Sinapsis Inmunologica

La sinapsis inmunitaria (SI) o agregado de activacin

supramolecular (AASM) es una estructura supramolecular estable que
se da en la unin celular entre un linfocito T (LT) y una clula
presentadora de antgeno (CPA). Una estructura tridimensional
compleja y muy dinmica, en la regin de contacto entre el LT y
la CPA, con una intensa actividad de seales bioqumicas entre estas
clulas.
Tras el reconocimiento por parte del Receptor del Linfocito T (RLT) de
su antgeno (Ag) presentado en el CPH, se da una importante
cantidad de transmisiones necesarias para la activacin de diferentes
procesos inmunolgicos. La SI estabiliza y ayuda en la interaccin
entre las dos clulas, interaccin que debe prolongarse durante
tiempo suficiente para que la respuesta inmune sea llevada a cabo.

Historia
La sinapsis inmunolgica fue descrita por primera vez por Abraham
Kupfer del National Jewish Medical and Research Center en Denver en
1999. Michael Dustin en la Universidad de Nueva York, acu el
trmino sinapsis inmune y estudi en mayor profundidad el
proceso. Daniel David y Jack Strominger mostraron sinapsis
inmunolgicas estructuradas para clulas Natural Killer, otro tipo
de linfocito, y publicaron tambin en 1999.

Estructura
La estructura de la SI o AASM est formada por anillos concntricos,
cada uno con una serie especfica de molculas.
AASM C (AASM Central): En esta zona de contacto intervienen el
complejo RLT (formado por RLT, CD3 i Z), los correceptores CD4 y
CD8, los coestimuladores CD28, CD40L y CD2, las enzimas PKC,

protenas adaptadoras y la mayora de protenas de sealizacin

involucradas en la activacin de los linfocitos T. Se trata de la zona
central y la distancia entre la membrana plasmtica del linfocito T y la
CPA es de aproximadamente 15 nm
AASM P (AASM Perifrico): Durante la sinapsis esta zona se
encuentra enriquecida con integrina y consta de la protena talina y la
molcula de adherencia ICAM-1 La distancia que separa la membrana
del linfocito T con la de la CPA es de aproximadamente 40 nm.
AASM - D (AASM Distal): Zona rica en CD43 y protena tirosina
fosfatasa CD45
La sinapsis inmunolgica, como unin fsica entre el Linfocito T (LT) y
la Clula presentadora de antgeno (CPA), est constituida por
diferentes molculas accesorias que estabilizan la estructura. La
estabilizacin que confiere la SI es clave para mantener la
organizacin y para controlar las funciones de las dos
clulas.2 Funciones que modulan la respuesta inmunolgica.

Formacin

Fase I: En esta fase se lleva a cabo la conexin entre la CPA i

el linfocito T. El LFA1 se une a la regin central de la sinapsis,
constituyendo as un punto de apoyo para los mecanismos del
citoesqueleto sobresalientes. Estos fuerzan una mayor aproximacin
con el sustrato del anillo ms exterior de la membrana del linfocito T.
Fase II: En esta fase se da el transporte del pptido MHC. Se cree que
se trata de un transporte mediado por actina. Se requieren
aproximadamente unos 5 minutos para llevar a cabo esta fase.
Fase III: La tercera y ltima fase corresponde a la estabilizacin de la
sinapsis immunitaria. En esta fase el TCR participa en la activacin del
limofcito T unindose a los peptidos MHR, mateniendo as unida
la CPA con el linfocito T.

El Complejo SI/LT
El complejo SI/LT es la unin entre la sinapsis inmunolgica y el
linfocito T1. Es la parte ms estudiada de la sinapsis inmunolgica

debido a su gran importancia biomdica. Este complejo es capaz de

regular las funciones del linfocito T. En este complejo, se hallan
principalmente tres tipos de molculas, dos en las regiones
citoplasmticas (las sealizadoras y las citoesquelticas) y tan solo
una en la regin membranosa (las protenas de membrana).

