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VICERRECTORA DE DOCENCIA
INSTITUTO TECNOLGICO
METROPOLITANO ITM
MANUAL DE SEGURIDAD Y
BIOSEGURIDAD PARA LOS
LABORATORIOS DE INGENIERA
BIOMDICA DEL ITM
GENERALIDADES DE BIOSEGURIDAD EN UN LABORATORIO DE
BIOLOGA CELULAR Y MOLECULAR NIVEL II
AO 2012
ELABOR
Johanna Carolina Arroyave Ospina
Fabian Mauricio Corts Mancera
Maria Teresa De Ossa Jimnez
Sara Isabel Duque Vallejo
Sara Mara Lpez lvarez
APROB
Sara Mara Lpez lvarez
Firma:
Versin 01
Documento
MGL 007
CONTENIDO
1. INTRODUCCIN.................................................................................... 6
1.1
2.1
2.2
2.3
Riesgos Biolgicos......................................................................... 14
3.2
3.3
Riesgos Fsicos.............................................................................. 27
Definiciones ................................................................................... 42
7.2
7.3
7.4
7.5
LISTA DE TABLAS
Tabla 1. Clasificacin de Agentes patgenos por grupos de riesgo. ............ 6
Tabla 2. Requisitos Generales por Nivel de Bioseguridad. ........................... 8
Tabla 3. Va de Entrada de los Agentes Patgenos ................................... 15
Tabla 4. Principales Agentes Biolgicos ..................................................... 15
Tabla 5. Vas de Exposicin a las Sustancias Qumicas............................. 18
Tabla 6. Cdigo de Colores Identificacin de Sustancias Qumicas. .......... 21
Tabla 7. Niveles de Peligrosidad, Rombo de Seguridad en Sustancias
Qumicas. .................................................................................................... 23
Tabla 8. Caractersticas Cmaras de Seguridad Biolgica. ........................ 36
Tabla 9. Soluciones utilizadas para el lavado de lesiones leves ................. 47
Tabla 10. Material de curacin .................................................................... 47
Tabla 11. Instrumental y elementos de primeros auxilios ........................... 48
LISTA DE FIGURAS
LISTA DE ANEXOS
ANEXO 1. PLANO Y DISTRIBUCIN ........................................................ 50
ANEXO 2. TIPOS DE RESIDUOS GENERADOS Y MANIPULADOS ........ 51
1. INTRODUCCIN
1.1
PRINCIPIOS GENERALES
TIPO DE RIESGO
DESCRIPCIN
Riesgo individual y
poblacional escaso o
nulo.
Riesgo individual
moderado, riesgo
poblacional bajo.
Riesgo individual
elevado, riesgo
poblacional bajo.
Riesgo
4
Individual y poblacional
elevado.
bioseguridad.
Nivel de Bioseguridad
2
3
No
No
Si
Si
No
No
Si
Si
No
Si
Si
Si
No
Si
Si
Si
No
No
Si/No
No
No
Si
Si
No
No
No
Si
No
No
No
Si
No
No
Si
Si
----
No
No
Si/No
No
No
Si/No
No
Si
Si
Si
No
No
Si
Si
No
No
Si
Si
No
Si
Si
Si
No
No
Si
Si
No
Si
2.
2.1
BIOPROTECCION EN EL LABORATORIO
2.1.4 Guantes.
Los guantes son imprescindibles en cualquier procedimiento de laboratorio.
Las manos pueden contaminarse fcilmente en el laboratorio, siendo fuente
de contaminacin no solo para el personal de laboratorio sino tambin para
las personas con quien se tenga contacto. Adicionalmente si hay microheridas (alergias, ueros, etc.) estas facilitan la entrada de agentes
patgenos. Una vez usados, estos deben ser descartados dependiendo de
lo que se haya manipulado (sustancias qumicas o biolgicas) en los
recipientes correspondientes.
Los guantes pueden ser de diferentes materiales, siendo los ms comunes
para el trabajo en el laboratorio los guantes de ltex con talco. Otros
utilizados, son los guantes de nitrilo o los guantes quirrgicos. En el caso
del laboratorio de biologa molecular, es importante tener en cuenta que los
guantes ideales, no deben tener talco ya que esto interfiere en algunos de
los procedimientos realizados.
