux
premires priodes de fonctionnement, la concentration "stabilise" en MES, est diffrente et
suprieure dans le BAMI. La mauvaise dcantation dans le racteur boues actives induit
une perte significative de biomasse la fin des deux premires priodes ce qui explique la
chute des MES des boues du BA et donc, globalement, lcart de MES entre les deux
racteurs.
De plus, dans cette tude, la charge volumique tant quasiment constante, les concentrations
en MES sont dautant plus leves que lge des boues est lev, cest--dire le taux de purge
faible. La figure IV.3 montre les correspondances entre lge des boues et les concentrations
en MES la fin de chaque priode. Pour chaque ge de boues, la concentration en MES
volue au cours du temps jusqu la valeur stabilise.
12
BA
-1
MES (g.L )
BAMI
0
0
20
40
60
Age des boues (j)
80
100
120
Figure IV.3: Evolution de la concentration en MES en fonction de l'ge des boues impos
Ainsi, dans notre mode de fonctionnement, tudier lvolution dun paramtre en fonction de
la concentration en MES revient tudier simultanment linfluence de lge des boues. Par
consquent, pour des raisons de clart, les graphiques de ce manuscrit sont souvent
reprsents en fonction des MES plutt quen fonction de lge des boues.
130
La proportion des matires volatiles en suspension dans les boues est prsente sur
la figure IV.4.
1,0
1,0
0,9
0,8
MVS/MES
MVS/MES
0,9
0,8
BAMI
0,7
BA
0,7
100 200 300 400 500

Temps (j)
100
200
300
Temps (j)
400
Figure IV.4: Evolution du rapport MVS/MES des boues

BAMI (1:TSB=9,8 j / 2:TSB=37,2 j / 3:TSB=160,0 ; 110,3 j / 4:TSB=53,0 j)
BA (1:TSB=9,2 j / 2:TSB=32,0 j / 3:TSB=14,3 j)
Les courbes montrent tout dabord quil ny a pas deffet trs important de la sparation
membranaire sur la proportion de matires organiques et minrales dans les boues. Le rapport
MVS/MES est compris entre 0,8 et 0,9 pour les deux systmes. Cependant, il semble que le
rapport MVS/MES des boues soit lgrement infrieur dans le procd boues actives
lorsque lge des boues est important (priode 2). Ceci est confirm par la figure IV.5 qui
prsente le rapport MVS/MES des boues en fonction de leur concentration en MES.
1,0
MVS/MES
BA
BAMI
0,9
0,8
0,7
0
4
MES (g.L-1)
Figure IV.5: Evolution du rapport MVS/MES des boues en fonction de la concentration en MES
Cette diffrence peut probablement tre explique par le fait que les pertes de boues du BA,
qui sont plus importantes forts ges de boues, sont plus charges en matires organiques que
les flocs qui dcantent.
131
Par ailleurs, contrairement ce qui aurait pu tre attendu, la figure IV.5 montre quune
augmentation des MES et donc de lge des boues ninduit pas une augmentation significative
de la fraction minrale dans le BAMI. En effet, le rapport MVS/MES semble relativement
constant durant toute ltude. Pollice et al. (2004) ou Rosenberger et al. (2002) ne constatent
pas non plus daccumulation de matires inorganiques dans un BAM fonctionnant avec une
quasi absence de purge. Pour le premier auteur, le rapport MVS/MES reste gal 0,80 contre
0,75 pour le second.
Dans notre cas, la concentration en matires minrales dans les boues peut tre influence par
leur concentration dans lERU. La figure IV.6 montre lvolution du rapport MVS/MES de
leau use dentre.
1,0
MVS/MES
0,9
0,8
2
0,7
0
100 200 300 400 500

Temps (j)
Figure IV.6: Evolution du rapport MVS/MES de l'ERU

1:1re priode / 2: 2me priode / 3: 3me priode / 4: 4me priode
Compte tenu de cette figure, il apparat que le rapport MVS/MES de leau use ne prsente
pas de diffrences significatives entre les diffrentes priodes.
Etant donn que les matires volatiles de la boue sont dgrades et minralises de manire
plus importante fort ge de boues, les rsultats montrent donc que la fraction minrale de la
boue est solubilise et de manire plus importante lorsque le temps de sjour des boues
augmente. Ceci peut tre mis en relation avec un pH relativement faible 5-6 observ dans
cette tude qui favorise la solubilisation des prcipits classiques (carbonates, phosphates).
132
II. Caractrisation des flocs

Au cours de ltude, la composition en EPS des flocs a t dtermine dans les deux
racteurs dans lobjectif dtudier les relations pouvant exister entre EPSlis et dautres
proprits des flocs.
1. EPS des flocs

Le tableau IV.1 prsente les gammes des teneurs en EPSlis obtenues pour les deux
boues, toutes priodes et donc tous ges de boues confondus.
Tableau IV.1: Teneurs limites en EPS dans les flocs (mg.gMVS-1)
Protines
Polysaccharides
Substances Humiques
BA
11,5-45,3
4,5-10,9
6,3-19,0
BAMI
5,5-41,3
1,9-25,1
0-16,6
Dans les deux procds, la majorit des polymres lis aux flocs sont des protines. Plusieurs
auteurs utilisant la mme technique dextraction sur des boues urbaines aboutissent cette
mme observation (Cadoret et al. 2002, Martin-C et al. 2001 ou Wiln et al. 2003). Il apparat
galement que lamplitude de variation des teneurs en polymres des flocs est la plus leve
pour les protines.
La figure IV.7 prsente, pour chaque priode et pour chaque racteur, lvolution de la
quantit dEPSlis en fonction des concentrations stabilises en MES. Cette reprsentation
permet simultanment dobserver linfluence de lge de boues puisque celui-ci augmente
avec la concentration en MES.
Sur chaque graphe sont reports la quantit dEPS totaux ainsi que la contribution de chacune
des espces (substances humiques, protines, polysaccharides). Les quantits dEPS totaux
sont calcules comme la somme des teneurs en substances humiques, protines et
polysaccharides.
133
80
80
60
60
-1
EPS (mg.gMVS )
-1
EPS (mg.gMVS )
40
20
0
40
20
0
4
6
MES (g.L-1)
Substances humiques et EPS totaux
4
6
MES (g.L-1)
Protines et EPS totaux
80
BA
60
EPS (mg.gMVS )
-1
BAMI
Substances Humiques
Substances Humiques
Polysaccharides
Polysaccharides
Protines
Protines
EPS.totaux
EPS.totaux
40
20
0
0
4
6
MES (g.L-1)
Polysaccharides et EPS totaux

Figure IV.7: Evolution des EPS prsents au sein des flocs
Par comparaison des deux procds, il apparat tout dabord que les teneurs globales ou
spcifiques en EPSlis ne prsentent pas de diffrences significatives entre les deux
procds tudis. La sparation membranaire ne provoquerait donc pas de
modifications importantes dans la teneur en EPS des flocs lorsque les procds
fonctionnent des ges de boues et des concentrations en MES similaires (ici dans la
gamme 1 4 gMES.L-1).
Par ailleurs, lobservation de lvolution globale des EPS (Figure IV.7), montre que des
tendances gnrales, valables pour les deux procds, se dgagent. Tout dabord, la
concentration totale en EPSlis diminue de 70 environ 35 mg.gMVS-1 lorsque la concentration
en MES augmente de 1 6 g.L-1 ou lge de boues augmente de 9 53 jours. Au del de 6
gMES.L-1 le manque de donnes exprimentales ne permet pas de conclure de faon certaine.
Cette volution a galement t remarque par Cho et al. (2004) pour les mmes gammes de
concentration en MES que les ntres (Figure IV.8).
134
100
EPSlis (mgCOT.gMVS-1)
TSB = 8 jours
80
TSB = 20 jours
TSB = 80 jours
60
40
20
0
2000
4000
6000
8000
Concentration en MES (mgMES.L-1)
10000
Figure IV.8: Relation entre EPSlis et MES pour diffrents ges de boues (TSB) (Cho et al. 2004)
Comme dans notre cas, la variabilit des concentrations en EPSlis est la plus leve pour de
faibles ges de boues.
En ce qui concerne chaque type dEPS, comme indiqu prcdemment (Tableau IV.1), leur
teneur au sein du floc est variable. Lvolution de la teneur en protines, espce majoritaire,
conditionne celle de la totalit des EPS. Une augmentation de lge des boues entrane une
diminution de la teneur en protines de 40 mg.gMVS-1 20 mg.gMVS-1.
Cette diminution de concentration est un peu moins marque pour les polysaccharides et
substances humiques. En effet, aprs une diminution apparente de la quantit de
polysaccharides lorsque la concentration en MES passe de 1 4 gMES.L-1, il semble que leur
teneur augmente pour des concentrations suprieures 4g.L-1, cest--dire pour les plus forts
ges de boues.
Ainsi, une tendance gnrale la diminution des EPS avec laugmentation de lge des
boues est observe. Toutefois, la teneur en polysaccharides prsente un comportement
significativement diffrent de celle des protines (Figure IV.7).
135
Cela nous amne donc tudier lvolution du rapport protines/polysaccharides en fonction

de la concentration en MES et de lge des boues (Figure IV.9).
PN/PS
BAMI
BA
0
0
4
MES (g.L-1)
BAMI
PN/PS
BA
0
0
20
40
60
Age des boues (j)
80
100
120
Figure IV.9: Relation entre le rapport protines/polysaccharides (PN/PS) des flocs et les MES/lge des boues
Le rapport protines (PN) sur polysaccharides (PS) des flocs est en permanence
suprieur 1 et volue en fonction de la concentration en MES et de lge des boues.
Pour une faible concentration en MES, la quantit de protines est trs suprieure
celle des polysaccharides et constitue lespce majoritaire (rapport PN/PS proche de 4).
A fort ge de boues ou lorsque la concentration en MES est leve les flocs voluent vers
des rapports protines/polysaccharides infrieurs 2.
Ainsi, une augmentation de lge des boues pourrait entraner :
1. une conversion de plus de substrat en polysaccharides et/ou moins en protines du
fait de la modification de ltat physiologique des bactries. Ce changement pourrait
notamment seffectuer au profit de la maintenance,
2. une dgradation (hydrolyse ou solubilisation) des protines plus rapide que celle des
polysaccharides en mme temps que la minralisation de la boue.
136
Les rsultats obtenus par Stricot (2004), qui a tudi le stockage arobie de boues issues de
BAM, confirment plutt la deuxime hypothse cest--dire une dgradation des protines
plus rapide que celle des polysaccharides. En effet, cette tude montre que lors dune absence
dalimentation, la quantit de protines dans les flocs dcrot plus rapidement que celle des
polysaccharides. Dans ces mmes expriences, les polysaccharides saccumulent dans le
surnageant contrairement aux protines ce que nous avons galement observ (Chapitre III).
Ceci montrerait que la dgradation des exo-polysaccharides est beaucoup moins rapide que
celle des protines. Selon Stricot (2004), lvolution des protines dans le floc, notamment les
enzymes extracellulaires (hydrolases et autres), semble suivre celle de la fraction de bactries
actives dans la boue ; diminution progressive des bactries actives avec laugmentation de
lge de boues. Au contraire, la cintique dhydrolyse des polysaccharides semble plus lente
et dcouple de celle de la biomasse active globale.
Ces rsultats confirment les hypothses du modle gnral de Laspidou et Rittman (2002). En
effet, lhydrolyse des exopolymres est considre dans ce modle comme une cintique
dordre 1 par rapport au substrat et indpendante de la cintique de dcs de la biomasse.
Suivant les valeurs du taux dhydrolyse et du taux de dcs, ceci peut conduire une baisse de
la concentration en biomasse active plus rapide que celle en exopolymres (cas possible pour
les polysaccharides), ou des vitesses de diminution comparables entre la biomasse et les
EPS (cas des protines dans notre tude).
2. Evolution de la taille des flocs

La distribution de la taille des flocs a t analyse durant tout le fonctionnement des
racteurs. Le diamtre moyen (d50) en volume et en nombre est reprsent aux figures IV.10
et figures IV.11 en fonction de la concentration en MES des deux boues.
4
240
BA
BAMI
diamtre (m)
diamtre (m)
200
160
120
80
40
BA
BAMI
2
1
0
0
0
4
6
-1
MES (g.L )
Figure IV.10: Evolution du diamtre moyen des flocs

(rpartition en volume) en fonction des MES
4
6
-1
MES (g.L )
Figure IV.11: Evolution du diamtre moyen des flocs

(rpartition en nombre) en fonction des MES
137
Les figures IV.10 et figures IV.11 permettent de constater quil existe deux populations de
particules :
- une population nombreuse de fines particules (collodes, bactries libres, fines MES)
de diamtre centr entre 1 et 4 m (visible sur la rpartition en nombre).
- une population de macro-particules (diamtre moyen entre 40 et 250m) dtectables
sur la rpartition en volume.
Pour une mme concentration en MES, le diamtre moyen des fines particules et flocs est
relativement proche pour les deux boues. Ce rsultat est intressant car bien que les mmes
paramtres opratoires soient fixs dans les racteurs (ge des boues, temps de sjour
hydraulique, charge organique), les conditions hydrodynamiques rgnant au sein des racteurs
sont diffrentes. En effet, les racteurs nont pas la mme gomtrie, le mme systme
dagitation, le mme type daration. Pourtant, la taille des flocs semble relativement similaire
entre les deux systmes, concentration en MES quivalente.
Des diffrences de distribution ont pu tre observes uniquement sur la premire priode
lorsque les deux procds fonctionnaient faible concentration en biomasse (1,5-2,0 g.L-1) et
au plus faible ge de boues (9,8 jours). Par exemple, la figure IV.12 montre les rpartitions
granulomtriques obtenues pour chaque boue la fin de la premire priode.
10
8
BAMI
BA
Population 2 :
flocs
6
Population 1 :
fines particules
4
2
0
1
10
100
1000
10000
Figure IV.12: Distribution granulomtrique des boues du BA et du BAMI la fin de la 1re priode
On note, cette priode, la prsence de fines particules dans le BAMI. De plus, le diamtre
correspondant au maximum de la population de flocs est de 260 m pour le BAMI et 170 m
pour le BA. Ceci peut sexpliquer par labsence de pompe de recirculation dans le BAMI et
des contraintes de cisaillement associes. En effet, durant une dure limite, lajout sur le
BAMI dune pompe pristaltique fonctionnant au mme dbit que celle du procd boues
actives a conduit une diminution de la population maximale dans le BAMI et a abouti
une distribution semblable celle du BA.
138
Toutefois, lorsque les ges de boues et concentrations en MES augmentent, les deux
populations du BA et du BAMI se confondent. Au final, les graphiques des figures IV.10 et
figures IV.11 prsentent une allure similaire constitue de 3 phases :
Phase 1 : le diamtre moyen des flocs diminue de 225 80 m et celui des fines
particules de 3,6 1,7 m, lorsque la concentration en MES augmente de 1 3 g.L-1.
Le profil de diminution du diamtre des flocs est tout fait comparable celui de la
concentration en EPS lis qui diminue de 70 35 mg.gMVS-1 du fait de la diminution de
la teneur en protines et des polysaccharides. Cependant, les conditions
hydrodynamiques au sein des racteurs changent galement avec la concentration en
MES. En effet, pour maintenir une concentration en oxygne quivalente entre toutes
les priodes, le dbit dair doit tre augment, crant plus de turbulences dans le
racteur, ce qui peut expliquer partiellement la diminution de la taille des flocs.
Phase 2 : le diamtre des flocs reste une valeur stable denviron 80 m et celui des
fines particules environ 1,7 m pour une concentration en MES comprise entre 3 et
5,5 g.L-1. Dans le mme temps, la concentration en EPS lis reste galement constante
environ 35 mg.gMVS-1.
Phase 3 : le diamtre des flocs augmente de 80 environ 95 m et les fines particules
de 1,7 2,0 m lorsque la concentration en MES augmente de 5,5 7,8 g.L-1. Bien
que dans ce cas une seule mesure ait t effectue, la concentration en EPS lis
augmente alors de 35 50 mg.gMVS-1.
Pour rsumer, faible concentration en MES (1 3 g.L-1) lorsque le rapport substrat/microorganismes est plus lev, les microorganismes sont plus favorablement en phase de
croissance et produisent des EPS, principalement des protines selon les mesures ralises,
mais galement des polysaccharides. Ces polymres peuvent servir dagent floculant et
induire une lvation de la taille des flocs lorsquils sont prsents en forte quantit. Ainsi,
lorsque lge des boues augmente de 10 53 jours et la concentration en MES de 1 5 g.L-1,
la diminution de la teneur en protines et polysaccharides peut expliquer la diminution de la
taille des flocs.
Pour de forts ges de boues, 110 jours dans notre cas, les micro-organismes ont un
mtabolisme principalement endogne; laugmentation de la teneur en polysaccharides, la
libration de produits issus de la lyse cellulaire associes une plus forte densit cellulaire
conduisent alors peut-tre une refloculation et une augmentation de la taille des flocs.
139
Pour conclure, la taille moyenne des flocs ne peut tre relie un seul paramtre puisquelle
rsulte dun quilibre complexe entre :
- des forces de cohsion rsultant de la teneur en diffrents exopolymres,
- dune probabilit de rencontre qui augmente avec la concentration en MES des
boues,
- des contraintes hydrodynamiques qui varient avec laugmentation du dbit dair, la
variation de la viscosit du milieu.
Pour savoir si laugmentation de la quantit de polymres au sein des flocs saccompagne
dune volution de la densit des flocs, la valeur de la dimension fractale des flocs a t
dtermine. Celle-ci est prsente en fonction de la concentration en MES des flocs
(Figure IV.13). La dimension fractale mesure la capacit dun objet remplir lespace. Ainsi,
plus la dimension fractale est leve et plus le floc est dense.
2,3
2,3
2,2
Dfractale
Dfractale
2,1
BA
2,2
2,1
BA
BAMI
BAMI
2,0
2,0
0
4
6
MES (g.L-1)
40
80
Age des boues (j)
120
Figure IV.13: Evolution de la dimension fractale des flocs en fonction de la concentration en MES
(graphique a) et de lge des boues (graphique b).
Il apparat que laugmentation de la concentration en MES saccompagne dune augmentation