Protenas de superficie (o de membrana)

Este tipo de molculas contiene habitualmente un alto contenido en
seales intracelulares encargadas de la regulacin del complejo.
Adems, contiene diferentes tipos de receptores y ligandos
fundamentales en la unin entre las clulas presentadoras de
antgeno y las clulas T. Por otra parte, son este tipo de molculas las
que permiten el inicio de del complejo SI/LT.
Molculas citoesquelticas

La correcta organizacin del complejo SI/LT se da gracias a protenas

asociadas al citoesqueleto, como por ejemplo la tubulina (formando
parte de los microtbulos) y la actina (formando parte de
los microfilamentos). Adems, tambin estn involucradas en el
control de la sealizacin del complejo.

Moleculas sealizadoras
En la regin del complejo SI/LT hallamos diferentes tipos de sustancias
sealizadoras, pero la ms destacada es la quinasa, la cual se explica
a continuacin.
Las quinasas son importantes para la transmisin de seales desde el
TCR, un receptor que carece de actividad enzimtica. Los principales
tipos son tirosina quinasa like, Lck, ZAP-70 y Fyn.

Funciones principales del complejo SI/LT

La SI (sinapsis inmunolgica) es un mecanismo molecular cuya
funcin consiste en aglutinar los linfocitos para proceder a su
posterior activacin.
La unin entre SI y el LT (linfocito T) favorece la adhesin entre el
linfocito T y la clula presentadora de antgeno (APC) as como la
organizacin del citoesqueleto en la clula T.
La SI-LT es un regulador de la seal TCR y la activacin de clulas T.
En el espacio intercelular en la sinapsis inmunolgica se secretan
diferentes clases de citoquinas y chemoquinas que se encargan de la
regulacin de los LT. El complejo SI-LT, debido a su polaridad, es capaz
de inducir a la divisin asimtrica de los LT, que tiene como
consecuencia la formacin de clulas de memoria y efectoras.

Seales sinapticas y Moleculas de Transmisin

Las diferentes molculas transmisoras de las seales de la sinapsis
inmunolgica se hallan en microdominios llamados rafts lipdicos, que
por el hecho de contener transmisores de seal, son considerados
ndulos de sealizacin celular.5 Estos son actores de la transmisin
de seales del receptor de clulas T y de los diferentes receptores de
los coestimuladores. Tienen la capacitad de provocar alteraciones en
el citoesqueleto, permitiendo la confluencia de diferentes rafts
lipdicos que acaban dando lugar a la estructura de la sinapsis
inmunitaria.

Encontramos tres tipos de seales presentes en la sinapsis

inmunolgica:
Primera seal de activacin
El complejo mayor de histocompatibildad una vez unido al pptido es
reconocido por los receptores de linfocitos T y por los linfocitos CD4 o
CD8.
Segunda seal de activacin
Los coestimuladores de los linfocitos T, como por ejemplo la molcula
B7, que tiene la funcin de activar las clulas T que an estn en un
estado de inmadurez. Algn ejemplo de tipos de molculas implicadas
en el proceso de coestimulacin son la CTLA-4 o la 4-IBB.
Tercera seal de activacin
Relacionada con las citoquinas o citocinas que son un grupo de
protenas de bajo peso molecular que actan como mediadores en les
reacciones de las clulas inflamatorias o linfticas . Ejemplos de este
tipo de molculas pueden ser las IL-2, IL-4, IL-5 o las IL-10 entre otras

Funciones de la sinapsis
Muchas de las funciones de la SI estn an por descubrir. La
comunidad cientfica no llega a un consenso sobre muchas otras.
Sin embargo, se ha demostrado que la sinapsis ayuda a la activacin
de los LT, media en la secrecin de ciertas sustancias y tiene un papel
importante en la transmisin de seales entre el LT y la CPA.

Activacin de linfocitos T
Cuando el pequeo nmero de complejos pptido-CPH de la CPA
mantiene la interaccin repetida de los RLT, superando los problemas
de baja afinidad que hay entre ellos y la presencia de pocas
molculas del CPH, se produce la sinapsis. Esta interaccin activa los
linfocitos T facilitando una transmisin de seales prolongada y eficaz
de los mismos. De esta forma, la propia sinapsis inmunitaria puede
proporcionar una interfase nica para la activacin del RTL.
Secrecin y acumulacin de sustancias
La sinapsis libera grnulos efectores, grnulos secretores con
perforina y granzimas desde los LTC a otras clulas especficas y
seales a las CPA adecuadas o a otras clulas especficas. Tambin se
secretan citosinas de forma directa hacia la hendidura sinptica.

