Universidad de Chile

Facultad de Medicina
PreuMed 2012
Biologa

Gua introductoria al uso del microscopio ptico

Material complementario para desarrollar antes de la realizacin de la actividad prctica.

Estudiante de PreuMed:
Te invitamos a reforzar de manera prctica los conocimientos bsicos que debes dominar sobre biologa
celular para rendir una buena Prueba de Seleccin Universitaria. Esta gua es introductoria, te entrega una
nocin bsica de la microscopa, necesaria para realizar el posterior trabajo prctico. Junto con esta gua se
adjuntan una serie de videos y links de utilidad, te recomendamos desarrollar las actividades que se plantean
con anticipacin y detalladamente antes de iniciar tus actividades prcticas.

Introduccin
Sin duda el planteamiento de la Teora Celular, ha sido fundamental para el desarrollo de la ciencia y la
humanidad. En ella, se describe a los seres vivos como un conjunto de unidades llamadas clulas, cuya actividad
origina todos los procesos que vemos en el organismo completo. Dado que las clulas en general son tan
pequeas que son invisibles al ojo humano, fue crucial el invento de un instrumento que permitiera estudiarlas a
gran aumento. Este instrumento es el microscopio, que a travs de sus diversas versiones en el curso de la
historia, nos ha plasmado una nocin de la asombrosa complejidad y diversidad de las clulas existentes, as
como tambin nos ha permitido construir una caracterizacin y clasificacin de los seres vivos.
El microscopio es un instrumento que permite aumentar el tamao de un objeto un nmero
determinado de veces. Existen dos grandes tipos de microscopio: el microscopio ptico (que usa luz) y el
microscopio electrnico (que usa electrones). El microscopio ptico fue el instrumento que llev al
descubrimiento de la clula, mientras que el microscopio electrnico, dado su enorme poder de resolucin,
permiti establecer una descripcin detallada de las estructuras subcelulares (como por ejemplo los organelos
celulares).
El microscopio ptico funciona en base a lentes de vidrio convergentes, que como su nombre lo indica,
provocan que los rayos de luz converjan en un punto, al cual se le llama foco. Al lograr que un nmero de rayos
de luz que normalmente veramos separados, enfoquen en nuestra retina, podemos interpretar esa imagen (que
es una imagen virtual) como una ampliacin de la imagen real.

Trayectoria real de los rayos de luz

Imagen
virtual

Objeto
Ojo
Lente
convergente
Trayectoria aparente de los rayos de luz

Dependiendo de si el microscopio posee un lente o un conjunto de lentes, se le llamar microscopio

ptico simple (lupa) o microscopio ptico compuesto, respectivamente. El microscopio ptico simple ha
quedado obsoleto y el compuesto es actualmente el ms utilizado. Su sistema ptico posee un lente
condensador (que concentra la luz proveniente de la fuente), una serie de lentes objetivos (que recogen los
rayos difractados por la muestra) , con diferentes poderes de aumentos (usualmente 4x, 10x, 40x y 100x) y uno
o dos lentes oculares (cerca de los ojos) que generalmente proporcionan un aumento de 10x. Si el microscopio
posee slo un lente ocular se llamar microscopio monocular, mientras que si tiene dos se llamar microscopio
binocular.

Ojo
Ocular
Objetivo
Muestra
Condensador
Fuente de luz
Gua temtica de Biologa 08 (2011), GenomaSur.

Los trminos de aumento se expresan en x, de tal forma que un aumento de 10x (diez por) significa
que una imagen est aumentada 10 veces el tamao original. El aumento total del microscopio es el producto
de los aumentos del lente objetivo ms el lente ocular.

Actividad 1: Partes del microscopio ptico compuesto.

Abre el archivo 1.-Partes del microscopio (o ingresa a http://youtu.be/yejc2e0f0cw) y completa el siguiente
esquema de un microscopio ptico compuesto monocular.

Repite la actividad con un microscopio ptico compuesto binocular.

Actividad 2: Funcin de las partes del microscopio.

Lee cuidadosamente la tabla que se presenta a continuacin, y con ayuda del video 2.-Funcin de las partes del
microscopio (o ingresando a http://youtu.be/yejc2e0f0cw) hazte una idea general del funcionamiento del
microscopio.
Parte del microscopio
Fuente de luz
Lente condensador
Diafragma iris
Platina y pinza
Controles x e y
Tornillo macromtrico
Tornillo micromtrico
Lentes objetivos
Revlver
Lente ocular

funcin
Ampolleta que proporciona los rayos de luz
Concentra los rayos de luz
Regula la cantidad de luz que llega a la muestra
Sostienen la placa a observar
Mueven la placa en los ejes x e y
Mueve la platina hacia arriba o hacia abajo, permite el enfoque grueso de la muestra
Permite el enfoque fino de la muestra
Proporcionan diferentes grados de aumento (4x, 10x, 40x y 100x)
Sostiene los lentes objetivos y permite rotarlos
Proporciona una magnificacin de 10x

Actividad 3: Uso correcto del microscopio ptico.

