Sie sind auf Seite 1von 105

2013

Manual
de
Manual
de Prcticas
Prcticas del
del Departamento
de
Departamento de
Parasitologa.
Parasitologa Veterinaria
Parasitologa.
Este manual est enfocado a los alumnos que cursen esta materia, servir
como apoyo indispensable en las prcticas dentro del departamento.

Pgina 1 de 105

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya


Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Manual de Prcticas del


Departamento de
Parasitologa.

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

ndice
Autor 2
Prologo ....7
Agradecimientos .8
3. Propsito del Sistema de Practicas ..9
4 .Encuadre de programa ..10
4.1 Niveles de Competencia Laboral ..11
5. Calendario de prcticas ..13
6. Prcticas generales de seguridad 14
Captulo 1. Recoleccin y Envi de Muestras ...16
Capitulo 2. Identificacin de Huevos de Parsitos .19
Capitulo 3. Mtodos Coproparasitoscopicos .23
Capitulo 4. Mtodo de Mc Mster 27
Capitulo 5. Mtodo de Harada y Mori 31
Capitulo 6. Conservacin de Nematodos y Cestodos 36
Capitulo 7. Identificacin de Ectoparsitos .39
Capitulo 8. Tcnica de Raspado Cutneo .45
Capitulo 9. Tcnica de Microhematocrito 50
Capitulo 10. Diagnostico de Microfilarias 53
Capitulo 11. Diagnostico de Babesia y Anaplasma 57
Capitulo 12. Diagnostico de Trypanosoma Cruzi 64
3

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Capitulo 13. Diagnostico de Ehrlichia Canina ..69


Capitulo 14. Examen de Orina ...75
Capitulo 15. Necropsia Parasitolgica .....79
Anexo I ..91
Anexo II .93
Anexo III 94
Anexo IV 95
Anexo V 96
Anexo VI 99

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

1. PROLOGO
Este manual est planeado para que permita que el estudiante aprenda
sistemticamente la parasitologa en sus diversos aspectos, ante todo, la
tcnica que se emplea en el laboratorio para que ayude al diagnostico de
parasitismo; luego, el estudio de los parsitos propiamente dichos,
agrupados en protozoarios, helmintos y artrpodos.
La finalidad es que este enfoque sistemtico de los aspectos prcticos de la
parasitologa, con su consiguiente apreciacin de las tcnicas de laboratorio y
morfologa de los parsitos, reducir la separacin didctica entre las
lecciones dadas en clase y los estudios prcticos.
Se describe, primero, los mtodos de laboratorio comnmente empleados
para detectar parsitos en materiales procedentes del cuerpo de animales,
as como darle al estudiante la oportunidad de practicar dichos mtodos en
nuestro departamento de parasitologa de la FMVZ de la UANL.

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

2. AGRADECIMIENTOS
Agradezco a todas las personas que contribuyeron con informacin para este Manual de
Practicas, gracias por su tiempo y paciencia, cuya disposicin hizo posible el
desenvolvimiento de una labor creativa, parcialmente resumida de este manual.

M.V.Z. Amaya lvarez Perla Cecilia.


M.V.Z. Obregn Chagoya Juan Eliud

Gracias.
M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

3. Propsito del Sistema de Prcticas.


El propsito de las prcticas de Parasitologia Veterinaria es el de proveer los
conocimientos tericos y prcticos en el rea de Parasitologia que permitan la
adecuada vinculacin de esta diciplina con las cuatro competencias generales de la
prctica Veterinaria (Salud Animal, Produccion Animal, Salud Pblica Veterinaria e
Inocuidad de Productos de Origen Animal).
Este sistema de prcticas se contribuir en el desarrollo de conocimientos necesarios
para formar un profesional dentro da la competencia laboral de Parasitologa
Veterinaria. El alcance del programa de prcticas en general se pretende alcanzar el
objetivo que es un sistema por competencias donde el alumno demuestra lo arendido
en clase. Presentan un grado de responsabilidad y autonomia en la toma de
decisiones. A menudo requiere la colaboracion con otros y trabajo en equipo.
Las unidades de competencia estn divididas en 8 partes:
a)
b)
c)
d)
e)
f)
g)
h)

Uso de la recoleccion y procesado de muestras fecales.


Uso del microscopio en parasitologa.
Morfologia de las formas de dispersin.
Tcnicas Coproparasitologicas.
Determinacin de la carga parasitaria por exmenes CPs.
Identificacin de Artropodos.
Diagnostico de parasitos sanguineos.
Necropsia demostrativa donde demuestra todo lo aprendido.

Para garantizar el funcionamiento adecuado del laboratorio as como de los materiales y


equipos, el sistema de prcticas propuesto est basado en el cumplimiento de las
normativas establecidas para ello: Reglamento interno de la Facultad de Medicina
Veterinaria y Zootecnia (UANL) y El Manual de Procedimientos Interno del Departamento
de Parasitologa, las Normas Oficiales Mexicanas requeridas para cada una y las Normas
Mnimas de Laboratorio.

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Unidades de Competencia

1.-Uso de la recoleccion y
procesado de muestras
fecales.
2.-Uso del microscopio en
parasitologa.
3.-Morfologia de las formas
de dispersin.
4.-Tcnicas
Coproparasitologicas.
5.-Determinacin de la
carga parasitaria por
exmenes CPs.
6.-Identificacin de
Artropodos.
7.-Diagnostico de parasitos
sanguineos.
8.-Necropsia demostrativa
donde demuestra todo lo
aprendido.

Competencia
Laboral

Tcnico en
Diagnostico
Parasitolgico
Nivel II

Competencia
Profesional

Parasitologa
Veterinaria

motriz
-Habilidad
manejar
para
adecuadamente el
Microscopio y de
muestras biolgicas.
de
Capacidad
para
observacin
distinguir las formas
de
bsicas
dispersin de los
parsitos.
-Capacidad reflexiva
comprender
para
los fundamentos de
tcnicas
las
coproparasitologica
s.

Destrezas

-Responsable
en el uso de
materiales
biolgicos
potencialmente
contaminantes
e infecciosos.
-Respetuoso
los
por
animales en las
de
prcticas
laboratorio.
-Disposicin
adoptar
para
las
todas
de
medidas
e
seguridad
higiene en el
desarrollo de
las prcticas.

Actitudes

4.- Encuadre del sistema de prcticas del programa de la materia de Parasitologa

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

4.1.- Niveles de competencia laboral.


Nivel 1.- Se realizan funciones rutinarias de baja complejidad. Se reciben instrucciones. Se requiere
baja autonoma.
Nivel 2.- Se realizan un conjunto significativo de actividades de trabajo, variadas y aplicadas en
diversos contextos. Algunas actividades son complejas y no rutinarias. Presenta un bajo
grado de responsabilidad y autonoma en las decisiones. A menudo requiere
colaboracin con otros y trabajo en equipo.
Nivel 3.- Se requiere un importante nivel de toma de decisiones. Tiene bajo su responsabilidad
recurso materiales con los que opera su rea. As como control de recursos financieros
para adquisicin de insumos.
Nivel 4.- Se desarrollan un conjunto de actividades de naturaleza diversa. En las que se tiene que
mostrar creatividad y recursos para conciliar intereses. Se debe tener habilidad para
motivar y dirigir grupos de trabajo.
Nivel 5.- Se desarrollan un conjunto de actividades de naturaleza diversa, en las que se tiene que
mostrar un alto nivel de creatividad, as como buscar y lograr la cooperacin entre
grupos e individuos que participan en la implantacin de un problema de magnitud
institucional.

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

10

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

5.-Calendario de prcticas Ene. Jul. 2012.


Enero
DOMINGO

LUNES

6
13
20
27

7
14
21
28

MARTES
1
8
15
22
29

MIERCOLES
2
9
16
23
30

JUEVES
3
10
17
24
31

VIERNES
4
11
18
25

SABADO
5
12
19
26

VIERNES
1
8
15
22

SABADO
2
9
16
23

Febrero
DOMINGO

LUNES

MARTES

MIERCOLES

JUEVES

3
10
17
24

4
11
18
25

5
12
19
26

6
13
20
27

7
14
21
28

1 Parcial

Marzo
DOMINGO

LUNES

MARTES

MIERCOLES

JUEVES
7
14
21
28

VIERNES
1
8
15
22
29

SABADO
2
9
16
23
30

3
10
17
24

4
11
18
25

5
12
19
26

6
13
20
27

JUEVES
4
11
18
25

VIERNES
5
12
19
26

SABADO
6
13
20
27

JUEVES
2
9
16
23
30

VIERNES
3
10
17
24
31

SABADO
4
11
18
25

Abril
DOMINGO
7
14
21
28

LUNES
1
8
15
22
29

MARTES
2
9
16
23
30

MIERCOLES
3
10
17
24

2 Parcial

Mayo
DOMINGO

LUNES

MARTES

5
12
19
26

6
13
20
27

7
14
21
28

MIERCOLES
1
8
15
22
29

3 Parcial
11

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

11

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

6.- Prcticas Generales de Seguridad.


