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[INFORME DE BIOQUIMICA PRACTICA N.

2]

DE 2015

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO


FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA: MEDICINA
CTEDRA: BIOQUMICA PRCTICA II
DOCENTE: DRA. ROSA ELISA CRUZ
PERIODO ACADEMICO:
MARZO - AGOSTO 2015
DATOS GENERALES:
SEMESTRE: SEGUNDO PARALELO: B
GRUPO:

C
1. ATACUSHI ROSERO SHIRLEY MICHELLE
2. FIALLOS CASTILLO PAMELA PRISCILA (COORDINADOR)
3. PATIO BRAVO KARLA VANESSA
4. MEDINA GAVIDIA KAREN STHEFY

INFORME No. 2
FECHA DE REALIZACIN DE LA PRCTICA: Martes 19 de mayo de 2015
FECHA DE PRESENTACIN DEL INFORME: Martes 26 de mayo de 2015

[INFORME DE BIOQUIMICA PRACTICA N.2]

DE 2015

1. TEMA: Determinacin cuantitativa de Glucosa Basal suero sanguneo


2. OBJETIVO(S)
2.1 OBJETIVO GENERAL
Cuantificar adecuadamente la concentracin de glucosa basal en suero sanguneo..
2.2 OBJETIVOS ESPECIFICOS
Identificar el mtodo de anlisis utilizado en esta determinacin.
Conocer los valores de referencia para glucosa en suero sanguneo en ayunas.
Calcular la concentracin de glucosa en una muestra de suero obtenido.
Interpretar los resultados obtenidos y correlacionarlos con su importancia

biomdica.
Expresar los resultados obtenidos en unidades SI (mmol/L).
Interpretar los trminos linealidad y lmite de deteccin para esta determinacin.
Realizar diluciones de suero sanguneo de ser necesario con solucin salina.

3. FUNDAMENTO TEORICO

La glucosa es el carbohidrato ms importante en los mamferos, por ser su principal


fuente de energa y, la nica en el feto y los tejidos glucodependientes (retina, eritrocitos
y el epitelio germinativo de las gnadas). Adems de esta vital funcin tiene otra de
gran importancia, por ejemplo: puede almacenarse como glucgeno, se puede
transformar en lpidos, origina la ribosa para los cidos nucleicos y puede formar
complejos con protenas.
La glucosa es derivada de la degradacin de los carbohidratos, incorporados a travs de
la dieta diaria y regulada a travs de los procesos de gluconeognesis (sntesis endgena
a partir de aminocidos y otras sustancias) y glucogenolisis (degradacin del depsito
de glucgeno heptico).
El nivel en sangre se mantiene a travs de la ingesta y de hormonas reguladoras como la
insulina, glucagn y epinefrina. Las determinaciones de glucosa se realizan en sangre
total, Plasma, Suero, Lquido Cefalorraqudeo, Lquido Pleural y orina.
REACCIONES QUIMICAS DE LOS MONOSACARIDOS
Los monosacridos tienen un grupo aldehdo

o una cetona y varios hidroxilos;

consecuente con ello los cambios qumicos a los que estn sujetos se relacionan con las

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transformaciones de estas funciones: se ven afectados por los cidos, bases, las altas
temperaturas y los agentes oxidantes y reductores que provocan su isomerizacin,
enolizacin, deshidratacin oxidacin , etc.
Bases: Segn la concentracin que se emplee, los hidroxidos inducen diversas
transformaciones en los monosacridos; en soluciones dbiles provoca enolizacin y
aun fragmentacin del azcar, a las que pueden seguir reacciones secundarias.
cidos: La isomerizacin de los azcares en condiciones cidas es muy lenta en
comparacin con la que se efecta con las bases; la enolizacin de los azcares es
lenta tambin en condiciones cidas. Sin embargo las reacciones de deshidratacin
son ms rpidas y se aceleran ante altas temperaturas produciendo derivados
furanos.
Altas temperaturas: Las altas temperaturas aceleran todos los cambios que sufren
los monosacridos en condiciones tanto cidas como alcalinas, pero a pH neutro
catalizan las reacciones de caramelizacin y de oscurecimiento no enzimtico.
Otras reacciones: Existen reacciones qumicas o enzimticas de reduccin y de
oxidacin en las que interviene el grupo aldehdo de los monosacridos, que se
transforma en su correspondiente alcohol primario o en cido carboxlico,
respectivamente.
METODO DE ANALISIS: ENZIMTICO COLORIMTRICO, PUNTO FINAL
CONDICIONES DE REACCION: COLOR PROPORCIONAL A LA
ABSORBANCIA
GLUCOSA
En la reaccin de Trinder, la glucosa es oxidada a D-gluconato por la glucosa
oxidasa (GOD), con formacin de perxido de hidrgeno. En presencia de
peroxidasa (POD), el fenol y la 4-minoantipirina (4-AA) se condensan por accin
del perxido de hidrgeno, formando una quinonaimina roja proporcional a la
concentracin de glucosa en la muestra.

