25 a 28 de Outubro de 2011

ISBN 978-85-8084-055-1

ESTUDO DA ATIVIDADE ANTIOXIDANTE DOS EXTRATOS DE

PRPOLIS E PERESKIA ACULEATA
Bruna Hyplito Garcia1; Leandro Alexandre Krauss1; Claudenice Francisca Providelo
Sartor2; Daniele Fernanda Felipe3
RESUMO: A prpolis considerada uma importante alternativa teraputica, devido suas inmeras propriedades
farmacuticas, dentre estas esto comprovadas as aes antimicrobiana, antiinflamatria, cicatrizante,
anestsica, anticariognica e antioxidante. A Pereskia aculeata tem sido empregada na medicina popular no
abrandamento dos processos inflamatrios, estimulao imunolgica, na recuperao da pele em casos de
queimadura e na cicatrizao de lceras, Alm disso, espcies do gnero Pereskia, como a Pereskia
grandifolia, apresenta ao antioxidante moderada. Neste trabalho foi avaliada a ao antioxidante dos extratos
de prpolis verde e vermelha e da Pereskia aculeata. A ao antioxidante foi realizada pelo mtodo
fotocolorimtrico in vitro do radical livre estvel DPPH (2,2-difenil-1-picrilidrazila). Quanto ao antioxidante, a
prpolis verde apresentou melhor ao com o IC50 de 80,64 g/mL quando comparada com a prpolis vermelha,
a Pereskia aculeata apresentou melhor ao antioxidante do que as prpolis testadas, apresentando um IC50 de
56,64 g/mL, sendo o extrato de prpolis verde e de Pereskia aculeata empregado na formulao de um
cosmtico. Ambos os produtos desenvolvidos apresentaram-se estveis e dentro dos parmetros analisados
para o controle de qualidade. Assim, justifica-se a utilizao da prpolis verde e de Pereskia aculeata em
formulaes cosmticas destinadas a preveno do envelhecimento cutneo.
PALAVRAS-CHAVE: Antioxidante; Envelhecimento; Prpolis; Pereskia aculeata

INTRODUO
O processo do envelhecimento tem reflexo em todo o nosso organismo, e um dos
rgos que mais cedo e melhor revela os sinais do envelhecimento a pele, por
representar 12% do peso total do corpo, sendo o maior sistema de rgos expostos ao
meio ambiente (GUIRRO;GUIRRO, 2004). A pele um rgo complexo no qual
interaes celulares e moleculares reguladas de modo preciso governam muitas das
agresses provindas do meio ambiente (HIRATA et al, 2004).
Como consequncia da exposio crnica ou excessiva a fatores extrnsecos do
envelhecimento, as espcies de oxignio reativo (EROs) podem reduzir a capacidade de
defesa antioxidante da pele, acelerando o processo de envelhecimento pela morte ou
mau funcionamento das clulas (SOUZA et al, 2007).
Com o objetivo de retardar ou prevenir a deteriorao, dano ou destruio provocada
pela oxidao so empregadas substncias antioxidantes. Os antioxidantes podem ser
1

Acadmicos do Curso de Farmcia do Centro Universitrio de Maring (CESUMAR), Maring Paran. Programa
de Iniciao Cientfica do Cesumar (PROBIC). brunahypolito@hotmail.com, leandrokrauss@live.com
2
Co-orientador, Docente do curso de Farmcia do Centro Universitrio de Maring (CESUMAR), Maring
Paran.claudenice@cesumar.br
3
Orientador, Docente do curso de Farmcia do Centro Universitrio de Maring (CESUMAR), Maring Paran.
danielefelipe@cesumar.br
Anais Eletrnico
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encontrados naturalmente em nosso organismo, em alimentos e em cosmticos. Estes

