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SISTEMA AUTOMATIZADO PARA

MICROBIOLOGA: BD PHOENIX

TM M. Soledad Prat M.
Seccin Bacteriologa

TEMARIO
Tecnologa y propsito del Sistema
Ventajas y desventajas de Sistemas
automatizados.
Descripcin del Equipo
Identificacin y AST en Bacilos Gram-negativos
Identificacin y AST en Cocceas Gram-positivas
Experiencia local (ISP)
Encuesta a usuarios
Conclusiones

VENTAJAS
SISTEMAS AUTOMATIZADOS

Uso metodologa estandarizada y validada.


Disminucin carga de trabajo para el personal del laboratorio.
Disminucin del tiempo de resultados en ID y AST.
Resultados ms rpidos para ser aplicados en clnica.
Mayor capacidad de Identificacin. Taxa muy amplia
Informe de resultados basados en CIM.
En AST: Interpretacin de resultados y Control de Calidad
con estndares CLSI - Actualizados.
Fcil manipulacin
Manejo de datos a travs de Software*. Concentracin de
informacin y anlisis.
Mayor Bioseguridad y Calidad de la informacin

DESVENTAJAS
SISTEMAS AUTOMATIZADOS
Costo alto de paneles/ muestra
Excesiva confianza en el sistema pudiendo no
detectar errores.
Errores pueden llevar a fallas en tratamiento,
(Ej. cultivos mixtos, identificacin equivocada).
Requiere igualmente analizar pruebas bsicas.
Requiere anlisis a cargo de profesional
competente.
Puede requerir uso agregado de pruebas
complementarias (> costo).

SISTEMA AUTOMATIZADO PARA


MICROBIOLOGA BD PHOENIX

SISTEMA AUTOMATIZADO PARA


MICROBIOLOGA BD PHOENIX

USO PREVISTO
El Sistema Automatizado para Microbiologa BD
Phoenix est diseado para la identificacin (ID)
rpida y la prueba de sensibilidad a antibiticos
(AST) en bacterias de importancia clnica
El sistema Phoenix proporciona resultados rpidos
para la mayora de las bacterias aerbicas grampositivas as como para la mayora de las bacterias
aerbicas y anaerbicas facultativas gramnegativas de origen humano.

FUNDAMENTOS TECNICOS
ID
En ID , muchas de las pruebas empleadas en los
paneles del Sistema Phoenix son modificaciones
de
los
mtodos
clsicos,
bioqumicos
convencionales.
Incluyen pruebas para la fermentacin,
oxidacin, degradacin e hidrlisis de diversos
sustratos.
Adems, el Sistema Phoenix utiliza sustratos
cromognicos y fluorognicos, as como
sustratos con fuentes de carbono nicas para la
identificacin de los organismos.

IDENTIFICACION BACTERIANA
(ID)
La produccin de cido se indica por un
cambio en el indicador rojo fenol, si la bacteria
utiliza carbohidratos como sustrato.
Los sustratos cromognicos producen un color
amarillo por la hidrlisis enzimtica.
Los organismos que utilizan una fuente
especfica de carbono reducen el indicador
basado en resazurina.
Existen otros tests que detectan la capacidad
del organismo para hidrolizar, degradar,
reducir o utilizar de otro modo un sustrato.

FUNDAMENTOS TECNICOS
AST
El mtodo AST del Sistema Phoenix es una versin
miniaturizada modificada de la tcnica de dilucin
doble de microdilucin en caldo.
Los test de sensibilidad en el Sistema Phoenix se
realizan mediante la determinacin del
crecimiento bacteriano en presencia de diversas
concentraciones de antibitico, analizado con la
ayuda del indicador AST .
El mtodo AST del sistema Phoenix es un test de
microdilucin que utiliza caldo de cultivo.

SUSCEPTIBILIDAD AST
Utiliza un indicador redox para detectar el
crecimiento del organismo en presencia de un
antibitico.
Se realizan mediciones continuas de los
cambios del indicador, as como la turbidez
bacteriana.
Cada configuracin del panel para AST
contiene diversos antibiticos con un amplio
rango de concentraciones de doble dilucin 1:2.
Se utiliza la identificacin del organismo para
interpretar los valores CIM de cada antibitico.

BD Phoenix PANELES
Cuenta con paneles para identificacin y paneles
combinados para ID y Susceptibilidad.
Velocidad proporcionando Exactitud y Precisin:
ID en promedio de 2-3 hrs, lectura hasta 12 hrs.

Se pueden configurar:
Alertas para resultados de pacientes crticos.
Alertas para deteccin de mecanismos de resistencia.

