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UNIVERSIDAD DEL QUINDO

FACULTAD DE CIENCIAS BSICAS Y TECNOLOGAS


PROGRAMA DE QUMICA
LABORATORIO DE FITOQUIMICA 2

Laboratorio Fitoqumica 2
EXTRACCION Y AISLAMIENTO DE ALCALOIDES PRESENTES EN BORRACHERO
(BRUGMANSIA CANDIDA PERS)

Presentado por:
Andrs David Naranjo Buitrago

Presentado al Profesor:
M.Sc. Fernando Agudelo A.
Fitoqumica II

Armenia-Quindo
21 de Abril del 2015

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LABORATORIO DE FITOQUIMICA 2

RESUMEN
En esta serie de prcticas de laboratorio se utilizaron plantas que en su contenido
existiera gran presencia de alcaloides la planta en para ello tomamos la planta de
borrachero, en donde encontramos el alcaloide denominado escopolamina y otros no
relevantes por su poca cantidad en el material vegetal. Se realizaron una serie de
procesos con el fin de obtener este metabolito en un alto grado de concentracin y asi
determina la presencia de alcaloides de la escopolamina en una planta de borrachero de
la familia solancea conocida cuyo nombre cientfico es brugmansia candida pers. Para
esto se emplearon procesos de seleccin, secado y molienda de material vegetal,
desengrasado, extraccin de alcaloides, aislamiento y pruebas para alcaloides.
Obteniendo as resultados positivos de la presencia de alcaloides en esta Planta.
Palabras clave: alcaloides, desengrase, aislamiento y pruebas para alcaloides
Imagen 1

Escopolamina

INTRODUCCIN
Brugmansia es un gnero con 10 especies aceptadas de plantas de la familia solancea,
nativo de las regiones subtropicales de Sudamrica, a lo largo de los andes
de Colombia hasta el norte de Chile e incluso el sudeste de Brasil. Son conocidas como
"Trompetas de ngel" debido a sus enormes flores y comparten dicho nombre con el

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gnero Datura con el cual est estrechamente emparentado. El nombre comn en
Colombia es "borrachero" o "cacao sabanero.
Son grandes arbustos o pequeos rboles que alcanzan alturas de 3 a 11 metros. Las
hojas son alternas generalmente largas de 10 a 30 cm y con una anchura de 4 a 18 cm
con bordes enteros o someramente dentados, a menudo con base del limbo asimtrica, y
cubiertas de finas vellosidades. Las flores pendulares llegan a medir 30 cm de largo; son
generalmente blanquecinas o amarillas aunque tambin rosas, naranjas o rojas. Su
perfume, que sobre todo se manifiesta al anochecer, atrae insectos nocturnos y, sobre
todo, murcilagos que son los principales responsables de la polinizacin.
Este gnero se han usado desde tiempos muy antiguos en rituales indgenas, desde
magia negra, hasta ceremonias de iniciacin y con propsitos medicinales; ya sea solas o
mezcladas con otras plantas, generalmente su uso es externo, y no se recomienda su
consumo, adems los curanderos que las utilizan, generalmente conocen la forma de
detener los efectos despus del tiempo necesario. En Suramrica se ha reportado el uso
para aliviar dolores de cabeza y para dolores reumticos como analgsico.
Imagen 2

Plata de borrachero (brugmansia candida per)

No existe un mtodo nico para extraer y aislar alcaloides, pues este depende tanto de
una naturaleza del material a procesar como de las estructuras qumicas y por ende, las
propiedades fsicas, de los alcaloides presentes o que se de desean separara del material
vegetal. Sin embargo gracias a su basicidad pueden proponerse un proceso general de
separacin l se puede emplear a conveniencia al realizarlo todo o solo una parte.

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Desengrase
Es un proceso que consiste en lavado del material vegetal con ter de petrleo
normalmente para este proceso se emplea un extraccin Soxhlet mediante la cual se
extraen los compuestos grasos antes de pasar a la extraccin.

Lixiviacin
Es el proceso de remocin o extraccin de un compuesto soluble (soluto contenido en
medio solido) mediante un solvente apropiado. Este es un proceso de trasferencia de
masa por lo que es indispensable que exista contacto ntimo entre el solvente y soluto.

