Actividad antioxidante y contenido de fenoles totales de

algunas especies del gnero Calophyllum

Antioxidant activity and total phenols content from some species
of Calophyllum genus

Ana M. Mesa-VanegasI; Carlos A. GaviriaII; Felipe CardonaIII; Jairo A. SezVega IV; Silvia Blair TrujilloV; Benjamn A. RojanoVI
Qumica. Grupo de Investigacin Malaria. Sede de Investigacin Universitaria (SIU).
Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia. Medelln, Colombia.
II
Ingeniero Qumico. Grupo de Investigacin en Ciencias de los Alimentos. Universidad
Nacional Sede Medelln. Medelln, Colombia.
III
Mster en Ciencias en Sistemtica Vegetal. Bilogo. Grupo de Estudios Botnicos.
Director Herbario Universidad de Antioquia. Medelln, Colombia
IV
Doctor en Ciencias Farmacuticas. Grupo Qumica de Plantas Colombianas, Instituto
de Qumica, Universidad de Antioquia. Medelln, Colombia.
V
Mster en Ciencias en Historia de la Ciencias. Mdica. Grupo de Investigacin Malaria.
Sede de Investigacin Universitaria (SIU). Facultad de Medicina, Universidad de
Antioquia. Medelln, Colombia.
VI
Doctor en Ciencias Qumicas. Laboratorio de Ciencias de los Alimentos. Escuela de
Qumica. Universidad Nacional de Colombia Sede Medelln. Medelln, Colombia.
I

RESUMEN
INTRODUCCIN: la bsqueda de nuevos compuestos antioxidantes naturales ha sido
de gran inters para la investigacin dado que interrumpen el proceso de oxidacin por
va radicalaria de lpidos, protenas, ADN y enzimas. El
gnero Calophyllum perteneciente a la familia Clusiaceae, produce una gran variedad
de metabolitos secundarios con caractersticas antioxidantes; los flavonoides, las
coumarinas y las xantonas resultan los compuestos ms reportados. Las especies de
este gnero pueden ser una fuente de antioxidantes potenciales.
OBJETIVO: determinar la actividad antioxidante de extractos de diferente polaridad

de las especies Calophyllum cf. brasiliense Cambess, Calophyllum

inophyllum L., Calophyllum sp.
MTODOS: se realiz un proceso de extraccin del material vegetal por percolacin
con solventes de diferente polaridad: hexano, diclorometano, acetato de etilo y
metanol, se concentr a presin reducida y se monitore por cromatografa en capa
delgada. La evaluacin de la capacidad antioxidante se determin con diferentes
metodologas: fenoles totales, ABTS (2,2-azinobis-[3 etilbenzotiazolin-6-sulfnico]),
DPPH (1,1-difenil2-picrilhidracil), FRAP (ferric reducing/antioxidant power) y en
algunas muestras seleccionadas ORAC (oxygen radical absorbance capacity).
RESULTADOS: las muestras que contienen compuestos fenlicos con una alta
capacidad reductora fueron CBTExtM, CNHTExtM, CRHTExtA, CRHTExtM, CBHExtA y
CBHExtM, que adems, poseen valores ORAC muy altos comparados con otros
sustratos, el extracto que present mejores valores fue CBTExtM. La tcnica FRAP
describe muy bien el fenmeno oxidativo en los extractos CSHTExtA, CBHExtA,
CIHTExtM, CSHTExtM y CIHTExtM; en (DPPH) el extracto que present altos valores
de TEAC fue CSHTExtA. El extracto CBTExtM present los mejores valores de inhibicin
del radical ABTS.
CONCLUSIONES: los extractos polares y medianamente polares de las tres especies
de Calophyllum presentaron alta actividad antioxidante en las metodologas evaluadas.
Palabras clave: actividad antioxidante, radicales libres, Calophyllum.

