Introduccin:

Mutacin.- Es un cambio en la secuencia nucleotidica del DNA y que es heredable.

Mutante.- Organismo que sufri un una mutacin.
Mutgeno.- Agente que provoca una mutacin.
Los tipos de agentes mutagnicos se clasifican en:
o
o
o

Mutgenos qumicos: son compuestos qumicos capaces de alterar las estructuras del
ADN de forma brusca, como el cido nitroso, brominas y algunos de sus compuestos.
Mutgenos fsicos: son radiaciones que pueden alterar la secuencia y estructura del ADN.
Como la radiacin ultravioleta que origina dmeros de pirimidina (generalmente de timina), y
la radiacin gamma y la alfa que son ionizantes.
Mutgenos biolgicos: son aquellos organismos que pueden alterar las secuencias del
material gentico de su hospedador; como algunos virus, bacterias y hongos.

Revertante.- Organismo regresa a su estado nativo tanto fenotpica y/o genotpicamente.

Reversin.- es una segunda mutacin en la cual se regenera el fenotipo nativo.
Hay dos tipos de reversin:
o Reversin genotpica.
o Reversin fenotpica.
La reversin genotpica se puede conseguir de dos maneras:
o
o
o
o
o

Retromutacin (en sentido).- consiste en recuperar la secuencia exacta de nucletidos en

el ADN.
Mutacin supresora.- es una mutacin secundaria que restaura total o parcialmente la
funcin prdida.
Retromutacin.- Consiste en recuperar la secuencia exacta de nucletidos en el ADN.
A veces tambin se habla de retromutacin en sentido funcional, de manera, que se
recupera la actividad enzimtica normal pero no se recupera la secuencia original de
nucletidos en el ADN.
Mutacin supresora.- Es una mutacin secundaria que restaura total o parcialmente la
funcin prdida.

No todas las mutaciones son causadas por mutgenos. Hay "mutaciones espontneas", llamadas
as debido a errores en la reparacin y la recombinacin del ADN.
Hay que destacar que, gracias a las mutaciones, actualmente existe gran biodiversidad. Si no fuera
por las variaciones que producen las alteraciones en el ADN, no habra variabilidad fenotpica, ni
adaptacin a los cambios ambientales. Por lo tanto, las mutaciones tienen su parte positiva, ya que
todo proceso biolgico tienes sus ventajas e inconvenientes.
Mutaciones puntuales son de 2 tipos:
o

Sustitucin de un nucletido por otro.

Se originan:

Mutacin silenciosa.- cuando el codn alterado contina codificando para el mismo

aminocido y por lo tanto se sintetiza la misma protena.

Mutacin de sentido errneo: cuando el codn alterado codifica para un aminocido

diferente que puede alterar las propiedades de la protena, o incluso convertirla en no
funcional.

Mutacin sin sentido: cuando la sustitucin del nucletido produce un codn de

terminacin de la cadena. El producto es una protena incompleta.
o

Mutaciones Por Corrimiento De Lectura

Mutaciones de insercin.- cuando se aaden uno o ms nucletidos

Mutaciones de delecin.- cuando se eliminan uno o ms nucletidos en un gen.

en

un

gen.

Estos dos tipos de mutacin llevan a la formacin de protenas no funcionales.

Una caracterstica importante de las mutaciones puntuales es que estas pueden revertir
(revertantes).

Objetivos:

Conocer el manejo de algunas tcnicas para producir mutaciones

Analizar algunos parmetros que caracterizan el proceso de mutacion, como la
frecuencia de mutacion y la relacin dosis y respuesta.
Caracterizar el dao producido por la luz ultravioleta y la Hidroxilamina, mediante
pruebas de reversin.

Resultados:
Tabla de porcentaje de supervivencia
Tubo

1
2
3
4
5

Conc.
Hidroxilami
na
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8

# de
colonias

Dilucin

titulo

496/564
346/360
185/159
132/151
136/114

10-6
10-6
10-5
10-5
10-5

5.3x109
3.5x109
1.87x108
1.41x108
1.25x108

% de
superviven
cia
100
66.03
3.52
2.66
2.35

100
90
80
70
60

% Sobrevivencia

50
40
30
20
10
0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

0.7

concentracion de hidroxilamina (M)

Figura 1.-Efecto letal de la Hidroxilamina sobre Escherichia coli W3350

Mutantes obtenidas
Concentracin
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8

Concentracin
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8

# de
colonias
0/0
1/0
1/1
2/1
0/0

Dilucin

# de
colonias
0/0
1/0
2/1
1/1
3/2

Dilucin

0
10-5
10-5
10-5
0

0
10-6
10-3
10-3
10-3

Ttulo de
mutantes
0
5x105
1x106
1.5x106
0

Ttulo de
mutantes
0
5x105
1.5x104
1x104
2.5x104

Frecuencias de mutacion obtenidas a

Concentracin

Titulo se
sobrevivientes

Ttulo de
mutantes

Frecuencia de
mutacion

0.8

0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
Concentracin
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8

5.3x109
3.5x109
1.36x108
1.585x108
2.87x108
Ttulo de
mutantes
0
5x105
1.5x104
1x104
2.5x104

0.01
0.01
0.01
0.01
0.01
Frecuencia de mutacion 0.01
0
0
0
0
0

0
5x105
1x106
1.5x106
0
Ttulo de
sobrevivientes
1.3x109
4.5x108
1 x107
5.5 x106
3x106

0.2

0.4

0
1.4x10-4
7.3x10-3
9.4x10-3
0
Frecuencia de
mutacion
0
1.11x10-3
1.5x10-3
1.8x10-3
8.3x10-3

0.6

0.8

conc. de Hidroxilamina (M)

frecuecia 1

frecuencia 2

Revertantes
Mutageno
Estreptomicina
9-aminoacridina
Nitrosoguanidina
5-Bromouracilo
Hidroxilamina
Nada

Mutante 1T2
No revitio
No revitio
Revirti
No revitio
No revitio
No revitio

Mutante 2T4
No revitio
No revitio
Revirtio
No revitio
No revitio
No revitio

Curva dosis respuesta Efecto mutagnico de la Hidroxilamina en Escherichia coli W3350

Discusiones:
Conclusiones:
Bibliografia