Establece reglas de Interpretacin actualizadas de acuerdo al CLSI


Vigentes.
BD Experto: con ms de 500 reglas
- validacin resultados AST
- validacin cruzada de ID & AST
- informes para el clnico.
- equivalencia antimicrobiana
- deteccin mecanismos de resistencia

EQUIPO / PANELES
Realiza un mximo de 100 tests de ID y AST , al mismo tiempo, en
paneles combinados .
El panel es una bandeja de poliestireno moldeada sellada y
autoinoculante, con 136 micropocillos con reactivos liofilizados.
El panel combinado incluye un lado para ID (51 pocillos) con
sustratos liofilizados para la ID de bacterias y un lado para AST (85
pocillos) con concentraciones variables de antibiticos.
Contiene controles interno de crecimiento y controles presencia
indicador redox (AST).
Utiliza un indicador redox colorimtrico optimizado para AST.
Utiliza indicadores colorimtricos y fluorimtricos para ID.
Utiliza caldo AST con ajuste de cationes (ej.: Ca++ y Mg++) para
optimizar el rendimiento de los anlisis de sensibilidad.

INSUMOS SISTEMA PHOENIX

CALDO ID,
CALDO AST
INDICADOR

PHOENIX
SPEC
NEFELOMETRO
PANELES ID, AST, ID/AST

INOCULACION PANELES
Los paneles Phoenix se inoculan con una densidad
equivalente al patrn 0,5 de McFarland (0,5 y 0,6 es
aceptable).
Las suspensiones deben prepararse slo con el nefelmetro
BBL CrystalSpec o BD PhoenixSpec.
Inoculados, los paneles se colocan en el instrumento y se
incuban a una temperatura constante de 35 C.
El instrumento analiza los paneles cada 20 minutos hasta un
mximo de 16 horas en caso necesario.
No es posible realizar una lectura manual.

TIEMPOS MAXIMOS PERMITIDOS

PANELES GRAM NEGATIVOS

PANELES GRAM -POSITIVOS

BD PHOENIX TAXA
48

152

300

GP

GN

Strepto

Gram Negativos
Enterobacterias
No-Fermentadores
Otros Bacilos Gram-

Gram Positivos
Staphylococcus
Enterococcus
Bacilos Gram +
Streptococcus (48)

PRUEBAS SUPLEMENTARIAS
ID

BD Phoenix AST

F. Quinolonas: 10 clases
Aminoglicsidos: 10 clases
Rifamicina: 1
B Lact/Inh B lact: 7 clases
B Lactamicos Pen: 7 clases
Carbapenemes: 3 clases
Cephem: 24 clases
Peptido ciclico: 1
Folatos: 3 clases
Glicopeptidos 2 clases
Ketolidos: 1
Lincosamida: 1

Macrolido: 3 clases
Monobactam: 1
Phenicol: 1
Lincosamida: 1
Fusidane: 1
Nitrofurano: 1
Oxazolidinona: 1
Ac. Pseudomnico: 2 clases
Quinolonas: 1
Streptogramina: 2 clases
Tetraciclina: 2
Otros: 4

AST : MIC VERDADERO


0,25

Deteccin del verdadero CIM est


basado en al menos 3 dobles
consecutivas concentraciones del
antimicrobiano.

No hay extrapolacin de la curva de


crecimiento. Es el valor que da para la
interpretacin.

0,5

1,0
2,0
4,0

MIC

8,0
16,0

32,0

Dos tecnologas de lectura:


Turbidimetra como resultado de la
divisin celular.
Cambio colorimetrico del indicador
Redox como resultado del
metabolismo.

DETECCION MECANISMOS
RESISTENCIA
 Confiabilidad y velocidad para pacientes crticos
 Deteccin de mecanismos de resistencia basados en test especficos o
antimicrobianos probados en el panel.

Deteccin de la produccin de BLEE entre especies de


Enterobacteriaceae.
Deteccin de la resistencia a la vancomicina en las especies
Enterococcus (VRE) y Staphylococcus (VISA y VRSA).
Deteccin de la resistencia a los aminoglicsidos de alto nivel en las
especies de Enterococcus y Streptococcus (HLAR);
Deteccin de resistencia a la meticilina en Staphylococos (MRS);
Deteccin de la produccin de -lactamasa en las especies de
Staphylococcus (BLACT);
Deteccin de la resistencia a los macrlidos en las especies de
Streptococcus (MLSb y MEFF);
La deteccin de la resistencia de alto y bajo nivel a la penicilina en
S. pneumoniae (HLPRSP) (LLPRSP).

Phoenix
MARCADORES RESISTENCIA
-Lactamasa en Staphylococcus (Nitrocephin test)
Meticilina Resistencia Staphylococcus
MRS basada en Interpretacin a Oxacilina.
mecA predice basado en Cefoxitin
Vancomicina Resistencia Enterococcus y Staphylococcus
(basado en CIM a Vancomicina).
Resistencia Enterococcus a alto nivel de Aminoglicosidos
(Gentamicina 500 mcg/ml and Streptomicina 1000 mcg/ml
MLSb resistencia en Staphylococcus and Streptococcus
Automtica si Clindamicina y Eritromicina = R
Clasificada manualmente (ind. MLSB or efflux) basada en
D test
-Lactamasa de Espectro Extendido en Enterobacterias.

