Medicina Quimica Sanguinea

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA
RED NACIONAL UNIVERSITARIA
UNIDAD ACADMICA DE SANTA CRUZ
BIOQUMICA Y FARMACIA
CUARTO SEMESTRE
SYLLABUS DE LA ASIGNATURA DE
QUMICA SANGUNEA
Elaborado por:
Dra. Eliana Cedeo Soria
Dra. Martha Aramallo
Gestin Acadmica I/2013
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UDABOL
UNIVERSIDAD DE AQUINO BOLIVIA
Acreditada como PLENA mediante R.M. 288/01
VISIN DE LA UNIVERSIDAD
Ser la universidad lder en calidad educativa.
MISIN DE LA UNIVERSIDAD
Desarrollar la educacin superior universitaria con calidad y
competitividad al servicio de la sociedad
Estimado(a) estudiante:
El Syllabus que ponemos en tus manos es el fruto del trabajo intelectual de tus
docentes, quienes han puesto sus mejores empeos en la planificacin de los procesos
de enseanza para brindarte una educacin de la ms alta calidad. Este documento te
servir de gua para que organices mejor tus procesos de aprendizaje y los hagas
mucho ms productivos.
Esperamos que sepas apreciarlo y cuidarlo.
Aprobado por:
Fecha: Marzo de 2013
SELLO Y FIRMA
JEFATURA DE CARRERA
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SYLLABUS
Asignatura:
Cdigo:
Requisito:
Carga Horaria:
Horas tericas
Horas Prcticas
Crditos:
QUMICA SANGUNEA
BCL 422
BTG 333
80 horas
40 horas
40 horas
8
I. OBJETIVOS GENERALES DE LA ASIGNATURA.
Describir los conceptos e instrumentos necesarios para la comprensin e interpretacin

de los resultados obtenido en un anlisis de laboratorio.
Determinar la planificacin de trabajos en Farmacia y Bioqumica con la aplicacin de
radioistopos.
Diferenciar los efectos de las diferentes radiaciones sobre la materia, para comprender
sus aplicaciones, riesgos, medicin y blindaje.
Determinar el valor diagnstico de los metabolitos estudiados en el rea de qumica
sangunea.
II. PROGRAMA ANALTICO DE LA ASIGNATURA

UNIDAD I
CONTROL DE CALIDAD
TEMA 1
NORMAS ISO
1.1. Norma ISO 9000
1.2. Norma ISO 9001
1.3. Norma ISO 15189
TEMA 2
CONTROL DE CALIDAD EN QUMICA SANGUNEA

2.1. Definicin
2.2. Control de calidad interno
2.3. Grfica de Levey-Jenning
2.4. Exactitud
2.5. Precisin
2.6. Tipos de control de calidad
2.7. Sistemas de gestin de calidad
UNIDAD II METABOLISMO
TEMA 3
METABOLISMO DIGESTIVO
3.1 Introduccin
3.2 Fuentes nutrientes
3.3 Enzimas digestivas
3.4 Degradacin
3.5 Absorcin
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TEMA 4
METABOLISMO DE LOS CARBOHIDRATOS

4.1 Definicin
4.2 Gluclisis
4.3 Gluconeognesis
4.4 Glucogenlisis
4.5 Glucognesis
4.6 Va de las pentosas
4.7 Va de los cidos urnicos
4.8 Regulacin de la glucosa
TEMA 5
METABOLISMO DE LAS PROTENAS

5.1 Introduccin
5.2 Mecanismo de degradacin de los aminocidos
5.3 Transaminacin
5.4 Deaminacin oxidativa
5.5 Transporte de amoniaco
5.6 Ciclo de la urea
TEMA 6
METABOLISMO DE LOS LPIDOS

6.1 Conceptos
6.2 Fuente de lpidos
6.3 Beta oxidacin
UNIDAD III
PERFILES CLNICOS
TEMA 7
PERFIL METABLICO
7.1.
GLUCOSA
7.1.1 Generalidades
7.1.2 Factores que influyen en la concentracin de glucosa
7.1.3 Absorcin
7.1.4 Umbral renal
7.1.5 Diabetes
7.1.6 Insulina
7.1.7 Determinacin de la glucosa
7.1.8 Condiciones del paciente
7.1.9 Metodologa
7.1.10 Hemoglobina glicosilada
7.2.
ACIDO RICO
7.2.1 Definicin
7.2.2 La gota
7.2.3 Metodologa
7.2.4 Muestra
7.2.5 Valores de referencia
7.3.
PROTENAS PLASMTICAS
7.3.1 introduccin
7.3.2 Propiedades de las protenas
7.3.3 Rol fisiolgico de las protenas
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7.3.4
7.3.5
7.3.6
7.3.7
7.3.8
TEMA 8
Dosificacin de las protenas

Tipo de muestras
Metodologa
Valores de referencia
Significacin clnica
PERFIL RENAL
8.1
UREA
8.1.1
8.1.2.
8.1.3
8.1.4
8.1.5
8.1.6
8.1.7
8.1.8
8.1.9
Definicin
Factores que influyen en la concentracin de urea
Azoemia Pre-renal
Azoemia renal
Azoemia Post-renal
Metodologa
Muestra
Interpretacin clnica
8.2
CREATININA
8.2.1 Definicin
8.2.2 Metabolismo
8.2.3 Tipo de muestra
8.2.4 Metodologa
8.2.6 Significacin clnica
8.3
PROTEINURIA
TEMA 9
PERFIL LIPDICO
9.1
LPIDOS
9.1.1
Generalidades
9.1.2 cidos grasos libres
9.1.3 Triglicridos
9.1.4 Colesterol y fracciones
9.1.5 Metabolismo
9.1.6 Metodologa
TEMA 10
PERFIL PANCRETICO
10.1
AMILASA
10.1.1.Generalidades
10.1.2 Nombre qumico
10.1.3 Metodologa
10.1.4 Fundamentos
10.1.6 Interpretacin clnica
10.2
LIPASA
10.2.1 Generalidades
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10.2.2
10.2.3
10.2.4
10.2.5
TEMA 11
Nombre qumico
Estabilidad
Metodologa
PERFIL HEPTICO
11.1 BILIRRUBINAS
11.1.1 Introduccin
11.1.2 Metabolismo
11.1.3 Conjugacin de la bilirrubina
11.1.4 Propiedades
11.1.4 Interpretacin clnica.
11.1.6 Metodologa
11.1.8 Significacin clnica
11.2 FOSFATASA ALCALINA
11.2.2 Estabilidad
11.2.3 Metodologa
11.3 TRANSAMINASAS
11.3.2 Origen
11.3.3 Muestra
11.3.4 Metodologa
TEMA 12
PERFIL CARDIACO
12.1
CREATIN FOSFOKINASA
12.1.2 Origen
12.1.3 Muestra
12.1.4 Metodologa
12.2 CK-MB
12.2.2 Origen
12.2.3 Muestra
12.2.4 Metodologa
12.3 LACTATO DESHIDROGENASA
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12.3.1
12.3.2
12.3.3
12.3.4
12.3.5
12.3.6
UNIDAD IV
Generalidades
Origen
Muestra
Metodologa
Interpretacin clnica
PRUEBAS ESPECIALES
TEMA 13
ELEMENTOS ESENCIALES
13.1 Calcio
13.2 Fsforo
13.3 Hierro
13.4 Magnesio
TEMA 14
HORMONAS
14.1 Definicin
14.2 Funcin
14.3 Clasificacin
14.4 Importancia clnica
14.5 Cuantificacin
TEMA 15
ELECTROLITOS
15.1 Definicin
15.2 Significancia clnica
15.3 Cuantificacin
15.4 Valor diagnostico
TEMA 16
GASES EN SANGRE
16.1 Definicin
16.2 Importancia clnica
16.3 Acidosis metablica
16.4 Alcalosis
16.5 Medicin en laboratorio
UNIDAD V
RADIOINMUNOSEROLOGIA
TEMA 17
ASPECTOS GENERALES DEL RADIOINMUNOENSAYO

17.1.
17.2.
17.3.
17.4.
17.5.
17.6.
TEMA 18
Concepto de radioactividad, estudio de las radiaciones.

Descripcin de equipos de medicin y su manejo de acuerdo al tipo
de radiaciones utilizado en biologa.
Aplicacin de estadsticas de medicin.
Estudio del efecto biolgico de las radiaciones.
Radiosensibilidad.
Exposicin, dosis absorvida, unidades y dosis mxima permisibles.
Proteccin en el trabajo. Normas.
MEDICIN Y APLICACIN DEL RADIOINMUNOENSAYO

18.1.
18.2.
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Aplicacin. Instalacin del laboratorio de radioistopos.

Uso de radionucleidos como agente de diagnstico y terapia.
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18.3.
18.4.
18.5.
18.6.
18.7.
18.8.
18.9.
Pureza. Controles.
Tcnicas aplicadas en diagnstico. Compuestos marcados, su
aplicacin.
Preparacin de compuestos marcado con yodo 31.
Condiciones del radioistopo y forma qumica a utilizar.
Control analtico de radio frmacos.
Pruebas dinmicas.
Radio inmunoanlisis. Ventajas. Usos industriales de las
radiaciones.
III. ACTIVIDADES PROPUESTAS PARA LAS BRIGADAS UDABOL

Resumen de los resultados del diagnstico realizado para la deteccin de los
problemas a resolver en la comunidad.
En Santa Cruz se ha observado, con mucha preocupacin, que da a da va aumentando la
poblacin con problemas de diabetes tipo 1.
Los factores ms importantes para esta alta prevalencia es el exceso de mucha comida rica en
carbohidratos y grasas, consumo excesivo de bebidas alcohlicas, y la vida sedentaria que
poseen la mayora de los afectados. Es importante tomar en cuenta que la diabetes tipo 1 es una
enfermedad grave que aqueja a personas de todas las edades, y sus efectos sobre la salud
deterioran la calidad de vida del individuo.
Actualmente la diabetes tipo 1 no afecta slo a personas adultas, pueden verse afectadas
personas jvenes e incluso nios debida, principalmente a sus malos hbitos de alimentacin y
estilos de vida.
Nombre del proyecto al que tributa la asignatura.
Prevalencia de Diabetes tipo 1 en comerciantes del mercado 4 de Noviembre del 3 anillo de la
ciudad de Santa Cruz de la Sierra primer semestre 2013
i.
Contribucin de la asignatura al proyecto.
Se determinar prevalencia de diabetes tipo 1 en comerciantes voluntarios del mercado 4 de
Noviembre del 3 anillo, mediante la determinacin de glicemia basal por mtodo enzimtico
oxidasas/peroxidasa, la participacin activa de los alumnos no solo ser en la realizacin
metodolgica, sino tambin esta avocado a realizar conferencias de orientacin sobre formas de
prevencin en la poblacin en general.
ii.
Actividades a realizar durante el semestre para la implementacin del

