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Pruebas pre-transfusionales y
administracin de la transfusin
DUE. Ana Mateo
Banc de Sang i Teixits. Reus
DUE. Elisabeth Verdaguer
Banc de Sang i Teixits. Badalona
DUE. Sara Vilanova
Banc de Sang i Teixits. Lleida
Sumario
1. Introduccin
2. Objetivos
3. Solicitud transfusional y muestras de sangre
3.1 Criterios de aceptacin de la solicitud
transfusional
3.2 Muestras de sangre
4. Pruebas
pre-transfusionales:
componente
receptor
4.1 Identificacin positiva del receptor y de la
muestra de sangre
4.2 Revisin de los registros del servicio de
transfusiones
4.3 Determinacin del grupo ABO y Rh (D)
4.4 Estudio de la discrepancia sero-hemtica
4.5 Resolucin de las discrepancias ABO
4.6 Resolucin de las discrepancias debidas a la
ausencia de antgenos esperados
4.7 Resolucin de discrepancias debidas a
reacciones inesperadas con anti-A y anti-B
4.8 Resolucin
de
las
discrepancias
por
inmunohematologa
6.2 Teora del potencial Zeta
6.3 Factores que influyen en la sensibilizacin
de los hemates
6.4 Factores que influyen sobre la aglutinacin
de los hemates
6.5 Utilidad de la prueba directa e indirecta de
la anti-globulina humana
7 Soluciones potenciadoras de la unin antgenoanticuerpo
8 Bibliografa
1. Introduccin
La transfusin es generalmente un procedimiento beneficioso para el paciente.
Pero algunas veces los hemates del donante y a veces los del receptor tienen
una destruccin acelerada. La mayora de reacciones transfusionales hemolticas
se originan por errores en la identificacin del paciente o de la muestra, pero a
veces la hemolisis es provocada por anticuerpos irregulares que se encuentran
en el suero del receptor. Los efectos nocivos fueron observados desde los
principios de la primera transfusin, realizada en el siglo XVII por Jean-Baptiste
Denis.
Actualmente hay una gran variedad de pruebas pre-transfusionales que mejoran
la seguridad y la eficacia transfusional. Realizar les pruebas pre-transfusionals
correctamente asegura que se administren los productos sanguneos ABO
compatibles con el receptor y que se detecten la mayora de anticuerpos
irregulares clnicamente significativos. As podemos seleccionar para cada
receptor los componentes sanguneos ms adecuados y que estos una vez
transfundidos tengan una superviencia aceptable y
destruccin clnicamente significativa de los
no se produzca una
2. Objetivos
Despus de revisar esta Unidad, el alumno tendra que ser capaz de llevar a cabo
las siguientes tareas:
hematolgicos
(transfusin
previa,
trasplantes,
embarazos,
abortos),
Solo deberan aceptarse las solicitudes transfusionales que fueran legibles y que
estuvieran correctamente cumplimentadas. Las solicitudes parcialmente o
defectuosamente cumplimentadas o con muestras insuficientes
no sern
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C un mnimo de 7 das
despus de la transfusin.
Suero o plasma: tiempo no inferior a 10 das a una temperatura de -
no se produzca una
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El examen del grupo ABO debe incluir siempre una prueba sobre los
hemates que llamaremos parte o prueba globular, donde estn los
antgenos y otra sobre el suero que llamaremos parte o prueba srica en la
que se encuentran los anticuerpos. Estas dos partes son inseparables a la
hora de clasificar el grupo sanguneo. Si los resultados de ambas partes no
son los esperados el grupo queda invalidado, debern hacerse las
investigaciones oportunas para averiguar las causas de dichas discrepancias
hemtico/sricas que ampliaremos ms adelante.
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Ejemplo de la
aglutinacin de la
parte
globular
con los reactivos
anti A, anti B i
anti AB
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Control Albmina
Reactivo anti D
Aglutinacin positiva
Grupo O
Parte globular
Parte srica
Grupo AB
Aglutinacin negativa
Aqu veramos representada la opcin manual con placa, pero
habitualmente este proceso de determinacin tanto del grupo como del Rh
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est automatizado con mquinas que utilizan los mismos reactivos pero
adaptados a la forma de tarjeta con microtubos. Esto lo vemos en la
siguiente figura.
GRUPO B POSITIVO
Resultado
positivo
Resultado
negativo
Vemos
representados
los
mismos
reactivos.
Aqu
la
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Aglutinacin positiva
que determina
resultado positivo
Aglutinacin negativa
que determina resultado
negativo
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Errores tcnicos
Los problemas tcnicos pueden producir discrepancias en las
pruebas ABO bien por la obtencin de resultados negativos en lugar
de positivos o positivos en lugar de negativos. Los problemas
tcnicos que producen falsos negativos en las pruebas ABO
realizadas con hemates o suero son debidas a:
o
Centrifugado incorrecto.