FLUJO DETERMINACION BLEE

ALARMAS EN RESULTADOS DE
PACIENTES CRITICOS

Informe selectivo:
- alertas en resultados de pacientes crticos
- alertas ante deteccin de mecanismos de
resistencia.
- rpido informe de resultados de ID & AST
- rapido informe depende del crecimiento
-Valor verdadero del CIM

BACILOS GRAM NEGATIVOS: ID y AST


Bacilos
Gram Neg.
Vibrios
BNF

N
cepas

Desempeo

507

89,9% T: 2-12
hrs
89,1% T: 4 hrs
84,2% T: 5 hrs

138
57

AST

Observ.

Referencia

No se
alcanzan
valores
> 90%

OHara et al.
JCM 2006

Enterobacte 231
rias
(31
esp.)
ID y AST

ID: 94,4%

EA: 98,7%
CA: 97,7%
VME: 0,38%, ME
0,3%
mE 1,8%

100%
Deteccin
BLEE

Carrol et al.
JCM 2006

Enterobacte 494
rias
BNF
110
ID y AST

98,4%

EA: 94,2%
CA: 97,3%
VME: 1,6%, ME 0,6%
mE 1,9%

98,5%
Deteccin
BLEE

Menozzi et al.
JCM 2006

Enterobacte 163
rias
BNF
53
ID y AST

98%
T: 2-12 hrs
P.aer. 100%
Otros 37,5%

CA: 99,5%
VME: 0,3%
ME : 0,2%
mE: 3,2%

Referencia
Estndar
CLSI.
Resultados
comparables

Snyder et al.
ASM 2006
(compara con
MSCan)

99,1%

95,5%
0,7%
1,3%
4,5%

DETECCION DE BLEE
N cepas Resultado
E. coli BLEE+ 174
K.pn. BLEE + 19

Resultado

Observ.

Referencia

Phoenix
E.coli 96%
K.p 89,4%
T: 95,3%

Vitek 2
E.coli 99,4%
K.p 100%
T: 99,5%

Compara Vitek 2 y
Phoenix. Referencia: ETest y Difusin CLSI

Trevio et al.
Enfermed.
Infecciosas y
MC. 2009.

E.coli
K.pn y K.
oxytoca

102

Phoenix
S: 96%
(99%)*
E: 81%
(58%)*

Vitek 2
S: 91%
(89%)*
E: 85%

Compara Vitek 2 y
Phoenix. Referencia:
Caracterizacin
enzimtica molecular
*regla adicion. experto

S.Thomson et
al. JCM.2007

Distintas
especies

510
BLEE +
:288
Secuenc.

Phoenix
319 + ms 2
K.oxytoca

Referencia: Mtodos
fenotpicos y
secuenciacin

Sanguinetti et
al. JCM.2003

Enterobact.

Met.
Fenotpico
319 +

Compara Vitek1 y 2 y
Phoenix. Referencia: ETest cepas clin. y
Genotipificac. cepas Ref.

Leverstein et
al. JCM 2002

BLEE + y -

E.coli
Klebsiella
spp

cepas:

74 cepas
clnicas
17 cepas
referen.

Hiperpro.K1
S: 100% E:
98,9%

Vitek1:
83%
Vitek 2
78%

Phoenix: 89%
E-Test: 94%*

CONCLUSIONES BACILOS GRAM


NEGATIVOS
En general se obtienen aceptables resultados en
identificacin de Enterobacterias.
Mayor dificultad en identificar Enterobacterias menos
comunes.
AST: en general aceptables resultados ms frecuente mE
y ME que EVM .
Buena deteccin de BLEE principales en especies de
E. coli y Klebsiella spp.

BACILOS NO FERMENTADORES: ID y AST


N cepas

Desempeo

AST

Observ.

Referencia

ID y AST*
B
lactmicos
amplio
espectro

136

95,6%

EA: 94,2%
CA: 93,1%
VME: 0%
ME: 5,2%*
mE: 5,1%*

Dificultad de medir
CIM en B.lact
(cefepime) por
complej. mecanismos
resistencia

Endimiani et
al.
Microbiolgi
ca. 2002

ID

65
clnicas
122
referencia

Phoenix
75% 67%
Vitek 2
61% 42%
MicroScan
75% 57%

No se obtienen
Turnbull et
resultados aceptables al.
ASM.2002

153

Phoenix
50%
Vitek 2
53%
P: 0,624

No se obtienen
Brisse et al.
resultados aceptables JCM.2002
(Compara

ID
B. cepacia

(Compara
varios
Mtodos)

varios
Mtodos)

BNF
1

CONCLUSIONES BACILOS GRAM


NEGATIVOS NO FERMENTADORES
Se obtienen buenos resultados en ID en las especies ms
frecuentes: Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter
sacaroliticos, S. maltophilia.
Otras especies presentan resultados muy diversos y no
siempre aceptables.
En Complejo B. cepacia se aprecia la insatisfactoria
capacidad de los sistemas automatizados para identificar
esta especie y por la importancia clnica, se requiere
mtodos de confirmacin fenotpicos y preferentemente
moleculares.
Estudios de AST deben complementarse con mtodos
estndares en especies MR con variados mecanismos.