de la dimension fractale de 2,05 2,18 et donc de la densit des flocs. Cette variation est
significative si lon en croit les domaines de variations de la dimension fractale rapports dans
la littrature : 1,7 2,5 pour des flocs biologiques selon Waite (1999). De plus, le profil de
variation de la dimension fractale prsente une forte variation entre 1 et 3 gMES.L-1 tout
comme les EPSlis ou le diamtre moyen des flocs.
Au final, en regroupant les rsultats sur les EPS lis et ceux de la dimension fractale, il
apparat que laugmentation des MES et de lge des boues sont synonymes dune diminution
de la taille des flocs et simultanment dune densification qui peut tre lie la diminution de
la teneur en EPSlis. Ces volutions de la structure des flocs seront rapprocher des rsultats
de filtration, ce qui fait lobjet du chapitre V.
140
Les figures IV.13 a et b montrent galement que le procd boues actives prsente
des flocs dont la dimension fractale est plus grande que ceux du BAMI. Pour un mme
diamtre de particules, les flocs les plus denses ont une meilleure aptitude la dcantation et
restent donc au sein du procd boues actives. Au contraire, les flocs les moins denses ont
du mal dcanter et pourraient tre vacus en surverse de dcanteur.
3. Dcantabilit et paississement de la boue

Les figures IV.14 et figures IV.15 montrent respectivement lvolution de lindice de
boues (IB) et de la turbidit du surnageant aprs 30 minutes de dcantation en fonction de la
concentration en MES des boues. La teneur en EPSlis na pu tre trace en fonction de
lindice de boues car le nombre danalyses effectues le mme jour, cest--dire sur
exactement la mme boue, est insuffisant.
250
160
Boues filamenteuses
Boues filamenteuses
Turbidit (NTU)
IB (mL.g-1)
200
150
100
50
BAMI
120
80
40
BA
BAMI
BA
0
0
0
4
6
-1
MES (g.L )
Figure IV.14: Evolution de la dcantabilit

des boues
4
6
MES (g.L-1)
Figure IV.15: Evolution de la turbidit du

surnageant de boues aprs 30 minutes de
dcantation.
La figure IV.14 montre que lindice de boues diminue avec laugmentation de la

concentration en MES de 2 8 g.L-1 selon une loi quasiment linaire (sil est fait abstraction
des chantillons prsentant des boues filamenteuses) :
IB (mL.g-1) = - 6,52 MES (g.L-1) + 114
Il faut noter quau cours du fonctionnement des racteurs, la prsence de boues filamenteuses
na t remarque que sur le racteur boues actives. La diminution de lindice de boues,
soit le volume occup par un gramme de boue, traduit la densification des flocs et conduit
une meilleure aptitude lpaississement.
En ce qui concerne la turbidit du surnageant des boues ayant dcantes durant 30 minutes,
elle augmente lorsque la concentration en MES augmente. Ainsi, laugmentation de lge des
141
boues conduit de faibles tailles de flocs et un surnageant de dcantation de moins bonne

qualit. Le nombre de microflocs ayant des difficults dcanter augmente donc dans le
BAMI lorsque lge des boues augmente.
La dcantation ne permet probablement pas dliminer les micro-flocs infrieurs 50 m
ainsi que les collodes, contrairement la centrifugation ou la filtration. Cest dailleurs
pourquoi il est difficile de faire des comparaisons entre la turbidit du surnageant de
dcantation, la DCO du permat de filtration sur 0,45 m (DCO "soluble") ou EPS du
surnageant de centrifugation 4200 G (EPS "solubles").
Pour conclure sur les caractristiques des flocs, il apparat que laugmentation de lge des
boues se traduit par une diminution de la production dEPSlis. Simultanment la taille de
lagrgat biologique diminue (Figure IV.10) mais gagne en compacit (Figure IV.13). En
effet, le passage dune concentration en MES de 1 6 g.L-1 provoque une augmentation de la
dimension fractale de 2,05 environ 2,18 traduisant ainsi une baisse de la porosit du floc.
Liu et Fang (2002) constatent galement une baisse de la porosit des flocs avec la diminution
de la quantit dexopolymres lis. La porosit plus leve des flocs compare celle de
granules est associe selon ces auteurs une quantit plus leve dexopolymres au sein des
flocs. Par ailleurs, nos rsultats montrent que lorsque le diamtre des flocs diminue, la qualit
du surnageant de dcantation diminue galement. On peut donc penser que la diminution du
diamtre moyen des flocs lorsque lge des boues augmente est due une dfloculation
partielle qui induit une augmentation du nombre de collodes dans le surnageant. Dpass un
temps de sjour des boues (110 jours dans notre cas) et pour une forte densit cellulaire, une
refloculation est observe qui pourrait tre associe une augmentation des EPSlis.
III. Caractrisation du surnageant des boues

Ce paragraphe permet ltude de linfluence de la sparation membranaire sur les
caractristiques du surnageant du milieu biologique. Les grandeurs tudies ici concernent la
DCO et les exopolymres du surnageant qui par convention seront dites "solubles". La DCO
soluble est obtenue par filtration sur membrane 0,45 m ; la concentration en EPS du
surnageant par centrifugation 4200 G pendant 15 minutes. Ces chantillons peuvent donc
encore contenir des matires collodales.
Comme il a t vu dans le chapitre III, la sparation membranaire retient peu de substances
humiques mais retient des protines et des polysaccharides dans le surnageant de la boue. Ces
composs saccumulent transitoirement puis leur concentration diminue progressivement. Il
est alors intressant danalyser les caractristiques du milieu aprs cette phase dynamique. La
142
figure IV.16 prsente les concentrations en EPS solubles obtenues aprs une priode de
40
40
30
30
-1
EPS (mg.L )
-1
EPS (mg.L )
stabilisation.
20
10
0
20
10
0
3 4 5 6
MES (g.L-1)
3 4 5 6
MES (g.L-1)
Substances Humiques
Protines
-1
EPS (mg.L )
40
BA
30
BAMI
Substances Humiques
Substances Humiques
Polysaccharides
Polysaccharides
Protines
Protines
20
10
0
0
3 4 5 6
MES (g.L-1)
Polysaccharides
Figure IV.16: Relation entre EPS spcifiques des surnageants et concentrations en MES stabilises
Quel que soit le procd tudi, les substances humiques reprsentent les principaux
exopolymres du surnageant (12 35 mg.L-1). Contrairement aux polysaccharides et aux
protines, les substances humiques proviennent exclusivement des eaux uses. Cest donc
pour cette raison que ces substances sont en trs faibles concentrations dans les flocs alors
quelles constituent le groupe majoritaire des EPSsolubles.
Aprs stabilisation, les protines constituent le groupe minoritaire des exopolymres du
surnageant (0 16 mg.L-1). Il est difficile de comparer leurs concentrations celles trouves
dans dautres travaux. En effet, la plupart des tudes surestiment leur concentration car elles
ne tiennent pas compte des interfrences, dues aux substances humiques, lors de la mesure
dabsorbance. De plus, les mthodes de sparation des composs solubles ne sont pas
identiques et peuvent mener des biais dans linterprtation des rsultats.
143
Enfin, la concentration en polysaccharides varie de 4 39 mg.L-1 avec une amplitude de

variation plus leve dans le surnageant du procd boues actives. Ces valeurs restent dans
les gammes de concentrations observes dans dautres tudes. En effet, Lesjean et al. (2004),
dans un BAMI aliment en eau use municipale fonctionnant 8 jours dge de boues
trouvent une concentration en polysaccharides comprise entre 2 et 17 mgq-glucose.L-1 contre 4,3
26,6 mgq-glucose.L-1 pour la premire priode de cette tude, c'est--dire 9 jours dge des
boues. Malgr les caractristiques des ERU et les conditions opratoires probablement
diffrentes, Lesjean et al. (2004) travaillant notamment avec des bassins anoxies, arobies et
anarobies placs en srie, ces valeurs sont du mme ordre de grandeur que les ntres.
La comparaison des deux procds montre galement que les concentrations en

polysaccharides et protines sont nettement plus faibles dans les boues du BA par
rapport au BAMI lorsquils fonctionnent faibles concentrations en MES et ges de
boues. En effet, pour une concentration en MES comprise entre 1 et 2,5 g.L-1, la
concentration en polysaccharides est denviron 5 10 mg.L-1 dans le surnageant du
procd boues actives contre environ 25 mg.L-1 dans celui du BAMI. Lorsque la
concentration en MES augmente (suprieure 3 g.L-1), les concentrations en protines et
polysaccharides augmentent dans le BA et se confondent aux valeurs mesures dans le
BAMI.
Il faut noter que les rsultats obtenus sur la boue du procd boues actives semblent
reproductibles car des concentrations quivalentes en polysaccharides et protines ont t
obtenues pour la priode dge de boues de 9,2 jours et 14,3 jours.
Lvolution de la concentration en EPS totaux avec lge des boues prsente galement des
volutions similaires celles des exopolymres spcifiques. La figure IV.17 illustre cette
volution dans le surnageant du BAMI. Les concentrations en matire organique
correspondent la moyenne des concentrations obtenues la fin de chaque priode de
fonctionnement un ge de boues donn.
144
100
-1
Concentration (mg.L )
DCO
EPS totaux
PS
60
Age des boues (j)
80
PN
80
60
40
20
0
0
20
40
100
120
Figure IV.17: Evolution de la concentration en DCO, EPS totaux, Polysaccharides (PS) et Protines (PN) du
surnageant de BAMI en fonction de lge des boues (concentration prise une fois stabilisation)
Pour de faibles ges de boues (infrieurs 53 jours) : les concentrations en exopolymres

spcifiques (protines et polysaccharides) diminuent lorsque lge des boues augmente
entranant une diminution de la concentration en DCO de 83 50 mg.L-1, et des EPS totaux
de 72 44 mg.L-1. Il semble assez logique quun temps de sjour des boues lev permette
une puration biologique plus pousse car alors le temps de contact entre la matire organique
retenue par la membrane et la biomasse est plus long. La matire organique lentement
biodgradable peut alors tre dgrade.
Pour des ges de boues levs (suprieurs 53 jours) : lorsque lge des boues augmente
de 53 110 jours, la concentration en polysaccharides augmente de 17 33 mg.L-1 pendant
que simultanment la concentration en protines augmente de 8 12 mg.L-1. Par consquent,
la concentration en EPS totaux augmente de 44 77 mg.L-1, celle de la DCO de
50 80 mg.L-1. Les rsultats concernant les EPS 110 jours dge de boues sont toutefois
interprter avec prcaution car le bioracteur membranes nest probablement pas en rgime
parfaitement stabilis. Cependant, de forts ges des boues (suprieurs 53 jours) les microorganismes pourraient avoir un mtabolisme principalement endogne qui provoque la lyse
cellulaire et donc la libration et laccumulation dEPS plus difficilement biodgradables. Une
partie de ces EPS serait adsorbe au floc ou participerait aux pontages entre cellules et une
autre partie serait hydrolyse et solubilise dans le milieu.
De plus, globalement, les variations en EPS et DCO suivent les mmes volutions. Les
polymres constituent une partie de la matire organique du milieu et ce titre sont inclus
145
dans la mesure de la DCO soluble. La concentration en EPS solubles est reprsente en
-1
EPS solubles ou PN+PS (mg.L )
fonction de celle de la DCO (Figure IV.18).

100
80
EPS totaux BA
BAM
EPS totaux BAMI
PN+PS BA
PN+PS BAM
60
SH
40
20
0
0
20
40
60
80
DCOsoluble (mg.L-1)
100
120
Figure IV.18: Relation entre EPS totaux, protines + polysaccharides et DCO du surnageant
(Concentrations prises sur la totalit du fonctionnement des racteurs)
Pour des concentrations en DCO infrieures 40 mg.L-1, les concentrations en

polysaccharides et protines sont pratiquement nulles alors que celle des substances humiques
est denviron 30 40 mg.L-1. Puisque les polysaccharides et les protines sont quasiment
absentes ces concentrations en DCO, cela signifie que 25 40 mg.L-1 de substances
humiques reprsentent environ 15 30 mgDCO.L-1, si toutefois la DCO nest compose que de
substances humiques.
Pour des concentrations en DCO suprieures 40 mg.L-1 une relation linaire entre les EPS et
la DCO du surnageant est observe qui intgre la fois les donnes du procd boues
actives et du BAMI (IV.1) :
EPSTotaux.solubles = 0,73 . DCOSoluble + 16
(IV.1)
Dans ce cas, lvolution de la concentration en DCO suit celle des polysaccharides et des
protines. Lcart de concentration entre les EPS totaux et la concentration des protines et
des polysaccharides est constitu par les substances humiques. En accord avec les rsultats
prcdemment trouvs (Figure IV.16), il apparat que cet cart reste constant ( 30 mg.L-1)
quelle que soit la concentration en DCO dans le surnageant de BAMI. Les substances
humiques constitueraient donc un talon de DCO difficilement dgradable pratiquement pas
retenu par la membrane (chapitre III).
146
IV. Conclusion et discussion

