Universidad Autnoma de Zacatecas, Campus UAZ Siglo XXI,

Carretera Zacatecas - Guadalajara Km. 6 Ejido la escondida, CP

98160, Zacatecas, Zacatecas, Mxico. Integrantes: Jorge Alejandro
Saldvar Nava, Aurelio Prez Favila, Pedro Antonio Mrquez Salas,
Unidad Acadmica de Ciencias Qumicas, Programa de Qumico Farmacutico
Bilogo, 8 A

Prcticas No.1,2,3,4
Obtencin de la Muestra Sangunea y Examen Macroscpico de Sangre
Velocidad de Sedimentacin Globular
Determinacin Cuantitativa de Hemoglobina

OBJETIVO
Obtener de manera correcta la toma de muestra para su posterior examn
macroscpico. As como para la realizacin de pruebas como la VSG (para poder
saber si existe un proceso infeccioso en el paciente), de igual manera realizar la
determinacin de hematocrito (que nos indica que el porcentaje de glbulos rojos
contenido en sangre) y por ltimo realizar la determinacin cuantitativa de la
hemoglobina (para determinar el aporte de oxigeno o la presencia de anemia).

INTRODUCCIN
La sangre es lquido rojo compuesto por plasma y clulas que, impulsado por el
corazn, recorre el cuerpo de los seres vivos y cuya funcin es transportar los
nutrientes y el oxgeno y retirar los desechos metablicos. Donde circula la sangre.
Las arterias llevan sangre oxigenada o limpia (sangre que ha recibido oxgeno al
pasar por los pulmones) la cuales bombeada desde el corazn al resto del cuerpo.
Las venas llevan la sangre sucia desde el resto del cuerpo hasta el corazn y los
pulmones, donde vuelve a ser oxigenada.
La sangre se compone de clulas y componentes extracelulares (su matriz
extracelular). El plasma sanguneo: un fluido traslcido y amarillento que

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representa la matriz extracelular lquida en la que estn suspendidos los

elementos formes.
Para la toma de muestra se necesita escoger el sitio de puncin:
En piel del sitio de puncin elegido, debe estar indemne y limpia. Se deben utilizar
preferentemente, venas del pliegue del codo, medianas baslicas o ceflicas, como
se muestra en la siguiente imagen.

La VSG consiste en una prueba diagnstica que consiste en la medicin de la

velocidad con la que sedimentan los eritrocitos. Previamente se trata la muestra
de sangre con anticoagulante (citrato sdico) y se deja reposar durante una hora
para observar los resultados.
Es til para el diagnstico de procesos inflamatorios agudos y en el diagnstico y
progreso de desrdenes crnicos, neoplsicas y degenerativos.
La sedimentacin globular se realiza en tres etapas:
Hemaglutinacin o tendencia a formar pilas de monedas.
Sedimentacin de los hemates hacia el fondo del recipiente.
Acumulo de los hemates en el fondo del recipiente.
El hematocrito, es el porcentaje de la masa del eritrocito con relacin al volumen
sanguneo. Con esos datos son calculados los ndices hematimtricos (VCM,
HCM, VMHC). La alteracin de estos parmetros nos ayudarn a orientar
diferente s enfermedades que causan alteraciones en estos ndices (Ejemplo:
diferentes tipos de anemias).
El hematocrito se basa en centrifugar la sangre. Las molculas de mayor peso
(clulas sanguneas) se depositarn en el fondo y las de menor peso (plasma) se
depositarn en la zona superior.
El ndice de hematocrito (Ht) describe el porcentaje de clulas transportadoras de
oxgeno con respecto al volumen total de sangre. Sus valores son mayores en
hombres (40 -54%) que en mujeres (37 - 47%).
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La hemoglobina es una protena conjugada que sirve para el transporte de O2 y