El microscopio de luz tiene una serie de reglas que debes seguir para su correcto uso. Debes asegurarte que el
microscopio est en condiciones ptimas antes de empezar a trabajar con l, luego, debes lograr el enfoque de
la muestra a diferentes aumentos, y finalmente debes dejar el microscopio en un estado de reposo adecuado
para la mantencin del equipo y para fututos usuarios.
A continuacin se enumeran los pasos que debes seguir para el correcto uso del microscopio, lelos
cuidadosamente, observa el video 3.-Uso del microscopio o ingresa a http://youtu.be/ZADZYylQihY y vuelve a
leer los pasos.
1. Debes asegurarte que el objetivo de menor aumento o lupa est en el eje ptico del microscopio. Si no
es as, colcalo en su sitio. Comprueba el sonido metlico que indica que est en su lugar. Si el
condensador es ajustable y se observarn muestras teidas, asegrate de que est arriba (cercano a 2
mm de la platina) y con el filtro azul puesto (el filtro azul es un dispositivo que selecciona los rayos de luz
ms cercanos al azul).
2. Prende el microscopio. Sube la intensidad de la luz si sta es regulable y abre el diafragma.
3. Pon la placa sobre la platina. Desplzala por la platina y sujtala con la pinza. Si la placa est sucia,
lmpiala antes de ponerla. Asegrate de colocar la muestra con el cubreobjetos hacia arriba (lmina de
vidrio delgada).
4. Centra la muestra con los controles x e y. Pon la parte coloreada o el lugar donde se encuentra la
muestra en el eje ptico del microscopio (lugar por donde pasa la luz). Cierra un poco el diafragma para
no encandilarte.
5. Mirando lateralmente, utiliza el tornillo macromtrico para acercar la platina hasta casi tocar la
preparacin (respetando al menos unos 3mm) o bien hasta que la platina llegue a su tope.
6. Mira a travs del ocular o los oculares. Si es un microscopio binocular y es la primera vez que miras por
l, ajusta la distancia interpupilar (que cada ocular quede alineado con tu pupila), cuando lo hayas hecho

7.

8.

9.

10.

vers un nico campo centrado, de lo contrario vers dos. Con el tornillo macromtrico aleja lentamente
la platina del objetivo. En una determinada posicin, el espcimen aparecer en foco.
Con movimientos finos del micromtrico ajusta el foco a tus ojos. Utiliza para tu observacin la parte
central del campo visual. Centra el espcimen si es necesario y ajusta el diafragma (o mueve el
condensador) de forma que obtengas una iluminacin adecuada (campo claro con iluminacin
homognea, si es una muestra al fresco obtn el mayor contraste posible).
Para pasar a un aumento mayor, gira el revlver, hasta colocar el siguiente objetivo en el eje ptico.
Realiza nuevamente el enfoque fino con el micromtrico. No utilices el tornillo macromtrico con los
objetivos de 10x y 40x, para evitar romper la muestra o daar los lentes.
Procura no pasar al objetivo de 100x a menos que lo indique tu tutor. El uso de este objetivo necesita la
colocacin de una gota de aceite de inmersin y una manipulacin extremadamente cuidadosa para
evitar romper la muestra y daar el lente.
Al finalizar tus observaciones, apaga la luz del microscopio (baja la potencia) y deja el microscopio en
posicin de reposo:
a. Con el objetivo de menor aumento en el eje ptico.
b. Con el condensador en la posicin ms alta.
c. La platina en su posicin ms baja.
d. El carro atrs centrado y apegado al brazo del microscopio.
e. Si es oportuno, dejar el microscopio en el centro de la mesa (cuida levantarlo y evitar los golpes
o vibraciones, pues descalibran el instrumento).

Actividad 4: Simulacin del uso del microscopio.

Ya has revisado los pasos esenciales para usar el microscopio en forma correcta, ahora prueba ensayar esos
pasos usando un programa computacional que simula un microscopio real. Este programa se encuentra en
ingls, por lo que te recomendamos abrir la presentacin con diapositivas de power point 4.-Tutorial
Microscopio Virtual que contiene un tutorial en espaol. Revisa cuidadosamente todos los pasos y
posteriormente ensaya enfocar distintas muestras hasta el objetivo de 40x. Puedes tener abierta la presentacin
y pasar a otras ventanas apretando Alt+Tab. Necesitas tener una conexin a internet y la versin 6 de Flash o
superior para poder utilizar el microscopio virtual, el enlace es el siguiente:
http://www.udel.edu/biology/ketcham/microscope/scope.html

Una vez finalizada esta actividad, ya estars preparado(a) para realizar tu actividad prctica. Te recordamos
repasar la materia de biologa celular, de manera de llegar preparado(a) y que la actividad sea fluida y
provechosa.