ABSTRACT
INTRODUCTION: the search of new natural antioxidant compounds has been of great
interest for research since they interrupt the oxidation process via radical pathway of
lipid, proteins, DNA and enzymes. The Calophyllum genus belongs to Clusiaceae family
producing a great variety of secondary metabolites with antioxidant features; the
flavonoids, the coumarins and the xanthones are the more reported compounds. The
species from this genus may be a potential antioxidant source.
OBJECTIVE: to determine the antioxidant activity of extracts from different polarity
of Calophyllum cf. brasiliense Cambess, Calophyllum inophyllum L., Calophyllum sp.
METHODS: a percolation process was carried out from the vegetal material by
decoction using solvent of different polarity: hexane, dichloromethane, and ethyl
acetate and methanol, concentrated at decreased pressure and monitored by thin layer
chromatography (TLC). The antioxidant capacity assessment was determined using
different methodologies: total phenols, ABTS (2,2-azinobis-[3 ethylbenzothiazolin-6sulphoni]), FRAP (ferric reducing/antioxidant power) and in some selected ORAC
samples (oxygen radical absorbance capacity).
RESULTS: the samples containing phenol compounds with a high reducing capacity
were CBTExtM, CNHTExtM, CRHTExtA, CRHTExtM, CBHExtA and CBHExtM, which also
have very high ORAC values compared with other substrates; the extract with better
values was the CBTExtM. The FRAP technique describes very well the oxidative
phenomenon in extracts CHSTExtA, CBHExtA, CIHTExtM, CSHTExtM and CIHTExtM: in
DPPH) the extract showing TEAC high values was the CSHTExtA. The CBTExtM extract
showed the better inhibition values of ABTS radical.
CONCLUSIONS: the polar and moderately polar extracts from the three species
of Calophyllum showed a high antioxidant activity in the assessed methodologies.
Key words: antioxidant activity, free radicals, Calophyllum.

INTRODUCCIN
El estrs oxidativo surge en sistemas biolgicos despus de una prolongada exposicin
a oxidantes, o a una disminucin de la capacidad antioxidante del sistema, o a ambas;
y est frecuentemente asociado con la generacin de radicales libres como las especies
reactivas oxigenadas (EROs), las cuales estn fuertemente implicadas en la patologa
de enfermedades como el cncer, enfermedades cardiacas, arterosclerosis;
enfermedades cerebrales y el envejecimiento prematuro, entre otras.1,2 Cuando un
exceso de radicales libres se forma, puede causar la inhibicin de enzimas como la
superxido dismutasa, catalasas y peroxidasas. Esto genera efectos letales en las
clulas por la oxidacin de lpidos, protenas, DNA y enzimas; ocasionando reacciones
en cadena que perpetan la produccin de ms radicales libres y aumenta el dao de
tejidos. Sin embargo, los compuestos antioxidantes tienen la capacidad de inhibir o
interrumpir las reacciones de transformacin que causan daos a las mencionadas
biomolculas.3
En los ltimos aos, los antioxidantes naturales provenientes de plantas han sido
frecuentemente usados en diferentes campos de la industria farmacutica como
preservantes en alimentos y en medicina. Muchos de estos compuestos como la
quercetina, -tocoferol y el -caroteno, entre otros, son antioxidantes naturales, que
presentan una actividad comparable con antioxidantes sintticos de mayor uso como el
2-terbutil-hidroxitolueno (BHT) y el 2-terbutil-hidroxianisol (BHA); los cuales sin
embargo, pese a sus propiedades antioxidantes presentan la desventaja de ser
txicos.4
El gnero Calophyllum tiene alrededor de 200 especies, con una distribucin
pantropical; muchas especies con propiedades medicinales. Son empleadas para tratar
enfermedades como ulceras gstricas, infecciones patolgicas, procesos
inflamatorios.5 De algunas plantas del gnero Calophyllum existen reportes sobre
compuestos tipo xantonas, esteroides, triterpenos, biflavonoides, piranocumarinas y
benzopiranos.6 Calophyllum brasiliense Cambess, es una planta empleada en la
medicina popular para el tratamiento de varias enfermedades, a la cual se han
realizado diferentes estudios fitoqumicos y farmacolgicos; adems, es la especie ms
conocida y empleada como producto ma derable por las constructoras, para pisos e
inmobiliarias. Las hojas, los tallos y las races deC. brasiliense se emplean para el
tratamiento del reumatismo, hemorragias, lceras, inflamaciones y se ha confirmado
su actividad biolgica en reportes con actividad analgsica, antiviral, antifngica,
citotxica antiulcerognico, antitumoral, antibacteriana, moluscicida.7 Respecto a la
actividad antioxidante, solo un reporte de C. brasiliense de los extractos acuoso,
metanlico y etanlico fueron determinados con 110,56, 99,17 y 99,57 % de
inhibicin, respectivamente, a una concentracin de 100 g/mL, mediante el mtodo
de captacin de radicales libres DPPH.8 Calophyllum inophyllum es empleada como
planta medicinal y ornamental, se reconoce por sus propiedades teraputicas:
reumatismo, blenorragia y sarna, lceras y fiebres, con reportes de actividad
antitumoral, antiviral, antibacteriana.9 Se han reportado molculas de tipo

