Bioquimica Metabolica TC LBM

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD
Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente-ECAPMA

Programas: Zootecnia; Agronoma; Ingeniera Agroforestal
LABORATORIOS DE BIOQUMICA METABLICA-LBM

Prof: Jairo Granados., MSc
PRCTICA 1
Determinacin de Actividad Uresica (AU) en suelos, pastos y

Forrajes
INTEGRANTES DEL GRUPO
Freddy Antonio camperos lazaro, cdigo 88211210 grupo 13
Marianaycarlos1012@yahoo.es
LILIANA PATRICIA NIO ESTUPIAN, 23.351632 grupo________
lilipcilico79@yahoo.es . Grupo_________
JHON ALEXANDER DIAZ LOZADA, 93471275, grupo_____
diazlozada1974@hotmail.com grupo_____
JAIME PERILLA, 79393133, jaeduperm@hotmail.com. Grupo 352001-20
DIRECTOR DE CURSO
Jairo Granados Moreno, jairo.granados@unad.edu.co
PROGRAMA: Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio

Ambiente-ECAPMA
24 DE NOVIEMBRE/2012
FECHA: _______________________


RESUMEN
Con el desarrollo de la prctica 1, se busca determinar la cantidad de urea hidrolizada
que se encuentra en dos muestras de suelo, una de forraje y harina, a travs del uso de
ureasa - enzima amidohidrolasa la cual cataliza la hidrlisis de urea a dixido de
carbono y amonaco.
PALABRAS CLAVES: Ureasa, enzima amidohidrolasa, coenzima, RBE hidrolisis,

sustrato.
INTRODUCCIN
La prctica se centra en producir la hidrlisis de la urea por medio de la enzima

amidohidrolosa denominada ureasa y cuantificar la actividad uresica (AU) en muestras
de origen biolgico como suelo, forraje y harina de alimento para animales mediante la
tcnica volumtrica de Berthelot.
El preinforme consta de concepto que se deben conocer para el buen desarrollo de la
prctica, conceptos como: Biocatalizador; protena; Enzima; Cintica qumica; Velocidad
de reaccin; ureasa; actividad uresica ; Energa de activacin; Sustrato; Hidrlisis;
Incubacin; pH; Solucin buffer; Titulacin; inhibidores enzima.
Se tiene claro los materiales a utilizar junto con los reactivos y la cantidad que se debe
utilizar.


1. FUNDAMENTACIN TERICA
CONCEPTOS PREVIOS
Biocatalizador: es un catalizador de las reacciones bioqumicas de los seres vivos. Se
consideran biocatalizadores las enzimas, las hormonas y las vitaminas. Un biocatalizador
reduce o aumenta la energa de activacin de una reaccin qumica, haciendo que sta
sea ms rpida o ms lenta. Cada reaccin qumica en un ser vivo, ya sea unicelular o
multicelular, requiere la presencia de uno o ms biocatalizadores (enzimas), pues si no
existieran stas ocurriran en desorden total.
Protena; son biomolculas formadas por cadenas lineales de aminocidos. Por sus
propiedades fsico-qumicas, las protenas se pueden clasificar en protenas simples
(holoproteidos), que por hidrlisis dan solo aminocidos o sus derivados; protenas
conjugadas (heteroproteidos), que por hidrlisis dan aminocidos acompaados de
sustancias diversas, y protenas derivadas, sustancias formadas por desnaturalizacin y
desdoblamiento de las anteriores. Las protenas son indispensables para la vida, sobre
todo por su funcin plstica (constituyen el 80% del protoplasma deshidratado de toda
clula), pero tambin por sus funciones biorreguladora (forma parte de las enzimas) y de
defensa (los anticuerpos son protenas).
Enzima: Las enzimas son los catalizadores biolgicos que facilitan las reacciones
qumicas que tienen lugar en los seres vivos. Sin ellas las reacciones qumicas seran tan
lentas que la vida se detendra. Adems, las enzimas se diferencian de cualquier otro
catalizador gracias a su alta especificidad tanto en las reacciones que catalizan como en
el sustrato involucrado en ellas.
Cintica qumica: es un rea de la fisicoqumica que se encarga del estudio de la

rapidez de reaccin, cmo cambia la rapidez de reaccin bajo condiciones variables y qu
eventos moleculares se efectan mediante la reaccin general (Difusin, ciencia de
superficies, catlisis). La cintica qumica es un estudio puramente emprico y
experimental; la qumica cuntica permite indagar en las mecnicas de reaccin, lo que se
conoce como dinmica qumica.
Velocidad de reaccin: se define como la cantidad de sustancia que reacciona por

unidad de tiempo. Por ejemplo, la oxidacin del hierro bajo condiciones atmosfricas es


una reaccin lenta que puede tardar muchos aos, pero la combustin del butano en un
fuego es una reaccin que sucede en fracciones de segundo.
Ureasa: es una enzima que cataliza la hidrlisis de urea a dixido de carbono y

amonaco. La reaccin ocurre de la siguiente manera:
(NH2)2CO + H2O CO2 + 2NH3
Urea: es un compuesto qumico cristalino bipolar e incoloro, de frmula CO(NH2)2. Se
encuentra abundantemente en la orina y en la materia fecal. Es el principal producto
terminal del metabolismo de protenas en el hombre y en los dems mamferos. La orina
humana contiene unos 20g por litro, y un adulto elimina de 25 a 39g diariamente. En
cantidades menores, est presente en la sangre, en el hgado, en la linfa y en los fluidos
serosos, y tambin en los excrementos de los peces y muchos otros animales.
Actividad uresica: Los factores inhibidores de la tripsina, como la ureasa y otros