so responsveis pela proteo do organismo contra a ao oxidativa dos radicais livres
(CHORILLI; LEONARDI; SALGADO, 2007).
Produtos cosmticos so utilizados na manuteno e aperfeioamento da esttica do
corpo humano, porm sem interferir nos processos normais do metabolismo celular,
devem colaborar para que esses processos ocorram de forma a melhorar a qualidade da
pele e anexos (ROQUE et al, 2009). A formulao para obteno de cosmticos naturais
significa dar a preferncia, sempre que possvel, aos derivados vegetais, evitando a sua
substituio por substncias sintticas. Portanto, extremamente importante realizar um
balanceamento lgico e coerente entre as matrias-primas sintticas e naturais,
maximizando a ao farmacolgica, a fim de alcanar melhores efeitos (IHA, 2008).
A prpolis uma importante alternativa teraputica do ponto de vista econmico e
eficcia farmacolgica por ser de fcil obteno e por apresentar inmeras propriedades
farmacuticas. Entre estas, est comprovada a ao antimicrobiana, antiinflamatria,
cicatrizante, anestsica, anticariognica e antioxidante (LONGHINI et al, 2007). Os
principais compostos qumicos isolados da prpolis at o momento podem ser
organizados em alguns grupos principais como: cidos e steres alifticos, cidos
fenlicos e steres aromticos, acares, lcoois, aldedos, cidos graxo, aminocidos,
esterides, cetonas, charconas e di-hidrocharconas, flavonides (flavonas, flavonis e
flavononas), Terpenides, Protenas, vitaminas B1, B2, B6, C, E, bem como diversos
minerais (MENEZES, 2005).
A Pereskia aculeata, a qual conhecida popularmente como ora-pro-nobis uma
planta que tem se mostrado promissora no campo fitoteraputico. Tal planta tem sido
empregada na medicina popular no abrandamento dos processos inflamatrios, na
recuperao da pele em casos de queimadura e na cicatrizao de lceras (ROSA;
SOUZA, 2003; DUARTE; HAYASHI, 2005; GRONNER et al., 1999). Alm disso, espcies
do gnero Pereskia, como a Pereskia grandifolia, apresenta ao antioxidante moderada
(TURRA, 2007). Segundo alguns estudos, foram encontradas substncias como
betacianina flavonis, alm de betana, isobetanina e filocactina (SIERAKOWSKI et al.,
1987).
Baseado neste contexto, a presente pesquisa teve como objetivo testar a ao
antioxidante a partir dos extratos de prpolis verde e vermelha e da Pereskia aculeata,
tendo em vista que a medicina tem buscado alternativas para o desenvolvimento de
novos frmacos com menos riscos a sade, principalmente derivado de espcies
vegetais.
MATERIAL E MTODOS

A avaliao da atividade antioxidante, foi realizada pelo mtodo fotocolorimtrico in

vitro do radical livre estvel DPPH (2,2-difenil-1-picrilidrazila). Preparou-se uma soluo 0,3
mM de DPPH em metanol. As amostras foram preparadas adicionando-se 400 L desta
soluo de DPPH a 3,0 mL de solues dos extratos diludos em metanol nas concentraes
de 150; 125; 100; 75; 50; 25; 12,5; 6,25; 3,12 e 1 g/mL para prpolis verde, concentraes
de 200; 150; 100; 75; 50; 25; 1; e 0,5 g/mL para prpolis vermelha e concentraes de 75;
50; 25; 12,5; 6,25; 3,12 e 1,56 g/mL. Para calibrao do espectrofotmetro utilizou-se
metanol. Como controle negativo, foi adicionado 3 mL de metanol em um tubo e 400 L de
DPPH . A soluo de DPPH possui uma colorao roxa intensa e a ao antioxidante de um
extrato pode ser visualizada pelo progressivo descoloramento da soluo, ao final do qual a
mesma torna-se amarelada. Trinta minutos aps a adio de DPPH s amostras, foi feita a
leitura em um espectrofotmetro de Ultravioleta UV- VIS (Varian) em 518nm. Todas as
leituras foram realizadas em triplicata e, com a mdia dos dados obtidos foi calculada a
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capacidade de seqestrar o radical livre, ou seja, a atividade antioxidante foi expressa em