6.1.- Normatividad aplicable a la prctica profesional relacionada a las prcticas.
Reglamento general del Departamento de Parasitologa de la FMVZ UANL, Normas
mnimas para los laboratorios que trabajan con materiales con actividad biolgica (ver
anexos y manual de procedimientos del Departamento de Parasitologa).
6.2.- Seguridad en el Laboratorio.
HBITOS BSICOS
Por higiene y seguridad, est prohibido fumar en laboratorios. No debes comer,
beber o masticar chicle.
No introducir objetos en la boca o masticar alimentos que han estado sobre la mesa.
Lvate las manos despus de cada prctica. Estas dos medidas de elemental higiene
evitarn la ingestin accidental de sustancias perjudiciales. Ten en cuenta que sobre la
mesa se ha podido trabajar con productos qumicos o material biolgico.
ORDEN Y LIMPIEZA
Debes mantener tu puesto de trabajo limpio y en orden. Sobre la mesa debe
colocarse solamente el material con que vas a trabajar, y por lo tanto, debe liberarse
de prendas, libros carpetas y otros objetos. Y, por supuesto, debes dejar tu puesto
limpio y en orden a tus compaeros.
SALUD
Si tienes alguna incompatibilidad con algn producto qumico, tienes un marcapasos
o alguna patologa que te parezca relevante para el curso normal de una prctica, has
de informar al profesor antes de realizarla.
VESTIMENTA
En trabajos con mquinas o en sus inmediaciones, no vistas con prendas sueltas o
con partes que cuelguen y que puedan engancharse a su movimiento (por ejemplo,
evita corbatas o flecos cerca las centrifugadoras o sustancias, etc.). Es recomendable
que no lleves anillos, relojes de pulsera, collares u otros accesorios que puedan
engancharse.
Es aconsejable que no lleves manga corta, faldas cortas, pantalones cortos o
sandalias. Esto es especialmente importante cuando manipules objetos a
temperaturas muy bajas o elevadas, como cidos, o cuando te acerques a estufas,
autoclaves u hornos. Protgete.
En el caso de que tengas el pelo largo, debers llevarlo recogido con el fin de evitar
riesgos.
EN GENERAL
La conducta en laboratorio ha de ser correcta. En los laboratorios no debes gastar
bromas, ni jugar.
12

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Lee atentamente el guin de la prctica. Sigue en todo momento las instrucciones


del profesor. Ante cualquier duda, consulta al responsable de la prctica.
No se pueden realizar experimentos que no estn autorizados por el profesor.
Una labor importante en la Universidad es la investigacin. No toques aquellos
equipos e instalaciones que no pertenecen a tu prctica, y en general, todo aquello
que no sabes cmo funciona.
6.3.- Equipos de proteccin individual
HBITOS BSICOS
Usando los equipos de proteccin individual o EPIs (guantes, gafas, casco, calzado
apropiado, mascarillas, pantallas de proteccin, batas, etc.) te proteges. Utilzalas
siempre que sea necesario
Conserva en buen estado los EPIs. Si observas alguna deficiencia en ellos, comuncalo
enseguida al profesor. Si no sabes cmo utilizarlos, asegrate de que te den las
oportunas explicaciones
PROTECCIN DE CARA Y OJOS
Es obligatorio usar gafas o pantallas de proteccin en operaciones donde exista
riesgo de proyecciones y salpicaduras. En prcticas donde utilicemos sangre, es
imprescindible.
Si trabajas con lquidos qumicos, piensa que tus ojos sern los ms perjudicados
ante cualquier salpicadura.
PROTECCIN DE PIEL Y MANOS
Dado que muchas sustancias pueden penetrar en el organismo a travs de la piel
debes evitar todo contacto con ellas, tanto en la manipulacin como en posibles
salpicaduras a la ropa. En el caso de que tu ropa se impregne con sustancias corrosivas
o que estn muy calientes, desprndete de ella rpidamente y con el mayor cuidado.
Es recomendable que uses bata
Utiliza guantes adecuados para evitar el contacto de la piel con los productos
qumicos. Si no ests seguro de que tipo de guante debes usar, pregntalo.
En la manipulacin de materiales calientes o muy fros es obligatorio usar guantes de
proteccin especficos. Si no ests seguro de que tipo de guante debes usar, pregnta.

13

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

13

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

CAPITULO 1
COLECCIN Y ENVIO DE MUESTRAS.
INTRODUCCION.

Esta informacin nos servir para cuando estemos en el mbito profesional


y haya que tomar muestras y enviarlas a un laboratorio para procesarlas, es
importante saber cmo colectarlas y como enviarlas, ya que si no se hace
como se debe la muestra puede arrojar datos errneos o simplemente la
muestra no sirve para la prueba.
OBJETIVO
Al finalizar esta prctica el alumno, tendr el conocimiento necesario para
saber cmo colectar una muestra, que qumicos aadirle y a que
temperatura debe estar, para as poder tener xito en la conservacin de la
misma.
MATERIAL
Guantes

Cucharilla Rectal

Bolsa Estril

Asa Coprlogica

Frasco Vacio

Plumn Indeleble

Congeladores

Hielera

PROCEDIMIENTO

Las muestras fecales se debern de tomar directamente del recto y se


procesarn inmediatamente despus, dependiendo de la especie animal de
que se trate, ser la forma de obtencin de las mismas, por ejemplo en
pequeas especies se puede utilizar el termmetro, una cucharilla rectal o
bien una varilla de vidrio. Si bien la cantidad de heces que se obtiene con
ellas es pequea, es apenas suficiente para un examen directo.
En grandes especies es comn el uso de guantes de palpacin para colectar
las muestras directamente del recto. En caso de no poder realizar las colectas
por ninguno de estos mtodos, se le puede tomar del suelo cuidando de
estar seguros, de que pertenece al paciente en cuestin y de que son
frescas.
14

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

La cantidad de materia fecal que se recomienda colectar es de 5 a 10gms., Sin


embargo la cantidad depender del tipo de prueba(s) a realizar.
Manejo de la muestra
Para el manejo de las muestras se utilizan preferentemente bolsas de
plstico o frascos de vidrio limpios de boca ancha, el material no debe de
estar contaminado con tierra, agua u orina, los frascos se colocan en lugares
frescos, pues el calor acelera los fenmenos de fermentacin.
Los datos que acompaan a las muestras son nombre y direccin de la
persona y del animal se anotar la edad, sexo, estado fisiolgico y de ser
posible, antecedentes teraputicos; as como la hora y fecha de la toma de la
muestra.
Conservacin de la muestra
Los conservadores pueden ser fsicos o qumicos. Los medios fsicos de
conservacin, son las temperaturas bajas. Por ejemplo 4C muchos estadios
parasitarios pueden ser preservados al menos por dos meses con un
desarrollo mnimo.
A 10C que es la temperatura del refrigerador, las muestras as
conservadas podrn examinarse 24 y hasta 48 horas despus de
evacuadas, en el caso de heces diarreicas stas debern examinarse en
un lapso no mayor de una hora. Los medios qumicos permiten la
conservacin de las muestras por ms tiempo, sin correr el riesgo de que las
formas parsitas se deformen o destruyan. Las muestras se pueden
conservar indefinidamente en formalina al 10% (1 parte de heces 9 partes
de formalina).
Aproximadamente el 50% de los huevos de algunos Strongyloideos de
rumiantes, fueron detectados luego de 200 das de conservacin con
esta solucin, la solucin al 5% se recomienda para muestras, en las que
se sospecha que contengan quistes de protozoarios.

15

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

15

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

RESULTADOS
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
DISCUSIN
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________

REFERENCIAS
Manual de parasitologa.
Juan Jos Zarate Ramos
2007

16

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

CAPITULO 2
IDENTIFICACION DE HUEVOS DE PARSITOS.
INTRODUCCION

Es crucial saber identificar un huevo de parasito de toda la contaminacin


fecal que existe en la muestra, tales como clulas vegetales, esporas de
hongos, polen, caros y de burbujas de aire, as tambin poder reconocerlos
y tratar de llegar a un Dx. Eficaz.
OBJETIVO
El reconocer e identificar los huevos de parsitos de las diferentes especies
en las que se encuentra.
MATERIAL
Muestra Fecal

Bata

Porta objetos

Guantes

Cubre objetos

Cmara Fotogrfica (1por equipo)

PROCEDIMIENTO
El primer paso es saber a qu objetivo buscar?
5x, 10x, 40x, 100x?

Muestra
Porta
objetos

Objetivos
17

2-1. Objetivos y margen de observacin.


M.V.Z. Raymundo Israel Figura
Prez Zumaya

17

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Cada objetivo da un campo de visin sobre la muestra, mientras ms


pequeo sea el no. de objetivo ms grande es el campo de visin, pero el
material que vemos es pequeo. Se recomienda siempre empezar por el
objetivo de 10x y recorrer la muestra en zig zag hasta recorrerla toda, y
aumentar el objetivo si es necesario ya que muchos huevos del genero
Eimeria necesitara un objetivo de 40x o superior una vez realizado la
observacin con xito podemos sacar un Dx. Cuantitativo o cualitativo.
Saber buscar el huevo en los diferentes estratos, ya que en la muestra
preparada existen varios estratos diferentes:
Estrato
Intermedio

Figura 2-2. Diferentes estratos en la muestra

Como podemos observar en la figura anterior el estrato donde ms


comnmente se observan huevos de parsitos es en el estrato intermedio, o
mejor conocido estrato de las burbujas, aqu en este estrato podemos
encontrar las burbujas, solo tenemos que definir bien el contorno de la
burbuja, esto lo podemos hacer acercando o alejando el objetivo de la
muestra, una ves definida podemos encontrar huevos de parsitos en ese
estrato (si la muestra es positiva).
Les daremos una muestra ya previamente analizada y positiva en parsitos,
esta preservada en formol buferado al 10%. Posteriormente la analizaran en
un porta-objetos. Y trataran de verificar su positividad y encontrar algn
huevo de parasito, las muestras son de Caballo, Cabra y Conejo.

18

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Figura 2-3. Burbujas del estrato intermedio

Figura 2-3. Huevo de parasito Trichostrongylus en el estrato intermedio

19

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

19

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

RESULTADOS
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
DISCUSIN
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________

REFERENCIAS
Manual de parasitologa.
Juan Jos Zarate Ramos
2007

20

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

CAPITULO 3

METODOS COPROPARASITOLOGICOS POR FLOTACION Y DIRECTO


INTRODUCCION
POR FLOTACIN

Esta

tcnica tiene como fundamento utilizar soluciones con pesos

especficos mayores que el agua (1,200 1,300) en donde los huevos de


helmintos y huevos de algunos artrpodos. Las soluciones utilizadas en esta
tcnica pueden ser S.SNaCl.(solucin saturada de cloruro de sodio), S.A.S.
(solucin azucarada saturada), soluciones de sulfato de zinc o magnesia entre
otras, en esta prctica utilizaremos la S.A.S.
OBJETIVO
Que el alumno tenga a su alcance las tcnicas ms utilizadas en las que
practicara la de flotacin y la directa utilizando heces de diferentes especies
animales, para determinar la presencia de huevos u ooquistes de los
parsitos.
MATERIAL
TUBOS DE ENSAYO

S.A.S.