componentes de la soja, son termolbiles. Por lo tanto, la actividad de estas sustancias
disminuye en funcin del tiempo e intensidad del tratamiento trmico aplicado. Como regla
general, se considera que cuando la actividad de la ureasa es mnima los dems factores
antinutricionales tambin han dejado de ser activos o se encuentran presentes en bajas
proporciones. La tcnica para determinar la actividad de la ureasa es rpida y sencilla
(40), razones por las que su uso se ha generalizado. Los resultados se expresan en
unidades de pH.
Energa de activacin: en qumica y biologa es la energa que necesita un sistema

antes de poder iniciar un determinado proceso. La energa de activacin suele utilizarse
para denominar la energa mnima necesaria para que se produzca una reaccin qumica
dada. Para que ocurra una reaccin entre dos molculas, stas deben colisionar en la
orientacin correcta y poseer una cantidad de energa mnima. A medida que las
molculas se aproximan, sus nubes de electrones se repelen. Esto requiere energa
(energa de activacin) y proviene del calor del sistema, es decir de la energa
traslacional, vibracional, etctera de cada molcula.
Sustrato: En bioqumica, un sustrato es una molcula sobre la que acta una enzima.
Las enzimas catalizan reacciones qumicas que involucran al sustrato o los sustratos. El
sustrato se une al sitio activo de la enzima, y se forma un complejo enzima-sustrato. El
sustrato por accin de la enzima es transformado en producto y es liberado del sitio
activo, quedando libre para recibir otro sustrato.


Hidrlisis: es una reaccin qumica entre una molcula de agua y otra molcula, en la
cual la molcula de agua se divide y sus tomos pasan a formar parte de otra especie
qumica. Esta reaccin es importante por el gran nmero de contextos en los que el agua
acta como disolvente.
Incubacin: El periodo de incubacin, es el tiempo comprendido entre la exposicin a

un organismo, qumico o radiacin patognico, y cuando los signos y sntomas aparecen
por primera vez. El periodo puede ser tan corto como algunos minutos, o tan largo como
treinta aos en el caso de la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob.
pH: es una medida de la acidez o alcalinidad de una disolucin. El pH indica la

concentracin de iones hidronio [H3O+] presentes en determinadas sustancias. La sigla
significa "potencial de hidrgeno
Solucin buffer: Un tampn, buffer, solucin amortiguadora o solucin reguladora

es la mezcla en concentraciones relativamente elevadas de un cido dbil y su base
conjugada, es decir, sales hidrolticamente activas. Tienen la propiedad de mantener
estable el pH de una disolucin frente a la adicin de cantidades relativamente pequeas
de cidos o bases fuertes. Este hecho es de vital importancia, ya que solamente un leve
cambio en la concentracin de hidrogeniones en la clula puede producir un paro en la
actividad de las enzimas.
Titulacin: Consiste en adicionar gradualmente un cido a una base o viceversa para

que se complete una reaccin de neutralizacin. La sustancia que se adiciona se
denomina titulante y la que est siendo neutralizada se llama analito. Esta reaccin se
lleva a cabo para determinar la concentracin del analito, pues conociendo la del titulante
y el volumen adicionado, sta se puede determinar con ayuda de la relacin
estequiomtrica, dada por la ecuacin qumica balanceada de la reaccin que est
ocurriendo.
lnhibidores enzimticos: son molculas que se unen a enzimas y disminuyen su
actividad. Puesto que el bloqueo de una enzima puede matar a un organismo patgeno o
corregir un desequilibrio metablico, muchos medicamentos actan como inhibidores
enzimticos. Tambin son usados como herbicidas y pesticidas. Sin embargo, no todas
las molculas que se unen a las enzimas son inhibidores; los activadores enzimticos se
unen a las enzimas e incrementan su actividad.
Enzima amidohidrolasa: es la enzima que cataliza la hidrlisis de las amidas y
produce amoniaco y el correspondiente cido carboxlico.
R-CONH2 + H2O NH3 + R-COOH


Cintica Michaeliana: describe la velocidad de reaccin de muchas reacciones

enzimticas. Su nombre es en honor a Leonor Michaelis y Maude Menten. Este modelo
slo es vlido cuando la concentracin del sustrato es mayor que la concentracin de la
enzima, y para condiciones de estado estacionario, o sea que la concentracin del
complejo enzima-sustrato es constante.
Lisosomas:
son orgnulos relativamente grandes, formados por el retculo

endoplasmtico rugoso y luego empaquetadas por el complejo de Golgi, que contienen
enzimas hidrolticas y proteolticas que sirven para digerir los materiales de origen externo
(heterofagia) o interno (autofagia) que llegan a ellos. Es decir, se encargan de la digestin
celular.
Coenzima: son cofactores orgnicos no proteicos, termoestables, que unidos a una

apoenzima constituyen la holoenzima o forma catalticamente activa de la enzima. Tienen
en general baja masa molecular (al menos comparada con la apoenzima) y son claves en
el mecanismo de catlisis, por ejemplo, aceptando o donando electrones o grupos
funcionales, que transportan de un enzima a otro.
Apoenzima: es la parte proteica de una holoenzima, es decir, una enzima que no puede
llevar a cabo su accin cataltica desprovista de los cofactores necesarios, ya sean iones
metlicos (Fe, Cu, Mg, etc.) u orgnicos, que a su vez puede ser una coenzima o un
grupo prosttico, dependiendo de la fuerza de sus enlaces con la apoenzima. La
apoenzima, es por tanto, catalticamente inactiva, hasta que se le une el cofactor
adecuado.
NNP: Se denomina Nitrgeno no proteico a los compuestos de nitrgeno que pueden ser
convertidos en protenas por algunos organismos vivos. Muchos organismos superiores
no puedes obtener aminocidos de otra formas, mas que absorbindolos de la dieta. A los
sumo pueden convertir algunos aminocidos en otros diferentes. Los compuestos que
forman el NNP son los que contienen amonaco, nitritos y nitratos y otros como la urea, el
biuret o el cido rico.
Amonio: El catin amonio es un catin poliatmico cargado positivamente, de frmula

qumica NH4+. Tiene una masa molecular de 18,05 y est formado por la protonacin de
amonaco (NH3). El ion resultante tiene una pKa de 9,25. Los nombres amonio y aminio
tambin son nombres generales para las aminas sustituidas protonadas o cargadas
positivamente, y los cationes amonio cuaternario N +R4, donde uno o ms tomos de
hidrgeno son reemplazados por grupos alquilo.