CO 2. Cuando est totalmente saturada, cada gramo contiene alrededor de 1'4ml
de O2. La masa total de eritrocitos de un adulto contiene unos 600gr de
hemoglobina capaces de transportar 800ml de O2.
Una molcula de hemoglobina consta de 2 pares de cadenas polipeptdicas
(unin de aminocidos) (globina) y 4 grupos prosticos HEM que contienen cada
uno un tomo de Fe en estado ferroso. Las cadenas peptdicas que son iguales 2
a 2 adoptan una posicin helicoidal; lo que da a la molcula de hemoglobina una
estructura esteroide. Cada punto HEM se localiza en una zona determinada de
una de las cadenas de polipptidos. Localizado cerca de la superficie de la
molcula, el HEM se combina de forma reversible con una molcula de O2 de CO
2. Este grupo HEM es el responsable del color rojo de la hemoglobina.
Las hemoglobinas con valores de referencia normales encontradas son:

Hemoglobina A: consta de 2 cadenas y 2 cadenas . En un adulto normal

corresponde a ms del 95% del total.
Hemoglobina A2: consta de 2 cadenas y 2 cadenas . En un adulto sano
est en proporcin menor al 3%
MATERIALES Y REACTIVOS UTILIZADOS

Sangre con EDTA (material biolgico)

Jeringas (calibre 19 o 21)
Alcohol etlico al 70%
Torundas de algodn
Bote plstico para RPBI de boca ancha para punzocortantes
Tubos Vacutainer con o sin anticoagulante (tapn morado7rojo)
Torniquete o ligadura
Guantes
Sangre total EDTA (material Biolgico)
Tubo de 12 x 75 con tapn
Gradilla
Tubo wintrobe
Pipeta Pasteur
Cronometro.
Tubo capilar
Tubo 12 x 75
Gradilla
Equipo (centrifuga para hematocitos)

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Tubos de ensayo
Calibrador
Equipo (espectrofotmetro, cubetas de 1cm, Micropipetas)

METODOLOGA

Toma de muestras

Velocidad de Sedimentacin Globular

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Hematocrito

Determinacin cuantitativa de hemoglobina

RESULTADOS
Nombre del
paciente
Edad

Jore Alejandro Saldvar Nava

22 aos

Parmetro medido
Velocidad de Sedimentacin globular
(VSG)
Hematocrito (HTO)
Hemoglobina (HB)

Resultado
1 mm/h
49%
17.6496 g/dl

Valor de referencia
1-13 mm/hr
40-54 %
13.8 - 17.2 g/dl

Calculo realizados para la hemoglobina:

[

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Imgenes de la medicin de VSG y HTO

Interpretacin:
VSG: Los valores obtenidos en este parmetro caen dentro de los valores de
referencia, indicando que la concentracin de las protenas plasmticas de fase
aguda de la inflamacin se encuentran de manera normal, lo que conlleva a que
podamos decir que el paciente no est pasando por un proceso infeccioso.
El aumento de la VSG es paralelo a la gravedad de una infeccin.
HTO: En lo relacionado a los valores de este parmetro, los resultados arrojan que
el valor del hematocrito cae dentro de los rangos normales, lo que nos indica que
el porcentaje de glbulos rojos contenido en sangre se encuentra de manera
normal.
Un valor alto de HTO suele ser signo de un padecimiento de poliglobulina,
sin embargo, tambin hay engaosos ascensos de HTO producidos por
hemoconcentracin.
Un valor bajo de HTO suele ser signo del padecimiento de una anemia. Sin
embargo, hay falsos descensos de HTO ocasionados por hemodilucin.
Hemoglobina: En lo relacionado a este parmetro nos sali 0.4496 /dl ms alta los
valores de referencia, lo que podra considerarse que se debe a alguna patologa,
sin embargo, segn nuestro criterio consideramos que esta pequea elevacin es
no significante, ya que los otros 2 parmetros se encuentran de manera normal.
Una de las posibles causas,que quiz sea la principal causa de esta elevacin se
debe a una ligera deshidratacin, esto en base a que nuestro paciente no
presentaba signos fsicos de enfermedad.