BATA

PORTA OBJETOS

COLADERA

GUANTES

CUBRE OBJETOS

EMBUDO

MICROSCOPIO

MORTERO

SOLUCION SALINA

PROCEDIMIENTO
Se colocan en el mortero de 8 a 15 gramos de heces (tratar de no exceder en
cantidad), se agregan una gotas de solucin glucosada (S.A.S.) se mancera
hasta obtener una pasta.
Vaciamos en el embudo y con el colador al tubo de ensayo.
Dejamos en el tubo de ensayo una cpula de la muestra.
Aplicamos el cubre objetos sobre la boca del tubo de ensayo.
M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

21

21

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Esperamos de 10 a 15 min.
Retiramos el cubre objetos, observamos que se adhiri a l una capa de la
muestra, despus lo colocamos sobre un porta objetos y observamos al
microscopio la muestra.

Figura 3-1. Forma de cmo se ve paso a paso.

DIRECTO
PORCEDIMIENTO
Esta tcnica tiene la ventaja de ser rpida y de utilizar poco equipo, pero la
desventaja de ser poco confiable debido a la pequea cantidad de heces que
se utiliza.
Con una haza coprlogica se obtiene la muestra ya sea directamente del
paciente o de la muestra refrigerada, se depositan 3 a 5 gramos de muestra
fecal sobre el porta objetos.
Con un palillo de dientes se mancera se agrega solucin salina para crear una
pasta homognea.
22

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Posteriormente se pone el cubre objetos encima y se observa al microscopio.

Figura 3-2. Forma de las tcnicas.

Figura 3-3. Forma de cmo se ve terminado.

23

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

23

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

RESULTADOS
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
DISCUSION
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________

REFERENCIAS
Manual de Parasitloga
Universidad Nacional Autnoma de Mxico
Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia
Departamento de Parasitologa

24

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

CAPITULO 4
METODO CUANTITATIVO DE MC MASTER.
INTRODUCCION

Tcnica cuantitativa de huevos de algunos parsitos. Ya que el recuento de


un gramo de heces resulta poco prctico, en la tcnica de Mc Master se
aplica un factor que permite establecer la equivalencia del recuento de un
gramo de la muestra problema con la muestra utilizada por esta tcnica.

INTERPRETACIN
Si en 45ml habra 3mgs de heces, (relacin 1 gramo por cada 15 ml) si de los
15ml se usa solo 0.15 (Que es el volumen de cada rea de lectura de la
cmara de Mc Master), Luego el factor de relacin para cada rea de lectura
ser de 100 y si la lectura se realiza en ambas cmaras ser de 50. El
resultado se expresa en HPG (huevos por gramo) es difcil calcular el nmero
exacto de parsitos adultos en un animal basndose en este tipo de
mtodos. Debido a que existen muchos factores que intervienen en la
produccin de huevos as como el nmero de huevos presentes en las heces.

OBJETIVO
Permite el recuento de huevos o formas de dispersin de algunos parsitos
con la finalidad de realizar la estimacin de la carga parasitaria del animal.

25

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

25

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

MATERIAL
Balanza.
Dos recipientes de 50 ml.
Mortero.
Tubo de ensayo de 15 ml.
Pipetas.
Tamiz (colador o bien doble capa de gasa).
Solucin Saturada de ClNa.
Cmara de Mc Master.

PROCEDIMIENTO
1.- Homogenizar 3gms. de heces en 45ml. de agua corriente, con la
ayuda del mortero.
2.- Tamizar y del filtrado se colocan 15ml en un tubo de ensayo.
3.-Sedimentar por espacio de 30 minutos o si se cuenta con
centrifuga centrifugar a 1000rpm/1 minuto.
4.- Eliminar el sobrenadante y remplazarlo con solucin de Cl Na.
5.- Homogenizar y con un gotero tomar una muestra para con esta
llenar la cmara de Mc Master.
6.- Esperar por espacio de 2 minutos para que los huevos y/o quistes
floten y se ubiquen en el campo de lectura.
7.- Se procede a realizar el conteo esto se facilita si se ubica en el
mismo foco ptico donde se encuentran las micro burbujas de aire.

26

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

CMARA DE RECUENTO DE MC MASTER


El nmero de huevos por gramo puede ser calculado de la siguiente
manera:
o Se deben contar la totalidad de los huevos dentro de la rejilla de cada
cmara, ignorando aquellos fuera de los cuadros.
o Se puede emplear una muestra de animal independiente para cada celda
de la cmara, en este caso se multiplica el nmero de huevos encontrados
por 100 lo que equivale al nmero de huevos por gramo de materia fecal
(HPG).
o Se puede usar la muestra de un mismo animal para las dos celdas, se
cuenta el total de huevos en ambas celdas y se los multiplica por 50.

Ejemplo:

12 huevos observados en la cmara 1 y 15 en la cmara 2 = (12 +15) x 50 = 1350 h.p.g .

27

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

27

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

RESULTADOS
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________

DISCUSION
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________

REFERENCIAS
http://www.rvc.ac.uk/Review/Parasitology_Spanish/EggCount/Purpose.htm

28

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

CAPITULO 5

Mtodo de Harada - Mori.


INTRODUCCION.

Los huevos de nematodos son muy difciles y hasta imposible de diferenciar.


Por ejemplo, el diagnostico diferencial entre los huevos de Strongylus y
Oesophagostomum en los cerdos solo pueden hacerse despus del cultivo de
los huevos. Es una tcnica empleada para el cultivo de larvas de nemtodos
de inters clnico. Es un mtodo til para la diferenciacin de parsitos cuyos
huevos son idnticos y es indispensable para el diagnstico y seguimiento de
las infecciones por Nematodos.
OBJETIVO
Que el alumno aprenda hacer coprocultivos para as poder diferenciar los
huevos de parsitos y poder llegar a un diagnostico eficaz, o en el mbito de
investigacin poder desarrollar lo huevos para diversas investigaciones.
VARIACIONES
Existen 2 variaciones: una en tubo de ensayo y otra en preparacin inclinada
en caja de petri. Se describir la original en tubo de ensayo y se mencionar
lo ms importante en la que utiliza caja de petri.
Nota: Las larvas recobradas pueden ser infectantes.
Aplicar medidas de seguridad: usar guantes, limpiar inmediatamente
cualquier cultivo derramado con una solucin de cloro, descartar
material en frascos con desinfectante.

29

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

29

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

MATERIAL
Tubos de ensayo de 15 ml de capacidad
Tiras de papel filtro cortadas 2 mm menos anchas que el
dimetro del tubo y 2 cm ms largas, con un extremo ms afinado.
Agua destilada, en una pizeta
aplicadores de madera
Gradilla o soporte para tubos
Guantes
Lpiz de grafito
Porta-objetos
Cubre-objetos

PROCEDIMIENTOS
El cultivo de larvas de heces de un animal infectado se hace en un tubo de
ensayo, una delgada capa de heces de 1 a 2 mm se extiende en el tercio
medio de una pieza de papel filtro.
1. Esta pieza es colocada en un tubo de centrifuga cnico de 15 ml.
2. Se depositan 3 ml de agua destilada.
3. Se deposita el papel filtro con las heces, se debe tener en cuenta que
el extremo inferior sin heces contacte con el agua llegando hasta 1 cm
del fondo del tubo y que el extremo superior sin heces sea sujetado
por un tapn de algodn.
4. El cultivo lleva de 7 a 10 das entre 24 y 28C.
5. Cada da se debe verificar si el agua contacta lo suficiente con el papel
filtro, si no se deber agregar agua.
30

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

6. Las heces se mantendrn hmedas gracias al papel filtro y tan pronto


como las larvas se hallen libres emigraran hacia al agua.
7. Las larvas se pueden extraer con una pipeta o ver directamente.

Figura 5-1. Variaciones de Harada-Mori. Tomado de: Ash L, and Orihel, 1987.

31

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

31

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Figura 5-2. Partes de la variacin en tubo de ensayo de Harada-Mori

RESULTADOS
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________

32

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

DISCUSION
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________

REFERENCIAS
Mtodos para Laboratorios de
Atencin Primaria de Salud
2da. Edicin, 2003
Rina Girard de Kaminsky, M.Sc

33

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

33

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

CAPITULO 6
CONSERVACION DE NEMATODOS Y CESTODOS.
INTRODUCCION.

Esta prctica nos servir para preservar ciertos parsitos que valga la pena
conservar, para investigaciones futuras o simplemente para observacin
inmediata, la prctica de conservacin se da en la necesidad de identificar a
los parsitos una vez estando fuera del animal y el mtodo ms rpido es por
comparacin.
OBJETIVO
Es el de dar las herramientas necesarias a los alumnos para la conservacin
de los parsitos ms frecuentes en esta regin, ya que el mismo alumno con
esta prctica ser capaz de crear una coleccin parasitaria evitando que las
mismas no se vean daadas por una mala muestra guardada.
MATERIAL
Tubos de ensayo
Alcohol al 70%
Termmetros
SSFE
Formaldehido 4%
Acido Actico 10%
Agua

34

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

PROCEDIMIENTOS
NEMATODOS
La cutcula de los vermes es muy gruesa y por ello, es preferible utilizar para
la fijacin lquidos calientes;
1) El alcohol del 70% o la solucin de formalina al 3-5% deben calentarse a
71-82C.
2) Lavar intensamente los vermes agitndolos en dos o tres cambios de suero
salino fisiolgico.
3) Despus introducir en el fijador caliente.
4) Una vez que el lquido se ha enfriado deben incluirse en fijador nuevo. (En
la mayora de los casos es adecuado un fijador compuesto de formaldehido al
4% y cido actico al 10%. Se obtiene aadiendo 10 ml de formalina y 10 ml
de acido actico glacial a 80 ml de agua).
CESTODOS
Antes de proceder a su fijacin debe intentarse lavarlos en solucin salina
fisiolgica, teniendo en cuidado de no romperlos ni dejar que se anuden.
Se fijaran despus en formalina al 5 10%, movindolos con una pinza
mientras se introducen en el liquido fijador o bien sumergindolos repetidas
ocasiones en el liquido y dejando que cuelguen entre las inmersiones
suspendida por una pinza.
Esta ligera traccin los mantiene en posicin extendida correcta y facilita el
examen posterior.