1.1 MAPA CONCEPTUAL

CONCEPTO
CONCEPTO
Ureasa
Enzima amidohidrolasa
Lizosomas
Clulas animales y vegetales
Sustrato
Urea
H2N-CO-NH2 + H2O
CO2
RBE hidrlisis
Cintica Michaeliana
Rumiantes
Coenzima
Apoenzima
NNP
Amonio
Parmetros Cinticos
Km y Vmx
NH4OH +


1.2 Mentefacto Actividad Biolgica y Enzimtica en suelos
2. MATERIALES Y MTODOS
2.1 LISTA DE MATERIALES Y EQUIPOS UTILIZADOS
Cuadro 1. Lista de materiales y equipos utilizados en la prctica 1


MATERIAL EQUIPO
APLICACIN
Probeta
Volumetra
Balanza analtica 0,0001g
Pesada(Gravimetra)
Montaje de titulacin
Neutralizacin
Tubos de ensayo con gradilla
Contencin de muestras lquidas
Pinzas para bureta
Sostienen la bureta
Erlenmeyer de 125mL
Aerbica y anaerbica
Pipeta de 5 mL
Volumetra
Pipeta de 10mL
Volumetra
Matraz aforado de 100mL
Volumetra
Bao termostatado
Controlador de temperatura
Beaker de 400mL
Volumetra
Bureta de 25mL
Volumetra
Soporte universal.
Sostiene instrumentos
2.2 LISTA DE REACTIVOS UTILIZADOS

Cuadro 2. Reactivos utilizados en la prctica 1


REACTIVO(NOMBRE)
FRMULA MOLECULAR
CONCENTRACIN
Urea
H2N-CO-NH2
0,25M
Ureasa
(NH2)2CO + H2O CO2 +

2NH3
0,1 %
Fosfato
PO43
P:7
Cloruro de Mercurio
HgCl2
1%
cido clorhidrico
HCl
0,1N
Cloruro de sodio
NaOH
1%
Indicador Tashiro
C15H14N3O2Na +
C16H18N3SCl - 3H2O +
C2H6O


2.3 PROCEDIMIENTOS
2.3.1 Protocolos de muestras analizadas (muestre la informacin fundamental
sobre el origen de cada una. Por ej: Elaborar una ficha formato que especie,
nombre cientfico, lugar de muestreo, datos agros climatolgicos, animales, etapa
productiva, alimentacin etc.)
Especie
Nombre cientfico
Lugar de muestreo
Datos agroclimatolgicos
Tipo de siembra
Plagas y enfermedades
Toxicidad
Tolera
Muestra de forraje
Pennisetum purpurem
Cuba CT-115
(
)BOYACA
.CORTE
.
2.3.2 Flujograma general de los procedimientos desarrollados que puede

incluir:


Alistar
montaje de
titulacin
Repetir con los

otros tubos
Erlenmeyer
solucin
blanco
Adicionar
lentamente
HCL
Color rosadoviolceo
Registrar ml de
HCL gastados
Repetir con tubo

ST
3. RESULTADOS Y DISCUSIN
3.1 TABLAS DE DATOS
Tabla 1.Volmenes de HCl 0,1N, empleados en la titulacin del NH4OH
Tubos
Tipo de Muestra
Blanco
St
Ureasa
Harina
Suelo
Forraje
mL gastados de HCl
0,1N


Tipo de muestra
Harina
Suelo
Forraje
Suelo
Suelo
Vs (mL)
W (g)
3.2. Clculos
3.2.1 Actividad Uresica en el tubo estndar
3.2.2. Actividad Uresica de la harina


3.2.3 Actividad Uresica en el suelo (tubo 2)


3.2.4. Actividad Uresica del forraje


3.2.5. Actividad Uresica en el suelo (tubo 4)
3.3TABLA DE RESULTADOS
Tabla 2. Actividad Uresica de las muestras biolgicas
TUBO
TIPO DE
MUESTRA
AU(


Stndar
Harina
Suelo
Forraje
3.3.1 GRFICAS
ojo cambiar datos por los del laboratorio para el diagrama


3.4 DISCUSIN DE RESULTADOS
ojo cambiar datos por los del laboratorio para las discuciones
La muestra de harina obtuvo una actividad uresica de 6291, 57 mol urea/min, lo
cual quiere decir que su disminucin no fue muy significativa y por lo tanto sus anti
nutrientes se encuentran activos en alto grado, mientras que con las muestras de
suelo (- 464.63 mol/min) y forraje (-89,16 mol/min) su disminucin fue amplia.
En suelos con pHs mayores que 6.3, cuando se agrega urea al suelo, sta sufre
un proceso de hidrlisis, generando como productos de la reaccin amonio (NH 4+)
y anin bicarbonato (HCO3-), la mayor actividad uresica se concentra en el
incremento significativo del pH alrededor del grnulo de urea ya que consume
protones. Ese incremento del pH desplaza el equilibrio del amonio y amonaco
favoreciendo la volatilizacin del NH3 a la atmsfera.
En la harina de comida para animales, La Ureasa cataliza la descomposicin de
urea en Amonaco, dixido de Carbono y agua. El amonaco aumenta el pH del
sustrato. Los valores aceptables oscilan entre 0.05 y 0.5; valores menores indican
sobre cocimiento y mayores falta de cocimiento.
4. CONCLUSIONES
1. Los resultados obtenidos en las pruebas de laboratorio, nos muestran el nivel
de ph que puede favorecer a no, el desarrollo sostenible en una granja en
determinado momento; la muestra de harina de alimento para animales nos
muestra que est pasada de cocimiento, mientras que la de suelo est muy por
bajo y si se analiza podemos decir que puede ser una condicin ptima para
inhibir los anti nutrientes:


