Junio, 1958

HOYLE

&

LOBATN: CMARAS DE RECUPERACIN DE INSECTOS BENFICOS

19

Notas Generales sobre Nematodes Portadores de Bacterias como un

Mtodo de Control Biolgico
1

Ing Agr

JOS LEN

El control biolgico de los insectos por intermedio de nematodes portadores de bacterias constituye un
nuevo mtodo de singular importancia inters en el
campo de la Entomologa.
Se debe sealar que las investigaciones y experiencias continan desarrollndose da a da, desde que fueran descubiertos en una forma casual, como ms tarde
veremos, hasta el presente.
En los Estados Unidos los factores limitantes los
constituyen las condiciones de temperatura y humedad
existentes. En el Per, stos factores quedan bastantes
atenuados debido a nuestras condiciones de clima ms
favorables para el desarrollo de estos nematodes.
Sin embargo no se debe pensar que el empleo de
este mtodo biolgico de control sea la salvacin de
la mayora de nuestros
problemas
entomolgicos ni
tampoco seamos pesimistas en extremo. Enfoquemos el
panorama bajo un punto de vista progresista y ya nuestras experiencias posteriores nos darn .una idea cabal
y ms exacta del nuevo mtodo. Empezar haciendo
un bosquejo de los trabajos hechos en los Estados Unidos, mtodos y tcnica usada para terminar con los
primeros ensayos efectuados aqu en el Per.
En Octubre de 1954, el D r . W a l t e r Hough observ
una fuerte mortalidad entre las larvas de las polillas del
manzano, Carpocapsa pomonella, sobre las bandas colocadas en los rboles del manzano en el huerto de la
ciudad de Stevens en Virginia. El Dr. Hough envi
unas muestras de. estas larvas al Laboratorio de Patologa de Insectos del Departamento de Agricultura de los
Estados Unidos. El D r . Dutky, patlogo de esta seccin luego de examinar las muestras encontr que contenan nematodes en forma muy caracterstica asociados con bacterias. Estudios taxonmicos de stos nematodes estn siendo hechos por el Dr. Steiner. Por

TANG .

ahora el nematode ha sido definido solamente como un

miembro de la familia
Steinernematidae.
Nematodes
pertenecientes a esta familia slo atacan insectos. No
producen, efectos dainos sobre hombres, plantas o animales.
El nematode perfora los intestinos de los insectos,
liberando bacterias que se multiplican rpidamente. La
bacteria mata al insecto, generalmente en menos de 24
horas. Sirve tambin como fuente de alimento para nematodes, permitiendo su rpida multiplicacin.
El Dr. Dutky y su colaborador J. B. Thompson
del Laboratorio de Investigaciones de Beltsvil e, establecieron rpidamente un mtodo de criar los nematodes
usando larvas de la polilla de la cera, Galera mello*
nella (p aga de las colmenas) como husped. Cada larva puede producir alrededor de 150,000 nematodes, que
pueden mantenerse en el cuerpo del husped o en recipientes de agua pura siempre que estn refrigerados o
o aireados.
Limitados experimentos de. campo llevados en cooperacin con el D r . Hough en huertos de manzano en
Virginia indicaron que del 60 al 7 0 % de las polillas
del manzano podran ser controlados con sta enfermedad producida por los nematodes. E s t e mtodo produce
los mismos efectos en el control del gusano de la mazorca del maiz en experimentos conducidos en Beltsville.
L o s nematodes han probado ser notablemente resistentes a las temperaturas altas y bajas fuera de la estacin, pero son mas activos como agentes de control
1 Presentado en la segunda Convencin de la Sociedad
Entomolgica Agrcola P e r u a n a ( S E A P ) realizado en la ciudad de Chimbte en Diciembre de 1957.
2 M. S e , Asistente de Entomologa, Comit Defensa Tcnica del Algodn, Soc. Nac, A g r a r i a . L i m a ,