percentuais, segundo a expresso abaixo:
%sequestro = Abs do controle negativo Abs da amostra x 100
Abs do controle negativo
A partir das atividades antioxidantes percentuais e da concentrao de cada extrato foi
realizada uma regresso linear, chegando-se assim concentrao necessria para se obter
50% do efeito antioxidante mximo estimado de 100% (IC50) (VICENTINO; MENEZES, 2007).
Para o desenvolvimento do gel-creme com ao antioxidante, foi utilizado prpolis
verde. Em um bcker foi adicionado BHT (0,05 g), metilparabeno (0,1 g), propilparabeno (0,1
g), EDTA (0,1 g), gua destilada q.s.p 100 mL e aqueceu a 70C dissolvendo as matriasprimas. Aps foi adicionado aos poucos o Sepigel 305, com agitao lenta e constante, at
completa homogeneizao. Resfriou a 40C e adicionou estearado de octila (5 mL), leo de
amndoas (3 mL) e o extrato de prpolis verde (0,016 g) baseado no IC50. Homogeneizou e
verificou o pH (6).
Para o desenvolvimento da base creme Polawax, com ao antioxidante, foi utilizado
o extrato de Pereskia aculeata. Para a preparao do creme a formulao foi dividida em
fase 1, 2 e 3, onde fase 1 foi composta por 3mL de leo Mineral e 19,5g de Polawax. A
fase 2 foi composta por 4g de Estearato de Octila, 0,1g de Metilparabeno, 0,1g de
Propilparabeno, 5g de Propilenoglicol, 0,05g de Butilhidroxitolueno (BHT) e q.s.p. 100mL de
gua Destilada. Fase 3 foi composta por 0,011g de extrato de Pereskia aculeata baseado no
valor de IC50. Homogeneizou e verificou o pH (6).
Foi realizado controle de qualidade dos produtos desenvolvidos sendo avaliados os
itens aspecto, cor, odor e pH. Alm disso, foi realizado o estudo de estabilidade preliminar,
neste teste, amostras do produto foram armazenadas em estufa (40C), na geladeira (5C) e
em temperatura ambiente durante 21 dias, sendo avaliadas nos tempos zero, 24 horas e
aps 7,14 e 21 dias quanto aos mesmos itens que foram verificados no controle de
qualidade, segundo o Guia de Estabilidade da Anvisa (2004).

RESULTADOS E DISCUSSO
A concentrao inibitria mdia (IC50) uma medida da eficcia de um composto em
funo biolgica ou bioqumica de inibio. Esta medida quantitativa indica o quanto de um
determinado medicamento ou outra substncia (inibidor) necessria para inibir um
determinado processo biolgico (ou componente de um processo, ou seja, uma enzima,
clulas, receptor de clulas ou microorganismo) pela metade. O IC50 de uma droga pode ser
determinada pela construo de uma curva dose-resposta. Valores de IC50 podem ser
calculados para um antagonista dada por determinao da concentrao necessria para
inibir a metade da resposta mxima biolgica do agonista. Em geral, quanto maior a
concentrao de inibidor, mais a atividade do agonista ser reduzida (MOLYNEUX, 2003). O
IC50 foi calculado a partir do grfico 1 atravs da equao da reta.
Grfico 1 A) Atividade sequestrante de radical DPPH do extrato de prpolis verde (IC50
80,64 g/mL). B) Atividade sequestrante de radical DPPH do extrato de prpolis vermelha
(IC50 86,10 g/mL). C) sequestrante de radical DPPH do extrato de Pereskia aculeata (IC50
56,64g/mL)

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AA %

AA %

concentrao em (g/mL)

concentrao em (g/mL)

AA %

Concentrao em (g/mL)

