CUESTIONARIO Y EJERCICICOS: LABORATORIOS DE BIOQUMICA

METABLICA-LBM

PRESENTADO POR
ROSAURA ANDREA RENGIFO G.

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA

ESCUELA DE CIENCIAS AGROPECUARIAS Y DEL MEDIO AMBIENTE
ECAPMA
PROGRAMA ZOOTECNIA
2014-II

1. Revisar detalladamente el
correctamente el cuadro 1:

montaje

Concepto

de

laboratorio

completar

Numero

Erlenmeyer

Soporte universal

Pinza para bureta

Cuerpo cilndrico graduado de la bureta

Nuez para pinza

Solucin titulante

Llava de paso

Tallo de la bureta

Solucin titulada

2. Con base en la lectura detallada de la gua de laboratorio. Analizar

detalladamente el diagrama de flujo de un evento de laboratorio, el cual se
desarrollo o ejecuto en la respectiva practica y completar el cuadro 2

INICIO ACAT

Informacin/
procedimientos

Catalasa:
buffer fosfato

Sustrato:
centrifugacin

Cuantificaci
n: ACAT

Titulacin
permanganometrica

Pesad
a

Mezcla
Reactiva

Agitado

Bao de
hielo

xido-reductasa

Perxido de hidrogeno H2o2

DATOS

Resultados y
discusin

Concepto/proceso

Numero

Agitacin

Resultados y discusin

Incubacin en bao de hielo

Centrifugacin

Enzima peroxidasa oxido reductasa

Titulacin permanganometrica

Perxido de hidrogeno H2o2

Extraccin con buffer fosfato

3. Con base en los siguientes conceptos y utilizando las palabras de enlace

adecuadas, elaborar un mapa conceptual en cmaptools

4. Con base en la lectura detallada de la gua de laboratorio, incluida en el

protocolo de practica, organizar los respectivos procesos de este experimento,
colocar al frente de cada uno, los nmeros correspondietes, en el cuadro siguiente
Proceso

Numero de orden

Lectura espectrofotomtrica: Am, Ast

Calculo %NNP

Pesada de la muestra en balanza analtica:

Wm
Mezcla reactiva

Filtracin

Muestreo

Medicin de volumen de filtrado: V

Extraccin con acido tricloro actico (ATA)

Registros de datos

5. Con base en la lectura detallada de la gua de laboratorio, includa en el

protocolo de prcticas Establecer la relacin correcta emparejamiento de los
conceptos mostrados en las dos columnas, colocando los nmeros
correspondientes.

Variable Evaluada

Emparejamiento

Tcnica Analtica

1. actividad de catalasa

(7)

2. Carbohidratos No
estructurales

(4)

Desplazamiento de agua por

CO2
Titulacin cido-base con NaOH
0,1N

3. Actividad Uresica

( 6)

4. Capacidad

(2)

Reaccin Qumica en Cubeta

hidroneumtica
Opalescencia, por produccin

Amortiguadora
5. Nitrgeno No Proteco

6. rea

de Azufre
(1)
(3 )

Foliar
7. clorofila

(5)

Cambio de concentracin por

unidad de tiempo
Mezcla de masas de agua a
diferente Temperatura
Calorimetra de reaccin

6. Con base en la lectura detallada de la gua de laboratorio, includa en el

protocolo de prcticas, elaborar un diagrama de flujo, utilizando los siguientes
procesos experimentales:
Muestreo; Extraccin con HCl 0,6N, Filtracin; Medicin de Volumen de filtrado: Vf;
Pesada: Wm; Mezcla colorimtrica de Reactivos; Incubacin; Registro de Datos;
Lectura Espectrofotomtrica; Clculos; Resultados: %CNE.