triterpenoides como la friedelina y la secofriedelina con potente inhibicin de HIV-1. No

hay reporte sobre actividad antioxidante de esta especie.
En este estudio se pretende determinar la capacidad antioxidante de extractos de
diferente polaridad de las especies Calophyllum cf. brasiliense Cambess, Calophyllum
inophyllum L. y Calophyllum sp., midiendo la actividad antioxidante por diferentes
metodologas: fenoles totales, ABTS, DPPH, FRAP y en algunas muestras seleccionadas
el mtodo ORAC, con el fin de caracterizar el potencial reductor de los diferentes
extractos de estas tres plantas y poder ampliar su uso en diferentes enfermedades
donde los procesos oxidativos sean relevantes.10,11

MTODOS
Reactivos y equipos
El radical libre DPPH (1,1-difenil2-picrilhidracil), fosfato cido de sodio, MeOH,
tricloruro de hierro, 2,4,6-tri(2-piridil)triazina (TPTZ), 2,2-azinobis-(3 etilbenzotiazolin6-sulfnico) (ABTS), AAPH [2,20-azo-bis(2-amidinopropano) dihydrochlorido] usado
como una fuente de radicales peroxilos, Trolox (cido 6-hidroxi- 2,5,8tetrametilchromano-2-carboxlico), fluoresceinato de sodio, cido ascrbico fueron
obtenidos de Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO), Folin-Ciocalteau fue obtenido de
Merck (Darmstadt, Germany). El agua usada en los experimentos es grado HPLC. Los
ensayos ORAC se realizaron en un espectrofotmetro de fluorescencia, Perkin Elmer
LS55; los ensayos de absorcin UV- Vis se hicieron en un espectrofotmetro Jenway
6405.
Material vegetal y elaboracin de los extractos: se obtuvieron tres tipos de muestras a
partir del material vegetal; muestras para especmenes de herbario con el fin de lograr
una clasificacin taxonmica clara de cada especie y como testigos de los especmenes
colectados, as como muestras de hojas y tallos para la obtencin de extractos. Los
especmenes de herbario fueron procesados y depositados en el herbario Universidad
de Antioquia (HUA), y se determinaron como Calophyllum cf. brasiliense Cambess
colectado en el departamento de Antioquia (voucher 162,467), Calophyllum
inophyllum L. colectado en el departamento de Caldas (voucher 149,140)
y Calophyllum sp. colectado en el departamento de Risaralda (voucher 167,392).
El material vegetal [hojas de C. brasiliense (CBH), tallos de C. brasiliense (CBT), hojas
y tallos C. inophyllum L. (CIHT), hojas y tallos de Calophyllum sp. (CSHT) seco, molido
de cada una de las especies], se extrajo sucesivamente por percolacin con hexano
(CBTExtH, CBHExtH CIHTExtH y CSHTExtH), diclorometano (CBTExtD, CBHExtD
CIHTExtD y CSHTExtD), acetato de etilo (CBTExtAE, CBHExtAE CIHTExtAE y
CSHTExtAE) y metanol (CBTExtM, CBHExtM CIHTExtM y CSHTExtM), concentrados a
presin reducida en un rotaevaporador y posteriormente pesados. Los extractos se
monitorearon por cromatografa de capa delgada con fase estacionaria de slica gel 60
GF254 Merck, mediante diferentes sistemas de elucin y revelando con solucin
etanlica (5 % de cido sulfrico en etanol y 1 % de vainillina) para determinar la
presencia de cumarinas y solucin de DPPH (200 mg/L) y as determinar la
decoloracin de posibles compuestos antioxidantes.