proyecto.
Trabajo a realizar por los
Localidad, aula o
Incidencia social
Fecha.
estudiantes
laboratorio
Organizacin de actividades del
Aula
Motivacin de los
8 al 13 de
proyecto y recopilacin
estudiantes y ampliacin de abril
bibliogrfica.
conocimiento
Elaboracin de material didctico Aula
Capacitacin de los actores 15 al 19 de
audiovisual para los talleres.
involucrados.
abril
Toma de muestras y anlisis de Mercado 4 de Alumnos con previa
22 al 27 de
laboratorio
Noviembre
y capacitacin realizarn una abril
Laboratorio
adecuada toma de muestra
UDABOL
para que no interfiera de
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Entrega y Orientacin sobre

resultados de laboratorio a las
personas con hipercolesterolemia
Lugares
asignados
previamente por la
junta vecinal
manera negativa en la
determinacin de colesterol
Actores involucrados en el
proceso orientacin sobre
resultados positivos a los
exmenes de laboratorio
1 al 4 de
mayo
IV. EVALUACIN DE LA ASIGNATURA.
PROCESUAL O FORMATIVA.
A lo largo del semestre se realizarn 2 tipos de actividades formativas:
Las primeras sern de aula, que consistirn en clases tericas, exposiciones, repasos cortos,
trabajos grupales. Las Brigadas Solidarias UDABOL, tendrn puntaje de evaluacin final en la
parte prctica de laboratorio antes, durante y despus del examen de laboratorio a travs del
mtodo enzimtico, en pacientes voluntarios del Mercado Abasto de nuestra ciudad.
Las segundas sern actividades de aula abierta. Las Brigadas Solidarias UDABOL tendrn
puntuacin procesual en la parte terica, referente a su preparacin y desempeo durante el
proceso de elaboracin y disertacin de la conferencia de orientacin sobre los riesgos que
conlleva la Obesidad.
El trabajo, la participacin y el seguimiento realizado a estos dos tipos de actividades se tomarn
como evaluacin procesual calificndola entre 0 y 50 puntos independientemente de la cantidad
de actividades realizadas por cada alumno.
Las actividades evaluativas, que comprenden la evaluacin procesual y de resultados se
realizara como sigue:
ACTIVIDAD
EVALUATIVA
Preguntas orales
Presentacin y
defensa escrita de
work paper
Presentacin y
defensa de los GIP
Examen final de
Laboratorio
PARMETROS
PONDERACIN
Conocimiento del tema.

Originalidad
TOTAL
Conocimiento del tema.
Originalidad
TOTAL
Presentacin y asistencia
Bioseguridad
Exactitud de los conocimientos
Destreza en la prctica
TOTAL
Defensa
Bioseguridad
Exactitud de los conocimientos
Destreza en la prctica
TOTAL
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25 puntos
25 puntos
50 puntos
25 puntos
25 puntos
50 puntos
10 Puntos
10 Puntos
10 Puntos
20 Puntos
50 Puntos
10 Puntos
10 Puntos
10 Puntos
20 Puntos
50 Puntos
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FECHA
Todas las clases de
forma aleatoria
Una semana antes de
cada parcial.
Una semana antes de
cada parcial.
Dos semanas antes

del examen final cada
grupo de prctica se
divide en dos grupos
que sern evaluados
uno por semana
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El trabajo, la participacin y el seguimiento realizado a estas actividades se tomarn como

evaluacin procesual calificando cada una entre 0 y 50 puntos y promediando el total.
La nota procesual o formativa equivale al 50% de la nota de la asignatura.
DE RESULTADOS DE LOS PROCESOS DE APRENDIZAJE O SUMATIVA (examen

parcial o final)
Se realizarn 2 evaluaciones parciales con contenido terico y prctico sobre 50 puntos cada
una. El examen final consistir en un examen escrito con un valor del 90% de la nota y la
presentacin de los informes y documentos del proyecto con el restante 10%.
V. BIBLIOGRAFA
BIBLIOGRAFA BSICA
- ngel, M. ngel, M. Interpretacin Clnica del Laboratorio. Quinta edicin. Editorial
Panamericana. Argentina. 2000. Signatura topogrfica COD 616.075 8 M47 c.2
- Balcells Alfonso La clnica y el laboratorio 2001. Signatura topogrfica COD 616.075 8 B18
c.4
BIBLIOGRAFA COMPLEMENTARIA
- Ergueta Collao, J. Tcnicas de Laboratorio Clnico. Tercera edicin. Editorial Urquizo. La Paz
Bolivia. 1986.
- Lynch, M. Mtodos de Laboratorio. Segunda edicin. Editorial Interamericana. Mxico. 1988.
- Todd-Sanford-Davidsohn. Diagnstico y Tratamiento clnico por el laboratorio. 10 Edicin
Editorial Salvat. Espaa. 1995.
- WIENER. Tcnicas de Laboratorio. Buenos Aires Argentina
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VI. PLAN CALENDARIO.

SEM.
DEL
1ra.
11 de marzo
2da.
3ra.
4ta.
18 de
marzo
25 de
marzo
1 de abril
AL
ACTIVIDADES ACADMICAS
16 de
marzo
23 de
marzo
30 de
marzo
Avance de materia
Tema 1 y 2
Avance de materia
Tema 3 y 4
Avance de materia
Tema 5
6 de abril
Avance de materia
Tema 6
5ta.
8 de abril
13 de abril
Avance de materia
Tema 7
6ta.
15 de abril
20 de abril
Avance de materia
Tema 8
7ma.
22 de abril
27 de abril
Avance de materia
Tema 9
8va.
29 de abril
4 de mayo
Avance de materia 1 EVALUACIN
9na.
6 de mayo
11 de mayo Avance de materia
OBSERVACIONES
Primera Evaluacin
Primera Evaluacin
Tema 10
10ma 13 de mayo 18 de mayo Avance de materia
Tema 11
Actividades Brigada
11ra. 20 de mayo 25 de mayo Avance de materia
Tema 12
Actividades Brigada
12da. 27 de mayo
1 de junio
Avance de materia
Tema 13
Segunda Evaluacin
13ra.
3 de junio
8de junio
Avance de materia 2 EVALUACIN Segunda Evaluacin
14ta.
10 de junio
15 de junio
15ta.
17 de junio
16ma 24 de junio
22 de junio
Avance de materia
Tema 14
Avance de materia
Tema 15
29 de junio
Avance de materia
ACTIVIDADES
EVALUATIVAS
Preguntas
orales
Preguntas
orales
Preguntas
orales
Preguntas
orales
Preguntas
orales
Defensa de Gip
y WP
Preguntas
orales
Preguntas
orales
Defensa de Gip
y WP
Preguntas
orales
Preguntas
orales
Preguntas
orales
Examen Final
de Laboratorio
Tema 16
Tema 17 y 18
17va.
1 de julio
6 de julio
Avance de materia
18ma
8 de julio
13 de julio
Avance de materia
19va
15 de julio
20 de julio
EVALUACIN FINAL
Presentacin
de notas
20va
22 de julio
27 de julio
EVALUACIN DE SEGUNDA INSTANCIA
Informe final
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Seminario
Defensa de
Trabajo final
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Examen Final
de Laboratorio
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PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD

WORK PAPER # 1
UNIDAD III: Tema 7
TITULO: Diabetes Mellitus
FECHA DE ENTREGA: 6 semana
PERIODO DE EVALUACIN 6 semana
El trmino Diabetes mellitus engloba un conjunto de enfermedades metablicas caracterizadas
por la presencia de niveles elevados de glucosa en sangre, tambin llamada hiperglicemia, que
puede estar producida por una deficiente secrecin de insulina, una resistencia a la accin de la
misma, o una mezcla de ambas. Un porcentaje muy alto de la poblacin mundial tiene diabetes
mellitus y no ha sido diagnosticada. Esta es una de las principales causas de la elevada
prevalencia de complicaciones crnicas de la diabetes, como retinopata neuropata y
neuropata.
La diabetes mellitus insulinodependiente o tipo I, est considerada como una entidad de origen
autoinmune, caracterizada por la destruccin progresiva de las clulas beta del pncreas. Ello
conduce a una creciente reduccin en la sntesis de insulina y mayor susceptibilidad a la
cetoacidosis. En contraste, la diabetes mellitus no insulinodependiente o tipo 2 (ms frecuente
en la poblacin adulta), es el resultado de mecanismos fisiopatolgicos diferentes.
El rasgo ms caracterstico es la resistencia a la accin de la insulina en los tejidos perifricos,
como resultado de trastornos del receptor o a nivel pre y postreceptor. Es por ello que en las
fases iniciales de la enfermedad, la hiperglicemia persistente induce la produccin de grandes
cantidades de insulina, pero dicho proceso paulatinamente va deteriorando la actividad funcional
de las clulas pancreticas, hasta que dejan de sintetizar insulina.
CRITERIOS DE DIAGNOSTICO
Existen tres criterios distintos para el diagnstico de diabetes:
1.- La presencia de sntomas clsicos
2.- Glicemia en ayunas superior a 126 mg/ml.
3.- La presencia de niveles de glucosa por encima de 200 mg/ml en un anlisis de dos horas
posterior a una sobrecarga de glucosa de 75 gramos.
CASO CLINICO
Paciente varn de 50 aos con los siguientes sntomas: polidipsia, polifagia, falla en la visin y
adems prdida de peso, acude al laboratorio con una orden mdica solicitando: glicemia, urea,
creatinina, hemoglobina glicosilada, insulina, examen de orina. Los resultados fueron:
Glicemia: 310 mg/ml
Urea : 65 mg/ml
Creatinina: 2.0 mg/ml
Insulina: 30 uUI/ml
Hemoglobina glicosilada: 11.5 %
En el examen qumico de orina reporta glicosuria, cetonuria, proteinuria, hematuria.
CONCLUCION
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Por los resultados obtenidos se trata de un paciente diabtico mal controlado y con compromiso
de la funcin renal.
CUESTIONARIO
1.- Definir diabetes
2.- Cules son los sntomas clsicos de la diabetes?
3.- Cuantos tipos de diabetes existen? Describa cada uno de ellos
4.- El caso clnico del Wok paper N 1 a que tipo de diabetes corresponde? Justifique su
respuesta.
5.- Qu es umbral renal y cul es su valor?
6.- Cundo y por qu aparece las cetonurias?
7.- Cules son los valores de referencia de hemoglobina glicosilada? Para qu sirve esta
prueba?
8.- Qu prueba indica el control de tratamiento del diabtico?
9.- Qu es el test de O SULLIVAN?
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WORK PAPER # 2
UNIDAD III: Tema 8
TITULO: Insuficiencia Renal Aguda
PERIODO DE EVALUACIN: 6 semana
La insuficiencia renal aguda es un sndrome que habitualmente cursa con aumento de los
niveles plasmticos de urea y creatinina, pues la filtracin glomerular juega un rol central en la
excrecin de estas sustancias. Sin embargo, existen situaciones clnicas en las cuales la
insuficiencia renal aguda puede cursar con niveles elevados de creatininemia pero sin mostrar
incremento en los de urea. Dicho patrn de insuficiencia renal puede observarse en pacientes
que poseen una dieta pobre en protenas, una insuficiencia heptica y / o una diabetes inspida.
En el siguiente reporte presentamos el caso de un paciente mono-reno que desarroll una
insuficiencia renal aguda con uremia normal secundaria a un cuadro de pelo nefritis aguda.
CASO CLNICO
Paciente de sexo masculino, 62 aos de edad, portador de Diabetes mellitus (tipo II) en
tratamiento con glimepirida 4mg/da. Litiasis renal (en el pasado). Nefrectoma derecha
practicada 10 aos atrs debido a una uropionefrosis. Hipercolesterolemia tratada con
sinvastatina 10 mg/da y ezetimibe 10 mg/da. El paciente fue internado en nuestro hospital a
raz de presentar un cuadro de dolor lumbar izquierdo, disuria y fiebre de dos das de evolucin.
Se le efectuaron anlisis de sangre y orina, hallndose como nicos datos positivos: abundantes
piocitos y leucocitos en el sedimento urinario, un aclaramiento de creatinina bajo (35 ml/minuto),
una uremia normal (29 mg/dl) y una creatininemia (2,1 mg/dl), y excrecin fraccional de urea
elevadas (80 %). El paciente que estaba normo-natrmico y ligeramente hiperglucmico: 130
mg/dl, cursaba una insuficiencia renal con poliuria acuosa: volumen urinario 3000 cc y
osmolalidad urinaria 176 mOsm/l. El paciente no estaba medicado con drogas nefrotxicas ni
tena evidencia clnica ni bioqumica de rabdomilisis. No estaba cursando enfermedades
potencialmente reducidoras de los niveles sricos de urea, tales como la malnutricin, la
hepatopata o el sndrome de Fanconi. El caso fue interpretado como una insuficiencia renal
aguda en un paciente con rin nico inducido por una pelo nefritis aguda. Una vez efectuados
uro y hemocultivos, comenz a ser tratado con ceftriaxona endovenosa (2 gramos/da). Luego el
urocultivo desarroll una Escherichia Coli sensible al esquema antibitico iniciado.
ANLISIS DE CASO CLNICO
La urea es el principal producto final del catabolismo proteico en los mamferos. Su sntesis se
realiza en el hgado y su excrecin es llevada a cabo principalmente por los riones.
Bajo condiciones basales, esta sustancia es filtrada un 100% a nivel glomerular, aunque su
excrecin urinaria final es del 50%. Esta diferencia entre la cantidad de urea filtrada y aquella
excretada se debe a su reabsorcin a nivel de los tbulos proximales y en los sectores ms
distales de los tmulos colectores, prximos al extremo de los sectores papilares. Adems, dado
que la urea tambin se secreta en el segmento S3 de los tbulos proximales, termina sufriendo
un proceso de recirculado intra-renal que contribuye a la reduccin de su excrecin. La
insuficiencia renal usualmente cursa con un incremento en los niveles sricos de urea y
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creatinina, pues en ambas sustancias la filtracin glomerular juega un rol central en su excrecin.
Sin embargo, hay situaciones clnicas en las cuales una insuficiencia renal aguda puede cursar
con elevados niveles de creatininemia pero con niveles normales de uremia. Este fenmeno
puede ser explicado principalmente por dos mecanismos fisiopatolgicos:
una baja produccin de urea, como sucede en la desnutricin, insuficiencia heptica, etc
un aumento en la excrecin urinaria de urea (pese a la existencia de cada del filtrado
glomerular), como ocurre durante disfuncin tubular renal proximal (sndrome de Fanconi),
diuresis osmtica (glucosuria, etc), diuresis acuosa (diabetes inspida), secrecin tubular
de urea (sndrome de secrecin inapropiada de hormona antidiurtica), etc.
En cuanto a la pelo nefritis aguda, esta infeccin puede inducir diabetes inspida nefrognica a
raz de generar una inflamacin del intersticio renal, con la consiguiente alteracin de la tonicidad
medular. Por otra parte, la pelo nefritis aguda puede tambin perturbar el proceso de
recirculacin intra-renal de la urea as como desencadenar una insuficiencia renal aguda en
paciente mono-reno o portador de nefropata crnica. En el caso que reportamos pueden ser
delineados tres sndromes:
una insuficiencia renal aguda no oligoanrica secundaria a pelo nefritis aguda. Situacin
que podra justificarse por haberse desarrollado dicha infeccin en un paciente anciano y
mono-reno.
una diabetes inspida nefrognica (diuresis acuosa) secundaria al compromiso intersticial
renal producto de la pelo nefritis aguda.
una elevada excrecin de urea secundaria a una menor capacidad reabsortiva de agua y
recirculacin intra-renal de la urea. Ambos desrdenes atribuibles a la pelo nefritis. Los
mecanismos antes mencionados podran explicar el aumento de la excrecin fraccional de
urea generndole al paciente la posibilidad de mantener uremias normales pese a la
existencia de cada del filtrado glomerular.
OBSERVACIONES
La pelo nefritis aguda en pacientes con rin nico puede presentarse como una insuficiencia
renal aguda con uremia normal. Es una triste realidad que a veces no se piensa en la presencia
de insuficiencia renal sino hasta que aparece anuria o una elevacin de la uremia del paciente.
Sin embargo, es bien conocido que la urea no es un indicador absolutamente confiable de
funcin renal, y si bien no existe aun un marcador exacto de la misma, se ha comenzado a
utilizar la cistatina C con tal fin.
CUESTIONARIO
1.- Cules son las pruebas de funcionamiento renal?
2.- Qu importancia tiene el examen de orina en el diagnstico de insuficiencia renal?
3.- Cul es el volumen urinario normal de un adulto? Qu nombre reciben sus alteraciones
volumtricas?
4.- En la insuficiencia renal aguda qu alteracin existe en el volumen urinario? Justifique su
respuesta
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WORK PAPER # 3
UNIDAD III: Tema 7
TITULO: PANCREATITIS
PERIODO DE EVALUACIN : 11a semana
CASO CLINICO
Varn de 64 aos ingresado de urgencias y diagnosticado de pancreatitis aguda de origen biliar
grado V de Hill 4 semanas antes del cuadro clnico actual. En la analtica destacaba una
leucocitosis (16.000/ml) con neutrofilia (82%) y una amilasemia elevada 5064 U/l. Se inici
tratamiento conservador y evolucion favorablemente aunque con persistencia de una
amilasemia elevada (700 U/I). A los 15 das el TAC de control sugera la existencia de un
pseudoquiste pancretico en formacin.
Enfermedad actual: Reingresa por reagudizacin de la pancreatitis acompandose de fiebre
(38C) y la presencia de ndulos cutneos diseminados por todo el cuerpo.
Exploracin: Ndulos cutneos eritematosos, dolorosos a la palpacin y localizados en
miembros inferiores, pared abominal (periumbilicales y flancos) y regin gltea.
En hipocondrio derecho se palpa una masa dolorosa.
Detalle de las lesiones que presentaba este paciente en extremidades inferiores y abdomen
Analtica: Leucocitosis (24.000cel/mm3) con neutrofilia (90%), amilasa (20.000U/l) y lipasa (700
U/l) elevadas.
T.A.C: En el TAC apareca una imagen sospechosa de pseudoquiste infectado, aislndose E.
Coli tras puncin y cultivo de la coleccin.
Intervencin: El drenaje por puncin de esta coleccin no fue efectivo y el paciente es
intervenido, encontrando focos de esteatonecrosis en mesocolon y regin peripancretica. Se
realiz colecistectoma y drenaje externo de la coleccin del pseudoquiste. Evolucin
postoperatoria: En el postoperatorio se normalizaron los niveles de amilasa y lipasa curando el
proceso pancretico sin fistulizacin de la cavidad drenada. Los ndulos cutneos remitieron
progresivamente con la curacin de la pancreatitis dejando una zona hiperpigmentada en la zona
de la lesin, 13 das tras la normalizacin de los niveles de amilasemia
Discusin
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La necrosis grasa diseminada no se limita exclusivamente al tejido celular subcutneo sino que
tambin puede afectar a otros tejidos como el articular, mdula sea, cerebro, pleura, pericardio,
mediastino, riones, suprarenales y ovarios. La lesin del tejido subcutneo asociada a la
enfermedad pancretica fue descrita por Chiari en 1883, afecta a un 2-3% de todos los pacientes
con enfermedad pancretica y lo ms frecuente es que se asocie a cuadros de pancreatitis
aguda alcohlica, siendo raros su aparicin con el cncer y el pseudoquiste pancretico. Las
reas de necrosis grasa subcutnea se manifiestan como ndulos indurados, eritematosos y
dolorosos con un dimetro de 0,5-2 cm, similares a las lesiones del eritema nodoso con quien se
debe realizar el diagnstico diferencial al igual que con otras enfermedades dermatolgicas. Su
distribucin suele ser generalizada pero aparecen preferentemente en los miembros inferiores,
regin gltea y tronco, como ocurri en nuestro paciente. Rara vez se afectan los miembros
superiores, el trax o la cabeza. Generalmente los ndulos de esteatonecrosis subcutnea se
resuelven en das o semanas tras la curacin de la pancreatitis e incluso se ha descrito su
remisin tras la pancreatectoma total, lo que refuerza la ntima relacin entre enfermedad
pancretica y necrosis grasa. En ocasiones se produce la curacin espontnea sin dejar lesin
residual o se ulceran los ndulos drenando un material cremoso y estril, dejando una
hiperpigmentacin residual. En nuestro caso los ndulos curaron de forma espontnea dejando
una zona hiperpigmentada 13 das tras la normalizacin de la amilasemia. Ms raramente, la
necrosis grasa puede extenderse a tejidos adyacentes (tendones y articulaciones)
acompandose entonces de una elevada mortalidad. Se ha visto asociada a la aparicin de
estos ndulos una eosinofilia elevada en el 50% de los pacientes, fundamentalmente en las
formas con poliartritis. Nuestro paciente presentaba una marcada leucocitosis con neutrofilia
pero sin eosinofilia. La patogenia de estas lesiones no est clara, y aunque en ocasiones no se
encuentra correlacin entre la presencia de esta necrosis grasa y los niveles sricos de enzimas
pancreticos, existen trabajos en los que si aparece esta asociacin con elevacin importante
(hasta 100 veces las cifras normales) de la amilasemia y lipasemia como en nuestro caso. La
elevacin ms acentuada, de los enzimas pancreticos en sangre, cuando existe necrosis grasa,
indicara su paso a la circulacin general por va venosa o linftica daando posteriormente las
clulas adiposas, como ya se ha descrito en los casos de fstula pancretico portal. Por otra
parte, Dhawan y cols demostraron que en pacientes con lesiones de necrosis grasa subcutnea
y pancreatitis aguda, los adipocitos se tean fuertemente con anticuerpos anti-lipasa
pancretica, lo que apoyara la accin directa de estos enzimas sobre los adipocitos. Comentar
finalmente, que estas lesiones pueden ser la primera y la nica manifestacin clnica de una
pancreatitis, y que se ha descrito algn caso de pancreatitis asintomtica diagnosticada tras
estudio del aspirado de stos ndulos al encontrar cantidades altas de amilasa. Sin embargo,
pensamos al igual que Manji y cols, que a pesar de la buena evolucin que presentan
frecuentemente estas lesiones, lo importante es su diagnstico precoz y la "alerta" cuando
aparecen, ya que la progresin de las mismas hacia tejidos vecinos, como ya se ha comentado
anteriormente, se asocia a una mortalidad elevada y de alguna manera esto podra condicionar
nuestra actitud teraputica.
1.
2.
3.
4.
5.
CUESTIONARIO
Cules son los valores de referencia de la amilasa y lipasa? Qu funcin cumplen
cada una de estas enzimas?
Defina qu es pancreatitis?
Qu hormonas se producen en el pncreas y qu funcin cumplen cada una de ellas?
Cmo influye la pancreatitis en el metabolismo de la glucosa?
Para el diagnstico de pancreatitis adems de la determinacin de amilasa qu otras
pruebas se realizan? Ejemplifique como deberan dar resultado estas pruebas
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WORK PAPER # 4
UNIDAD III: Tema 11
TITULO: Hepatitis
PERIODO DE EVALUACIN : 11 semana
CASO CLINICO
Hombre de 34 aos, con una semana de evolucin de fiebre, cefalea y compromiso del estado
general, a lo que se agreg posteriormente dolor en hipocondrio derecho, coluria e ictericia de
piel y mucosas. El laboratorio evidenci leucopenia, plaquetopenia, hiperbilirrubinemia y gran
aumento de las transaminasas. Se inform VDRL positivo y ms tarde un test de MHA-TP
positivo. El estudio para hepatitis A, B, C, citomegalovirus y virus de Epstein Barr fue negativo, la
IgG para virus de hepatitis E fue positiva. La biopsia heptica demostr alteraciones
concordantes con hepatitis sifiltica. El paciente recibi penicilina benzatina 2.400.000 U.I. una
vez a la semana durante tres semanas con buena respuesta. Despus del alta se conoci
reaccin de polimerasa en cadena positiva para el virus de inmunodeficiencia humana (VIH).
Este caso ejemplifica una manifestacin poco usual de la sfilis secundaria, a la cual atribuimos
la complicacin heptica, que se presenta prcticamente pura en un paciente infectado con el
VIH, dato conocido slo despus del alta.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
CUESTIONARIO
Defina qu es hepatitis?
Qu pruebas de laboratorio integran el perfil heptico?
Describa el metabolismo de las bilirrubinas
En una hepatitis viral Qu tipo de bilirrubina aumenta?
Qu es ictericia y a partir de qu valores de bilirrubina es posible reconocerla?
En cuanto a la hidrosolubilidad, clasifique a los tipos de bilirrubinas
Qu tipo de bilirrubina se elimina por orina?
El tiempo de protombina (TP) mide el factor de coagulacin VII, explique Por qu se
considera una prueba de funcin heptica?

