Universidad Autnoma del Estado de Mxico

Facultad de Qumica
UA: Reactores Biolgicos
Produccin de penicilina
Nolasco Terrn Eder Yair
Grupo 85
IQ
Penicilina
Los antibiticos son productos del metabolismo microbiano que son capaces de
matar o inhibir el crecimiento de otros microorganismos a bajas
concentraciones. Durante la II Guerra Mundial la demanda de agentes
quimioteraputicos para tratar las infecciones de las heridas condujo al
desarrollo de un proceso de produccin para la penicilina y al inicio de la era de
investigacin sobre los antibiticos. En la actualidad contina siendo una de las
reas ms importante de investigacin dentro de la Microbiologa Industrial.
Los antibiticos son producidos por bacterias y hongos. Entre los hongos,
solamente 10 de los antibiticos conocidos se producen comercialmente y
solamente las penicilinas, cefalosporina C, griseofulvina y cido fusdico tienen
importancia clnica.
La penicilina fue descrita por Fleming en 1929. Un grupo de investigacin en
Oxford, bajo la direccin de Florey y Chain, la aisl a partir de cultivos de
Penicillium notatum en 1940 y la primera aplicacin clnica de la penicilina se
realiz en 1941. Las penicilinas son producidas por muchos hongos,
particularmente especies de Penicillium y Aspergillus.
Mtodos de produccin
La penicilina G y la penicilina V son producidas utilizando procesos sumergidos
en fermentadores de 40.000-200.000 litros. Debido a las dificultades en el
suministro de oxgeno no pueden ser empleados tanques mayores. La
fermentacin de penicilina es un proceso aerbico con una velocidad de
absorcin volumtrica de oxgeno de 0,4-0,8 mM/l min. La velocidad de
aireacin requerida est entre 0,5-1,0 volmenes de aire (volumen de lquido)1 min-1 dependiendo de la cepa, del biorreactor y del tipo de impulsor. Para el
mezclado se suelen utilizar varios impulsores de tipo Rushton (120-150 rpm). El
rango de temperatura ptima es de 25-27C.
En un esquema tpico de produccin de penicilina el inculo se inicia utilizando
esporas liofilizadas. Debido a la gran variabilidad de las cepas de alta
produccin, es necesario el mantenimiento cuidadoso de las cepas. La
concentracin de esporas (ptima 5x103/ ml) y la formacin de agregados son
cruciales para el rendimiento subsecuente. Si se quiere conseguir una
velocidad ptima de formacin de penicilina, los agregados (pellets) no deben
crecer como bolas compactas sino de una forma suelta. Despus de varias
etapas de crecimiento est preparado el cultivo de produccin. En la
fermentacin tpica de penicilina existe una fase de crecimiento de unas 40h
con un tiempo de duplicacin de 6h, durante la cual se forma la mayor parte de

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la masa celular. El suministro de oxgeno es crtico en el cultivo en crecimiento
ya que el aumento de la viscosidad dificulta la transferencia de oxgeno.
Despus de la fase de crecimiento, el cultivo llega a la fase real de produccin
de penicilina. Debido al aporte de distintos componentes al medio, la fase de
produccin puede extenderse hasta 120-160h.

Actualmente la extraccin con solventes es la base para la separacin y

purificacin de la penicilina. El primer paso consiste en separar el micelio del
medio de cultivo empleando un filtro rotatorio a vaco tipo cilndrico. El filtrado
rico en penicilina es luego enfriado en un intercambiador de calor a 0 - 4 C con
el objeto de disminuir la degradacin enzimtica y qumica durante las etapas
de extraccin posteriores.
Las penicilinas G y V son cidos fuertes (pKa entre 2.5 - 3.1). Las formas cidas
son solubles en muchos solventes orgnicos y se pueden extraer con un alto
rendimiento en acetato de amilo o de butilo a pH 2.5 - 3.0. La extraccin se
puede realizar en operaciones continuas, a contracorriente en extractores
centrfugos en etapas mltiples, a temperaturas de 0 - 3 C. Otra posibilidad es
el empleo de mezcladores estticos o decantadores, los cuales tienen en
menor costo de inversin.

