Wilber Sosa Holgun

APC (GEN SUPRESOR TUMORAL)

El gen APC (Adenomatous polyposis coli) es un gen supresor tumoral que codifica una protena
que juega un importante papel en la supresin de tumores. La prdida de su funcin que puede
estar ocasionada por diferentes mutaciones, facilita la aparicin de cncer colorrectal y provoca
la enfermedad denominada poliposis adenomatosa familiar. El gen APC humano se encuentra
situado en el brazo largo del cromosoma 5, entre las posiciones 21 y 22, desde la base
112.118.468 hasta la 112.209.532, est compuesto 21 exones y codifica una protena formada
por 2843 aminocidos. Ha sido identificado en todos los animales mamferos a los que se les
ha estudiado el genoma.
Las mutaciones en la lnea germinal del gen APC, es decir las que afectan a las clulas
productoras de gametos, son las responsables de la aparicin de poliposis adenomatosa
familiar, enfermedad gentica de herencia autosmica dominante, que puede transmitirse a los
descendientes y ocasiona entre otras manifestaciones una alta probabilidad de desarrollar
cncer de colon. Por contra, las mutaciones espordicas, es decir las que afectan a las clulas
somticas o no germinales, tienen lugar en el 80% de los canceres de coln no hereditario y no
son transmisibles a la descendencia.

Introduccin al APC
Las mutaciones en el gen APC (adenomatous polyposis coli) son fuertemente asociadas con
ambos casos heredados y espordicos del cncer del colon. As como ser descrito en la
siguiente pgina, la protena APC, como varios supresores de tumor, controla la expresin de
genes crticos en el proceso de la divisin celular.
Se piensa que la mayora de los casos del cncer del colon desarrollan lentamente sobre un
perodo de varios aos. La inactivacin del gen APC, localizado en el crosomosoma 5, parece
aumentar la proliferacin celular y contribuir a la formacin de plipos coloniales. Varias
alteraciones genticas tienen que ocurrir durante la conversin de clulas del colon normales a
clulas capaces de formar tumores. En varios casos la mutacin del gen APC parece ser uno
de los primeros pasos. La evidencia se encuentra al examinar los individuos que han heredado
una mutacin en uno de sus genes APC. Estos pacientes tienen una enfermedad llamada
poliposis adenomatosa familar (PAF), una condicin en la cual el colon est lleno de plipos.
Cada plipo tiene la capacidad de desarrollar cncer, as que los individuos con la mutacin
heredada estn a mucho mayor riesgo de cncer. Esta situacin es muy parecida a la que
hemos descrito sobre una forma heredada de retinoblastoma en la seccin sobre Rb. En vez de
necesitar dos mutaciones somticas en la misma clula para perder la funcin del APC, estos
individuos slo necesitan un cambio gentico.
Las comparaciones de mutaciones identificadas en las clulas removidas en diferentes etapas
del desarrollo del cncer han podido establecer un orden posible de mutaciones genticas que
conllevan a un grupo de cnceres del colon. En este modelo, el gen APC es mutado en la
primera etapa, produciendo clulas que se reproducen ms de lo normal. Entonces, estas

clulas forman un plipo, el cual puede convertirse en cncer.

La funcin del APC

Ya que la ausencia de la protena APC funcional lleva a la incrementacin en la divisin celular,

es razonable decir que el funcin de la protena normal es la de inhibir en cierta forma la
divisin celular. Por cierto, este es el caso. La protena APC forma un complejo con la betacatenina, un factor de transcripcin, llevan a la degradacin de la beta-catenina. Durante la
ausencia de la protena APC existe un exceso de beta-cateninas en el ncleo. Las betacateninas se unen a otras protenas en el ncleo para formar un complejo que se une al ADN y
activa la transcripcin de varios genes. Uno de los genes activados por este complejo es c-myc,
oncogen conocido. C-myc es en s un factor de transcripcin para varios genes que controlan el
crecimiento y la divisin celular. Entonces, la mutacin del gen APC conlleva a una cascada de
eventos que al final resultan en mayor divisin celular. Una diagrama de este modelo de la
funcin del APC est mostrada debajo.
Por supuestos, varios otros factores pueden influenciar la expresin de los genes y sus
productos, pero las mutaciones en los genes APC parecen ser correlacionados con un aumento
en los niveles de beta-catenina y c-myc resultando en un ritmo de proliferacin alto. .