WORK PAPER # 5
UNIDAD III: Tema 12
TITULO: Infarto de Miocardio
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INTRODUCCIN
El infarto agudo de miocardio es un padecimiento grave, con una alta mortalidad. Su
fisiopatologa fundamental es la ateroesclerosis, ya que es la causa en 90 % de los casos. La
ateroesclerosis es un proceso inflamatorio crnico de las capas ntimas y media de las arterias.
El proceso consiste en la acumulacin de lipoprotenas ricas en colesterol y triglicridos (de baja
densidad) y de un infiltrado de clulas mononucleares y fibroblastos formando un sustrato
anatmico llamado placa, lo cual obstruye total o parcialmente el vaso involucrado. El evento
final de dicha obstruccin, es la ruptura de la placa, con lo cual se exponen al torrente
circulatorio ciertos elementos de la matriz subendotelial, tales como la colagenasa que estimulan
la agregacin plaquetaria; tambin se libera factor tisular, el cual estimula la va extrnseca de la
coagulacin, llevando ambos a la formacin de un trombo oclusivo que causa la detencin
absoluta de la irrigacin del vaso involucrado y conduce al infarto de miocardio. Al ser el infarto
de miocardio un padecimiento grave, es imprescindible realizar un diagnstico rpido y confiable
para iniciar las medidas teraputicas lo antes posible.
MARCADORES ESPECIFICOS
Los marcadores bioqumicos especficos son: mioglobina; creatinquinasa (CK) y su fraccin
especfica; troponinas.
La mioglobina es una protena que se encuentra presente es el msculo cardiaco y esqueltico,
por lo cual es sensible, pero poco especfica como marcador de lesin miocrdica.
La mioglobina es liberada rapidamente y se puede detectar en el suero a las 2 horas de iniciado
un infarto. Sin embargo es depurada muy rpidamente con una vida media de 10 minutos. Esto
implica la probabilidad de obtener un resultado falso negativo.
La creatinquinasa (CPK) se encuentra localizada en msculo cardiaco,esqueltico y cerebro.
Presenta tres isoenzimas: CK-MB; CK-BB; CK-MM, siendo especfica de miocardio CK-MB.
Los incrementos de CK-MB ocurren de 4 a 6 horas de iniciado el infarto, volviendo a sus niveles
normales entre 48 y 72 horas.
Las troponinas son protenas reguladoras de la contraccin del msculo estriado y estn
formadas por un complejo de tres subunidades:Troponina C; Troponina I; Troponina T.
En el infarto aumentan a partir de las 4 horas de iniciado el dolor y persisten elevadas por varios
das entre 7 a 14 das.
CASO CLINICO
Paciente internado por infarto de miocardio, se realizan en laboratorio marcadores cardiacos
CPK; CK-MB; Troponinas; reportndose aumento en los valores de estos. Al cuarto da de
evolucin presenta repeticin de dolor precordial intenso, pero en esta ocasin slo se solicita
CK-MB cuya elevacin confirma un reinfarto.
CUESTIONARIO
1.-En el caso clnico mencionado, Por qu no es til la medicin de la troponina?
2.- Por qu existe la probabilidad de obtener falsos negativos en la medicin de mioglobina?
3.-Adems de CK, CK-MB, TROPONINAS, MIOGLOBINA, Qu otros marcadores cardiacos
existen?
4.- Por qu es importante la valoracin de cada uno de los indicadores cardiacos mencionados
en la anterior pregunta?
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GUA DE INVESTIGACIN PRACTICA - GIP # 1
UNIDAD I :
TITULO:
Tema 1
Principios bsicos del laboratorio clnico
FECHA DE ENTREGA:
6 semana

OBJETIVO.
Conocer todos los elementos bsicos sobre el funcionamiento de un laboratorio de anlisis
clnico.
CONTENIDO.
Principios de bioseguridad.
Casos de emergencias.
Uso de sustancias corrosivas, custicas y venenosas.
cidos y bases fuertes.
Material de laboratorio.
Reactivos.
Equipos
RESULTADO
...
CONCLUSIN
...........................................................................................................................................................
...........................................................................................................................................................
...........................................................................................................................................................
CUESTIONARIO
1. Por qu es importante la aplicacin estricta de las normativas de bioseguridad?
2. Cules son los procedimientos a seguir en caso de accidente al derramarse sangre del
paciente sobre el mesn de trabajo?
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3. Cules son los procedimientos a seguir en caso de accidente al salpicar material biolgico
del paciente sobre los ojos del personal de laboratorio?
4. Mencione qu normas de bioseguridad se deben cumplir en el Laboratorio de la asignatura de

qumica sangunea.
.............................
5.- Qu tipo de desinfectantes y antispticos son utilizados en laboratorio? Mencione y describa
cada uno de ellos
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UNIDAD I:
TITULO:
Tema 3
Toma de muestra
FECHA DE ENTREGA:
6 semana

OBJETIVO
El estudiante deber ser capaz de realizar una toma de muestra sangunea en ptimas
condiciones.
RECOLECCIN Y TOMA DE MUESTRA
Muestras
Condiciones
Factores de variacin
Tipo de obtencin de sangre
Puncin venosa
Puncin arterial
Puncin capilar
Conservacin de las muestras
EQUIPOS:
- Centrifuga para tubo de hemlisis
- Bao Mara a 37C
REACTIVOS Y MATERIALES:
- Alcohol 96
- EDTA
- Tubos de hemlisis
- Jeringas de 5ml.
- Torniquete
- Pipeta Pasteur
- Guantes de ltex descartable
- Pinzas
- Registro
- Material de escritorio
PROCEDIMIENTO
- El sitio ms adecuado para la toma de muestra es la vena que se encuentra en el pliegue
anterior del codo, en el punto donde sea ms gruesa y fcilmente visible, aprovechando de
preferencia, una de las ramas que forman una Y
- Sin tocar ms que la base de la aguja, pruebe la aguja y jeringa para cerciorarse de que no
est obstruida. Cubra el extremo de la aguja con su capuchn estril hasta que se use.
- Con la mano derecha coloque firmemente el torniquete alrededor del brazo.
- Con la mano izquierda tire de un extremo, cruzndolo
- A continuacin introduzca este extremo por debajo de la parte principal del torniquete. El
torniquete se deber ajustar solo lo suficiente para aminorar la corriente sangunea y dilatar
las venas, sin apretarlo tanto que reduzca el paso de sangre por las arterias
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- Pida al paciente que abra si cierre la mano varias veces, para favorecer la dilatacin de las
venas.
- Con el dedo ndice de la mano izquierda palpe la vena en que introducir la aguja.
- Desinfecte la piel con una pieza de algodn humedecida en tintura de yodo o etanol.
- Tome la jeringa con la mano derecha, colocando la yema del dedo ndice sobre la base de la
aguja.
- Coloque la aguja sobre la vena, con el bisel hacia arriba, introduzca la aguja
aproximadamente 0.5cm en el centro de la vena, sin titubeos.
- Con la mano izquierda retire hacia atrs el embolo de manera que se observe el ingreso de
sangre por la aguja hacia la jeringa, aproximadamente 4ml.
- Retire el torniquete tirando del extremo doblado
- Aplique una pieza seca de algodn sobre la parte donde se encuentra oculta la punta de la
aguja. Saque la aguja con un movimiento suave y rpido por debajo de la pieza de algodn
- Pida al paciente que presione firmemente la pieza de algodn durante 3 minutos, con el brazo
extendido. Tape la aguja con su respectivo capuchn, aplicando las medidas de Bioseguridad.
- Separe la aguja de la jeringa. Coloque la muestra de sangre escurriendo por las paredes del
tubo de vidrio. Inmediatamente identificar y rotular el frasco con marcador para vidrio.
- Introduzca el tubo en Bao Mara por 20 minutos, luego proceda a la centrifugacin a
3000rpm por 5 minutos
- En la parte superior del tubo de vidrio quedar el suero, el cual ser alicuotado en 500ul en
pequeos tubos de plstico con tapa
- Descartar el material utilizado, como indica las normas de Bioseguridad
RESULTADO
COMCLUSIN
...........
CUESTIONARIO
1. Para qu pruebas de laboratorio es imprescindible el obtener sangre arterial y que arterias
son los lugares de puncin?
...
2. Cmo se debe realizar el encapuchado de la aguja, y qu finalidad tiene este
procedimiento?
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...
3. Menciona 5 pruebas de laboratorio de qumica sangunea en la que sea posible utilizar
plasma como muestra qu tipo de anticoagulante es utilizado?
4. Menciona y describe la accin de los diferentes anticoagulantes utilizados en laboratorio
5. A qu temperaturas se deben someter las muestras para poder conservarlas durante una
semana, un mes y un ao?
..............
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UNIDAD I: Control de calidad
TITULO: Control de calidad en qumica sangunea
OBJETIVO.
El estudiante deber ser capaz de desarrollar un programa de control de calidad en el rea de
qumica sangunea.
CONCEPTOS BSICOS
Definicin
Control de calidad interno
Grfica de Levey-Jenning
Exactitud
Precisin
Tipos de control de calidad
Sistemas de gestin de calidad
PROCEDIMIENTO
Preparar un pool de sueros de pacientes aparentemente sanos
Centrifugar el pool de sueros.
Colocar un conservante.
Alicuotar en fracciones de 1.5 ml
Congelar las fracciones
Realizar la cuantificacin del metabolito en estudio en 20 de las alcuotas guardadas en
congelamiento.
Construir la Grfica de Levey-Jenning
Interpretar el comportamiento de la grfica.
CALCULOS:
CALCULOS (Continua)
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RESULTADO
CONCLUSIN
CUESTIONARIO
1. Cul es la importancia del control de calidad interno en laboratorio de qumica sangunea?
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2. Cul es la importancia de trabajar con exactitud o/y precisin?
3. Describa cuales son las condiciones que deben tener, segn las normas de calidad, los
ambientes de un laboratorio clnico para la atencin adecuada del cliente.
4. Cul es la utilidad del Standatrol en laboratorio clnico?