CAPACIDAD DE DETECCION
OTRAS RESISTENCIAS
Deteccin Resistencia a Imipenem en Acinetobacter baumannii. Se
compara Phoenix, Vitek y Microscan . Solamente Microscan no obtuvo
resultados aceptables, los otros sistemas aceptables y comparables. (BMC
Infecctions Diseases 2009).
Susceptibilidad de P.aeruginosa ante Beta lactmicos se compara Phoenix,
Microscan y Vitek 1 y 2. Se obtuvo en todos los sistemas inaceptables niveles
de error con falsa susceptibilidad con TZP e IMI y falsa resistencia con ATM,
FEP, CAZ. Comparados como referencia CLSI por difusin y CIM. Se
recomienda mtodos alternativos en estos casos.(JCM. 2007).
Inconsistentes resultados con TZP?. Se estudia la capacidad de detectar
Resistencia a TZP en cepas de E. coli por Phoenix, Microscan, Vitek . Se
compara con mtodo referencia Microdilucin en caldo. Estudio de
reproducibilidad en 20 das.
Cepas resistentes presentaron variabilidad de resultados en el mtodo de
referencia y , en mtodos automatizados siendo el Phoenix el que obtuvo
resultados ms cercanos al de referencia, CA 74%. (ICAAC, 2005).

CARBAPENEMASAS EN
ENTEROBACTERIAS
Trabajo sin publicar ( F.Pasteran et al. INEI , C.Malbrn. Argentina).
Capacidad del Phoenix para Deteccin Cabapenemasas Clase A, comparado
con Dilucin en agar y la genotipificacin.
Resultados preliminares:
CA entre Phoenix y Dil. Agar: IMI: 84%, MEM: 71, ERT.73%
75
cepas

Phoenix

Dilucin Agar

IMI

MEM ERT

IMI

MEM ERT

Sens. 90

78

100

79

76

79

Esp.

82

78

91

79

75

91

Conclusin: Buena capacidad de deteccin principalmente con ERT. Baja la


especificidad ante presencia de CTX-M.

Staphylococcus y Enterococcus
Objetivo

N
cepas

Capacidad
Phoenix

Total Enterococcus ID 100%


424
90 cepas
cepas S.aureus
ID 100%
232
Staphyloc.sp ID 98%
102

Staphylococcus
Enterococcus
ID y AST

Comparar
Mtodos ID
Stpahylococcus

Comparar
Mtodos ID y
ASTStpahyloc. y
Enterococcus

40

Resultado

Compara

especi Vitek 2
es
Phoenix
API

Sistemas
automatiz.
Aceptables y
comparables.
API Mejores
resultados

202
102 S. aureus ID (ambos):
cepas 100Enterococ. Staphyloc.
Compara
Phoenix y
Microsacan

100%
Enterococ.
99%

Resultado

Autor

EA100% CA 99,3% Caroll et al.


Vanco R: 100%
JCM. 2006
EA98,2% CA 98,8%
VME: 1,7%
EA 96,8% CA 95,7%
VME0,7%, ME 1,7%
y mE: 2,9%
Phoenix: menor
correlacin
S. hominis 75%
S.epidermidis 76%.

Layer et al.
JCM.
2006

AST (ambos):

Noel et al.
ASM. 2005

Staphyloc.
96,9%
Enterococ.
95,2%

DETECCION RESISTENCIA EN Staphylococcus


Objetivo

N cepas

Comparar
deteccin
Resist. por
Gen mecA
S.aureus

620

Comparar
deteccin
VISA en 6
sistemas:
Referencia
Mtodo

T: 129
< 1: 60
2 ug/ml:

Microdilucin

CIM a
Cefoxitin
como
predictor
Gen mecA

24
4 ug/ml:
36
8 ug/ml:
9

Resultado

Resultado

Autor

SAMR 448
cepas
SAMS 172
cepas
*uso
cefoxitin

ID Phoenix:
99,8%

AST Phoenix
EVM: 0,2%
EM: 0%
AST Vitek 2:
EVM: 0,2%
EM: 0,6%

Junkins et
al. JCM.
2009

Phoenix, Etest
Vitek 1 y 2
Microscan
Diluc. Agar,
Difusin,
Screening.

