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Calor seco
Incinerao (E): processo drstico de eliminao de microrganismos, que destri o produto.
Ao rubro (E): processo onde os materiais levados incadescncia, promovendo a destruio de todos os
microrganismos.
Flambagem (D): processo onde o material submetido diretamente ao fogo, seja seco ou embebido em
lcool. Bastante utilizado na desinfeco de alas de vidro.
Estufa esterilizante (E: 160C/2 hs ou 180C/1 h). Amplamente utilizado para vidrarias e outros
materiais.
Calor mido
Como mencionado anteriormente, um processo mais eficiente devido ao maior poder de penetrao do
vapor dgua. A morte decorrente da desnaturao de cidos nuclicos e protenas, podendo tambm
romper membranas. Alm disso, o vapor tem maior capacidade de romper as pontes de hidrognio.
Autoclave (E - 121C/20 min./1 atm) - Destri esporos, em um pequeno volume, em 10 a 12 minutos.
Com volumes maiores, o tempo maior (5 litros => 70 minutos). Frequentemente so utilizados
indicadores da eficincia de esterilizao, por exemplo, ampolas contendo esporos de B.
stearotermophilus ou de Clostridium PA3679, os quais so inoculados em meios de cultura aps o
processo de esterilizao. Caso haja o desenvolvimento de clulas vegetativas, o processo no foi
realizado adequadamente, uma vez que no houve a esterilzao.
gua em ebulio (D - 100C/30 min.)
A ttulo de comparao, a eliminao de esporos de C. botulinum pela fervura, requer cerca de 5,5 horas.
Por outro lado, a 120C, estes esporos so eliminados aps 4 a 5 minutos.
Pasteurizao (D - 62,8C/30 min - pasteurizao lenta, ou 71,7C/15 seg - pasteurizao rpida)
UHT (E): 141C/2 segundos - processo bastante utilizado para o leite e outros alimentos lquidos.
FILTRAO - Processo muito til na esterilizao de materiais termolbeis, sendo empregado para
lquidos e gases. Estes filtros so geralmente compostos por celulose, acetato, policarbonato, teflon, ou
outro material sinttico. Embora o dimetro dos poros possa variar, os mais utilizados so aqueles de 0,2
m, que removem os microrganismos (exceto vrus) das solues e do ar.
Dentre os principais tipos de filtros podemos citar:
Filtros de profundidade: Correspondem aos filtros mais antigos, constitudos de malha fibrosa ou
granular, base de papel, asbestos ou fibra de vidro, arranjados de forma a criar uma srie de camadas
aleatrias sobrepostas, formando pequenos canais sinuosos. Assim, os microrganismos ficam retidos nas
malhas e/ou adsorvidos superfcie do material. Estes filtros so feitos tambm de terra de diatomceas
(Berkefield) ou porcelana (Chamberlain). Na prtica, so usados como pr-filtros, para a remoo de
partculas maiores. Muitas vezes so tambm usados na filtrao de ar.
Membranas Filtrantes: Correspondem ao tipo mais comum de filtro esterilizante, em microbiologia. So
membranas porosas de acetato de celulose, nitrocelulose ou policarbonato, tendo espessura de 0,2 mm,
contendo poros variando de 0,1 a 0,5 m de dimetro, que ocupam cerca de 80 a 85% da membrana.
Solubilidade - A substncia deve ser solvel em gua ou em outros solventes (como o lcool) em
quantidade necessria ao seu uso efetivo.
6) Inativao mnima por material estranho - Algums compostos qumicos antimicrobianos combinam-se
facilmente com protenas ou outros materiais orgnicos encontrados no material que esta sendo tratado.
Isto diminui a quantidade de substncia qumca disponvel para agir contra os microrganismos.
7) Atividade em temperaturas ambiente ou corporal - No deve ser necessrio aumentar a temperatura
alm daquela normalmente encontrada no ambiente onde o composto qumico utilizado.