Aislamiento
Proceso mediante el cual se separan metabolitos de inters de una matriz, este proceso
se lleva a cabo conociendo las caractersticas de las molculas objetivos.

Pruebas para alcaloides


Son sustancia que al reaccionar con un alcaloide producen un cambio o una seal, la cual
es evidencia de precia de este tipo de molcula.

Meyer: 1.3 g de bicloruro de mercurio en 60 mL de agua y 5 g de yoduro de potasio se


afora a 100 mL. Los alcaloides se detectan como un precipitado blanco que es soluble en
cido actico y etanol.
Dragendorff: se prepara mezclando8 g de nitrato de bismuto pentahidratado en 20 mL de
cido ntrico al 30 % con una solucin de 27.2 g de yoduro de potasio en 50 mL de agua.
Se deja reposar por 24 h, se decanta y se afora a 100 mL. La presencia de alcaloides se
detecta al producirse una coloracin naranja rojiza cuando un papel impregnado con el
reactivo se pone en contacto con una solucin acida de alcaloides. Cuando se usa como
reactivo de precipitacin las bases precipitan como solidos marrones.
Bouchardat: solucin de yodo y yoduro de potasio que indica prueba positiva cuando se
forma un precipitado de color marrn.

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Diagrama general:

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METODOLOGA
Parte 1 seleccin, secado y molienda de material vegetal
Se tomaron hojas (aproximadamente 500g de material humero) de un rbol de
borrachero en el barrio San Jos de Armenia en la casa de uno de los integrantes del
grupo, la recoleccin se realiz en horas de la maana. (brugmansia candida pers) las
hojas se dejaron secar al sol durante 2 semanas, luego se molieron. As al final de este
proceso se obtuvieron 120 g de material vegetal en polvo.

Parte 2 desengrase de material vegetal empleando una extraccin soxhlet


Materiales.

Extractor Soxhlet
Pinzas y sus nueces
Condensador de reflujo (bolas) y sus mangueras.
Baln de fondo redondo de 1000 mL.
Estufa elctrica
Beaker de 400 mL.
Beaker de 500 mL.
Probeta de 100 mL.
Balanza con dos cifras decimales.
Frasco lavador

Reactivos

ter de petrleo

Metodologa
Se tomaron 100 g de material en polvo, los cuales se introdujeron en una columna soxhlet
y posteriormente se agregaron 700 mL de ter de petrleo, la solucin formada fue
refluida durante 9 horas en un rango de temperatura entre 60-80 C. finamente se obtuvo
una solucin de color oscura y el marco vegetal hmedo, este ltimo se dej secar al aire
libre durante 8 das.

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Imagen 3

Montaje de reflujo

Resultado parcial
Se obtuvo una solucin oscura rica en lpidos y carotenoides adems de un marco vegetal
libre de grasas un poco hmedo el cual se dej secar para tomarlo como matriz y en
esta analizar la presencia de alcaloides.
Parte 3. Extraccin por medio de lixiviacin
Materiales.

Bolsa de suero vaca para la Lixiviacin.


Embudo pequeo de gravedad
Balanza con dos cifras decimales.
Probeta de 100 mL.
Beaker de 400 mL.
Pinza y su nuez para el embudo en la Lixiviacin.
Esptula metlica
Frasco lavador
Gafa de seguridad.
.

Reactivos

500 mL de etanol al 95 %

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Metodologa
Se tom el marco vegetal secado durante 8 das y obtenido de la segunda parte, se
introdujo en un embudo de decantacin, se tomaron 500 mL de etanol los cuales se
hicieron pasar a travs de la muestra y seguidamente llenar la bolsa de suero. Despus
de llenada la bolsa de suero se puso a gotear lentamente el lquido y atravesar la
muestra, este procedimiento se repiti durante un semana.
Resultado
Se obtuvo una solucin viscosa de color verde oscuro
Parte 4. Aislamiento de alcaloides
Materiales.

Equipo de Rotaevaporador
8 Tubos de ensayo pequeos
Centrfuga
Gradilla
3 Pipeta de 1.0 mL. graduada
1 Pipeta de 5 mL. graduada
Placa excavada
Esptula metlica
Erlenmeyer de 125 mL.
Beaker 250 mL
Aro y su nuez
Soporte universal
Embudo de separacin de 250 mL.
Frasco lavador
Pera succionadora
Gafa de seguridad.