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Vol. 1, No. 1

REVISTA P E R U A N A DE ENTOMOLOGA AGRCOLA

con temperaturas moderadas ( 6 0 a 8 0 F o sea entre

15.5 y 26.6 C ) . Segn e! Dr. Dutky el clima seco parece ser el factor limitante en el uso exitoso de los nematodes para controlar los insectos que se alimentan de
las partes expuestas de las plantas.
L a s condiciones de humedad son importantes porque los nematodes se movilizan en una pelcula de agua
y no sobreviven la sequa. Sin embargo pueden vivir
durante largos periodos sin lluvia, permaneciendo en el
insecto husped, en el suelo, en la corteza de rboles o
en los ta los de plantas donde existe cierta humedad.
En su estado infeccioso el nematode puede sobrevivir largos perodos sin a imento. E s t o permite la sobrevivencia cuando faltaren huspedes.
Hasta ahora las pruebas han indicado que los nematodes pueden pasar a travs d una boqui la de aspersin de alta presin sin sufrir gran mortalidad. Son
tambin resistentes a la mayora de insecticidas de uso
comn. E s t o s dos hechos hacen posible que los nematodes y los insecticidas puedan usarse simultneamente
para el control entomolgico.
El Dr. Dutky seal que su valor potencial debe
incrementarse conforme los huspedes sobre los que son
efectivos aumenten y la poca y modo de tratamiento
se determine con exactitud.
Segn el D r . C. G. Thompson el nematode ataca
al Heliothis virescena al igual que al Heliothis zea. La
larva de la polilla de la cera es el insecto ms apropiado para la multiplicacin del nematode. Sin embargo, otros insectos serviran para dicho fin tan eficazmente como el citado.
El D r . Thompson cra las larvas del polilla de la
cera en un medio conteniendo 120 gramos de pablum
(cereal para alimentacin infantil), 50 c. c. de miel de
abeja, 50 c. c. de glicerina y 25 c. c. de agua. L o s
adultos depositan sus huevos entre capas de papel encerado, doblado en forma de acorden, postula que se
realiza mejor a una temperatura de 8 0 F (26.6 C ) .
Temperaturas ms elevadas no los afectaran pero las
ms fras detienen su desarrol o seriamente.
La infestacin de las larvas se realiza colocando
50 de ellas en una c a j a petri conteniendo dos hojas de
papel de filtro humedecidas con 2 c.c. de agua vertidos
en el fondo. Cuatro gotas de una suspensin de nema
todes en agua y conteniendo aproximadamente 10,000
nematodes son agregados al papel de filtro. De aqu los
nematodes pasan a la larva atacndola y matndola en
un perodo de 24 horas a temperatura ambiente. El nematode es ms efectivo que el insecto husped por las
altas temperaturas. Se sugiere que para la multiplicacin de los nematodes la temperatura debe mantenerse
en lo posible entre los 75 y 80? F. (23.8 - 26.6 C ) .
Mientras que la bacteria en asociacin mata a las
larvas dentro de las 24 horas, se requieren ms o menos
8 das para que el ciclo evolutivo sea completado. En
este momento habrn de 100,000 a 150,000 nematodes
en el interior de cada larva de la polilla de cera. E s t o s
nematodes en segundo estado son las nicas formas movibles y en ese estado ellos pasan a infestar al insecto
husped. Ellos pueden ser recobrsdo* de la larvas in-

Fig.

N?

1.

Cmara

Bioclimtica

para

cra

de

nematodes

festadas despus de un perodo de 8 das, colocando estas sobre una caja de petri invertida a la que se pondr encima un papel de filtro y as ser colocado en
una vasija conteniendo agua destilada suficiente como
para cubrir el fondo del recipiente. Los nematodes en
segundo estado dejarn el insecto hospedero y se movern hacia el agua donde pueden ser pipeteados y almacenados de preferencia a una temperatura de 45 F.
(7.2 C.) hasta el momento en que sean necesitados.
Pruebas de Laboratorio han indicado que los nematodes
son capaces de invadir insectos con piezas bucales chupadoras al menos bajo condiciones de Laboratorio y as
son capaces de atacar insectos tales como el arrebiatado. Un factor limitante del nematode es que cierta humedad es requerida durante el perodo en que las formas juveniles son libres o mviles. Se ha encontrado
que en reas de alta humedad, aplicaciones hechas al
atardecer (despus que el r c c ' o empieza a formarse)
son efectivas contra insectos tales como el gusano rosa-

Fig.

A/?

2.

