DETERMINACIN DE TRIGLICERIDOS EN SUERO

TEMA DE DISCUSIN: NDICE DE MASA CORPORAL Y CLASIFICACIN AL

PACIENTE SEGN EL GRADO DE OBESIDAD
Los triglicridos son esteres de cidos grasos, al ser hidrolizados forma glicerol y
cidos grasos libres. Los triglicridos son acilgliceroles, un tipo de lpidos formados
por una molcula de glicerol, que tiene esterificada sus tres grupos hidroxilo, por tres
cidos grasos saturados o insaturados. La determinacin de triglicridos forma parte
habitualmente del perfil lipdico utilizado para identificar el riesgo de desarrollar
enfermedad cardiaca. Los niveles de triglicridos varan con la edad, y de la ingesta de
alimentos previo al examen. La medicin es ms precisa si el ayuno es de 12 horas
previas al examen. El valor normal es de 150 mg/dL. Se recomienda que para los que
sufren problemas cardiacos, los niveles de esta sustancia deben ser inferiores a los
100 mg./dl.
Fundamento del Mtodo: Lipasa hidroliza triglicridos a glicerol y cidos grasos, el
glicerol es fosforilado por ATP en presencia de kinasa glicerol para producir glicerol-3fosfato (G3P) y adenosina-5-difosfato. El G3P es entonces convertido a
dihidroxiacetona fosfato (DHP) y peroxido hidrogenado por oxido glicerofosfato (GPO).
El peroxido de hidrogenado reacciona entonces con 4-aminoantipirina (4-AAP) y 3hidroxi-2, 4, 6-cido tribomobensoico (TBHB) en reaccin catalizada por peroxidasa
para producir un tinte quinoneimino de color rojo, la intensidad de color a 540 nm es
directamente proporcional a la concentracin de triglicridos en suero.
DETERMINACIN DE COLESTEROL TOTAL EN SUERO
El colesterol es un lpido anfiptico que se encuentra en los tejidos y en las
lipoprotenas plasmticas como colesterol libre o ster de colesterol. Es un
componente esencial de las membranas celulares. Los niveles de colesterol total en
sangre varan desde 140 mg/dL en jvenes, 200 mg/dL en adultos y adulto mayor, sin
embargo existe bibliografa que indica el lmite para los adultos mayores de 250
mg/dL. Se sabe que el riesgo de enfermedad cardiaca coronaria es tres veces mayor
en varones adultos cuando los niveles son mayores de 230 mg/dL y aumenta a 6
veces en individuos con ms de 260 mg/dL de colesterol srico; de aqu la importancia
del control de los niveles de colesterol sanguneo.

Fundamento: Inicialmente los esteres de colesterol son hidrolizados por la colesterol

ster hidrolasa en colesterol libre y cidos grasos. El colesterol libre es oxidado por la
colesterol oxidasa generando en el medio de reaccin colest-4-en-3-ona y perxido de
hidrgeno; este ltimo por medio de la peroxidasa y en presencia de 4-amino fenazona
y fenol forma un complejo coloreado de color rojiso, directamente proporcional a la
concentracin de colesterol que se mide a una longitud onda de 520 nm.
DETERMINACIN DE PROTENAS TOTALES Y ALBUMINA EN SUERO
Las protenas son compuestos orgnicos macromoleculares, ampliamente distribuidos
en el organismo y esenciales para la vida. Actan como elementos estructurales y de
transporte y aparecen bajo la forma de enzimas, hormonas, anticuerpos, factores de
coagulacin, etc.
Las protenas constituyen la mayor porcin de solutos en el plasma. Las protenas del
suero se dividen en dos fracciones Albmina y Globulina. La albmina representa el
ms abundante constituyente de las protenas, mientras que las globulinas son un
grupo heterogneo de componentes como las inmunoglobulinas, complemento,
enzimas, factores de coagulacin, hormonas y protenas de transporte especficas.
Las albuminas tiene como funciones la de permitir el transporte de cidos
grasos, hormonas

esteroides, bilirrubina, catecolaminas, que en forma libre son

insolubles en medio acuoso.