5. BIBLIOGRAFA
1. es.scribd.com/.../Manual-de-Tecnicas-Para-Lab-Oratorio-de-Aliment...
2. http://surconsult.com.py/ccuj/revistas/2012/feb_2012.pdf
3. es.wikipedia.org/wiki/
4. http://www.planetasoja.com/trabajos/trabajos800.php?
id1=3083&publi=&idSec=37&id2=3096
5. http://www.buenastareas.com/ensayos/Tilulaciones-QuimicasDefiniciones/2046737.html


PRCTICA 2
Capacidad Amortiguadora y Potencial Amortiguador de muestras

Biolgicas
RESUMEN
El pH o potencial hidrogenado es uno de los procedimientos analticos ms importantes y
ms utilizados en bioqumica por la razn de que esta medida determina caractersticas
notables de la estructura y la actividad de las macromolculas biolgicas por consiguiente
la conducta de las clulas y del organismo.
El objetivo principal de la siguiente practica es la de determinar las caractersticas
especiales de cada sustancia por medio de la determinacin del pH y la de observar la
capacidad amortiguadora o de resistencia a los cambios bruscos de pH que poseen
algunas sustancias presentes en los organismos vivos.
PALABRAS CLAVES: disociacin electroltica, soluciones Buffer, Equilibrio cido

base, capacidad amortiguadora, potencial amortiguador.
INTRODUCCIN
Soluciones amortiguadoras son aquellas soluciones cuya concentracin de hidrogeniones
varan muy poco al aadirle cidos o bases fuertes. El objeto de su empleo, tanto en
tcnicas de laboratorio como en la finalidad funcional del plasma, es precisamente impedir
o amortiguar las variaciones de pH y, por eso, suele decirse que sirven para mantener
constante el pH.
Para la presente prctica se tendr en cuenta sistemas como Sistema Bicarbonato
(anhdrido carbnico/bicarbonato), el cual es el buffer amortiguador principal en el
fluido extracelular, dentro de la clula roja de la sangre y en el plasma. En este sistema el
CO2 se comporta como cido voltil y su concentracin puede ser controlada por medio
de la tasa de respiracin del animal; tambin se utiliz el Sistema Fosfato, todos los
fosfatos en el animal vienen de la dieta, a un pH de 7.40, la mayora del fosfato en los
compartimientos fluidos existe en la forma de las especies inicas H2PO4-1 y HPO4-2,
cuando el pH en los fluidos corporales comienza a decaer, a especie HPO4 -2 se vuelve
importante corno un aceptante de protones y se convierte en la especie H2PO4 -1, as
cuando el pH se eleva por encima de 7.40, la especie H2PO4 -1 dona un protn al fluido y


se convierte de nuevo en la especie HPO 42. El sistema fosfatos es el amortiguador ms

importante en la orina, debido a que los protones excretados en la orina son
principalmente en la forma de la especie H2PO4-1.
CONCEPTOS PREVIOS:
cido dbil: es aquel cido que no est totalmente disociado en una disolucin acuosa.
Aporta iones
al medio, pero tambin es capaz de aceptarlos.
Base dbil: Una base dbil tambin aporta iones OH al medio, pero est en equilibrio
el nmero de molculas.
pKa: es la fuerza que tienen las molculas de disociarse (es el logaritmo negativo de la
constante de disociacin cida de un cido dbil).
Una forma conveniente de expresar la relativa fortaleza de un cido es mediante el valor

de su pKa, que permite ver de una manera sencilla en cambios pequeos de pK a los
cambios asociados a variaciones grandes de Ka. Valores pequeos de pKa equivalen a
valores grandes de Ka (constante de disociacin) y, a medida que el pKa decrece, la
fortaleza del cido aumenta.
Electrolitos: es cualquier sustancia que contiene iones libres, los que se comportan
como un medio conductor elctrico. Debido a que generalmente consisten de iones en
solucin, los electrlitos tambin son conocidos como soluciones inicas, pero tambin
son posibles electrolitos fundidos y electrolitos slidos.
Disociacin electroltica: es el proceso mediante el cual se separan los iones de un

compuesto. Hay sustancias que son capaces de conducir corriente elctrica cuando se
encuentran en una disolucin, a estas sustancias reciben el nombre de electrolitos.
Tampones fisiolgicos: Tambin denominados sistemas tampn o buffer. Son la

primera lnea de defensa ante los cambios de pH gracias a la capacidad que tienen para
captar o liberar protones de modo inmediato.