35

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

35

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Figura 6-1 Oxyuris equi. Nematodo

Figura 6-2 Moniezia spp. Cestodo.

RESULTADOS
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
DISCUSION
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
REFERENCIAS
Tcnicas de Diagnostico en Parasitologa Veterinaria
Consuelo Almazn Garca UAT
36

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

CAPITULO 7

IDENTIFICACION DE ECTOPARASITOS
INTRODUCCION

La mayora de los ectoparsitos son artrpodos, estos a su vez son parsitos


obligados ya que son hematfagos y son vectores de numerosas
enfermedades infecciosas. Son los caros de mayor tamao (pulgas y
garrapatas).
Se las menciona errneamente como insectos, las garrapatas no son
insectos, sino arcnidos.

OBJETIVO
En esta prctica los alumnos aprendern a observar e identificar los
ectoparsitos ms comunes (pulgas y garrapatas), ye que son un problema
para los animales domsticos y salvajes y unos de los principales vectores de
enfermedades zoonticas, al finalizar la prctica el alumno tendr el
suficiente conocimiento para identificar y diagnosticar cualquier problema de
ectoparsitos.

MATERIAL
Porta-objetos
Agujas y/o alfileres
Estereoscopio
Cmara fotogrfica
Gua de identificacin

37

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

37

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

PROCEDIMIENTO
Los especmenes deben ser colectados de su hbitat, ya sea en fase parasita
o en vida libre.
En el caso de las garrapatas (artrpodos) adheridas a su hospedador, los
ejemplares deben ser desprendidos a contrapelo mediante suaves
movimientos de traccin que debern efectuarse con los dedos, para evitar
el desprendimiento del gnastoma y que este quede adherido a la piel del
husped.
Y en las pulgas, se toman directamente del husped, antes de que esta salte
o se esconda entre el pelo, es importante recomendar tener un tubo con
alcohol para poder procesar las muestras
La muestra debe estar MUERTA y en alcohol.
Posteriormente pasamos a tomar el espcimen y colocarlo junto con
una gota de alcohol en el porta-objetos.
Despus lo colocamos bajo el objetivo del estereoscopio.
Y con la ayuda de la gua tratamos de identificar el ectoparsito.
GARRAPATAS GUIA

Figura 7-1.
Diferentes
garrapatas de la
regin.

38

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Figura 7-2. Morfologa de la garrapata vista dorso-ventral.

Figura 7-3. Morfologa de la garrapata vista ventro-dorsal.


M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

39

39

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Dermacentor

Amblyoma

Ixodes

Boophilus

Rhipicephalus

Haemaphysalis

Figura 7-4. Morfologa de Basis capitulum y Palpus de cada especie.

PULGAS GUA

Figura 7-5. Anatoma de la Pulga, . Courtesy of US Public Health Service, CDC.

40

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

DOG FLEA
Ctenocephalides
Canis
CAT FLEA
Ctenocephalides
felis
NORTHERN RAT FLEA
Nosopsyllus
Fasciatus
SQUIRREL FLEA
Orchopeas
howardii
HUMAN FLEA
Pulex
irritans
ORIENTAL RAT FLEA
Xenopsylla
cheopis

Figura 7-6. Diagrama de especies comunes de pulgas en USA. Courtesy of US


Public Health Service, CDC.
41

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

41

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

RESULTADOS
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
DISCUSION
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________

REFERENCIAS
Courtesy of US Public Health Service, CDC.
Tcnicas de Diagnostico en Parasitologa Veterinaria
Consuelo Almazn Garca UAT

42

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

CAPITULO 8
TECNICA DE RASPADO CUTANEO
INTRODUCCION

Los raspados son importantes para detectar la presencia de parsitos, que


pueden encontrarse en las capas ms superficiales o ms profundas
de la piel. Se recomienda realizarlos en caso de enfermedades que cursen
con descamacin y prurito cuando se sospeche de la presencia de
algn parsito.

TIPOS DE RASPADO
La profundidad del raspado vara en funcin del parsito que busquemos:
Raspado superficial: para detectar parsitos de los gneros de Cheyletiella
spp., Otodectes spp., Sarcoptes spp. o Notoedres spp.
Raspado profundo (hasta provocar el sangrado capilar): para evidenciar la
presencia de parsitos del gnero Demodex.

MATERIAL
Hoja de bistur
Aceite mineral
Portaobjetos
Cubreobjetos
Hisopo
Solucin Salina Fisiolgica

43

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

43

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

PROCEDIMIENTO
Se debe rasurar el pelo de la zona que se va a raspar. Entonces se coloca una
gota de aceite en el porta y desde all se impregna el borde de la hoja de
bistur que se utilizar para raspar. Es necesario pellizcar la zona rasurada y
raspar el pliegue (figura 8-1).
El material recogido con la hoja de bistur se coloca en el portaobjetos, y se
homogeniza con el aceite. A continuacin se tapa con el cubreobjetos para
impedir que el material se seque, y se observa al microscopio (figura 8-2).

Figura 8-1. Raspado cutneo en una zona


lesionada.

Figura 8-2. Preparacin del material


raspado para visualizarlo al microscopio.

44

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

En el caso del odo es diferente ya que hay parsitos donde son especficos
de esta zona (Otodectes cynotis), aqu se usa una tcnica diferente;
utilizamos un hisopo humedecido previamente con S.S.F y se introduce en el
odo, posteriormente sacamos el hisopo y lo frotamos suavemente en el
porta-objetos.
Aadimos una gota de S.S.F a la muestra fijada en el porta-objetos,
colocamos el cubre-objetos y checamos al microscopio.

Figura 8-3. Introduccin de un hisopo


en el odo para la recogida de
muestras.

Figura 8-4. Extensin sobre porta-objetos


del material recogido con el hisopo.

45

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

45

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

ACAROS COMUNES
SARNA DEMODESICA

Figura 8-5. Demdex canis.

SARNA SARCPTICA

Figura 8-6. Sarcoptes scabei.

SARNA NOTODRICA DEL GATO

Figura 8-7. Notoedres cati.

CAROS DE LA OREJA

Figura 8-8. Otodectes cynotis

46

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

RESULTADOS
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________

DISCUSION
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________

REFERENCIAS
La Clnica Da a Da.
Ateuves No. 8, 2008
Principales caros en perros y gatos.
Bayer. 2002

47

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

47

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

CAPITULO 9

TECNICA DE MICROHEMATOCRITO.
INTRODUCCION

Es una tcnica importante ya que por medio de esta podemos saber el nivel
de anemia de nuestro paciente o inclusive detectar parsitos sanguneos, de
cualquier especie.

OBJETIVO
El alumno al terminar esta prctica tendr el conocimiento de poder
desarrollar esta tcnica y poder expresar los valores determinados de esta
prueba y as llevar un tratamiento eficaz.

MATERIAL
Capilares
Micro-Centrifugadora
Tabla de Valores
Muestra
Cera de plstico cinlico
Regla de microhematocrito

PROCEDIMIENTO

El primer paso es tomar la muestra.


El segundo paso es colocarla en un tubo de ensayo EDTA (K3).
Moverlo uniformemente y despacio
hasta cubrir toda las superficie del tubo.
Posteriormente pasamos la sangre al capilar despacio y en manera
uniforme.
48

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Figura 9-1. Forma del llenado capilar.

Seguimos con la inclusin de plastilina en la parte inferior.


Cabe mencionar que la pieza debe estar limpia de todo resto de
sangre.
Posteriormente lo insertamos en la centrifugadora a 3500 rpm en un
tiempo de 5 a 10min.
Es importante mencionar que el lado de plastilina cermica va hacia
fuera, en la centrifugadora esto es debido a la fuerza centrifuga.
As queda el capilar despus de la centrifugacin.

Figura 9-2. Estructura del


microhematocrito despus de la
centrifugacin.

Para la deteccin de parsitos sanguneos como la microfilaria se busca en el


nivel de G.Blanco y plasma, se rompe el capilar a esa altura se vaca un poco
el contenido y posteriormente se observa al microscopio.

*Para regla de microhematocrito y valores normales, buscar en anexos.


49

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

49

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

RESULTADOS
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________

DISCUSION
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________

REFERENCIAS
Manual de parasitologa.
Juan Jos Zarate Ramos
2007

50

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

CAPITULO 10

DIAGNOSTICO DE MICROFILARIAS.
INTRODUCCION

L a filariosis o mejor llamada dirofilariosis,

es una enfermedad grave

preferentemente de los perros, aunque tambin se encuentra en otros


animales (gato, lobo, zorro, visn, otros animales salvajes y ocasionalmente
el hombre), provocada por la infestacin de una filaria adulta, que es un
parsito redondo, alargado, que viven en el corazn y arterias pulmonares de
sus huspedes, pueden vivir unos pocos o varios cientos en un mismo animal,
esta enfermedad es transmitida por el mosco Aedes spp., el cual tiene la
funcin de hospedador intermediario para la propagacin de la enfermedad,
ya que este, se alimenta por las noches que es cuando se encuentran en
mayor cantidad las microfilarias en el torrente sanguneo que son la forma
infectiva de dicho parasito, posteriormente ya que el mosco se ha
alimentado, se alimenta de otros animales y por medio de sus secreciones
salivares, que es ah donde se alberga la microfilaria, va infectando a nuevos
individuos.
La infestacin por dirofilaria se diagnostica en un examen de suero o de
sangre por el mtodo de gota gruesa preferentemente o mediante la
utilizacin de otros mtodos convencionales.

OBJETIVOS
Que el alumno pueda diagnosticar por varios mtodos la presencia de
microfilarias en sangre, as poder llevar un tratamiento efectivo, en conjunto
con lo aprendido en el saln de clases.