Pesar
Pesar +/+/- 2.0g
2.0g de
de
muestra
en balanza
muestra en
balanza
analtica
analtica y
y registrar
registrar
como:
(Wm),
como: (Wm),

agregar
50 mL
mL de
agregar 50
de
solucin
solucin
de
HCl
0,6N
de HCl 0,6N

bao
termostatado y
y
bao termostatado
calentar
a
calentar a
90C,durante 20
20 min
min
90C,durante

adicionar
a ste
ste 5mL
5mL
adicionar a
de
de
NaOH
0,6N,
agitar
NaOH 0,6N, agitar
por
15 segundos
segundos
por 15

Alistar
tubos de
de ensayo,
Alistar 3
3 tubos
ensayo,
rotularlos
as: B=blanco;
B=blanco;
rotularlos as:
St=Estndar; m
y
St=Estndar;
m =muestra
=muestra y
adicionarles
adicionarles cuidadosamente
cuidadosamente
Alistar
tubos de
de ensayo,
Alistar 3
3 tubos
ensayo,
rotularlos
as: B=blanco;
B=blanco;
rotularlos as:
St=Estndar;
m =muestra
St=Estndar; m
=muestra

Medir
el volumen
volumen del
del
Medir el
filtrado(Vf)
filtrado(Vf)

-- Agua
Agua destilada
destilada
-Glucosa
-Glucosa 1%
1%
-FFCNE
-FFCNE
Fenol
5%
Fenol 5%
H2SO4
H2SO4
Concentrado
Concentrado
5,0 5,0
5,0 5,0
5,0
5,0
H2O destilada
H2O
destilada

enfriar
min y
enfriar por
por 5
5 min
y
filtrar
sobre papel
papel
filtrar sobre
filtro
filtro

7. Con base en la lectura detallada de la gua de laboratorio, includa en el

protocolo de prcticas, elaborar un Mentefacto, utilizando los siguientes
conceptos:
CONCEPTO

CONCEPTO

Desdobla el Radical H2O2

Actividad cataltica

El sustrato es el perxido

pH y T ptimos

xido-reductasa

Catalasa (CAT)

El sustrato es la rea

Peroxidasa

Peroxisoma
Cintica enzimtica de MichaellisMenten
Impide la acumulacin de perxido

Produce H2O y O2
Parmetros cinticos(Km y Vmx)

Es amidohidrolasa

RBE REDOX

Participa en la foto-respiracin

Falta por hacer

8. Con base en la lectura detallada de la gua de laboratorio, includa en el

protocolo de prcticas, elaborar un diagrama de flujo, utilizando los siguientes
procesos experimentales:
Muestreo; Pesada: Wm; Extraccin con ATA; Mezcla Reactiva; Filtracin; Medicin
de Volumen de filtrado: Vf; Incubacin; Registro de Datos; Lectura
Espectrofotomtrica; Clculos; Resultados: %NNP

Pesar +/- 2,0 g de muestra (Suelo, forraje)

(picada pulverizada) , en balanza
analtica y registrar como (Wm)

Adicionar 20 mL de agua destilada fra,

agitar por 1min
Dejar reposar la mezcla por 15 min

Adicionar 30 mL de solucin de ATA, agitar

por 1min, Reposar a Temperatura
ambiente por 20 min

guardar en nevera a refrigeracin,

Alistar 4 tubos de ensayo, rotularlos as:

B:blanco; st :estndar; m-1 y m-2

Recolectar 5 mL del filtrado, colocarlos en

un tubo de ensayo y rotularlo

Agua destilada
Albmina 0,5%
FFNNP , FSNNP
Reactivo de Biuret

Filtrar sobre papel filtro en probeta

Medir el volumen del filtrado(Vf)

Lectura espectrofotomtrica
c) Alistar el espectrofotmetro a una
longitud de onda de 540 nanmetros
(nm) y calibrarlo configurarlo con la
solucin del tubo blanco.
d) Leer la Absorbancia(A) de las dems
soluciones : st, m-1 y m2
Registrar estos valores en la tabla de
datos

