Qumica analtica

UNIDAD VI
Espectrofotometra

Profa. Lilia Araujo.

Prof. Avismelsi Prieto.

Qumica analtica

La espectrofotometra

es la ciencia que estudia la interacciones que ocurren entre la radiacin y la

materia.

Mtodos espectrofotomtricos de anlisis: Son aquellos que

miden la clase y cantidad de

radiacin emitida o absorbida por la especies atmicas, inicas o moleculares que se analizan.

Radiacin Electromagntica

Es una forma de energa que se transmite por el espacio a velocidades

muy altas.

Espectro electromagntico : Distribucin energtica del conjunto de las ondas electromagnticas

Qumica analtica

Qumica analtica
Unidades de longitud de onda () para algunas regiones del espectro elctromagntico
Regin
Unidad
Definicin
Rayos X
Angstrom ()
10-10 m
Ultravioleta visible
Nanmetros (nm)
10-9 m
Infrarrojo
Micrometros (m)
10 -6 m

La Radiacin Electromagntica tiene propiedades de ondas y corpusculo:

A) Propiedades Ondulatorias: Observadas a nivel macroscpico
Longitud de onda ( )

Frecuencia ( )

Velocidad ( V )

Amplitud

Campo elctrico

Campo Magntico

Reflexin

Refraccin Difraccin e Interferencia

A diferencia de las ondas sonoras la radiacin electromagntica no necesita de un medio para

transmitirse, ya que se propagan en el vaco.

Qumica analtica

El modelo ondulatorio no explica satisfactoriamente los procesos asociados con la

absorcin y la emisin de la energa radiante con la materia, por lo tanto es conveniente
considerar a la radiacin electromagntica como paquetes discretos de energa llamados
Fotones o Cuantos.

B) Propiedades de partculas:
Cuando una muestra absorbe radiacin electromagntica experimenta un cambio de energa.

La interaccin entre la muestra y la radiacin electromagntica, se explica suponiendo que la

muestra absorbe los fotones, que quedan destruido y sus energas pasan a la muestra.

La energa de un fotn se puede

relacionar con su longitud de onda
mediante la ecuacin:
h= Constante de Planck = 6,626.10-39 J*s
C= velocidad de la luz= 3*108 m/s
V = # de onda
Una radiacin de una definida
Puede variar su intensidad con el
Cambio de la amplitud

E h. h

h.c.v

Intensidad: Nmero de fotones

Por unidad de tiempo

Qumica analtica

Interaccin de la radiacin y la materia.

Interacciones relacionadas
con las propiedades
gruesas de la materia.

En espectrofotometra

Reflexin, refraccin,
dispersin, interferencia
y difraccin.

Las interacciones
ms importantes
son las que dan lugar a

Transiciones electrnicas,
Vibracionales y rotacionales
en especies moleculares o
Iones poliatmicos

Normalmente
no implican
transiciones
entre diferentes
niveles de energa.

Transiciones entre niveles

de energa de especies
qumicas.

Transiciones electrnicas
en especies atmicas

Qumica analtica

TRANSICIONES ENERGTICAS
Una molcula lineal de n
tomos puede girar
alrededor de 2 ejes y
tiene 3n-5 modos
vibracionales

Una molcula no lineal

de n tomos puede girar
alrededor de 3 ejes y
tiene 3n-6 modos
vibracionales

Qumica analtica

Tpicas transiciones electrnicas del elemento sodio

Configuracin electrnica:

Na: (1S2)(2S2)(2P6)(3S1)

4p

3d
330,0 nm

4S
Energa

3p
589,0 nm

3S

Qumica analtica

Molcula del N2 (N N)

Qumica analtica

Diagrama de los niveles de energa de una molcula

En general, cuando una molcula

absorbe radiacin para provocar
una transicin electrnica ,
ocurren tambin transiciones
vibracionales y rotacionales
simultneas

Qumica analtica

Espectros de absorcin de radiacin

ESPECIES
ATMICAS

ESPECIES
MOLECULARES

Transiciones
electrnicas
puras

Transiciones
electrnicas,
vibracionales
y rotacionales
simultneas

Qumica analtica
MEDICIN DE LOS FOTONES COMO SEAL

Se utiliza las interacciones materia- radiacin electromagntica a fin de obtener informacin

cualitativa y cuantitativa de la muestra.
Fuente de estmulo

Muestra

Energa calorfica
Electricidad
Radiacin electromagntica
Reaccin qumica

El analito est
predominantemente
en su estado ms
bajo de energa
o estado fundamental

Espectrofotometra de
emisin
Espectrofotometra de
absorcin

Espectrofotometra de
fotoluminiscencia

Resultado
Se induce alguna (s)
Transicin (s) del analito
presente en la muestra por
ganancia de un cantidad
de energa.