51

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

51

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

MATERIAL:
* Sangre problema
* Centrfuga
*Wright colorantes
*Guantes

* Gradilla
*Pipeta Pasteur
*Formalina al 2%
* Bata

*Tubos de centrfuga
* Acido actico al 3%

PROCEDIMIENTO:
METODO DE SUERO
TAMBIEN SE PUEDE UTILIZAR LA TECNICA DE MICROHEMATOCRITO PARA
DETECTAR LA PRESENCIA DE MICROFILARIAS EN LA SANGRE.
Se obtienen mayores resultados en la observacin del suero por la
concentracin de larvas, se prefiere obtener la muestra durante la tarde o
noche para apreciar un intenso movimiento serpenteante.
Se coloca en un tubo de centrfuga 1 ml de colorante de Wright en 5 ml de
sangre, posteriormente se agregan 5 ml de ac. Actico al 3%, se centrifuga
durante 5 minutos a 1500 rpm y se deja reposar, despus con la pipeta se
toma una muestra del sedimento y otra de la superficie y se coloca cada una
en un portaobjetos y se observa al microscopio.
METODO DE GOTA GRUESA
Esta tcnica se recomienda cuando la fase aguda de esta parasitosis se haga
presente
Procedimiento:
Se coloca una gota de la sangre problema en el centro del portaobjetos a
utilizar y esta se tiene que extender en el portaobjetos con movimientos
rotatorios con otro portaobjetos hasta que la gota de sangre se extienda en
un dimetro de 1.25 cm, se deja secar en posicin horizontal, esto puede
durar varios minutos, as mismo se tiene que proteger de los insectos y si se
desea se puede hacer tanto tincin como fijacin de la misma y as nuestra
muestra se encuentra lista para ser observada al microscopio.
52

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

TCNICA DE KNOTT
En un tubo de centrfuga se mezcla 1 ml de sangre con 10 ml de formalina al
2%, este se centrifuga durante 3 a 5 minutos a 1500 rpm, posteriormente se
decanta el sobrenadante y se mezcla el sedimento en partes iguales con azul
de metileno de 1:1000 y se examina el sedimento teido en el microscopio
compuesto con el objetivo de 40X y/o 100X.

Figura 10-1. Microfilarias en tincin y


vistas a 100X.

53

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

53

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Figura 10-2. Microfilaria en tincin y


vistas a 100X.

RESULTADOS
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________

DISCUSION
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________

REFERENCIAS
-TECNICAS DE DIAGNSTICO EN PARASITOLOGA VETERINARIA, 1999
UAT
MVZ.CONSUELO ALMAZN GARCA
-Manual de parasitologa.
Juan Jos Zarate Ramos
2007

54

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

CAPITULO 11
DIAGNOSTICO DE BABESIA Y ANAPLASMA.
INTRODUCCION

Que es la Babesia?
Comnmente conocido como piroplasma, la Babesia canis y Babesia
gibsoni son parsitos (protozoarios) intracelulares eritrocitarios de los
perros y se trasmiten por picaduras de garrapatas ixdidas.
Miembros de Phylum Apicomplexa Transmitidos por Artrpodos
El perro es hospedador de al menos dos especies de piroplasmas del
genero babesia, es principalmente un parasito de los artrpodos, en
los que se desarrollan y fusionan los gametos. La reproduccin sexual
tiene lugar en el perro.
Una vez en la corriente sangunea, los trifozoitos de babesia canis se
introducen en los eritrocitos y experimentan repetidas divisiones
binarias de modo que un eritrocito puede contener una, dos o
mltiples parejas de parsitos hasta que la membrana celular se
distiende al mximo. La rotura de los eritrocitos parasitados y la
liberacin de su carga de trofozoitos permite la invasin de nuevos
eritrocitos y da lugar a una parasitema transitoria. Des pues de tres o
cuatro das los parsitos desaparecen de la sangre y reaparecen a los
10 das en mucha mayor cantidad para volver a repetir el proceso.
En la naturaleza las garrapatas ixdidas actan como vectores y
reservorios de todas las piroplasmosis incluyendo las de los perros.

55

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

55

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Que es Anaplasma?
La Anaplasmosis es una enfermedad infecto-contagiosa de los
bovinos caracterizada por producir una anemia progresiva, asociada
a la presencia de cuerpos de inclusin intracelular.
La Anaplasmosis bovina es causada por la rickettsia ( Anaplasma
marginale, parsito obligado de los eritrocitos. Es la enfermedad
hemoparasitaria de mayor distribucin mundial, afecta a bovinos y
a rumiantes silvestres, ovinos y caprinos rara vez son afectados. La
Anaplasmosis se transmite biolgicamente por garrapatas
infectadas de varios gneros incluyendo Dermacentor,
Amblyomma, Boophilus y mecnicamente, es transmitida por
fmites contaminados (transmisin iatrognica).
Los bovinos afectados desarrollan anemia hemoltica, prdida de
peso, aborto, baja de produccin de leche y mortalidad aproximada
del 36%.

OBJETIVO
Que el alumno desarrolle la capacidad de poder identificar y tratar este
parasito y/o bacteria, ya que en esta prctica podrn hacer un diagnostico
sanguneo por medio de un frotis y as poder reconocer este parasito y
bacteria.

MATERIAL

Cubre objeto/porta objetos


Aceite de inmersin
Microscopio
Tinciones Wright o Giemsa
Sangre con EDTA de Canino y Bovino que tengan garrapatas.

56

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

PROCEDIMIENTOS
1. Utilizar un porta objetos limpios y secos
2. Colocar una gota pequea de sangre en un extremo del porta objetos.
3. Contactar este con otro porta objetos, en un ngulo de 45 y hacerlo
correr hacia el otro extremo.
4. Obtener un frotis fino y homogneo y secar inmediatamente al aire.
5. Teir con Giemsa o Wright.

Figura 10-1. Diagrama donde se muestra


paso a paso la realizacin frotis
sanguneo.

57

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

57

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Figura 10-2. Como debe quedar al


finalizar el frotis.

Procedimiento de la tincin:
1. Sumergir el frotis en la sol. Fijadora 5 veces durante 1 segundo cada
vez, dejar escurrir el exceso.
2. Sumergir el frotis en el Hemocolorante UNO, 5 veces durante 1
segundo cada vez, dejar escurrir el exceso.
3. Sumergir el frotis en el Hemocolorante DOS, 5 veces durante un
segundo cada vez, dejar escurrir el exceso.
4. Lavar con agua destilada y dejar secar.

58

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Figura 10-3. Resultados de la tincin.

Figura 10-4. Babesia bigemina.

59

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

59

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Figura 10-5. Anaplasma marginale.

Figura 10-6. Ciclo Vital de Babesia.

60

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

RESULTADOS
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________

DISCUSION
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________

REFERENCIAS
Manual de parasitologa.
Juan Jos Zarate Ramos
2007
Colaboracin del MVZ. MC. MARCO ANTONIO CANTU MARTINEZ
Parasitologa en clnica canina, 1994
J.R. GEORGI
M.E. GEORGI

61

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

61

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

CAPITULO 12
DIAGNOSTICO DE TRIPANOZOMA CRUZI.
INTRODUCCION

El Trypanosoma cruzi es un protozoo en cuyo ciclo biolgico interviene un


insecto vector (triatmido) llamado Triatoma Dimidiata, conocido aqu en la
regin como Chinche besucona, los mamferos son reservorios de la
enfermedad, como el hombre y los animales domsticos (perro y/o gato), o
silvestres (roedores y carnvoros).

OBJETIVO
Que el alumno aprenda a identificar y diagnosticar correctamente esta
enfermedad zoontica, desde aprender a reconocer al insecto vector hasta
Identificar y reconocer este protozoario sanguneo; mediante observacin
directa y el frotis sanguneo, asimismo conocer el grado zoontico que tiene.

MATERIAL
Sangre positiva a Trypanosoma Cruzi
Cubre / Porta objetos
EDTA
Aceite Inmersin
Lentes de proteccin
Cubre boca
Guantes
Bata

62

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

MODO DE TRANSMISION
La va ms importante es a travs de las heces del insecto, que al picar la piel
del hombre, elimina el tripomastigote metacclico, penetra por la zona de la
picadura o a travs de las mucosas. Otras formas son: por transfusin
sangunea (el tripomastigote se mantiene viable por dos meses en muestras
de sangre refrigerada), trasplante de organos, manipulacin de sangre y de
animales infectados, y por compartir jeringas. Tambin por pasaje
transplacentario (chagas congnito).

UBICACION
Es en el torrente sanguneo como tripomastigotes, y en el interior de las
clulas como amastigotes. En la fase aguda se diseminan por todos los
rganos teniendo preferencia por el msculo estriado, sistema nervioso
central y ganglios del sistema nervioso autnomo.

Figura 12-1y 2. Ratn con rganos


hipertrofiados debido al Trypanosoma cruzi.
(FOTO TOMADA POR M.V.Z. RAYMUNDO ZUMAYA)

63
Presenta tres formas distintas: amastigota, epimastigota y tripomastigota.

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

63

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Amastigota: esfrico u ovalado, es la forma reproductiva en el interior


de las clulas mamferas.
Epimastigota: alargado y con el cinetoplasto localizado anteriormente
al ncleo, es la forma reproductiva en el tracto digestivo de los
invertebrados y en medios de cultivo.
Tripomastigota: tambin alargado, pero con el cinetoplasto localizado
posteriormente al ncleo. Se encuentra en la sangre de los mamferos
y es la forma infectante de ellos. Esta forma no se divide.

Figura 12-3. Diferentes estadios del


Trypanosoma cruzi.

64

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

PROCEDIMIENTOS
OPCIONES PARA EXAMEN MICROSCPICO DE LA SANGRE:
Se puede examinar la sangre por: Tincin gruesa Extendido fino.
El examen ms sencillo es el de examinar una gota de sangre en fresco del
paciente sospechoso entre porta y cubre o coloreada para reconocer
tripanosomas mviles.

PRECAUCIN
Todo personal de laboratorio que trabaja con muestras procedentes de
pacientes sospechosos de tener tripanosomiasis americana o muestras de
cultivos de T. cruzi debe tomar medidas de seguridad y buena prctica de
laboratorio.
Los tripomastigotes son altamente infectantes y algunas cepas del parsito
son ms virulentas que otras.