Ce chapitre a permis dtudier linfluence de la sparation membranaire sur les
caractristiques de la boue biologique aprs stabilisation des racteurs BA et BAMI.
La sparation membranaire semble peu influencer les caractristiques des flocs puisque
lvolution gnrale des paramtres tudis est similaire entre le BAMI et le procd boues
actives. En revanche, une modification de lge des boues (les forts ges de boues tant
obtenus avec le BAMI) entrane un changement des proprits des flocs. Deux phases
diffrentes sont distingues :
1. laugmentation de lge de boues de 9 53 jours entrane une diminution de la
teneur en EPSlis (70 35 mg.gMVS-1) et de la taille des flocs (200 80 m). Lors de
laugmentation de lge des boues, la quantit dEPSlis diminue provoquant une
dfloculation. Par consquent, la turbidit du surnageant augmente et la taille des
agrgats diminue. La compressibilit de la boue est diminue et la densit des flocs
accrue,
2. laugmentation de lge des boues de 53 110 jours entrane une augmentation de la
teneur en EPSlis et donc de la taille des agrgats. Cette augmentation de la quantit
dEPSlis pourrait alors tre due une augmentation de la lyse cellulaire et une
libration de substances favorisant la floculation.
Linfluence de la sparation membranaire sur les caractristiques du surnageant a galement
t tudie. La membrane permet la rtention des composs du surnageant et notamment de
certains exopolymres comme les protines et les polysaccharides. Les diffrences entre les
deux procds sont plus marques pour de faibles ges de boues. La concentration en
polysaccharides et un degr moindre en protines, est infrieure dans le procd boues
actives. En revanche, les substances humiques ne semblent pas dgrades ou retenues par la
membrane et restent une concentration relativement constante quel que soit lge des boues.
Laugmentation de lge des boues de 9 53 jours entrane une diminution de la
concentration en polysaccharides (25 15 mg.L-1) et protines (10 5 mg.L-1). Puis, au-del
de 53 jours dge de boues, les concentrations en polysaccharides et protines augmentent et
atteignent respectivement 12 et 33 mg.L-1.
Par ailleurs, abstraction faites des substances humiques, les protines sont les produits
microbien majoritaires des flocs (11,5 45,3 mg.gMVS-1) alors que ce sont les polysaccharides
147
qui composent majoritairement le surnageant. Nous pouvons donc nous interroger sur les
mcanismes de dgradation et de production de ces exopolymres (Figure IV.19)
FLOC
BIOMASSE
ACTIVE
PS
SURNAGEANT
PN
LYSE
CROISSANCE
EPS lis
DESORPTION
MATIERE INERTE
Soluble ou particulaire
SUBSTRAT
HYDROLYSE
MEMBRANE
PN
PS
Figure IV.19: Etude des mcanismes d'limination et de production des EPS des boues
Rappelons tout dabord quune boue biologique est un milieu complexe dont les
caractristiques rsultent dun tat dquilibre. A ce titre il faut prendre en compte lensemble
des mcanismes de dgradation/production/accumulation pour pouvoir expliquer les teneurs
en chacun des polymres de la boue.
Dans notre cas, les protines constituent les polymres majeurs des flocs et leur proportion
tend diminuer mesure que lge des boues augmente (PN/PS diminue). La production de
protines, notamment les enzymes, pourrait donc tre lie la concentration en biomasse
active des boues. Ainsi, faible ge des boues la croissance des micro-organismes est facilite
et engendrerait une augmentation de la teneur en protines des flocs. Cette hypothse est
galement celle avance par Stricot (2004). Au-del dun ge de boues donn, certains auteurs
(Durmaz et Sanin 2001, Liu et Fang 2003, Liao et al. 2001) supposent que les substrats
148
organiques, alors en faible quantit par rapport celle des micro-organismes, seraient
principalement utilise pour la maintenance cellulaire. Cette situation devrait rduire la
production de polysaccharides et conduire une augmentation du rapport PN/PS mais le
phnomne contraire a t observ dans notre tude. Signalons galement que le phnomne
de lyse cellulaire devient plus important forts ges de boues et donc quelle influencera
galement les proportions en chacun des polymres des flocs et du surnageant. Ainsi, la
proportion en chacun des polymres dans les flocs est en partie lie leurs cintiques de
production.
Cependant, le taux de polymres dans les flocs nest pas li seulement leur cintique de
production mais galement leur capacit sadsorber et dsorber. Une dsorption rapide
dun type de polymres doit mener une baisse de la teneur en ce polymre dans les flocs et
une augmentation dans le surnageant. Les cintiques de dsorption/adsorption seront
modifies avec la temprature, le pH, probablement la concentration en biomasse, la taille des
flocs, etc et dpendront de la localisation et du type de polymres.
Les concentrations en polymres du surnageant et des flocs sont en partie lies aux cintiques
de dsorption et dhydrolyse. Il est difficile de savoir si lhydrolyse des EPS a lieu
principalement dans le floc ou dans le surnageant. La plupart des tudes concernant
lhydrolyse ont t ralises sur des biomasses issues de boues actives. Elles dmontrent que
les enzymes hydrolysantes sont principalement localises proximit des agrgats bactriens,
mais dans le cas du bioracteur membranes ceci nest pas prouv. Par exemple, la
concentration leve en polysaccharides dans le surnageant pourrait tenir des cintiques
dhydrolyse plus lentes pour ces polymres que pour les protines ou une dsorption plus
rapide.
Enfin, la membrane joue galement un rle cl dans laccumulation des polymres solubles
car elle prsente des taux de rtention diffrents pour chacun des polymres (Chapitre III). Le
taux de rtention varie galement suivant les caractristiques du milieu filtrant et les
conditions opratoires et donc entranera une accumulation slective des polymres. Par
exemple, une modification de lge des boues change la quantit mais galement la masse
molculaire des polymres et donc modifiera les cintiques dhydrolyse ainsi que les taux de
rtention.
Pour conclure, il apparat donc que la membrane influence significativement les
caractristiques dune boue biologique en permettant laccumulation de composs, mais que
149
ces modifications sont largement influences par lge des boues. Parce quelle autorise
galement de travailler des ges de boues levs, la sparation membranaire conduit des
milieux plus concentrs slectivement en exopolymres et ncessite que lon sintresse plus
largement aux phnomnes dhydrolyse lente de ces macro-molcules. Par ailleurs, oprer
un ge de boues lev va se traduire par une diffrence de structure (taille, densit,
compressibilit) des flocs et donc de leur filtrabilit.
150
CHAPITRE V
ANALYSE DU COLMATAGE PAR UN
MILIEU BIOLOGIQUE DANS UN BAMI
Chapitre V : Analyse du colmatage par un milieu biologique dans un BAMI
Lobjectif de ce chapitre est dtudier et de comprendre lvolution du colmatage dans le

BAMI fonctionnant sans rtrolavages squentiels avec un simple systme dinsufflation dair
sous forme de grosses bulles (Figure V.1). Il sagit de fournir des informations pour lier
lvolution du colmatage celle du milieu biologique, pour des conditions opratoires fixes.
Description de lvolution du colmatage
sur le long terme
. Identification de phases caractristiques

dans lvolution du colmatage
Identification des facteurs influenant

le colmatage court terme
. Rle des composs du milieu biologique
Identification des mcanismes

du colmatage
. Apprhension des interactions

composs-matriau membranaire
Caractrisation
du colmatage
Figure V.1: Dmarche adopte dans la caractrisation du colmatage par un milieu biologique dans un BAMI
Nous allons dans un premier temps analyser le colmatage (en terme de drive de pression
transmembranaire) et sa dynamique sur le long terme. Nous tudierons ensuite sa rversibilit
par des mthodes hydrauliques ou chimiques et enfin nous utiliserons la mthode des
incrmentations de flux de permat pour caractriser la vitesse de colmatage court terme et
flux sur-critique afin de la relier aux proprits du fluide biologique.
I. Identification des paramtres influenant le colmatage

long terme
Le bioracteur membranes a fonctionn sous un flux de permat constant de
-1
5 L.h .m-2 pendant 4 priodes rparties sur une dure de 420 jours. Ce flux de permation a
t choisi pour viter un colmatage trop rapide des membranes. Il a ensuite t maintenu
cette valeur quel que soit le temps de sjour des boues afin dtudier linfluence dautres
conditions opratoires et des caractristiques du milieu biologique sur la filtration.
151
1. Evolution de la pression transmembranaire au cours du

temps
Il est important de rappeler ici que le BAMI a fonctionn en labsence de
rtrolavages ou de phases de relaxation. La seule mthode utilise pour limiter le
colmatage a t laration grosses bulles. Au cours de cette tude toutes les membranes
utilises pour le BAMI taient en polysulfone et avaient les mmes caractristiques (voir
chapitre II).
La figure V.2 montre lvolution de la pression transmembranaire au cours de la
filtration long terme lors des 4 priodes de fonctionnement du BAMI. Sur une dure totale
de 420 jours, le BAMI a fonctionn pendant 340 jours.
Nous allons dans un premier temps prsenter lhistorique du fonctionnement, en prcisant les
vnements particuliers (lavages) intervenus lors de ce fonctionnement. Nous dgagerons
ensuite des tendances gnrales sur le colmatage long terme.
1
PTM (bar)
0,8
Pas de
relevs
0,6
Arrt de
la
filtration
0,4
2
3
0,2
0
0
50
100
150
200
250
Temps (j)
300
350
400
450
Figure V.2: Evolution de la pression transmembranaire au cours du fonctionnement du BAMI

1re priode de fonctionnement :

Pendant la premire priode (TSB = 9,8 jours) la pression transmembranaire augmente
lentement (0,04 kPa.h-1) pendant 24 jours puis, partir du 24me jour une drive brutale de la
pression transmembranaire est observe (1,20 kPa.h-1). Un lavage de la membrane est alors
effectu le 27me jour sur le faisceau de fibres extrait du bioracteur. Durant le lavage pratiqu
lextrieur du BAMI, tout le milieu biologique reste dans le BAMI et laration est
maintenue constante. Il ny a donc pas de baisse du niveau de liquide au sein du racteur do
larrt de la rgulation du niveau et par suite celui de lalimentation en ERU.
152
Le lavage du 27me jour a consist :

-
une limination de la gangue de boue laide dune projection deau pressurise le

long de la membrane,
un rtrolavage leau ultrafiltre pendant 15 minutes 1,5 bars,
une permation externe/interne pendant 30 minutes dune solution 1 g.L-1 de

chlore actif.
Bien que cette procdure de lavage nait pas permis de rcuprer la permabilit initiale de la
membrane (seule 66 % de la permabilit initiale a t rcupre), le faisceau de fibres a t
rintroduit dans le BAMI ds la fin de la journe afin de ne pas trop perturber la biomasse et
la filtration sest poursuivie dans les mmes conditions que prcdemment. Pendant les
24 jours suivants la pression transmembranaire a recommenc monter lentement
(0,03 kPa.h-1). Cette drive est voisine de celle qui avait t observe dans la phase de
dmarrage de la priode 1. Au 52me jour de fonctionnement, le BAMI a t vidang et arrt
jusquau 128me jour.
2me priode de fonctionnement :
La 2me priode de fonctionnement (TSB = 37,2 jours) a dbut avec la membrane lave, avec
une permabilit gale la permabilit initiale soit 200 L.h-1.m-2.bar-1. Au dbut de cette
priode de fonctionnement la pression transmembranaire a augment raison de 0,03 kPa.h-1
jusquau 150me jour. Un dcolmatage des membranes a alors t effectu. Comme lors de la
premire priode, la membrane a t lave lextrieur du BAMI alors que celui-ci ntait pas
aliment en ERU. Une succession de rtrolavages au chlore (1 g.L-1) lacide oxalique
(5 g.L-1) et la soude (4 g.L-1) ont t effectus sur des dures de 15 minutes 1,5 bars afin
de rcuprer une partie de la permabilit de la membrane (permabilit la fin des
rtrolavages gale 143 L.h-1.m-2.bar-1 soit 71% de la permabilit initiale). Lors de la reprise
de la filtration, la valeur de la pression transmembranaire tait de 0,05 bar puis elle a
augment raison de 0,1 kPa.h-1 durant 6 jours. De nouveaux rtrolavages chimiques
lextrieur du BAMI ont alors t effectus :
-
limination de la gangue de boue,
rtrolavage de deux fois 15 minutes 1,5 bars avec du chlore 1 g.L-1,
rtrolavage 15 minutes 1,5 bars la soude (4 g.L-1).
Le faisceau de fibres a t rintroduit dans le racteur dans la journe mme et la filtration

5 L.h-1.m-2 a t poursuivie. Durant 40 jours la drive de pression tait de lordre de
0,03 kPa.h-1. Le 197me jour le faisceau de fibres colmates a directement t remplac par un
faisceau neuf identique au prcdent (mme permabilit, matriau et diamtre moyen des
153
pores). Le lavage des membranes colmates a consist liminer la gangue de boue, puis
effectuer 6 rtrolavages leau (1,5 bars, 15 minutes chacun) et enfin des lavages chimiques
lacide oxalique (5 g.L-1) et lultrasil (6 g.L-1). Lanalyse de lefficacit de ces dcolmatages
sera prsente au paragraphe II de ce chapitre.
Aprs une priode sans relev de la pression transmembranaire, le faisceau de fibres
colmates a t remplac le 218me jour par un faisceau rgnr et la 3me priode de
fonctionnement a commenc avec ce faisceau (TSB= 160 jours). La drive de pression au
cours de cette 3me priode est en moyenne de 0,002 kPa.h-1.
Enfin, le 320me jour, suite un lessivage de la boue d son moussage nous avons vidang
60 70% du milieu biologique et le faisceau de fibres a t remplac. Le BAMI a alors t
complt 16 litres avec la boue du procd boues actives. La 4me priode a commenc
avec un ge de boues fix 53 jours. Aprs une monte soudaine de la pression
transmembranaire de lordre de 1,04 kPa.h-1, le faisceau de fibres a t remplac par un
faisceau compltement rgnr et la pression transmembranaire a volu lentement une
vitesse de lordre de 0,003 kPa.h-1.
Un premier rsultat trs intressant est que le BAMI a pu fonctionner sur des dures
relativement longues, (plus de 90 jours de filtration durant les 3me et 4me priodes) sans
rtrolavages squentiels, avec uniquement une aration grosses bulles continue et un
faible flux de permat. Seuls quelques lavages hydrauliques et chimiques ponctuels ont
d tre pratiqus pendant les 340 jours de fonctionnement (au total 8 lavages). Il est
donc tout fait envisageable de faire fonctionner un BAMI sans rtrolavages squentiels
un flux de 5 L.h-1.m-2.
Un second rsultat concerne lvolution de la vitesse de colmatage, dfinie ici comme la
variation de la pression transmembranaire par unit de temps. Cette vitesse varie suivant la
priode dtude, cest dire suivant le temps de sjour de la boue. Le tableau V.1 prsente les
drives de pressions observes aprs une rgnration des membranes ou un remplacement du
faisceau de fibres.
154
Tableau V.1:Rcapitulatif des valeurs de drive de pression durant le fonctionnement du BAMI
Priode
Age des boues

(j)
Temps aprs
rgnration ou
remplacement du
faisceau de membrane
(j)
1-23
24-27
1-24
1-22
1-6
1-41
dPTM/dt
(kPa.h-1)
0,04
1,20
0,03
0,03
0,1
0,03
9,8
37,2
160,0-110,3
1-101
0,002
53,0
1-9
1-91
1,04
0,003
Deux types diffrents dvolution de la pression transmembranaire sont observs : une

volution lente (dPTM/dt < 0,1 kPa.h-1) et une autre trs rapide (dPTM/dt > 1 kPa.h-1). Pour la
1re priode de fonctionnement, ces deux phases sont successives.
Lordre de grandeur de la drive lente de pression est de 0,001 0,1 kPa.h-1 et correspond aux
valeurs trouves par dautres auteurs pour un BAM fonctionnant sur du long terme des flux
sous-critiques. Par exemple, Cho et al. (2002) et Ognier et al. (2004) observent
respectivement une vitesse de colmatage de lordre de 0,025 kPa.h-1 et 0,07 kPa.h-1 lors de la
monte progressive de la pression transmembranaire.
Lors de la monte brutale, des valeurs de 1,2 kPa.h-1 et 1,0 kPa.h-1 sont respectivement
obtenues pour les priodes 1 et 4.
Dans la suite de ce chapitre, nous allons examiner les causes possibles des modifications de la
vitesse de colmatage. Nous allons en particulier examiner si elles peuvent tre dues une
variation de certaines caractristiques du milieu biologique. Lanalyse des caractristiques de
la boue et du milieu filtrant doit donc permettre lidentification des facteurs et des composs
impliqus dans le colmatage. Nous allons successivement nous intresser ltat du faisceau
de fibres puis lvolution de certaines proprits du milieu biologique (MES, DCO,
EPSsolubles) en lien avec la variation de pression transmembranaire.
155
2. Observation du faisceau de fibres colmatage du

faisceau
Lors du fonctionnement du BAMI, la prvention du colmatage externe a t effectue
au moyen dune aration grosses bulles un flux de 2,8.10-5 m3.s-1.m-2membrane soit
3,5.10-4 m3.s-1.m-3racteur. Lobjectif de cette aration tait de limiter le dpt de particules la
surface des membranes. A lheure actuelle, des questions subsistent pour savoir quel est entre
le mouvement des fibres ou le taux de cisaillement gnr prs des parois membranaires, le
phnomne participant principalement la prvention du colmatage.
Dans le fonctionnement rel du BAMI, on observe, comme le montre la photo ci-dessous, un
colmatage du faisceau de fibres lui-mme : une gangue de boue se forme autour des fibres
creuses. Cette gangue pourrait adhrer aux fibres grce aux EPS du surnageant et ceux
scrts par les microorganismes du biofilm. Ce
Boue
dernier type dexopolymres est dailleurs loin

dtre ngligeable, puisque Martin-Cereceda et
al. (2001) obtiennent une quantit de protines
dans un biofilm dvelopp sur un support non
poreux, trois fois suprieur celle dans la boue
active.
La photo a t prise le 150me jour cest--dire
Membrane
22 jours aprs le dbut de la deuxime priode

de fonctionnement du BAMI, alors que la
pression transmembranaire tait de 0,19 bars
dans la premire phase de colmatage (drive
lente de PTM). Chaque fois que le faisceau de fibres a t sorti du racteur pour tre lav, que
laugmentation soudaine de la pression transmembranaire ait eu lieu ou non, le faisceau avait
cette apparence. Cette observation souligne le fait que laration grosses bulles de notre
systme permet peut tre de limiter le dpt de fines particules la surface de la membrane (
vrifier), mais ne permet pas dviter la formation dun biofilm ou dune gangue de boue qui
viennent agglomrer les fibres entre elles et colmater le faisceau en profondeur. Cette gangue
est rpartie de faon htrogne sur toute la longueur du faisceau de fibres. Par exemple,
lil nu, aucun biofilm nest visible aux extrmits des fibres. Dans les premiers instants de la
filtration les fibres peuvent bouger indpendamment les unes des autres puisque la gangue de
boue nest pas encore forme. Cependant, par la suite lapparition de la gangue alourdit le
faisceau et limite le mouvement individuel des fibres. Seul est alors permis le mouvement de
lamas de fibres.
156
Ainsi, pour un mme dbit daration sous le faisceau, leffet hydrodynamique change au
cours de la filtration et devient trs diffrent de celui qui serait observ avec des fluides non
biologiques. Les taux de cisaillement la surface de la membrane sont peut tre conservs
(sauf si la gangue de boue modifie la rpartition des bulles et leur taille), mais probablement
pas lamplitude du mouvement des fibres. Lanalyse des phnomnes est donc complexe
quand on sintresse la mise en uvre du dcolmatage lair pour des fluides biologiques
rels.
Nous verrons au paragraphe II la contribution au colmatage de cette gangue de boue.
3. Influence des caractristiques du milieu biologique