............................................................................................................................................................
............................................................................................................................................................
............................................................................................................................................................
............................................................................................................................................................
...........................................................................................................................................................
5. Elaborar la Grfica de Levey-Jenning con los datos obtenidos en laboratorio, graficar en papel
milimetrado e interpretar por escrito como conclusin de esta prctica.
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UNIDAD III:
TITULO:
tema 7
Cuantificacin de glucosa sangunea
FECHA DE ENTREGA:
6 semana

OBJETIVOS Cuantificar la glucosa sangunea en pacientes sanos y diabticos
SIGNIFICANCIA CLNICA.
La patologa ms comn relacionada con el metabolismo de los hidratos de carbono es la
diabetes mellitus. El diagnostico precoz y el control de los pacientes diabticos, tiene por
objeto evitar la cetoacidosis y las complicaciones de los sntomas resultantes de la hiperglicemia,
mediante el tratamiento adecuado. Dado que existen mltiples factores de hiper o hipo
glicemia, debe considerarse en cada caso la condicin fisiolgica y/o patologa presentes en el
paciente en cuestin.
FUNDAMENTO DEL MTODO.
El esquema de reaccin es el siguiente:
Glucosa + O2 + H2O
__
__GOD ___
ACIDO GLUCORNICO + H2O2
2H2O2 + 4- AF + FENOL ______POD______ QUINONA COLOREADA + 4H2O

Reactivo de trabajo:
De acuerdo al volumen de trabajo colocar en una probeta 500 partes de agua destilada, 50
partes de reactivo 4-AF, 50 partes de reactivo fenol y llevar a 1000 partes con agua destilada.
Agregar 3 partes de GOD/POD previamente homogeneizadas. Mezclar por inversin, sin agitar.
Rotular y fechar. Pueden prepararse distintas cantidades respetando las proporciones
antedichas. Es importante adems respetar el orden de agregado de los reactivos y asegurar
una perfecta homogenizacin de los mismos, a fin de que el reactivo Fenol no deteriore el
reactivo de Trabajo.
PRECAUCIONES.
Los reactivos son para uso in vitro.
El fenol es txico e irritante.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO.
Reactivos provistos: Son estables en refrigerador (2-10 C) hasta la fecha de vencimiento
indicada en la caja. No mantener a temperaturas elevadas durante lapsos prolongados.
Reactivo de trabajo: en refrigerador (2-10C) y en frasco color caramelo es estable un mes
a partir de la fecha de su preparacin.
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS.
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Durante el uso, el Reactivo de Trabajo puede desarrollar un ligero color rosado que no afecta su
funcionamiento siempre que se procese un blanco con cada lote de determinaciones y un
Standard peridicamente. Desechar cuando las lecturas del blanco sean superiores a 0,160 D.O.
o las lecturas del Standard sean anormalmente bajas.
MUESTRA:
Suero o plasma
a) Recoleccin: se debe obtener suero o plasma de la manera usual. Tambin es posible
realizar las determinaciones en lquido cefalorraqudeo. Adems, cuando no es posible
extraer sangre venosa o en caso de extrema urgencia, la determinacin se puede
realizar en sangre capilar
b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea plasma se recomienda el uso de
anticoagulante G de Wiener lab. Para su obtencin (El mismo contiene fluoruro como
conservador).
c) Sustancias interferentes conocidas: los sueros o plasmas con hemlisis visible o
intensa deben ser desproteinizadas. Las muestras de lquido cefalorraqudeo
hemorrgicas deben ser centrifugadas antes de procesar. No se observan interferencias
por: bilirrubina hasta 200 mg/l, acido ascrbico hasta 75mg/l, acido rico hasta 200 mg/l
hemlisis ligera.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: Los hemates y leucocitos son los
responsables de la destruccin enzimtico de la glucosa sangunea, siendo mxima a
37C, razn por la cual debe centrifugarse las sangre dentro de las dos horas posteriores
de la extraccin, hasta obtener un sobrenadante lmpido y transferir a otro tubo para su
conservacin. En estas condiciones la glucosa es estable 4 horas a temperatura
ambiente o 24 horas refrigeradas (2-10C). En caso de no poderse procesa las muestras
de la forma antes indicada, deber adicionarse un conservador en el momento de la
extraccin para inhibir la gluclisis.
MATERIAL REQUERIDO.
- Espectrofotmetro o foto colormetro
- Material volumtrico adecuado
- Frasco de vidrio color caramelo
- Tubos de foto colormetro o cubetas espectrofotomtricas de caras paralelas
- Bao de agua a 37C.
- Reloj o timer.
PROCEDIMIENTO.
En tres tubos de foto colormetro marcados B (Blanco) s (Standard) y D (Desconocido) Colocar:
B
S
D
Standard
25 ul
Muestra
25 ul
Reactivo de Trabajo
2.5 ml
2.5 ml
2.5 ml
Incubar 10 minutos en bao de agua a 37C. Luego leer en espectrofotmetro a 505 nm en foto
colormetro con filtro verde (490 -530 nm) llevando el aparato a cero con el blanco.
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCIN FINAL.
El color de reaccin final es estable 1 hora, por lo que la absorcin debe ser leda dentro de este
lapso
CALCULO DE LOS RESULTADOS
Glucosa g/l = D x f
donde f = 1,00g/l
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VALORES DE REFERENCIA.
Suero o plasma: 0,70 - 1.10 g/l
LINEALIDAD.
La reaccin lineal hasta 4,5 g/l. Para valores superiores, diluir la solucin coloreada final con
el reactivo de trabajo y repetir la lectura multiplicando el resultado final por 2.
RESULTADO
CONCLUSIONES
..........................................................................................................................................................
..........................................................................................................................................................
.......................................................................................................................................................
CUESTIONARIO
1. Qu es la glucosa?
2. El exceso de glucosa se deposita en el hgado, Qu nombre recibe la glucosa en este

rgano?
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....
3. En qu estados fisiolgicos existe hiperglicemia?
4. Qu es la gluclisis?
5. Qu es la Gluconeognesis?
6. Cules son las hormonas reguladoras de la glucosa? Qu funcin especfica cumplen cada
uno de ellas?
7. Qu es la Hemoglobina glicosilada, que importancia tiene en la evaluacin del paciente

diabtico?
8. En qu consiste la curva de tolerancia a la glucosa? Cul es la informacin que brinda en el

diagnstico del paciente?
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9. Qu tiempo de ayuno debe tener el paciente para determinar la concentracin de glicemia?

Justifique su respuesta
...........
...........................................................................................................................................................
10. Investigar el significado de los siguientes trminos:
- Glicemia basal
- Glicemia postpandrial
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UNIDAD III:
TITULO:
tema 8
Cuantificacin de creatinina sangunea
FECHA DE ENTREGA:
12 semana

OBJETIVOS
Realizar la cuantificacin de creatinina en un paciente normal y uno con insuficiencia renal.

INTRODUCCIN:
Compuesto sumamente difusible, se elimina del organismo casi exclusivamente por filtracin
renal. Su determinacin en suero, as como el clearence de creatinina endgena constituyen
parmetros importantes para el diagnostico de diversas afecciones renales. Sin embargo, debido
a los problemas prcticos inherentes a la determinacin del clearence, la determinacin de
creatinina srica es ms utilizada como ndice de funcionalismo renal.
FUNDAMENTOS DEL MTODO
La creatinina reacciona con el picrato alcalino en medio tamponado, previa desproteinizacin con
acido pcrico, obtenindose un cromgeno que se mide a 510nm.
REACTVOS
- Reactivo 1: acido pcrico 41.4 mmol/l
- Reactivo 2: buffer glicina /NaOH 1 mol/l, pH final 12.4
- Standard: solucin de creatinina 20 mg/l
MUESTRA
Suero u orina
a) Recoleccin: se debe obtener suero de la manera usual.
Puede emplearse tambin orina de 2 horas o de 24 horas. Su recoleccin debe efectuarse en
un recipiente perfectamente limpio que se mantendr en el refrigerador (2-10C) durante el
tiempo de la recoleccin. Medir la diuresis, tomar una alcuota y efectuar una dilucin 1:50 de la
misma. En caso de que la diuresis sea de 2 horas, multiplicar el volumen medido por 12 para
calcular la cantidad de creatinina eliminada durante 24hras.
b) Aditivos: no se recomienda el uso de plasma pues se obtienen resultados menores en un 8
a un 15%.
c) Sustancias interferentes conocidas: hemlisis ligera a moderada no interfiere, pero no debe
emplearse sangre total ya que aproximadamente el 60% de material Jaffe *-reactivo de los
eritrocitos no es creatinina.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: es conveniente utilizar el suero recin
obtenido. Si esto no es posible puede mantenerse hasta 24 horas en refrigerador (2-10C) sin
variaciones de los resultados.
MATERIAL
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Espectrofotmetro o foto colormetro.