Bandejas conteniendo
nematodes.

cajas

petri

con

Junio, 1958

LEN:

21

NEMATODES PORTADORES DE BACTERIAS

do y el picudo mientras que aplicaciones hechas durante el da, han sido, ineficaces. Sin embargo a p i c a c i o n e s
durante el da, de una suspensin de nematodes en agua
sobre los estigmas de las mazorcas del maz han sido
efectivas, quizs a causa de que los nematodes pueden
entrar rpidamente en un medio o ambiente hmedo.
U n a vez en el interior del insecto hospedero la t e m p e ratura exterior as como la humedad son de pequea importancia aunque temperaturas por encima de 9 0
F (32.2 - C ) , tendran un afecto adverso sobre los nematodes.
o

TRABAJOS REALIZADOS POR EL COMIT DE DEFENSA

TCNICA DEL ALGODN.-A consecuencia del inters mostrado por los avances de este nuevo mtodo biolgico de
control de insectos, el Comit de Defensa T c n i c a del
Algodn efectu un pedido de larvas de la polilla de cera
americana, Gallera mellonella, muertas por accin de los
nematodes portadores de bacterias, al D r . Thompson de
la Estacin Experimental de Beltsvil e.
Los trabajos del "Plan Nematodes" se estn efectuando en cooperacin con el Departamento de Entomologa de la Estacin Experimental de la Molina. Con
fecha 6 de Julio del presente ao, se recibieron 3 p a cas, petri conteniendo cada una 10 larvas de la polilla
de la cera infestadas por nematodes D D - 1 3 6 , clave con
el que es conocido hasta la fecha. Se procedi entonces
a la recuperacin de los nematodes, mediante el mtodo
ya descrito (placa petri invertida). Desde entonces se
trat de buscar un husped que reuniera las condiciones
de la Galera fin de empezar de multiplicacin. P a r a
el efecto se pens en nuestra polilla de la cera Achria
grisella pero por su pequeo tamao y reproduccin
inicial lenta se sigui buscando otro husped sin abandonar ste, probndose entonces el gusano de seda,
Bombix mor. E s t e gusano se puede criar durante todo
el ao bajo condiciones de laboratorio y su gran tamao y rusticidad le dan l forma de buen husped. E n contrado el husped se procedi a la inoculacin y multiplicacin activa de nematodes, realizndose sto con
bastante xito.
A continuacin se efectuaron las siguientes pruebas
de laboratorio a fin de determinar la susceptibilidad al
ataque de los nematodes sobre diferentes insectos. Los
resultados de estos ensayos no pueden ser definitivos
pero si dan una pauta d la mayor susceptibilidad del
husped al ataque. Incluyo en estos resultados al gusano de seda y a larvas de la polil a de cera a fin de
que se conozca su comportamiento al ataque del nematode.
Gusano de Seda, Bombyx mor: A la fecha se han
efectuado 50 inoculaciones a un total de 10,269 gusanos de seda siendo la mortalidad registrada de 1 0 0 %
a las 24 horas de efectuada la inoculacin. T o d o s demostraron gran susceptibi idad.
Polillas de la cera, Achroia grisella ( F ) :
se
han
efectuado 5 inoculaciones a un total de 2,500 larvas con
un promedio de 1 0 0 % de mortalidad a las 48 horas de
efectuada la inoculacin.

Fig.

Nv

3.

Ala

de Arrebiatado
nematodes.

parasitada

por

INSECTOS DAINOS AL CULTIVO DEL ALGODONERO.

Heliothis virescens: una pequea prueba demostr
una gran susceptibilidad de las larvas al ataque del nematode.
Mescinia peruella: en una prueba efectuada sobre
2 0 0 larvas de Mescinia se registr un 1 0 0 % de mortalidad a las 48 horas despus de la inoculacin.
Pococera atramentalis: un pequeo ensayo determin la muerte de las larvas en 48 horas. Susceptibles.
Picudo: Anthonomus vestitus Bohm: se efectuaron
2 inoculaciones a un total de 4 8 0 picudos adultos, registrndose una mortalidad d 1 0 0 % a las 72 horas de
efectuada la inoculacin. L o s picudos mostraron ser menos susceptibles al ataque del nematode.
Arrebiatado:
Dysdercus
peruvianas
Guerin:
Se
hicieron 6 inoculaciones a un total de 1,124 arrebiatados
adultos, registrndose una mortalidad de 1C0% a las
48 horas de efeceuada la inoculacin. Susceptibles.
En el caso particular del arrebiatado se efectuaron
2 ensayos de control del chinche en plantas del algodn en pie, encerradas en jaulas. El primer ensayo se
realiz el da 13 de Noviembre a las 5 p. m. Se usaron
3 jaulas: una como testigo a cuya planta se asperj solamente agua ( 6 0 ce.) y las otras 2 a cuyas plantas se
asperj una suspensin de nematodes a diferente concentracin (a: 3 ce. de suspensin de nematodes o sean
4 8 , 0 0 0 nematodes; b: 9 ce. de suspensin de nematodes
o sean 144,000 nematodes.) completados a 60 ce. de agua.
En cada una de las jaulas se colocaron 50 arrebiatados, agregndoles adems algunos coccinlidos en el
siguiente nmero por jaula: 24 adultos y 4 larvas de
Hippodamia convergens; 3 larvas y 10 adultos de Cj?

