INFORME DE LABORATORIO N 02

CURSO: Bioqumica.
DOCENTE: Blga. Carmen Yzsiga Barrera.
CICLO: III.
GRUPO: B.
INTEGRANTES:
1.

Anastacio Jurez Jorge Luis.

2. Huincho

Aquio Sonia Marisol.

3. Vsquez

Villacorta Nelly Sofa.

DEMOSTRACIN CUALITATIVA DE
CARBOHIDRATOS
I. INTRODUCCIN
Los carbohidratos son compuestos orgnicos, formados primordialmente por
carbono, hidrgeno y oxgeno. Se encuentran en muchos productos naturales y
son una de las fuentes principales de energa para los organismos quimiotrficos.
La unidad fundamental de los carbohidratos son los monosacridos, estos son
polihidroxialdehdos o polihidroxicetonas. Los monosacridos se combinan, con
la prdida de molculas de agua unindose mediante enlaces glucosdicos,
formndose oligosacridos y polisacridos. En presencia de cidos no oxidantes,
los carbohidratos se deshidratan y forman furfural si el monosacrido es una
pentosa o hidrximetilfurfural, si el monosacrido es una hexosa. Cuando la
reaccin de deshidratacin se efecta con la ayuda del cido sulfrico
concentrado y el color se desarrolla con alfa naftol, la prueba se denomina
reaccin de Molisch. Prueba para azcares reductores, las

propiedades

reductoras de los azcares depende de la presencia de grupos aldehdos o

cetonas, reales o potenciales. Al calentar ciertas soluciones de azcares, en
presencia de determinados iones metlicos, el grupo carbonilo se oxida y el ion
metlico se reduce. Los polisacridos son cadenas muy largas o polmeros de
monosacridos,

lineales

ramificados.

Se

dividen

en heteropolisacridos y homopolisacridos dependiendo si la forman distintos

o iguales unidades simples. Algunos polisacridos de reserva importante lo son
el almidn formado por dos constituyentes: amilasa y amilopectina; y el
glucgeno llamado almidn animal, se encuentra en el hgado y msculos.
OBJETIVOS

Reconocer los diferentes tipos de carbohidratos

Identificar la presencia de azucares reductores provenientes de la

hidrolisis acida de muestras de carbohidratos

II. MATERIALES Y MTODOS

1.

REACCION DE MOLISH.-Esta es una reaccin general de los

carbohidratos y por lo tanto nos sirvi para detectarlos en una sustancia
problema. Se colocaron en 4 tubos de ensayo muestras de carbohidratos
de la siguiente manera.

TUBOS(ml)

II

III

IV

Sol. Glucosa 1%

2.0

----

----

----

----

Sol sacarosa 1%

----

2.0

----

----

----

Sol. Maltosa 1%

----

----

2.0

----

----

Sol. Almidn 1%

----

----

----

2.0

----

Sol. Alfa naftol5%(gotas)

02

02

02

02

02

Me mezclaron bien los tubos para luego agregar cido sulfrico.

cido sulfrico

2.

2.0

2.0

2.0

2.0

2.0

REACCION DE SELIVANOFF.-reaccin especfica para grupos funcional

cetnico.se colocaron nuevamente en tres tubos de ensayo soluciones de
fructosa, glucosa y sacarosa como se muestra en la siguiente cuadro.

TUBOS(ml)

II

III

Sol. fructosa 1%

1.0

----

----

Sol glucosa 1%

----

1.0

----

Sol. sacarosa 1%

----

----

1.0

Selivanoff

5.0

5.0

5.0

Se mezclaron bien y se llevaron a bao mara hirviente durante un

intervalo de tiempo de 3 a 15 min.

3.