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 El nivel alto de la hemoglobina casi siempre se debe a bajos niveles de

oxgeno en la sangre (hipoxia), presentes durante un largo perodo de
tiempo. Las razones comunes abarcan: ciertos defectos congnitos del
corazn, insuficiencia del lado derecho del corazn (corpulmonale), EPOC
grave. Otras razones para el nivel alto de hemoglobina abarcan la
deshidratacin.
El nivel de hemoglobina baja puede deberse a problemas como anemia
debida a la destruccin de los glbulos rojos antes de lo normal (anemia
hemoltica), sangrado prolongado, enfermedad crnica renal, la medula
sea no puede producir nuevas clulas sanguneas, bajos niveles de hierro,
vitamina B12 y B16.
CUESTIONARIO
1.- Por qu es importante mezclar la sangre en los tubos que contiene
aditivos?
Para que se lleve a cabo la reaccin entre la sangre y el aditivo y que se separe el
compuesto de la sangre para ser estudiado.
2.- Qu otros mtodos existen par a medir la VSG?
Los tres principales mtodos usados para determinar la VSG son el de
Westergren, de Wintrobe y el Zetafuge. Asimismo, se han descrito otros mtodos
como el de Landau Adams y se han comercializado sistemas ms o menos
automatizados para realizar la VSG segn el mtodo de Westergren.
3.- Cmo se encuentra la VSG durante el embarazo?
Por el embarazo el VSG se encuentra alto.
4.- Mencione al menos 8 casos en los cuales se encuentra alterado la VSG

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5.- mencione 4 trastornos donde el hematocrito se ve disminuido y cuatro

donde se ve aumentado.
Los valores bajos de hematocrito pueden deberse a:

Anemia
Sangrado
Destruccin de los glbulos rojos
Leucemia
Desnutricin
Deficiencias nutricionales de hierro, folato, vitaminas B12 y B6
Sobrehidratacin

Los valores altos de hematocrito pueden deberse a:

Cardiopata congnita
Insuficiencia del lado derecho del corazn (cor pulmonale)
Deshidratacin
Aumento anormal en los glbulos rojos (eritrocitosis)
Niveles bajos de oxgeno en la sangre (hipoxia)
Cicatrizacin o engrosamiento de los pulmones (fibrosis pulmonar)
Enfermedad de la mdula sea que causa aumento anormal en los glbulos
rojos (policitemia vera)

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6.- Mencione los errores ms comunes en la recoleccin de

sanguneas

muestras

Empleo de tubos o jeringas no limpias o hmedas.

Empleo de anticoagulantes inadecuados o en proporcin errnea.
Colocacin de ligadura durante un tiempo excesivamente largo antes de la
puncin.
Perforacin de la vena por la parte profunda, con la formacin de un
hematoma y la subsiguiente lesin de tejidos, que al producir la entrada de
factores hsticos en la sangre puede diluir la muestra y tambin acelerar el
proceso de la coagulacin sangunea.
Extraccin sangunea excesivamente lenta con coagulacin parcial de la
sangre en la jeringa o en el tubo de recogida.
Introduccin de la sangre en el tubo de recogida por vaciamiento de la
jeringa bajo presin y con la aguja puesta, lo que facilita la formacin de
espuma y la aparicin de hemlisis.
Agitacin excesiva de la mezcla sangre anticoagulante con formacin de
espuma (hemlisis) o agitacin insuficiente con aparicin de microcogulos.
Errores de identificacin del paciente al realizar la toma de muestra.
Llenado insuficiente de los tubos que contienen una proporcin
determinada de anticoagulante.

7.- Qu parmetros permiten determinar si el paciente presenta una

anemia?
La anemia es una disminucin de la hemoglobina o del nmero de hemates por
debajo del nivel normal. Cuando un paciente presenta anemia el nivel de
hemoglobina, hemates, hematocrito se ven de manera reducida y de forma
indistinta se utilizan para identificar la presencia y gravedad de la misma.
Otros componentes como el ndice VCM y HCM son tiles para la deteccin y
clasificacin de alguna anemia.
8.- Investigue normas que tengan informacin sobre residuos de laboratorio
explicando brevemente su contenido.