Los ensayos de protenas totales son tiles tambin en la deteccin de
hipoproteinemia observada en la mal nutricin, enfermedades renales asociadas con
prdida de protenas, edema, hemorragias, procesos malignos y condiciones
patolgicas. Mientras que en otras como mieloma mltiple, endocarditis bacteriana y
hemoconcentraciones de diversos orgenes, se observan hiperproteinemias.
PLASMA: es la fraccin lquida y a celular de la sangre. Est compuesto por agua el
90% y mltiples sustancias disueltas en ella. De stas las ms son las protenas.
Tambin contiene glcidos y lpidos, as como los productos de desecho del
metabolismo. Es el componente mayoritario de la , puesto que representa
aproximadamente el 55% del volumen sanguneo total. El 45% restante corresponde a
los elementos formes (tal magnitud est relacionada con el hematocrito).

Fundamento: Los mtodos comnmente utilizados se basan en la unin de albmina

a colorantes o indicadores, siendo el ms comn el que utiliza verde de bromocresol.
El aumento de absorbancia a 620 nm respecto del blanco de reactivo, es proporcional
a la cantidad de albmina presente en la muestra.
La determinacin de protenas se basa en la Reaccin de Biuret, en el cual los enlaces
peptdicos de las protenas reaccionan con el in cprico, en medio alcalino, para dar
un complejo color azul-violeta con mximo de absorcin a 540 nm. El color formado se
mide colorimtricamente, cuya intensidad es proporcional a la concentracin de
protenas totales en la muestra.

OBSERVA EL SEDIMENTO URINARIO EN EL MICROSCOPIO Y DETERMINACIN

DE SU COMPOSICIN BIOQUMICA POR MEDIO DE TIRAS REACTIVAS
La orina es un de los principales lquidos biolgicos por los cuales se eliminan
grandes cantidades de desechos metablicos, siendo el renal la principal va de
excrecin. Los riones tienen un lmite para la filtracin y reabsorcin de las sustancias
componentes del plasma sanguneo: este lmite es el umbral. As cuando ciertas
sustancias exceden este umbral, no se absorben y se eliminan por la orina. Por
ejemplo la glucosa tiene un lmite de reabsorcin que equivale a 180 m% en sangre
cuando excede este valor, el rin ya no es capaz de reabsorber la glucosa, de modo
que el excedente se elimina apareciendo en la orina. Por otro lado, existen sustancias
que no tienen umbral, es decir que una vez filtradas no son reabsorbidas. Este es el
caso de la creatinina y creatina.
RECOLECCIN: Se prefieren muestras al inicio de la maana porque estn ms
concentradas por la retencin de toda la noche en la vejiga. La muestra se obtiene
mediante captura o cateterizacin, La orina se recolecta en un recipiente limpio y seco
con una tapa bien cerrada. Se analiza en la primera hora de la recoleccin o se
mantiene refrigerada de 2 a 8C durante no ms de de 8 horas antes del anlisis.
ALTERACIONES EN EL METABOLISMO DE LAS PURINAS Y LAS PIRIMIDINAS
Las purinas (adenina y guanina) y las pirimidinas (citosina, timina, uracilo) tienen
funciones esenciales en la replicacin del material gentico, transcripcin gnica,
sntesis de protenas y metabolismo celular. Los trastornos que implican anomalas en

el metabolismo de los nucletidos comprenden desde enfermedades relativamente

frecuentes, como gota hiperuricemia, en las que existe incremento de la produccin o
alteracin de la eliminacin de un producto final del metabolismo de las purinas, el
cido rico, hasta deficiencias enzimticas raras que afectan a la sntesis o
degradacin de las purinas y las pirimidinas. El mejor conocimiento de estas vas
bioqumicas ha conducido, en algunos casos, a establecer formas especficas de
tratamiento, como el empleo del allopurinol para reducir la produccin de cido rico.
DETERMINACION DE ACIDO URICO EN SUERO
En algunos vertebrados incluidos el hombre, el producto final de la degradacin de las
purinas es el cido rico. Las purinas principales, adenina y guanina se convierten
primero en xantina, la que es oxidada a cido rico por accin de la xantina oxidasa.
En la sangre, el cido rico se encuentra bajo la forma de urato mono sdico, que es
relativamente insoluble en agua, lo que hace que precipite y cristalice en la orina
formando clculos renales y lesionando el rin. El cido rico tambin puede
depositarse en los tejidos cartilaginosos provocando la enfermedad de la gota. En esta
prctica se realiza la determinacin enzimtica de cido rico en suero.