Reactivos.

600 mL HCl 0.5 N


800 mL NaOH 15%
Etanol 95%.
Cloroformo o diclorometano
Reactivos de Mayer, Dragendorf, Bouchardat, Reinecke.
Carbn activado
Papel indicador

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Metodologa
El extracto etanlico fue tratado con HCl 0.5 N hasta pH acido agitado durante 2 horas y
luego centrifugado con el fin de observar la formacin de gomas, en este proceso se
remueven las bases como sales solubles. 8 das despus la solucin cida fue basificada
con 15% NaOH a pH 10, luego se realizaron 3 extracciones liquido-liquido empleando 20
mL cloroformo en cada una de ellas, posteriormente fueron unidas y llevadas a al
rotavapor para concentrar en esta solucion de pueden para las bases libres (alcaloides
secundarios y terciarios).
Resultados
Se obtuvo un extracto de color oscuro en el cual debe estar disuelto el alcaloide
secundario y terciario.
Parte 5. Pruebas para alcaloides
Materiales.

Caja escavada
Pipeta
Tubos de ensayo
Gotero
Fraco lavador

Reactivos

Meyer
Dragendorf
Acido pcrico
Bouchardat

Metodologa
Se tomaron gotas del extracto clorofrmico y se transfirieron en una caja escavada de 12
huecos, en cada uno de los huecos se agreg gotas del extracto y algunas gotas de los
reactivos de precipitacin obteniendo cada resultado por triplicado.
Se tom 1 mL de extracto y se transfiri a cada tubo de ensayo, luego se agregaron
algunas gotas de cada reactivo y se observ los cambios de coloracin y formacin de
precipitados

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OBSERVACIONES
El extracto etanolico presento una coloracin verde intensa con algunos solidos de color
negro. Cuando a este se le adiciono NaOH al 15% la coloracin paso de verde a naranja
ladrillo. En el momento de la extraccin la separacin presento dos fases: la acuosa con
una coloracin caf y la orgnica de color verde muy tenue.
Cuando se llev esta fase orgnica al rotavapor, la solucin que se obtuvo aparentaba ser
ms viscosa y pareca ser algo blanquecina.
Despus de ser tratada con cido, se utilizaron los reactivos de precipitacin para
evidenciar la presencia de alcaloides. Utilizando el reactivo de Mayer, se presento un
precipitado color blanco, lo que nos indica que es positiva la presencia de alcaloides; asi
mismo sucedi con el reactivo de Bouchardat, que presento un precipitado color caf o
naranja ladrillo y Hager que presento gran turbidez y un precipitado blanco, nos muestran
la presencia de alcaloides en la planta.
En la fase acuosa tambin se efectuaron estas pruebas, las cuales dieron todas
negativas, evidenciando la inexistencia de alcaloides en ella, adems que nos indica que
las extracciones fueron realizadas satisfactoriamente; pues el objetivo ltimo era el de
aislar los alcaloides.
Resultados
Placa excavada
Prueba

Abundancia

Evidencia

Color

Meyer
Dragendorf
Bouchardat

+++
+++
+++

Precipitado
Precipitado
Precipitado

Blanco
Naranja
Caf naranja

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CONCLUSIONES

Si bien la Extraccin Soxhlet es un proceso simple; ya que consta de solo tres


partes;(tubo refrigerante, tubo extractor y el baln de destilacin) y que adems su
proceso es bastante lento, los resultados que se pueden obtener de este son muy
eficientes y beneficiosos.
Se logr identificar la presencia de alcaloides por medio de los diferentes reactivos
de precipitacin, en el extracto etanolico con un alto grado de abundancia.
La extraccin se realiz satisfactoriamente puesto que los anlisis con los
reactivos de precipitacin para identificacin de alcaloides en la fase acuosa,
dieron negativos; lo que nos indica que las dos extracciones fueron muy bien
realizadas porque extrajimos todos los alcaloides presentes.

BIBLIOGRAFA

Universidad de Antioquia, Gabriel Jaime Arango Acosta, alcaloides y compuestos


nitrogenados, Medelln junio 2008.

Deanna et al. Fitoquimca Orgnica. universidad central de Venezuela.


2002.
Profesor Fernando Agudelo. Laboratorio fitoquimca II

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