REACCION DE BARFOED.-prueba utilizada para diferenciar

monosacridos de disacridos. Se colocaron en 4 tubos de ensayo
soluciones de carbohidratos y se le agregaron a cada tubo de la
siguiente manera.
2

TUBOS(ml)

II

III

IV

Sol. Glucosa 1%

1.0

----

----

----

Sol fructosa 1%

----

1.0

----

----

Sol. sacarosa 1%

----

----

1.0

----

Sol. Maltosa 1%

----

----

----

1.0

Rx Barfoed

5.0

5.0

5.0

5.0

Se mezclaron bien y se sometieron a bao mara hirviente por

5 min.

4.

ACCION DE LOS ALCALIS SOBRE LOS CARBOHIDRATOS.

Se trituro en un mortero una papa sin cascara.

Se le agregaron 5-10 ml de agua destilada, luego se mezcl y se

decant el sobrenadante en un vaso de precipitacin.

En un tubo de ensayo aparte se midi 2ml del sobrenadante

anterior y en otro tubo se coloc 2ml de solucin del almidn
preparado.

Se aadi 2 ml de HCl 1.55 a cada uno de los tubos.

Se calentaron los tubos de ensayo en bao mara hasta que hierva

durante 15 minutos, se dej enfriar y se le aado 5 gotas de KOH
1%.

Finalmente se le aadi a los tubos anteriores 1ml de soluciones

de fehling A y B, luego se someti a ebullicin entre 3 y 5 minutos.

III. DISCUSIN
Guarnizo, A. et al. (2000) seala que La mayora de las pruebas
cualitativas para la caracterizacin qumica de carbohidratos se basa en
la formacin de sustancias coloreadas o precipitados mediante
tratamiento con reactivos, los cuales proporcionan informacin sobre la
estructura de la molcula. Y tal como se describe en la teora, las pruebas
cualitativas que se realizaron en la prctica se basaron en la formacin
de sustancias y precipitados coloreados mediante tratamiento con
distintos reactivos, los cuales proporcionaron informacin para
diferenciar entre los distintos tipos de carbohidratos y sus caractersticas.
La primera prueba realizada fue la Reaccin de Molish. Guarnizo indica
que la prueba de Molisch es una prueba general para cualquier
carbohidrato sin importar su complejidad; el H2SO4 hidroliza los
carbohidratos complejos y deshidrata los monosacridos resultantes
formando furfural y derivados y estos, finalmente, producen compuestos
color prpura por reaccin con el -naftol. En la prctica, los cuatro tubos
dieron positivo a la prueba de Molisch, ya que se observ la aparicin de
un anillo rojo violeta oscuro (prpura); esto confirm que los tubos
contenan carbohidratos (glucosa, sacarosa, maltosa y almidn).
La segunda prueba realizada fue la Reaccin de Selivanoff. Guarnizo
explica que las cetohexosas y aldohexosas se deshidratan en medio
cido dando lugar a 5-hidroximetilfurfural, el cual se condensa con
resorcinol para dar lugar a un producto rojo oscuro. Sin embargo, las
cetohexosas (como la fructosa) reaccionan con mucha mayor rapidez (de
3 a 5 minutos) que lo hacen las aldohexosas; por este motivo el reactivo
de Seliwanoff se usa para diferenciar cetohexosas de aldohexosas. Los
disacridos que contienen fructosa (por ejemplo la sacarosa), dan
positiva esta prueba si se deja correr la reaccin durante un tiempo
prudencial para permitir la hidrlisis cida; de esta manera la sacarosa
libera fructosa y, esta, da positiva la prueba de Seliwanoff. Gracias a los
resultados de la prctica uno se puede dar cuenta de que se comprueba
al pie de la letra lo que dice la teora, porque el tubo de fructosa y el de
4