Tubos de ensayo y de foto colormetro
Micro pipetas y pipetas capaces de medir los volmenes indicados.
Reloj o timer.
CONDICIONES DE REACCIN
Longitud de onda: 510nm en espectrofotmetro o en fotocolormetro con filtro verde (500540nm).
Temperatura de reaccin: temperatura ambiente, que no debe exceder los lmites de 15 y
30C.
Tiempo de reaccin: 35 minutos.
Volumen de muestra. 0.7ml
Volumen final de reaccin: 3.5ml.
PROCEDIMIENTO
En caso de que la muestra a utilizar sea suero, debe efectuarse una desproteinizacin de la
siguiente manera: a 0.7ml de suero agregar 3.5ml de reactivo 1. Mezclar por inversin. Dejar
reposar 10 minutos y centrifugar a 3000r.p.m. durante 5 minutos como mnimo.
En tubos de foto colormetro marcados B (Blanco), S (Standard), Ds y DO (Desconocidas suero
y orina), colocar:
B
Desproteinizado
Standard
Orina diluida (1:50)
Agua destilada
Reactivo 1
Reactivo 2
-------
------0.5 ml
-------0.5 ml
2 ml
0.5 ml
-------1 ml
2 ml
0.5 ml
DS
DO
3ml
----------------------0.5ml
-------------0.5 ml
0.5 ml
2 ml
0.5 ml
Mezclar por inversin. Incubar 20 minutos a temperatura ambiente. Luego leer en

espectrofotmetro a 510nm o en foto colormetro con filtro verde (500-540nm), llevando a cero el
aparato con agua destilada.
Microtcnica
Si es necesario usar menos cantidad de muestra y el aparato de lectura lo permite, puede
desproteinizarse 0.4ml de suero con 2ml de Reactivo 1 separando 1.5ml de sobrenadante y
adicionando a este 0.25ml de Reactivo 2.
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCIN FINAL
El color de la reaccin es estable durante 10 minutos por lo que la absorbancia debe ser leida
dentro de ese lapso. El blanco y el Standard pueden leerse hasta los 60 minutos.
Corregir las lecturas S y D restndoles el Blanco (B)
1) Creatinina en suero (mg/dl)= Ds x F
F= 20 mg/l
S
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2) Creatinina en orina (g/24hrs)= DO x V

S
Siendo:
V= volumen de la diuresis expresado en litros/24hrs.
La formula surge de:
Creatinina en orina (g/24hrs)=
DO
S
x 0.20 G/L x 50 x V
Donde:
0.0.20 g/l = concentracin del Standard
50= factor de dilucin
3) Depuracin de Creatinina Endgena (D.C.E):

D.C.E ml/min= Creatinia en orina (g/24hrs) X 694 ml/min
Creatinina en suero (mg/l)
Donde:
694 ml/min = g24hrs = 1000 mg x 1000 ml = 1.000.000 ml
mg/l
1 mg x 1440 min
1440 min
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VALORES DE REFERENCIA
Suero: 8 a 14 mg/l
Orina: 0.9 a 1.5 g/24hrs
D.C.E: 80 a 140 ml/min (promedio 125 ml/min)
Estos valores de D.C.E correspondiente a adultos hasta 60 aos.
RESULTADOS
...
CONCLUSIONES
CUESTIONARIO
1. Cul es la linealidad de la prueba?
...
..........................................................................................................................................................
..........................................................................................................................................................
..........................................................................................................................................................
2. Qu se debe hacer si la reaccin final sobrepasa su linealidad? Ejemplifique
3. Cul es la importancia diagnstica de la depuracin de creatinina?
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4. Qu relacin tiene la creatinina con la urea?

..
.
.
....
5. En qu patologas (mencione 4) es frecuente la elevacin de los niveles de creatinina?
.
..
.................................................
6. Describa la diferencia de Insuficiencia renal crnica e Insuficiencia renal aguda?
..
..
...
.
...........
7. Para la depuracin de creatinina Qu muestra se utiliza, porqu?
.
..
..
.
8. Si la dilucin a realizarse fuera 1:20 qu cantidad de muestra y diluyente se debe medir

.....
..
10.-En la depuracin de creatinina Qu se debe hacer si la diuresis es de 2 horas?
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UNIDAD III:
TITULO:
tema 8
Cuantificacin de urea sangunea
FECHA DE ENTREGA:
12 semana

OBJETIVOS
Determinar la concentracin de urea en pacientes con insuficiencia renal.

INTRODUCCIN:
La urea es le principal producto final del metabolismo de las protenas y deriva principalmente de
los grupos aminados de los aminocidos. Se sintetiza en el hgado por un proceso de sntesis a
travs del ciclo de la ornitina. sta urea formada se la encuentra tanto intra como extraceluares
(plasma, suero, LCR). De la sangre se elimina por los riones a travs de la filtracin glomerular,
se reabsorbe un 40% por los tbulos renales por difusin pasiva.
El esquema de reaccin es el siguiente: Reaccin de Bertelot.
NH3 + Fenol + Hipoclorito de sdio _______________ AZUL de indofenol
REACTIVOS
- Standard: solucin de urea 60 mg/dl.
- Enzima: estabilizada de ureasa (tamponada).
- Reactivo 1: reactivo desecado conteniendo fenol, nitroferricianuro de sodio, etilen-bisditiocarbamato manganoso.
- Reactivo 2: reactivo concentrado de hipoclorito de sodio y p-toluen sulfoncloramida en
hidrxido de sodio.
MUESTRA
Suero o plasma u orina diluida 1/10.
a) Recoleccin: se debe obtener suero o plasma de la manera usual.
b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea plasma. Se recomienda nicamente el
uso de EDTA como anticoagulante para su obtencin.
c) Sustancias interferentes conocidas:
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Excepto la EDTA, los anticoagulantes comunes interfieren en la determinacin. Por

ejemplo el fluoruro inhibe la accin de la ureasa.
Los sueros con hemlisis visibles o intensas producen valores falsamente aumentadas
por lo que no deben ser usados.
MATERIAL
Espectrofotmetro o foto colormetro
Micropipetas, pipetas y material volumtrico adecuados.
Frasco de vidrio color caramelo.
Tubos de foto colormetro o cubetas espectrofotomtricas de caras planas.
Bao de agua a 37C.
Reloj o timer.
Longitud de onda. 540 nm en espectrofotmetro o en foto colormetro con filtro verde
(490-530nm).
Temperatura de reaccin: 37 C.
Volumen de muestra: 20ul
Volumen de reactivos de trabajo: 2ml
Volumen final de reaccin: 12.02ml
PROCEDIMIENTO
En tres tubos de fotocolormetro o cubetas espectrofotometrcas marcadas B (Blanco), S
(Standard) y D (Desconocido), colocar:
B
Standard
Muestra
Ureasa
Reactivo 1
Reactivo 2
Agua dest.
l
-----20ul
-----------1 gota
1 gota
Mezclar e incubar a 37 C por 5 minutos.
2 ml
2 ml
2 ml
2 ml
10 ml
10 ml
Mezclar por inversin, dejar reposar por 10 minutos.
-----20ml
1 gota
2 ml
2 ml
10 m
Leer en espectrofotmetro a 540 nm, llevando el equipo a cero con el blanco de reactivo.
CLCULOS DE LOS RESULTADOS
Urea mg/dl = D x F
donde F = 60 mg/dl
S
20 a 45 mg/dl
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RESULTADO
CONCLUSIONES
CUESTIONARIO
1. Qu es la urea?
2. Cul es la principal va de eliminacin de la urea?
3. Qu terminologa se utiliza para denotar el aumento de urea en sangre y en qu patologas

generalmente se observa en este cambio?
...
4. Cules son las funciones que cumplen las lipoprotenas de alta densidad y baja densidad?
Escriba sus valores normales.
..
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5. En qu otras patologas aumenta la concentracin de urea en sangre?
..

UNIDAD III:
TITULO:
tema 9
Cuantificacin de colesterol sangunea
FECHA DE ENTREGA:
12 semana

OBJETIVOS
Determinar la concentracin de colesterol y sus fracciones en un paciente normal y uno con

sobrepeso.
INTRODUCCIN:
La determinacin de colesterol en forma aislada tiene utilidad diagnostica limitada. Se ha visto
que el colesterol es uno de los factores contribuyentes a la formacin de ateromas dado que las
complicaciones arteriosclerticas prevalecen en individuos hipercolesterolmicos. Estudios
epidemiolgicos demuestran que el riesgo de contraer enfermedad cardiaca coronaria para
individuos de mas de 40 aos con colesterolemia menor a 2.10 g/l es 3 veces menor que entre
individuos con mas de 2.30 g/l y 6 veces menor que entre individuos con mas de 2.60 g/l.
El esquema de reaccin es el siguiente:
Esteres de colesterol
Colesterol +O2
lipasa
CHOD
H2O2 + 4-AF + fenol
POD
colesterol + cidos grasos

colesten 3 ona +H2O2
quinona coloreada + H2O
REACTIVOS
- Standard: solucin de colesterol 2 g/l
- Enzimas: suspensin conteniendo lipasa, colesterol oxidasa (CHOD) y peroxidasa (POD).
- Reactivo 4 AF: solucin de 4-aminofenazona 25mmol/l.
- Reactivo Fenol: solucin de fenol 55mmol/l.
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MUESTRA
Suero o plasma
a) Recoleccin: se debe obtener suero o plasma de la manera usual.
b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea plasma. Se recomienda nicamente el
uso de heparina como anticoagulante para su obtencin.
Excepto la heparina, los anticoagulantes comunes interfieren en al determinacin.
Los sueros con hemlisis visibles o intensas producen valores falsamente aumentadas
por lo que no deben ser usados.
En sueros fuertemente hiperlipmicos puede observarse turbiedad: en tal caso, diluir el
volumen final de reaccin a o 1/3 con Blanco de reactivos, repetir la lectura y
multiplicar el resultado por el factor de dilucin.
No se observan interferencias por bilirrubina hasta 200mg/l, acido ascrbico hasta
75mg/l, acido rico hasta 200mg/l, ni hemlisis ligera.
Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el colesterol en suero es estable no menos de
una semana en refrigerador (2-10C) y dos meses en congelador, sin agregado de
conservadores.
MATERIAL
Espectrofotmetro o foto colormetro
Micropipetas, pipetas y material volumtrico adecuados.
Tubos de foto colormetro o cubetas espectrofotomtricas de caras planas.
Bao de agua a 37C (opcional).
Reloj o timer.
Longitud de onda. 505nm en espectrofotmetro o en foto colormetro con filtro verde
(490-530nm).
Temperatura de reaccin: 15minutos.
Volumen de reactivos de trabajo: 2ml
Volumen final de reaccin: 2.02ml
PROCEDIMIENTO
En tres tubos de fotocolormetro o cubetas espectrofotometritas marcadas B (Blanco), S
(Standard) y D (Desconocido), colocar:
Standard
Muestra
Reactivo de trabajo
----------2ml
20ul
------2ml
--20ml
2ml
Incubar 15 minutos en bao de agua a 37 C. Leer en espectrofotmetro a 505 nm, llevando el

equipo a cero con el blanco de reactivo.
CLCULOS DE LOS RESULTADOS
Colesterol g/l = D x F
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donde F = 2.00 g/l
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Hombres: 1.72 a 2.48 g/l
n=63 edades: 35-a 62aos
Mujeres: 1.75 a 2.40 g/l
n=68 edades: 30- a 60aos
RESULTADO
CONCLUSIONES
CUESTIONARIO
6. Describa el metabolismo del colesterol
7. Cules son las funciones que cumple el colesterol en nuestro organismo?
8. Qu terminologa se utiliza para denotar el aumento de colesterol en sangre y en qu

patologas generalmente se observa aumentado?
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...
9. Cules son las funciones que cumplen las lipoprotenas de alta densidad y baja densidad?
Escriba sus valores normales.
..
10.
Qu relacin tienen los lpidos con las enfermedades cardiovasculares?
..
7.- En caso de usar plasma para la determinacin de colesterol qu aditivo se debe
usar, porqu?
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UNIDAD III: tema 10
TITULO:
Cuantificacin de amilasa sangunea
FECHA DE ENTREGA:
12 semana