La radiacin
electromagntica emitida

La radiacin
electromagntica absorbida

La radiacin electromagntica
luminiscente

Para obtener
informacin que
permita cuantificar al
analito se puede
medir

Qumica analtica

Espectrofotometra de emisin

Se mide la Radiacin Electromagntica emitida

E2,1

1
Muestra
E1,0
E2,0
Energa trmica
Energa elctrica
Energa Qumica

0
Excitacin por la energa
absorbida
Espectro de Emisin

Radiacin
electromagntica
emitida, P
Energa
no radiante

2 ,0

1,0

2,1

Qumica analtica

Espectrofotometra de absorcin
Radiacin
Muestra
electromagntica
incidente
Po

Radiacin
electromagntica
transmitida
muestra

E2

1
E1

0
Se mide la radiacin electromagntica
absorbida

Energa radiante absorbida

Para que ocurra la absorcin, la energa radiante debe corresponder a la diferencia

de energa entre los niveles de energa 1,2,,etc.
Espectro de absorcin

Longitud de onda

Qumica analtica

Espectrofotometra por fotoluminiscencia (Fluorescencia y Fosforescencia)

Radiacin
electromagntica
incidente

Radiacin
electromagntica
transmitida

Muestra
muestra

Po (1)
Radiacin
electromagntica
emitida

(1)

PL (2)

2 > 1

Luminiscencia

2
1

Energa no radiante

0
Radiacin absorbida
para excitarse

Radiacin emitida
(luminiscencia) que se
mide

Qumica analtica

Espectrofotometra de absorcin molecular

Absorcin de radiacin infrarroja

Los espectros de absorcin de radiacin infrarroja
representan una de las principales herramientas para
determinar las estructuras de especies orgnicas
Un espectro infrarrojo es una propiedad altamente
caracterstica de un compuesto orgnico puro.
Si dos compuestos tienen espectros infrarrojos idnticos,
se demuestra que se trata de la misma sustancia.

Espectro de absorcin infrarrojo: Es la representacin grfica de la absorcin de la

radiacin electromagntica del compuesto, en funcin de la frecuencia (cm -1 ) y/o
longitud de la onda ().

Qumica analtica

Frecuencias caractersticas
de absorcin infrarroja

m = moderada
v = variable

Modos de vibracin
de una molcula

Qumica analtica
N de onda (cm-1) = 1 / (cm)

1-octeno

Bromuro de isopropilo

n-butilbenceno

Qumica analtica

Alcohol secbutilico

Alcohol benclico

Qumica analtica

cido proponico

cido o-tolico

Qumica analtica

n-butiraldehido

Acetofenona

Qumica analtica

Isobutilamina

n-metilanilina

Qumica analtica

Acetato de
metilo

benzamida

Qumica analtica

Di-n-propileter

Fenil-etil-eter

Qumica analtica

Espectrofotometra de absorcin molecular

Absorcin de radiacin ultravioleta-visible
Absorcin por compuestos orgnicos
Los espectros moleculares UV-Vis se deben a cuatro tipos de transiciones electrnicas
entre los niveles de energa cuantizados.
Rango

Radiacin

Transicin

(nm)

electromagntica

Ejemplo

<200

UV

C6H14 (hexano) ;C5H12 (pentano)

100-260

UV

H2O; CH3OH; CH3Cl

CH3NH2

200-500

UV o Visible

CH3CN ; (CH3)2CO ; C6H6 ;

C40H56 (caroteno)

250-600

UV o Visible

CH3NO2 ; CH3COOH;
C4H9NO ( n-butil-nitroso)

La presencia de grupos Cromforos (-NH2 ; -OH; C=O) en las molculas hacen que la
absorcin se desplace a la regin visible de la radiacin electromagntica.

Qumica analtica

Absorcin de compuestos inorgnicos

A) Los iones complejos coloreados de los metales de transicin como Ej: Fe,
Cu, Cr, Mn, Zn, V, TI, Cd, etc, son coloreados, debido a que el ion metlico
absorbe radiacin de la zona viisible, dando lugar a las transiciones
electrnicas de los electrones de valencia en los orbitales d.
dz2

dx2-y2

dxy dxz dyz dz2 dx2-y2

ION METLICO
LIBRE

dxy

dxz

dyz

ION COMPLEJO

Las diferencias de energa entre

los orbitales d del metal,
depender del estado de
oxidacin y del tipo de ligando
que tenga enlazado.

B) Otros compuestos inorgnicos que absorben en la regin UV, por ejemplo :

NO3- , NO2- , PO43-.
Los compuestos que no absorben en la regin visible pueden determinarse,
hacindolos reaccionar con grupos orgnicos insaturados (cromforos), a fin
de obtener productos que s absorben.