Adicionalmente se debe tener en cuenta, que algunas personas presentan
alergias o dermatitis despus de usar guantes de ltex.
11
2.2
12
2.3
13
3 CLASIFICACIN DE RIESGOS
14
Mecanismo
Respiratoria*
Inhalacin de
aerosoles
Digestiva
Ingestin directa
Piel y mucosas
Salpicaduras,
pinchazos: contacto
con mucosa oral,
ocular, nasal o piel
Sangunea,
Percutnea
Pinchazos
Actividades de
Riesgo
-Centrifugacin de
muestras
-Agitacin de Tubos
-Mezcla de muestrasreactivos
-No uso de mascara
de proteccin
-Comer-Beber en el
laboratorio
-Pipetear en la boca
-Inadecuado lavado de
manos
-No uso guantes
-Manejo y
procesamiento de
muestras, No uso de
elementos de
proteccin
-Toma de muestras,
material cortopunzante
contaminado
*Es importante tener en cuenta, que el flujo de aire del rea de trabajo y
la presencia de aire acondicionado, afectan la movilizacin de aerosoles.
Tipo de Agente
Muestra Biolgica
VIH
Virus
Sangre, suero,
plasma, fluidos
vaginales, semen
VHB,VHD,VHC
Virus
Sangre, suero,
plasma, fluidos
15
vaginales, semen
M. tuberculosis
Bacteria
Secreciones
respiratorias*
B. anthracis
Bacteria
Secreciones
respiratorias*
Gasas, microporo.
Salpicaduras de sangre o fluidos biolgicos: Lavar con abundante
16
sustancias qumicas:
Mecanismo
Inhalacin de
aerosoles
Salpicaduras,
Derrames
Ingestin Directa
20
Propiedad
Consideraciones
21
Naranja
Sin Riesgo
Almacenamiento general
Manipular con elementos
Azul
Riesgo para la salud
de proteccin personal
Almacenar en un lugar
Rojo
Inflamable
fresco, protegido de
cambios de temperatura
Evitar cadas,
Reactivo
Amarillo
almacenamiento en
espontneamente
estantes bajos
Evitar contacto con el
Blanco
Corrosivos
agua
Almacenar
Blanco cebra
Incompatible*
separadamente
*Incompatible aun con los dems productos de su misma clasificacin.
Donde,
ROJO: Indica el riesgo de inflamabilidad.
AZUL: Indica el riesgo que representa para la salud
AMARILLO: Indica el riesgo de reactividad (inestabilidad).
BLANCO: En este recuadro se realizan las indicaciones
especiales del reactivo, tales como: producto oxidante,
corrosivo, reactivo con agua o radiactivo.
22
SALUD
INFLAMABILIDAD
Exposicin en incendio:
Peligro de material
combustible ordinario.
Ejemplo: Hidrgeno
Materiales que no
se queman.
Ejemplo: cido
Clorhdrico
REACTIVIDAD
Materiales estables aun
en incendio, no
reactivos con agua.
Ejemplo: Cloruro de
Bario
Materiales que
Materiales estables,
deben
pero a altas presiones y
precalentarse
temperaturas reactivos
antes de la
con agua, no forma
combustin.
violenta.
Ejemplo: Aceite de
Ejemplo: cido Ntrico
Palma
Materiales que
Materiales inestables,
deben exponerse a
sufren cambios
temperaturas
qumicos violentos sin
medias o altas
explosin. Reactivos
antes de la
violentamente con agua.
combustin.
Ejemplo: cido
Ejemplo: ortoSulfrico.
cresol.
Exposicin: Irritacin,
daos menores en
ausencia de tto mdico.
Ejemplo: Glicerina
Exposicin continua:
incapacidad temporal o
daos permanentes, sino
hay atencin medica
rpida. Ejemplo:
Trietanolamina
Lquidos y slidos
que se encienden
a temperatura
ambiente.
Ejemplo: Estireno
Materiales inestables,
sufren explosin con un
fuerte iniciador.
Reactivos con agua
Ejemplo: Dinitroanilina
Materiales que
vaporizan rpido a
temperatura y
presin ambiental
o que se queman
en el aire.