OBJETIVOS
Cuantificar los niveles de creatinina en una muestra normal y un paciente con pancreatitis.
INTRODUCCIN
La amilasa, producida en el pncreas exocrina y en la glndulas salivales, escinde de los
enlaces alfa 1-4 glucosdicos de los polisacrido (almidn y glicgeno). Se encuentra elevada en
el suero de pacientes con pancreatitis aguda, alcanzando los valores mas elevadas entre las 24
y 30 horas posteriores al ataque las 24 horas y 48 horas siguientes.
Tambin se ve aumentando en este caso la excrecin urinaria de la enzima, persistiendo la
hiperamilasuria 3 a 5 das, luego de que la actividad srica ha alcanzado los niveles normales.
Las parotiditis bacterianas y paperas se asocian tambin con elevaciones en los niveles de
amilasa srica.
El sustrato, almidn tamponado, se incuba con la muestra, producindose la hidrlisis
enzimtica. Esta de detiene por el agregado de reactivo del yodo, que al mismo tiempo produce
color con el remanente de almidn no hidrolizado. La disminucin de color respecto de un
sustrato color. (Sin muestra) es la medida de la actividad enzimtica, que se expresa en
Unidades Amilo lticas.
REACTIVOS
- Sustrato 1: solucin de almidn 500mg/l, tamponada a pH7 con buffer fosfatos 0.1mol/l en
CINa 0.15MOL/L.
- Reactivo de yodo 2: solucin 0.01eq/l de yodo. En acido clorhdrico 0.02mol/l.
MUESTRA
Suero u orina
a) Recoleccin: obtener suero de la manera usual.
Si la muestra a utilizar es orina, debe obtenerse de la siguiente forma: el paciente debe orinar
descartando esta miccin, 2 horas despus vuelve a orinar y recoge toda la orina. Esta muestra,
que corresponde a 2 horas de diuresis, se diluye a 200ml con agua.
La determinacin se efecta con 20ul de esta dilucin, obtenindose el resultado directamente
en Unidades Amilolticas/hora.
b) Aditivos: no se requieren.
c) Sustancias interferentes conocidas: los citratos y oxalatos inhiben la actividad enzimtica.
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Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: si la determinacin no puede efectuarse de

inmediato, la muestra puede conservarse hasta una semana en refrigerador (2-10C), sin
perdida de actividad.
MATERIAL
- Espectrofotmetro o foto colormetro.
- Micropipetas y pipetas capaces de medir los volmenes indicados.
- Tubos de ensayo y de foto colormetro.
- Bao de agua a 37 C
- Reloj o timer.
- Longitud de onda: 640nm en espectrofotmetro o en foto colormetro con filtro rojo (610660nm).
- Temperatura de reaccin:37C
- Tiempo de reaccin: 7minutos y 30 segundos.
- Volumen de muestra : 20ul
- Volumen final de la reaccin. 10ml
PROCEDIMIENTO
En dos tubos de foto colormetro marcados C (Control) y D (Desconocido) colocar:
C
Sustrato 1
1ml
1ml
Dejar unos minutos en bao de agua a 37C y agregar:
Muestra
-----20ul
Incubar a 37C .A los 7 minutos y medio exactos, agregar:
Reactivo de lodo 2
1ml
1ml
Mezclar por agitacin suave, retirar los tubos del bao y agregar:
Agua Destilada
8ml
8ml
Mezclar por inversin. Leer en foto colormetro con filtro rojo o en espectrofotmetro alrededor de
640nm, llevando a cero el aparato con agua destilada.
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCIN FINAL
El color de la reaccin es estable durante 1 hora por lo que la absorbancia debe ser leda dentro
de ese lapso. Si la temperatura ambiente es superior a 25 C, la lectura deber efectuarse dentro
de los 20 minutos.
Amilasa (UA/dl) =
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C - D
C
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X 1000
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Unidades: Una unidad Amilotica (UA) es la cantidad de enzima contenida en 10ml de muestra,
que puede hidrolizar 10mg de almidn en 30 minutos, en las condiciones de la reaccin. Es esta
tcnica se incuban 20ul de muestra con 0.5mg de almidn contenidos en 1ml se Sustrato 1
durante 7 minutos y medio, lo que equivale a incubar 100ml de suero con 10.000mg de almidn
durante 30 minutos. Para obtener las unidades de actividad amilsica, la fraccin de almidn
digerido se multiplica por 1000.
VALORES DE REFERENCIA.
CONDICIN CLNICA
Normal
Pancreatitis aguda
Pancreatitis crnica
Parotiditis
Parotiditis c/complicacin
Procesos abdominales agudos (sin pancreatitis)
SUERO (UA/dl)
< 120
300 a 12.000
hasta 200
200-350
mas de350
normal
ORINA (UA/hora)
< 260
mas de 900
mas de 300
350-750
mas de750
normal
RESULTADO
......................
CONCLUSIONES
CUESTIONARIO
1.
Qu es amilasa y cul es su funcin?
.
2.
Sobre qu enlaces glucosdicos acta la amilasa?
.
3.
Cul es el comportamiento de la amilasa en una pancreatitis? Por qu?

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.
4.
Mencione 5 patologas en las que se elevan los niveles de amilasa
5.
Adems del pncreas En qu rganos o tejidos de nuestro organismo se produce

amilasa?
.
6.
Durante el proceso de la prueba por qu no se debe pipetear con la boca?
7.
Si la muestra a utilizar es orina Cmo se la debe obtener?
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UNIDAD III :tema 11
TITULO: Determinacin de bilirrubina sangunea
OBJETIVO.
Realizar la valoracin de las bilirrubinas en una muestra de suero normal y una ictrica.
INTRODUCCIN:
La Bilirrubina, compuesto de degradacin de la hemoglobina, es captada por el hgado para su
conjugacin y excrecin en la bilis. Las alteraciones hepatocelulares u obstrucciones biliares
pueden provocar hiperbilirrrubinemias. La eritroblastosis fetal o anemia hemoltica del recin
nacido es una patologa provocada por incompatibilidad materno-fetal en la que se produce una
destruccin excesiva de glbulos rojos. Esto resulta en un severo aumento de la bilirrubina
srica con el consecuente riesgo de difusin del pigmento al sistema nervioso central, por lo que
la determinacin de la bilirrubina en estos nios recin nacidos resulta sumamente importante.
FUNDAMENTO DEL MTODO:
La bilirrubina reacciona especficamente con el cido sulfanlico diazotado produciendo un
pigmento color rojo-violceo (azo-bilirrubina) que se mide fotocolorimtricamente a 530nm.
Si bien la bilirrubina conjugada (directa) reacciona directamente con el diazorreactivo, la
bilirrubina no conjugada (indirecta) requiere la presencia de un desarrollador acuoso que
posibilite su reaccin. De forma tal que, para que reaccione la bilirrubina total (conjugada y no
conjugada) presente en la muestra, debe agregarse benzoato de cafena al medio de reaccin.
REACTIVO
- Desarrollador: solucin acuosa de benzoato de cafena 0.13mol/l, tamponada y estabilizada.
- Nitritos de Sodio: solucin de nitrito de sodio 0.07mmol/l y acido clorhdrico 0.17mol/l.
MUESTRA:
Suero, plasma o lquido amnitico
a) Recoleccin: obtener suero o plasma de la manera usual.
Proteger de la luz natural o artificial, envolviendo el tubo con papel negro.
Tambin es posible realizar la determinacin en lquido amnitico.
b) Aditivos: en caso de la muestra a emplear sea plasma, debe usarse heparina
Para su obtencin.
c) Sustancias interferentes conocida: hemlisis moderada o intensa inhiben la reaccin
directa, obtenindose valores de bilirrubina total falsamente aumentados.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la muestra debe ser preferentemente
fresca. En caso de no efectuarse el ensayo en el momento, el suero debe conservarse
hasta 48 horas en el refrigerador (2-10C) y la sangre entera no mas de 24 horas en el
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refrigerador o 12 horas a temperatura ambiente. El liquido amnitico es conveniente

mantenerlo congelado hasta el momento de efectuar el ensayo. La accin de la luz es
capaz de destruir en una hora hasta un 50% de la bilirrubina presente en la muestra. Es
por tal motivo que debe protegerse cuidadosamente.
MATERIAL
Micropipetas y pipetas capaces de medir los volmenes indicados.
Reloj o timer.
Longitud de onda: 530nm en espectrofotmetro o 520-550nm en foto colormetro con filtro
verde.
Temperatura de reaccin: temperatura ambiente.
Tiempo de reaccin: 5 minutos.
Volumen de muestra: 200ul.
PROCEDIMIENTO
1.- TCNICA PARA EL SUERO
En tres tubos foto colormetro marcados B (Blanco), D (Directa) y T (Total)
Colocar:
B
Muestra (suero)
Agua destilada
Desarrollador
Reactivo Sulfanlico
Diazorreactivo
200ul
2.5ml
----200ul
-----
200ul
2.5ml
----------200ul
200ul
------2.5ml
------200ul
Mezclar de inmediato cada tubo por inversin. Luego de 5 minutos, leer en espectrofotmetro a
530nm o en foto colormetro con filtro verde (520-550nm), llevando el aparato a cero con agua
destilada. Las lecturas pueden efectuarse entre 4 y 15 minutos, excepto para la bilirrubina directa
que debe leerse a los 5 minutos exactos. Si se lee antes, habr subvaloracin de los resultados
por reaccin incompleta. Si se lee despus, habr sobrevaloracin porque comienza a
reaccionar la bilirrubina libre.
Sueros Ictricos: debe emplearse la tcnica descrita pero con menores cantidades de muestra,
de acuerdo a la severidad de la ictericia. De tal forma, en caso de ictericia moderada se usaran
50 ul de suero mientras que frente a una ictericia intensa se requiere solo 20 ul.
Multiplicar el resultado obtenidos por 3.79 y 9.38 respectivamente.
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TCNICA PARA LQUIDO AMNITICO