9. A partir de una consulta detallada de literatura, completar el siguiente cuadro:

Temtica
zootecnia
Actividad
Eursica

Capacidad
Amortiguadora

Aplicabilidad en
Agronoma

Ingenieria agroforestal

De esta forma, al titular el

hidrxido de amonio producido
por la hidrlisis, se puede
calcular la cantidad de urea
hidrolizada, utilizando el
mtodo estequiomtrico,
puesto que se producen 2
moles de
NH4OH por cada mol de urea
desdoblada. Por lo tanto, esta
reaccin puede utilizarse con
xito en la determinacin de
urea en sangre, orina, suelos y
otros materiales orgnicos.

La capacidad amortiguadora,
se refiere al potencial qumico
que
tienen
los
sistemas
edficos para regular y controlar
su pH, cuando son sometidos a
procesos de acidificacin
alcalinizacin; dicha regulacin
se da por la presencia de
sistemas
amortiguadores
biolgicos, existentes en la
materia orgnica e inorgnica
del suelo.

La capacidad amortiguadora, se
refiere al potencial qumico que
tienen los sistemas edficos
para regular y controlar su pH,
cuando son sometidos a
procesos de acidificacin
alcalinizacin; dicha regulacin
se da por la presencia de
sistemas amortiguadores
biolgicos, existentes en la
materia orgnica e inorgnica
del suelo.

La capacidad amortiguadora,
se refiere al potencial
qumico que tienen los
sistemas edficos para
regular y controlar su pH,
cuando son sometidos a
procesos de acidificacin
alcalinizacin; dicha
regulacin se da por la
presencia de sistemas
amortiguadores biolgicos,
existentes en la materia
orgnica e inorgnica del

suelo.
Carbohidratos
No
Estructurales

Actividad de
Catalasa

Nitrgeno No
proteco

Este mtodo determina la

cantidad de carbohidratos
totales No estructurales,
basndose
en su contenido de almidones
hidrolizables y azcares
solubles.
La catalasa es una
enzima( protenas con gran
especificad)que se
encuentra en organismos
vivos como los
peroxisomas y cataliza la
descomposicin del
perxido de hidrgeno
(H202) en oxgeno y agua.
El perxido de hidrgeno
es un residuo del
metabolismo celular de
muchos organismos vivos,
pero dada su toxicidad
debe transformarse
rpidamente en
compuestos menos
peligrosos. Para ello se usa
con frecuencia esta enzima
que cataliza su
descomposicin en agua y
oxgeno
Cerca del 90 % del nitrgeno
total (NT) presente en el

contenido del lquido ruminal,

se encuentra en forma
insoluble.
En el laboratorio, el nitrgeno
no proteico (NNP), que est
includo en: rea, amonaco y
pptidos, es tradicionalmente
aquel que pasa en el filtrado
despus de la precipitacin
con un reactivo especfico para
protena.
Area Foliar y
Clorofilas

10. Con base en la lectura detallada de la gua de laboratorio, includa en el protocolo de prcticas, completar el
siguiente cuadro:
SUSTANCIA

FRMULA MOLECULAR

PESO MOLECULAR(G/MOL)

Urea

CH4N2OUREA.

60,06 g/mol

Fosfato dibsico de
potasio
Cloruro de Mercurio
cido Clorhdrico

K2HPO4

174,17

HGCL2
HCL

271,52 g/mol
36,46094 g/mol

119.98 gr / mol

Fosfato monobsico de
sodio

NAH2PO4

Hidrxido de sodio
Acido Tricloroactico

NAOH
CCL3COOH

39,997 g/mol
163,39

Fenol
cido Sulfrico
Perxido de Hidrgeno
Permanganato de
potasio
Acetona

C6H6O
H2SO4
H2O2
KMNO4

94,11124 g/mo
98,079 g/mol
34,0147 g/mol
158,034 g/mol

C3H6O

58,08 g/mo