Comme nous lavons vu au chapitre IV, le milieu biologique volue au cours du temps
mme lorsque les conditions opratoires (ge des boues, flux de permat, aration) sont
maintenues constantes.
Nous avons dans un premier temps recherch sil pouvait y avoir un lien entre les volutions
de la pression transmembranaire et des variations de proprits de la fraction particulaire du
milieu biologique. Nous avons donc analys lvolution des performances hydrauliques du
BAMI en relation avec celle des MES et du diamtre des particules et des flocs. La figure V.3
prsente les rsultats obtenus pour les MES.
1
10
8
0,6
0,4
0,2
0
450
50
100
150
200
250
Temps (j)
300
350
400
-1
PTM (bar)
MES
MES (g.L )
PTM
0,8
Figure V.3: Evolution de la pression transmembranaire et des MES au cours du temps
Aucune relation directe ne lie les matires en suspensions de la boue et la pression

transmembranaire. En effet, alors que la concentration en MES augmente puis diminue trs
significativement durant la 3me priode, aucune modification significative de la vitesse de
colmatage nest observe. La qualit des matires en suspensions a certainement plus
dimpact sur le colmatage long terme que leur quantit. Nous avons vu notamment que les
157
teneurs en EPS des flocs et le rapport PN/PS diminuent durant les priodes 3 et 4 (ge de
boues lev). Or il faut se rappeler que la revue bibliographique de ce manuscrit a permis de
montrer que les proprits de surface telles que lhydrophobicit ou la charge de surface ont
souvent un rle dans le colmatage et que les teneurs en EPS lis et le rapport PN/PS influence
les proprits dadhsion. Ces caractristiques ont pu jouer un rle dans ltablissement de la
gangue de boue.
Au cours de cette tude, aucune relation prcise na t trouve entre lvolution de la
pression transmembranaire et lindice de boues ou la concentration en EPS des flocs (rsultats
non prsents). Notons toutefois que peu de valeurs exprimentales taient disponibles pour
pouvoir conclure dfinitivement.
Nous avons galement caractris lvolution du diamtre des flocs et des particules des deux
boues. Chaque fois quune analyse granulomtrique a t effectue sur la boue du BAMI, les
pressions transmembranaires correspondantes ce jour ont t releves. Il est alors possible
de calculer la drive de pression transmembranaire sur cette journe. Les figures V.4 et
figures V.5 prsentent la drive de pression transmembranaire en fonction des diamtres
moyens des flocs.
1,2
dPTM/dt (kPa.h )
0,8
-1
-1
dPTM/dt (kPa.h )
1,2
0,4
0,0
-0,4
0,8
0,4
0,0
-0,4
0
40 80 120 160 200

Diamtre moyen (m)
Figure V.4: Evolution de la vitesse de colmatage en

fonction du diamtre moyen (rpartition en volume)
des particules
1
2
3
Diamtre moyen (m)
Figure V.5: Evolution de la vitesse de colmatage en

fonction du diamtre moyen (rpartition en nombre)
des particules
Toutes les valeurs du diamtre moyen des flocs ou particules correspondent une drive de la
pression transmembranaire infrieure 0,1 kPa.h-1, except pour le diamtre de 170 m
(rpartition en volume).
Plusieurs valeurs de drive de pression transmembranaire correspondent un diamtre moyen
compris entre 50 et 160 m pour la distribution en volume ou entre 1,5 et 3 m pour la
rpartition en nombre. Ainsi pour cette gamme de diamtre, sil existe un lien entre vitesse de
158
colmatage et diamtre des flocs, il est peu significatif. Pour un diamtre moyen des flocs de
110 m, il est mme observ une lgre chute de la pression transmembranaire.
Pour des valeurs suprieures 160 m (3 m pour la distribution en nombre) il est dlicat de
se prononcer sur linfluence du diamtre des flocs sur la vitesse de colmatage car pour un
diamtre de 170 m (3,1 m pour la distribution en nombre) la drive de pression
transmembranaire est trs leve puis au-del chute une vitesse de colmatage plus faible.
Nous nous sommes galement intresss au rle de la fraction soluble des boues travers des
analyses de DCO et dEPS du surnageant des boues (Figure V.6).
1
300
PTM (bar)
EPS soluble
0,6
180
0,4
120
0,2
60
0
0
50
100
150
200
250
Temps (j)
300
350
400
-1
240
DCO soluble
DCO ou EPS (mg.L )
PTM
0,8
0
450
Figure V.6: Evolution de la pression transmembranaire, de la DCO et des EPS solubles au cours du
fonctionnement du BAMI
Comme il a t vu au chapitre III, chaque nouvel ensemencement du BAMI (1er, 128me et

320me jour), il y a tout dabord accumulation de la matire organique soluble sous la forme
dEPS ou de DCO, avant que celle-ci soit dgrade. Durant les deux premires priodes (du
1er au 197me jour) de fonctionnement du BAMI, la vitesse de colmatage est la plus leve et
correspond galement des concentrations en DCO et EPS solubles maximales. La brve
augmentation de la pression entre le 380 et 390me jour pourrait ainsi tre explique par
laccumulation de composs solubles au sein du milieu biologique et donc peut tre sur/dans
le matriau membranaire et sur/dans le dpt de particules. La monte progressive de la
pression transmembranaire pourrait donc tre lie la concentration en EPS et DCO du
surnageant. Rosenberger et Kraume (2002) ont observ un lien entre EPS du surnageant et
vitesse de colmatage o laugmentation des EPS du surnageant entrane laugmentation de la
vitesse de colmatage.
159
La nature chimique de chacun des polymres est diffrente et peut donc entraner une
participation diffrente au colmatage. Nous avons donc tudi lvolution de la drive de
pression transmembranaire en fonction de la concentration en exopolymres solubles
0,12
0,12
0,1
0,1
-1
dPTM/dt (kPa.h )
-1
dPTM/dt (kPa.h )
spcifiques (Figure V.7).
0,08
0,06
0,04
0,02
0
0,08
0,06
0,04
0,02
0
0
0,12
0,12
0,1
0,1
-1
dPTM/dt (kPa.h )
-1
dPTM/dt (kPa.h )
0
20
40
60
Substances humiq. (mg.L-1)
0,08
0,06
0,04
0,02
0
20
40
Protines (mg.L-1)
60
0,08
0,06
0,04
0,02
0
20
40
60
Polysaccharides (mg.L-1)
40
80
120
-1
EPS totaux (mg.L )
Figure V.7: Suivi de la PTM en fonction des EPS totaux, protines, polysaccharides et substances humiques
solubles lors du fonctionnement long terme du BAMI
Toutes les drives de pression transmembranaire des graphiques correspondent une monte
progressive de la pression transmembranaire . En effet, aucune analyse des EPS solubles na
t effectue lors dune monte brutale de la pression transmembranaire.
Les graphiques de la figure V.7 ne permettent pas de dgager de relation prcise entre EPS
solubles et drive de pression transmembranaire dans la gamme de concentration considre.
En effet, pour des concentrations donnes en EPS du surnageant plusieurs valeurs de drive
de pression transmembranaire sont obtenues. Dans ces conditions, il est difficile de conclure.
Le chapitre III a permis de souligner le rle de la membrane dans la rtention et
laccumulation de protines et polysaccharides dans le surnageant. Il a aussi permis de
montrer que les EPS solubles qui saccumulent de manire temporaire sont progressivement
160
biodgrads. En particulier sur les deux dernires priodes forts ges de boues, les
concentrations en EPS solubles taient stables et relativement faibles (peu daccumulation
temporaire) et le colmatage tait galement trs faible.
Cependant le manque de donnes reprsentatives sur toutes les priodes de fonctionnement du
BAMI et en particulier aux fortes vitesses de colmatage ne permet pas de dgager une relation
simple entre les EPS du surnageant et la vitesse de colmatage long terme. Par ailleurs, la
vitesse de colmatage dpend de lhistorique de la membrane et pas seulement dun paramtre
pris instantanment.
Au cours de la revue bibliographique, nous avons mis en vidence que des variations de
temprature ou de pH peuvent entraner des changements dans les cintiques de production
des EPS. Elles peuvent galement avoir un effet sur leur solubilit et leur adsorption sur les
flocs ou le matriau membranaire. Dans notre cas, le racteur biologique est maintenu une
temprature constante de 20C alors que le pH nest pas rgul. Nous avons donc voulu
connatre limplication du pH sur le colmatage. Lvolution de la pression transmembranaire
en fonction du pH est prsente la figure V.8.
1
PTM (bar)
0,8
0,6
0,4
0,2
0
0
pH
Figure V.8: Evolution de la pression transmembranaire (PTM) en fonction du pH dans le BAMI
Il napparat pas de relation vidente entre le pH et la pression transmembranaire. On observe

que les fluctuations de pH sont trs importantes : au cours du temps le pH a vari entre 2,7 et
8,2. Les fluctuations des concentrations en EPS solubles et en particulier en protines,
saccompagnent de fluctuations de pH. Certaines conditions de pH pourraient permettre la
prcipitation de composs solubles (carbonates, protines, etc), voire favoriser la cration
dun gel de protines. A concentration identique en protines, les phnomnes mis en jeu
peuvent donc tre trs diffrents selon la gamme de pH concerne. Ceci peut expliquer quon
161
ne trouve sur lensemble des donnes sur le long terme aucun lien entre concentration en EPS
et drive de pression.
Pour rsumer sur cette partie, il apparat que la vitesse de colmatage est la plus faible pour les
3me et 4me priodes de fonctionnement du BAMI, cest--dire pour les forts ges de boues
(53-110 jours). Nous avons donc cherch expliquer ce fait en analysant les caractristiques
des boues au cours du fonctionnement du BAMI. Nous avons tout dabord constat quil
nexiste pas deffet significatif de la concentration en MES sur la dynamique du colmatage.
Aucun lien direct na t mis en vidence entre la taille des flocs et la vitesse de colmatage.
Le colmatage est dautant plus faible que les molcules accumules dans le surnageant sont
dgradables et dgrades. Ceci explique lintrt de travailler fort ges de boues. En
revanche aucune relation directe et simple na t tablie entre drive de pression
transmembranaire et teneurs en diffrentes substances solubles. Cela peut tre li au manque
de donnes aux priodes trs colmatantes et/ou aux fortes variations de pH qui modifient la
proportion soluble/collode des EPS.
A ce stade de notre tude, nos rsultats nous orienteraient plus vers une implication des EPS
du surnageant dans le colmatage long terme. Leur prcipitation, leur dpt et/ou adsorption
sur ou dans le matriau membranaire pourraient contribuer laugmentation de la vitesse de
colmatage.
II. Rversibilit du colmatage

Aprs une priode de fonctionnement, le faisceau de fibres a t extrait du BAMI afin
dtudier la rversibilit du colmatage. Le faisceau colmat a t introduit dans un systme de
filtration quip dune pompe volumtrique permettant la succion/rtrolavage des dbits
levs. Ainsi, directement aprs le prlvement du faisceau colmat, sa permabilit leau
pure (eau ultrafiltre) a t mesure puis des squences de lavages hydrauliques ou chimiques
ont t pratiques. Aprs chaque squence, la permabilit leau pure des membranes a t
dtermine.
Suivant cette technique, une succession de lavages a t ralise sur le faisceau colmat au
197me jour de fonctionnement du BAMI (TSB=37,2 jours) alors que la monte de la
pression transmembranaire tait encore progressive.
162
Les oprations suivantes ont t effectues :

Lavage 1 : limination de la gangue de boue par passage dun jet deau pressuris le
long des membranes,
Lavage 2-7 : rtrolavage leau ultrafiltre durant 15 minutes 1,5 bars
Lavage 8 : succession de rtrolavages chimiques 1,5 bar pendant 15 minutes (ultrasil
6 g.L-1, acide oxalique 5 g.L-1).
Aprs mesure de la permabilit (Lp) et connaissant la rsistance initiale de la membrane
(2,0.1012 m-1), la rsistance du colmatage rsiduel aprs chaque lavage peut tre dtermine en
utilisant le modle des rsistances en srie (Equation V.1) :
Lp =
( V.1 )
. (R m + R c )
Avec Lp : permabilit de la membrane colmate (m3.m-2s-1.Pa-1)

Rc : rsistance de colmatage (m-1)
Rm : rsistance hydraulique de la membrane (m-1)
: viscosit dynamique du permat la temprature de filtration (Pas)
-1
Rc (m )*10
12
Elim.
gangue
Rtrolavage leau
6
4
7,1
5,4
4,2
3,2
3,0
2,9
2,7
0
1
4
5
Numro de lavage
Figure V.9: Efficacit du lavage des membranes
Ainsi, le 197me jour de fonctionnement du BAMI, la rsistance due au colmatage total tait
denviron 1,6.1013 m-1. Cette valeur de rsistance est certainement infrieure la rsistance
existant dans le BAMI, car en sortant le faisceau du racteur il y a srement un changement
de structure et une perte de matire. Cependant, cela montre que la rsistance de colmatage est
bien suprieure celle de la membrane (2,0.1012 m-1).
Llimination de la gangue de boue par rinage permet de supprimer 56% de la rsistance due
au colmatage (passage de 1,6.1013 7,1.1012 m-1). Les rtrolavages successifs leau
ultrafiltre permettent damliorer la permabilit et de supprimer 61% de la rsistance de
163
colmatage restante. Le colmatage restant correspond donc au colmatage irrversible

hydrauliquement. Ainsi, la rsistance due au colmatage rversible est estime environ
1,3.1013 contre 2,7.1012 m-1 pour le colmatage irrversible.
La srie de rtrolavages chimiques effectus par la suite (lavage n8) permet de rcuprer la
totalit de la permabilit de la membrane.
Pour conclure, la rsistance de colmatage totale (1,6.1013 m-1) de la membrane au 197me

jour peut tre dcompose en :
. 56% gangue (colmatage en profondeur du faisceau de fibres)
. 27% autre colmatage rversible
. 17 % adsorption
Ces rsultats mettent en vidence le rle important de la gangue de boue dans la
limitation au transfert de matire. Cette gangue est facilement liminable lchelle du
laboratoire par des mthodes hydrauliques simples. Un enjeu du dveloppement de
BAMIs industriels sera de concevoir des systmes limitant la formation de cette gangue.
Par ailleurs, le colmatage par dpt particulaire en surface et lintrieur des pores de
la membrane amne une contribution significative au colmatage. Le rle des fines
particules, bactries libres et polymres collodaux dans ce colmatage reste prciser.
III. Identification des

colmatage court terme
paramtres
influenant
le
Le but de ce paragraphe est dtudier linfluence des caractristiques dun milieu

biologique sur les performances dune filtration de courte dure. Il sagit de dterminer le
pouvoir colmatant dune boue afin didentifier les composs et les mcanismes participant au
colmatage. La mthode adopte est celle de la filtration par incrmentation du pas de flux
(flux-step). Cette mthode est dcrite dans la partie matriel et mthodes de ce manuscrit.
Au cours du fonctionnement du procd boues actives et du BAMI, des chantillons de
boues ont t prlevs et introduits dans un systme de filtration annexe identique au BAMI.
La vitesse de colmatage (dRc/dt), pour chaque chantillon et chaque flux de permat est alors
dtermine. Un exemple obtenu sur diffrentes boues est prsent figure V.10.
164
16
TSB: 37,2 j
TSB: 32,0 j
12
TSB: 53,0 j
-1
-1
dRC/dt(m .h )*10
12
TSB: 9,8 j
TSB: 37,2 j
TSB: 9,2 j
0
0
20
40
J20C (L.h-1.m-2)
60
80
Figure V.10: Analyse du pouvoir colmatant des boues

