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OBJETIVO GENERAL

Conocer la tcnica de cromatografa de capa delgada como criterio para la


separacin de pigmentos de una planta.

MARCO TEORICO

La cromatografa de capa fina es un procedimiento que se utiliza para separar


molculas relativamente pequeas. En la biologa celular se utiliza
frecuentemente para separar azcares simples, lpidos, aminocidos,
nucletidos, metabolitos, y ocasionalmente para separar cadenas cortas de
polipptidos y cidos nucleicos. Al igual que otras cromatografas, consiste de
una fase estacionaria y una fase mvil y el principio es el mismo: la sustancia
de inters se adherir a la fase estacionaria o se mover con la fase mvil,
viajando una distancia que es inversamente proporcional a la afinidad por la
fase estacionaria. La fase estacionaria puede ser variada. Puede ser de papel,
de celulosa o de un gel de silicato (vidrio molido bien fino) unido a una
superficie slida (una placa de vidrio, aluminio, plstico o papel). Esta
superficie slida puede ser rgida o flexible. El tipo de fase estacionaria que se
utilice en un experimento depender del tipo de molculas que se quieran
separar. Incluso vienen algunas placas con indicadores fluorescentes. La fase
estacionaria consiste de un solvente que puede ser agua, un solvente orgnico
o una mezcla de ambos.
Podemos distinguir 3 tipos de cromatografa dependiendo si la fase
estacionaria/fase mvil es slido/lquido, lquido/lquido o lquido/gas: Si es
slido/lquido, cabe distinguir entre: Cromatografa de adsorcin: El slido
adsorbe al componente que inicialmente estaba en fase mvil (liquida o
gaseosa) (Fuerzas de Van der Waals).
Cromatografa de cambio inico: el slido es un cambiador de iones (fuerzas
electrostticas).
Cromatografa de exclusin (o de geles): el slido es un gel formado por
polmeros no inicos porosos que retienen a las molculas de soluto segn su
tamao.
Cromatografa de afinidad: es un tipo especial de cromatografa de adsorcin,
utilizada especialmente en bioqumica, en la que un slido tiene enlazado un
llamado ligando de afinidad que puede ser por ejemplo, un indicador
enzimtico o un anticuerpo.
Si es lquido/lquido, cabe distinguir: Cromatografa de particin: el soluto se
reparte entra la fase mvil (lquido o gas) y la fase estacionaria.
Si es lquido/gas, cabe distinguir entre: Cromatografa gas-liquido (CGL), que
es una cromatografa de particin. Cromatografa gas-slido (CGS), que es una
cromatografa de adsorcin.

Si es un fluido supercrtico, (fluido calentado a una temperatura superior a la


temperatura crtica, pero simultneamente comprimido a una presin mayor
que su presin critica), se trata de la cromatografa de fluidos supercrticos
(CFS), que puede ser de particin o de adsorcin.
Las tcnicas cromatografas, segn el dispositivo utilizado para conseguir la
separacin entre la fase mvil y la estacionaria, pueden ser: en columna y
plana.
Cromatografa en columna: Se utiliza un tubo cilndrico, en cuyo interior se
coloca la fase estacionaria y a su travs se hace pasar la fase mvil. El flujo de
la fase mvil (lquido o gas) a travs de la estacionaria se consigue: 1) por
presin, 2) por capilaridad, 3) por gravedad.
Cromatografa plana: La fase estacionaria est colocada en una superficie
plana que en realidad es tridimensional, aunque una de sus dimensiones es
muy reducida, por lo que puede considerarse bidimensional.
Se divide en dos tipos generales: 1. -Cromatografa en papel: en la que el papel
absorbente acta como soporte de la fase estacionaria (cromatografa de
particin). Una muestra lquida fluye por una tira vertical de papel absorbente,
sobre la cual se van depositando los componentes en lugares especficos.
Cromatografa en capa fina: en la que un slido acta como fase estacionaria
(cromatografa de particin), se extiende en una capa delgada sobre una placa,
generalmente de vidrio. El uso de la cromatografa est ampliamente
extendido en el anlisis de alimentos, medicinas, sangre, productos petrolferos
y de fisin radiactiva.