8)
Poder de penetrao - A menos que uma substncia possa penetrar atravs da superfcie, a ao
antimicrobiana limitada ao local de aplicao (Entretanto, a ao na superfcie algumas vezes
necessria).
Poder desodorizante - O desinfetante ideal deve ser inodoro ou apresentar um odor agradvel. A
capacidade desodorizante e uma caracterstica desejvel.
11) Capacidade detergente - Um agente antimicrobiano que tem propriedades detergentes tem a vantagem
de ser capaz de remover mecanicamente os microrganismos da superfcie que est sendo tratada.
12) Disponibilidade e baixo custo - O produto deve ser facilmente encontrado e de baixo custo.
denominados lcool de madeira, menos bactericida do que o lcool etlico e altamente txico.
Inclusve, o vapor deste composto pode produzir seqelas permanentes nos olhos.
As propriedades bactericidas do lcool aumentam quanto maior for sua cadeia de carbono. Entretanto,
lcoois com cadeias de carbono maiores do que o lcool proplico e isoproplico so menos solveis em
gua do que o lcool etlico e, assim, so pouco utilizados como desinfetantes. Os lcoois proplico e
isoproplico em concentraes de 40 a 80% so bactericidas para as clulas vegetativas e so
freqentemente utilizados no lugar do lcool etlico.
Aplicaes Prticas dos lcoois
lcool etlico (70%) e lcool isoproplico (90%) so utilizados como anti-spticos de pele e como
desinfetantes de termmetros clnicos de uso oral e de certos instrumentos cirrgicos. O tratamento com lcool o mtodo mais utilizado para limpar a pele antes de coletar amostra de sangue. Comparado com
outras solues anti-spticas, o lcool etlico o mais eficiente na destruio das bactrias. O lcool em
concentraes entre 60 e 90% eficiente contra vrus. Entretanto, a presena de outras protenas diminui
a. eficincia contra os vrus, porque o lcool combina-se com elas impedindo a ao sobre as protenas
virais.
Mecanismo de Ao dos Alcoois.
A atividade antimicrobiana dos lcoois deve-se principalmente sua capacidade de desnaturar protenas.
Os lcoois so tambm solventes lipdeos, lesando assim as estruturas lipdicas da membrana das clulas
microbianas. Alem disso, parte de sua eficincia como desinfetante de superfcie pode ser atribudo ao
detergente e de limpeza, que auxilia na remoo mecnica dos microrgamsmos.
3) HALOGNIOS
Os elementos qumicos do grupo dos halognios, particularmente o iodo, o cloro e em menor extenso o
bromo, so componentes de muitos agentes qumicos antimicrobianos.
Os halognios so fortes agentes oxidantes e, em virtude dessa propriedade, so altamente reativos e
destroem os componentes vitais da clula microbiana.
Iodo e Compostos Iodados
O iodo um dos mais antigos e eficientes agentes antimicrobianos. Foi reconhecido pela Farmacopia
Norte Americana no incio de 1830 e utilizado para tratar ferimentos durante a guerra civil americana. O
lodo puro um elemento cristalino preto-azulado com brilho metlico. pouco solvel em gua pura
porm altamente solvel em lcool etlico e em soluo aquosa de iodeto de potssio (KI) ou iodeto de
sdio (NaI). _tradicionalmente utilizado como agente anti-sptico na forma de tintura de iodo. O termo
tintura refere-se a uma soluo alolica de uma substncia medicinal. Vrias preparaes so utilizadas:
iodo 2% com iodeto de sdio 2% diludo em lcool 70%; iodo 7% com iodeto de potssio 5% em lcool
83%; e iodo 5% com soluo aquosa iodeto de potssio 10% .
O iodo tambm utilizado na forma de substncias denominadas iodforos, que so complexos de iodo
com compostos que atuam como carreadores e agentes solubilizadores do iodo Por exemplo, povidineioso um complexo de iodo e polivinilpirrolidona. Iodforos so germicidas como o iodo, com a
vantagem de no corar e no ser irritante pele.