Contenido de fenoles totales (CFT): la determinacin de fenoles se realiz por el

mtodo colorimtrico de Folin-Ciocalteu.12 Se construy una curva patrn usando como
estndar cido glico. Se diluy el extracto a una concentracin en la cual el contenido
de fenoles se encontraba dentro del intervalo de la curva patrn. Los resultados se
expresaron como mg de cido glico/100 g de extracto. Las lecturas se realizaron a
760 nm.
Evaluacin de la actividad antioxidante
Ensayo de decoloracin del catin radical --difenil--picrilhidrazilo (DPPH): para
cuantificar la capacidad captadora de radicales libres de los extractos se determina el
grado de decoloracin que provocan sus componentes a una solucin metanlica de
DPPH mediante el mtodo de Brand-Williams, con algunas modificaciones.13,14 Se
prepar una solucin madre de DPPH aproximadamente 20 mg/L del radical en
metanol, 990 L de esta solucin se mezclaron con 10 L de solucin de extracto (a
diferentes concentraciones). Se prepar un blanco de muestra que contena 990 L
MeOH con 10 L de muestra y un blanco de referencia con 990 L DPPH y 10 L de
solvente. Se incub a temperatura ambiente durante 30 min en la oscuridad y se midi
la absorbancia a 517 nm. Los resultados se expresaron como valores TEAC (trolox
equivalent antioxidant capacity) mediante la construccin de una curva patrn usando
como antioxidante TROLOX.
Ensayo de decoloracin con el radical catinico ABTS+: se fundamenta en la
cuantificacin de la decoloracin del radical ABTS+, debido a la interaccin con
especies donantes de hidrgeno o de electrones.15 El radical catinico ABTS+ es un
cromforo que absorbe a una longitud de onda de 734 nm y se genera por una
reaccin de oxidacin del ABTS (2,2'-azino-bis- (3-etil benzotiazolin-6-sulfonato de
amonio) con persulfato de potasio. Las mediciones se realizaron a una longitud de
onda de 734 nm.15 En la evaluacin se utilizaron 10 L de extracto y 990 L de la
solucin del radical ABTS+. A los 30 min de reaccin a temperatura ambiente y en la
oscuridad, se ley el cambio en la absorbancia respecto a la referencia del reactivo, a
una longitud de onda de 734 nm. La referencia del reactivo consisti en una solucin
del radical ABTS+ con el solvente de la muestra. Los resultados se expresaron como
valores TEAC (trolox equivalent antioxidant capacity) mediante la construccin de una
curva patrn usando como antioxidante TROLOX.
Ensayo FRAP (ferric reducing/antioxidant power): este mtodo evalu la capacidad
antioxidante de una muestra de acuerdo con su capacidad para reducir el hierro frrico
(Fe+3) presente en un complejo con la 2,4,6-tri(2-piridil)-s-triazina (TPTZ) hasta la
forma ferrosa (Fe+2), que tuvo un mximo de absorbancia a una longitud de onda entre
590-595 nm.16 Este ensayo se llev a cabo en unbuffer cido actico-acetato de sodio
(pH 3,4), que contena TPTZ y FeCl3. Se utilizaron 900 L de esta solucin, 50 L de
muestra y 50 L de agua destilada. Luego de 60 min de reaccin se determin la
absorbancia a una longitud de onda de 593 nm. Para cada muestra se tuvo en cuenta
la lectura de la absorbancia del blanco sin cromforo, de la misma manera que en las
pruebas anteriores. La curva de referencia se construy usando cido ascrbico como
patrn primario Las actividades de las muestras se expresaron como AEAC (ascorbic
acid equivalent antioxidant capacity: mg de cido ascrbico/100 g extracto).
Ensayo ORAC (oxygen radical absorbance capacity): el procedimiento experimental
estuvo basado en reportes previos de Ou y otros,17-19 en el cual se empleaba Trolox
como estndar y condiciones controladas de temperatura a 37 C y pH 7,4. Las

lecturas se realizaron a una l de excitacin 493 nm y slit de excitacin 5, l de emisin