sacarosa dieron positivo a la prueba de Seliwanoff al presentar una

coloracin rojo-cereza (rojo oscuro); mientras que el tubo que contena
la glucosa dio negativo a esta prueba.
La tercera prueba realizada fue la Reaccin de Barfoed. Guarnizo dice
que esta prueba se utiliza para diferenciar monosacridos de
disacridos. Los monosacridos dan positivo a la reaccin de Barfoed al
observarse la aparicin de un precipitado color rojo naranja, mientras que
los disacridos dan negativo por presentar el enlace O-glucosdico que
no les permite reaccionar con el reactivo de Barfoed. En la prctica, a
esta prueba dieron positivo la glucosa y la fructosa, ya que en sus tubos
se form un precipitado rojo naranja, confirmando lo que dice la teora
de que estos dos carbohidratos son monosacridos; y estos se
diferenciaron de la sacarosa y la maltosa, ya que dieron negativo a la
prueba de Barfoed por ser disacridos.
La cuarta prueba realizada fue la Accin de los lcalis sobre los
carbohidratos. La teora dice que las aldosas y las cetosas, como los
carbohidratos compuestos que contienen un grupo azcar libre,
presentan el fenmeno de la tautomerizacin cuando son sometidos a la
accin de los lcalis dando origen a las formas enlicas que se
comportan como cidos dbiles y tiene la capacidad de unirse al lcali
dando lugar a sales enlicas que tienen propiedades reductoras. De
estas propiedades se valen los mtodos para la identificacin y
cuantificacin de muchos azcares (Reaccin de Benedict, Fehling, etc.)
En la prctica se hizo la hidrlisis cida de un polisacrido (almidn) y
luego se identific el azcar reductor correspondiente.

IV. CONCLUSIONES
1.

La reaccin Molish no ayudo a determinar si en alguna solucin muestra

estaba constituida por un azcar. Con este mtodo se determin si se
trata de unos monosacridos (azcar) o un polisacrido. Sera un
polisacrido cuando la reaccin sea negativa; es decir que estaremos en
presencia de un monosacrido, en el caso del tubo I; II, III y IV, estos
arrojaron positivos.
Para poder diferenciar monosacridos de disacridos, hicimos uso del
reactivo de Barfoed. Que nos permiti determinar si nos encontramos
frente a un disacrido o un monosacrido o un polisacrido. La prueba
ser positiva cuando observemos un precipitado rojo naranja, en el caso
del tubo I y tubo II, que contenan glucosa y fructuosa respectivamente

2. En

el desarrollo de la prctica se determin al almidn como azcar

reductor. En la hidrolisis acida se produce un rompimiento total de los

enlaces que mantienen unido a los monmeros del almidn y se forma
glucosa, maltosa e isomaltosa.
.

V. RECOMENDACIONES
Tener

siempre puesto el guardapolvo al ingresar a la prctica de

laboratorio.

Llegar puntual a las prcticas, y regirse a las horas ya establecidas para

no estar interrumpiendo la clase.

Saber emplear bien la pipeta, sobre todo al momento de pipetear cualquier

acido.

Emplear bien los instrumentos, materiales, ya que en esta prctica se hiso

uso de un cuchillo para pelar la papa.

Realizar las pruebas a bao mara con mucho cuidado para evitar lesiones
o daos peores.

Manipular siempre los equipos de laboratorio con nuestra docente gua,

para no ocasionarnos algn dao o daos al equipo.

Tomar apunto sobre los resultados obtenidos en la prctica.

Dejar siempre limpio el laboratorio, lavando los materiales usados en
nuestra prctica.

VI. REFERENCIAS
8.1 Bohinski, R. 1978. Bioqumica 2da edicin. Fondo Educativo
Latinoamericano S.A.

8.2 Morrison, R. y Boyd. 1985. Qumica orgnica. 2da edicin. Fondo

Educativo Latinoamericano S.A. Mxico.
8.3 Villavicencio, M. 1993. Bioqumica. A&B S.A. Editores, Lima - Per.
8.4 Quesada, S. 2005. Manual de experimentos de laboratorio para
bioqumica. EUNED. Espaa.
8.5 Macarulla, J. et al. 1993. Biomolculas: lecciones de bioqumica
estructural. Edicin Ilustrada. Reverte. Espaa.
8.6 Guarnizo, A. et al. 2000. Experimentos de Qumica Orgnica.
ELIZCOM S.A.S. Mxico.
8.7 Giraldo, G. et al. 2007. Laboratorio de Bioqumica: Una Visin
Prctica. ELIZCOM S.A.S. Mxico.
8.8 Ocampo, R. 2008. Curso prctico de qumica orgnica. Enfocado a
biologa y alimentos. Universidad de Caldas. Espaa.