HCl
+
cido clordrico
HClO
cido Hipocloroso
Quando adicionados a gua, os hipocloritos e as cloraminas sofrem hidrlise, dando origem ao cido
hipocloroso. Este cido sofre nova reao, originando o oxignio nascente (O):
HClO
HCl
O
Oxignio nascente
O oxignio nascente liberado nesta reao um poderoso agente oxidante que pode destruir substncias
celulares vitais. O cloro pode tambm combinar diretamente com protenas, celulares e destruir as suas
atividades biolgicas.
5) METAIS PESADOS E SEUS COMPOSTOS
O termo metais pesados refere-se a metais tais como mercrio, chumbo, zinco, prata e cobre
Antigamente a gua era armazenada em recipientes de prata e cobre porque as pessoas notaram que os
vasilhames de metal conservavam gua para beber. O mercrio e os compostos mercuriais tm uma longa
histria no controle de infecces, incluindo a sfilis. O cloreto de mercrio (HgCl 2) era amplamente usado
no incio do sculo XX como desinfetante geral, mas desde ento tem sido substitudo por outros agentes
menos txicos e corrosivos.
A capacidade de quantidades extremamentes pequenas de certos metais, particularmente a prata, de
exercer efeito legal sobre as bactrias conhecida sob a denominao de ao oligodinmica, termo que
se origina do grego oligos (pequeno) e dinamiks (poder). Este fenmeno pode ser demonstrado no
laboratrio, colocando-se uma moeda de prata (previamente limpa) sobre a superficie de um meio
solidificado previamente inoculado. Aps a incubao uma zona de inibio (sem crescimento)
verificada ao redor da moeda. A quantidade de meta! dissolvido, responsvel pelo efeito de inibio,
extremamente diminuta e pode ser expressa como parte por milho.Acredita-se que a atividade desses
ons metlicos se deve inativao de certas enzimas que se combinam com o metal.
Aplicaes Prticas dos Metais Pesados e Seus Compostos.
Alguns compostos contendo mercrio orgnico possuem maior atividade antimicrobiana e menor
toxicidade do que os compostos mercuriais inorgnicos. Entre os compostos orgnicos esto o
merbromim (mercrio cromo), timerosal (mertiolate) e nitromersol (metafenl) , que so utilizados para o
tratamento de pequenos cortes, feridas e infeces de pele,
Uma soluo a 1 % de nitrato de prata (AgNO3) era amplamente empregada para prevenir infecces
oculares por gonococos em recm-nascidos; atualmente, o nitrato de prata tem sido substitudo por
antibiticos, tais como penicilina ou eritromicina. Compressas (esponjas ou camadas de gaze)
impregnadas com nitrato de prata a 0,5% tm sido utilizadas para prevenir infeces em queimaduras.
O sulfato de cobre (CUS04) efetivo como um algicida em reservatrios abertos de gua e piscinas. O
sulfato de cobre tem tambm ao fungicida e utilizado na forma de mistura de Bordeaux no controle de
infeces em plantas. Compostos de zinco so tambm fungicidas e so usados em ungntos e ps para o
tratamento do p-de-atleta.
Mecanismo de Ao dos Metais Pesados e Seus Compostos
Os metais pesados inativam as protenas celulares combinando.-se com algum componente da protena.
Por exemplo, o cloreto de mercrio inativa enzimas que contm grupos sulfidrilas (-SH ).
6) DETERGENTES
Os detergentes so compostos que diminuem a tenso superficial e so utilizados para limpar superfcies.
So tambm denominados surfactantes. A ao umectante deve-se ao fato de serem compostos
anfipticos. Quando uma substncia apolaar, como as gorduras, colocada em uma soluo aquosa de
detergente, os grupos hidrofbicos do detergente ligam-se s substncias, enquanto os grupos hidroflicos
criam uma superfcie que pode ser encharcada com a gua.