Igualmente, la acumulacin de las molculas de CD40L y CD40 sobre

las interfases de los linfocitos T y las CPA de la sinapsis inmunitaria
facilita las interacciones entre ambas.
Recambio de molculas transmisoras
Mediante la sinapsis se recambian las molculas transmisoras de
seales, por ubicuitinacin y liberacin hacia los endosomas tardos y
los lisosomas, contribuyendo esta degradacin a finalizar la activacin
de linfocitos T.

TITULO : "Dinmica de la Sinapsis Inmunolgica: Hallazgo, Establecimiento y

Consolidacin de una Conexin."

Las interacciones entre clulas del sistema inmune son importantes

para expandir el espectro de la respuesta inmune y controlar la
infeccin y conservar la tolerancia. La activacin de la inmunidad
adaptativa es el resultado de la interaccin entre el receptor de las
clulas T (RCT) con pptidos presentados por las molculas del
complejo mayor de histocompatibilidad (CMH) en la superficie de las
clulas presentadoras de antgenos (CPA). Es importante la
especificidad de este reconocimiento; las respuestas a los pptidos
microbianos son necesarias para la eliminacin de muchas
infecciones, mientras que las respuestas a pptidos propios pueden
dar lugar a fenmenos de autoinmunidad.
Recientemente, sealan los expertos, se ha demostrado que la
activacin de las clulas T se asocia con la formacin de una "sinapsis
inmunolgica" entre estas clulas y las clulas a las que reconocen.
Esta sinapsis parece dirigir el agrupamiento de receptores y promover
la formacin de una acumulacin centralizada de RCT; lo que se
denomina complejo activador central supramolecular (c-SMAC, por
sus siglas en ingls). Alrededor de este ltimo se forma un anillo
perifrico consistente en el par de ligandos ICAM/LFA-1 (molcula de
adhesin intercelular y antgeno asociado a la funcin linfocitaria,
respectivamente).

Rastreo linfocitario
Antes de la formacin de la sinapsis las clulas T viajan por los
ganglios linfticos y los vasos en busca de las seales de
quemoquinas que las atraen y detienen su migracin. En ese estado
las clulas tienen forma de "espejo de mano", con el ncleo volcado
hacia el frente de la clula y el citoplasma concentrado en la
proyeccin posterior.
Las clulas T que se hallan en este estado tienen una distribucin
sesgada de muchas molculas crticas. Las integrinas, RCT y
correceptores, junto con las molculas transmembrana de mayor
tamao (CD43 y CD44) tienden a localizarse en la regin posterior. En

cambio, los receptores de quemoquinas, como CCR2 y CCR5, estn

polarizados hacia el frente. Mientras que la unin a ligandos en la
regin anterior de la clula T es un fuerte estmulo para la
sealizacin por calcio, la proyeccin posterior es muy insensible a los
ligandos; esto resulta paradjico, dado que en esta misma regin
estn los mayores niveles de RCT. Es improbable que el RCT
contribuya significativamente al establecimiento del contacto inicial
entre la clula T y la CPA, debido a que la adhesin inicial es
independiente de antgeno. Aunque no se sabe cules son las
molculas que median la adhesin inicial, es probable que haya
varias integrinas (LFA-1, por ejemplo) y lectinas o receptores
especficos como CD2.

La seal de detencin y el aumento de calcio intracelular

Probablemente, sealan los autores, el evento inicial ms importante
durante el reconocimiento de la CPA sea la seal de detencin, la cual
es necesaria porque el contacto entre la clula T y la CPA desprovista
de ligandos es relativamente breve. Esta seal puede ser mediada
por la unin del RCT al complejo pptido-CMH. Este proceso debe
competir contra los gradientes de quemoquinas que impulsan a la
clula T a continuar con el quimiotactismo. El evento mejor
caracterizado que coincide con la seal de detencin es la liberacin
de calcio intracelular y, posteriormente, su transporte al medio
extracelular. La forma de la seal de calcio es influida por la identidad
del pptido ligado a CMH; los pptidos ms estimulatorios dan
seales prolongadas y sostenidas. Estudios recientes han demostrado
que los pptidos de muy baja afinidad (Kd > 1 mM), antes
denominados pptidos nulos, pueden participar en la formacin de la
sinapsis e inclusive aumentar la respuesta. Dichas interacciones de
baja afinidad podran explicar los pulsos de calcio de bajo nivel
observados en clulas T acopladas a clulas dendrticas activadas en
ausencia de pptidos agregados exgenamente.