EA: 98%
Menos Vitek1.

S. aureus mecA + 212


340cepas mecA - 128
Referencia:
Det. Gen
por pCR

ID VItek 2:
99,7%

En CIM de 2-4 Swenson


ug/ml fue
et al.
difcil para la JCM.2009
Phoenix, E-Test: una
mayora
dilucin >
incluso Met.
Vitek 2: una dilucin < Referencia
Se usa CIM > 8ug/ml
para predecir Resist.
mediada por Gen
mecA

Phoenix:
S: 100%
E: 99,2 %

Votta et
al.
ICAAC
2004

DETECCION RESISTENCIA
ERITRO/CLINDA Streptococcus
Objetivo: Evaluar 4 mtodos su capacidad de deteccin de R
mediada por ermB y mefA/E.
ermB (MLSB): Eritromicina R y Clindamicina R
Inducible: iMLSB o constitutiva cMLSB

mefA/E (M): Eritromicina R y Clindamicina S.

Se estudiaron 59 aislamientos: 31 ermB, 20 mefA/E y 8 negativas.


Se evala: doble disco, Microscan, Phoenix y microdilucin caldo.
Resultados:
Mtodo difusin: mejor correlacin ermB: 100% (Phoenix: 97%)
Microdilucin caldo: mejor correlacin mefA/E: 95%. (Phoenix: 90%).
En Phoenix % correlacin para deteccin iMLSB: 100% y para cMLSB 93%.
Sinha et al. Evaluation of Four AST Methods for Detection of Erytromicin and
Clindamycin Resistance in Streptococci. ICAAC. 2003.

AST: Streptococcus pneumoniae


311 cepas clnicas.
Tiempo:
Phoenix : 12,1 horas
Vitek: 9,8 horas
EVM menores en
Phoenix (0,3%, con
penicilina) comparado con
Vitek (2,4%).
mE en Phoenix 9,3% y en
Vitek 9,6%.
Ambos sitemas dan
resultados confiables y en
menor tiempo que
sistemas manuales.
Scott et al. Comparison of BD Phoenix to Vitek 2, MicroScan MICroStrep and E-Test for
Antimicrobial Susceptibility Testing of Streptococcus pneumoniae . JCM. 2009, p. 3557- 3561.

COMPARACION FLUJO TRABAJO V/S


CAPACIDAD: VITEK 2 Y PHOENIX
Estudio realizado con 307 cepas.
Variable
Tiempo:
Manipulacin 7 cepas
Resultado total cepas

Phoenix

Vitek

20,9 +- 1,8
727 +- 162

10,6+- 1,0
506 +- 120

ID BNF
ID Staphyloccus
ID Enterococcus
ID Enterobacteriaceae

100%
97%
100 %
96%

100%
97%
100%
98%

AST

97%
3%
0,3%
0,6%

97%
2,8%
0,2%
1,7%

CA
mE
ME
VME

Eigner et al. Analysis of the Comparative Workflow and Performance


Characteristics of the Vitek 2 and Phoenix Systems. JCM,2005, p.3829-3834.

EXPERIENCIA LABORATORIO REFERENCIA ISP (2008-2009)


BNF IDENT LAB. Total
REF.
A. baumannii
Pseudomonas
aeruginosa
Acinetobacter
asacarolitico
Stenotrophomon
as maltophilia
Burkholeria
cepacia
Alcaligenes
faecalis
She. putrefaciens
P. fluorescens
P. putida

211 A. baumannii 196

Sin identif 5

Alcalig. faecalis 3

191 P. aeruginosa 189


Acinetobacter
16 asacarolitico 11

Sin identif 1

Pseudomonas spp. 1

Sin identif 1

Acinetobacter spp. 1 Moraxella spp. 2

40

S. maltophilia

20

Burkh. cepacia 17

7
6
6
10

Alcal. faecalis 4
P. putida 1
She. putrefaciens 3 P.aeruginosa 1
P. fluorescens 3
P.aeruginosa 2
P. putida 8
P.aeruginosa 1
CDC grupo EF 4b
P. oryzihabitans 2 1
P. pseudoalcalig. 1 P. stutzeri 1

P. oryzihabitans

P.pseudoalcalig.
P. stutzeri
P. monteilii
Chrys.
Indologenes
Eliz.
kinkiamening

4
4
2

Myroides spp.
Sphin.
paucimobilis
Achromobacter
(distintas
especies)
Delftia, Weksella,
Comamonas,
Moraxella
Otras Especies
incorrecta o sin
identificar
Total cepas BNF

P. stutzeri 1
Ps. putida

Chrys. indolog. 3

Eliz. kingiamen. 3

Myroides spp. 1
Sphin. paucimobilis
2
Achromobacter
(distintas especies)
4
Delftia, Weksella,
Comamonas,
Moraxella 4