Formes noires : boues du BAMI / Formes blanches : boues du BA
Il apparat tout dabord que la notion de flux critique est difficile mettre en vidence dans ce
type de bioracteur fonctionnant en filtration frontale. En effet, il existe, notamment pour la
boue du BA des flux de permat pour lesquels la vitesse apparente du colmatage est nulle.
Cependant, lincertitude sur ces faibles vitesses de colmatage est grande. De plus, mme si
une aration est place sous les membranes, le transfert de particules et soluts vers la paroi
membranaire a toujours lieu. Pour ces raisons, aucun flux critique ne peut tre observable
dans ces expriences.
On observe ensuite que lvolution de la vitesse de colmatage est similaire pour tous les
chantillons filtrs. Dans un premier temps, la vitesse de colmatage augmente
progressivement puis elle sacclre.
Pour des flux de permat infrieurs 20 L.h-1.m-2, le pouvoir colmatant des diffrentes boues
est quasiment le mme. En dautres termes, lors du fonctionnement dun BAMI de faibles
flux de permat, les concentrations de la boue influent trs peu sur le colmatage court terme.
Il y a dailleurs pas ou peu de colmatage court terme dans ce cas.
Pour des flux de permat suprieurs 20 L.h-1.m-2, les boues prsentent un comportement la
filtration diffrent. On constate systmatiquement que, quelles que soient les conditions
opratoires, les boues issues du BAMI prsentent une vitesse de colmatage suprieure
aux boues issues dun systme boues actives.
165
1. Colmatage court terme ge de boues faible (9 jours)

Des expriences ont t ralises afin de dterminer le pouvoir colmatant de boues
issues des deux bioracteurs fonctionnant au mme ge de boues de 9-10 jours et de
concentration en MES quasiment gale (MES=1,9 g.L-1 pour le BAMI contre 1,5 g.L-1 pour le
BA). Les boues introduites dans le systme de filtration dcrit au chapitre II, ont t filtres
successivement en suivant la mthode dincrmentation du flux de permat. Lvolution de la
vitesse de colmatage pour les deux boues en fonction du flux de permat impos est reporte
la figure V.11.
dRC/dt(m-1.h-1)*1012
16
BA-MES=1,5 g.L-1
12
BAMI-MES=1,9 g.L-1
8
20
40
-1
-2
J20C
Fp (L.h .m )
60
80
Figure V.11: Comparaison du pouvoir colmatant d'une boue de BAMI et de BA

fonctionnant respectivement 9,8 et 9,2 jours.
On observe que, quel que soit le flux de permat appliqu et pour une concentration en MES
quasiment similaire, la vitesse de colmatage est suprieure dans le BAMI. Par exemple, pour
un flux de permat de 30 L.h-1.m-2 la vitesse de colmatage est denviron 4.1012 m-1.h-1 pour la
boue de BAMI alors quelle est infrieure 1.1012 m-1.h-1 pour celle du BA.
Pour comprendre la diffrence de comportement entre ces deux boues en terme de colmatage
court terme, nous avons compar les proprits des boues. Dans un premier temps, les
distributions granulomtriques des deux boues sont prsentes (Figure V.12).
166
10
8
BAM
BA
6
4
2
0
1
10
100
1000
10000
Figure V.12: Distributions granulomtriques des boues du BAMI et du BA

de lexprience de filtrabilit (TSB : 9,2-9,8 j)
Il apparat que, pour cet ge de boue, une des diffrences essentielles dans la structure
particulaire du milieu biologique est la forme de la distribution. En effet, alors que pour le
procd boues actives la distribution est unimodale avec une population de flocs centre
sur 160 m, celle du BAMI est bimodale avec une population de flocs centre sur environ
260 m et une deuxime population de fines particules centre sur environ 6 m. Les
membranes utilises ici ont un diamtre moyen des pores de 0,2 m cest pourquoi les fines
particules peuvent contribuer au colmatage par dpt externe et interne pour celles ayant un
diamtre infrieur 0,2 m. Ainsi, pour ces faibles valeurs de MES, la diffrence de
comportement des deux boues la filtration pourrait en partie tre explique par la prsence
de fines particules (bactries libres, collodes minrals et organiques) dans les boues du
BAMI. A concentration en MES quivalente, les structures des dpts de particules constitus
partir des deux boues seront diffrentes.
De plus on observe une lgre diffrence dans la dimension fractale des flocs issus des deux
racteurs. Les flocs du procd boues actives prsentent une dimension fractale de 2,10
alors que ceux du BAMI ont une dimension fractale de 2,00. Ces derniers sont donc
lgrement moins denses et plus dformables ce qui peut contribuer augmenter la rsistance
et la compressibilit de leur dpt.
167
Les boues ont galement t caractrises par leur teneur en exopolymres dans les flocs
(Figure V.13).
15,6
15,8
25,1
29,1
59,3
55,0
Graphique 1
-1) -1
Teneurs (mg.g
Concentration
(mg.g
)
MVSMVS
BAMI
BA
40
30.1
30
20
24.8
13.1
12.7
7.9
10
7.1
0
BAMI
BA
Graphique 2
FigureV.13: Proportions (graphique 1) et teneurs (graphique 2) en EPSlis des flocs de BAMI et de BA de
lexprience de filtrabilit (TSB : 9,2-9,8 j)
Substances humiques ( ), protines ( ), polysaccharides ( ).
Les teneurs en exopolymres dans les flocs et donc leurs proportions sont quasiment
similaires pour les deux boues (incertitude de mesure estime 15% de la valeur). Les
exopolymres des flocs de BAMI et du procd boues actives sont principalement
constitus de protines, puisquelles reprsentent environ 57% des exopolymres prsents.
Les concentrations en EPSlis tant quasiment similaires, il ne semble pas que les diffrences
de colmatage court terme observes soient lis aux exopolymres des flocs.
168
Les concentrations en exopolymres des deux surnageants ont galement t analyses

(Figure V.14).
19,7
36,3
52,4
80,3
11,3
Graphique 1
-1
L-1-1
Concentrations
(mg.L
Concentration
)-1)))
Concentration
(mg.L
Concentration (mg.
(mg.L
BAMI
BAM
40
40
BA
35,8
35,8
35.8
31,5
31,5
31.5
30
30
24,9
24.9
24,9
20
20
10
10
00
7,8
7.8
7,8
7,7
7.7
7,7
0.0
0,0
0,0
BAMI
BAM
BA
Graphique 2
Figure V.14: Proportions (graphique 1) et concentrations (graphique 2) en EPS des surnageants
de boues de BAMI et de BA de lexprience de filtrabilit (TSB : 9,2-9,8 j)
Substances humiques ( ), protines ( ), polysaccharides ( ).
Les surnageants des deux boues prsentent des diffrences significatives de concentrations en
exopolymres. Le surnageant de la boue de BAMI est beaucoup plus concentr en
exopolymres solubles et collodaux que celui du procd boues actives. La concentration
en substances humiques est quasiment similaire dans les deux surnageants (31 36 mg.L-1).
Ces substances constituent 52% des exopolymres dans le cas du BAMI, contre 80% dans le
cas du procd boues actives. La diffrence majeure entre les deux boues est due aux
concentrations plus leves en protines et polysaccharides dans le BAMI. La concentration
en polysaccharides est de 24,9 mg.L-1 dans le surnageant du BAMI et de 7,7 mg.L-1 dans le
surnageant du procd boues actives. En ce qui concerne les protines, elles sont
inexistantes dans le surnageant du procd boues actives alors que 7,8 mg.L-1 composent
celui du BAMI. Ainsi les protines et les polysaccharides collodaux et solubles pourraient
participer la diffrence de comportement la filtration des deux boues. Ces composs
peuvent notamment intervenir dans la structuration du gteau de filtration, former un gel la
surface des membranes ou sadsorber sur le matriau membranaire.
169
Ces expriences de filtrabilit des boues de faibles temps de sjour (9-10 jours) et de
mme concentration en MES montrent donc que plusieurs paramtres pourraient
influencer le comportement dune filtration court terme :
- la taille des flocs,
- lexistence dune population de fines particules,
- la concentration en EPS du surnageant et notamment celle des protines et des
polysaccharides.
Signalons que les paramtres tudis ici pour la caractrisation des boues ne reprsentent
quune faible part des facteurs pouvant influencer le colmatage. Outre les paramtres
opratoires, la synthse bibliographique a permis de mettre en vidence limportance des
proprits de surface (hydrophobicit, charge de surface) des flocs et collodes dans le
colmatage.
2. Influence des proprits du fluide biologique sur le

colmatage court terme
On peut ensuite se demander, de manire gnrale, quand lge de boues varie quelles sont
alors les caractristiques des boues menant une diffrenciation de leur filtrabilit court
terme? Ainsi, les matires en suspension et les EPS du surnageant ont t analyss pour les
boues filtres. Pour un flux donn (Figure V.10), il est possible de connatre pour chaque boue
et donc pour une caractristique donne (DCO ou EPS) la valeur de la vitesse de colmatage.
Au final, nous pouvons tracer une courbe donnant la vitesse de colmatage en fonction dun
paramtre caractristique des boues. La figure V.15 prsente la vitesse de colmatage obtenue
pour toutes les boues analyses (boues actives et boues du BAMI) en fonction de leur
concentration en MES, lorsque le flux de permat est de 30 et 40 L.h-1.m-2.
20
20
12
15
-1
-1
15
10
-1
-1
J=40 L.h-1.m-2
dRc/dt (m .h )*10
dRc/dt (m .h )*10
12
J=30 L.h-1.m-2
10
5
0
0
0
4
6
-1
MES (g.L )
4
6
MES (g.L-1)
Figure V.15: Evolution des vitesses de colmatage en fonction de la concentration en MES des boues
170
Au vu des graphiques de la figure V.15, dans la gamme de concentrations de notre tude,

entre 1,5 et 5,8 gMES.L-1, on ne peut dgager une relation reliant de manire univoque les MES
(et donc lge de boues) la vitesse de colmatage. Une augmentation de la concentration en
MES ne saccompagne pas systmatiquement dune augmentation de la vitesse de colmatage.
Pour un flux de 40 L.h-1.m-2, la vitesse de colmatage est denviron 6,0.1012 m-1.h-1, alors
quelle est de 13,0.1012 m-1.h-1 pour respectivement une concentration en MES de 5,83 g.L-1 et
3,61 g.L-1.
De tous les points exprimentaux de la figure V.15 les deux valeurs de vitesse de colmatage
leve (13.1012 m-1.h-1 avec un pH compris entre 4,2-4,8 et 14.1012 m-1.h-1 avec un pH
compris entre 4,4-5,0) correspondent aux valeurs les plus leves de la concentration en
exopolymres du surnageant (respectivement 57 et 77 mg.L-1). Mis part ces deux points qui
correspondent deux chantillons diffrents, la vitesse de colmatage semblerait augmenter
avec la concentration en MES (entre 1,5 et 5,8 gMES.L-1).
Les exopolymres du surnageant pourraient donc tre responsables de diffrences de
comportements la filtration entre deux boues. Nous nous sommes alors intresss relier les
proprits du surnageant des boues (EPSsolubles spcifiques) avec leur filtrabilit. Des
rsultats intressants sont obtenus pour les protines et les polysaccharides des surnageants
(Figure V.16 et Figure V.17). Rappelons que les surnageants ont t obtenus aprs
centrifugation des boues 4200 G pendant 15 minutes. Ils contiennent des lments solubles
des boues mais galement la fraction collodale.
12
12
J=20 L.h-1.m-2
J=30 L.h-1.m-2
J=40 L.h-1.m-2
-1
dRc/dt (m .h )*10
16
-1
20
8
4
0
0
10
20
-1
Concentration en polysaccharides solubles (mg.L )
Figure V.16: Vitesse de colmatage en fonction de la concentration en polysaccharides des surnageants

de BAMI et de BA
171
30
J=20 L.h-1.m-2
16
J=30 L.h-1.m-2
12
J=40 L.h-1.m-2
-1
-1
dRc/dt (m .h )*10
12
20
8
4
0
0
10
20
-1
Concentrationenenprotines
Protinesolubles
soluble (mg.L
Concentration
(mg.L-1)
30
Figure V.17: Vitesse de colmatage en fonction de la concentration en protines des surnageants

de BAMI et de BA
Il apparat que, pour un flux de permat donn, la vitesse de colmatage augmente avec la
concentration en protines ou polysaccharides du surnageant (les caractristiques des boues
telles que le diamtre des flocs, la dimension fractale. la teneur en EPS etc sont
probablement diffrentes dun point un autre). Cette augmentation est dautant plus marque
que le flux de permat est lev. Ainsi, travailler un flux de permat de 40 L.h-1.m-2 entrane
une vitesse de colmatage de 13.1012 m-1.h-1, si la concentration en protines du surnageant est
de 7 mg.L-1. Pour un flux de 20 L.h-1.m-2 la vitesse de colmatage est de 2.1012 m-1.h-1 cette
mme concentration en protines. On observe galement que la vitesse de colmatage est plus
sensible et mieux corrle la concentration en protines qu celles en polysaccharides.
Muka et al. (2000) constatent que plus la rtention de protines solubles est leve, plus le
colmatage est important. Dans notre cas, les concentrations en protines et polysaccharides du
surnageant sont dtermines sur la boue centrifuge 4200 G pendant 15 minutes. Les
concentrations en protines et polysaccharides correspondent donc certainement aux
composs solubles et collodaux. Ainsi, ces exopolymres, associs aux MES ou de faon
isole, peuvent former un dpt, voire un gel la surface de la membrane.
Ltude de la compressibilit du dpt a donc t mene en dterminant la valeur du produit
.C pour les diffrents flux de filtration ( : rsistance spcifique du dpt ; C : quantit de
matire dpose la surface de la membrane par unit de volume). A chaque changement de

flux, la premire valeur de la pression transmembranaire est releve et note PTM0. Ainsi, il
est possible dtudier lvolution du produit .C en fonction des diffrentes valeurs de PTM0
(Figure V.18).
172
40
PN = 27,6 mg.L-1
PS=17,6 mg.L-1
PN = 5,0-7,7 mg.L-1
PS=14,0-24,9 mg.L-1
.C (10
13
-2
m )
30
20
-1
PN = 3,1 mg.L
PS=18,2 mg.L-1
10
PN = 0 mg.L-1
PS=7,7 mg.L-1
0
0
0.1
0.2
0.3
PTM0 (bar)
0.4
0.5
0.6
Figure V.18: Evolution du produit .C en fonction de la pression transmembranaire pour les boues
du BA et du BAMI
La figure V.18 montre que linfluence des polysaccharides est peu visible sur la valeur du
produit .C. En revanche, le dpt gnr par chaque boue a un comportement diffrent la
filtration en fonction de sa teneur en protines. Leffet dune augmentation de pression se
traduit diffremment selon la concentration en protines du surnageant.
Pour une concentration en protines nulle, la rsistance du dpt est indpendante de la
pression transmembranaire, dans la gamme de pression tudie (entre 0,1 et 0,4 bar). Le dpt
est donc incompressible.
Pour une faible concentration en protines (infrieur 3,1 mg.L-1), on voit que la diffrence
de comportement la filtration entre des boues sera visible partir de pressions suprieures
environ 0,15 bar.
Quand la concentration en protines est suprieure 5 mg.L-1, laugmentation, mme minime
de la pression transmembranaire entrane une augmentation du produit .C, cest--dire de la
quantit de matire (protines) dpose sur la membrane et/ou de la rsistance spcifique du
gteau de filtration :
-dans le cas ou laugmentation de la quantit de matire dpose dpend de la quantit
de protines, cela signifie que les protines sont sous forme particulaire et quelles
contribuent la fois au colmatage interne et en surface. Ce dpt favorise alors la
rtention des flocs, bactries et autres MES.
-dans le cas o laugmentation du produit .C dpend essentiellement de
laugmentation de la rsistance spcifique au colmatage alors augmente avec la
pression transmembranaire et cela signifie que le dpt est compressible et que la
173
compressibilit dpend de la concentration en protines. Les protines peuvent

