UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Per, DECANA DE AMRICA)

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA
ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUMICA

MATERIA

QUIMICA ANALITICA
INSTRUMENTAL

DOCENTE

Norma Carlos Casas

TEMA

Curva de Ringbown

ALUMNOS

SEMESTRE

Elizabeth Huamn Meza

Franklyn Torres Chacon
Grecia Jaime Herrera
Joel Candela Rojas
Vanessa Rayme Yez

2015- I

2015

I.

INTRODUCCIN

En la primera prctica aprendimos la constitucin, el manejo y el cuidado del

espectrofotmetro UV visible y la importancia que tena dicho instrumento para el
reconocimiento de una sustancia. Para reconocer una sustancia hallamos su curva
espectral la cual despus fue comparada con la curva espectral de una sustancia patrn;
otra manera es que debe de cumplir con la Ley de Lambert Beer pero debemos saber
que esta ley tiene sus limitaciones y que una de estas tiene que ver con la concentracin
del analito.
En esta prctica se aprender a hallar la concentracin ptima para una mejor lectura en
el espectrofotmetro UV visible y para que el analito cumpla con la Ley de Lambert
-Beer, esto lo lograremos con el uso de la Curva de Ringbown.
La curva de Ringbown relaciona la absortancia con la concentracin del analito.
Mediremos la absorbancia de diferentes concentraciones de un analito, hallaremos el
porcentaje de transmitancia y con esto la absortancia, luego la relacionaremos con sus
concentraciones y de acuerdo a la curva reconoceremos la concentracin ptima en la
cual se cumpla con la Ley de Lambert Beer.

II.

MATERIALES Y EQUIPOS

Espectrofotmetro UV visible

Fiolas

Pipetas graduadas

Aseptil rojo (Azosulfamida)

III.

MTODOS

El analito fue colocado junto a un patrn (agua) en el espectrofotmetro. Medimos la

transmitancia conforme aumentamos la longitud de onda. El punto en el cual la
transmitancia sea la ms baja posible ser nuestra absorbancia ms alta, es decir, la
longitud ptima de la onda nos otorga la absorbancia ms alta posible de la sustancia
problema. Si deseamos graficar la curva de Ringbown (la que nos permite formar nuestra
curva de calibracin) primero debemos realizar las diluciones. Preparamos soluciones de
una concentracin desde 0.1 ug/ml , 0.2 ug/ml , 1 ug/ml , 2 ug/ml , 5 ug/ml , 10 ug/ml , 15
ug/ml , 20 ug/ml , 30 ug/ml , 200 ug/ml hasta 500 ug/ml a partir de la solucin estndar de
aseptil rojo (azosulfamida 5%).

Una vez que ya tuvimos nuestras diluciones preparadas, pudimos comenzar con las
lecturas de la transmitancia, para esto, se aadieron en las cubetas del espectrofotmetro
cada dilucin unitariamente. Las lecturas fueron del % de transmitancia; nuestra labor
luego consisti en determinar la absortancia: absortancia = 100 - %T, para luego graficar
nuestra curva Absortancia vs Log (C) (Curva de Ringbown). (Pino; 1983)

IV.

RESULTADOS

V.

DISCUSIONES

En la prctica realizada se grafic la Curva de Ringbown en donde con la longitud de

onda ptima (525nm) hallada en la prctica pasada se hall la transmitancia para obtener
la absortividad; la muestra utilizada fue la azosulfamida, solucin adecuada para dicha
prctica ya que posee grupos cromforos que son los grupos funcionales de la molcula
responsables de los mximos de absorcin. (Hernndez, 2002)
/
/Grupos
cromforos
/

En la curva de Ringbow, los cruces de la parte recta (la intermedia), con las mesetas
inferior y superior, determinan un valor para los lmites de deteccin mnimo y mximo,
respectivamente. Este rango de valores nos ayudar para saber cules podrn ser los
valores ptimos para poder trabajar en la curva de calibracin. (Skoog, 2005)

VI.