Ecuacin de Henderson-Hasselbach: es una frmula qumica que se utiliza para

calcular el pH, de una solucin buffer, o tampn, a partir del pKa (la constante de
disociacin del cido) y de las concentraciones de equilibrio del cido o base, del cido o
la base conjugada.
Soluciones Buffer: Tambin se les denomina solucin amortiguadora lampn y son

aquellas que se oponen a los cambios de pH, cuando se les adicionan cidos o lcalis
(hidrxidos). su accin se basa principalmente en la absorcin de hidrogeniones (H+)
iones hidrxilo (OH').En forma general, una solucin amortiguadora est conformada por
una mezcla binaria de un cido dbil y una sal del mismo cido proveniente de base
fuerte tambin, una base y una sal de esta base proveniente de un cido fuerte.
Homestasis: es la caracterstica de un sistema abierto o de un sistema cerrado o una

conjugacin entre ambos, especialmente en un organismo vivo, mediante la cual se
regula el ambiente interno (metabolismo), para mantener una condicin estable y
constante.
Equilibrio cido base: El equilibrio cido bsico esta relacionado con la conservacin
de las concentraciones normales de iones hidrogeno(H+), en los lquidos del cuerpo este
equilibrio es mantenido por un sistema de amortiguadores en los lquidos extracelular e
intracelular. Para una persona sana el pH en el LEC es mantenido entre 7.35 y 7.45.
Metabolismo: es el conjunto de reacciones bioqumicas y procesos fsico-qumicos que

ocurren en una clula y en el organismo. Estos complejos procesos interrelacionados son
la base de la vida a escala molecular, y permiten las diversas actividades de las clulas:
crecer, reproducirse, mantener sus estructuras, responder a estmulos, etc.
ATP : La biomolcula del El ATP es considerada como un nucletido energtico, porque

contiene una base nitrogenada que corresponde a la Adenina, un monosacrido pentosa
denominado ribosa y un grupo trifosfato, el cual almacena la energa libre metablica en
sus enlaces qumicos fosfoanhdridos de ster.
Sistema
Bicarbonato
(anhdrido
carbnico/bicarbonato) : Este el buffer
amortiguador principal en el fluido extracelular, dentro de la clula roja de la sangre y en el

plasma. En este sistema el CO2 se comporta como cido voltil y su concentracin puede
ser controlada por medio de la tasa de respiracin del animal.
Sistema Fosfato: Todos los fosfatos en el animal vienen de la dieta, a un pH de 7.40, la

mayora del fosfato en los compartimientos fluidos existe en la forma de las especies
inicas H2PO4-1 y HPO4-2, cuando el pH en los fluidos corporales comienza a decaer, a


especie HPO4-2 se vuelve importante corno un aceptante de protones y se convierte en la

especie H2PO4-1, as cuando el pH se eleva por encima de 7.40, la especie H2PO4 -1 dona
un protn al fluido y se convierte de nuevo en la especie HPO 42. El sistema fosfatos es el
amortiguador ms importante en la orina, debido a que los protones excretados en la
orina son principalmente en la forma de la especie H2PO4-1.
Aminocidos: Todos los aminocidos componentes de las protenas son L-alfaaminocidos. Por lo tanto, estn formados por un carbono alfa unido a un grupo
carboxilo, a un grupo amino, a un hidrgeno y a una cadena (habitualmente denominada
Radical alquilo o arilo) de estructura variable, que determina la identidad y las
propiedades de los diferentes aminocidos; existen cientos de cadenas R por lo que se
conocen cientos de aminocidos diferentes, pero slo 20 forman parte de las protenas y
tienen codones especficos en el cdigo gentico.
Hemoglobina: es un amortiguador muy importante y slo so encuentra en la clula roja

de la sangre. Sirve como un amortiguador excelente por varias razones. Las dos razones
principales son su alta concentracin en la sangre y su altsimo contenido del aminocido
histidina. Este aminocido tiene una cadena lateral nica llamada imidazol. Esta cadena,
puede atraer a los protones y sacarlos de los fluidos corporales o puede donar protones
dichos fluidos en el intento de mantener el pH cerca de 7.40.
Capacidad Amortiguadora: Se utiliza para comparar las eficiencias de las soluciones

amortiguadoras y se define como: La cantidad en miliequivalentes (meq) de cido o base
fuerte que puede neutralizar la solucin amortiguadora, sufriendo un cambio de pH en una
unidad. Matemticamente, se expresa como la relacin cociente entre el incremento de
cido o base fuerte con respecto al incremento del pH, es decir: = B / (pH), Donde:
= Capacidad amortiguadora de la solucin, B = Incremento de cido o base fuerte, meq
/(pH) (pH) = incremento en unidades de pH


1.1 MAPA CONCEPTUAL

CONCEPTOS
CONCEPTOS
protenas
Sangre
Capacidad amortiguadora
Potencial amortiguador
Savia
pH
Aminocidos
Fotosntesis
Metabolismo
Alimento
Buffer
cido dbil+ Sal
Hemoglobina
Aminocidos
HCO3-
Fosfatos
Vacuola
Saliva
Pulmn
Rumiantes
Respiracin celular
Plantas
Anhidrasa carbnica
CO2 + H2O




1.2 MENTEFACTO CONCEPTUAL

CONCEPTO
CONCEPTO
Bicarbonato
Potencial de Hidrgenos
Controlan Metabolismo cidoBase

H2PO4=
Acidosis Respiratoria
Alcalosis Respiratoria
Dieta
Balance electroltico
Estomas
Mitocondria
Sales
Minerales
Buffer Biolgicos
Hemoglobina
Reguladores de pH
Aminocidos
Respiracin
Jadeo
Agua
Potencial Hdrico
Catabolismo
RBE


2.1 LISTA DE MATERIALES Y EQUIPOS


Cuadro 3. Lista de materiales y equipos utilizados en la prctica
MATERIAL EQUIPO
APLICACIN
Bureta Graduada
Titulacin Volumtrica
Pesada(Gravimetra)
Erlenmeyer de 125mL
Volumtrica
Pipetas graduadas de 10mL
Volumtrica
Esptula metlica
Retirar pequeas cantidades de

sustancias slidas de los frascos.
Agitador de vidrio
Mezclar y revolver
Probeta graduada de 100mL
Volumtrica
Soporte universal
Sujetar las pinzas
Beaker de 250mL
Volumtrica
Potencimetro
Controla la intensidad de la
corriente elctrica
Equipo de titulacin
Volumtrico
Muestras biolgicas
(concentrado ,suelo y forraje )