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Se debe tener en cuenta que tanto la penicilina G como la V se degradan en
medio cido con una cintica de primer orden a una velocidad proporcional a la
temperatura y recproca con respecto al pH. Esto hace que la vida media en
condiciones de eficiente extraccin en medio cido sea muy reducida. Sin
embargo como la forma V en tales condiciones es ms estable que la G, si el
objetivo es obtener 6-amino penicilnico (6-APA) la produccin de penicilina V
es ms aconsejable.
La extraccin de penicilina se puede realizar en una o ms etapas sucesivas,
con una acidificacin del caldo filtrado con H2SO4 o H3PO4 al 10% P/V y con el
agregado de un agente surfactante (0,003 - 0,1% P/P, en el solvente),
realizndose la extraccin y concentracin en extractores centrfugos.
Dependiendo de las especificaciones de uso final, el solvente conteniendo
penicilina se puede tratar con carbn para separar pigmentos y otras
impurezas. Esta etapa actualmente no se realiza debido a las bajas impurezas
de los caldos y a los altos rendimientos obtenidos.
La cristalizacin se puede realizar desde la fase acuosa si se desea, siendo los
valores crticos las concentraciones de sodio o potasio, la temperatura, la
concentracin de penicilina y el pH. En caso de hacerse la cristalizacin a partir
de un solvente se requiere tambin un exceso de Na+ o K+, siendo los
cristales recuperados en un filtro rotatorio a vaco. Estos cristales son lavados y
presecados con un solvente voltil que tambin separa impurezas coloreadas.
El secado definitivo se puede realizar con aire caliente, vaco o calor radiante.
La penicilina cristalina G o V as obtenida puede ser empleada como tal o como
intermediario que es convertido a 6-APA para obtener nuevas penicilinas
semisintticas, cuidando en todos los casos que los productos debern tener
un grado farmacutico. El cido 6-APA puede ser obtenido por va enzimtica
(penicilinacilasa) o qumica.
El medio de un cultivo tpico alimentado puede variar dependiendo de la cepa,
y generalmente consiste en:
Lquido de maceracin de maz (4-5% peso seco).
Una fuente de Nitrgeno adicional, harina de soja, extracto de levadura o
suero.
Una fuente de carbono, lactosa.
Varios tampones
El pH se mantiene constante a 6,5.
El cido fenilactico o el fenoxiactico se alimentan continuamente como
precursores (0,5-0,8% del total).
Los procesos con alimentacin de glucosa o melazas tambin tienen xito. En
estos casos las velocidades de alimentacin son de 1.0-2.5 kg/m 3h, con una

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concentracin de glucosa de 500 kg/m . Aproximadamente el 65% de la fuente
de carbono metabolizada se utiliza para el mantenimiento energtico, el 25%
para el crecimiento y slo el 10% para la produccin de penicilina.
Se est llevando a cabo una intensa investigacin para producir penicilina con
clulas inmovilizadas. En un estudio a escala de laboratorio se demostr la
ventaja de este enfoque sobre el uso de sistemas discontinuos alimentados,
pero esta tcnica no ha sido introducida todava a nivel comercial. La penicilina
es excretada al medio y menos del 1% permanece unida al micelio. Despus de
la separacin del micelio, la recuperacin del producto se lleva a cabo por
medio de dos etapas de extraccin continua en contracorriente del caldo de
fermentacin con acetato de amilo o de butilo a 0-3C y pH: 2,5-3,0. El
rendimiento es de alrededor del 90%.

Bibliografa
http://nostoc.usal.es/sefin/MI/tema15MI.html
http://www.biologia.edu.ar/microind/producci%C3%B3n_de_penicilina.htm
http://www1.us.es/pautadatos/publico/asignaturas/40397/17564/BIOTEC_0708_TEMA%2010.pdf
http://blogs.creamoselfuturo.com/bio-tecnologia/2011/03/25/procesosindustriales-de-produccion-de-penicilinas-semisinteticas/
http://www.uam.es/departamentos/medicina/farmacologia/especifica/F_General
/FG_T62.pdf
http://www.ugr.es/~iquimica/PROYECTO_FIN_DE_CARRERA/lista_proyectos/p192
.htm