Sobrecentrifugacin
Tambin
pueden
detectarse
antgenos
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hemates
modificados
pueden
aglutinarse
agregaciones
inespecficas
que
simulan
la
Se
ha
observado
que,
en
raras
ocasiones,
las
sueros
de
pacientes
con
concentraciones
sricas
que
han
recibido
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Tn-activados
tienen
glucoprotenas
que
incorporan
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4.8.2. Anti A1
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Analizar
los
hemates
del
portador
del
anticuerpo
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4.8.5. Rouleaux
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Todas las pruebas pretransfusionales tienen como objetivo seleccionar para cada
receptor potencial los componentes sanguneos adecuados de forma que una
vez transfundidos tengan una supervivencia ptima. Estas pruebas tienen su
fundamento en que el organismo est dotado de un sistema inmunolgico que
reconoce los antgenos extraos y los distingue de los antgenos propios,
desencadenando una respuesta inmune especfica para dicho antgeno. Las
premisas generales y que nunca debemos de pasar por alto son las siguientes:
2% restante, son
fundamentales :
o
El
estudio
de
anticuerpos
irregulares
clnicamente
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En
enfermos
previamente
transfundidos,
sobre
todo
en
los
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ms un
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Sistema antignico
Aloanticuerpo
Importancia clnica
IgG
HTR - EHRN
Lewis (Lea/Leb)
IgG-IgM
Rara HTR
Kell (Kell/k )
IgG
HTR - EHRN
Duffy (Fya/Fyb)
IgG
HTR - EHRN
Kidd (Jka/Jkb)
IgG
I/i
IgM
Ninguna
MN,Ss,U
IgG/IgM
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generales sin embargo hay que hacer una secuencia de pasos para resolver la
identificacin de estos aloanticuerpos. Estas secuencias las describimos a
continuacin:
y prueba de la
antiglobulina humana
6.1. Reaccin antgeno-anticuerpo en inmunohematologa:
La interaccin antgeno-anticuerpo puede ser detectada por diversas tcnicas
serolgicas. Los mtodos utilizados con mayor frecuencia en el banco de
sangre tienen como resultado la hemlisis o la aglutinacin de los hemates.
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facilidad. Para que tenga lugar la aglutinacin deben ser vencidas las fuerzas
de repulsin que normalmente mantienen separados los hemates.
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En medio salino (NaCl al 0,85%), los iones positivos de sodio (Na+) son
atrados por las cargas negativas de los glbulos rojos, creando una nube de
cargas positivas, que genera una fuerte repulsin interglobular.
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Considerando la carga elctrica del glbulo rojo , la fuerza inica del medio
de la suspensin ( ) y la constante dielctrica del medio , Pollack desarroll la
siguiente expresin del potencial zeta (Z):
glucoprotenas
de
la
membrana,
reduciendo
su
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6.3.3. Temperatura
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Anticuerpos fros
En una solucin salina normal, los iones Na+ y Cl- se agrupan alrededor de las
molculas de antgeno y anticuerpo, y neutralizan parcialmente sus cargas
opuestas.
Cuando los hemates estn en suspensin salina de bajo potencial inico, la nube
de cationes que rodea a los hemates es menos densa. La concentracin
disminuida de cationes alrededor de los glbulos rojos permite a las molculas
de anticuerpo tener ms fcil acceso a los lugares antignicos de la membrana
eritrocitaria, aumentando as la tasa de sensibilizacin.
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se incluyen las propiedades del medio utilizado para la suspensin globular y las
caractersticas del antgeno y del anticuerpo.
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Cualquier mecanismo que elimine las cargas negativas de los eritrocitos reducir
la distancia que los separa al disminuir el potencial zeta y as facilitar su
aglutinacin por parte de anticuerpos de la clase IgG. La disminucin de la carga
superficial de los glbulos rojos permite un mayor acercamiento de stos,
facilitando su aglutinacin por las molculas de anticuerpo. El tratamiento
enzimtico de los eritrocitos tambin incrementa la accesibilidad de algunos
antgenos cuando las glicoprotenas son eliminadas.
Adems de estas acciones, las enzimas proteolticas eliminan zonas antignicas
de otros anticuerpos como anti-M, -N, -S, -s, -Fya, -Fyb y Xga. Esta propiedad de
las enzimas proteolticas son de gran utilidad en la identificacin de anticuerpos
eritrocitarios.
6.4.4. Temperatura
El Tiempo de incubacin afecta a la aglutinacin. Los anticuerpos de los diversos
grupos sanguneos tienen diferentes tiempos para alcanzar el equilibrio, en esto
interviene de manera significativa la clase de inmunoglobulina y la forma en que
se une con antgeno especfico.
Estudios con eritrocitos suspendidos en suero o solucin salina han demostrado
que del 100 % de anticuerpos RhD que se fijan, aproximadamente el 25 % lo
hace en los primeros 15 minutos y el 75 % restante lo hace durante la primera
hora. La adicin de varios agentes potenciadores, por ejemplo disminucin de la
fuerza inica, puede aumentar la cantidad de anticuerpos fijados durante los
primeros 15 minutos, y con esto disminuir el tiempo de incubacin necesario
para alcanzar el equilibrio.
6.4.5. Densidad del antgeno
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Los potenciadores son las substancias que se utilizan para modificar el medio de
la prueba para promover la aglutinacin de hemates antgeno-positivos con los
anticuerpos correspondientes. Con esta finalidad se han desarrollado
potenciadores para la deteccin de anticuerpos irregulares en les pruebas de
rutina. Entre estas substancias potenciadoras, la albmina bovina, las soluciones
de baja fuerza inica y el polietilen glicol PEG), son las ms utilizadas.
Albmina bovina:
la
aglutinacin
directa
por
algunos
anticuerpos,
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potenciador de la reaccin
Enzimas:
En 1946 Pickles describi por primera vez el uso de las enzimas. Algunas
enzimas proteolticas como la ficina, la papana, la tripsina y la bromelina
se utilizan para la potenciacin de reacciones serolgicas, sobre todo la
de los anticuerpos de los sistemas Rh y Kidd.
Pero hay algunas desventajas en el uso de las enzimas en les pruebas de
laboratorio. Los antgenos M, N, S, Fya y Fyb son destruidos si estn
tratados con enzimas, por lo tanto estos anticuerpos no podrn ser
detectados. Adems las enzimas potencian anticuerpos fros y eso hace
que algunos anticuerpos no significativos se puedan detectar y eso
interferira en las pruebas de laboratorio.
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8. Bibliografa
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