influencer la structuration et la compressibilit du dpt soit parce quelles sont elles
mmes sous forme collodale soit parce quelles pourraient gnrer des pontages entre
substances collodales. En forte concentration et/ou pour de fortes pressions
transmembranaires elles creraient un dpt voire un gel compressible.
De plus, la figure V.18 montre que pour une pression transmembranaire donne, une
augmentation de la quantit de protines dans le surnageant provoque une augmentation de la
quantit dpose et/ou de la rsistance spcifique. Ces rsultats particulirement originaux
sont importants, car ils mettent en vidence un lien entre la composition du surnageant et des
proprits structurelles du dpt colmatant.
Enfin, sur la figure V.18 nous avons indiqu galement la concentration en polysaccharides
du surnageant des boues. Il apparat que, pour une pression transmembranaire donne, le
produit .C augmente lorsque le rapport protines/polysaccharides augmente de 0 1,6. Il
faut se rappeler que les protines sont majoritairement hydrophobes contrairement aux
polysaccharides qui sont plutt hydrophiles. Ainsi, la structuration du dpt pourrait
galement tre lie la proportion en chacun de ces composs et non pas uniquement lie la
concentration en protines.
Les exopolymres du surnageant de boue jouent un rle dans le colmatage court terme. Ces
rsultats rejoignent ceux de Bouhabila (1999) qui a tudi, suivant lge des boues, la
rsistance spcifique du surnageant (obtenu par centrifugation 4500 tr/min pendant
1 minute) de boues issues dun BAMI aliment en eau use domestique. Il a filtr uniquement
le surnageant de boue (filtration frontale), sur membrane plane en polysulfone de diamtre de
pores gal 0,1 m et sous 1 bar (Figure V.19).
174
14
. C (.10
Alpha.C
(101515m
m-2-2))
12
10
8
6
4
2
0
20
40
60
80
Temps (j)
10 jours
20 jours
100
120
30 jours
Figure V.19: Suivi de la filtrabilit " C" du surnageant de boues pour 3 temps de sjour des boues
(Bouhabila 1999)
Les courbes de la figure V.19 montrent que suivant lge des boues la valeur du produit .C,
cest--dire la rsistance spcifique du dpt multiplie par la quantit de matire dpose la
surface de la membrane, est diffrente. Pour un ge de boues lev la rsistance du dpt de
filtration est la plus faible. Daprs nos rsultats, un ge de boues lev correspond, entre
autre, la concentration en exopolymres du surnageant la plus faible (Chapitre IV). En
dautres termes, les rsultats de Bouhabila (1999) confirmeraient que lintensit du colmatage
dpendrait en partie de la concentration en exopolymres du surnageant.
Par ailleurs, la figure V.19 montre galement que pour un ge de boues fix, le produit .C
volue au cours du temps. Pour ltude de Bouhabila (1999) le produit .C augmente dans les
30 premiers jours de fonctionnement du BAMI, puis chute. Cette volution du produit .C
rappelle celle de la concentration en EPS de nos surnageants de BAMI pour des boues
nouvellement ensemences (Chapitre III) et appuie le fait que les EPS du surnageant soient
impliqus dans le colmatage court terme.
Ainsi, travers nos rsultats et ceux de la littrature, il apparat clairement que les EPS du
surnageant interviennent fortement dans le colmatage et notamment les polysaccharides et les
protines qui pourraient participer la structuration du dpt, en plus de leur contribution dj
connue ladsorption.
175
IV. Mcanismes de colmatage par un milieu biologique

dans un BAMI
Au cours de ce travail, nous avons tout dabord tudi le colmatage prenant place sur
de longues dures de filtration et correspondant une filtration un flux soutenable.
Paralllement, une tude sur le pouvoir colmatant court terme des boues issues du procd
boues actives et du BAMI a t mene. Lobjectif de ce travail tait didentifier les composs
et les mcanismes responsables dun type de colmatage. Les observations faites durant cette
tude permettent de proposer des mcanismes de colmatage jouant un rle important lors
dune filtration dun milieu biologique dans un BAMI :
1. la formation dune gangue de boue qui colmate le faisceau de fibres en profondeur
et attnue les effets de laration sur le colmatage des membranes,
2. ladsorption et/ou la formation dun gel contenant des protines,
3. le colmatage interne et en surface par des mcanismes rversibles hydrauliquement
(sans liens forts entre la matire et la membrane)
Nous proposons de considrer chacun de ces mcanismes et de discuter pour chacun dentreeux des proprits du fluide biologique intervenant dans ce mcanisme, en examinant la
contribution de la fraction particulaire (flocs + fines particules) et des composs dissous.
Nous allons galement discuter pour chacun de ces mcanismes de leur contribution possible
la drive de pression lors dun fonctionnement sur du long terme.
La gangue de boue : ce phnomne a t observ lors du colmatage sur du long terme. Il est
essentiellement d un amas de flocs. Les protines et polysaccharides peuvent contribuer
structurer cet amas.
Le dveloppement de cette gangue est un phnomne plutt progressif et a donc une influence
lors de la filtration sur de longues dures. Outre son implication dans la monte progressive
de la pression transmembranaire, on pourrait mettre lhypothse que cette gangue puisse
galement tre responsable du changement soudain de la drive de pression. En effet, partir
dune pression limite, cette gangue pourrait se comprimer et augmenter la rsistance au
transfert de matire de la priphrie vers le centre du faisceau et donc la rsistance totale. Afin
destimer la validit de cette hypothse, nous avons utilis la membrane colmate du
176
197me jour pour filtrer diffrents flux de leau ultrafiltre par paliers de 20 secondes. La
figure V.20 montre la progression de la pression transmembranaire pour les diffrents flux de
permat fixs.
10
-1
-2
Fp20C (L.h .m )
8
6
4
2
0
0,0
0,1
0,2
0,3
0,4
Pression transmembranaire (bar)
0,5
0,6
Figure V.20: Evolution de la pression transmembranaire pour diffrents flux de permat fixs
Il apparat que pour des pressions transmembranaires comprises entre 0,15 et 0,55 bars, la
linarit entre flux de permat et pression transmembranaire est tablie sur toute la gamme de
flux. Cette exprience ne permet donc pas de confirmer lhypothse dune compression rapide
(en 20 secondes) de la gangue pour cette gamme de pressions. Il est toutefois difficile de
conclure sur la compressibilit du dpt de fortes pressions transmembranaires dans la
mesure o la gangue pourrait prsenter une compressibilit pour des dures plus longues
dapplication de la pression. Enfin, lors de lintroduction de la membrane colmate dans le
systme utilis pour le lavage de la membrane, une partie de lenveloppe entourant les fibres a
forcment t perdue ou sest structure diffremment.
Pour pouvoir conclure dfinitivement sur le rle de la compressibilit de la gangue de boue
sur la drive rapide de pression, il faudrait pouvoir pratiquer cette exprience in situ, sans
extraire le faisceau de fibres, aprs vidange du racteur (pour pouvoir filtrer de leau pure non
colmatante) et pour des dures plus longues dapplication de la pression. Cette opration ne
peut tre ralise qu larrt dfinitif du racteur.
Ladsorption : Cest un phnomne qui intervient gnralement pour de longs temps de
filtration. Dans notre tude, ce phnomne a t mis en vidence :
- lors de ltude de la rversibilit du colmatage. Au 197me jour de fonctionnement
du BAMI, lensemble du colmatage irrversible reprsentait 17% du colmatage total.
177
- lors de la filtration sur de courtes dures de filtration. Lutilisation dagents

chimiques pour la rgnration du faisceau de fibres tait ncessaire aprs chaque
exprience de filtration. Lors des expriences de dtermination du pouvoir colmatant
dune boue par incrmentation du flux de permat, les premiers flux de filtration cest-dire les plus faibles, nengendraient aucune drive de pression. Le colmatage
intervenait donc aprs 20 30 minutes de filtration pendant lesquelles de ladsorption
peut avoir lieu.
Certains auteurs comme Ognier et al. (2004) modlisent la monte progressive de la pression
transmembranaire par un phnomne de colmatage interne des pores. Selon eux, ladsorption
ou le blocage des pores de la membrane par ladsorption de composs solubles entraneraient
une valeur du flux local au voisinage dun pore suprieure son flux critique. Ainsi, bien que
le flux global de filtration resterait constant, certains endroits de la membrane le flux de
filtration dpasserait le flux critique du pore. Il en dcoulerait un colmatage accru se
traduisant par lapparition dun dpt certains endroits de la membrane et au final une
vitesse globale de colmatage acclre.
Dans notre cas, cette explication de la monte progressive de la pression transmembranaire
na pu tre vrifie. En effet aucune relation na pu tre mise en vidence entre la
concentration en composs solubles (DCO, EPS) et lvolution long terme de la pression
transmembranaire. Par contre, nous avons mis en vidence linfluence probable de certains
EPS (protines et polysaccharides) accumuls dans le surnageant et biodgradables forts
ges de boues. Le phnomne dadsorption peut donc tre prfrentiellement attribu aux
polysaccharides et aux protines. De plus, nous avons montr que dautres phnomnes
peuvent contribuer la lente drive de pression : le dpt interne et externe de fines particules
et des flocs ou la formation dune gangue de boue sont galement prendre en considration.
Le colmatage interne et en surface : Ce type de colmatage est rversible hydrauliquement.
Ltude de la rversibilit du colmatage a montr que la gangue de boue et le colmatage
rversible autre, comptent respectivement pour 56 % et 27 % de la rsistance totale au
colmatage. La part prise par le colmatage rversible li au dpt interne et externe est donc
significative. Les fines particules minrales et organiques ainsi que les flocs pourraient
participer ce dpt.
Linfluence du diamtre des fines particules et collodes sur ce type de colmatage reste
prciser. Cependant au travers des expriences de filtrabilit des boues du procd boues
actives et du BAMI de temps sjour similaire, il apparat que les vitesses de colmatage les
178
plus leves correspondent aux boues ayant des diamtres de fines particules les plus faibles
(centrs sur 1 10 m). Ces composs pourraient former un dpt lintrieur des pores de la
membrane ou la surface du matriau membranaire. Le blocage des pores de la membrane de
microfiltration pourrait galement prendre place.
En ce qui concerne linfluence des flocs, il apparat que pour les dimensions fractales les plus
faibles, la vitesse de colmatage est la plus forte, cest--dire pour les boues du BAMI. Ainsi,
filtrer une boue contenant des flocs de faible dimension fractale pourrait entraner une
augmentation de la capacit du dpt se comprimer et donc une augmentation de la vitesse
de colmatage quand la pression augmente. La compressibilit pourrait galement voluer au
cours du temps en fonction des conditions de pH, de temprature, de linfluence de laration
sur la structuration du dpt, etc
La compressibilit du dpt serait galement lie la concentration en protines. En effet, les
expriences de filtration court terme ont montr limportance des protines du surnageant
sur le colmatage d au dpt. Pour une pression donne, laugmentation de la concentration
en protines du surnageant entrane une augmentation du produit .C. A linverse, pour une
concentration en protines donne, laugmentation de la pression transmembranaire entrane
une augmentation du produit .C ( : rsistance spcifique du dpt/gel, C : quantit de
matire dpose sur la membrane). Les protines pourraient donc soit saccumuler sous forme
de gel compressible soit structurer diffremment le dpt la surface de la membrane, par
exemple, en crant des liaisons entre les flocs. Cette structure serait alors beaucoup plus
dformable que lempilement de flocs seuls.
Ainsi, les protines peuvent tre associes aux flocs et jouer un rle dans la compressibilit du
dpt. Elles pourraient galement former un gel la surface du matriau membranaire
lorsquelles sont localement en forte concentration ou que le pH ou la temprature varient.
Rappelons que pour les racteurs de cette tude, de trs fortes variations de pH ont t notes
lors des expriences sur le long terme. Shiau et al. (2004), lors de la filtration dune solution
de protines ont montr que laugmentation soudaine de la rsistance de colmatage est due
la compression du dpt de filtration. La monte soudaine de la rsistance de colmatage
intervient plus tt lorsque la pression applique la filtration ou la concentration en protines
sont plus leves. Ces rsultats bibliographiques confirment quun dpt de protines est
compressible et que des paramtres comme la pression applique ou la concentration en
protines modifient sa compressibilit. Les montes rapides de la vitesse de colmatage lors
179
des expriences sur le long terme pourraient donc tre dues en partie cette compressibilit
du dpt en prsence de protines.
La monte rapide interviendrait donc ds lors quune pression minimale serait atteinte et que
la concentration en protines en solution serait suffisamment leve. Suivant cette hypothse,
la valeur de la pression minimale correspondant au point dinflexion des courbes PTM=f(t)
dpend de la concentration en protines. Plus la concentration en protines est leve, plus
laugmentation de vitesse de colmatage serait leve.
En conclusion sur les deux phases de vitesse de colmatage on peut considrer que :
- la phase de drive lente correspond ladsorption de protines et polysaccharides, au
dpt de flocs en surface et de fines particules en surface et dans les pores,
- la phase de drive rapide pourrait tre due
. la compressibilit de la gangue de boue (hypothse peu probable, vrifier),
. une compressibilit des flocs dformables,
. une compressibilit du dpt en liaison avec la prsence de protines et/ou
la compressibilit dun gel de protines.
V. Conclusion
Lors de cette tude nous avons analys le colmatage par un milieu biologique dans un BAMI.
Les principaux mcanismes de colmatage ont t dcrits et comments.
Lors de la filtration sur du long terme deux phases dvolution de la pression
transmembranaire ont pu tre mises en vidence. Une phase de monte progressive de la
pression transmembranaire et une phase daugmentation soudaine. Les mcanismes
prpondrants dans le colmatage sont probablement diffrents au cours de ces deux phases.
Alors que la monte lente de la pression transmembranaire pourrait tre rgie par le dpt de
particules, ladsorption de composs solubles et collodaux ainsi que par la formation dune
gangue de boue, la monte rapide pourrait tre due une restructuration et une compression
du dpt. Ce dpt est form par les flocs, les collodes notamment organiques et les fines
particules (Figure V.21)
180
PS
PN
PS
PN
PN
PN PN PN PN
Figure V.21: Schmatisation du colmatage des membranes par un milieu biologique
La rsistance la filtration de ce dpt va dpendre de :

-
la dformabilit des flocs la pression en lien avec leur forme, taille et rigidit,
la prsence de fines particules qui peuvent sinsrer dans les interstices du

dpt et le structurer diffremment,
les forces dinteractions entre les flocs. Les protines et les polysaccharides
peuvent crer des pontages entre flocs et augmenter la compressibilit du
dpt.
Le dpt peut galement contenir des protines sous forme de gel. Il se structure alors
diffremment
notamment
suivant
la
concentration
en
protines
ou
la
pression
transmembranaire applique.
Pour conclure, il apparat que les phnomnes participant la limitation du flux de permat
sont complexes et font intervenir des mcanismes complmentaires. Cette tude permis de
montrer quil existe un lien troit entre les caractristiques du milieu biologique et en
particulier la teneur en protines et les proprits du colmatage.
181
CONCLUSION
Conclusion
A lheure actuelle, un des procds les plus utiliss en matire dpuration des eaux
rsiduaires urbaines est le systme boues actives. Il doit maintenant faire face de
nouvelles exigences et notamment tre capable de traiter plus, mieux, sans agrandissement
des installations existantes. Face ces nouveaux besoins ce procd savre quelques fois
inadapt. Les bioracteurs membranes constituent une alternative intressante pour la
dpollution des eaux et connaissent un dveloppement important, en particulier les
bioracteurs membranes immerges.
Cependant, le dimensionnement, la conduite et loptimisation des bioracteurs membranes
restent encore problmatiques en raison de connaissances insuffisantes sur les mcanismes de
colmatage.
Lobjectif de ce travail tait de caractriser les interactions entre les spcificits physicochimiques dun milieu biologique typique dun BAMI et la sparation membranaire. Pour
cela, le bioracteur membranes a t compar avec un procd boues actives fonctionnant
dans les mmes conditions et aliment par la mme eau rsiduaire urbaine. Paralllement, une
tude spcifique de linfluence du temps de sjour des boues, a t mene.
Sparation
membranaire
Milieu Biologique
Conditions
opratoires
Description de la dmarche adopte au cours de cette tude
Les principales conclusions de cette tude sont synthtises ci-dessous.