2.2 LISTA DE REACTIVOS UTILIZADOS

Cuadro 4. Reactivos utilizados en la prctica
REACTIVO(NOMBRE)
FRMULA
MOLECULAR
CONCENTRACIN
cido Clorhdrico
HCl
0,1N
Hidrxido de sodio
NaOH
0,1N
Fenolftalena
C20H14O4
2 gotas
Rojo de metilo
C15H15N3O2
Agua destilada
H2O
Solucin buffer
fosfato
NaH2PO4
PH neutro 2%
2.3 PROCEDIMIENTOS
Cuadro 5.Tcnicas analticas utilizadas en la prctica
VARIABLE(INDICADOR)
EVALUADA(O)
TCNICA ANALTICA
UTILIZADA
pH
Mtodo potenciomtrico
Capacidad Amortiguadora
Mtodo de titulacin volumtrica


2.3.1
Muestra de forraje
Especie
Nombre cientfico
Lugar de muestreo
Datos agroclimatolgicos
Tipo de siembra
Plagas y enfermedades
Toxicidad
Tolera
2.3.2 Flujograma general de los procedimientos desarrollados que puede
inclur :
3. RESULTADOS Y DISCUSIN


3.1 TABLAS DE DATOS

Tabla 1..Datos volumtricos para capacidad amortiguadora de muestras biolgicas
Muestras
Agua destilada
Buffer fosfato
Leche
Vm (mL)
V NaOH 0,1N (mL)
Tabla 2.Datos potenciomtricos para capacidad amortiguadora de muestras biolgicas

Muestras
Harina
Suelo
Forraje
Valores evaluados
Vm (mL)
pH1
100
5.11
100
4.55
100
4.68
Wm (g)
5.0104
5.0575
5.0280
pH2
4.41
2.47
2.47
ojo cambiar datos por los del laboratorio para los PH
3.2 ECUACIONES DE CLCULO

3.2.1. Mtodo de titulacin volumtrica
del agua destilada
ojo cambiar datos por los del laboratorio

para LOS EJERCICIOS


Potencial Amortiguador
del buffer fosfato

para LOS EJERCICIOS


de la leche

para LOS EJERCICIOS
3.2.2. Tcnica potenciomtrica
Con respecto a HCl de la harina.


ojo cambiar datos por los del laboratorio para

LOS EJERCICIOS
Con respecto a HCl de la harina.
ojo cambiar datos por los del laboratorio para LOS

EJERCICIOS
Con respecto a HCl del suelo.

LOS EJERCICIOS



EJERCICIOS
Con respecto a HCl del forraje.

LOS EJERCICIOS

EJERCICIOS
3.3 TABLAS DE RESULTADOS
Tabla 3. Valores de capacidad y potencial amortiguador para las muestras analizadas
Muestras
(mEq
HCl /pH)
(mEqNaO
H
/pH)
HCl
NaOH


Harina
Suelo
Forraje
3.3.1 GRFICAS
ojo cambiar datos por los del laboratorio para LA GRAFICA


ojo cambiar datos por los del laboratorio para LA GRAFICA

3.4 DISCUSIN DE RESULTADOS
ojo cambiar datos pora las discuciones
La capacidad amortiguadora del HCI en la harina de alimento para animales es de

5702.43 mEq/pH, ya que 5.0104 gramos de harina tienen un pH de 5.11 y al
aplicar 100mL de HCI, la muestra tiene un cambio en el pH reducindose a 4.41.
La capacidad amortiguadora del HCI en el suelo es de 694.44 mEq/pH, ya que
5.0575 gramos de muestra de suelo tienen un pH de 4.55 y al aplicar 100mL de
HCI, la muestra tiene un cambio en el pH reducindose a 2.27.
La capacidad amortiguadora del HCI en el forraje es de 809.94 mEq/pH, ya que
5.0575 gramos de muestra de forraje tienen un pH de 4.55 y al aplicar 100mL de
HCI, la muestra tiene un cambio en el pH reducindose a 2.27.


4. CONCLUSIONES
1. En el suelo al reducirse el pH por la capacidad amortiguadora del HCI, hace

que este sea ms cido y por consiguiente sea menos apto para desarrollar
cultivos o simplemente para el crecimiento de las plantas y adems es
desfavorable para el crecimiento de bacterias y hongos necesarios para un
suelo de ptima calidad.
2. La capacidad amortiguadora del forraje es intermedia por ser pasto por ser
bajo en protenas, entre el 15 y el 35% El pH de la digesta en el rumen es uno
de los factores que influye de manera ms significativa sobre la poblacin
microbiana y el patrn de fermentacin ruminal (Lana et al., 1998) y,
consecuentemente, sobre la degradacin de la pared celular vegetal. La
produccin de cidos grasos de cadena corta tiende a reducir el pH, mientras
que su absorcin a travs de las paredes del rumen y la secrecin de saliva
con una elevada capacidad amortiguadora son los principales mecanismos
para neutralizar dicho efecto y mantener el pH dentro de un rango estrecho. El
pH puede variar en funcin del tipo de dieta que ingiere el animal.
5. BIBLIOGRAFA
a. http://es.wikipedia.org/wiki/Base_%28qu%C3%ADmica%29
b. http://www.buenastareas.com/ensayos/DisociacionElectrolitica/95348.html
c. http://es.scribd.com/doc/6655764/tampones-fisiologicos
d. http://es.wikipedia.org/wiki/Ecuaci%C3%B3n_de_HendersonHasselbalch


e. http://html.rincondelvago.com/equilibrio-acido-base.html
PRCTICA 4
Actividad Cataltica de Catalasa (ACAT) en muestras de