10
557 Correlacin 88,9%

Bord.bronchisep. 1 Ac. asacarolitico 3 Acinetobacter spp. 3

Alcalig. faecalis 1

S. maltophilia 1 P.fluorescens 2

Sin Identif 1

B. bronchisep. 2
P. pseudoalcalig. 1
P. putida 1
P. oryzihabitans 1
Kingella

Sin Identif 1
P. putida 1

P.aeruginosa 1
Pseudomonas spp.1

Bergeyella
zoohelcum 3
Sphin.
paucimobilis 1
Eliz. kingiamening
1

Burkholderia
gladioli 1

Pseudomonas spp. 1 P. aeruginosa 1

Sin Ident

EXPERIENCIA LABORATORIO REFERENCIA ISP (2008-2009)


ENTEROBACTERIAS
IDENT LAB. REF.
K. pneumoniae
E.coli

K. oxytoca 1
128
69

K. pneumoniae 127
E.coli
E. cloacae

Delftia acidovorans
68 1
36
Citrobacter koseri K. pneumoniae 1 Citrobacter
2
freundii 1

E. cloacae

40

S. marcescnes

28

E. agglomerans

24

S. marcescnes
E. agglomerans 9

E. cloacae

E.aerogenes

E.aerogenes 2

K. pneumoniae 1

241

Salmonella spp.

Salmonella spp.
Shigella spp.
S. odorifera
S. liquefaciens
P. mirabilis
M. morganii
K. oxytoca
K.ozaenae
E. gergoviae

5
1
1
6
1
2
3
1

Shigella spp.
S. odorifera
S. liquefaciens
P. mirabilis
P. stuartii
K. oxytoca
K.ozaenae
Enterobacter spp.

C. freundii
Hafnia alvei
Vibrio parahaemolyticus

2
6
1

C. freundii
Hafnia alvei
Vibrio
parahaemolyticus

Total cepas

562
96,00%

K. pneumoniae 1 Tatumela
physeos 3

Leclercia adec. Shigella 1


8

EXPERIENCIA LABORATORIO REFERENCIA ISP (2008-2009)


AST
Especie
K. pneumoniae
BLEE +

TOTAL
128

CORRELACIN
128

Error muy grave

Error grave

Error menor

Comentarios
Beta lactamicos

Beta lactamicos
K. pneumoniae
BLEE -

16

16

E. coli BLEE +

46

46

Beta lactamicos

E. coli BLEE P. mirabilis BLEE +

10
5

10
4*

Beta lactamicos

E. cloacae

20

20

Recomendacin
Experto para BLEE 4

2 cepas BLEE + , no
estandarizado
S. marcescens

30

28

E. aglomerans

20

20
Susc. Dism. Cipro
error: 26,2%

Salmonella spp.

229

169

60

A. baumannii

177

171

carbapenemes
error: 3,4%

IMI: 2, MEM:4

P. aeruginosa

154

143

carbapenemes
error: 7,1%

MEM

S. maltophilia

38

26

4*

5**

error: 31,7

* SXT, ** LEV,
CAZ

3*

NA

ENCUESTA
Pregunta

Hosp. 1

Hosp.2

Hosp.3

Hosp.4

Dificultad ID y
AST en
Cocceas

Errores con
ID Staph.
saproph.

Moderada
Dificultad CIM MF 0,5 en
escaso
Strepto y algunos Linezolid en
Enterococcus. desarrollo
Staphy.

Tiempo
demora C+

12 horas
promedio

10 a 12 horas

Dificultad ID y
AST en BGN

No

Muy poco por


inculo y en
Pseudom.
ASTcon TZB

No

No

Tiempo
demora BGN

10 horas

4 12 horas

No

Uso Tec.
Alternativa

No

En bajos %
confianza y AST:
mecan. Resist.

Si , para
resistencias
especficas

En Cocc.+
da baja
confiabilidad

CONCLUSIONES EXPERIENCIA
PHOENIX
Muy buena correlacin en bacterias ms frecuentes
en clnica.
Buena correlacin de resultados CIM en la mayora
de AB.
Sistema expertos buen aporte.
Es necesario siempre analizar la ID, AST, aspectos
microbiolgicos y de la muestra.
Fcil manipulacin
Menor tiempo para obtener resultados.
Software permite anlisis de datos

CONCLUSIONES EXPERIENCIA
PHOENIX
Desventajas:
Costo paneles
Tamao Equipo
Requiere control adecuado de temperatura
ambiente.
Paneles con corta fecha de vencimiento.

CONCLUSIONES VITEK / PHOENIX


Ambos sistemas presentan buen nivel de
identificacin en bacterias de importancia clnica.
AST : todos presentan errores mayores y muy
mayores similares, con variaciones dependiendo
del agente bacteriano.
Es necesario estar alerta para deteccin de
mecanismos de resistencia.
Son una buena alternativa para la prctica clnica
(tiempo, estandarizacin, alertas, sistemas de
experto, etc.)