Ejemplo:
Acetaldehdo
Tipo
de
envase,
condiciones
de
desechos
incluyendo
empaques
para
3.3
RIESGOS FSICOS
Recomendaciones:
un
equipo
elctrico,
verificar
su
correcto
3.3.3 Riesgos con equipos emisores de lser; rayos X; U.V.; infra rojo.
Corresponden a este grupo las emisiones de radiacin infrarroja (I.R.);
ultravioleta (U.V.); lser; etc.
La luz infrarroja puede daar la vista; acta como una fuente puntual
de calor y puede aumentar los efectos dainos de otras radiaciones.
Deben emplearse lentes apropiados que filtren la radiacin infrarroja.
La luz ultravioleta provoca irritaciones en la piel o quemaduras
similares a las producidas por los rayos solares y es muy daina para
la vista. An exposiciones cortas pueden generar una ceguera
temporal por dao en la crnea. Tambin debern utilizarse lentes que
filtren esta radiacin, si bien lo ms aconsejable es cubrir totalmente la
fuente de emisin.
En ciertos equipos (fundamentalmente espectroscopas U.V.; I.R. y
Light Scattering) se emplea radiacin lser, deber evitarse que
accidentalmente el lser incida en la vista, extremando las
precauciones en el empleo de espejos y otros tipos de accesorios que
pudieran desviar el rayo de su trayectoria original.
30
4.1.1 Acceso
Debe tener el smbolo de riesgo biolgico
Las puertas deben permanecer cerradas
-Ingreso controlado: no ingreso nios, ni personal no autorizado
usarn
guantes
protectores
apropiados
para
todos
los
31
4.1.3 Procedimientos
Estar estrictamente prohibido pipetear con la boca.
No se colocar ningn material en la boca ni se pasar la lengua por
las etiquetas.
Todos los procedimientos tcnicos se practicarn de manera que se
reduzca al mnimo la formacin de aerosoles y gotas.
Se limitar el uso de jeringuillas y agujas hipodrmicas, que no se
utilizarn en lugar de dispositivos de pipeteo ni con ningn fin distinto
de las inyecciones por va parenteral o la aspiracin de lquidos.
Todos los derrames, accidentes y exposiciones reales o potenciales a
materiales infecciosos se comunicarn al supervisor del laboratorio. Se
mantendr un registro escrito de esos accidentes e incidentes.
Se elaborar y seguir un procedimiento escrito para la limpieza de
todos los derrames.
Los lquidos contaminados debern descontaminarse (por medios
qumicos o fsicos) antes de eliminarlos por el colector de
saneamiento. Puede ser necesario un sistema de tratamiento de
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seguir la
zonas de trabajo.
Se prevern espacio e instalaciones para la manipulacin y el
almacenamiento seguros de disolventes, material radiactivo y gases
comprimidos y licuados.
Los locales para guardar la ropa de calle y los objetos personales se
encontrarn fuera de las zonas de trabajo del laboratorio.
Los locales para comer y beber y para descansar se dispondrn fuera
de las zonas de trabajo del laboratorio.
En cada sala del laboratorio habr lavabos, a ser posible con agua
corriente, instalados de preferencia cerca de la salida.
Las puertas irn provistas de mirillas y estarn debidamente
protegidas contra el fuego; de preferencia se cerrarn
automticamente.
En el nivel de bioseguridad 2 se dispondr de una autoclave u otro
medio de descontaminacin debidamente prximo al laboratorio.
Los sistemas de seguridad deben comprender medios de proteccin
contra incendios y emergencias elctricas, as como duchas para
casos de urgencia y medios para el lavado de los ojos.
Hay que prever locales o salas de primeros auxilios,
convenientemente equipados y fcilmente accesibles (vase el anexo
1).
Cuando se planifique una nueva instalacin, habr que prever un
sistema mecnico de ventilacin que introduzca aire del exterior sin
recirculacin. Cuando no se disponga de ventilacin mecnica, las
ventanas debern poder abrirse y, a ser posible, estarn provistas de
mosquiteras.
Es indispensable contar con un suministro regular de agua de buena
calidad. No debe haber ninguna conexin entre las conducciones de
agua destinada al laboratorio y las del agua de bebida. El sistema de
abastecimiento pblico de agua estar protegido contra el reflujo por
un dispositivo adecuado.