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En muestras hemolizadas las enzimas liberadas de los hemates originan una


disminucin de la tasa de glucosa presente, obtenindose valores bajos falsos.
Adicionalmente la catalasa presente compite con la peroxidasa por el perxido de
hidrogeno dando as mismo valores errneo bajos.

INTERFERENCIAS:
-

Lipemia puede afectar los resultados.


Bilirrubinas (>10mg/dL) puede afectar los resultados.
Hemoglobina (>1g/dL) puede afectar los resultados.
VALORES DE REFERENCIA
En suero o plasma en ayunas
70-105 mg/dL (3,89Adultos

5,83mmol/L)
60-110mg/dL (3,33-

Nios
Neonato

6,11mmol/L)
40-60mg/dL (2,22-

3,33mmol/L)

SIGNIFICADO CLINICO
Un aumento anormal en la tasa de glucosa sangunea, conocida como
hiperglucemia, puede estar asociado con la Diabetes Mellitus y con la
hiperactividad de las glndulas (adrenales, tiroides o pituitaria).
La hipoglucemia o disminucin anormal por debajo de la tasa hallada en ayunas, se
observa en casos de sobredosis de insulina, tumores secretores de insulina,
hipopituitarismo, enfermedad de Addison, mixedema y condiciones que interfieren
con su absorcin.

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La determinacin de glucosa en sangre, es una prueba clave para evaluar y


diagnosticar desrdenes relacionados con el metabolismo de los carbohidratos.
VALORES DE REFERENCIA
Plasma.
MTODO:
Enzimtico colorimtrico, punto final reactivos:
EQUIPOS
Centrifugadora
Espectrofotmetro
REACTIVOS
Suero o plasma heparinizado libre de hemlisis, en ayunas.
La glucosa es estable unas 24 horas a 2-8C, cuando el suero o el plasma se
separan dentro de los 30 minutos posteriores a la extraccin.
Agua destilada
Solucin salina
PROCEDIMIENTO
-

Equilibrar reactivos y muestras a temperatura ambiente


Pipetear en los tubos rotulados:

TUBOS

BLANCO

PATRON

MUESTRA

(STANDARD)
(SUERO)
Reactivo
1mL
1mL
1mL
Standard
10L
Muestra(Suero)
10L
Mezclar y reposar los tubos 10 minutos a temperatura ambiente cinco minutos
a 37C.

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Leer la absorbancia (A) del patrn (standard) y de la muestra frente al blanco del

reactivo. El color es estable 2 horas protegido de la luz.


Calcular la concentracin de glucosa mg/dL, Para expresar los resultados en

unidades SI aplicar: mg/dL*0.0555=mmol/L


Muestras con concentraciones superiores a 500mg/dL deben diluirse 1:4 con

solucin salina y repetir el ensayo. Multiplicar los resultados por 4.


- Lmite de deteccin=0.63mg/dL
- Linealidad= 500mg/dL
4. CALCULOS
Absorbancia B: 0,292 U/L
Absorbancia del Estndar: 0,347 U/L
Absorbancia Muestra 1: 0,268 U/L
Absorbancia Muestra 2: 0,234U/L
Concentracin de la glucosa basal = A muestra x C estndar
A estndar
Concentracin de la glucosa basal =

0.268
0.347

Concentracin de la glucosa basal = 77,233 mg/dl

5. RESULTADOS Y DISCUCIONES
Datos del Paciente
Nombre: Mara Irene Cumbicos Santn
Edad: 35 aos
Sexo: Mujer
Fecha de anlisis: Martes 19 de mayo de 2015
Hora: 09h00 am
Tipo: Glucosa
Muestra: Suero
Ayunas: Si
Antecedentes Familiares: Diabticos
Patologia en especial: Ninguna

100 mg
dl

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Los resultados de los anlisis realizados demuestran una concentracin de glucosa


dentro de los valores normales.
OBSERVACIONES

Se observ que la muestra de sangre obtenida de personas con diabetes tena

un tono mucho ms oscuro de las personas sin esta patologa


Observamos que al mezclar el reactivo con el plasma dio un tono rojo claro.
6. CONCLUSIONES
Al terminar esta prctica determnanos que el aumento o disminucin de los
valores referenciales de glucosa pueden indicar una patologa como la
diabetes

Tras tomar la muestra de sangre y luego de centrifugarla fue posible obtener


el suero necesario para realizar la practica

La glucosa es un monosacrido con frmula molecular, misma que la


fructosa pero con diferente posicin relativa de los grupos -OH y =O

RECOMENDACIONES

Es importante tomar las medidas de precaucin correctas por lo que se sugiere

usar bien las herramientas del laboratorio ya que puede alterar los resultados
Se debe pipetear de manera correcta pues el resultado depende mucho de cmo

se pipetee la muestra.
Para obtener la muestra de sangre el paciente obligatoriamente se debe encontrar

en ayunas
7. CUESTIONARIO
8. ANEXOS

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