CONCLUSIONES VITEK / PHOENIX


No se puede desechar mtodos tradicionales.
Resultados siempre deben ser analizados por
profesionales competentes relacionando ID y AST.
Al seleccionar el equipo: tener claro sus
limitaciones y el objetivo para el laboratorio y
relacionarse con los clnicos para una mayor
utilidad de los resultados.
Los grupos de usuarios de los distintos sistemas
deberan solicitar la incorporacin de paneles AST
con antimicrobianos de acuerdo a la realidad local.

MUCHAS GRACIAS
Gracias por la colaboracin
Dr. Leonardo Chanqueo
TM. Carlos Rodo
TM Dina Concha
TM:, Natacha Garrido, Arturo Briones y Pablo Saavedra

BGN:Publicaciones revisadas
1.

2.

3.

4.

5.
6.
7.

OHara Caroline. Evaluation of tehe Phoenix 100 ID/AST Systema and NID Panel for
Identificaction of Enterobacteriaceae, Vibrionaceae, and Commonly Isolated
Nonenteric Gram Negative Bacilli. JCM. 2006, p. 928-933.
Carrol et al. Evaluation of the Phoenix Automated Microbiology Microbiology System
for Identification and Antimicrobial Susceptibility Testing of Enterobacteriaceae. JCM.
2006, 44(10): 3506-3509.
Menozzi et al.Two Center Collaborative Evaluation of Performance of the BD Phoenix
Automated Microbiology System for identificaction and Antimicrobial Susceptibility
Testing of Gram Negative Bacteria. JCM. 2006, p: 2085 4094.
Snyder et al. Comparative Study of Identificaction and Antimicrobial Susceptibility
Testing of Enterobacteriaceae and Non Fermentative Gram negative Organisms with
the Phoenix Automated microbiology and Microscan. Meeting ASM. 2006.
Brasso et al. Variabiity in Vitro Susceptibility Test Results for E.coli Isolates and
Piperacilin/Tazobactam Using Comercial and Reference AST Methods. ICAAC. 2005
.Turner et al. Detection of Gram Negative Bacterial Resistance to Fluoroquinolone
Agents in the Phoenix Automated Microbiolgy System. ASM. 1999.
Salomon et al. Assessment of the Phoenix Automated Microbiology System in the
Identificaction of a Variety of Gram Negative Bacilli. Clinical microbiology and
Infections Diseases. 2000.

BNF: Publicaciones revisadas


1. Endimiani et al. Identificcation and Antimicrobial Susceptibility Testing of clinical Isolates
of Nonfermenting Gram Negative Bacteria by the Phoenix Automates microbiology
System. Microbiologica. 2002, (25): 323- 329.
2. Turnbull et al. Side by Side Evaluation of Dade Microscan Walkaway 96, BD Phoenix
and BioMerieux Vitek 2 for Identificaction Testing of a Challenge and Routine Set of
Nonfermentative and Miscellaneous Gran Negative Clinical Isolates. Meeting ASM.
2002.
3. Brisse et al. Comparative Evaluation of the Phoenix and Vitek Automated Instruments for
Identificaction of Isolates of the Burkholderia cepacia Complex. JCM. 2002, p.1743-1748.
4. Kulah et al. Detecting imipenem resistance in Acinetobacter baumannii by automated
system (Phoenix, Microscan, Vitek 2), high error rates with Microscan. BMC Infections
Diseases 2009.
5. Juretschko et al. Accuracies of B-Lactam Susceptibility Test Results for P. aeruginosa
with Four Automated System( Phoenix, Microscan, Vitek, 1 y 2)JCM.2007,p: 1339-1342.
6. Turng et al. Comparative Studies of Antibiotic Susceptibility of S. maltophilia with
Trimethoprim/sulfonamethoxazole Using Different Testing Methodologies. Clinical
microbiology and Infections Diseases. 1999.
7. Hejna et al. Comparison of Phoenix and Vitek Automated Susceptibility Testing for
Performance with A. baumannii complex and P. aeruginosa isolates. Clinical
microbiology and Infections Diseases. 1999