Debe disponerse de un suministro de electricidad seguro y de
suficiente capacidad, as como de un sistema de iluminacin de
emergencia que permita salir del laboratorio en condiciones de
seguridad. Conviene contar con un grupo electrgeno de reserva para
alimentar el equipo esencial (estufas, CSB, congeladores, entre otros),
as como para la ventilacin de las jaulas de los animales.
Es esencial un suministro fiable y adecuado de gas. La instalacin
debe ser objeto del debido mantenimiento.
Tanto los laboratorios como los locales destinados a los animales son
34
35
Clase de CSB
I, II, III
III
I, II
II, III Flujo laminar
IIB1, IIA2 Ventilada al exterior
36
qumicas/voltiles
Proteccin contra de sustancias
qumicas/voltiles
I, IIB2, III
37
6. MANEJO DE RESIDUOS
GRIS
Material Reciclable: Plstico, Papel, Desechables, Cartn
VERDE
Basura Comn: Papel plastificado, Icopor, barrido del laboratorio,
ROJA
Residuos Biolgicos: Plstico, sanitarios, algodones, servilletas,
cortopunzantes o cualquier materia contaminado con fluidos
biolgicos.
Residuos Qumicos: Plstico, servilletas, sanitarios contaminados con
qumicos, recipientes de sustancias qumicas.
6.1.3.1 Biolgicos.
Los residuos biolgicos son recolectados, inactivados por autoclave y
dispuestos finalmente a la ruta de basura comn de EEVV o al operador
especial para que sean incinerados. Cuando se dispone de sangre o
derivados, estos deben congelarse en bolsa roja, y despus son llevados a
incineracin.
Estos deben ser entregados en bolsa roja sin mezclarlos e identificados as:
Nombre del laboratorio
Tipo de material
Fecha
NOTA: Si el material Biolgico est contaminado con reactivos qumicos
este residuo se considera un residuo qumico y no biolgico.
Material contaminado con Biolgicos
39
6.1.3.2 Qumicos.
Deben utilizarse recipientes plsticos en buen estado, bien cerrados que no
presenten fugas, para aquellos reactivos qumicos que atacan el plstico se
recibirn en frasco de vidrio
Los recipientes deben rotularse as:
Nombre del producto o mezcla.
Concentracin
Nombre del laboratorio
Responsable
Adicionalmente al momento de entregar la mezcla qumica, se debe
hacer entrega al coordinador del laboratorio de los siguientes
datos:
Nombre de cada uno de los componentes
Concentracin
Presentacin
40
Cantidad
Ficha de seguridad
6.1.3.3
41
7. DESINFECCIN Y ESTERILIZACIN
7.1 DEFINICIONES
43
El personal de laboratorio deber lavarse las manos siempre que salga del
laboratorio, y especialmente despus de realizar cualquier procedimiento.
Se deben lavar con agua y jabn, frotndose durante un mnimo de 10
segundos; a continuacin se aclararn en agua limpia y se secarn con una
toalla de papel o un pao limpio. Cuando no se puedan lavar las manos, y
solo estn ligeramente sucias pueden frotarse con alcohol al 70% o con gel
desinfectante.
7.5.2 Formaldehdo
El formaldehdo (HCHO) es un gas que destruye todos los agentes
infecciosos y esporas a temperaturas superiores a los 20C. Sin embargo,
no tiene actividad contra los priones.
Su accin es relativamente lenta y requiere una humedad relativa de
alrededor del 70%. Se comercializa en forma de polmero slido
(paraformaldehdo), en copos o comprimidos, o como formol, solucin del
44
gas en agua con aproximadamente 370 g/l (37%) y con metanol (100 ml/l)
como estabilizante. Ambas formulaciones se calientan para liberar el gas,
que se utiliza en la descontaminacin y la desinfeccin de espacios
cerrados como CSB y locales y puede utilizarse como desinfectante lquido
(un 5% de formol en agua).
El formaldehdo es un gas peligroso de olor acre que puede irritar los ojos y
las mucosas, por lo que debe almacenarse y utilizarse con una campana
extractora de vapores o en zonas bien ventiladas. Adicionalmente se
presume, que tiene efecto cancergeno.