Desplazamiento y agrupamiento de receptores, y sinapsis

En 1998 se demostr que la interfase entre la clula T y la CPA puede
estar formada por arreglos concntricos de protenas. Los
experimentos indicaron que los RCT y las molculas de CMH de las
CPA ocupan el c-SMAC, mientras que el par ICAM/LFA-1 ocupa la

periferia. Adems, los estudios revelaron que tales arreglos pueden

depender del reconocimiento del antgeno adecuado, dado que los
antgenos que son agonistas dbiles no dan lugar a dicha estructura.
Estos resultados, destacan los autores, han sido confirmados por
experimentos en los que se utilizaron molculas de pptido-CMH y de
ICAM-1 marcadas con distintos reactivos. Las molculas fueron
introducidas en bicapas lipdicas artificiales carentes de otras
molculas de CPA. En estas condiciones se formaron estructuras tipo
c-SMAC, lo cual dependi en gran medida de la identidad del pptido
unido a CMH.

Zonas relativas en la regin interfase

Hasta el momento se han observado distintos patrones en la regin
sinptica entre clulas T y CPA. Aunque no est clara la importancia
de tales arreglos para la sealizacin, todos los estudios indican que
la formacin de una acumulacin centralizada de RCT/CMH depende
de un agonista fuerte. Tambin est claro que las molculas ICAM y
los RCT se ubican en regiones diferentes de la interfase. Ni la
exclusin de ICAM ni la formacin del agrupamiento central de RCT
parecen ser responsables del inicio de la sealizacin intracelular, ya
que estos agrupamientos se suelen formar al cabo de 5 minutos o
ms tras el ingreso de calcio.
Adems de la exclusin de ICAM, se producen otros arreglos de
receptores de superficie que podran ser importantes para la
consolidacin de la sealizacin. Recientemente, los autores han
demostrado que mientras la molcula CD4 forma inicialmente
microagrupamientos en la interfase similares a los de CD3, la misma
suele ser excluida luego, cuando el bloque CD3 se empieza a
consolidar. Otra molcula que tambin ha sido caracterizada como
formadora de arreglos en la sinapsis es CD45, que parece excluida de
la sinapsis en la activacin temprana. Esta molcula es bastante
grande, y de no ser excluida podra inhibir la interaccin RCT/CMH por
impedimento estrico. En el mismo sentido puede interpretarse la
exclusin de CD43 de la interfase de esferas recubiertas con
anticuerpo anti-CD3.

Formas de organizacin

Los estudios con anticuerpos de entrecruzamiento y lectinas

demostraron que el citoesqueleto es necesario para el
desplazamiento de los receptores, sealan los autores. La tincin de
los complejos entre clulas T y CPA con anticuerpos antitubulina
revelaron una reorientacin del centro organizador de microtbulos
luego del reconocimiento antignico. Estudios ms recientes sugieren
que el citoesqueleto de actina y los motores de miosina basados en
actina contribuyen a la dinmica de la reorientacin temprana de
receptores y a su centralizacin en la interfase. Hasta el momento no
est claro si los procesos a nivel del citoesqueleto dirigen todos los
aspectos de la reorientacin de la superficie celular. Dos trabajos
recientes sugieren que la coestimulacin por CD28 podra tener un
papel en la reorientacin o agregacin de receptores. Otros estudios
realizados por los autores demuestran que el bloqueo de la
coestimulacin es perjudicial para la formacin de estructuras tipo cSMAC. En particular, el bloqueo de LFA-1 o CD28 con anticuerpos
contra sus ligandos reduce enormemente la frecuencia de
acumulacin centralizada de CMH sobre las CPA.