NOM-087-ECOL-SSA1-2002: La presente Norma Oficial Mexicana

establece la clasificacin de los residuos peligrosos biolgico-infecciosos
as como las especificaciones para su manejo. Esta Norma Oficial
Mexicana es de observancia obligatoria para los establecimientos que
generen residuos peligrosos biolgico-infecciosos y los prestadores de
servicios a terceros que tengan relacin directa con los mismos.
NOM-052-SEMARNAT-2005: Esta Norma Oficial Mexicana establece el
procedimiento para identificar si un residuo es peligroso, el cual incluye los
listados de los residuos peligrosos y las caractersticas que hacen que se

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consideren como tales. Es de observancia obligatoria en lo conducente

para los responsables de identificar la peligrosidad de un residuo.
9.- Qu parmetros se miden en una biometra hemtica?
Serie Roja

Hemoglobina (Hb): se mide en gr/dl y representa la cantidad de esta

protena por unidad de volumen.
Hematocrito (Hct): se mide en % y representa la proporcin de eritrocitos en
el total de la sangre.
Numero de glbulos rojos (GR): se mide en millones por microlitros
(millones/ul). Su valor normal depende tambin de los factores sealados
para los otros dos parmetros eritrociticos (Hb y Hct).
Volumen globular medio (VGM): se miden en femtolitros (fl) o micras
cubicas. Este ndice eritrocitico, medido directamente con citometria de
flujo, es de gran valor en el esclaramiento de la causa de la anemia.
Hemoglobina corpuscular medio (HCM): se expresa en picogramos (pg) y
representa la cantidad promedio de hemoglobina en cada eritrocito.
Concentracin media de hemoglobina globular (CmHb): este ndice
eritrocitico, medido como % se determina dividiendo la Hb multiplicada por
100 entre el Hct.

Serie blanca

Numero de glbulos blancos (GB): se miden en miles de millones por litro.

Neutrfilos
Eosinofilos
Basfilos
Linfocitos
Monocitos

10.- Mencione los valores de referencia para los parmetros medidos en una
BH en un adulto.
Parmetro
Nmero de Leucocitos
Nmero de linfocitos
Nmero de clulas medianas
Nmero de granulocitos
Porcentaje de linfocitos
Porcentaje de clulas medianas
Porcentaje de granulocitos
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Abreviacin
WBC
Lymph#
Mid#
Grand#
Lymph%
Mid%
Gran%
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Referencia
4.5 - 10.5
0.9 - 5.3
0.1 - 1.1
1.3 7.4
20 - 45
2.0 10.0
30 70
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Nmero de eritrocitos
Hemoglobina
Hematocrito
Volumen corpuscular o globular medio
Hemoglobina corpuscular media
Concentracin de hemoglobina corpuscular
media
ndice de medicin de la heterogeneidad de
tamaos de los glbulos rojos
ndice de medicin de la heterogeneidad de
tamaos de los glbulos rojos, con
desviacin estandar
Plaquetas
Volumen plaquetario medio
Amplitud de distribucin plaquetaria
Procalcitonina

RBC
HGB
HCT
MCV
MCH
MCHC

4.3 6.5
13.5 18.0
40 - 54
80 99.9
27 33
32 36

RDW-CV

11.5 14.5

RDW-SD

35 56

PLT
MPV
PDW
PCT

150 400
7.4 10.4
15 17
0.180 0.282

11. describa la tcnica para la extraccin de sangre arterial

1. Eleccin de la arteria. El sitio de eleccin es la arteria radial. En su defecto
puede utilizarse a branquial, pedia, tibial posterior, temporal superficial (en nios),
femoral por orden de preferencia.
2. Desinfeccin de la zona.
3. Infiltracin con anestesia local (opcional).
4. Localizacin de la arteria. Palpar la arteria con el dedo ndice.
5. Puncin de la arteria. Puncin con una aguja de 22 G unida a una jeringa de 5
ml, en direccin ceflica y con una inclinacin de 30 en relacin a la superficie de
la piel. Cuando la aguja punciona la arteria se produce la aparicin de sangre sin
necesidad de realizar aspiracin. Extraer al menos 3 ml.
6. Retirar aguja y jeringa. Tras retirar la aguja comprimir la zona de puncin
durante 5 minutos. Para cortar la hemorragia por el punto de puncin no es
necesario que la compresin produzca falta de riego.
7. Remitir la muestra para anlisis. Retirar la aguja de la jeringa y eliminar
cualquier burbuja de aire y tapar el extremo de la jeringa con un capuchn de
plstico. Procesar lo antes posible. Idealmente se procesar en el primer minuto
de su extraccin o se almacenar y transportar a 2 C.

