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UNIVERSIDAD TCNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERA EN ALIMENTOS


INGENIERA EN ALIMENTOS
MICROBIOLOGA DE ALIMENTOS II
Nombre: Andrs Olalla
Semestre: Cuarto U
Tema: Resumen Crecimiento Microbiano
CRECIMIENTO MICROBIANO
Crecimiento microbiano es el aumento del nmero de microorganismos a lo largo del tiempo. Por tanto,
no nos referimos al crecimiento de un nico microorganismo (ciclo celular), sino al demogrfico. El
crecimiento de una poblacin es el aumento del nmero de clulas como consecuencia de un crecimiento
individual y posterior divisin.

CICLO CELULAR
Las clulas aisladas cultivadas en un volumen finito de medio de cultivo apropiado van utilizando los
nutrientes que tienen disponibles, sintetizando sus propios componentes celulares y dividindose en
cuanto duplican su masa y su material gentico. El tiempo que tarda una clula en cumplir ese proceso se
denomina tiempo de generacin () y puede variar desde unos 20 minutos en condiciones ptimas hasta
varios meses en condiciones ambientales. Cada vez que transcurre un tiempo de generacin, el nmero de
clulas se duplica, siguiendo, por tanto, un incremento exponencial.
CINTICA DE CRECIMIENTO
Es importante conocer la cintica de crecimiento de los cultivos microbianos para predecir cmo va a
evolucionar un cultivo, cmo va a ir consumindose el substrato y cmo se van a ir acumulando los
productos del cultivo. Conociendo estos factores es posible iniciar el cultivo a mayores escalas.

CRECIMIENTO MICROBIANO EN MEDIO LQUIDO

Si la bacteria crece en un medio lquido, en la mayora de los casos las clulas que se producen en cada
divisin forman una suspensin de clulas libres.
En un cultivo discontinuo de bacterias en medio lquido, se pueden diferenciar cuatro fases en la
evolucin de los parmetros que miden el crecimiento microbiano
1.- Fase lag o de adaptacin durante la que los microorganismos adaptan su metabolismo a las nuevas
condiciones ambientales (abundancia de nutrientes y condiciones de cultivo). En esta fase no hay
incremento en el nmero de clulas, pero hay gran actividad metablica, aumento en el tamao individual
de las clulas, en el contenido proteico, ADN y peso seco de las clulas.

2.- Fase exponencial o logartmica: en ella la velocidad de crecimiento es mxima y el tiempo de


generacin es mnimo. Durante esta fase las bacterias consumen a velocidad mxima los nutrientes del
medio.
Si un cultivo que est creciendo en fase exponencial es inoculado al mismo medio de cultivo bajo las
mismas condiciones de crecimiento, no se observa fase de latencia y el crecimiento exponencial sigue a la
misma velocidad.
3.- Fase estacionaria: en ella no se incrementa el nmero de bacterias (ni la masa u otros parmetros del
cultivo). Las clulas en fase estacionaria desarrollan un metabolismo diferente al de la fase exponencial y
durante ella se produce una acumulacin y liberacin de metabolitos secundarios que pueden tener
importancia industrial.
Los microorganismos entran en fase estacionaria porque se agota algn nutriente esencial del medio o
porque los productos de desecho que han liberado durante la fase exponencial hacen que el medio sea
inhspito para el crecimiento microbiano.
4.- Fase de muerte: Si la incubacin contina despus de que una poblacin microbiana alcanza la fase
estacionaria, las clulas pueden seguir vivas y continuar metabolizando, pero va a comenzar una
disminucin progresiva en el nmero de clulas viables y cuando esto ocurre se dice que la poblacin ha
entrado en fase de muerte.

MEDIDA DEL CRECIMIENTO Y ENUMERACIN DE MICROORGANISMOS

Existen diferentes sistemas para detectar y medir el crecimiento de microorganismos.


Los mtodos ms utilizados son el recuento de viables en placa y el mtodo turbidimtrico:
Recuento de viables: Consiste en la dilucin de una muestra (con solucin salina estril, buffer fosfato,
agua peptona) hasta que las bacterias se diluyan lo suficiente como para contar con precisin. Se siembra
un volumen determinado de cultivo o muestra sobre el medio de cultivo slido adecuado para estimar el
nmero de viables contando el nmero de colonias que se forman puesto que cada una de estas deriva de
una clula aislada. Las placas de final de la serie debe tienen entre 25 y 250 colonias (o entre 30 y 300
colonias). Menos de 25 las colonias no son aceptables por razones estadsticas, y ms de 250 colonias en
una placa es probable que produzcan colonias muy cerca unos de otros para ser distinguidos como
distintas unidades formadoras de colonias (UFC).

Mtodo turbidimtrico: el sistema se basa en que las clulas en suspensin dispersan la luz causando la
turbidez del cultivo. La turbidez depende de la masa en suspensin y, por tanto, midiendo esta se puede
estimar aquella. Este es el parmetro de medida ms fcil de usar en los cultivos de laboratorio. La
densidad de clulas debe ser del orden de 105 por ml. Esta metodologa se basa en la ley de Lambert-Beer.
Recuento directo: consiste en la observacin al microscopio de volmenes muy pequeos de
suspensiones de bacterias. Se usan unos portaobjetos especiales denominados cmaras de PetroffHausser. Para que la medida sea correcta es necesario que la densidad de clulas sea del orden de
105 por ml.

Medida del nmero de partculas usando contadores electrnicos de partculas. Estos sistemas no nos
indican si las partculas corresponden a clulas vivas o muertas; pero nos pueden dar una idea del tamao
de las partculas.