Qumica analtica

Espectro de absorcin Ultravioleta Visible (UV-Vis) : Es la representacin

grfica de la absorcin de la radiacin electromagntica por el analito, en
funcin de la longitud de la onda (nm).
Los espectros de absorcin en las regiones UV-Visible tienen poca utilidad
cualitativas, se emplean comnmente para propsitos cuantitativos.
especialmente la regin visible,.

400

500

700

(nm)

Complejo Fe(Fen)3+2
(rojo)

350

Absorbancia

Absorbancia

Absorbancia

Longitud de onda mxima ( max ): Es la longitud de onda donde el analito

Absorbe la mayor cantidad de radiacin electromagntica.

Azul de Bromotimol
(verde)

750

(nm)

380

580
620
Sulfato Cprico
(azul)

(nm)
730

Qumica analtica

Color complementario ( color observado).

El color observado de una solucin nos da una idea donde encontraremos la longitud de
onda mxima max del compuesto, en el espectro de absorcin de la solucin,
encontrndose ste en el rango de longitud de onda del color absorbido.

Qumica analtica

Medida de la atenuacin de la radiacin electromagntica.

La absorcin de la radiacin
provoca una atenuacin de la
radiacin incidente

Disolucin

Po

Transmitancia

Analito con concentracin C

(T)

Absorbancia
(A)

La transmitancia (T) : Es la fraccin de la radiacin incidente trasmitida por el

medio.

P
Po

%T

P
*100
Po

Absorbancia (A): Es la atenuacin de los fotones a medida que atraviesan una

muestra.
La absorbancia (A) que presenta una solucin est relacionada con la Transmitancia ( T ) por:
P
A log T log
La A es la ms usada para expresar
Po
la atenuacin
A 2 log %T

Qumica analtica

Ley de la absorcin

Ley de Beer

La absorbancia est relacionada linealmente con la concentracin (C) de la especie

absorbente y con la longitud de la trayectoria de la radiacin (b) en el medio
absorbente

A=a.b.C

C (Unidades fsicas)

a= Absortividad (L/cm . mg)

A=.b.C

C (Molaridad)

b= Longitud de la celda (cm)

c=Concentracin (mg/L)
= Absortividad molar (L/mol . cm)

Ideal

A=a.b.c

y=mx

A
Pendiente = a.b

Se puede determinar el valor de

a partir de la pendiente .
Conc.

a ( absortividad )

Qumica analtica

Absortividad molar ()
en soluciones
diluidas es
constante

[]

*Disolvente y longitud de onda de la radiacin

*Composicin de la solucin
*Temperatura
*Concentracin de los iones inertes Fuerzas electrostticas
*ndice de refraccin (depende de la concentracin)

Limitaciones de la ley de Beer

Slo se aplica para bajas concentraciones de analito. En altas concentraciones se pierde la

independencia de cada partcula del analito en relacin con las dems.
Limitaciones qumicas: Cuando la especie absorbente participa en una reaccin de equilibrio
Limitaciones Instrumentales:
- Falta de radiaciones monocromticas

- Radiaciones difusas parsitas

Qumica analtica

DETERMINACIONES CUANTITATIVAS EN LA REGIN VISIBLE

Pasos experimentales

1) El analito debe estar en solucin acuosa u orgnica, libre de interferencias.

2) Si el analito no presenta color, aadir reactivos que formen con l, productos
coloreados.
3) Obtener el espectro de absorcin y seleccionar una longitud de onda
( tpicamente max ) para realizar las lecturas de absorbancias en el instrumento.
4) Preparar una serie de soluciones patrn de concentracin creciente y el blanco
respectivo.
5) Si el instrumento es de un solo haz, se lleva a cero Absorbancia con el blanco.
6) Obtener la absorbancia de cada una de las soluciones patrn del analito y de las
muestras.
7) Con las absorbancias de las soluciones patrn, construir una curva de
calibracin. Las concentraciones se colocan en el eje x y las
absorbancias en el eje y.
8) Se deduce la concentracin del analito en las muestras, GRAFICAMENTE
utilizando la curva de calibracin o ANALTICAMENTE empleando la ecuacin
de la Lnea recta.

Qumica analtica
Absorbancia

Forma GRFICA

A = Absorbancia de la muestra
C = Concentracin de la muestra

Concentracin patrones

Forma ANALITICA
Para encontrar la concentracin del analito en las muestras se puede utilizar el
mtodo de los mnimos cuadrados para deducir la ecuacin de la lnea recta.
Asignando los datos de las concentraciones de las soluciones patrn al eje X y
sus respectivas absorbancias al eje Y, se encuentran los valores de la pendiente
(b) y del intercepto (a):
Al establecer la ecuacin de la lnea recta, se puede calcular la concentracin
del analito en cualquier muestra, a la cual se le haya medido su absorbancia:
Y =
absorbancia

+ bX
concentracin

X = Y-a
b

Qumica analtica
La ley de Beer y muestras con mltiples componentes:

En el caso de soluciones con ms de 1 tipo de sustancia absorbente que no interactan entre

ellas se cumple:

Atotal

i n

A
i 1

A1 A2 A3 An

Atotal E1bC1 E 2 bC 2 E3 bC3 EnbCn

Donde 1,2,3,, n son cada uno de las sustancias que absorben
La ley de Beer es aditiva

Cuando hay mezclas de n componentes que presentan solapamientos de sus espectros de

absorcin, se deben leer las A total en n longitud de onda, para determinar la concentracin de
cada componente de la mezcla.
Ej: Para la mezcla de 2 sustancias que absorben , X e Y

Atotal1 Ex1bC x Ey 1bC y

Atotal2 Ex 2bC x Ey 2bC y

Qumica analtica
-4

-3

Espectro de Absorcin de 1x10 M KMnO4

Espectro de Absorcin de 1x10 M K2Cr2O7

Espectro de Absorcin del K2Cr2O7

Espectro de Absorcin del KMnO4

1.2

1.2

Absorbancia
Absorbancia

1.4

Absorbancia
Absorbancia

1.4

0.8
0.6
0.4
0.2

1
0.8
0.6
0.4
0.2

380

400

420

440

460

480

500

520

Longitud
Longitud de de
Onda onda
(nm)

540

560

580

600

380

400

420

440

460

480

500

520

540

560

580

600

Longitud de Ondade
(nm) onda
Longitud

Espectro de absorcion de la mezcla

K2Cr2O7 y KMnO4

A470 = A470K2Cr2O7 + A470KMnO4

Absorbancia

A515 = A515K2Cr2O7 + A515KMnO4

1.5

Cr2O72- 470 nm
1

A470 = a470.b.CK2Cr2O7 + a470.b.CKMnO4

KMnO4 515 nm

A515 = a515.b.CK2Cr2O7 + a515.b.CKMnO4

0.5

0
407

457

507

557

Longitud de onda (nm)

607

Dos ecuaciones y dos incgnitas

CK2Cr2O7 y CKMnO4

Qumica analtica

Instrumentos y componentes en espectrofotometra

La Fuente
Produce
radiacin en
la regin de
inters. Debe
ser estable y
reproducible.
En
muchos
casos
la
fuente puede
emitir ms de
un

Lentes/ El
rendijas/ monocromador La muestra
en su
colimado (selector de
compartimien
res afinanlongitudes de
y alinean onda) dispersa la to absorbe
el haz
radiacin incidenteuna cantidad
en un continuo de caracterstica
componentes de de cada
longitud de
longitudes de
onda examinados onda
o seleccionados incidente
individualmente

El detector
convierte la
radiacin
transmitida
en una
seal
elctrica
amplificada

La
computad
ora
convierte la
seal en
datos
visuales

Qumica analtica

Espectrofotmetro de un solo haz

Qumica analtica

Instrumento con divisin de haz

Qumica analtica

Instrumento de haces separados en el tiempo

Qumica analtica

Espectrofotmetro con arreglo de diodos

DETECTOR

1.024
diodos

Qumica analtica

1.- Fuentes de radiacin electromagntica.

A) Fuentes Continuas: Emiten radiacin electromagntica cuya intensidad

vara solo de manera gradual en funcin a .
B) Fuentes de lneas: Emiten un nmero restringido de bandas de
radiacin, cada una con un estrecho rango de .

Fuente

Regin de longitud de onda

Utilidad

Lmpara de H2 y D2

Fuente continua

160-380 nm

Absorcin molecular UV

Lmpara de tungsteno

Fuente continua

320-2400 nm

Absorcin molecular Visible

Lmpara de tungstenohalgeno

Fuente continua

240-2500 nm

Absorcin molecular UVVisible

Lser

Fuente Lineal

UV- Visible

Absorcin Atmica molecular Fluorescencia y

dispersin

Qumica analtica
2.- Selector de longitud de onda

Permite el paso de una estrecha banda de radiacin caracterizada por una longitud de onda
nominal, una amplitud de banda efectiva y una cantidad mxima de radiacin.

(Radiaciones estrechas disminuyen las desviaciones de Ley de Beer)

Costosos: anchura de banda < 1nm

Espectrofotmetros

Econmicos: anchura de banda >1 < 20nm

Tipos de selectores de longitudes de onda:

Filtros

Absorcin: Absorben selectivamente la radiacin de una regin estrecha

del espectro electromagntico.
Interferencia: Usan interferencias constructivas y destructivas para
aislar una gama estrecha de longitud de onda.

Ej: Un filtro de absorcin prpura elimina el color complementario verde de 500-560 nm

Absorcin

30-250 nm

Interferencia

10-20 nm

Efectividad de los filtros

Los filtros no permiten una seleccin continua de .