Sabes so exemplos de detergentes Eles so sais de sdio ou potssio de cidos graxos de cadeia longa
solveis em gua (por exemplo, oleato de sdio). Os sabes so produzidos quando as gorduras so
aquecidas com bases fortes como o hidrxido de sdio ou o hidrxido de potssio. Porm, os sabes tm
a desvantagem de precipitar facilmente na presena de gua alcalina ou cida. Por esta razo, novos
agentes de limpeza mais eficientes denominados detergentes sintticos tm sido desenvolvidos. Eles
diferem estruturalmente dos sabes e no formam precipitados.
Quimicamente, os detergentes so classificados em trs grupos principais:
a) Detergentes aninicos so aqueles em que a propriedade detergente do composto reside na poro
aninica ou no on da molcula carregado negativamente
b) Detergentes catinicos so aqueles em que a propriedade detergente do composto reside na poro
catinica da molcula (carregada positivamente)
c) Detergentes no-inicoss so aqueles que no ionizam quando dissolvidos em gua. Exemplos so o
polissorbato 80 e octoxinol.
Os detergentes no-inicos no so antimicrobiano, Muitos detergentes antimicrobianos pertencem ao
grupo catinico, dos quais os compostos quaternrios de amnio so mais largamente utilizados.
6.1) COMPOSTOS QUATERNRIOS DE AMNIO
As estruturas dos compostos quaternrios de amnio esto relacionadas a do cloreto de amnio, NH4Cl.
Na molcula de um composto quaternrio de amnio, os grupos R 1, R2, R3 e R4 so grupamentos
qumicos orgnicos ligados a um tomo de nitrognio central. Um dos compostos mais utilizados o
Cloreto de Benzalcnico.
Os compostos quaternrios so bactericidas para bactrias Gram-positivas e Gram-negativas, mesmo em
concentraes muito baixas. As concentraes bactericidas variam de diluies de uma parte do composto
quaternrio para poucos milhares a centenas de milhares de partes de gua. Outro aspecto importante
destes compostos que apresentam atividade bacteriosttica em concentraes muito abaixas daquela em
que so bactericidas. Por exemplo o limite na ao bactericida de um composto quaternrio pode ser igual
a uma diluio de 1:30.000, mas o composto pode ser bacteriosttico em diluies to altas quanto
1:200.000. Portanto, a ao desses compostos demonstra a necessidade de se distinguir atividade
bacteriosttica e bactericida nos testes de avaliao dos desinfetantes.
Aplicaes Prticas dos Compostos Quaternrio
Alm de sua atividade germicida e ao detergente os compostos quaternrios de amnio caracterizam-se
pela baixa toxicidade, alta solubilidade em gua, alta estabilidade em soluo e por no serem corrosivos.
Esta combinao de propriedades faz dos compostos quaternrios um excelente agente anti-sptico,
desinfetante e sanificante. So largamente aplicados em assoalhos paredes e outras superfcies em
hospitais, enfermarias e outros estabelecimentos pblicos. So tambm utilizados como agentes
sanificantes utenslios de restaurantes, assim como de superfcies e equipamentos em instalaes de
processamentos de alimentos.
Diluio 5min
1: 100
1: 125
1:150
1: 175
1:200
+
+
+
10min
15 min
+
+
Fenol
1:90
+
1 100
+
+
+
Coeficiente fenlico do desinfetante X = 150/90 = 1.6
- ausncia de crescimento
+ presena se crescimento
ESTERILIZANTES QUMICOS
Esterilizantes qumicos so particularmente utilizados para a esterilizao de materiais mdicos sensveis
ao calor como bolsas de sangue para transfuso, seringas plsticas descartveis e equipamentos de
caterizao. Tambm so utilizados para esterilizar ambientes fechados, incluindo cmara asspticas,
utilizadas para procedimentos que devem ser livres de microrganismos. Os principais esterilizantes
qumicos utilizados so xido de etileno, -propiolactona, glutaraldedo e formaldedo.