Medida de parmetros bioqumicos tales como la cantidad de ADN, ARN, protenas, peptidoglicano,
etc. por unidad de volumen de cultivo.

Medida de actividad metablica de las bacterias como que respiran producen una disminucin del
potencial redox del medio en que se encuentran como consecuencia del consumo de oxgeno (utilizacin
de colorantes sensibles a oxidacin-reduccin tales como el azul de metileno).
Mtodos fsicos: Impedancia (bactometer , bioMerieux),microcalorimetra, citometra de flujo.

Films secos (Petrifilm): Son pelculas deshidratadas de medios de cultivos generales o selectivos en las
que se deposita 1 ml de la muestra que rehidrata el medio. Tras la incubacin se hace el recuento.

Mtodo del nmero ms probable: Basado en series de diluciones y clculo estadstico del nmero de
bacterias presentes en las diluciones ms altas. Se puede hacer con 3 5 tubos. El mtodo es popular
aunque poco exacto.

FACTORES FSICOS Y QUMICOS QUE INFLUYEN EN EL CRECIMIENTO.

Temperatura: Cada microorganismo tiene una temperatura de crecimiento adecuada.


Si estudiamos la variacin de la velocidad de crecimiento en funcin de la temperatura de cultivo,
podemos observar una temperatura mnima por debajo de la que no hay crecimiento; a temperaturas
mayores se produce un incremento lineal de la velocidad de crecimiento con la temperatura de cultivo
hasta que se alcanza la temperatura ptima a la que la velocidad es mxima. Por encima de esta
temperatura ptima, la velocidad de crecimiento decae bruscamente.

Actividad de agua: Se denomina actividad de agua a la relacin entre la presin de vapor de agua del
substrato de cultivo (P) y la presin de vapor de agua del agua pura (P0). El valor de la actividad de agua
est relacionado con el de la humedad relativa (HR).
El valor de la actividad de agua nos da una idea de la cantidad de agua disponible metablicamente.
Cuando un microorganismo se encuentra en un substrato con una actividad de agua demasiado baja, su
crecimiento se detiene. Esta detencin del crecimiento no suele llevar asociada la muerte del
microorganismo, sino que ste se mantiene en condiciones de resistencia durante un tiempo ms o menos
largo.

pH: Es un parmetro crtico en el crecimiento de microorganismos ya que cada tipo de microorganismo


slo puede crecer en un rango estrecho de pH fuera del cual mueren rpidamente. El pH intracelular es
ligeramente superior al del medio que rodea las clulas ya que, en muchos casos, la obtencin de energa
metablica depende de la existencia de una diferencia en la concentracin de protones a ambos lados de la
membrana citoplsmica.
El pH interno en la mayora de los microorganismos est en el rango de 6.0 a 7.0. Los rangos de pH
tolerables por diferentes tipos de microorganismos son, tambin, distintos. Hay microorganismos
acidfilos que pueden vivir a pH=1.0 y otros alcalfilos que toleran pH=10.0.

Potencial redox: Nos indica la capacidad del substrato para aceptar o donar electrones, es decir sus
caractersticas oxidantes o reductoras. Uno de los factores que intervienen en el potencial redox, aunque
no el nico, es la concentracin de oxgeno [O2]. Hay microorganismos que requieren ambientes
oxidantes para crecer, mientras que otros necesitan ambientes reductores. El metabolismo de ambos tipos
de microorganismos presenta diferencias notables. El requerimiento de condiciones oxidantes o
reductoras no debe confundirse con la necesidad de presencia o ausencia de oxgeno para que se produzca
el crecimiento.

EFECTOS DE LA PRESIN HIDROSTTICA Y ADAPTACIONES MOLECULARES


La presin hidrosttica afecta a la fisiologa y a la bioqumica de las bacterias que viven a grandes
profundidades y por tanto a su crecimiento que suele ser ms lento al aumentar la presin.
La presin hidrosttica elevada
- Disminuye la capacidad de fijacin Enzima - Sustrato
- Produce interferencias en la sntesis de protenas
- Afecta el transporte a nivel de membrana
Mecanismos de adaptacin
-Plegamiento especial de las protenas enzimticas.
-Mayor proporcin de cidos grasos insaturados en la membrana plasmtica
-Cambios en protenas estructurales de la pared celular
-Cambios en las protenas de transporte
-En Gram negativas se dan cambios en la composicin de protenas de la membrana
externa.

EFECTO DE LAS RADIACIONES


Radiaciones ionizantes: rayos x. Rayos gamma y csmicos
-Efecto letal por la Ionizacin del agua y otras sustancias. La ionizacin del agua produce radicales
hidroxilo que reaccionan con el ADN, entre otras macromolculas provocando roturas en ambas cadenas.
-Mutagnesis indirecta a causa de la ionizacin
Radiaciones ultravioleta
-Efecto letal o mutagnico dependiendo de su longitud de onda.
-Generan fotoproductos (molculas modificadas) tales como dmeros
el ADN), fotoproducto de la endoesporas o hidratos de pirimidina.
-Las bacterias disponen de una serie de mecanismos para reparar el ADN
Luz visible

de

pirimidina

(en

-Si es muy intensa provoca fotooxidaciones en protenas y cidos nucleicos debido a la absorcin de
energa por molculas tales como riboflavinas, porfirinas o citocromos. Tambin puede generar Oxigeno
singlete.(1. Crecimiento microbiano: concepto y consideraciones generales, n.d.)

Bibliografa:
1. Crecimiento microbiano: concepto y consideraciones generales. (n.d.). Retrieved June 3, 2015, from
http://www.diversidadmicrobiana.com/index.php?
option=com_content&view=article&id=182&Itemid=225