Influence de la sparation membranaire et du temps de sjour des boues sur les
proprits du milieu biologique :
Il est tout dabord apparu que la filtration induit des modifications dans les caractristiques du
milieu biologique et notamment celles des surnageants des boues. La sparation membranaire
permet daccumuler certains exopolymres du surnageant, notamment les protines et les
polysaccharides. Ainsi, chaque nouvel ensemencement du BAMI, les polymres
saccumulent au sein du surnageant puis sont biodgrads. Aprs stabilisation des MES, les
protines (0-16 mg.L-1) constituent le groupe minoritaire du surnageant alors que les
182
Conclusion
substances humiques sont hauteur de 12 35 mg.L-1 et les polysaccharides entre 4 et

40 mg.L-1.
Linfluence du temps de sjour est diffrente pour le surnageant de BAMI et celui du procd
boues actives.
Pour le BAMI, les concentrations en polysaccharides et protines diminuent lorsque lge des
boues augmente de 9,8 53,0 jours, puis augmente au-del de 53 jours dge de boues.
Pour le procd boues actives les concentrations en polysaccharides sont faibles (5
10 mg.L-1) aux ges de boues les plus faibles (9,2 14,3 jours) puis augmentent des valeurs
quasiment similaires celles du BAMI lorsque lge de boue augmente 32 jours.
En ce qui concerne les flocs, aucune diffrence importante na t observe entre les flocs
issus des deux procds pour les mmes temps de sjours des boues. Le diamtre des flocs
(80 m<d50<200 m), la teneur en protines (5,5 mg.gMVS-1<teneur en protines<45,3
mg.gMVS-1) en polysaccharides (1,9 mg.gMVS-1<teneur en polysaccharides<25,1 mg.gMVS-1),
lindice des boues (50 mL.g-1<IB< 110 mL.g-1), la dimension fractale (2<Df<2,2) sont
identiques dans les deux racteurs.
En revanche, lge des boues influe sur les caractristiques des flocs. Laugmentation de lge
des boues dans le BAMI de 9,2 110 jours se traduit par :
-
une diminution du rapport protines/polysaccharides (4 2) et de lindice de boue

(100 70 mL.g-1),
une augmentation de la dimension fractale (2 2,2), et de la turbidit du

surnageant aprs 30 minutes de dcantation (110 160 NTU).
Lvolution du diamtre des flocs semble suivre celle de la teneur globale en EPSlis :
-
une augmentation de lge de boues de 9 53 jours entrane une diminution de la

teneur en EPSlis (70 35 mg.gMVS-1) et de la taille des flocs (200 80 m),
au-del de 53 jours dge de boues, le diamtre des flocs et priori les teneurs en
exopolymres augmentent.
En revanche, lvolution de la totalit des EPS des flocs nest pas lie de faon simple aux
EPS
spcifiques.
En
effet,
lorsque
lge
des
boues
augmente,
le
rapport
protines/polysaccharides diminue. Ainsi, la teneur en protines semble corrle celle de la

fraction de bactries actives alors que la cintique dhydrolyse des polysaccharides semble
plus lente et indpendante de la biomasse active.
183
Conclusion
Enfin ce travail a permis de prciser les potentialits du BAMI en matire de production de

boues. Peu de diffrences ont t constates entre les deux procds lorsquils fonctionnent
aux mmes ges de boues infrieurs 37 jours. La capacit rduire la production de boues
dun BAMI est lie son aptitude pouvoir oprer de forts ges de boues. Par ailleurs, les
modles classiques de modlisation de la production de boues savrent inefficaces pour
prdire la production de boues pour des BAMI voluant dans une large gamme de temps de
sjour des boues.
Influence des caractristiques du milieu biologique et des conditions opratoires sur la
sparation membranaire
Les analyses menes sur le BAMI ont permis ltude des mcanismes de colmatage long
terme. Deux phases distinctes dvolution de la vitesse de colmatage ont t observes :
-une phase de monte progressive de la pression transmembranaire probablement due
ladsorption, la formation dune gangue de boue et au dpt de protines et de
polysaccharides collodaux et solubles,
-une phase dacclration de la vitesse de colmatage qui pourrait tre due la
restructuration/compressibilit du dpt en lien avec la prsence de protines.
Paralllement, une tude du colmatage court terme a t mene afin didentifier les
paramtres pouvant influencer ce type de colmatage. A de faibles flux, les caractristiques de
la boue influent peu sur la vitesse de colmatage. Pour des flux suprieurs une valeur limite
de lordre de 20 L.h-1.m-2 et pour des concentrations en MES comprises entre 1,5 et
5,8 gMES.L-1, la concentration en polymres solubles, la prsence de fines particules (collodes
organiques, bactries libres et MES minrales) et la dformabilit des flocs semblent jouer un
rle prpondrant dans le colmatage. Un des rsultats particulirement intressant est le rle
jou par les protines dans la structuration du dpt. Pour de fortes concentrations en
protines et/ou des pressions transmembranaires leves la rsistance du dpt augmente par
augmentation de la quantit de matire dpose et/ou de la compressibilit du dpt. Deux
hypothses peuvent expliquer que la compressibilit du dpt augmente avec la concentration
en protines :
-
Quand la concentration locale en protines au voisinage de la membrane ou du

dpt augmente du fait de la rtention par la membrane, les protines peuvent
former un gel uniforme ou entre flocs.
Les protines pourraient galement contribuer modifier la structuration du dpt

en formant des liens entre flocs.
184
Conclusion
Suite cette tude, plusieurs domaines restent explorer et permettraient une comprhension
plus claire des phnomnes rencontrs dans un BAMI. Les tudes suivantes pourraient tre
menes :
-
une analyse multi-variable des paramtres pouvant influencer la dynamique du

colmatage. Dans ce cadre une attention plus particulire devra tre porte aux
paramtres tels que les fines particules, les protines et le pH. Il faudrait en
particulier diffrencier les fractions particulaires et solubles des EPS et des
protines.
une analyse des polymres du surnageant afin didentifier prcisment les

polymres prsents dans le surnageant et leur masse molculaire. Ces analyses
permettraient de prciser les effets dun changement de temprature, de pH sur la
solubilit des polymres mais galement de relier la masse molculaire des
polymres au colmatage,
une modlisation du comportement de la biomasse par des logiciels de simulation

dynamique tel que GPS-X pour prdire les cintiques de biodgradation et de
production de boues, en intgrant les mcanismes de production et dhydrolyse des
exopolymres.
Cette tude permet de dgager des enjeux importants pour lamlioration des BAMIs et des
pistes pour des dveloppements futurs :
-
contrler et limiter la formation de la gangue de boue en travaillant sur la

conception du faisceau de fibres et sur lhydrodynamique au sein des racteurs,
limiter le rle jou par les protines solubles sur le colmatage. Il y a plusieurs
stratgies possibles :
. maintenir les protines sous forme soluble en contrlant les proprits de la
solution (rgulation de pH, temprature),
. amliorer la biodgradabilit des protines et/ou limiter leur production
. dplacer le problme en favorisant le dpt de protines dans dautres zones
du racteur, par exemple en favorisant leur adsorption sur des supports ou en
les intgrant plus dans les flocs, par des processus de floculation. Cette dernire
mthode aurait lavantage de faire diminuer en mme temps la population de
fines particules libres, responsables du colmatage interne des membranes.
185
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195
ANNEXE I
CHOIX DE LA METHODE
DEXTRACTION ET DE DOSAGE
DES EPS
Annexe I : Choix de la mthode dextraction et de dosage des EPS
I. Choix de la mthode dextraction des EPSlis

Les rsultats fournis au tableau I.1, et notamment les travaux de Liu et Fang (2002)
raliss sur une mme boue, montrent clairement que la mthode dextraction adopte
influence les rsultats. Ainsi, lextraction au formaldhyde-NaOH et celle lEDTA
produisent respectivement 165 et 147 mgEPS.gMVS-1 contre 26 78 mgEPS.gMVS-1 pour les
extractions au formaldhyde-ultrason, centrifugation-formaldhyde, centrifugation seule et la
rsine changeuse de cations.
Ainsi, le choix de la technique dextraction apparat important dans ltude des EPSlis et
fait lobjet du paragraphe suivant. La mthode dextraction devra permettre un bon rendement
dextraction sans lyse ou rupture des cellules ainsi quune bonne reproductibilit des rsultats.
Une fois cette mthode choisie, les paramtres opratoires seront optimiser. Cependant
avant lextraction proprement dite, la boue doit subir un prtraitement.
1. Le Prtraitement
Le prtraitement consiste en un chantillonnage, une homognisation et un lavage de la
boue :
- Lchantillonnage : afin deffectuer un chantillonnage reprsentatif de la liqueur
mixte du bioracteur, il est recommand de transporter, stocker et extraire la boue 04C pour viter toute activit enzymatique. Congeler les chantillons nest gnralement
pas conseill car la dconglation entrane la rupture des cellules.
- Lhomognisation : cette tape dtermine lefficacit et la reproductibilit de
lextraction des EPS. En effet, lefficacit des ultrasons ou dune rsine changeuse
dions sera diffrente suivant lhtrognit de lchantillon. Cette homognisation ne
doit pas engendrer de rupture des cellules cest pourquoi elle est souvent ralise par
retournement dune prouvette remplie de boue.
-
Ltape de lavage : elle doit permettre llimination des EPS solubles et de la

matire organique dissoute ou peu lie aux flocs. Ce lavage seffectue avec une
solution tampon de mme force ionique que celle de lchantillon afin de ne pas
dsorber des EPS lis aux flocs et de ne pas rompre les cellules.
196
2. Lextraction des EPS

Aucune procdure dextraction nest aujourdhui standardise car les paramtres
garantissant un rendement dextraction maximal ne sont pas extrapolables une autre boue.
Cette tape doit permettre la dispersion des flocs par destruction des liaisons entre microorganismes et polymres. Les mthodes dextraction aujourdhui employes sont soient
physiques, soient chimiques soient physiques et chimiques. Certaines techniques dextraction,
sont proscrire car elles entranent une lyse cellulaire.
De plus, il est noter que tous les exopolymres ne possdent pas la mme facilit
dextraction (Jahn et Nielsen, 1998). Ainsi, quelque soit la mthode dextraction utilise, elle
ne permettra pas de rcuprer, en mme temps, la totalit des exopolymres. Par exemple,
Jahn et Nielsen (1998), lors dune extraction avec une rsine Dowex, montrent quavec cette
mthode, applique des biofilms aliments en eau use domestique, les substances humiques
sont extraites plus facilement que les protines qui, leur tour, sont plus facilement extraites
que les polysaccharides. Dignac et al. (1998) comparent la quantit dEPS extraite par deux
procds : la sonication seule et la sonication couple une rsine changeuse dions. Ils
trouvent que la mthode couple extrait 100% dEPS protinique et 20% dEPS
polysaccharidiques en plus par rapport une extraction uniquement avec les ultrasons.
Higgins et Novak (1997) et Murthy et Novak (1999) trouvent galement que lajout de cations
une boue augmente la quantit dEPSlis sous forme de protine sans changer notablement
celle des polysaccharides. Ces rsultats montrent que les cations se lient plutt avec les
protines quavec les polysaccharides, et que chaque mthode dextraction, extrait
prfrentiellement un certain type de polymre. Le couplage de mthodes dextraction peut
donc savrer judicieux afin daugmenter lefficacit dune extraction.
a. Mthodes physiques dextraction des EPS
Gnralement le rendement dune extraction ayant recours des procds physiques

demeure infrieur celui utilisant des techniques combinant les mthodes physiques et
chimiques. Les mthodes physiques dextraction (centrifugation, sonication, traitement
thermique) impliquent un cisaillement de la matire. Par consquent une lyse cellulaire
(Azeredo et al. (1998) - extraction par sonication ; Gehr et Henry, (1983) - extraction la
vapeur deau), une dnaturation des protines (Gehr et Henry, (1983) - extraction la vapeur
deau) et/ou une mauvaise reproductibilit des rsultats sont observs (Gehr et Henry, 1983 ;
Goodwin et Forster, 1985 ; Clarke et Forster, 1982 ; Schmidt et Ahring, 1994 lors dextraction
la vapeur deau).
197
Parmi les mthodes physiques, la centrifugation seule ou couple la sonication apparat

comme tre la technique la plus adapte pour lextraction des EPS. Gehr et Henry, (1983) lors
de lextraction par centrifugation seule observent une bonne reproductibilit et une faible
contamination par des composs intracellulaires. Toutefois, lorsque cette mthode est
applique seule, celle-ci reste inefficace pour extraire les EPS fortement lis au floc (Novak et
al., 1981 ; Frolund et al., 1996). La centrifugation est donc surtout utilise aprs lextraction
pour sparer les EPS des autres cellules et particules (Urbain et al., 1993 ; Jorand et al., 1995 ;
King et Forster, 1990 ; Brown et Lester, 1980). Ce couplage permet dobtenir de forts
rendements dextraction avec une destruction de la structure du floc sans rupture des cellules
(Urbain et al., 1993 - sonication 50W). Cependant, Brown et Lester (1980) obtiennent de
faibles rendements dextraction lorsquils lutilisent une puissance de sonication de 20W.
En outre, lefficacit de cette mthode dextraction dpend fortement des conditions
opratoires et de la nature des flocs.
b. Mthodes chimiques dextraction des EPS
Les EPS sont librs au contact dun produit chimique. Les agents chimiques utiliss
sont :
- des bases : hydroxyde de sodium ou dammonium. Laddition dune base provoque
lionisation des groupes carboxyliques des protines et des polysaccharides qui ont
leurs points isolectriques gnralement en dessous de pH 4-6.
Il se produit alors une forte rpulsion entre EPS et une meilleure solubilisation des
composs. Cette mthode permet lextraction dune grande quantit dEPS (Dignac,
1998) mais provoque bien souvent la dtrioration des cellules.
- des acides : acide trichloroactique ou acide sulfurique. Les ions Ca++ du floc sont
remplacs par des ions H+ lorsque lon abaisse le pH.
- des agents chlatants (ethylne diamine ttra-acetique (EDTA) ou ethylne glycol
bis- N,N-tetraacetic acid (EGTA)) ajouts aux boues permet de librer les cations
Ca++, responsables de liaisons entre EPS (Bruus et al., 1992). Liu et Fang (2003)
notent que les cations des flocs sont probablement retenus par ces agents chlatants ce
qui provoque laffaiblissement des structures du floc. Cette mthode permet dobtenir
des rendements dextraction trs levs (Dignac, 1998). Cependant, lajout dEDTA
la boue risque de supprimer les ions divalents constitutifs de la paroi des cellules et
conduit alors la libration de matriels cellulaires. Cette mthode savre galement
inapproprie si par la suite le dosage des protines est souhait car lEDTA perturbe
lanalyse.
198
- des rsines changeuses de cations (rsine Dowex). Laddition de rsines permet le

remplacement des ions divalents responsables des ponts entre chanes polymriques
par des ions monovalents ou dautres ions divalents ayant moins daffinit avec les
exopolymres (Bruus et al., 1992).
- glutaraldhyde : cette petite molcule (masse molaire 100 g.mol-1) est utilise pour
liminer les substances qui entourent les bactries avant leur observation
microscopique. Dignac (1998) note que le glutaraldhyde est slectif pour les
polysaccharides et plus particulirement pour les polysaccharides contenant du
glucose. De plus, une comparaison entre extraction aux ultrasons (37W, 1 min) et au
glutaraldhyde (3 et 10% avec des boues 12 et 6 gMES.L-1) montre une meilleure
efficacit dextraction avec les ultrasons (Dignac 1998).
c. Mthodes couples dextraction des EPS (Physique/Physique ou
Chimique/Physique)
La combinaison dun procd physique et dun procd chimique permet dobtenir une
extraction plus reproductible et plus efficace. Par exemple, Frolund et al. (1996) ou Jahn et
Nielsen (1996), utilisent avec succs une mthode faisant intervenir une rsine changeuse de
cations prcde dune phase de sonication. Cette mthode permet dobtenir de bons
rendements dextraction (Dignac, 1998 ; Jahn et Nielsen, 1995) et ne rencontre aucun
problme dinterfrences lors des analyses colorimtriques (Conrad et al., 2000 ; Jahn et al.,
1995 ; Frolund et al., 1996). Plusieurs auteurs notent galement labsence de lyse cellulaire
(Conrad et al., 2000 ; Jahn et al., 1995 ; Frolund et al., 1996 ; Dignac, 1998).
199
d. Comparaison des mthodes dextraction des EPS
Jahn et Nielsen (1999) synthtisent plusieurs rsultats defficacit dextraction des EPS
dans le tableau annexe I.1.
Tableau annexe I.1: Composition en EPS et efficacit de plusieurs mthodes d'extraction
Rendement
Mthodes
Protines ADN Carbohydrates
Units
Rfrences
dextraction(1)
Sonication(2)
Centrifugation
Chauffage(2)
80C
Vapeur (2)
10 min
NaOH(2)
(pH 11)
EDTA(3)
Dowex/
Cisaillement(2)
Dowex/
(3)
Cisaillement
Dowex/
Cisaillement(4)
279.9
67.34
60.54
mg.L-1
10 %
Urbain et al. 1993
121
n.d(5)
mg.gMVS-1
9%
Frolund et al. 1996
77.1
3.7
15.8
mg.gMES-1
10 %
Brown et al. 1980
96
n.d(5)
22
mg.gMVS-1
8%
Frolund et al. 1996
94
19
110
mg.L-1
3%
Platt et al. 1985
243
n.d(5)
48
mg.gMVS-1
27 %
Frolund et al. 1996
154
12
12
mg.gCOT-1
15 %
Jahn et Nielsen 1995
214
15
56
mg.gCOT-1
11 %
Jahn et Nielsen 1995
(1)
exprim en carbone organique extrait sur carbone organique total - (2 ) procd appliqu des boues actives (3)
procd appliqu sur un biofilm (4) procd appliqu sur une culture de Pseudomonas putida (5) n.d = non
dtermin
Au vu de ce tableau et des conclusions retranscrites au paragraphe prcdant, la mthode

alliant une rsine changeuse dions prcde par une tape dultrasons semble offrir le
meilleur rendement dextraction tout en assurant labsence de lyse cellulaire. Cette technique
est donc choisie et sera optimise pour tre applique nos boues.
Cependant, comme le rappelle Jahn et Nielsen (1998), cette mthode, mais galement
toutes les autres mthodes utilises ce jour, ne permet pas dextraire les exopolymres
hautement hydrophobes.
e. Optimisation de lextraction par rsine changeuse de cations
Lextraction par rsine, permet lchange des cations divalents du flocs par les ions
Na+ de la rsine et affaiblit ainsi la cohsion du floc pour librer les EPSlis dans le milieu
sous forme soluble :
200
Higgins et Novak (1997) et Murthy et Novak (1999) constatent que lajout de 10

meq.L-1 dions monovalents dans une boue actives rduit la concentration de
protines sous forme EPSlis. Le remplacement des ions divalents par les ions
monovalents affaiblit la structure du floc et le dsintgre.
Bruus et al (1992) trouvent galement que lajout dions monovalents sous forme de
Na+ et K+ une boue paissie provoque la libration dions Ca2+ et laugmentation de
sa turbidit.
Ce paragraphe reporte des rsultats de la littrature concernant loptimisation des paramtres

opratoires lors de lextraction par rsine changeuse dions.
Effet du stockage des chantillons
Lorsquun chantillon de boue est prleve, il est vident quil doit tre reprsentatif
de la liqueur mixte contenue dans le racteur. Bura et al. (1998) montrent que stocker une
boue 4C pendant plus de 10 jours mne une perte trs importante dEPS
(Tableau annexe I.2).
Tableau annexe I.2 : Effet du nombre de jours de stockage d'une boue sur la rcupration des EPS extraits par
rsine changeuse d'ions
Composs
Protines
Carbohydrates
ADN
% de rcupration
1 jours 4C
10 jours 4C
1 mois 20C
99,1
91,1
90,7
72,2
60,6
44,4
69,1
49,4
37,7
Importance de lordre des tapes dextraction

