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BACTERIOLOGA
CARACTERSTICAS GENERALES Y CLASIFICACIN DE LAS BACTERIAS
Definicin de bacterias:
Las bacterias son diminutos organismos microscpicos,
vegetales y unicelulares que difieren de las plantas superiores por su carencia de clorofila y
que se reproducen por fisin binaria. Se encuentran en gran profusin en el suelo, el aire, el
agua y la leche, en la superficie de las frutas y los vegetales y en diversas partes del
cuerpo, tales como el conducto alimenticio, la piel, etc.
Se ha clasificado a las bacterias de la siguiente manera:
1. Autotrficas que viven sobre materia inorgnica
2. Heterotrficas que viven sobre la materia orgnica
(a) Parsitas, aquellas que requieren materia orgnica viva para su desarrollo.
Entre estas quedan incluidas las patgenas, las cuales tienen una accin
daina sobre el animal o vegetal (husped) en el que viven.
(b) Saprofitas, las que viven sobre materia orgnica muerta.
Agrupamiento morfolgico general de las bacterias: Por su forma las bacterias se
clasifican en tres grupos principales:
a) bacilos u organismos en forma de bastn
b) cocos, en forma redonda o esfrica
c) espirilos, organismos en forma de coma o espiral mviles.
Bacterias gram-positivas esporulantes anaerobias estrictas
Gnero Clostridium.
Bacterias anaerobias estrictas, pueden ser patgenas por:
Produccin de toxinas (C. tetanii, C. botulinum)
Destruccin de tejidos (C. perfringens)
Son los agentes causantes de la putrefaccin de la carne (descomposicin anaerobia de
las protenas).
Importancia de las bacterias del gnero Clostridium en la tecnologa de alimentos.
Agentes responsables de intoxicaciones alimentarias agudas
C. botulinum: intoxicacin por neurotoxina termosensible
C. perfringens: intoxicacin por toxina acumulada debido a tratamiento defectuoso de
alimentos.
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Agar nutritivo
Estracto de carne
Peptona de gelatina
PREPARACIN:
1.- Colocar en un matraz de 50 ml un poco de agua destilada.
2.- Se pesa 1.2 gr. de medio de cultivo y se agrega al matraz.
3.- Calentar ligeramente, agregar agua destilada lo suficiente como para completar 50 ml.
4.- Colocar tapn de algodn y esterilizar.
5.-
Se cubre el frotis con safranina durante medio minuto. Eliminar y enjuagar con agua
corriente, y secar a condiciones del laboratorio.
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2.1 COPROCULTIVO:
INTRODUCCIN: Las enterobacterias representan la mayor parte de la flora microbiana del
tracto intestinal del hombre. En ella se incluyen grmenes comensales (proteus y bacilos
coliformes) as como patgenos del gnero salmonella y shigella. Pueden estar tambin
estreptococos intestinales (enterococos), clostridia levaduras (incluso cndida albicans), y
ocasionalmente estaphilococos patgenos. El vibrin colrico puede ser aislado en casos
de clera; ocasionalmente es necesario tratar de aislar mycobacterium tuberculosis en
materia fecal.
Colonias de color azul negro con brillo metlico en EMB, y agar sangre son
caractersticas de escherichia coli, y si la materia fecal es de un nio con diarrea, se
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POR LAS
En medio de Kliger:
Fondo amarillo: fermenta la glucosa
Superficie amarilla: fermenta la lactosa
Formacin de burbujas en el medio y elevacin del mismo: produce gas
Urea Sacarosa (Surraco) En este medio se puede observar la fermentacin de la
sacarosa ( color amarillo) y la hidrlisis de la urea ( color morado)
E.coli
Citrobacter
freundii)
Enterobacter
aerobacter
Paracolobactrum
BIOQUMICAS DE ENTEROBACTERIAS
movilid Glu lact. Sac Manit Indol H2S
ad
c.
.
ol
+o+
+
+o
+
+(-)
(E
+
+
+
+o
+
+
+o+
+o+
+
V
+o-
-o+
Proteus mirabilis
proteus vulgaris
proteus morgonii
+
+
+(-)
+
+
+
proteus retigeri
Pseudomonas
aeroginosa
Alcaligenes
Vibrio
Klebsiela
V = Variable
+(-)
+
+
+
+
-
+
+
Salmonela
S. dysenteriae
S flexneri
S boydii
S sonnai
A
B
C
D
+o
-o
+
Urea
sac.