Qumica analtica

Tipos de selectores de longitudes de onda:

Monocromadores:
a) Rejillas de difraccin
Espejos cncavos

Rejilla de
difraccin
Rendija de
entrada

b) Prismas

Rendija de
Salida

La que sale de un
monocromador puede
variar en forma
continua en un gran
intervalo del espectro.

Qumica analtica

3.- Porta muestras:

Es una celda o ventana que debe transmitir la radiacin en la regin
de la longitud de onda que se trabaja.

Celdas estndar y
con abertura

Microcelda y
celda de flujo

Material de la celda

Regin de trabajo

Caractersticas

Vidrio comn (silicatos)

Visible

Bajo costo absorbe UV

Cuarzo slice fundida

UV- Visible

Alto costo

Qumica analtica

4.- Detectores: Son transductores o dispositivos que convierten los fotones en una
seal elctrica.
Rango de

Seal emitida

200-1000 nm

Corriente

Fotomultiplicadores 110-1000 nm

Corriente

Diodos

Corriente

Fototubos
Detectores de fotones

200-1000 nm

Estos detectores poseen una superficie fotosensible que absorbe radiacin UVVisible, produciendo una corriente elctrica proporcional al # de fotones que llegan
al transductor.

5.- Procesador de la seal: La seal elctrica generada en el transductor se enva a un

procesador que la presenta en forma tal que sea cmoda para leer por el analista.
Medidores analgicos Digitales Registrador Computador

Qumica analtica

Lmites de deteccin y de cuantificacin de la IUPAC en los

mtodos espectrofotomtricos.
El lmite de deteccin (LD): Es la concentracin ms baja de un analito
que el proceso analtico detecta en forma confiable. Sin embargo, no es
posible efectuar determinaciones cuantitativas en el lmite de deteccin ya
que la desviacin estndar relativa estar entre 30 a 50 %.
Determinacin del lmite de deteccin (LD):
Corresponde a tres veces la desviacin estndar de la seal
analtica correspondiente al blanco (Sb), obtenida para al menos veinte
determinaciones, dividida por la pendiente de la curva de calibracin (b).
LD = 3Sb / b

(en ingls LOD)

Para el lmite de cuantificacin (LQ ) se sustituye el valor de 3 por 10.

LQ = 10Sb / b (en ingls LOQ)

Qumica analtica

Aplicaciones
Los analitos que no absorben en la regin visible pueden determinarse, hacindolos
reaccionar con cromforos (reactivos especficos), a fin de obtener productos que s absorben.
Analito

Mtodo

(nm)

Aluminio

La reaccin con colorante cianuro de eriocromo R a pH 6 produce un complejo de color rojo a

rosado.

535

Arsnico

Reducido a AsH3 con Zn y hacerlo reaccionar con dietilditiocarbamato para producir un complejo
rojo.

535

Cromo

Oxidar a Cr(VI) y hacer reaccionar con difenilcarbazina en disolucin cida, para obtener un
complejo rojo-violeta.

540

Mercurio

Extraccin con CHCl3 despus de acomplejar con ditizona a pH cido; complejo naranjado.

492

Cinc

Reaccin con zincon a pH 9 para formar un complejo azul.

520

Cloro residual

Oxidacin de leuco cristal violeta para formar un producto de color azulado.

592

Nitrato

Reduccin a NO2- por Cd. Se forma un colorante azo por reaccin con sulfanilamida y N-(1-naftil).
etilendiamina.

543

Fosfato

Reaccin con molibdato amnico seguida de reduccin con cloruro de estao para formar azul de
molibdeno.

690

Fenol

Reaccin con 4-aminoantipirina y K3Fe(CN)6 para formar colorante de antipirina.

460

Surfactantes

Formacin de par inico azul entre el surfactante aninico y el colorante catinico azul de
metileno, que se extrae en CHCl3.

652

Qumica analtica

Espectrofotometras de absorcin y emisin atmicas

Las espectrofotometras atmicas se fundamentan en la absorcin o emisin de
radiacin electromagntica por tomos neutros en estado gaseoso. Tpicamente
las radiaciones involucradas son ultravioleta y visible.

Los electrones ocupan posiciones orbitales en una forma predecible y ordenada.

La configuracin normal para el tomo es conocida como estado fundamental.
Si a un tomo se le aplica energa de una magnitud apropiada, sta ser absorbida
por l, e inducir que el electrn ms externo sea promovido a un orbital vaco de
mayor energa conocido como estado excitado (etapa de excitacin) . Como este
estado es inestable, el tomo inmediatamente y espontneamente retornar a su
configuracin fundamental (etapa de decaimiento).

Los procesos de excitacin y decaimiento, son comunes a los dos

campos de la espectrofotometra atmica.