Articulo
Deteccin de mutaciones del gen APC en el ADN fecal de los pacientes con tumores
colorrectales
Detection of APC mutations in fecal DNA from patients with colorectal tumours
Fundamento. Los mtodos no invasivos de deteccin de los tumores colorrectales podran
disminuir la morbimortalidad producida por esta enfermedad. Tericamente, las mutaciones del
gen de la poliposis adenomatosa del colon (APC) que inician el desarrollo de los tumores
colorrectales podran constituir un marcador ptimo para la deteccin de estos tumores. El
propsito de nuestro estudio fue determinar la factibilidad de la deteccin de mutaciones del
gen APC en el ADN fecal mediante la utilizacin de mtodos recientemente desarrollados.
Mtodos. Purificamos el ADN de muestras fecales obtenidas de forma rutinaria y valoramos la
presencia de mutaciones del gen APC mediante el empleo de un nuevo mtodo denominado
truncamiento proteico digital. Con esta tcnica se podran potencialmente identificar de una
forma sensible y especfica muchas mutaciones diferentes.
Resultados. Se investigaron muestras fecales de 28 pacientes con cncer colorrectal no
metasttico, 18 pacientes con adenomas de al menos 1 cm de dimetro, y de 28 pacientes
controles sin enfermedad neoplsica. Se identificaron mutaciones del gen APC en 26 de los 46
pacientes con neoplasias (57%; intervalo de confianza del 95%, 41-71%) y en ninguno de los
28 pacientes controles (0%; intervalo de confianza del 95%, 0-12%; p < 0,001). En los
pacientes con resultados positivos, los genes APC mutantes constituyeron el 0,4-14,1% de
todos los genes APC observados en las heces.
Conclusiones. En los pacientes con tumores colorrectales relativamente iniciales pueden
detectarse mutaciones del gen APC. Este estudio de factibilidad sugiere un nuevo mtodo para
la deteccin precoz de las neoplasias colorrectales.

Wilber Sosa Holgun

AKT1
Protein kinasa B
El gen AKT1 provee instrucciones para formar una protena llamada AKT1 Quinasa (Enzima).
Esta protena se halla en varios tipos de clulas a travs del cuerpo, donde este juega un rol
crtico. Por ejemplo, la AKT1 kinaza ayuda a regular el crecimiento y divisin celular
(proliferacin), el proceso por el cual las clulas maduran para transportar su funciones
especicas (diferenciacin), y as mantener la supervivencia celular. La AKT1 Quinasa tambin
ayuda al control de la apoptosis, que es la destruccin propia de clulas cuando ellas llegaron a
daarse o ya no son necesarias.
Al menos una mutacin en el gen AKT1 se ha encontrado que causa el sndrome de Proteus.
Esta mutacin cambia un solo bloque de la construccin de la protena (aminocido) en AKT1
Quinasa. En concreto, se reemplaza el aminocido cido glutmico con el aminocido lisina en
la posicin 17 de la protena (escrito como Glu17Lys o E17K).
El gen AKT1 pertenece a la clase de genes conocidas como oncogenes. Cuando mutan, los
oncogenes tienen el potencial para causar que las clulas normales se vuelvan cancerosas.
RAC-alfa serina/treonina-protena quinasa es una enzima que en los humanos est codificada
por el gen AKT1. Mltiples variantes de la transcripcin empalmados alternativamente se han
encontrado para este gen. Se conoce comnmente como PKB, o por ambos nombres como
"Akt/PKB".
Donde est localizado el gen AKT1?
Localizacin Citogentica: 14q32.32
Locacin Molecular en el Cromosoma 14: Pares
de bases 105,235,685 a 105,262,079
El gen AKT1 est localizado en el brazo largo (q)
del cromosoma 14 en la posicin 32.32.
Mas precisamente, el gen AKT1 est localizado
del par de base 105,235,685 al par de base
105,262,079 en el cromosoma 14.
Diagnstico de Joseph Merrick
Los cientcos planean ahora analizar muestras de ADN del esqueleto de Joseph Merrick, que
se conserva en el Royal London Hospital, donde vivi y muri en 1890 a los 27 aos, para
determinar si realmente fue el sndrome de Proteus el que caus su drstica desguracin.
El hospital ha conservado su esqueleto y ha permitido a los investigadores analizar su ADN
centenario con las tcnicas ms avanzadas.
Sin embargo, el diagnstico de Merrick no ser una tarea sencilla porque, tal como explican los
cientficos, la mutacin no ocurre en todas las clulas sino slo en un subgrupo celular.
Por eso suele ocurrir que durante una biopsia mdica, en la cual se toma una muestra de tejido
para analizarlo, no se logra hacer un diagnstico de la enfermedad porque slo aparecen
clulas sanas.
"El diagnstico de nuestros pacientes ha sido realmente difcil" explica la doctora Leslie
Biesecker, quien dirigi el estudio.
"Pero este hallazgo molecular nos da una base para lograr un diagnstico molecular objetivo en
pacientes que muestran una forma desconcertante de crecimiento desproporcionado" agrega.
El gen involucrado en este estudio, el AKT1, es un oncogn, un gen que tiene el potencial de
causar cncer.
Los cientficos creen que la variante que causa el sndrome de Proteus tambin est asociada
al proceso que provoca la metstasis (cuando un tumor canceroso se propaga a otros
rganos).