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12. describa la tcnica para la extraccin de sangre capilar

Muestra capilar, muestra capilar de sangre, puncin en el dedo o puncin en el
taln es la recoleccin de una muestra de sangre que se obtiene punzando la piel.
Los capilares son diminutos vasos sanguneos que se encuentran cerca de la
superficie de la piel.
Se realiza punzando un dedo, un taln u otras reas y recogiendo una o ms
gotas en una tirilla de examen o en un pequeo recipiente.
El rea se limpia con una sustancia antisptica y se punza con una aguja o lanceta
para luego recoger la sangre en una pipeta (tubo pequeo de vidrio), en una
laminilla de vidrio, sobre una tirilla de examen o en un recipiente pequeo.
Finalmente, se puede colocar algodn o un vendaje en el sitio de la puncin si el
sangrado persiste.
13.- Qu significado clnico tiene la evaluacin de los valores de la VSG?
La velocidad de sedimentacin globular VSG es la precipitacin de los eritrocitos
(glbulos rojos) en un tiempo determinado (1-2 horas), que se relaciona
directamente con la tendencia de los glbulos rojos hacia la formacin de
acmulos (pilas de monedas) as como a la concentracin plasmtica de protenas
(globulinas y fibringeno). Como la VSG es una marcador inespecfico de
inflamacin y se afecta por otras circunstancias, los resultados deben interpretarse
junto a los hallazgos clnicos que el mdico haya observado, la historia clnica de
la persona y junto con los resultados de otras pruebas de laboratorio. Un
incremento de la VSG puede estar indicando un aumento de la inflamacin o una
baja respuesta al tratamiento; una disminucin de la VSG puede estar indicando
una buena respuesta al tratamiento.

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14.- Mencione la clasificacin fisiopatolgica de las anemias.

La clasificacin fisiopatolgica (segn su mecanismo de produccin) de una
anemia se basa en la capacidad de la mdula sea para adaptarse al descenso de
la concentracin de hemoglobina en sangre. El recuento de reticulocitos (que son
las clulas precursoras de los glbulos rojos), indica cul es la capacidad de
respuesta de la mdula sea frente a la anemia. La disminucin de la
concentracin

de

hemoglobina

en

sangre

siempre

origina

un

aumento

compensador de la eritropoyesis por aumento de la Epo. Por ello, cuando la

mdula presenta una capacidad regenerativa normal, siempre debe existir una
relacin inversa entre disminucin de hemoglobina y aumento del nmero de
reticulocitos (anemia regenerativa).Por el contrario, cuando la anemia no se
acompaa de un aumento proporcional del nmero de reticulocitos, es que la
capacidad regenerativa de la mdula sea se halla disminuida (anemia
arregenerativa).

15.- Describa la clasificacin morfolgica de las anemias.

La apreciacin del tamao y el contenido hemoglobnico de los eritrocitos es uno
de los anlisis de laboratorio ms empleados en el diagnstico de las anemias. El
ndice eritrocitario de mayor valor clnico es el volumen corpuscular medio (VCM),
ya que constituye un criterio morfolgico para clasificar las anemias en
normocticas (VCM: 82-98 fl), macrocticas (VCM >98 fl) y microcticas (VCM <82
fl).
El VCM se correlaciona con la hemoglobina corpuscular media (HCM), magnitud
que informa sobre el valor medio del contenido hemoglobnico de los eritrocitos
circulantes. En consecuencia, la HCM disminuye al hacerlo el VCM (anemias
microcticas e hipocromas) y aumenta cuando aumenta el VCM (anemias
macrocticas e hipercromas)
16.- Cual es el valor de la hemoglobina considerado para catalogar una
anemia como grave?

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17.- Qu otros estudios aparte de la determinacin de Hb son necesarios

para diagnosticar una anemia?
Por lo general, la primera prueba que se usa para diagnosticar la anemia es un
hemograma completo, en el que se examinan diferentes partes de la sangre. En el
hemograma se determinan los niveles de la hemoglobina y el hematocrito.
Si los resultados del hemograma muestran que usted tiene anemia, es posible que
necesite otras pruebas, como:

Electroforesis de hemoglobina. Esta prueba evala los diferentes tipos de

hemoglobina que hay en la sangre. Puede servir para diagnosticar el tipo de
anemia.