Qumica analtica
tomos gaseosos
Radiacin

Radiacin

Electromagntica
incidente

(Po)

Electromagntica
transmitida
Estado
fundamental

Estado
excitado

Proceso de absorcin atmica

E. Calorfica
o

(P)
Seal: absorbancia

Radiacin

E. electrca
Estado
fundamental

Estado
excitado

Electromagntica
emitida
Decaimiento

Proceso de emisin atmica

(P)
Seal: intensidad
de emisin

Qumica analtica

Ejemplo: Tpicas transiciones electrnicas del elemento sodio

Configuracin electrnica:

Na: (1S2)(2S2)(2P6)(3S1)

4p

3d
E = 330,0 nm

4S
Energa

3p
E = 589,0 nm

3S

Para el sodio las radiaciones

electromagnticas de 330 nm
y 589 nm sern absorbidas en
un proceso de absorcin
atmica o emitidas en un
proceso de emisin atmica.

Qumica analtica

Transiciones electrnicas para tomos

de litio, sodio, potasio y rubidio

Qumica analtica

Espectro de
lneas atmicas

Espectro de emisin (o de absorcin)

atmico del mercurio

Qumica analtica

Qumica analtica

Qumica analtica

2.4

Qumica analtica

Modalidades ms comunes de espectrofotometras atmicas

Tcnica

Fuente de energa
para atomizar

Cantidad

medida

Esp. de absorcin
atmica con llama

llama
1700-3200 C

radiacin
absorbida

Esp. de absorcin
atmica electrotrmica

horno elctrico
1200-3000 C

radiacin
absorbida

Esp. de emisin
atmica con llama
Esp. de emisin
Atmica con plasma
acoplado inductivamente

llama
1700 3200 C

radiacin
emitida

plasma de argn
6000 8000 C

radiacin
emitida

Qumica analtica

Espectrofotometra de Absorcin Atmica

Si la radiacin de una determinada longitud de onda incide sobre un tomo neutro
en estado fundamental, el tomo puede absorber energa y pasar al estado
excitado, en un proceso conocido como absorcin atmica.
La nube de tomos requerida para las mediciones en absorcin atmica,
es producida mediante el suministro de suficiente energa a la muestra
para convertir los compuestos qumicos en tomos libres.

Mtodos usados para

lograr la atomizacin o
generacin de tomos
neutros gaseosos

a) Utilizando la energa calorfica de una llama

b) Empleando un tubo de grafito calentado

elctricamente (horno de grafito)

Qumica analtica

a) Espectrofotometra de absorcin atmica con llama

En esta modalidad, el calor de una llama proporciona la energa necesaria
para generar tomos neutros gaseosos capaces de absorber radiacin
electromagntica.
Instrumentacin

Espectrofotmetro de absorcin atmica de doble haz

Po

P
(llama)

Qumica analtica

ESPECTROFOTMETRO DE ABSORCIN
ATMICA CON LLAMA

Qumica analtica

Fuente de Radiacin electromagntica

Lmpara de ctodo hueco

Al

Qumica analtica

Procesos que tienen lugar durante la atomizacin con una llama

La muestra es succionada
continuamente

M+ + A--

Iones en solucin

1) Nebulizacin

M+ + A--

2) Desolvatacin

MA(s)

3) Liquefaccin

MA(l)

Sal lquida

4) Vaporizacin

MA(g)

Sal gaseosa

5) Atomizacin

Mo + A o

6) Absorcin de
radiacin
continua

Iones en aerosol
Sal slida

tomos gaseosos

Radiacin
M*

tomos gaseosos excitados

Qumica analtica

Formacin del aerosol

Mechero de flujo laminar y esquema de la estructura de una llama

Qumica analtica

Caractersticas de llamas comunes

Combustible
Acetileno
Acetileno
Acetileno

Oxidante
Aire
xido nitroso
Oxgeno

Temperatura (C)
2.400
2.800
3.150

Hidrgeno

Aire

2.050

Propano

Aire

1.950

b) Espectrofotometra de absorcin atmica electrotrmica

En este caso la atomizacin se logra aplicando una diferencia de potencial
elctrico a travs de un tubo de grafito dentro del cual se ha colocado la muestra.
El horno de grafito sustituye a la llama en el espectrofotmetro y est alineado en
forma tal que la radiacin de la lmpara pasar por el centro del tubo de grafito. El
vapor atmico generado por la muestra cuando el tubo de grafito es calentado
absorber entonces radiacin de la lmpara.