Figura 12-4. Ciclo vital del Trypanosoma


cruzi.

65

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

65

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Figura 12-5. Triatoma Dimidiata


(FOTO TOMADA POR M.V.Z. RAYMUNDO ZUMAYA).

RESULTADOS
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
DISCUSION
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
REFERENCIAS
-Manual de parasitologa.
Juan Jos Zarate Ramos
2007
-Parasitologa en clnica canina, 1994
J.R. GEORGI
M.E. GEORGI

66

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

CAPITULO 13
DIAGNOSTICO DE EHRLICHIA CANINA.
INTRODUCCION

La ehrlichiosis canina es una enfermedad rickettsial causada por Ehrlichia


spp. y transmitida por garrapatas. Todas las Ehrlichia spp. son
microorganismos intracelulares que infectan leucocitos salvo Ehrlichia platys
que se encuentra en plaquetas. Son varias las especies de Ehrlichia capaces
de infectar al perro, aunque desde un punto de vista clnico es Ehrlichia canis
la que ms importancia tiene. E. canis infecta el citoplasma de los linfocitos y
los monocitos sanguneos de los perros afectados.
Dentro de su ciclo biolgico se pueden distinguir diferentes formas: cuerpos
elementales, que a su vez se dividen producindose las tpicas mrulas
(formadas incluso por ms de 40 cuerpos elementales).
En general, Ehrlichia spp. se transmite por la picadura de garrapatas. En
concreto, en el caso de E.canis existe un nico vector conocido: Rhipicephalus
sanguineus. Esta garrapata, al alimentarse de un perro con ehrlichiosis,
puede ingerir glbulos blancos con Ehrlichia en su citoplasma. Este hecho es
mucho ms frecuente si la garrapata se fija a perros en fase aguda de la
enfermedad, ya que es en esta fase cuando se encuentran un mayor nmero
de leucocitos infectados en sangre.
El potencial de la garrapata como vector y reservorio de esta enfermedad es
muy alto. De hecho, una vez que la garrapata ha ingerido sangre, sta puede
transmitir la infeccin hasta al menos 155 das despus.
Las secreciones de las glndulas salivales de la garrapata constituyen la
fuente de transmisin para el perro. Estas secreciones y la inflamacin
causada por la picadura parecen favorecer la llegada de leucocitos a ese
lugar, facilitndose la entrada de Ehrlichia spp. en los mismos.
67

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

67

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

OBJETIVO
El alumno aprender a detectar y diagnosticar la ehrlichiosis canina, por el
mtodo de frotis sanguneo y por el serolgico que es a base de una prueba o
kit donde el mtodo es detectar anticuerpos para la deteccin de E. canis.

MATERIAL

Sangre canina o felina en tubo con EDTA (tapa morada)


Cubre objetos / Porta objetos
Tinciones
Prueba diagnostica
Sol. Diluyente (Buffer)
Pipetas Pasteur

PROCEDIMIENTOS
Muestra de Sangre
1. Primero hacemos un frotis con la sangre problema.
2. Lo teimos.
3. Y buscamos en el microscopio.
El diagnstico se puede realizar observando mrulas o cuerpos de
inclusin de E. canis en el citoplasma de linfocitos y monocitos en un frotis
sanguneo teido con las tcnicas habituales. Desgraciadamente, E.canis
aparece transitoriamente en la sangre y, especialmente, durante la fase
aguda por lo que son muchos los perros con ehrlichiosis en los que no
encontramos estos cuerpos de inclusin. Tambin se puede intentar
establecer un diagnstico etolgico a partir de muestras de mdula sea,
ganglio, etc.

68

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Prueba serolgica
EL kit de prueba Ehrlichia canis est diseado para detectar anticuerpos
Ehrlichia canis en sangre, suero o plasma. Los resultados de la prueba
aparecen en lneas de control (C) y prueba (T) en los que se usan
principios de inmunocromatografa.
1. Van a depositar una gota de sangre con la pipeta pasteur en la fosa,
van a esperar que se absorba.
2. Y posteriormente aaden una gota de Buffer, esto es hasta que la
primera gota se haya absorbido completamente.
3. Posteriormente va a esperar 10 minutos para el resultado.
Interpretacin de los resultados:
Deber aparecer una banda prpura sobre la lnea control sin importar el
resultado de la prueba. La presencia de otra lnea como lnea de prueba
determina el resultado.
Lnea de control (C): La lnea debe aparecer siempre sin importar la
presencia de anticuerpos Ehrlichia canis. Si no aparece esta lnea, debe
considerar la prueba como no vlida. Y deber ser repetida.
Lnea de prueba (T): La presencia de anticuerpos Ehrlichia canis determina
la presentacin de la lnea de prueba

Figura 13-1. Muestra de la prueba


serolgica.

69

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

69

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Figura 13-2. Prueba serolgica invlida.

Figura 13-3. Inclusin compatible con


Ehrlichia spp. en el interior de una clula
mononuclear en extensin sangunea.

70

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Figura 13-4. Diagrama de la iinclusin de Ehrlichia spp. en el interior de una clula


mononuclear por medio de fagocitosis.

RESULTADOS
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________

71

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

71

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

DISCUSION
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________

REFERENCIAS
-Manual de parasitologa.
Juan Jos Zarate Ramos
2007
-Parasitologa en clnica canina, 1994
J.R. GEORGI
M.E. GEORGI

72

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

CAPITULO 14
EXAMEN DE ORINA.
INTRODUCCION

La recoleccin de orina no es siempre tarea sencilla, en determinados casos


basta para realizar esta operacin con colocar un recipiente bajo la abertura
prepucial. En las hembras de los animales domsticos lo ms prctico es
extraer la orina mediante un cateterismo cuidadoso. En caballos, bueyes, y
toros, la orina puede reunirse en un recipiente sujeto a la pared abdominal y
frente al orificio prepucial. En los pequeos animales cabe utilizar una jaula
con suelo de rejilla, bajo el cual se coloca una bandeja metlica adecuada
para recoger la secrecin urinaria. Esta debe depositarse en un frasco de
vidrio bien cerrado para su envi al laboratorio.

MATERIAL:
*Frasco vaco para centrfuga
*Cinta adhesiva
*Lupa
*Pipetas Pasteur
*Sonda de bajo calibre
*Guantes

*Catter vaginal

*Centrfuga

*Bata

PROCEDIMIENTO:
La orina primeramente se examinar ante todo a simple vista o con ayuda de
una lupa para ver si contiene algn verme evacuado espontneamente. Para
realizar el exmen, microscpico se diluye la orina con agua destilada, se
centrifuga durante 3 minutos y el sedimento se lleva con ayuda de una pipeta
al portaobjetos para su examinacin. Tambin se puede dejar que la orina
sedimente en una copa de fondo agudo, para proceder seguidamente al
examen del sedimento de la forma anteriormente descrita.
73
M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

73

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

En la vejiga de los carnvoros y muchas veces en las vas urinarias se observa


la presencia del nematodo Capillaria plica, sobre todo en zorros adultos. Se
reconoce fcilmente en la orina por tener forma alimonada, 63-65 x 26-29
m de tamao, huevos amarillo-verdosos, de superficie estriada y con sendos
abultamientos en ambos polos de la cpsula. As mismo, en los riones y
pelvis renal de los carnvoros se registra la presencia, si muy bien rara, del
nematodo Dioctophima renale, de color rojo sangre y de gran tamao. Sus
huevos tienen una dimensiones de 64-68 x 40-44 m, su superficie muestra
mucho hoyuelos y en el momento de su puesta ya contienen una larva en
primera fase del desarrollo; los huevos pueden evidenciarse en la orina.
En varios pases de Amrica se observa en el tejido graso perirrenal de los
cerdos el nematodo Stephanurus dentatus, sus huevos aparecen en la orina y
tiene forma ovalada, con envoltura fina y unas dimensiones de 90-120 x 5565 m. En el epitelio de los tbulos renales del ganso se halla el coccidio
Eimeria truncata. Los ooquistes son verdosos, de 18-24 x 13-18 m y se
acumulan en los canales urinarios para ser eliminados con la orina; en el caso
de mezclarse la orina con las heces, los ooquistes pueden describirse en
estas.

Figura 14-1. Esquema del proceso


despus de la centrifugacin.

74

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Figura 14-2. Huevo de Capillaria plica en


orina. University of Pennsylvania School
of Veterinary Medicine
Dr. Thomas Nolan
.

Figura 14-3. Huevo de Stephanurus


dentatus. Diagnostico de las helmintiasis
por medio de examn coprolgico. D.
Thienpont, F. Rochette, O.F.J. Vanparijs

75

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

75

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

RESULTADOS
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________

DISCUSION
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________
_______________________________________________________________

REFERENCIAS
L. Nemeseri, F. Hollo. Diagnstico parasitolgico veterinario. Editorial Acribia

76

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

CAPITULO 15

NECROPSIA PARASITOLOGICA.
INTRODUCCION

Por medio de la necropsia parasitolgica, se puede lograr el diagnostico


definitivo del genero y especie a la que pertenece el parasito adulto, el
examen parasitolgico del cadver cabe esperar los mejores resultados
cuando este es reciente; el reconocimiento preciso de las fases adultas de los
parsitos, es importante porque permite tomar medidas preventivas, as
como implementar programas de control adecuados, adems de
proporcionar material para la realizacin de estudios de ndole inmunolgico,
parasitolgico y epidemiolgico.
Una primera consideracin orientada en el reconocimiento de la especie
involucrada, es el tomar en cuenta las variables dependientes del ambiente y
del hospedero. Dentro de las primeras destacan la zona geogrfica, el clima,
la poca del ao y el sistema de manejo. Otras caractersticas de valor
orientador son las especies animales afectadas y el rgano de localizacin.

OBJETIVO
Adquirir el conocimiento y las habilidades necesarias para el reconocimiento
de los parsitos y su localizacin dentro de cada especie animal.

