LABORATORIO N 3

AMINOCIDOS Y PROTENAS. PROPIEDADES DE LA

CASENA Y DE AMINOCIDOS
A. Objetivo de la prctica
Reconocer las propiedades de las protenas y aminocidos.

B. Propiedades fsico-qumicas
productos & subproductos:

de

reactantes

Tabla N1. Propiedades fisicoqumicas del reactante, producto y

subproducto orgnico. [2]

Parte Experimental
A. Precipitacin Isoelctrica de la casena
Observaciones experimentales y comentarios. Por
ejemplo,
i.
Inicio: casena en solucin bsica (color o
apariencia de la disolucin) y Ph

ii.

La casena que se utiliz tena un color beich, esta es una

protena conjugada, que contiene orto fosfato como grupo
prosttico. Al agregarle hidrxido de sodio se observ una
solucin turbia, con algunos granitos precipitados de casena.
El pH medido de sta solucin fue de 8.

Casena (ac), en NaOH(ac) + HCl(ac) 0.1N:

observaciones (pH), etc.

A la solucin de casena con NaOH se le agrega gota a gota

HCl a 0.1N y observamos la precipitacin de est en el fondo
del recipiente, a un pH de 4.5 y al seguir agregando HCl, se
observa la dilucin del precipitado con un pH de 2.5, Al
volver agregar NaOH gota a gota a un pH de 5 observamos
nuevamente precipitacin, y a un pH cercano a 8 volvemos a
observar la dilucin completa del precipitado de casena.

B. Hidrlisis de la casena
Por ejemplo, indicar la apariencia de la disolucin
final (hidrolizado de la casena)
C. Prueba de biuret (para la casena y para la
disolucin de hidrolisis)

UNI/FC- EPQ ____________________________________________________________________________ CQ-441-P.L. N

D. Cromatografa de capa fina de aminocidos

Resultados experimentales y comentarios
i.
Caractersticas de la placa, eluente, revelador,
Rf.

La placa utilizada fue de slice gel (base aluminio) de 3 x 8

cm, el eluente es una solucin de nbutano-cido acticoagua en proporcin de 60:20:20, y el revelador fue de
nihidrina, solucin al 1% en metanol. Los sustratos
(aminocidos) usados fueron leucina y tirosina
estabilizados por metanol. La relacin de la distancia
recorrida por un sustrato a la distancia recorrida por el
solvente, en el mismo tiempo (Rf) vara con la naturaleza
del componente, la actividad de adsorbente y la
naturaleza del eluente, as hallamos el Rf1 para el
sustrato leucina y Rf2 para el sustrato tirosina.

X: Distancia recorrida por la muestra, medida en el punto

de mxima intensidad de color o en el centro de gravedad
de la mancha en cm.
Y: Distancia recorrida por el solvente, en cm.

ii.

Rf1 =

X
Y

2.7 cm
= 6.2cm

= 0.44

Rf2 =

X
Y

1.4 cm
= 6.2 cm

= 0.23

Ilustracin de las placas cromatografas

desarrolladas (adjuntar la placa obtenida)

UNI/FC- EPQ ____________________________________________________________________________ CQ-441-P.L. N

CUESTIONARIO
P1. Punto
protenas.
i.

ii.

iii.

isoelctrico

precipitacin

de

las

Punto isoelctrico. Definicin.[3]

El pH de la disolucin en la cual la protena tiene una carga neta
cero se denomina pH isoelctrico. A este pH isoelctrico
(llamado a veces punto isoelctrico) el nmero de cargas
negativas y positivas es el mismo con lo que la carga neta es
cero.

Relacin con el pH de la disolucin, relacin con

la solubilidad de la protena. Cul es el valor del
punto isoelctrico de la casena? [4]
El punto isoelctrico de la casena es 4.6. A este pH, la casena
se encuentra en su punto de menor solubilidad, debido a la
reduccin de repulsiones intermoleculares, por lo que precipita.

Por qu es importante conocer el valor del

punto isoelctrico de una protena, como en el
caso de la casena. En que se aplica este
conocimiento?[3]
Como ya se defini en el pH isoelctrico el nmero de cargas
negativas y positivas es el mismo con lo que la carga neta es
cero. Para comprender cmo afectan estas cargas a las
propiedades de la protena. Consideraremos la disolucin de
casena, a un pH elevado todas las molculas de casena estn
cargadas negativamente. A un pH bajo, todas las molculas
estn cargadas positivamente. En cualquiera de los casos las
3

UNI/FC- EPQ ____________________________________________________________________________ CQ-441-P.L. N

molculas se repelen las unas a las otras, por lo que se unen y

no dan lugar a ningn precipitado. A un valor intermedio de pH,
el punto isoelctrico de la casena, las molculas no tienen carga
neta y no se repeles. Sin embargo, las molculas tienen zonas
de carga positiva o negativa, por lo que la zona positiva de una
molcula puede atraer la zona negativa de otra. Estas
atracciones pueden aglutinar las molculas de la protena
haciendo que precipite de su disolucin.