Il est souvent mentionn dans la littrature une phase de sonication avant lextraction
la rsine Dowex. La sonication dtruit toutes les liaisons dont lnergie est infrieure
lnergie fournie par les ultrasons puis la rsine permet dliminer les cations multivalents et
de dtruire les liaisons lectrostatiques. Dignac (1998) sest intress limportance de
lordre de ces deux tapes sur lefficacit dextraction des exopolymres. La mise en contact,
pendant une heure, de la boue avec la rsine Dowex peut se faire indiffremment avant ou
aprs la sonication (37W): les quantits de carbone extraites sont identiques (15,3 g de COT
extrait / 100 g de MVS et 15,9 g de COT extrait / 100 g de MVS). Une phase de mise
lquilibre, c'est dire un temps de contact suffisamment long entre la rsine et la boue,
permet de passer de 9 g de COT extrait / 100 g de MVS, pour un temps de contact de
1minute, plus de 15 g de COT extrait / 100 g de MVS pour un temps de contact de 1 heure.
201
Influence de la concentration de la boue

Dignac (1998) tudie linfluence de la concentration de la boue lors de lextraction par
sonication et rsine changeuse de cations. La quantit de polymres extraite ne varie pas de
manire significative si la concentration de la boue passe de 1 3 g de MVS.L-1.
Influence de la quantit de la rsine Dowex
Jahn et Nielsen (1995), montrent quafin davoir le meilleur rendement dextraction
possible il est ncessaire de dterminer la quantit optimale de rsine introduire. Ainsi, lors
de lextraction des EPS contenus dans un biofilm, ils dterminent les conditions optimales
dextraction environ 240 g de Dowex par gramme de COT introduit (lagitation de 40 mL
du mlange rsine-chantillon est fix 600rpm pendant 2H).
Durmaz et al. (2001) valuent la quantit optimale de rsine introduire 100
grammes de rsine par gramme de matire volatile prsent dans la boue.
Daprs Frolund et al., (1996) le rendement dextraction des protines et des
carbohydrates demeure quasiment constant lorsque la quantit de rsine introduite se situe
entre 60 et 80 grammes par gramme de MVS.
Influence du temps dextraction
Le temps dextraction joue un rle galement primordial sur le rendement dextraction
des exopolymres. Ainsi Jahn et Nielsen (1995) extraient une quantit croissante
dexopolymres (Protines, substances humique et COT) mesure que le temps dextraction
augmente. Cependant, ils remarquent que le nombre de cellules viables dcrot avec
laugmentation du temps dextraction. Ils dterminent alors un temps optimal dextraction de
1 2H.
Frolund et al. (1995), lors de lutilisation dune rsine changeuse de cations,
dmontrent galement quaprs 2 heures dextraction, lactivit enzymatique de la G6PDH
(Glucose-6-phosphate dshydrognase) augmente fortement, signe dune lyse cellulaire.
Dignac (1998) compare le rendement dextraction en COT lorsque la rsine est mise
en contact de la boue durant 1H ou 2H. Elle conclue quune extraction la rsine Dowex de
2H (7-8 g de COT/100 g de MVS) est lgrement plus efficace quune extraction de 1H (9 g
de COT/100 g de MVS) mais que pour viter une destruction des cellules ou une volution de
la matire organique une extraction courte tait prfrable.
202
Influence de la vitesse dagitation

Jahn et Nielsen (1995) dterminent une vitesse optimale dagitation du mlange
rsine-boue de 600 rpm. Cette vitesse est dtermine lors de ltude de la quantit de
carbohydrates et de protines extraits par rapport la vitesse dagitation des ples lorsque la
quantit de rsine introduite est de 272 g.gCOT-1 et que le temps dagitation est de 2H.
Frolund et al., (1996) ne constatent quasiment pas de variation de rendement
dextraction des protines et des carbohydrates lorsque lintensit dagitation est comprise
entre 600 et 800 rpm.
Effet de la temprature
La temprature agit sur les liaisons de faibles nergies et doit donc tre garde la plus
constante possible tout le long du processus dextraction. De plus, une faible temprature
vite la poursuite du mtabolisme bactrien. De ce fait, lors de la sonication, les pots de
centrifugation contenant la boue sont placs dans de la glace pille pour prvenir
lchauffement de lchantillon.
II. Choix de la mthode de dosage des polymres

Cette revue bibliographique prsente diverses techniques colorimtriques utilises pour
le dosage des exopolymres contenus dans les eaux rsiduaires. Le rendement, la
reproductibilit, la fiabilit et lexactitude des rsultats fournis par chacunes des mthodes
sont abords dans ce chapitre.
1. Mthodes de dosage des protines

a. Mthode au bleu de Coomassie
Lors de ce dosage le Bleu de Coomassie G-250 ragit avec les groupes acides et
aromatiques des protines pour former un complexe dont labsorbance est dtermine
595nm. Par comparaison avec labsorbance du colorant seul, 465nm, la quantit de
protines contenues dans lchantillon est dtermine.
Bradford (1976) est le premier utiliser cette technique et remarque que celle-ci est
moins sujette aux interfrences que la mthode de Lowry. De plus, lors dexpriences
ralises en triplicat, sur du srum albumine bovin, il obtient une dviation standard de 1,2%,
montrant ainsi la bonne reproductibilit de la mthode. Le dveloppement de la coloration due
au complexe colorant-protine est dailleurs obtenue au bout de 2 min et reste stable (4%)
durant 1 heure. De plus, cette mthode savre 4 fois plus sensible que la mthode de Lowry
203
(Bradford 1976) mais tend surestimer la teneur en protine des chantillons (Frolund 1996
ou Durmaz et al 2001).
Quelques interfrences surviennent lors de lutilisation de tampon fortement alcalin
comme par exemple durant la prparation de lchantillon, mais galement, lorsque des
dtergents (Triton X-100, Sulfate de sodium dodcyl) ou des composs tels que lEDTA, le 2mercaptoethanol, le phnol sont prsents dans lchantillon analyser. De plus, cette mthode
prsente une sensibilit diffrente suivant le type de protines doser Bradford (1976). De
plus, cette mthode nest utilisable que pour des protines de grandes tailles ( 8 9 liaisons
peptidiques) alors que lon peut doser les dipeptides avec la mthode de Lowry (Raunkjr et
al., 1994).
Raunkjr et al. (1994) utilisent cette technique pour les eaux uses domestiques
dAalborg et trouvent que cette mthode permet de doser jusqu 15 mg.L-1 de protines
dissoutes lorsquils utilisent du srum albumine bovin comme standard; Au del de cette
concentration, la linarit entre la concentration en protine et labsorbance nest plus tablie.
Ils montrent galement que le choix de ltalon standard influence le rsultat des
concentrations en protines. Ainsi, avec la Gamma globuline bovine (BGG) comme standard
la concentration en protines est de 47 62% plus grande quavec du srum albumine bovin
(BSA).
b. Mthode au phnol Folin-Ciocalteau ou mthode de Lowry
Les liaisons peptidiques des protines forment des complexes avec le sulfate de cuivre
CuSO4, en milieu alcalin. Ce complexe rduit alors les acides phosphomolybdiques et
phosphotungstiques du ractif Phnol-Folin-Ciocalteau pour donner un second complexe de
couleur bleue, mesur au spectrophotomtre 750 nm.
Raunkjr et al. (1994), lors de lutilisation de cette mthode, montrent que les
dtergents ou les acides gras prsents dans les eaux domestiques ne nuisent pas au dosage des
protines. Cependant, les travaux de Davis (1988) mettent en vidence des interfrences
causes par les substances humiques. Frlund et al. (1995) modifirent alors la mthode
tablie par Lowry pour prendre en compte leffet des substances humiques.
De plus, Raunkjr et al. (1994) montrent quavec le Gamma globuline bovin (BGG)
ou le srum albumine bovin (BSA) comme standard, les rsultats obtenus sont similaires.
Ainsi, la coloration dveloppe lors du dosage ne dpend pas du type de protines : la
sensibilit de la mthode est la mme quelque soit le type de protine doser.
Du point de vue reproductibilit Raunkjr et al. (1994), suite une analyse effectue
sur 7 rplicats deaux uses domestiques, notent une dviation sur leurs rsultats de lordre de
204
3.8%. Toujours daprs ltude mene par Raunkjr et al. (1994), la mthode de Lowry
permet dobtenir des concentrations en protines 4 6 fois plus grande quavec la mthode de
Bradford (Raunkjr et al., 1994 ; Durmaz et al., 2001).
c. Mthode BCA
Smith et al. (1985) proposent une mthode base sur la mthode de Lowry mais en
remplaant le ractif Phnol-Folin-Ciocalteau par de lacide bicinchonique (BCA). Ce ractif
savre tre plus stable et plus sensible que le ractif de Lowry et la mthode gnralement
plus tolrante aux substances interfrentes. En contrepartie cette mthode devient inutilisable
ds que lchantillon analyser contient des sucres rduits (Smith et al ., 1985).
En utilisant cette mthode, Raunkjr et al. (1994) montrent que la prsence de
13mg.L-1 de glucose dans un chantillon deau use domestique sont dtects comme tant
30mg.L-1 de protine. Cette mthode nest donc pas envisageable sur des eaux uses.
Au vu de ces rsultats, la mthode que nous allons retenir pour doser les protines
contenues dans les eaux uses domestiques sera celle de Lowry modifie par Frlund et al.
(1995).
2. Mthode de dosage des polysaccharides

Toutes les mthodes colorimtriques de mesure des carbohydrates ncessitent dune part
le chauffage de lchantillon en prsence dacide sulfurique concentr et dautre part
laddition danthrone ou de phnol pour dvelopper la coloration. Dans un premier temps, les
polysaccharides sont hydrolyss, durant le chauffage, par lacide sulfurique puis les
monosaccharides sont dshydrats soit par lanthrone (coloration verte) soit par le phnol
(coloration orange).
a. Mthode lanthrone
Koehler (1952) note que tous les sucres ne donnent pas la mme intensit de
coloration (les hexoses dveloppent une couleur plus intense que les pentoses et les heptoses).
En ce qui concerne les interfrences, les composs tels que les graisses, les protines
ne semblent pas nuire au dosage des sucres (Raunkjr et al., 1994).
Par ailleurs, cette mthode donne des rsultats reproductibles. Pour exemple,
Raunkjr et al. (1994) constatent 2 4,8% de dviation relative sur les rsultats des 7
expriences ralises avec des eaux uses domestiques dAalborg.
205
b. Mthode au Phnol
La mthode au phnol ou mthode de Dubois (1956) possde une trs grande

spcificit et permet dobtenir des colorations dune mme intensit quel que soit le sucre
dos.
Brown et Lester (1980), dans leurs expriences sur une culture bactrienne pure
(K. aerogenes) trouvent que les rendements obtenus avec la mthode de Dubois sont
suprieurs ceux obtenus avec la mthode lanthrone.
Cette mthode, semble toutefois donner des rsultats peu reproductibles puisque
Raunkjr et al. (1994) trouvent jusqu 50% de dviation relative sur leurs rsultats. Ces
auteurs conseillent alors de chauffer lchantillon durant un temps fixe.
En analysant les concentrations en polysaccharides des EPSlis de 14 chantillons de
boues, Brown et Lester (1980) trouvent que la mthode de dosage lacide sulfurique-phnol
donne en moyenne des concentrations 24% suprieures celles avec la mthode lanthrone.
Cette conclusion rejoint celle de Frolund et al. (1996) qui mesurent une concentration en
polysaccharides de 477 mg.gMVS-1 avec un dosage avec le ractif phnol-acide sulfurique
contre 413 mg.gMVS-1 avec la mthode lanthrone.
Au final, la mthode de Dubois modifi par Frolund a t choisie pour toutes les
expriences concernant ltude sur nos racteurs. Les mmes conditions exprimentales
entre chaque expriences seront fixes (notamment un temps de chauffe similaire pour
toutes les expriences).
206

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THSE

LINSTITUT NATIONAL DES SCIENCES APPLIQUES DE TOULOUSE

BIORACTEUR A MEMBRANES IMMERGES POUR

Soutenu le 15 dcembre 2004

Professeur Universit Rice (USA)

Professeur Universit Montpellier II

Professeur Universit Bordeaux II

Charg de recherche CNRS, HDR, UPS Toulouse

Ingnieur de Recherche, Docteur, Mont/Lacq TPF

Professeur, INSA, Toulouse

Matre de confrences, INSA, Toulouse

Enfin, the last but not the least.

TABLE DES MATIERES

CHAPITRE I : SYNTHESE BIBLIOGRAPHIQUE

1.Caractrisation des flocs: les EPSlis

b. Description des EPSlis: rle, origine, composition

c. Paramtres influenant la production d'EPS

c.1 Les paramtres environnementaux

c.2 Les paramtres opratoires - l'ge de boues

c.3 Perturbations et dysfonctionnements des racteurs

d. Influence de la composition en EPSlis sur les proprits des flocs

d.2 Proprits de surface des flocs - Charge de surface et hydrophobicit

2.Les produits microbiens solubles (PMS)

a. Description des PMS: composition, origine

b. Mcanismes de production des PMS

c. Les paramtres influenant la production de PMS

II. Etude des mcanismes de production de boues

c.1 Le concept de maintenance

c.2 La respiration endogne

c.3 Le concept de mort rgnration (croissance cryptique)

2.Paramtres influant sur la production de boues

a. Effet des paramtres opratoires - l'ge des boues

b. Rle jou par les micro-organismes suprieurs

c. Influence des caractristiques de l'eau traiter

III. Caractrisation du colmatage

1.Description des mcanismes de colmatage

2.Paramtres influenant le colmatage

a. Influence des conditions de filtration

a.1 Nature chimique et physique de la membrane

a.2 Les conditions opratoires de filtration

b. Influence des caractristiques chimiques et physico-chimiques du milieu

b.1 Nature et composition de l'effluent traiter

b.2 Importance relative des matires particulaires et solubles - les produits

b.3 Distribution de la taille des particules et flocs

b.4 Proprits de surface des flocs

c. Etat physiologique de la biomasse et charge applique

c.1 Viabilit et carences nutritives

c.2 Age de la boue

CHAPITRE II : MATERIEL ET METHODES

1.Le pilote boues actives

2.Le bioracteur membranes immerges (BAMI)

3.Rcapitulatif des conditions opratoires

II. Caractristiques de l'eau rsiduaire urbaine

III. Techniques analytiques mises en uvre

4.Evaluation de la filtrabilit d'une boue

a. Calcul de la vitesse de colmatage

5.Extraction et dosage des EPSlis et EPSsolubles

a. Protocole d'extraction retenu

b. Protocole de dosage des EPS

b.1 Dosage des protines et substances humiques

b.2 Dosage des polysaccharides

6.Dtermination de la production de boues

2. Rle de la rtention membranaire: tude dynamique

3. Etude de l'limination des EPS solubles