Mecanismos pasivos
Adems de los movimientos de RCT mediados por el citoesqueleto,
algunas limitaciones fsicas podran cumplir cierto papel en la
dinmica y resultado de la reorganizacin de receptores. Algunos
expertos han propuesto un mecanismo de organizacin de receptores
en la sinapsis dependiente de las dimensiones de las interacciones
receptor-ligando. Estos investigadores proponen que la estrechez
relativa del par RCT-CMH (aproximadamente 15 nm) puede hacer que
este par se ubique en el centro de la interfase, mientras que las
molculas de mayores dimensiones (ICAM-LFA-1 y CD45) seran
desplazadas hacia afuera de la sinapsis por simple impedimento
estrico. Algunos estudios recientes parecen sustentar esta teora.
En CPA en las que se expresaron CD48 cuyo dominio tipo
inmunoglobulina fue truncado o extendido con secciones de CD2 o
CD22, ambos tipos de mutaciones redujeron la respuesta de las
clulas T a estas CPA. No obstante, esos experimentos no indican que
las dimensiones de la molcula modificada sea el nico factor que
determina su localizacin final en la interfase. Aunque el gran tamao
de molculas tales como CD43 y CD45 pueden contribuir a su
localizacin en la periferia de la interfase, otros varios factores
biofsicos y celulares podran tener igual o mayor importancia en los

patrones de organizacin de receptores y ligandos. En una estructura

tan compacta, hasta las interacciones muy dbiles pueden tener
efectos significativos.

El papel de la CPA
Un aspecto frecuentemente no tenido en cuenta es el papel de la CPA
en la formacin de la sinapsis, sealan los autores. En un estudio,
comentan, el pretratamiento de un linfoma con citocalasina D no tuvo
efecto sobre la reorientacin de ICAM-1, pero el tratamiento de la
clula T previno el reconocimiento antignico, lo cual sugiere que la
CPA es relativamente pasiva. No obstante, estos resultados no
eliminan la posibilidad de que la CPA pueda incrementar la respuesta
en situaciones ms fisiolgicas. Estudios recientes con clulas
dendrticas han sugerido que estas CPA pueden contribuir
activamente a la formacin de la sinapsis, dado que la
desorganizacin de su citoesqueleto redujo drsticamente la
formacin de agrupamientos en la interfase entre CPA y clula T.
Internalizacin de receptores
La finalizacin del acople de la clula T es precedida por la regulacin
negativa del RCT superficial, explican los autores. Se ha demostrado
que las clulas T CD8+ internalizan eficazmente ligandos de CMH I
luego de la activacin. Esto sugiere que los receptores internalizados
podran ser reexpresados y producir el cese de la respuesta al inducir
a esos linfocitos T citotxicos a lisar a las clulas vecinas.
Conclusiones
Aunque el reconocimiento por RCT es el principal requerimiento para
la activacin de las clulas T, est claro que la activacin no es un
simple reconocimiento de 2 superficies en contacto. El rea de la
interfase es significativa (aproximadamente 50 micrones cuadrados),
lo cual permite alcanzar una alta avidez de unin. Adems, una
interfase grande y plana permite que los receptores accesorios y sus
ligandos (LFA-1/ICAM, por ejemplo) contribuyan a crear una superficie
estable donde puedan producirse interacciones a altas
concentraciones entre ligandos relativamente dbiles (RCT/pptidoCMH).

La sinapsis muestra una clara segregacin de molculas hacia zonas

particulares, lo cual podra tener distintas funciones. En primer lugar,
postulan los autores, es probable que la sealizacin se vea
favorecida por una exclusin e inclusin cuidadosa de sustratos y
actividades enzimticas. Adems, es posible que el c-SMAC constituya
un sitio para la interaccin en serie. En este sentido, una
concentracin central de complejos pptido-CMH en contacto con la
clula T podra ser la funcin ms importante del c-SMAC, y las
clulas T podran "evaluar" esta regin antes de la internalizacin de
los complejos pptido-CMH. Tambin cabe la posibilidad de que el cSMAC se forme simplemente para facilitar la internalizacin de
receptores que han completado su funcin de sealizacin. Es
necesaria, sealan los autores, una mayor comprensin acerca de
cmo y por qu se controlan los eventos que tienen lugar durante el
reconocimiento antignico por las clulas T. Probablemente ese
proceso ofrezca muchas oportunidades de intervencin para modular
las respuestas inmunes.