TEMA:

CROMATOGRAFA DE AZCARES
OBJETIVOS
Generales
o

Realizar la cromatografa de los azcares mediante el

papel Whatman los azcares que contiene una muestra
desconocida y su respectivo clculo (factor de retencin)

Especficos
o

Conocer como se realiza una cromatografa

Determinar la muestra desconocida mediante la

cromatografa

Calcular el factor de retencin (Rf) a las muestras de

azcar

PROCEDIMIENTO
CROMATOGRAFA ASCENDENTE EN PAPEL DE
AZCARES
Colocamos sobre el mesn las diferentes
muestras

GLUCOSA

SACAROS

FRUCTOS

2cm

XXXXX
X
2 cm

Doblamos
losde
2cm
deaplicacin
la parte superior
hacia
atrs, le pasamos
B._Despues
cada
agitamos
constantemente,
A._Colocamos
con
loselel
puntos
capilar
Aun
y Bcon
poco
cinco
veces
muestra
massegn
para
un
hiloRepetimos
e inmediatamente
grapamos
el
doblado.
hasta
que
se seque
sealado
elde
capilar

Colocamos debajo de cada una de las X el nombre de una de las

muestras dadas
X

Glu

X
Sac

X
fruc

Sostenemos los extremos del hilo y sumergimos el papel en la

cuba de modo que la lnea de lpiz, quede un poco ms arriba
del nivel del solvente (butanol, acido actico, agua (60:15:25)

Pegamos los extremos del hilo a los lados de la cuba con

cinta, e inmediatamente procedemos a cerrar la cuba.

Dejamos correr la cromatografa, hasta que el solvente

llegue al margen superior

Sacamos el papel de la cuba y esperamos que se seque

REVELADO DE LA CROMATOGRAFA

El revelado se realiza al sumergir el papel cromatografico

en:

1.- En
solucin de
AgNO3 al 0.5%

2.- En
solucin de
KOH al 5% en

3.-En solucin
de NH3 al 3%

Secar al aire
libre, pasara a
la siguiente
solucin y asi
sucesivament
e

Esperar que
aparezcan
manchas,
lavar con un
chorro de
agua y secar
al aire libre

Lavar con un
chorro de
agua y secar
al aire

Una vez terminado el revelado, observamos y

procedemos a realizar los clculos correspondientes

Rf = factor de retencin Rf menor a 1

Clculos

X = distancia entre la superficie

dejada por el solvente hasta el centro
de la mancha de la muestra (cm)
Y = distancia entre la superficie dejada
por el solvente hasta el nivel del frente
del solvente (cm.)

Muestra de Glucosa

Rf =

Muestra de sacarosa

1.8
=0.15
11.3

Muestra de fructosa

Muestra desconocida

RESULTADOS

# de
Muestra
1.

Muestra
aplicada

Glucosa

x(cm)

y(cm)

1.8

11.3

Rf
0.15

Fructosa

2.6

11.3

0.23

Sacarosa

o.6

11.3

0.05

Muestra
problema (2)

11.3

0.08

1
2.7

o.23

OBSERVACIONES
PROCEDIMIENTO/REACTIVO
AGREGADO

CARACTERISTICAS OBSERVADAS

ADICION DE LA MUESTRA EN
EL PAPEL DE CROMATOGRAFIA

Al colocar la cantidad necesaria de

muestra con la ayuda del capilar en el
papel whatman se absorbe rpidamente,
para secarlo se lo debe agitar

PAPEL EN LA CUBA

Se puede observar la huella del nivel del

solvente sin presencia de manchas

REVELADO CROMATOGRAFICO
AgNO3 al 0.5% en acetona

El cromatograma permanece igual su

color

KOH al 5% en etanol

El papel toma un color caf y las

manchas toman un color ms intenso del
papel

NH3 al 3%

Al igual con el reactivo anterior

permaneca del mismo color pero las
manchas se notaban mucho mas

Conclusiones
Al realizar la presente prctica llegamos a la conclusin
o

Para realizar la cromatografa de las muestras se debe utilizar

sustancias puras o estndares, para as poder determinar la muestra
desconocida mediante las observaciones de los resultados (lectura
del revelado cromatogrfico )

El revelado cromatogrfico se lo puede realizar mediante diversos

reveladores es decir diferente composicin de los reactivos

El clculo para determinar el factor de retencin obtuvimos los

siguientes resultados

Muestra aplicada

Rf

Glucosa

0.15

Fructosa

0.23

sacarosa

0.05

Muestra desconocida

0.08
o.23

Se puede notar que el azcar que tiene un mayor Rf es la fructosa porque

tienen un valor de 0.23 por lo que va a tener mayor facilidad de ser
desplazado por el solvente desde la fase mvil a la fase estacionaria lo que
no ocurrir con la sacarosa
o

En la muestra desconocida se podra concluir que es una mezcla de

los 3 azucares primero porque en el clculo del Rf tienen una valor
similar al de la sacarosa (0.05- 0.08) aunque en la lectura la sacarosa
empieza la mancha desde el origen lo que no ocurre con la muestra.
Tambin contiene glucosa pues estn al mismo nivel pero con
seguridad la muestra desconocida tiene fructosa ya que se pudo
observar que se encuentran al mismo nivel y edemas tienen el mismo
valor de Rf.

Bibliografa.
o

ANGULO Ugalde, Y. Bioqumica Manual de laboratorio Universidad de

Costa

Biblioteca de Consulta Encarta 2009

http://www.wiquipedia/wiki.disacridos/wiki/wiki.htm

"Ao de la Promocin de la Industria Responsable y del Compromiso

Climtico".

FACULTAD DE INGENIERA INDUSTRIAL

CARRERA PROFESIONAL DE INGENIERA INDUSTRIAL

CROMATOGRAFA DE AZCARES

PRESENTADO POR:

Quispe valos, Mauro

Casas Medina,
Sagua Cruz, Luis Alberto
Vargas Peraltilla, John
Vilca Caldern, Jos

Arequipa Per
2014