7.5.3 Alcoholes
El etanol (alcohol etlico, C2H5OH) y el 2-propanol (alcohol isoproplico,
(CH3)2CHOH) tienen propiedades desinfectantes similares. Son activos
contra las formas vegetativas de las bacterias, los hongos y los virus con
envoltura lipdica, pero no contra las esporas. Su accin sobre los virus sin
envoltura lipdica es variable. La mxima eficacia, se obtiene utilizando
concentraciones acuosas de aproximadamente un 70% (v/v): las
concentraciones ms altas o ms bajas pueden no tener tanto poder
germicida.
Las mezclas con otros agentes son ms eficaces que el alcohol por s solo;
por ejemplo, el alcohol al 70% (v/v) con 100 g/l de formaldehdo, o el alcohol
con 2 g/l de cloro libre. Las soluciones acuosas de etanol al 70% (v/v)
pueden utilizarse en la piel, las superficies de trabajo de las mesas de
laboratorio y las CSB, as como para sumergir pequeas piezas de
instrumental quirrgico. Los alcoholes son voltiles e inflamables y no
deben utilizarse en las proximidades de llamas desnudas. Las soluciones de
trabajo deben almacenarse en recipientes apropiados para evitar la
evaporacin.
45
46
8. PRIMEROS AUXILIOS
Cantidad
Jabn Yodado
1 frasco 200 ml
Jabn liquido
1 frasco 200 ml
Alcohol 70%
1 botella 350 ml
Uso
Limpieza heridas:
Germicida
Limpieza manos e
instrumental
Desinfeccin manos e
instrumental
Cantidad
Paquete con
presentacin individual.
5 unidades
3 unidades
Algodn laminado
1 paquete
2 unidades
Venditas
20 unidades
Venditas en rollo
10 unidades
Uso
Limpieza y cubrimiento
heridas, quemaduras,
hemorragias
Oclusin ojos en
lesiones o proyeccin
partculas
Para forrar
inmovilizadores, limpieza
de elementos o
instrumental.*
Fijar gasas, apsitos o
vendas
Proteccin de heridas
simples
Proteccin de heridas,
inmovilizaciones,
hemorragias
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Vendas triangulares
10 unidades
Inmovilizaciones,
proteccin de heridas
Cantidad
Tijeras
Baja lenguas
5 unidades
Guantes ltex
2 pares
Mascarillas desechables
con vlvula anti-reflujo
Bolsas (verdes, rojas)
2 de cada color
Aplicadores
10 unidades
Gafas de seguridad
Linterna pequea
500cc
2 unidades
Uso
Retirar ropa, cortar
gasas o vendas
Inmovilizar traumas o
lesiones en manos
Proteccin del auxiliador
y del accidentado
Proteccin del auxiliador
o respiracin boca-boca
Disposicin de desechos
Limpieza de heridas,
retirar cuerpos extraos
Proteccin del auxiliador
Revisin de cuerpos
extraos
Lavado de heridas o
quemaduras
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BIBLIOGRAFA
Manual de Bioseguridad de la OMS,Tercera edicin 2005.
PROBLEMA MEDIOAMBIENTAL EN LABORATORIOS QUMICOS: trabajo
para su solucin. Disponible en:
http://usuarios.lycos.es/ambiental/ea1/labquim.html
49
ANEXOS
ANEXO 1. PLANO Y DISTRIBUCIN
A continuacin, se presenta el plano y la distribucin fsica del Laboratorio
de Ciencias Biomdicas H-106, del ITM Campus Robledo. Este laboratorio,
por manipular tanto residuos qumicos, como biolgicos (por el tipo de
prcticas realizadas por el Grupo de Investigacin SINERGIA), cuenta con
reas de Procedimientos, almacenamiento de Reactivos, Seguridad
Industrial y Almacenamiento de Residuos.
50
Biolgicos
Anatomopatolgicos: Sangre y Derivados, Cultivos celulares
(Primarios y lneas celulares).
Material plstico contaminado con biolgicos.
Qumicos:
Reactivos: TRIzol, Cloroformo, Etanol, Isopropanol, Citrato de
Sodio, NaOH, EDTA, TBE 1X, Glicgeno, Syber Green, Bromuro
de etidio, Sanitarios, Mezclas de soluciones orgnicas, Soluciones
sales.
Material plstico contaminado con qumicos.
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