Recuento de reticulocitos. Esta prueba determina la cantidad de glbulos

rojos inmaduros (reticulocitos) de la sangre. Muestra si la mdula sea est
produciendo glbulos rojos a la velocidad adecuada.

Pruebas para determinar las concentraciones de hierro en la sangre y en el

cuerpo. Entre ellas se encuentran el hierro srico y la ferritina srica. La
transferrina y la capacidad total de captacin de hierro tambin son pruebas
que miden las concentraciones de hierro.

18.- Mencione 3 mtodos para la determinacin de hemoglobina.

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El gravimtrico con sulfato de cobre, caracterizado por ser menos costoso,

pero arroja gran proporcin de resultados falsamente normales en sujetos
anmicos.

El espectrofotomtrico, basado en la cuantificacin de un complejo

coloreado, la cianometahemoglobina, mtodo de referencia que se utiliza
ampliamente para determinaciones con sangre capilar y venosa, en
analizadores hematolgicos o hemoglobinmetros porttiles.

Mtodos elctricos, acsticos y pticos, los cuales se caracterizan por ser

no invasivos.

DISCUSIN
Durante la realizacin de la Prctica de Velocidad de Sedimentacin Globular
(VSG), Hematocrito y determinacin cuantitativa de hemoglobina, nuestro equipo
no tuvo mayores complicaciones para poder determinar los parmetros de cada
una de las pruebas correspondientes.
De los 3 valores obtenidos el nico que se sali un poco del rango normal fue el
de la hemoglobina con 0.4g/dl por arriba del lmite superior, esto pudo deberse a
un error en el equipo de medicin debido a su calibracin o simplemente una
deshidratacin del paciente, pero corroborando con los otros 2 datos no hay
indicio de ningn tipo de enfermedad en el paciente. Y es ah donde radica la
importancia de hacer varias pruebas que se complementan porque de no hacerlo
se puede tomar una decisin errnea con una sola prueba y dar un diagnostico
falso.
Conclusin
Los datos del paciente tanto de VSG 1mm/h como de Hematocrito 49% salieron
dentro de los valores de referencia normales. El valor de hemoglobina es de
17.6496 g/dl mientras que los valores de referencias son 13.8 - 17.2 g/dl, lo que
indica que est un poco arriba dicho valor. Y haciendo un balance de las 3
pruebas el paciente est clnicamente sano.
Estas pruebas en conjunto nos ayudan a dar un perfil de diagnstico adecuado
del paciente, porque el valor de una sola prueba no siempre puede ser
determinante para dar un diagnostico sino que se requiere complementar con otro
tipo de pruebas para tener ms amplio el panorama de salud del paciente y poder
dar un diagnstico acertado.
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REFERENCIAS

Garrigs L- Los comienzos de la determinacin colorimtrica de la

hemoglobina en la sangre: innovacin o evolucin?. Actesdhistria de la
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Normas ISO / EN / ANSI / AAMI ISO 6710 Recipientes de un solo uso para
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ISO 11137Esterilizacin de productos para la salud, requisitos para el
control de validacin y rutinario Esterilizacin de la radiacin.
Ruiz A. G. J. Fundamentos de Hematologa, 4ta Edicin, Editorial Medica
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C.
Errores
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http://www.ifcc.org/media/214854/errores%20en%20el%20laboratorio%20cl
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Velocidad
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www.fisiologia.me/images/0/03/Practica_6.rosamarti.pdf
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Normas Mexicanas Oficiales, NOM-087-ECOL-SSA1-2002 disponible en:
http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/087ecolssa.html
Normas Oficiales Mexicanas, NOM-052-SEMARNAT-2005 disponible en:
http://www.inb.unam.mx/stecnica/nom052_semarnat.pdf
Castelln M.G., Interpretacin de la biometra hemtica, documento en
lnea, disponible en: http://biomedicalpv.com/evento24feb/bh.p df
Garca A.L. Puncin Arterial y capilar, documento en lnea disponible en:
http://www.oc.lm.ehu.es/Fundamentos/fundamentos/TecnicasCM/PuncionAr
terial.PDF

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