MATERIAL
Animal domestico

Microscopio de luz

Microscopio estereoscpico

Recipientes de 1, 2 o 3 Solucin de formol al Solucin salina fisiolgica


litros.
10%
Placas de petri

Bata y guantes de ltex

Cmara fotogrfica digital

Estuche de diseccin

Mesa de trabajo

Gafas de seguridad
laboratorio
77

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

77

de

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Marcador indeleble

Jabn lquido

Hilo camo

Cuchillo

Colador

Cubreobjetos

Centrifuga

PROCEDIMIENTO
Los animales se dejaran en jaulas 1-2 das antes del sacrificio
Reunidos los datos referentes a raza, sexo, estado de carnes, edad, peso,
etc., se procede a la recolecta de los ectoparsitos
Los animales se sacrifican mediante mtodos adecuados
La necropsia se realizara incidiendo por lnea media e inmediatamente se
ligaran las uniones: omaso-abomasal, abomaso duodenal e leo-cecal, para
evitar la migracin de nematodos de un rgano a otro.
Despus se extraer el abomaso, intestino delgado e intestino grueso,
trabajndose de la siguiente manera, cada rgano ser incidido
longitudinalmente y lavado perfectamente con agua corriente,
depositndose el contenido en recipientes, los cuales sern aforados a 1, 2,
3 litros.
Dependiendo de su volumen, de este total se obtendr una alcuota de 100,
200 a 300 ml respectivamente, a la que se le agregara formol al 10% como
conservador para su posterior observacin.
Aparato digestivo
Con una tijera se escinde longitudinalmente el esfago, estomago, rumen,
abomaso, intestino delgado y grueso y recto. A continuacin se examina cada
rgano por separado.
Esfago
Se escinde longitudinalmente y se buscan helmintos en la mucosa, la
submucosa y la serosa con cuidado para recoger los vermes que pudieran
encontrarse; se cortaran los ndulos presentes en el esfago. La
identificacin de los parsitos que no son perceptibles a simple vista se lleva
a efecto examinado cortes de la mucosa. El corte se traslada con la punta de
un cuchillo hasta un portaobjetos, se mezcla con agua, se extiende y se
coloca un cubreobjetos; por ultimo, se examina al microscopio, con pocos
aumentos al principio y luego con ms. En los casos con resultado positivo, se
aparta el parasito con una aguja de diseccin o con un pincel; si el corte es de
78

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

gran tamao, se mezcla con agua y despus de dejar reposar el total, se


renen los parsitos del sedimento con ayuda del estereomicroscopio.

Rumen
El rumen se incide y se extrae el bolo ruminal, buscando los helmintos
adultos en la pared del rumen y las glndulas ruminales; al bolo ruminal se le
realizan lavados y pasajes por cedazos para buscar helmintos, los cuales se
colectan en solucin salina fisiolgica.
Estmago
El contenido del estomago se vierte en un recipiente ancho de vidrio,
agregando 10-20 volmenes de agua y mezclando cuidadosamente, tras lo
cual se deja reposar 5 minutos. Se decantan con cuidado 2/3 partes de la
emulsin y el tercio restante se vuelve a disolver en agua, se deja en reposo 5
minutos y acto seguido se vuelven a verter los 2/3 superiores. Esta operacin
se repetir hasta que las partculas vegetales de las haces se hayan eliminado
en su mayor parte. Las vermes presentes en el estomago pueden
reconocerse sin dificultad en el sedimento sobre el fondo o con ayuda del
microscopio. La mucosa gstrica se examina por medio de cortes. En el caso
de hacer la necropsia en aves, se investigaran detenidamente los estmagos
glandular y muscular, se separara la mucosa crnea de la molleja.

15.1 Diseccin de estomago


glandular y muscular en aves.
(FOTO TOMADA POR M.V.Z. RAYMUNDO ZUMAYA)

79

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

79

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Abomaso
El abomaso se coloca en un recipiente de plstico de
aproximadamente de 5 litros de capacidad y se escinde longitudinalmente
por su cobertura mayor, colectando su contenido en un recipiente;
posteriormente se realizan lavados de la mucosa con agua simple, de
preferencia con pizeta y se procede a la coleccin de los especmenes
adheridos a ella, los cuales se depositan en el recipiente; hecho lo anterior, el
contenido del recipiente se afora a 1, 2 o 3 litros, dependiendo del volumen
colectado y se agita uniformemente en forma de cruz para homogeneizar
perfectamente el contenido del cual se obtiene una alcuota del 10%,
pudiendo ser de 100, 200 o 300 ml dependiendo del volumen total aforado.
A esta se le adicionan 10 ml de formol al 10%. En el caso de querer obtener
especmenes vivos, el resto del contenido aforado se pasa por un cedazo de
500 m de dimetro, los cuales se colocan en solucin salina fisiolgica.
Intestino delgado
El intestino delgado se coloca en un recipiente de plstico y se escinde
longitudinalmente, cuidado de que el contenido se colecte en el recipiente
posteriormente se lava la mucosa del intestino. El contenido colectado se
afora a 1, 2, 3 o 4 litros. Se agita vigorosamente para la homogeneizarlo
perfectamente, de este se obtiene una alcuota del 10% del total pudiendo
ser de 100, 200, 300 o 400 ml, a la alcuota se le adicionan 10 ml de formol a
10% para su conservacin.

Figura 15.2 Corte longitudinal de intestino.


(FOTO TOMADA POR M.V.Z. RAYMUNDO ZUMAYA)

80

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Intestino grueso
Expuesto el intestino grueso se procede a hacer una incisin
longitudinal desde el ciego hasta el recto, cuidando que todo el contenido se
vierta sobre un recipiente, debido a la consistencia del contenido de las
heces, es preciso agregar agua, hasta hacerlo lo mas fluido posible. De
acuerdo con las caractersticas morfolgicas de los helmintos localizados con
este rgano se procede de dos maneras: la primera, es mediante la
obtencin de una alcuota del 10%, tal y como fue sealado para el abomaso
e intestino delgado. La segunda requiere la observacin de la totalidad del
contenido, utilizando cedazos, ya que los helmintos se pueden observar
macroscpicamente. Cuando se hace el homogeneizado es necesario
desbaratar todas las materias solidas para evitar que algunos helmintos
pasen desapercibidos. Es recomendable adicionar formol al 10%, tanto a la
alcuota como a la coleccin de helmintos para su conservacin.
Hgado
Se realiza una minuciosa diseccin del hgado, el contenido de la
vescula biliar se vierte en una placa de petri o en un plato de cristal y la
vescula se examina en capa fina. Los capilares biliares se cortan con tijera en
direccin a la periferia y luego se fragmenta el hgado en pequeos trozos;
los ndulos parasitados hallados se colocan y presionan entre dos portas y se
examinan al microscopio. Luego se introducen los fragmentos de hgado del
tamao de terrones de azcar en un recipiente lleno de solucin salina
fisiolgica, para a continuacin proceder al examen del sedimento.

Figura 15.3 Hgado cortado en


fragmentos.
(FOTO TOMADA POR M.V.Z. RAYMUNDO ZUMAYA)

81

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

81

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Aparato respiratorio
Expuesto el aparato respiratorio, se hace una observacin de la laringe
para bsqueda de helmintos. Posteriormente se escinde longitudinalmente la
trquea y bronquios, recogindose los vermes apreciados a simple vista; se
examinara al microscopio la secrecin traqueal. Para reunir los vermes
localizados en las vas respiratorias mas finas se cortan los pulmones en
fragmentos pequeos, se depositan en un recipiente con solucin salina
fisiolgica y el total se deja en estufa 1-2 horas, en cuyo tiempo los vermes
ascienden a la superficie de la porcin liquida. Los ndulos pulmonares
tambin se examinaran en fresco al microscopio; se cortaran con un cuchillo
bien afilado o con tijera, comprimiendo luego con los dedos que como
consecuencia de esta accin se examina con estereomicroscopio o se prepara
una extensin con el liquido o secrecin; o bien se hace un corte del ndulo,
se humedece con unas gotas de agua y se examina con cubreobjetos.

Figura 15.4 Vista del pulmn


derecho y
trquea.
(FOTO TOMADA POR M.V.Z. RAYMUNDO ZUMAYA)

Aparato circulatorio
El contenido del corazn y de los grandes vasos sanguneos se
estudiara por el mtodo de la sedimentacin; la sangre se examinara en
busca principalmente de microfilarias y el musculo cardiaco se revisara
despus de trocearlo finalmente.
Figura 15.5 Vista de Dirofilaria immitis
en corazn de perro.
(FOTO TOMADA POR M.V.Z. RAYMUNDO ZUMAYA)

82

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Aparato genito-urinario
El contenido de la vejiga se vierte en un vaso o en una placa de petri
para su examen. Se seccionaran los riones, as como la pelvis renal, y se
estudiaran con minuciosidad. Se har lo mismo con las secreciones de los
rganos sexuales y cortes de la mucosa. Se comprobara si el oviducto de las
aves contiene Prosthogonimus.

Figura 15.6 Corte longitudinal de rin


(FOTO TOMADA POR M.V.Z. RAYMUNDO ZUMAYA)

En los msculos se proceder ante todo a la investigacin


macroscpica de las larvas de cestodos, para lo cual se cortan las
localizaciones preferidas por los parsitos y se revisa la superficie de seccin;
asimismo, se sometern a examen triquinoscopico las muestras tomadas de
los pilares del diafragma.
Tambin se proceder al examen de las tablas del cuello,
extremidades, lquido sinovial de articulaciones y vainas tendinosas, ojos,
conjuntiva, fosas nasales y conductos que terminan en las mismas. Tras
cuidadosa revisin de las meninges, se fragmenta el cerebro en pequeos
trozos para su examen.