1) XIDO DE ETILENO
O xido de etileno um composto orgnico com a seguinte estrutura cclica:
H2C
CH2
O
O xido de etileno lquido a temperaturas abaixo de 10,8C, mas acima desta temperatura torna-se um
gs. Seus vapores so altamente irritantes para os olhos e mucosas, e ele inflamvel mesmo em baixas
concentraes. Este problema de segurana tem sido superados pela preparao de misturas de xido de
etileno com dixido de carbono e Freon, que so gases no inflamveis. Esta mistura mantm a atividade
microbicida do xido de etileno, que mata no somente clulas vegetativas de microrganismos mas
tambm endsporos bacterianos.
Outra caracterstica importante e desejvel do xido de etileno o seu poder de penetrao. Ele atravessa
e esteriliza o interior de grandes pacotes com objetos, roupas e mesmo certos plsticos. Assim certos
materiais, como seringas, podem ser acondicionados e ento esterilizados. Entretanto, uma das
desvantagens do xido de etileno a baixa velocidade de ao contra microrganismos, necessitando de
vrias horas de exposio ( algumas vezes uma noite) para ser eficiente.
Aplicaes prticas do xido de Etileno
e
o
e
e
CH2
R SH
R - S CH2CH2O H
O
xido de Etileno
Enzima Ativa
Enzima Inativa
2) -PROPIOLACTONA
Este composto um lquido em temperatura ambiente, com pomo de ebulio de 155C. e tem a seguinte
estrutura:
CH2
CH2
C = O
A -propiolactona no inflamvel como o xido de etileno mas apresenta uma caracterstica indesejvel,
a de causar bolhas quando em contato com a pele e irritao nos olhos. bactericida, esporicida,
fungicida e viricida. No apresenta poder de penetrao demonstrado pelo xido de etileno, mas
consideravelmente mais ativa contra os microrganismos. Somente 2 a 5 mg/l de -propiolactona so
requeridos para fins de esterilizao dos materiais, enquanto so necessrios 400 a 800 mg/ml de xido de
etileno. Entretanto, em virtude do baixo poder de penetrao e de sua provvel propriedade carcinognica,
sua utilizao como agente esterilizante foi restringida.
3) GLUTARALDEDO
O glutaraldedo um lquido oleoso, incolor com a seguinte estrutura:
Uma soluo aquosa de 2% deste agente qumico tem um largo espectro de atividade antimicrobiana.
efetivo contra vrus, clulas vegetativas e esporuladas de bactrias e fungos. utilizado na medicina para
esterilizar instrumentos urolgicos, lentes de instrumentos, e outros equipamentos especficos '
4) FORMALDEDO
O formaldedo tem uma estrutura qumica simples ( HCHO). um gs que se mostra estvel somente em
altas concentraes e em temperaturas elevadas. extremamente txico e seus vapores so intensamente
irritantes s mucosas. Em temperatura ambiente, o formaldedo gasoso polimeriza-se, formando uma
substncia slida incolor chamada paraformaldedo que rapidamente libera formaldedo pelo
aquecimento. O formaldedo tambm comercializado em soluo aquosa como formalina, que contm
37 a 40 % (p/v) da substncia. O metanol usualmente adicionado (10 a 15 %) para prevenir a
polimerizao do formaldedo.
O formaldedo em soluo utilizado para a esterilizao de certos instrumentos. Na forme gasosa pode
ser utilizado para desinfeco e esterilizao de reas fechadas. A umidade e a temperatura tm grande
influncia sobre a ao microbicida do formaldedo; a fim de esterilizar uma rea fechada, a temperatura
deve estar prxima de 22C e a umidade relativa do ar entre 60 a 80 %. Uma das desvantagens desse
processo a capacidade limitada de penetrao dos vapores de formaldedo em superficies cobertas.
O formaldedo um composto qumico extremamente reativo e sua atividade microbicida parece dever-se
capacidade de inativar constituintes celulares como protenas e cidos nuclicos. As clulas vegetativas
so destrudas mais rapidamente com o formaldedo do que as formas esporuladas.
A figura abaixo resume os stios e os mecanismos de ao dos vrios compostos qumicos
antimicrobianos.