515 nm y slit de emisin 13, con atenuador de 1 % y sin placa atenuadora. Para el
desarrollo de la tcnica se utilizaron soluciones de fluorescena 1x10-2 M en PBS (75
mM), AAPH 0,6 M en PBS (75 mM). La muestra contena 21 L de fluorescena,
2,899 L de PBS, 30 L del extracto ensayado y 50 L de AAPH. Como referencia se
uso Trolox. El efecto protector del antioxidante fue calculado usando las diferencias de
reas bajo la curva de decaimiento de la fluorescena entre el blanco y la muestra, se
compar contra la curva del Trolox y se expres en micromoles equivalentes de Trolox
por gramo de muestra (mol Tx/g muestra), de acuerdo con la ecuacin siguiente:

Donde AUC es el rea bajo la curva de la muestra, AUC rea bajo la curva para el
control, AUCTrolox rea bajo la curva para el Trolox, f es el factor de dilucin de los
extractos.18,19
Anlisis estadstico
Las mediciones se realizaron por triplicado y los resultados se presentaron como la
media y su desviacin estndar (DE). Todos los clculos se realizaron en el programa
estadstico STATGRAPHICS Plus 2.0.

RESULTADOS
Los rendimientos de la extraccin provenientes de las tres diferentes especies
de Calophyllum se presentan en la tabla 1.
Los porcentajes de material extractable con los diferentes solventes mostraron mejores
rendimientos para CBH y los rendimientos mximos de extraccin se obtuvieron para
los extractos metanlicos de todas las especies siendo el porcentaje en peso con
respecto al material vegetal seco result de 3,72 % para CBH, 2,61 % para CBT, 3,59
% para CIHT y 8,14 % para CSHT.
Los resultados obtenidos con el empleo de 4 metodologas diferentes para las 16
muestras analizadas, en la tabla 2 se presentan.
Tabla 2. Resultados de cuatro ensayos para los 16 extractos

Muestra

DPPH

ABTS

FRAP

Fenoles totales

TEAC mol
Trolox/g de

TEAC mol
Trolox/g de

mg a.a./100 g
muestra

Fenoles totales mg
de cido glico/g de

extracto

extracto

extracto

CBTExtH

80 6,3

1 199 136,9

1 310 144,7

59 5,5

CBTExtD

209 11,4

1 088 125,9

3 024 185,5

55 0,7

CBTExtA

836 3,5

3 310 89,5

9 647 333,3

198 5,8

CBTExtM

2 651 93,5

8 492 568,7

47 261 595,0

249 15,4

CBHExtH

45 2,9

7 077 504,2

1 100 72,3

56 0,7

CBHExtD

205 30,1

1 424 18,0

3 846 59,0

46 3,4

CBHExtA

1 946 109,0

4 613 88,7

57 458 2474,0

493 19,6

CBHExtM

1 507 86,2

3 939 27,7

30 473 906,1

245 10,4

CIHTExtH

62 2,5

265 3,7

-----*

35 2,6

CIHTExtD

211 14,9

1190 16,2

3 439 392,2

57 2,4

CIHTExtA

799 18,3

2 608 208,8

12 377 673,0

175 5,9

CIHTExtM

2 554 45,9

7 153 167,1

43 266 974,6

266 12,8

CSHTExtH

31 5,0

2 033 50,0

1 214 77,3

54 2,6

CSHTExtD

262 7,7

1 749 98,7

6 059 76,4

66 1,6

CSHTExtA

2 737 95,0

6 791 368,1

79 416 2 133,3

518 7,6

CSHTExtM

2 325 177,7

5 573 84,9

45 076 857,3

248 8,7

Todos los resultados fueron realizados por triplicado, y los datos son expresados con la
desviacin estndar ( DE), *No hay solubilidad