Figura 15.7 Corte transversal del crneo de


cabra; vista panormica del cerebro.
(FOTO TOMADA POR M.V.Z. RAYMUNDO ZUMAYA)

83

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

83

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

15.8 Localizacin de los nematodos comunes en diferentes especies.


Localizacin
Abomaso

Intestino
delgado

Intestino
grueso

Hgado

Sistema

Ovicaprinos
Haemonchus
contortus
Ostertagia
trifurcata
Ostertagia
circuncincta
Teladorsagia
davtiani
Trichostrongylus
axei
Cooperia
oncophora
Cooperia curticei
Nematodirus
filicollis
Nematodirus
battus
Nematodirus
spathinger
Trichostrongylus
colubriformis
Trichostrongylus
vitrinus
Bunostomun
Trigonocephalum
Strongyloides
papillosus
Moniezia spp.
Oesophagostomum
Venulosum
Trichuris ovis
Chabertia ovina
Dicrocoelium
lanceatum
Fasciola heptica
Dictyocaulus filaria

Bovinos
Haemonchus
contortus
Ostertagia
ostertagi
Ostertagia lyrata
Ostertagia
crimensis
Trichostrongylus
axei

Caninos y felinos

Cooperia
oncophora
Cooperia
mcmasteri
Cooperia punctata
Nematodirus
helvetianus
Trichostrongylus
Longispicularis
Bunostomum
phlebotomum
Strongyloides
papillosus
Toxocara vitulorum
Moniezia spp.

Capillaria putorii
Ancylostoma
caninum
Uncinaria
stenocephala
Toxascaris
leonina
Toxocara cati
Toxocara canis
Apophallus
donicus
Mesostephanus
spp.
Dipylidium
caninum
Taenia pisiformis
Strongyloides
stercoralis
Oesophagostomum Trichuris vulpis
radiatum
Trichuris serrata

Dicrocoelium
lanceatum
Fasciola heptica
Dictyocaulus

Capillaria
84

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

respiratorio

Protostrongylus
rufescens
Muellerius
capillaria

Sistema
circulatorio

Sistema
urinario

viviparus

aerophila
Aelurostrongylus
abstrusus
Angiostrongylus
vasorum
Dirofilaria
immitis
Dioctophyma
renale
Capillaria plica

RECOMENDACIONES
Antes de iniciar la colecta de los vermes es importante tener preparados
recipientes de plstico o de vidrio.
Todos los recipientes debern estar etiquetados con bolgrafos indelebles,
conteniendo la especie animal, raza, identificacin, rgano o
compartimiento, cantidad del contenido y conservador empleado.

REFERENCIAS
L. Nemeseri, F. Hollo. Diagnstico parasitolgico veterinario. Editorial Acribia;
Pg. 75-78
MVZ. Consuelo Almazn Garca. Tcnicas de diagnstico en parasitologa
veterinaria. Primera edicin. Universidad Autonoma de Tamaulipas (1999);
Pg. 40-43

85

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

85

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE NUEVO LEON


FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
REPORTE DE LA LTIMA PRCTICA

Datos generales
Titular:
_______________________________________________Tutor:______________
___
Practica:
_____________________________________________
Fecha:
_______________
Alumno: _____________________________________________
Matricula:
_____________
Material
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________________
Identificacin del Animal
Especie:
_____________Raza:_______________Sexo:_______________Edad:_________
_
Estado fsico del animal
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________________
Apertura del Cadver
Sistema respiratorio
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________________
Sistema cardiaco
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________________

86

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Sistema Digestivo:
Lengua, esfago y estomago
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________________
Intestino Delgado
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________________________
Intestino grueso
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________________________
Hgado
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________________
Bazo
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________
__________________________________________________________________
________
Sistema Urinario y Reproductor
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________________
__________________________________________________________________
________
Sistema Nervioso
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________________
87

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

87

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Conclusiones
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________________________________

REGION
_________________________________________________________________
__________________________________________________________________
_______________?
R=_______________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
_________________________________________

Firma del tutor


_____________

88

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Anexo I
Valores normales del microhematocrito para cada especie.

89

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

89

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Lector de capilares para Micro-Hematocrito

90

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Anexo II
Volmenes aproximados de sangre circulatoria en las diferentes especies
de animales de laboratorio.

91

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

91

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Anexo III
Esquema de cmo entregar los reportes, se entregara un reporte por cada
practica, sea la practica tomada en el laboratorio o fuera de el, sin
excepcin.

1. PORTADA (NOMBRE DE INTEGRANTES)


2. MATERIAL
3. METODOLOGA
4. RESUMEN
5. IMGENES
6. RESULTADOS
7. CONCLUCIONES
8. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS (2 LIBROS Y 1 WEB)

92

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Anexo IV
REGIONES
Despus de cada prctica tendrn 5 das hbiles para dar las regiones con
sus tutores, al pasar los 5 das y al haber una prctica nueva, no se
aceptaran regiones pasadas, as como tambin les daremos el formato a
firmar por los tutores despus de cada regin aceptada. Este formato le
sacaran copia, cortaran y entregaran a sus tutores.

93

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

93

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Anexo V
Reglamento General del Departamento de Parasitologa
Veterinaria
ARTCULO 1. El presente Reglamento es aplicable en todos aquellos de la
Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia en donde se realice trabajo
experimental, sea de docencia o de investigacin. Estos sitios, para efectos del
presente Reglamento, sern denominados laboratorios.
Su observancia es obligatoria para el personal acadmico alumnos y trabajadores
administrativos y no excluye otra reglamentacin que resulte aplicable.
ARTCULO 2. Es necesario que el personal que trabaja en cada laboratorio
conozca el sistema de alertamiento, las zonas de seguridad, las rutas de
evacuacin, el equipo para combatir siniestros y las medidas de seguridad
establecidas en cada laboratorio.
ARTCULO 3. Los laboratorios debern estar acondicionados, como mnimo con
lo siguiente:
a) Un control maestro para energa elctrica
b) Un botiqun de primeros auxilios
c) Extintores
d) Un sistema de ventilacin adecuado
e) Agua corriente
f) Drenaje
g) Un control maestro para suministro de gas h) Sealamientos de proteccin Civil
segn sea el caso.
ARTCULO 4. Todas las actividades que se realicen en los laboratorios debern
estar supervisadas por un responsable. La Direccin de la Facultad nombrar a
dicho responsable en sus reas correspondientes.
ARTCULO 5. Al entrar al laboratorio cada estudiante deber colocarse en el lugar
asignado por el responsable, permaneciendo ah durante el desarrollo de la
prctica en orden y en silencio.

94

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

ARTCULO 6. Al terminar cada prctica se debe limpiar cuidadosamente su lugar


de trabajo y el material utilizado deber lavarse y colocarse en su lugar despus
de su uso.
ARTCULO 7. Cada estudiante se responsabilizara de su rea de trabajo y de su
material.
ARTCULO 8. Todo el material, especialmente equipos de investigacin , como
microscopios, deben manejarse con cuidado evitando los golpes o forzar sus
mecanismos.
ARTCULO 9. Al terminar la prctica debern desconectar microscopios y
cubrirlos con sus respectivas fundas.
ARTCULO 10. Si manejan mecheros de gas se debe verificar cuidadosamente el
cierre de la llave de paso.
ARTCULO 11. Usar siempre guantes dentro del laboratorio.
ARTCULO 12. Usar siempre bata dentro del laboratorio.
ARTCULO 13. No introducir comida ni bebidas.
ARTCULO 14. No fumar
ARTCULO 15. Depositar el material biolgico, objetos punzocortantes y la basura
en general en su lugar asignado.
ARTCULO 16. Todas las substancias, equipos, materiales, etc., debern ser
manejados con el mximo cuidado, atendiendo a las indicaciones de los manuales
de uso o de los manuales de seguridad, segn el caso.
ARTCULO 17. Las puertas de acceso y salidas de emergencias debern de estar
siempre libres de obstculos, accesibles y en posibilidad de ser utilizadas ante
cualquier eventualidad. El responsable del rea deber verificar esto, al menos
una vez cada semana.
ARTCULO 18. Las regaderas debern contar con el drenaje correspondiente,
funcionar correctamente, estar lo ms alejadas que sea posible de instalaciones o
controles elctricos y libres de todo obstculo que impida su correcto uso. El
responsable del rea deber verificar esto, por lo menos una vez cada semana.

95

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

95

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

ARTCULO 19. En caso de emergencias, con incendios, derrames o personas


accidentadas, dirigirse a la zona de seguridad establecida y/o activar el servicio de
Emergencias Mdicas. Al activarlo:

acceso.

cia. Avisar de
inmediato al encargado de la Seguridad del rea.
ARTCULO 20. Los lugares en que se almacenen reactivos, disolventes, equipos,
materiales, medios de cultivo, y todo aquello relacionado o necesario para que el
trabajo en los laboratorios se lleve a cabo, estarn sujetos a este Reglamento en
su totalidad.
ARTCULO 21. Queda prohibido desechar sustancias al drenaje o por cualquier
otro medio sin autorizacin del responsable del rea correspondiente. Los
manuales de prcticas correspondientes debern incluir la forma correcta de
desechar los residuos.
ARTCULO 22. En cada laboratorio de la Facultad deber existir, de manera clara,
visible y legible, la informacin acerca de los telfonos de emergencia a los cuales
llamar en caso de requerirlo.
ARTCULO 23. Todas aquellas cuestiones que no estn especficamente
sealadas en el presente Reglamento, debern ser resueltas por la Direccin de la
Facultad con la opinin de la Coordinacin de Seguridad, Prevencin de Riesgos y
Proteccin Civil.
ARTCULO 24. Las personas a quienes se sorprenda haciendo mal uso de
equipos, materiales, instalaciones, etc. propias de los laboratorios, de todo aquello
mencionado en el artculo 2 del presente Reglamento, o de las sealizaciones
instaladas para proteccin civil, sern sancionadas conforme a la Legislacin
Universitaria, segn la gravedad de la falta cometida.
ARTCULO 25. En el caso de los alumnos, las sanciones aplicables sern las que
decida el H. Consejo Tcnico, conforme a las disposiciones de la Legislacin
Universitaria.
ARTCULO 26. Tratndose de personal acadmico y administrativo, se levantarn
las actas correspondientes y se dictarn las sanciones conforme a las
disposiciones de la Ley Federal del Trabajo.
96

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

Anexo VI
Lista de Helmintos patgenos.

97

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

97

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

98

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

99

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

99

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

100

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

101

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

101

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

102

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

103

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

103

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

104

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

Manual de Prcticas del Departamento de Parasitologa Veterinaria


Agosto de 2013

105

M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya

105

Das könnte Ihnen auch gefallen