origen Biolgico
RESUMEN
Para este laboratorio que esta encaminado en el tema de la catalasa la cual
se determinara por medio de del mtodo de permanganometrico en el cual
podemos titular en los proximales residuales. Las enzimas son los
catalizadores biolgicos que facilitaran las reacciones qumicas que tienen
lugar en los seres vivos. Sin ellas las reacciones qumicas seran tan lentas
que la vida se detendra. Adems, las enzimas se diferencian de cualquier
otro catalizador gracias a su alta especificidad tanto en las reacciones que
catalizan como en el sustrato involucrado en ellas.
PALABRAS CLAVES
Molecular, hidrogeno oxidorreductasa, cloroplasto, oxidacin, permanganato
INTRODUCCIN
Las reacciones qumicas que se dan en los seres vivos no podran tener lugar sin
la presencia de los enzimas. Estas macromolculas, que generalmente son
protenas, catalizan las reacciones bioqumicas, permitiendo que los sustratos se


conviertan en los productos que necesita la clula. Como todo catalizador, los
enzimas no se consumen en las acciones que catalizan, pero a diferencia de otros
catalizadores de naturaleza inorgnica, las reacciones que catalizan son muy
especficas: slo interaccionan con determinados sustratos, y slo facilitan el curso
de determinadas reacciones.
Una enzima que podemos encontrar en todos los seres vivos es la catalasa,
necesaria para descomponer el perxido de hidrgeno, un compuesto txico, que
se produce durante el metabolismo celular
Enzima: Las enzimas1 son molculas de naturaleza proteica que catalizan
reacciones qumicas, siempre que sean termodinmicamente posibles: Una
enzima hace que una reaccin qumica que es energticamente posible (ver
Energa libre de Gibbs), pero que transcurre a una velocidad muy baja, sea
cinticamente favorable, es decir, transcurra a mayor velocidad que sin la
presencia de la enzima.2 3 En estas reacciones, las enzimas actan sobre unas
molculas denominadas sustratos, las cuales se convierten en molculas
diferentes denominadas productos. Casi todos los procesos en las clulas
necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas significativas. A las reacciones
mediadas por enzimas se las denomina reacciones enzimticas.
Biomolecular: Las biomolecular son las molculas constituyentes de los seres

vivos. Los cuatro bioelementos ms abundantes en los seres vivos son el carbono,
hidrgeno, oxgeno y nitrgeno, representando alrededor del 99% de la masa de la
mayora de las clulas.1 Estos cuatro elementos son los principales componentes
de las biomolculas debido a que:


Permiten la formacin de enlaces covalentes entre ellos, compartiendo electrones,

debido a su pequea diferencia de electronegatividad. Estos enlaces son muy
estables, la fuerza de enlace es directamente proporcional a las masas de los
tomos unidos.
Metabolismo celular: Es el conjunto de reacciones qumicas a travs de las
cuales el organismo intercambia materia y energa con el medio
Reacciones Celulares Bsicas.
Los sistemas vivos convierten la energa de una forma en otra a medida que
cumplen funciones esenciales de mantenimiento, crecimiento y reproduccin. En
estas conversiones energticas, como en todas las dems, parte de la energa til
se pierde en el ambiente en cada paso.
Oxidacin: La oxidacin es una reaccin qumica donde un metal o un no metal
cede electrones, y por tanto aumenta su estado de oxidacin. La reaccin qumica
opuesta a la oxidacin se conoce como reduccin, es decir cuando una especie
qumica acepta electrones. Estas dos reacciones siempre se dan juntas, es decir,
cuando una sustancia se oxida, siempre es por la accin de otra que se reduce.
Una cede electrones y la otra los acepta. Por esta razn, se prefiere el trmino
general de reacciones redox. La propia vida es un fenmeno redox.
Permanganato: Los permanganatos son las sales del cido permangnico o
permangansico, de frmula HMnO4. Se trata de sustancias de un intenso color
violeta y alto poder oxidante que contienen el anin MnO4 y por lo tanto el
manganeso en su mayor estado de oxidacin, 7
Prosttico: Un grupo prosttico es el componente no aminoacdico o que no es
proteico que forma parte de la estructura de algunas protenas y que se halla
fuertemente unido al resto de la molcula. Las protenas con grupo prosttico
reciben el nombre de heteroprotenas (o protenas conjugadas). Muchas protenas
requieren el grupo prosttico para ser funcionales.
1.1 MENTEFACTO CONCEPTUAL
OXIDO
REDUCTASA


CONCEPTO
CONCEPTO
Desdobla el Radical H2O2
Actividad cataltica
El sustrato es el perxido
pH y T ptimos
xido-reductasa
Catalasa (CAT)
El sustrato es la rea
Peroxidasa
Peroxisoma
Produce H2O y O2
Cintica enzimtica de
Michaellis-Menten
Impide la acumulacin de
perxido
Parmetros cinticos(Km y Vmx)

Participa en la foto-respiracin
Es amidohidrolasa
RBE REDOX
EL SUSTRATO
ES PEROXIDO
Desdoblan el
radical H2O2
EL SUSTRATOI
ES LAUREA
Actividad
catalitica
PH Y T
OPTIMOS
Parmetros cinticos(Km
y Vmx)
PEROXISOMA
IMPIDEN LA
ACUMULACION DE
PEROXIDO
Impide la acumulacin
de perxido
RBE REDOX
1.2 MAPA
CONCEPTUAL
Impide
la acumulacin
de perxido
Es amidohidrolasa
CONCEPTO
CONCEPTO