-
Gas
-o+
+-
-o+
+o-
++
+
+
V
V
V
-
+
-
+
V
+
+
-
+
+
+
+
+
+
+
-(+
)
+
-
+
-
+
-
+
+-
- +
-
+o+
+
+
+
+
++
-
+-
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Tcnica:
Este material se recoge con torundas, aunque en los casos sospechosos de tos ferina,
se prefiere una asa de platino larga y curva para alcanzar la nasofaringe.
Una desventaja del empleo de la tcnica en la recoleccin de las muestras, es que las
superficies no son muy hmedas y la torunda se seca muy rpidamente. Para resolver
este problema se sugiere conservar la torunda en un tubo que contenga
aproximadamente 0.5 ml de caldo de soya tripticasa conservndose juntos en el tubo de
transporte.
Para el uso se aplica sobre la zona problema la torunda humedecida en el caldo, luego
se regresa el tubo. Al llegar al laboratorio se exprime la torunda contra las paredes del
tubo para que el material que contiene caiga en el caldo.
2.2.1 MEDIOS DE CULTIVO:
Los medios de cultivos mas empleados son: gelosa sangre, infusin cerebro corazn,
agar, gelosa chocolate y Staph 110
Se preparan cultivos de agar sangre que se incuban a 37 en CO2 al 10%.
En caso de difteria se preparan cultivos en tubo inclinado de Loeffler y en medio de
telurita.
2.2.2 IDENTIFICACIN DE CEPAS PATOLGICAS
Estaphilococos crecen con facilidad en la mayora de los medios de cultivo ordinarios,
dando colonias redondas lisas elevadas y brillantes, aureus color amarillo, citreus verde
limn y albus de color blanco.
las colonias virulentas de estreptococos tienen aspecto mate.
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2.2.3 ANTIBIOGRAMA
Si en el medio de cultivo hay desarrollo bacteriano, elaborar un frotis con el mtodo de
tincin de gram, anotar las caractersticas morfolgicas de la bacteria mas las
caractersticas de la colonia determinada. desarrollar un antibiograma gram positivo o
gram negativo de acuerdo a los resultados del frotis (bacterias gram positivas = frotis
teidos de azul o violetas bacterias gram negativas = frotis teido de rosa o rojiso)
Nombre del paciente:______________________________________________
Resultado:_______________________________Revisado:________________
Nombre del alumno:________________________________fecha:___________
2.3
REACCIONES FEBRILES
FUNDAMENTO:
La demostracin de anticuerpos en el suero contra las especies de salmonella, brucella,
y enfermedades por ricketsias se conocen como reacciones febriles. stas son de
mucho valor en el diagnstico de enfermedades tales como: fiebre tifoidea, paratifoidea,
brucelosis e infecciones por proteus.
La demostracin de estas reacciones serolgicas se hacen fundamentadas por la
reaccin antgeno - anticuerpo.
MTODO: Reaccin de Widal, Reaccin de Weil Felix y reaccin de hudlesson.
1.- REACCIN DE WIDAL.- Incluye reacciones con:
a) Antgeno tifico O
b) Antgeno tifico H
c) Antgeno paratifico A
d) Antgeno paratifico B
2.- Reaccin de Weil Felix
a) Antgeno proteus OX 19
3.- Reaccin de hudlesson
a) Antgeno Brucella Abortus
MATERIAL:
*placa Macini *aplicadores de madera *pipeta *microscopio
MATERIAL BIOLGICO
Suero
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ANLISIS CUANTITATIVO
UROCULTIVO
FUNDAMENTO:
La orina de pacientes con pielonefritis tiene mayor nmero de leucocitos que el normal,
y el nmero de bacterias viables de la porcin media de la miccin excede de 10,000 en
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y
con
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Cocobacilos:
forma
usual
de
Acinetobacter sp, que puede ser
Gram-positivo o Gram-negativo, y, a
menudo, Gram-variable.
Tincin GRAM: Bacterias GramPositivas
Cocos Gram-positivos
Racimos:
forma
tpica
de
Staphylococcus sp, como S. aureus
Bacilos Gram-negativos
Bacilos
finos:
forma
usual
enterobacteriaceae, como E. Coli
de
Cadenas:
forma
tpica
de
Streptococcus
sp,
como
S.
pneumoniae, Streptococcus grupo B
Cocobacilos:
forma
usual
de
Haemophilus sp, como H. influenzae
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Bacilos Gram-positivos
Gruesos: forma tpica de Clostridium
sp, como C. perfringens, C. septicum
Ramificados:
forma
tpica
de
Actinomycetes y Nocardia, como A.
israelii
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