Universidad de Santiago de Chile.

Facultad de Qumica y Biologa.

Tcnico universitario en anlisis qumico fsico.

Informe de laboratorio N1

Microscopa

Laboratorio de Microbiologa.
Tcnico Universitario en Anlisis Qumico y Fsico
Integrantes: Eliseo Antigual
Mara Jos Muoz
Docente: Miguel Castro
Ayudante: Maximiliano
Fecha: Abril 9 de 2015

Introduccin.
Todos los organismos estn compuestos por clulas, que en su
mayora son invisibles al ojo humano, para poder estudiarlas en detalle es
necesario utilizar el microscopio. Existen 2 tipos distintos, electrnicos y
pticos. El microscopio ptico, el cual utilizaremos, donde un haz de luz
emitido por una fuente luminosa para ser condensado posteriormente, y
pasar a travs de la muestra, la que puede ser observada con distintos
objetivos, que amplificarn su tamao en distintas proporciones, y podr ser
observado finalmente por medio del lente ocular. La amplificacin de la
imagen hace posible observar detalles que de otra forma seria imposible.
En este prctico el uso del microscopio va enfocado a observar distintos
tipos celulares (Eucariontes: animal y vegetal y Procariontes). (1)
La mayora de los organismos carecen de una coloracin natural, se
deben teir previamente para lograr resaltarlos de manera artificial. La
utilizacin de un colorante simple permite la conseguir este contraste. (2)
Se observarn clulas provenientes de tejido vegetal, animal, y
muestras donde podremos observar bacterias, si bien no ser posible
observar detalles; si podremos diferenciar de manera sencilla un tipo celular
de otro.

Objetivos:
General
- Conocer y aprender a utilizar el microscopio electrnico compuesto.
Especficos
- Aprender la preparacin de muestras para ser observadas por el
microscopio.
- Conocer las diferencias de manera amplia, entre una clula
procarionte y eucarionte.
- Aprender las utilidades que tiene el azul de metileno.

Metodologa
1.- Realizar una preparacin de catfilo de cebolla: Se realiz un
corte, con la ayuda de un bistur, en la porcin cncava de una de las hojas
de la cebolla, se separ una pequea porcin de epidermis. Con una pinza
se deposit el tejido sobre un porta objetos, procurando que no quedaran
dobleces. Luego con una piseta se agreg una gota de agua destilada,
seguido a esto se cubri la muestra con un cubre objeto. Se llev la
muestra al microscopio y se observ correctamente aplicando el uso del
microscopio. Finalmente se analiz el tejido vegetal (epidermis) al
microscopio.
Se realiz un preparado de la muestra de igual forma que en el anterior,
solo que al momento de dejar la muestra en el porta objeto, esta se cubri
con una gota de azul de metileno, el cual se dej actuar por al menos 2
minutos, posteriormente se lav la muestra con agua destilada, con el fin de
eliminar el exceso de azul de metileno. Luego se procedi a tapar la
muestra con el cubre objeto. Para seguir con observacin al microscopio.
2.- Preparacin de un palito de fosforo: Con un bistur, se realiz un
raspado por las paredes del fosforo. Este raspado se dej caer sobre el
portaobjeto, luego de que se obtuvo una cantidad considerable, se dej caer
una gota de agua destilada sobre la muestra, para posteriormente cubrir la
muestra con el cubre objeto.
3.- Preparacin de lmina de corcho: Se realiz la preparacin con la
ayuda de un bistur, con el cual se cort una lmina muy fina de corcho, se
deposit sobre el porta objeto, se aadi unas gotas de agua destilada y se
cubri con el cubre objetos.
4.- Preparacin de clulas descamativas de la cavidad bucal: Con
una trula estril, se rasp con precaucin por la cara interna de la mejilla
de un alumno, se deposit el contenido obtenido sobre un porta objeto, se
tom la precaucin de dejarlo con cuidado. Para fijar la muestra, se procedi
a flamear el reverso del porta objeto con un mechero bunsen, procurando
no acercarla demasiado para no perjudicar la muestra. Hasta que se
observ estuviera seca. Una vez que qued fijada la muestra. Se procedi a
depositar de 2 a 3 gotas de azul de metileno, dejndolo actuar por 3
minutos. Se lav suavemente con agua destilada. Se dej caer sobre la
muestra un cubre objeto limpio. Se observ y se dibuj la preparacin.
5.- Preparacin de agua estancada: de una muestra que fue
proporcionada por el ayudante del laboratorio se extrajo una gota con la

ayuda de una pipeta pasteur, la que fue depositada en el porta objeto, se

dej caer el cubre objeto. Se observ y se dibuj la preparacin.