Esto signica, dicen los investigadores, que cualquier tratamiento potencial que pueda bloquear
el crecimiento excesivo causado por el sndrome de Proteus podra ser utilizado tambin para
frenar la progresin de ciertos tipos de cncer como:

Cncer de Mama

Cncer de Ovario

Cncer Clorectal

Proteus y otras hamartomatosis - seran todos casos de mosaicismo somtico?

En el Noticiero anterior, difundido hace un mes, hemos mencionado un recientemente
publicado artculo y su comentario editorial, en el New England J Med, sobre este hallazgo que
consideramos de gran inters. Se refiere a mutaciones causantes del sndrome de Proteus, en
forma de un mosaicismo somtico, con mutaciones activantes del gen AKT1 que codifica la
enzima AKT1 kinasa, activa en la proliferacin y en la apoptosis celular.
No todos hemos tenido la excepcional y al mismo tiempo deprimente oportunidad de
observar un caso de este sndrome (con incidencia < 1caso en un milln, segn los autores), o
incluso seguir su desarrollo a lo largo de varios aos. Hemos deseado y esperado algn
hallazgo que pudiera dilucidar la causa y el mecanismo de origen de esta alteracin, al menos
para comprender el proceso y quizs un da poder prevenirlo o incluso enfocar medidas
teraputicas apropiadas.
El artculo en cuestin proviene de un grupo amplio de unos 40 investigadores
procedentes de diversas instituciones peditricas y de gentica clnica, en los Estados Unidos,
Alemania, Israel y Reino Unido. Encararon el problema en base a una hiptesis enunciada en
1986 por el dermatlogo genetista alemn R.Happle, de que una enfermedad similar, el
sndrome de McCune-Albright, pudiera ser causada por mosaicismo somtico en una mutacin
potencialmente letal.
Han logrado reunir muestras de tejidos alterados y no alterados, de 29 pacientes (en
total 158 muestras). Con la hiptesis de que las muestras de tejidos alterados mostraran un
patrn gnico diferentes de las de los tejidos no afectados, evidenciando as un mosaicismo,
utilizaron primero el mtodo de secuenciamiento exmico para encontrar variantes en
heterocigosis, que indicaran una tendencia constante; al hallar candidatos posibles,
procedieron con el mtodo ms preciso de secuenciacin Sanger y ensayo con enzimas de
restriccin (particularmente la enzima de restriccin modificada MboII), y confirmaron sus
resultados mediante un anticuerpo anti-AKT que seala la enzima cuando est fosforilada.
26 de los 29 pacientes estudiados mostraron la presencia de una nica mutacin
(c.49G-->A, p.Glu17Lys) en un 1-47% de las muestras patolgicas. En muestras de sangre de
los mismos pacientes no se hall el mosaicismo, excepto en 2 muestras con el anlisis con la
enzima de restriccin. No se comprob una asociacin entre la edad de comienzo de cada
caso y el grado del mosaicismo que present.
En 3 pacientes no se encontr el mosaicismo mencionado.
Los autores concluyen que este sndrome es un ejemplo de mosaicismo somtico por
una mutacin que de ser germinal resultara letal. En la discusin de los resultados, los autores
enfocan la cuestin de no hallarse ms mosaicismos en la sangre perifrica, de limitarse a un
solo codn del gen AKT1, y de no observarse frecuentemente en muestras tumorales aunque
el gen tiene potencial oncognico. Hacen notar que en casos de este sndrome o
fenotpicamente muy similares sndrome SOLAMEN, y Cowden segmental tipo 2), se
describieron mutaciones del gen PTEN y agregan que mutaciones de prdida de funcin del
PTEN ocasionan activacin del AKT1.
(Una pequea observacin: al designar la mutacin hallada como Glu17Lys pero en el
texto se menciona repetidamente que el aminocido mutado N 17 es la Glutamina, se
produce una confusin ya que la abreviatura propia de la glutamina es Gln. La secuencia
nucleotdica en la Figura 2 confirma que se trata de cido glutmico).