Contenido de fenoles totales: el mtodo Folin-Ciocalteau se emple para evaluar los

grupos fenlicos presentes en cada uno de los extractos obtenidos a partir de las tres
especies del generoCalophyllum. Las muestras evaluadas que presentaron un mayor
contenido de fenoles (expresados en mg de cido glico/g de extracto) fueron los
extractos de acetato de etilo y metanol de las tres especies, especialmente las
codificadas como CSHTExtA, CBHExtA, CIHTExtM, CSHTExtM, CBTExtM, CBHExtM,
CBTExtA, CIHTExtA, con valores de 518 7,6, 493 19,6, 266 12,8, 248 8,7,
249 15,4, 245 10,4, 198 5,8 y 17 5,9, respectivamente. Las muestras con
ms bajo contenido de fenoles se presentaron en los extractos de hexano y
diclorometano de las tres especies deCalophyllum, CBTExtH, CBTExtD, CBHExtH,
CBHExtD, CIHTExtH, CIHTExtD, CSHTExtH, CSHTExtD.
Ensayo de decoloracin del catin radical --difenil--picrilhidrazilo (DPPH): una
notable capacidad de inhibicin del DPPH presentaron todas las muestras analizadas
(expresados en mol Trolox/g de extracto). Las muestras con altos valores de TEAC
fueron CSHTExtA (2 737 95,0), CBTExtM (2 651 93,5), CIHTExtM (2 554 45,9),
CSHTExtM (2 325 177,7), CBHExtA (1 946 109,0), CBHExtM (1 507 86,2).
Ensayo de decoloracin con el radical catinico ABTS+: la cuantificacin de la
decoloracin del radical ABTS+ se genera debido a la interaccin con especies donantes
de hidrgeno o de electrones. El extracto metanlico de los tallos de Calophyllum cf.
brasiliense Cambess (CBTExtM) present los valores ms altos de inhibicin del radical
ABTS (8 492 568,7), seguido de los extractos codificados como CIHTExtM (7 153
167,1), CBHExtH (7 077 93,5) y CSHTExtA (6 791 368,1).
Ensayo FRAP (ferric reducing/antioxidant power): los valores ms altos como
reductores lo poseen los extractos de acetato de etilo y metanlico; especficamente
las muestras CSHTExtA (79416 2133,3) seguido de CBHExtA (57458 2474,0),
CIHTExtM (47261 595,0), CSHTExtM (45076 857,3) y finalmente CIHTExtM
(43266 974,6).
Ensayo ORAC (oxygen radical absorbance capacity): en la tabla 3 se presentan los
valores ORAC expresados como moles Trolox/g de los extractos de las muestras
CBTExtM, CIHTExtM, CSHTExtA, CSHTExtM, CBHExtA y CBHExtM. El ms alto valor de

ORAC fue para la muestra CBHExtM con valores de 11 644 1 902, y el ms bajo
encontrado fue para la muestra CBHExtA con un valor de 3 491 400.
Los 5 extractos seleccionados en este trabajo estn muy por encima de esos valores;
de tal manera que los extractos medianamente polares y polares de las especies
estudiadas del gneroCalophyllum tienen una alta capacidad reductora y pueden tener
un gran potencial para ser usados en diferentes eventos biolgicos donde los
mecanismos redox sean los ms relevantes.
Se realizan correlaciones entre las diferentes tcnicas de evaluacin antioxidante: en
la figura 1 se presentan los valores TEAC de ABTS+ vs. fenoles totales con R2= 9,82,
en la figura 2 los valores TEAC de DPPH vs. fenoles totales con R2= 81,0, en la figura
3 los valores FRAP vs. fenoles totales con R2= 89,5, y en la figura 4 el ensayo FRAP vs.
DPPH con R2= 88,9, como parmetro descriptivo para entender el mecanismo oxidativo
de las muestras evaluadas.