Resultados
1.- Realizar una preparacin de catfilo de cebolla:
Observaciones: se observ clulas vegetales y su forma hexadrica (en
celdas) y alargadas. En 10x se logr diferenciar la membrana, la cual es de
color muy claro, y el citoplasma (Figura 1); en 40x se identific dentro de
las clulas que tenan ms proporcin de azul de metileno uno diminutos
puntos (ncleo). (Figura 2)
2.- Preparacin de un palito de fosforo:
Observaciones: Las clulas de la madera extrada del palo de fosforo
tenan forma alargada y de apariencia rgida,(40x) se puede ver en
diferentes orientaciones y tamaos estructuras alargadas cubiertas por una
pared celular uniforme. (Figura 3)
3.- Preparacin de lmina de corcho
Observaciones: Al igual que la muestra de astillas de cerillas se observa
una red de celdas divididas (40x) y distribuidas uniformemente, se parece
mucho a la estructura de un panal de abejas. Cubiertas por pared celular,
es la nica estructura que puede reconocerse. (Figura 4)
4.- Preparacin de clulas descamativas de la cavidad bucal:
Observaciones: Se pudo apreciar clulas ovoides de carcter etreo, con
ayuda de la tincin se puede distinguir la pared celular, ncleo y bacterias
(100x). (Figura 5)
5.- Preparacin de agua estancada
Observaciones: En el agua estancada se pudo visualizar una cantidad
importante de impurezas, sedimentos slidos y precipitados. As como
tambin distintos tipos de clulas procariontes. (100x). (Figura 6)

Discusiones
La utilizacin de un colorante en la observacin de las clulas, es de
gran ayuda ya que permite identificar con mayor facilidad algunas
estructuras, tanto de una clula eucarionte y procarionte. El uso de este
colorante, azul de metileno, debe ser cuidadosa, ya que el exceso de este
sobre la muestra podra llegar a provocar la nula diferenciacin de las
estructuras. Este colorante de tipo bsico es utilizado para aumentar el
contraste, todas las clulas quedaran teidas del mismo color. Por lo que no
es posible diferenciar distintos tipos celulares. (3)
Con respecto a las observaciones de clulas vegetales, provenientes de la
epidermis de una cebolla, con el objetivo 10x se pudo observar la pared
celular delimitando al citoplasma. Y en la preparacin del mismo tejido, pero
con colorante, se logr diferenciar el ncleo, como una pequea
circunferencia de color azul.
Para las preparaciones de palo de fosforo y el corcho 10x en ambos casos
solo fue posible diferencias celdillas, que corresponden a un conjunto de
clulas. Aunque la madera y el corcho no estn cumpliendo un ciclo
bioqumico o en otras palabras se encuentre sin vida, las paredes celulares
siguen siendo funcionales.(3)
En la muestra con clulas del epitelio bucal observbamos en cada clula
unos puntos oscuros de color azul, debido al azul de metileno, los cuales
corresponden al ncleo rodeando este y delimitado por la membrana
celular. As como tambin se logr observar distintos tipos de bacterias que
no se puede diferenciar, por el mtodo utilizado. (4)
Para la muestra de agua estancada, lo que principalmente se observ
fueron sedimentos slidos, en el momento que se aument el alcance del
objetivo, se pudo diferenciar unas pequeas figuras con distintas formas y

en movimiento, que por la procedencia de la muestra se determin que

correspondan a bacterias.

Conclusiones
Para la realizacin del practico fue necesario conocer cada una de las partes
del microscopio y sus funciones, esto logro se avanzara mucho ms rpido
con el procedimiento.
Luego de que se observ distintos tipos celulares, animal y vegetal, se
puede concluir a grandes rasgos que estas presentan caractersticas
similares. Sus formas de organizacin son similares, no as su funcin.
Cuando hablamos de una forma de organizacin nos referimos a que estas
son capaces de unirse y formar tejidos, rganos, seres vivos, poblaciones,
etc. por lo que podemos inferir que la clula es la mnima expresin de un
ser vivo.
Tanto clulas eucariontes y procariontes, pueden ser observadas por medio
del microscopio. Destacamos que por medio de la tincin con azul de
metileno, solo podemos diferenciar membranas y ncleo. No se observan
organelos en el caso de las clulas vegetal y animal.

Referencias
(1) Brooks, G.F., Butel, J.S. , Morse, S.A. 1999. Microbiologa Mdica de
Jawetz, Meinick y Adelberg. Editorial el Manual Moderno. 16. Edicin.
(2) (2) Gamazo, C., Lopez-Goi, I. & Diaz, R. (2005). Manual prctico de
Microbiologa (3ra Ed). Captulo 3 ( pg. 15-24). Espaa: Masson S.A.
(3) Lpez-Jcome, L.E., Hernndez-Durn, M., Coln-Castro, C., Ortega-Pea,
S., Cern-Gonzlez, G., Franco-Cendejas, R., (2014). Las tinciones bsicas
en el laboratorio de microbiologa. www.medigraphic.org.mx. Vol. 3,
Nm. 1. pp 10-18
(4) Koneman elmer, Washington C. Winn, Stephen D. Allen, William M.
Janda , ,Gary W. Procop, Paul C. Schrenckenberger, Gail L. Woods (2008)
Diagnostico Microbiolgico, Texto y Atlas a color. Sexta edicin, Editorial
Panamericana.