El artculo editorial, cuyos autores, en especial John Opitz, son bien conocidos en el
mbito de la gentica clnica, aporta algunos datos histricos, como el del caso del hombre
elefante quien vivi en el siglo 19 y se sospecha tuvo este sndrome.
A Mosaic Activating Mutation in AKT1 Associated with the Proteus Syndrome
Marjorie J. Lindhurst, Ph.D., Julie C. Sapp, Sc.M., Jamie K. Teer, Ph.D., Jennifer J. Johnston,
Ph.D., Erin M. Finn, B.A., Kathryn Peters, M.S., Joyce Turner, M.S., Jennifer L. Cannons, Ph.D.,
David Bick, M.D., Laurel Blakemore, M.D., Catherine Blumhorst, M.S.N., Knut Brockmann,
M.D., Peter Calder, M.B., B.S., Natasha Cherman, Ph.D., Matthew A. Deardorff, M.D., Ph.D.,
David B. Everman, M.D., Gretchen Golas, M.S., Robert M. Greenstein, M.D., B. Maya Kato,
M.D., Kim M. Keppler-Noreuil, M.D., Sergei A. Kuznetsov, Ph.D., Richard T. Miyamoto, M.D.,
Kurt Newman, M.D., David Ng, M.D., Kevin O'Brien, M.S., Steven Rothenberg, M.D., Douglas J.
Schwartzentruber, M.D., Virender Singhal, M.D., M.B.A., Roberto Tirabosco, M.D., Joseph
Upton, M.D., Shlomo Wientroub, M.D., Elaine H. Zackai, M.D., Kimberly Hoag, Tracey
Whitewood-Neal, Pamela G. Robey, Ph.D., Pamela L. Schwartzberg, M.D., Ph.D., Thomas N.
Darling, M.D., Ph.D., Laura L. Tosi, M.D., James C. Mullikin, Ph.D., and Leslie G. Biesecker,
M.D.
N Engl J Med 2011; 365:611-619
Background. The Proteus syndrome is characterized by the overgrowth of skin, connective
tissue, brain, and other tissues. It has been hypothesized that the syndrome is caused by
somatic mosaicism for a mutation that is lethal in the nonmosaic state.
Methods. We performed exome sequencing of DNA from biopsy samples obtained from
patients with the Proteus syndrome and compared the resultant DNA sequences with those of
unaffected tissues obtained from the same patients. We confirmed and extended an observed
association, using a custom restriction-enzyme assay to analyze the DNA in 158 samples from
29 patients with the Proteus syndrome. We then assayed activation of the AKT protein in
affected tissues, using phosphorylation-specific antibodies on Western blots.
Results. Of 29 patients with the Proteus syndrome, 26 had a somatic activating mutation
(c.49GA, p.Glu17Lys) in the oncogene AKT1, encoding the AKT1 kinase, an enzyme known
to mediate processes such as cell proliferation and apoptosis. Tissues and cell lines from
patients with the Proteus syndrome harbored admixtures of mutant alleles that ranged from 1%
to approximately 50%. Mutant cell lines showed greater AKT phosphorylation than did control
cell lines. A pair of single-cell clones that were established from the same starting culture and
differed with respect to their mutation status had different levels of AKT phosphorylation.
Conclusions The Proteus syndrome is caused by a somatic activating mutation in AKT1,
proving the hypothesis of somatic mosaicism and implicating activation of the PI3KAKT
pathway in the characteristic clinical findings of overgrowth and tumor susceptibility in this
disorder. (Funded by the Intramural Research Program of the National Human Genome
Research Institute.)
Editorial. Hamartoma Syndromes, Exome Sequencing,
John
M.
Opitz,
M.D.,
and
Lynn
N Engl J Med 2011; 365:661-663

and
B.

Protean
Jorde,

Puzzle
Ph.D.