Qumica analtica

Instrumentacin

(a) Seccin transversal

de un horno de grafito
(b) La plataforma Lvov
y su posicin en el horno
de grafito

Espectrofotmetro de
absorcin atmica
con horno de grafito

La muestra es
Inyectada con
una micro jeringa

Qumica analtica

Secuencia de calentamiento
1) Ciclo de secado: ~ 110 C
Ocurre la evaporacin del solvente y
componentes voltiles de la matriz.
2) Ciclo de calcinacin: 200 1.500 C
Volatilizacin de los componentes menos
voltiles y pirolisis de algunas sustancias.
3) Ciclo de atomizacin: 2.000 2.500 C
Generacin de tomos neutros gaseosos
que absorben radiacin.
4) Ciclo de limpieza: 2.700 3.000 C
Desalojo del tubo de grafito de
residuos de analito y muestra.

3000
2500

Temp. (C)
2

1000
500

1
Se obtienen seales
de absorbancia
discontinuas

0
Tiempo (s)

Qumica analtica

Cuantificacin en absorcin atmica

muestra

Abs.

Abs.
solvente

solvente
tiempo
Llama

3 inyecciones
Horno de grafito

En las espectrofotometras de absorcin atmica con llama y

horno de grafito se cumple la

A = abC

Altura de
pico

Absorbancia

Concentracin

Llama

Ley de Beer :

Concentracin

Horno de grafito

Qumica analtica

INTERFERENCIAS EN ABSORCIN ATMICA

Ocurren por la presencia de algn constituyente en la muestra que modifica uno o ms pasos del
proceso en la llama u horno de grafito que no es observado con las soluciones patrn

Tipos de
Interferencias
Matriz*
Qumicas*
Componentes que
reaccionan con analito

Efectos causados

Mtodos de correcciones

Modifica Velocidad de
Aspiracin y la eficiencia de
la nebulizacin

Cuantificar por Adicin estndar*

Igualacin de matriz-Patrn

Los analitos disminuyen el

grado de atomizacin porque
forman compuestos
trmicamente estable

Ionizacin*

Reduce el # de tomos que

pueden absorber

Absorcin de
fondo

Partculas que dispersan y

molculas que absorben la
radiacin

Aadir especie protectora

o liberadora del analito.
Usar llama ms caliente
Extraccin del analito

Aadir elemento fcil de ionizar

para que el analito sea menos
ionizado.
Usar llama ms fra
Medir y restar la absorcin de
fondo. Mtodos: (a) de la banda
ancha (LCD) y (b) Zeeman

Qumica analtica

Correccin de fondo con lmpara de deuterio (LCD)

LCH

LCD

LCH
LCD

Atotal (Aanalito + Afondo)

Afondo

Electrnicamente

Aanalito = Atotal - Afondo

Qumica analtica

Correccin de fondo con efecto Zeeman

Campo magntico
Aplicado

Sin campo magntico

Intensidad de
la radiacin
de la lmpara
de ctodo
hueco

(LCH)

-0,02

0 +0,02

Longitud de onda relativa (nm)

No tiene la polarizacin correcta
electromagntica para que sea
absorbida

LCH sin campo magntico

LCH con campo magntico
Electrnicamente

Atotal (Aanalito + Afondo)

Afondo

Aanalito = Atotal - Afondo

Qumica analtica

Ley de Beer :

A = abC

Absorbancia

Concentracin

Qumica analtica

Mtodo de adicin estndar

1) Colocar igual volumen de muestra, en vasos de precipitados

2) Aadir igual volumen de agua y patrn de concentracin creciente

Muestra+
agua

Muestra+
Patrn 1

Muestra+
Patrn 2

d
Muestra+
Patrn 3

3) Medir las absorbancia de cada una de las soluciones anteriores

4) Aplicar el mtodo de los mnimos cuadrados
5) Determinar la ecuacin de la lnea recta.
6) Determinar la concentracin de la muestra mediante

CM= Corte / Pendiente

Qumica analtica

Vaso

Conc (mg/L)

Absorbancia

AM

Patrn 1

AMP1

Patrn 2

AMP2

Patrn 3

AMP3

C = a/b = 0,14/ 0,0188 = 7,45 ppm

Espectrofotometras de absorcin atmica con llama vs. horno de grafito

Caracterstica
Deteccin
Volumen de muestra
Precisin
Susceptible de interferencias
Costo

Llama
mg/L
> 5 mL
1 2 % DER
menor
moderado

Horno de grafito
g/L
5 100 L
5 10 % DER
mayor
alto

Qumica analtica

Espectrofotometra de emisin atmica

En la emisin atmica, la muestra es sometida a una alta energa, con el objeto de
producir tomos gaseosos en el estado excitado, capaces de emitir radiacin
electromagntica.