Catalasa(CAT)
Enzima xido-reductasa
Familia peroxidasas
Clulas animales y vegetales
Peroxisoma
Peroxidacin lipdica
RBE REDOX
H2O2
H2O + O2
Cintica Michaeliana
Permanganometra
Coenzima
Apoenzima
Grupo Hemo(Fe+3)
Protena cuaternaria
Homotetramrica
Grasas
Mitocondria
Oxidacin
2.1 LISTA DE MATERIALES Y EQUIPOS UTILIZADOS


Cuadro 6. Lista de materiales y equipos utilizados en la prctica
MATERIAL EQUIPO
APLICACIN
Probeta
Volumetra
Pesada(Gravimetra)
Permanganometra
TUBO PAR SENTRIFUGAR
volumetria
Agitador
Probeta
volumetria
Erlenmeyer
volumetria
Probeta
Volumetra
Pesada(Gravimetra)
Neutralizacin
Tubos de ensayo con gradilla
Contencin de muestras lquidas
Pinzas para bureta
Sostienen la bureta
Erlenmeyer de 125mL
Aerbica y anaerbica


Pipeta de 5 mL
Volumetra
Pipeta de 10mL
Volumetra
Matraz aforado de 100mL
Volumetra
Bao termostatado
Controlador de temperatura
Beaker de 400mL
Volumetra
Bureta de 25mL
Volumetra
Soporte universal.
Sostiene instrumentos
2.2 LISTA DE REACTIVOS UTILIZADOs

Cuadro 7. Reactivos utilizados en la prctica
REACTIVO(NOMBRE)
FRMULA MOLECULAR
CONCENTRACIN
Perxido de hidrgeno
H2O2
0,05M
Controlador de PH
H2O2 0.03M
4ml
ACIDO SULFURICO
H2SO2
4ml
2.3 PROCEDIMIENTOS
Pesar 2g de muestra de la materia picada , colocarla en un tubo de
centrifugado, adicionar 10ml de solucin de buffer fosfato 0.05M . ph
6.8 agitar con agitador de vidrio por 3 min, y centrifugar a 2500 rpm,
durante 5 min.


Sacar el sobre nadante y pasarlo a una probeta y medir su volumen y

registrarlo con Vs y tomar 5 ml par depositarlo en un tubo de ensayo
taparlo, rotularlo como EVCAT.
2.3.2 Flujograma:


3.RESULTADOS Y DISCUSIN
Toda clase de procesos tiene una secuencia puesto que en la
alimentacin d los animales se debe de ser muy cuidadoso. Pues no
se debe exceder en los ingredientes para su alimentacin. Pues el
exceso de estos mismos le puede ocasionar daos irreversibles a los
mismos, que le pueden causar la muerte.
3.1 TABLAS DE DATOS
Tabla 4. Datos obtenidos para actividad cataltica de la catalasa
TUBOS
muestra
Vs(mL)
BLANCO
ml
HARINA DE
CONCENTRADO
ml
mLde KMnO4 0,01M
ml


FORRAJE
SUELO
ml
ml
ml
ml
4
5
Tipo y origen de
la muestra
COLOCAR DATOS
DE ORIGEN DE LA
MUESTRA
3.3 TABLAS DE RESULTADOS

Tabla 5. Valores de actividad de catalasa en las muestras estudiadas
Tubos
Muestras
Analizadas
blanco
Harina de
concentrado
forraje
suelo
ACAT (moles de
H2O2 / min)
3.3.1 GRFICAS ojo cambiar datos por los del laboratorio para LA
GRAFICA


3.5 . DISCUSIN DE GRFICAS Y RESULTADOS

En conclusin los forrajes tienen un buen desarrollo dependiendo de los suelos
cuando son ricos en minerales, por consiguiente esto se ve retribuido en el buen
desarrollo de los animales.
4. CONCLUSIONES
Una de todas las caractersticas ms especiales, es la capacidad de la clula para
realizar reacciones qumicas rpidas y a temperatura ambiente.
Existen protenas sintetizadas en la clula que catalizan una reaccin, es decir
aceleran, a estas protenas se les llama enzimas.
En esta prctica, se intentara comprobar que las enzimas pierden eficacia al
alterar o cambiarlas de temperatura, ya que estas tienen su mayor eficacia a
temperatura ambiente
5. BIBLIOGRAFA


temas de bioquimica. (s.f.). clasificacion de las proteinas. Recuperado el 20

de
noviembre
de
2011,
de
ttp://temasdebioquimica.wordpress.com/2008/07/15/clasificacion-de-lasproteinas/
yahoo respuestas. (s.f.). Cual es el grupo funcional de las proteinas.
Recuperado
el
20
de
noviembre
de
2011,
de
http://mx.answers.yahoo.com/question/index?
qid=20080328015029AANuZvE
zonadiet.com, L. M. (s.f.). zonadiet. Recuperado el 20 de noviembre de
2011, de proteinas : http://www.zonadiet.com/nutricion/proteina.htm
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Las siguientes afirmaciones se contestan en la hoja de respuestas anexa
, de acuerdo a la siguiente tabla:
Indicador Equivalencia en puntos
Completamente de acuerdo 5 (cinco)
De acuerdo 4 (cuatro)
No s que decir 3 (Tres)
En desacuerdo 2 (Dos)
Completamente en desacuerdo 1(uno)
OJO COLOCAR LA AUTOEVALUACION
Puntaje
Afirmacin
Afirmacin
Puntaje



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1.2 Mentefacto Actividad Biolgica y Enzimtica en suelos

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Balanza analtica 0,0001g

Tubos de ensayo con gradilla

Contencin de muestras lquidas

Pinzas para bureta

Matraz aforado de 100mL

2.2 LISTA DE REACTIVOS UTILIZADOS

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(NH2)2CO + H2O CO2 +

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2.3.2 Flujograma general de los procedimientos desarrollados que puede

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