DETECCION BLEE
Publicaciones revisadas
1. Trevio et al. Comparacin entre las pruebas para la deteccin de beta-lactamasas
espectro extendido de los sitemas Vitek 2 y Phoenix. Enfermedades Infecciosas y
Microbiologa Clnica, 2009: 27(10): 566-570.
2. Thomson et al. Comparation of Phoenix and Vitek 2 Extended Spectrum B-Lactamase
Detection Test for Analysis of Escherichia coli and Klebsiella Isolates wuith well
Characterized B- Lactamases.JCM. 2007.p: 2380-2384.
3.Sanguinetti et al. Characterization of Clinical Isolates of Enterobacteriaceae from Italy
by the BD Phoenix Extended Spectrum B-Lactamases Detection Method. JCM, 2003, p.
1463-1468.
4.Leverstein et al. Evaluation of E-Test ESBL and the BD phoenix, Vitek 1 y 2,
Automated Instruments for detection of Extended Spectrum B-Lactamases in
Multiresistant E.coli y Klebsiella spp. JCM, 2002, p.3703-3711.
5. Gross et al. The importance of ESBL Screening Test in Rapid Automated Antimicrobial
Susceptibility Testing (AST). ICAAC.2001
6. Turng et al. An evaluation of the Phoenix Automated Microbiolgy Sysem for Extended
Spectrum Lactamase Detection. Society Microbiology .Los Angeles. 2000.
7.Brisse et al. Evaluation of the Phoenix Automated Microbiology Systemfor Detection
Extended Spectrum Beta Lactamase Producing E. coli and Klebsiella and Ciprofloxacin
Resistant Acinetobacter and Pseudomoans aeruginosa European Clinical Isolates.
ICAAC, 2000.

STAPHYLOCOCCUS Y ENTEROCOCCUS
D. Junkins et al, BD Phoenix and Vitek 2 Detection of mec A mediated Resistance in
Staphylococcus aureus with Cefoxitin. JCM, 2009 p. 2879-2882.
Spanu et al. Identification of methicilin-resistant isolates Staphylococcus aureus and
coagulase-negative Staphylococci responsible for blood stream infections with Phoenix
system. Diagnostic Microbiolgy and infections Diseases.2004, (48)p.221-227
M. Swenson et al. Accuracy of Comercial and Reference Susceptibility Testing Methods
for Detecting
Vancomycin-Intermediated Staphylococuus aureus . JCM, 2009 p. 2013-2017
.
M. Votta et al. Evaluation of Cefoxitin MIC Results as a Predictor of
mecA-mediated Resistance with Staphylococcus aureus in
the Phoenix Automated Microbiology System. ICAAC 2004.
C. Carroll et al. Evaluation of the BD Phoenix Automated Microbiology System for
identificaction
and Antimicrobial Susceptibility Testing of Staphylococcus and
.
Enterococcus. JCM, 2006, p. 2072-2077.
F. Layer et al. Comparative Study Using various Methods for Identificaction of
Staphylococcus Species in Clinical Specimens. JCM, 2006, p.2824-2830
Noel et al. Clinical Evaluation Comparing the BD Phoenix Automated Microbiology System
with the Microscan for Identificaction and Antimicrobial Susceptibility Testing of
Staphylococcus aureus and Enterococcus species. ASM.2005.
Webster et al. Methicilin resistant S. aureus with reduced susceptibility to vancomycin in
Canad. Diagnostic Microbiology and Infections Diseases. 2006.

PUBLICACIONES REVISADAS
Sinha et al. Evaluation of Four AST Methods for Detection of Erytromicin and Clindamycin
Resistance in Streptococci. ICAAC. 2003.
Scott et al. Comparison of BD Phoenix to Vitek 2, MicroScan MICroStrep and E-Test for
Antimicrobial Susceptibility Testing of Streptococcus pneumoniae . JCM. 2009, p. 35573561.
Eigner et al. Analysis of the Comparative Workflow and Performance
Characteristics of the Vitek 2 and Phoenix Systems. JCM,2005, p.3829-3834.
Gross et al. Comparison of Phoenix to Vitek 2 Antimicrobial Susceptibility Test Performance
with a Diverse Group of bacteria which are Found in Clinical Microbiology Labs. Clinical
Microbiology and Ifections Diseases. 2002.
Junkins et al. Comparison of BD Phoenix AP Workflow with Vitek 2. JCM.2010.
Fahr et al. Antimicrobial Susceptibility Testing for Ten Fluoroquinolones Using the BD
Phoenix Automated Microbiology System. Clinical Microbiology and Infections Diseases.
2002.
Reuben et al. Preliminary Evaluation and Overview of Phoenix a New Automated ID/AST
System. Clinical Microbiology and Infections Diseases 1999.
Reuben et al. A Performance Evaluation of Phoenix Automated Microbiology System in
detecting resistance to Linezolid , Azitromycin, Claritromycin, and Quinupristin.dalfopristin
among Staphylococcal and Enterocococcal isolates. ICAAC. 2000.
Hong et al. Detection of Vancomycin Resistance in Enterococci with the Phoenix System.
Clinical Microbiology and Infections Diseases. 2002.
Hejna et al. Detectionof High Level Aminoglycoside Resistance HLAR, in Enterococci with
the Phoenix Automated Microbiolgy System. Clinical Microbiology and Infections Diseases.
2000