LABORATORIO

MANUAL TCNICO DE CALIDAD

PROCEDIMIENTO OPERATIVO DE
ENSAYO LEUCOCITOS.

NUEVA
CALIFORNIA

Cdigo:
POE- L 5.4.1
CAPITULO 5.4
Versin:
01/2014
Pgina:
1 de 2

2. OBJETO:
El recuento de Leucocitos es la tcnica que permite calcular el nmero de glbulos
blancos que se encuentran en un volumen de sangre.
Finalidad
Principio

1. ALCANCE:
Recuento de leucocitos en Cmara de Neubauer

Mtodo
Muestra
Materiales
Reactivos
.
Estabilidad
y Almacenamiento
No pipetear el substrato
con la boca, ni soplar en el substrato; no usar material
contaminado con saliva ni hablar con el frasco destapado, porque son acciones que
pueden contaminar el reactivo con cantidades microscpicas de saliva capaces de
deteriorar irremediablemente el substrato.

3. TOMA DE MUESTRA:

Una disminucin
> a un 10% en la absorbancia del control indica contaminacin del
Recoleccin
substrato con saliva.
Estabilidad y almacenamiento
Cuidados especiales: El reactivo de color contiene acido clorhdrico. Se debe tener
cuidado para evitar la ingestin y en caso de contacto con los ojos, lavar
inmediatamente con gran cantidad de agua y procurar auxilio mdico.

4. PRECAUCIONES Y CUIDADOS:
1 Recomendaciones
La limpieza y secado adecuado del material son factores fundamentales para la
estabilidad de los reactivos REVISADO:
y obtencin de resultados correctos.
ELABORADO:
APROBADO:
Nombre:

Dra. Karla L. Flores

Nombre:

Dra. Lucero Jorges

Nombre:

Dra. Carol Delgadillo

Cargo:
Cargo:
Como la saliva
Analista
es muy rica en
amilasa, seGerente
debe evitar
tcnico que ella
contamineDirector
el material y
Fecha:
Fecha:
Fecha:
04/10/14
04/10/14
10/10/14
los reactivos utilizados, Responsable
no soplando
la pipetaDra.
usada
para medir elVigente
agua,
muestra y
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de la emisin:
Carol Delgadillo
a partir de: 10/10/14
reactivos.
Cargo:

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5. INTERFERENCIAS:
Valores de bilirrubina superiores a 5 mg/dl, hemoglobina superiores a 30 mg/dl y
triglicridos superiores a 250 mg/dl producen resultados falsamente disminuidos.

Para evaluar la concentracin aproximada de la hemoglobina en una muestra

hemolizada se puede proceder como expuesto a continuacin: Diluir 0,05 ml de la
muestra en 2,0 ml de NaCl 150 mmol/l ( 0,85%) y medir la absorbancia en 405 o 415
nm, ajustando el cero con agua desionizada o destilada.

7. TERMINOS Y DEFINICIONES:

Las condiciones de bioseguridad empleadas sern las mismas que estn descritas en el
Capitulo 5.7, considerando el hecho de considerar a toda muestra potencialmente peligrosa.

9.8.CONDICION
DE BIOSEGURIDAD:
Analista
laboratorista
RESPONSABILIDAD:

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10. DESARROLLO DEL PROCEDIMIENTO:

Caractersticas del Ensayo:
Longitud de onda:

620 nm

Paso de luz:
Temperatura:

37 C

Tiempo de reaccin:

7,5 minutos

Cantidad de muestra:

10 ul

2 Linealidad:
3

hasta 400 Unidades / dl.

Preparacin del reactivo

Tomar 2 tubos de ensayo y proceder como expuesto a continuacin:

Sustrato # 1

Control

Muestra

0,5 ml

0,5 ml

Colocar en bao mara a 37 C durante 2 minutos. El nivel del agua en el bao debe ser
superior al nivel de los reactivos en los tubos de ensayo.
Muestra
----------10 ul
Mezclar e incubar en bao mara a 37 C exactamente 7 minutos, cronometrados.
Reactivo de color
0,5 ml
0,5 ml
Agua destilada o desionizada

4, 0 ml

4,0 ml

Mezclar, esperar 5 minutos y determinar las absorbancias del control y de la muestra en

660 nm o filtro rojo ( 620 a 700) ajustando el cero con agua destilada. El color es estable
por 30 minutos.

ELABORADO:
Nombre:
Cargo:

REVISADO:

APROBADO:
Nombre:
Dra. Lucero Jorges
Dra. Carol Delgadillo
Cargo:
Cargo:
Gerente tcnico
Director
Fecha:
Fecha:
04/10/14
10/10/14
Responsable de la emisin:
Dra. Carol Delgadillo
Vigente a partir de: 10/10/14

Dra. Karla L. Flores

Analista
04/10/14

Fecha:
Laboratorio: NUEVA CALIFORNIA

Nombre:

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11. CALCULOS:
13.recuentos
SIGNIFICADO
CLINICO:
12.
VALORES
DE REFERENCIA:
Los
de leucocitos,
al igual que los eritrocitos,

se expresan como
concentraciones, que en este caso seran nmero de clulas por unidad de volumen de
sangre, que es 1mm3
Despus de contar los glbulos blancos de los 4 cuadrados angulares, se suman el total de
ellos y con dicha cantidad de hace
el siguiente clculo: 3
Adultos: 4 000 8000
x mm3
4,0 - 8,0 x 10 ul
3
N de leucocitos x mm = altura x dilucin
x rea
Nios: 10 000 - 123 000 x mm3 10.0 - 12.0 x 103 ul
N de leucocitos x mm = 1/10 x 1/20 x 4 = 1/10 000
N de leucocitos x mm3 = 4/200 = 1/50
N de leucocitos x mm3 = N de leucocitos contados x 50

La amilasa sangunea tiene origen en dos fuentes principales: pncreas y glndulas

salivales. Otras fuentes potenciales de amilasa srica son los rganos de la
reproduccin y el hgado. La elevacin de la amilasa srica no es un hecho especfico
de la pancreatitis ya que niveles elevados tambin ocurren en el infarto mesentrico,
embarazo ectpico roto, en la uremia, colelitiasis, parotiditis epidmica e individuos
portadores de macro amilasemia. En esta ltima condicin , la amilasa no aparece en
la orina. Drogas como morfina y analgsico anlogo, diurticos tiasdicos provocan
elevaciones transitorias de la amilasa srica.
La determinacin de la amilasa srica y urinaria son las pruebas ms tiles para el
diagnstico de la pancreatitis

13. CONTROL DE CALIDAD:

Emplear sueros controles con valores conocidos de Amilasa, el Humatrol N o el
Humatrol P, o un pool de sueros.

ELABORADO:
Nombre:
Cargo:

REVISADO:

APROBADO:
Nombre:
Dra. Lucero Jorges
Dra. Carol Delgadillo
Cargo:
Cargo:
Gerente tcnico
Director
Fecha:
Fecha:
04/10/14
10/10/14
Responsable de la emisin:
Dra. Carol Delgadillo
Vigente a partir de: 10/10/14

Dra. Karla L. Flores

Analista
04/10/14

Fecha:
Laboratorio: NUEVA CALIFORNIA

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