DISCUSIN
Los extractos polares y medianamente polares de las tres especies
de Calophyllum presentaron una promisoria actividad antioxidante en las metodologas
evaluadas y un alto contenido de fenoles. Ninguna asociacin se encontr entre los
rendimientos de extraccin, el contenido de fenoles totales y las dems pruebas que se
realizaron. Sin embargo, se hicieron correlaciones entre las diferentes pruebas para
discutir los resultados y tener una idea del mecanismo de accin de los antioxidantes
presentes en las muestras analizadas.
Correlaciones entre los fenoles totales y las actividades antioxidantes: un buen
antioxidante, para su correcta evaluacin debe cumplir con muchos requisitos como:
alta solubilidad en el medio, correcta orientacin para interactuar con los radicales
libres, proteger los lpidos oxidables, ser un buen reductor y funcionar con alta
reactividad, tener efectividad a diferentes pH. Sin embargo, ninguna tcnica de
medicin de la actividad antioxidante satisface las condiciones anteriores, y para tener
una idea del mecanismo de accin de los antioxidantes se deben establecer
correlaciones entre el contenido de fenoles y los diversos ensayos antioxidantes.20
Las medidas de los valores TEAC por la tcnica ABTS son muy altos; sin embargo, es
una tcnica que no permite discriminar extractos que contienen compuestos buenos
antioxidantes como la gran mayora de este trabajo; esto se debe a la labilidad del

reactivo ABTS+, una estructura completamente plana que reacciona fcilmente con
reductores mediante un mecanismo SET y(o) HAT,21 lo anterior se refleja en la poca
correlacin entre los valores TEAC de ABTS+ vs. fenoles totales (R2= 9,82).
La concentracin de fenoles totales contra la actividad antioxidante, expresada como
TEAC por el ensayo DPPH tienen una correlacin de 81 %. Mientras que la regresin
lineal entre FRAP y fenoles totales describe en 89,5 % el fenmeno oxidativo; de tal
manera, que la mayora de los compuestos fenlicos contenidos en los extractos de las
especies de Calophyllum son buenos antioxidantes y, en su mayor parte, se expresan
muy bien como agentes reductores que reaccionan fundamentalmente mediante un
mecanismo de transferencia de electrones SET. Los valores TEAC por el ensayo DPPH y
AEAC FRAP, tienen una alta correlacin entre ellos (R2= 88,9), por lo tanto, ambas
tcnicas describen de igual forma el mecanismo oxidativo, que result ms significativo
estadsticamente el ensayo FRAP.22
Para concluir, los diferentes extractos obtenidos a partir de las tres especies
de Calophyllum contienen compuestos fenlicos reductores, especialmente en los
extractos CBTExtM, CNHTExtM, CRHTExtA, CRHTExtM, CBHExtA y CBHExtM, que
adems, poseen valores ORAC muy altos comparados con otros sustratos conocidos
como las especies del gnero Vaccinium. La tcnica FRAP describe muy bien el
fenmeno oxidativo en los extractos CSHTExtA, CBHExtA, CIHTExtM, CSHTExtM y
CIHTExtM; en el ensayo de decoloracin del catin radical --difenil--picrilhidrazilo
(DPPH), el extracto que present los valores ms altos de TEAC por ambas
metodologas, fue el extracto de acetato de etilo Calophyllum sp. (CSHTExtA). El
extracto metanlico de los tallos de Calophyllum cf. brasilienseCambess (CBTExtM)
present los mejores valores de inhibicin del radical ABTS. En el mtodo ORAC que
generalmente es considerado de alto nivel, debido al uso de los radicales libres de
importancia biolgica, el extracto que present mejores valores fue el extracto
metanlico de los tallos de Calophyllum cf. brasiliense Cambess (CBTExtM). Las
mediciones de la actividad antioxidante por diferentes tcnicas, ofrecen ventajas en
trminos de la prediccin de la capacidad antioxidante in vitro.22

AGRADECIMIENTOS
Al apoyo financiero brindado por el Ministerio de Agricultura de Colombia proyecto (No.
009-2007-V7552-38-07): Caracterizacin y actividad antimalarica de metabolitos
secundarios de algunas especies de plantas medicinales nativas de los
gneros Piper y Calophyllum, para el desarrollo de productos farmacuticos con
actividad antimalarica. A la Universidad de Antioquia y a la Universidad Nacional de
Colombia, sede Medelln.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1. Kohen R, Nyska A. Oxidation of biological systems: Oxidative stress phenomena,
antioxidants, redox reactions, and methods for their quantification. Toxicologic
Pathology. 2002;30(6): 620-50.

2. Kohen R, Chevion S, Schartz R, Berry EM. Evaluation of the total low molecular
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Recibido: 27 de octubre de 2009.

Aprobado: 30 de mayo de 2009.