VII. CUESTIONARIO
1.

Cul de las pruebas permite diferenciar aldosas de

cetosas? Fundamente su respuesta.

La Reaccin de Selivanoff. Se explica que las cetohexosas y

aldohexosas se deshidratan en medio cido dando lugar a 5hidroximetilfurfural, el cual se condensa con resorcinol para dar
lugar a un producto rojo oscuro. Sin embargo, las cetohexosas
(como la fructosa) reaccionan con mucha mayor rapidez (de 3 a 5
minutos) que lo hacen las aldohexosas; por este motivo el reactivo
de

Seliwanoff

se

usa

para

diferenciar

cetohexosas

de

aldohexosas. Los disacridos que contienen fructosa (por ejemplo

la sacarosa), dan positiva esta prueba si se deja correr la reaccin
durante un tiempo prudencial para permitir la hidrlisis cida; de
esta manera la sacarosa libera fructosa y, esta, da positiva la
prueba de Seliwanoff. Gracias a los resultados de la prctica uno
se puede dar cuenta de que se comprueba al pie de la letra lo que
dice la teora, porque el tubo de fructosa y el de sacarosa dieron
positivo a la prueba de Seliwanoff al presentar una coloracin rojocereza (rojo oscuro); mientras que el tubo que contena la glucosa
dio negativo a esta prueba.

2. el almidn ingerido por el ser humano sufre el mismo tipo

de hidrolisis acida realizada en la prctica? cmo se
hidroliza?

Disacridos: (ejemplo, la sacarosa), producen dos molculas de

monosacrido por hidrlisis. Rompimiento de enlace glucosdicos.
La sacarosa (enlace (1 2) O), es un disacrido que no posee
carbonos anomricos libres puesto que estn siendo utilizados en
el enlace glucosdicos, por lo que carece de poder reductor. Sin
embargo, en presencia de HCl y en caliente, la sacarosa se
hidroliza, es decir, incorpora una molcula de agua y se
9

descompone en los monosacridos que la forman, glucosa y

fructosa, que s son reductores, lo cual demuestra que se rompi el
enlace O-glucosdicos de esta.

3. Cules son las unidades monomricas de:

-

Lactosa: disacrido
Sacarosa: oligosacrido
Maltosa: oligosacrido
Celulosa: polisacrido

4. Represente

la unin de molculas en la formacin de

almidn, glucgeno y celulosa.

ALMIDON:

CELULOSA

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5. De los siguientes azucares Cul no es reductor? por qu?

- glucosa: S es reductor.
Porque tienen un carbono anomrico libre capaz de oxidarse, si puede
oxidarse, entonces puede reducir a otro compuesto, por esto es
reductor todo monosacrido tiene poder reductor, sea una aldosa o
una cetosa, porque posee potencialmente un carbono cuyos
sustituyentes pueden oxidarse
- Lactosa: S es reductor,
Porque tienen la estructura qumica abierta necesaria para actuar
como agentes reductores. La estructura simple de los monosacridos
les permite descomponerse al doble de velocidad que los disacridos,
mientras que los disacridos deben descomponerse en partes ms
pequeas primero.
- Sacarosa: No es reductor.
En la sacarosa no ocurre tal reaccin como la glucosa, ya que los dos
monosacridos que la componen estn unidos mediante esos
carbonos anomricos que son capaces de oxidarse. Al estar
comprometidos en la unin glucosdicos, no estn aptos a reducir
nada.
- Fructosa: s es reductor.

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