El espectro de emisin de un elemento consiste de un grupo de

lneas de emisin ubicadas a las longitudes de onda permitidas. Este
espectro de emisin puede usarse como una caracterstica para la
identificacin cualitativa del elemento.
Ms importante aun es que las tcnicas de emisin atmicas
pueden usarse para cuantificar la concentracin de un elemento en
una muestra. Para esto se mide la intensidad de la radiacin emitida
a la longitud de onda del elemento por determinarse. La intensidad de
la emisin a esta longitud de onda ser cada vez ms alta conforme
se incremente la concentracin del analito en la muestra:
Int. Emisin = k.C

Qumica analtica

Mtodos comunes
utilizados para la
generacin de
tomos gaseosos
excitados.

a) Utilizando la energa calorfica de una llama

b) Utilizando la energa calorfica de un plasma

Atomizacin + excitacin

Espectrofotometra de emisin atmica con llama

En esta modalidad, el calor de una llama proporciona la energa necesaria para
generar tomos gaseosos neutros excitados capaces de emitir radiacin.
La intensidad de la radiacin emitida es proporcional a la concentracin del analito
en la muestra.
En la prctica, el instrumento utilizado es el espectrofotmetro de absorcin
atmica, pero con la lmpara de ctodo hueco apagada, ya que la magnitud a
medir es la intensidad de la radiacin emitida.

Qumica analtica

Espectrofotmetro de emisin atmica

llama

En sta tcnica el calor de la llama sirve para

1) Desolvatacin

MA(s)

2) Liquefaccin

MA(l)

3) Vaporizacin

MA(g)

4) Atomizacin

Mo + Ao

5) Excitacin

M*

Mo + Radiacin Emitida

Qumica analtica

Espectrofotometra de emisin atmica con plasma

Un plasma es una mezcla gaseosa conductora de la electricidad que

contiene una concentracin significativa de cationes y electrones.
En el plasma de argn que se emplea en emisin atmica, los iones argn,
una vez que se han formado en un plasma, son capaces de absorber
suficiente potencia de una fuente externa, como para mantener un nivel
de temperatura en el que la ionizacin adicional sustenta el plasma
indefinidamente.

La fuente de potencia ms utilizada es un campo de

radiofrecuencias, generando un plasma conocido
como Plasma Acoplado Inductivamente (ICP). La
temperatura puede llegar a 8.000 C.

Qumica analtica

En espectrofotometra de emisin atmica con plasma de argn, la

introduccin de la muestra al plasma se realiza con un nebulizador que trabaja
con flujo de argn.

Tpica fuente de plasma

acoplado inductivamente

Sistema para la introduccin de la

muestra en una fuente de plasma

Qumica analtica

Fuente de plasma

Qumica analtica

Instrumentos
Los ms econmicos son los secuenciales, que miden las intensidades de lnea
una por una, parando el tiempo suficiente (unos pocos segundos) para obtener
una respuesta satisfactoria. Por otra parte los instrumentos multicanal se disean
para medir simultneamente las intensidades de las lneas de emisin de un gran
nmero de elementos ( a veces tantos como 50 o 60).

Espectrofotmetro secuencial para emisin ICP

Qumica analtica

Intensidades de emisin simultnea para 7

elementos obtenida con ICP ptico

Qumica analtica

Las fuentes de plasma presentan las siguientes ventajas con

respecto a la emisin atmica con llama:
1) Sufren de menores efectos de interferencias entre elementos, que es
consecuencia de sus temperaturas ms elevadas.

2) Se pueden obtener buenos espectros de emisin para la mayora de los

elementos con las mismas condiciones de excitacin, en consecuencia es
posible cuantificar simultneamente docenas de elementos.

3) Permiten la determinacin de bajas concentraciones de elementos que

tienden a formar compuestos refractarios.

4) Permiten adems de la determinacin de metales, tambin de no metales

tales como: cloro, bromo, yodo y azufre.

Qumica analtica

Cuantificacin en espectrofotometras de emisin atmica

La cuantificacin se realiza mediante el uso de curvas de calibracin. Sin
embargo en este caso no se cumple la ley de Beer, ya que la seal analtica
medida es la intensidad de emisin de los tomos del analito.

Intensidad Emisin = k.C

Mtodo de patrones externos

Mtodo del patrn interno

El mtodo del patrn interno produce mejores resultados en la mayoria de los

casos, ya que corrige los efectos de las matrices de las muestras y variabilidades
en las nebulizaciones y atomizaciones.

Qumica analtica

Aplicaciones de las espectrofotometras atmicas

En varios tipos de muestras tales como:
Cuantificacin de:
Geolgicas, biolgicas, metalrgicas, vtreas, cementos,
Elementos metlicos, productos petroleros, suelos, sedimentos, aguas naturales
semi-metlicos y
y residuales, frmacos, atmosfricas, alimentos, etc.
no metlicos

Tratamiento de la muestra
Muestras lquidas

Presentan pocos problemas de pretratamiento,

a veces slo dilucin.

Muestras slidas

Estas muestras deben ser primero disueltas

antes de la medicin analtica.

Muestras gaseosas

Se extraen los analitos por burbujeo del

gas en una solucin o absorbiendo los
analitos en un slido, seguido de su
lixiviacin apropiada.