Se determina bilirrubina total. En dos tubos de foto colormetro marcados B (Blanco) y T (Total)
Colocar:
B
MUESTRA (liquido amnitico)

Agua destilada
Desarrollador
Reactivo Sulfanlico
Diazorreactivo
1ml
1.5ml
----0.2ml
----
1ml
---1.5ml
----0.2 ml
Proceder de la misma manera que en la tcnica. Dividir el resultado final por 5,37.
Bilirrubina total (mg/l) = ( T B ) x F
Bilirrubina directa (mg/l)= ( D B ) x F
Bilirrubina libre= Bilirrubina total - Bilirrubina directa
El factor colorimetrito (f) debe calcularse con el Estndar de Bilirrubina.
Bilirrubina en suero o plasma
ADULTOS:
Directa: hasta 2 mg/l
Total : hasta 10 mg/l
RECIN NACIDOS:
Sangre de cordn
Hasta las 24hrs
Hasta las 48 hrs
Del 3 al 5 da
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Nacidos a termino
25mg/l
60mg/l
75mg/l
120mg/l
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Prematuros
.................
80 mg/l
120 mg/l
240 mg/l
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Los valores comienzan luego de disminuir para alcanzar el nivel promedio del adulto al mes de
nacimiento. En los prematuros, los niveles de bilirrubina tardan mas en alcanzar la normalidad,
dependiendo del grado de inmadurez heptica.
Bilirrubinas en lquido amnitico
Valores menores de 1mg/l son considerados normales, mientras que entre 1 y 2,7mg/l sugieren
la posibilidad de un feto afectado. Los niveles por encima de 2,7mg/l solo se encuentran en
presencia de eritroblastosis fetal. Si la cantidad de bilirrubina es superior a 4,7mg/l el feto ya se
encuentra afectado y tiene probablemente algn tipo de falla circulatoria. Si la cantidad de
bilirrubina sobrepasa los 9.5mg/l la muerte fetal es inminente.
RESULTADO
CONCLUSIONES
...........
CUESTIONARIO
1. Qu es bilirrubina?
.
2. Describa el metabolismo de las bilirrubinas
3. Defina el significado de ictericia neonatal
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4. Qu es kernicterus?
.
5. Por qu se debe proteger las muestras de la luz?
............................................................................................................................................................
............................................................................................................................................................
............................................................................................................................................................
............................................................................................................................................................
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UNIDAD O TEMA:
TITULO:
Fosfatasa alcalina
Determinacin de fosfatasa alcalina en sangre
FECHA DE ENTREGA:
17 Semana

OBJETIVOS
Determinar los niveles sricos de fosfatasa alcalina en una muestra normal y una patolgica.
INTRODUCCIN
La fosfatasa alcalina es una enzima ampliamente distribuida en el organismo. En el adulto
proviene en parte del hgado (fraccin termoestable) y en la parte del hueso, sistema
reticuloendoletial y vascular (fraccin termolbil), dando lugar a distintas isoenzimas. La actividad
srica de fosfatasa alcalina sea, en condiciones normales, alcanza su mayor actividad srica de
fosfatasa alcalina ose, en condiciones normales, alcanza su mayor actividad en los nios en
edad de crecimiento debido a que esta izo enzima se localiza en los osteoblastos. Entre las
patologas que afectan la actividad srica de fosfatasa alcalina, se pueden citar: carcinomas
metastsicos en hgado y en hueso, colestasis biliar, fenmenos osteoblsticos, trastornos de
mal absorcin acompaados de lesiones ulcerosas, e incluso lesiones en vas de reparacin
tales como infarto agudo de miocardio, infarto pulmonar o renal.
La fosfatasa alcalina del suero hidroliza el sustrato de fenilfosfato de sodio en medio alcalino a
pH 9.8 liberando fenol. Este ltimo reacciona con el diazo reactivo de Gomori y el color
desarrollado, medido a 490nm, es directamente proporcional a la actividad enzimtica.
REACTIVOS
- Sustrato: Comprimidos contenido cada uno 21.6 mulo de fenilfosfato de sodio en buffer
carbonato de pH 9.8.
- Reactivo diazo: comprimidos contenidos cada uno 4.5 mg de naftalen 1.5 disulfonato de la
sal de diazonio del 5- nitro 2 aminoasinol.
MUESTRA
Suero:
a) Recoleccin: se debe obtener suero de la manera usual.
b) Aditivos: no se requieren.
c) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: emplear suero preferentemente fresco. En
caso de no efectuarse el ensayo dentro de las 6 horas posteriores a su obtencin, la muestra
debe conservarse en el congelador. Si se mantiene a temperatura ambiente o en la heladera (210C) se observan aumentos de actividad de fosfatasa alcalina del 5 al 30% en 24horas.
d) Sustancias interferentes conocidas:
Hemlisis visibles o intensas pueden ser causa de ligeras variaciones en los resultados.
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Los anticoagulantes comunes (EDTA di sdico, oxalato, citrato o fluoruro) producen entre 50 y
90% de inhibicin de la actividad de fosfatasa alcalina.
MATERIAL
Micropipetas y pipetas para medir los volmenes indicados.
Tubos de ensayo y de foto colormetro
Bao de agua a 37%
Reloj o timer.
Longitud de onda: 405 nm en espectrofotmetro o 490 540nm en foto colormetro con filtro
verde.
Temperatura de reaccin: 37%C
Tiempo de reaccin: 3 minutos
Volumen final de reaccin: 2.52 ml
PROCEDIMIENTO
En un tubo mantenida a la temperatura de reaccin colocar:
Sustrato reconstituido
2.5 ml
Preincubar unos minutos. Luego agregar:
Suero
20 ul
Mezclar inmediatamente. Leer la absorbancia inicial y disparar simultneamente el cronmetro.
Registrar la absorbancia luego de 1, 2, y 3 minutos de la primera lectura. Determinar la diferencia
promedio de absorbancia.
Fosfatasa Alcalina (U/l ) = A x 6.812
Adultos: 65 300 U/l
Nios: Hasta 645 U/l
RESULTADO
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CONCLUSIONES
CUESTIONARIO
1. Qu es la fosfatasa alcalina?
2. Dnde se forma y qu funcin tiene la fosfatasa alcalina en nuestro organismo?
......
3. Porqu en los nios los valores de fosfatasa alcalina frecuentemente son mas elevados que
en los adultos?
4. Cul es el valor diagnostico que tiene la fosfatasa alcalina?
5. Qu enzimas se evalan en laboratorio clnico correspondientes al perfil heptico?
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GUA DE INVESTIGACIN PRACTICA - GIP #11
UNIDAD O TEMA:
TITULO:
Calcio
Valoracin de calcio en suero sanguneo
FECHA DE ENTREGA: 17 Semana

OBJETIVO
Valorar el calcio en una muestra sangunea
INTRODUCCIN
El calcio es esencial en la mayora de las reacciones de la coagulacin sangunea y en la
regulacin de la excitabilidad de las fibras musculares. Su concentracin en suero esta regulada
por la accin de factores tales como niveles de parathormona, vitamina D y fsforo,
observndose de fluctuaciones fisiolgicas debidas a edad, sexo, embarazo, actividad fsica,
cambios gestacionales (por accin de la luz solar). La hipercalcemia esta relacionada con
distintas patologas: hiperparatiroidismo, neoplasias seas, intoxicaciones con vitamina D. La
hipocalcemia se asocia con desordenes tales como hipoparatiroidismos, deficiencia de vitamina
D, mal absorcin.
El calcio reacciona con la cresolftalein complexona (cfx) a pH 11, dando un complejo de adicin
color magenta que se mide fotocolorimetricamente a 570nm.
REACTIVOS
Reactivo Cfx: solucin de cresolftalein complexona 3,7 mmol/l
Buffer: solucin de amnometil propanol 0,2mol/l en metanol 35% V/V para pH
final 11.
-
Standard: solucin de calcio 10 mg/dl.
MUESTRA
Suero u orina
a) Recoleccin:
-Suero: obtener de la manera usual.
-Orina: recomendar al paciente una dieta libre de calcio (eliminando la leche y todos sus
derivados) durante por lo menos 3 das previos al anlisis y recolectar orina de 24hra sobre
20 ml de acido clorhdrico al 50%. Llevar a 2 litros con agua y homogenizar.
b) Aditivos:
Si la muestra a emplear es orina, s debe acidificar con acido clorhdrico al 50% durante su
recoleccin.
Los anticoagulantes complejan al calcio produciendo resultados errneos.
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No interfieren: protrinas hasta 15g/dl, fosfatos hasta 5g/l bilirrubina gasta 200mg/l, hemlisis
intensa o lipemia hasta 15g/l.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento:
La muestra debe ser preferentemente fresca. Puede conservarse una semana en
refrigerador (2-10C) o mas de 5 meses en el congelador, sin agregado de conservadores
MATERIAL
1. Provisto:
Varilla plstica.
2. No previsto:
Micropipetas y pipetas capaces de medir los volmenes indicados.
Tubos de foto colormetro o cubetas espectrofotomtricas.
Longitud de onda: 570nm en espectrofotmetro o 560-590nm en foto colormetro con filtro
rojo.
Temperatura de reaccin: temperatura ambiente (15-25C).
Volumen de muestra: 20ul.
Los volmenes de muestra y de reactivos pueden disminuirse o aumentarse proporcionalmente.
PROCEDIMIENTO
Se aconseja trabajar directamente en tubos de foto colormetro de manera de poder determinar
un Blanco interno para cada ensayo, condicin indispensable para controlar las trazas de calcio
que pudiera haber escapado al proceso de lavado de material.
En dos tubos de foto colormetro marcados S (Standard) y D (Desconocido) colocar:
S
Reactivo Cfx
50 ul
50 ul
Buffer
3.5 ml
3.5 ml
Mezclar con la varilla provista y leer la absorbancia de ambos tubos (blancos internos: BS Y BD)
en espectrofotmetro a 570 nm en foto colormetro con filtro rojo (560 590nm) llevando el
aparador a cero con agua destilada. Luego agregar:
Standard
20 ul
------Muestra
-----20 ul
Mezclar inmediatamente. Luego de 10 minutos, volver a leer (S y D).
Corregir las lecturas restando los Blancos internos correspondientes:
S- BS= S
D-BD= D
1) Calcio srico (mg/dl)= Dx f
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= 10 mg/dl
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2) Calcio urinario (mg/24hrs) = D x 200 mg/24hrs

S
Suero: 8.5-10.5 mg/dl
Orina: 60-200 mg/24hrs
RESULTADO
CONCLUSIONES
CUESTIONARIO
1. Cul es la funcin del calcio en nuestro organismo?
.
2. Qu cuidados se deben tener en la determinacin del calcio srico?
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3. Porqu se valora el calcio en un muestra de orina de 24 horas?
.
4. En qu patologas el calcio se eleva?
5. Cul es el valor de referencia del calcio inico en nuestro medio?
..
6. Qu es la osteoporosis? A causa de qu aparece esta enfermedad?
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Medicina Quimica Sanguinea

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