Com respeito atividade antioxidante, as amostras se comportaram de maneira

distinta, isto , observou-se que a amostra Pereskia aculeata apresentou um IC50 de
56,64g/mL, o extrato de prpolis verde apresentou um IC50 de 80,64 g/mL e a prpolis
vermelha apresentou um IC50 de 86,10 g/mL (Grfico 1). Mostrando que o extrato de
Pereskia aculeata possui uma maior atividade antioxidante, seguida da prpolis verde e por
ultimo a prpolis vermelha.
Atualmente, possvel observar que esto sendo realizados diversos estudos com
produtos vegetais, com o objetivo de analisar a atividade antioxidante destes, pois possuem
em sua composio compostos fenlicos (CANTERLE, 2005). Para Santos et al. (2003),
diversas substncias fenlicas so importantes antioxidantes, uma vez que possuem
esqueleto carbnico propcio para a estabilizao de radicais livres. Verificou-se que a
posio e o grau de hidroxilao so fatores importantes para a atividade antioxidante dos
flavonides.
Segundo Alencar (2009), a composio qumica da prpolis altamente dependente
da localizao geogrfica, ou seja, dependendo do local e da estao do ano sua
composio qumica muda. Isto pode justificar os resultados encontrados, onde a ao
antioxidante da prpolis vermelha foi menor quando comparada com a prpolis verde.
Chaves et al. (2007), relata em seu estudo uma boa ao antioxidante de 5 plantas
medicinais estudadas, mostrando os seus respectivos IC50 em g/mL (Terminalia brasiliensis
IC50 27,59; Terminalia fagifolia IC50 44,53; Cenostigma macrophyllum IC50 78,45; Qualea
grandiflora IC50 50,16; Copernicia prunifera IC50 111,14). Quanto maior o consumo de DPPH
por uma amostra, menor ser a seu IC50 e maior a sua atividade antioxidante. Em trabalho
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realizado por Salgado et al. (2007), mostra que a goiaba possui uma considervel ao
antioxidante, apresentando um IC50 de 150 g/mL.
Sendo assim, a Pereskia aculeata apresentou um IC50 de 56,64g/mL possui uma boa
ao antioxidante e a prpolis verde apresentou um IC50 de 80,64 g/mL indicando uma
considervel ao antioxidante, quando comparada s atividades antioxidantes dos
diferentes extratos demonstrados nos trabalhos relatados acima, o que justifica o emprego do
extrato de Pereskia aculeata e da prpolis verde no desenvolvimento de formulaes.
Desta forma, as formulaes desenvolvidas foram com a prpolis verde e Pereskia
aculeata, sendo empregado o extrato de prpolis verde em um gel-creme e o extrato de
Pereskia aculeata em um base creme Polawax contra envelhecimento cutneo. As
formulaes apresentaram-se estveis durante o estudo da estabilidade preliminar (21 dias),
e dentro dos itens avaliados no controle de qualidade, ou seja, cor branca, odor
caracterstico, aspecto homogneo e pH 6.
O perfil de estabilidade de um produto serve para avaliar o seu desempenho,
segurana e eficcia, alm de sua aceitao pelo consumidor. Fornece indicaes sobre o
comportamento do produto, em determinado intervalo de tempo, frente s condies
ambientais a que possa ser submetido, desde a fabricao at o trmino da validade. Os
ensaios organolpticos fornecem parmetros que permitem avaliar, de imediato, alteraes
como separao de fases, precipitao e turvao (ANVISA, 2004).

CONCLUSO
Os resultados encontrados mostram um caminho promissor para o uso dos extratos de
prpolis verde e Pereskia aculeata. Sendo assim, ambos os extratos foram empregadas no
desenvolvimento de formuaes que mantiveram-se estveis durante o perodo de anlises,
quanto aos testes de qualidade realizados.
Desta forma, justifica-se a utilizao dos extratos de prpolis verde e Pereskia
aculeata em formulaes cosmticas destinadas a preveno do envelhecimento cutneo,
tendo em vista que nas ultimas dcadas tem sido observado um crescente interesse no
aproveitamento da biodiversidade, particularmente de espcie vegetais, que vm sendo
utilizadas em vrias reas da sade em programas preventivos e curativos.

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