CONCLUSIONES

Para poder cuantificar una sustancia a partir de su espectro es necesario que su

concentracin este no muy concentrado o muy diluido porque no sern cuantificados de
manera confiable. Las curvas de Ringbown ayudan a determinar los rangos de
concentracin ptimos.

VII.

CUESTIONARIO

1) Caractersticas del mtodo colorimtrico

Es una tcnica muy usada para determinar la concentracin de un compuesto o de
un grupo de compuestos que forman parte de una mezcla.
Al pasar luz blanca a travs de una solucin coloreada, algunas longitudes de onda
se absorben con preferencia sobre las otras. Muchos compuestos no son coloreados pero
pueden absorber luz en la regin visible si se someten a la accin de un reactivo
apropiado. Estas reacciones son a menudo especficas y muy sensibles. La mayor ventaja
consiste en que no es necesario el aislamiento del compuesto y que se pueden
determinar los constituyentes de incluso mezclas complejas.
Determina la concentracin de un compuesto incgnita, midiendo la absorbancia
que produce la muestra a un determinado color. Se confecciona una curva con las
absorbancias que producen muestras sintticas que tienen cantidades conocidas del
mismo compuesto y por comparacin se determina la concentracin.
Discusiones:
A la hora de representar grficamente los datos espectrofotomtricos el %
de absortancia se traza en funcin del logaritmo de la concentracin (Baeza; 2003)
aunque el % de transmitancia puede emplearse directamente como funcin de ordenada.
Sin embargo, existi cierta ventaja prctica en el uso de la absortancia porque cuando las
concentraciones son bajas se hallan asociadas en absortancias tambin bajas y la
pendiente de la curva siempre es positiva.
2) Requisitos para aplicacin del mtodo espectrofotomtrico.
- Disposicin del espectro correspondiente a cada una de las sustancias puras.
- Comprobacin de la exactitud del espectrofotmetro.
- Calibracin de las escalas de longitudes de onda y de las transmitancias (o
absorbancias).
3) En 2 lneas explique linealidad para la validacin del mtodo en la gentamicina.
La linealidad del mtodo se evalu teniendo 7 concentraciones standares de sulfato
de gentamicina cuyas concentraciones oscilan entre 30 y 120 ug/ml. Se prepararon
quince muestras, las distintas ejecuciones eran genuinos repeticiones y no slo
repeticiones a la misma lectura; Este enfoque proporcionar informacin sobre la
variacin en la absorbancia entre muestras de misma concentracin.
Discusiones:

La metodologa de validacin fue de acuerdo con la Conferencia Internacional de

Armonizacin ("ICH" Tema Q 2 B Nota de orientacin sobre la validacin de los
procedimientos analticos)

4) De acuerdo al espectro obtenido Cuales fueron los mximos obtenidos? Cual

fue la longitud de onda escogida?, Por qu?

5) Indique 2 conclusiones de la investigacin

-

VIII.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

Harris D. Anlisis qumico cuantitativo. Tercera edicin. Barcelona Espaa.

Editorial Revert S.A; 2007.

Pino F. Prez D. Anlisis de elementos traza por espectrofotometra de absorcin

molecular UV visible. Sevilla Espaa. Editorial Universidad de Sevilla; 1983.

Olsen E. Mtodos pticos de anlisis. Barcelona Espaa. Editorial Revert S.A;

1990.
Hernandez H. Lucas. Introduccin al anlisis instrumental. 1ed. Espaa. Editorial
Ariel. 2002. p 413

Skoog, D. West, D. Introduccin a la qumica analtica. 8 ed. Barcelona:

S.A Ediones Paraninfo 2005 p. 502

Baeza, A. Qumica Analtica Instrumental I: Precisin en espectrofotometra;

Documento
de
apoyo.
2da
edicin
2003.

Universidad
Nacional
de
Colombia,
establecimiento
de
un
mtodo espectrofotomtrico. Servicios acadmicos virtuales. Disponible en
http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2001184/lecciones/Cap10/01_01_01.
htm. Consultado en abril del 2015