Prof. Jos Abel Ros OBJETIVO DE APRENDIZAJE: 1. Extraer ADN de guisantes (Pisum sativum). 2. Interpretar los resultados obtenidos del desarrollo de la experiencia de laboratorio. INTRODUCCIN El cido desoxirribonucelico, frecuentemente abreviado como ADN, es un tipo de cido nucleico, una macromolcula que forma parte de todas las clulas. Contiene la informacin gentica con las intrucciones para el desarrollo y funcionamiento de todos los organismos vivos y algunos virus, siendo el responsable de la transmisin hereditaria. El ADN es el componente qumico fundamental de los cromosomas y el material que constituye los genes. MATERIALES Guisantes Jugo de limn, pia o ablandador de carne Licuadora o Batidora Alcohol etlico al 90% Sal de mesa Tubos de ensayo Agua fra Varilla de vidrio y algodn Detergente lavavajillas lquido Vaso qumico, colador PROCEDIMIENTO 1. Con la ayuda de una batidora o licuadora hay que conseguir un batido de guisantes (usa el doble de agua fra que de guisantes: 100 ml de guisante/ 200 ml de agua). 2. Vierte el batido a travs de un colador en un vaso de precipitados. 3. Aade media cucharadita de sal comn. Mezclar bien. 4. Aade 30 ml de detergente lavavajilla (un par de cucharadas soperas), mezcla bien y deja reposar 5 minutos. 5. Reparte la mezcla en tubos de ensayo. No lo llenes ms de un tercio de su capacidad. 6. Aade a los tubos un pellizco de enzimas (ablandador de carne, jugo de limn o pia,
incluso puede emplearse lquido limpiador de lentes de contacto).
7. Inclina los tubos de ensayo y vierte alcohol fro en ellos dejndolo resbalar lentamente por la pared lateral hasta tener partes iguales de alcohol y de la mezcla. 8. Cuando se hayan formado grumos en la parte superior del tubo introduce el varilla de vidrio y extrae la masa filamentosa de ADN. 9. El ADN aparece en la interfase alcohol-filtrado como grumos blancos. Introducir una varilla de vidrio o un palillo hasta justo la separacin entre el alcohol y el triturado y girar suavemente la varilla mientras se extrae. As se le irn pegando miles de fibras de ADN (Nota: Realmente son fibras de ADN Y FRAGMENTOS DE arn; en una separacin profesional se aaden enzimas que impiden que el ARN se una al ADN). 10. Dibujen los pasos fundamentales de la experiencia en su bitcora de laboratorio con sus respectivas explicaciones. 11. Entregue oportunamente su informe de laboratorio a la Profesora asistente Jennifer Carrin. RECOGER Y LIMPIAR todo el material, dejar el laboratorio limpio. ANLISIS Y DISCUSIN 1. Para qu se utiliza el detergente y la sal de mesa (Cloruro de sodio, NaCl). 2. Qu componente aporta el jugo de pia o ablandador de carne y cul es su utilidad? 3. Qu es una enzima? 4. Por qu se incorpora finalmente el alcohol etlico muy fro al medio? 5. Describe el ADN que has extrado de las clulas de guisantes Por qu se forman los grumos de ADN? 6. Realice un dibujo de la accin del detergente sobre las clulas. 7. Investigue y explique brevemente en que consiste la electroforesis.