P2. Hidrolisis de protenas y prueba de biuret.

1.
2.

Proponga la ecuacin de la reaccin de hidrlisis

de la casena, proporcionando como productos
un dipeptido y un aminocido.
Tomando como sustratos a la casena y un
aminocido que se haya formado en la hidrolisis
de la casena:
i.
Indique cul de ellos da prueba positiva del
biuret, al agregar una solucin de sulfato
de cobre al 2% (de color azul)
ii.
Proponga la estructura del complejo que
ilustra la prueba del Biuret.

P3. Desnaturalizacin de protenas. Definicin y

proceso.[5]
La desnaturalizacin de una protena implica la alteracin de sus
estructuras secundaria, terciaria o cuaternaria, dejando intacta la
estructura primaria; el resultado de esto es que la protena nativa
(como se encuentra en la clula) pierde su actividad biolgica, en
algunos casos la desnaturalizacin es reversible. La desnaturalizacin
de las protenas ocurre cuando se exponen al calor, la luz ultravioleta,
los cidos, las bases, los disolventes orgnicos y las sales de metales
pesados; estos agentes alteran las fuerzas de dispersin, los enlaces
de hidrgeno y los enlaces inicos. En la siguiente figura, podemos
observar el proceso de desnaturalizacin: los enlaces disulfuro se
rompen por la accin de un agente reductor.
FIGURA 1: Desnaturalizacin de una protena.

UNI/FC- EPQ ____________________________________________________________________________ CQ-441-P.L. N

P4.Reaccin de aminocidos con nihidrina. L-serina

i.

Proponga la ecuacin qumica de la reaccin,

indicando los cambios fsicos (color) que se
presentan.

ii.

Proponga el mecanismo de reaccin respectivo.

P5. Enzimas y hormonas (que guardan relacin con

los aminocidos y protenas)
a) Hormonas. Definicin. Proponga dos ejemplos e
identifique las funciones que cumplen.[6][7][8]
Las hormonas son sustancias qumicas sealizadoras producidas
por clulas especializadas que forman parte de las denominadas
glndulas endocrinas. Las hormonas son vertidas en la sangre y
desde all son transportadas a los rganos efectores, en donde
ejercen funciones reguladoras, fisiolgicas y bioqumicas. Las ms
de 100 hormonas y sustancias similares a hormonas que existen en
el organismo animal pueden clasificarse segn su estructura o
segn su funcin. Desde el punto de vista qumico casi todas las
hormonas son derivados de aminocidos, pptidos o protenas o
esteroides. Por ejemplo tenemos:

i.

INSULINA: Es una hormona secretada por el pncreas,

que disminuye los niveles de glucosa en la sangre. Una
produccin insuficiente de insulina crea un desequilibrio
en el metabolismo del cuerpo, provocando
deshidratacin, excesiva miccin y en algunos casos, el
coma y la muerte. La enfermedad se denomina
diabetes mellitus. El tipo de diabetes ms grave
aparece en la infancia y requiere la inyeccin de
insulina durante toda la vida.
5

UNI/FC- EPQ ____________________________________________________________________________ CQ-441-P.L. N

ii.

ADRENALINA: La hormona de adrenalina de la mdula

suprarrenal es una de las pocas hormonas que est
directamente influenciada por el sistema nervioso;
durante condiciones estresantes la adrenalina
proporciona una fuerza y una agresividad
extraordinarias. La liberacin de adrenalina incrementa
la presin sangunea, acelera la respiracin, acelera el
pulso cardiaco y aumenta la glucosa en la sangre.

C. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
[1] Reyna, Vctor. Gua de Laboratorio N 3 de Qumica Orgnica 3
Aminocidos y protenas. Casena: Precipitacin, hidrlisis y CCF, UNIFC-EPQ,

Lima, 2015, Pg. 1,2.

[2] // BIBLIOGRAFA DE LA TABLA DE PROPIEDADES

[3]

Martnez,

Roberto.

Rodrguez.

Josefa.

Snchez,

Luis.

Qumica: un proyecto de la American Chemical Society.

Editorial Revert S.A., 2005, Pgs. 620,621.
[4] Macarulla, Jos M. Goi, Felix M. Biomolculas Lecciones de
bioqumica estructural. Editorial Revert, 1984, Pg. 122.
[5] Acua Arias, Flora. Qumica Orgnica. Editorial universidad
Estatal a Distancia, San Jos, Costa Rica, 2006, Pg. 312.
[6] Koolman, Rohm, Bioqumica: texto y Atlas, Editorial mdica
Panamericana, 2004, Pg. 370.
[7] Ingraham John, Ingraham Catherine, Introduccin a la
microbiologa, Editorial Revert, 1998, Pg. 746.
[8] Saxena Rajeev, Comprensin de las glndulas, Editorial Jain
publishers, 1921, Pg 41.