REVISTA P E R U A N A DE ENTOMOLOGA AGRCOLA

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Vol. 1, No. 1

cloneda sangunea y algunos adultos de Eriopis connexa.

En este ensayo, primero se realiz la aspersin de nematodes sobre la planta y luego se introdujeron los
chinches y coccinlidos. El segundo ensayo se efectu
una semana despus, es decir el 20 de Noviembre. En
esta prueba no se utilizaron coccinlidos, realizndose
la aspersin en la misma forma que en el primer ensayo, con la diferencia que la aspersin se hizo una vez
que los chinches se encontraban dentro de las jaulas.
En ambos casos se llev un control diario y por espacio de aproximadamente 4 das y medio (105 h o r a s ) .

mente 5 0 , 0 0 0 nematodes por ce. de agua. U n a pequea

aspersin de \ /2 galn fu utilizada, la cual trabaj a
una presin de 30 libras por pulgada cuadrada. Utilizando el mtodo de laboratorio y larvas de gusanos rosados se encontr que concentraciones tan bajas como
1,000 nematodes por c e . daban un porcentaje de mortalidad igual al obtenido con 50,000 nematodes por ce.
La recuperacin de nematodes procedentes de larvas de
gusanos rosados tratadas con bajas concentraciones fu
igual a aquellas tratadas a altas concentraciones pero
el perodo de incubacin fu mas largo".

En el primer caso los resultados del control del

chinche fueron los siguientes: en la jaula en la que se
asperj la menor dosis de suspensin de nematodes se
obtuvo un control de arrebiatados de 2 3 % ; en la jaula
en la que se aplic la mayor dosis un control de 3 5 . 8 % .
Respecto a los coccinlidos no se encontr una diferencia significativa entre la jaula con la planta testigo
y las jaulas con las plantas tratadas.

"Pruebas de campo no han sido conducidas contra

plantas verdes de algodn n pie. Se observ que bajo
condiciones de a ta humedad, el nematode D D - 1 3 6 fu
capaz de atacar gusanos rosados en bellotas de algodn en roseta. H a y indicaciones que experimentos de
campos sobre algodn en pie son dignos de investigacin".

En el segundo ensayo los resultados fueron los siguientes: 2 5 % de control del chinche con la menor dosis y 2 2 . 2 % de control del chinche con la mayor dosis.
Si en ve~dad estos porcentajes de control del arrebiatado no demuestran que su control sea significativo,
estn dando una pauta de que el chinche es susceptible al ataque del nematode cuando ste sea aplicado en
el campo. Probablemente tengamos que mejorar el mtodo y la hora de aplicacin para obtener mejores resultados.
Hasta el momento, stos han sido todos los insectos
sometidos a la prueba de susceptibilidad al ataque de
los nematodes portadores de bacterias.
C o m o un dato adicional agrego la traduccin de
unos prrafos de una carta del D r . Robert R. SIuss,
quien fu el encargado del Plan Nematodes en la E s tacin Experimental de Brownsville, T e x a s , y que se
encuentra actua'mente en el estado de Kansas. Sus datos los considero de suma importancia,
aumentando
nuestras esperanzas de que este nuevo mtodo de Control Biolgico, recientemente comenzado en el Per no
sea ya una promesa sino que constituya un futuro
xito.
L o s prrafos dicen lo siguiente:
(Extracto

de

la carta del Dr. Robert R. Sluss

Kansas
12-11-57).
" E n el laboratorio, ap-oximadamente un 5 0 % de
control de larvas de gusano rosado dentro de bellotas
verdes de algodn fu obtenida con los Nematodes D D 136 y su bacteria asociada. Las be'lctas verdes fueron
tratadas con una suspensin que contena aproximada-

"Experimentos de campo han sido conducidos contra larvas de gusanos rosados en estado de hibernacin
o cerca de la superficie del suelo. Aquellos experimentos llevados bajo condiciones muy hmedas mostraron
un control de 9 0 % ms. Sin embargo aquellos experimentos llevados bajo condiciones de extrema sequedad no dieron ningn control. Alrededor de 8 0 0 , 0 0 0
nematodes por pie cuadrado fueron aplicados en ambos experimentos".
" L o s ensayos en el laboratorio como en el campo
indicaron que las condiciones de humedad son absolutamente necesarias para que el nematode D D - 1 3 6 sea
efectivo".
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