Bioingeniera

Determinacin del coeficiente de

transferencia de oxigeno
Edgar Rodrguez Garca, Osiris Jair Patio Chvez, Jacob Correa Soto, Viviana Yaneli
Ramirez Carrazco, Claudia Jesica Gonzales Gutierrez. Prctica 3. Equipo 2.
Universidad Autnoma de Quertaro. Facultad de Qumica.
Ingeniera en Biotecnologa. Laboratorio de Bioingeniera.
Sexto semestre. Responsable: Dr. Julian Carrillo Reyes . 4 de marzo del 2015.

Contenido

Pgina

I.

Introduccin..2

II.

Conocimientos previos..3

III.

Objetivo3

IV.

Metodologa.3
a. Material y equipo3
b. Reactivos y soluciones.3
c. Requerimientos de seguridad3
d. Disposicin de residuos..3
e. Procedimiento..3
f. Diseo experimental.3

V.

Resultados6
a. Clculos..6

VI.

Conclusiones..14

VII.

Bibliografa..15

Introduccin:
En bioprocesos aerobios el oxgeno es un sustrato clave debido a su baja solubilidad en
soluciones acuosas, por lo que necesita de un suministro continuo. La tasa de
transferencia de oxgeno (OTR) debe ser conocida y predicha para lograr un diseo y
funcionamiento ptimo y el escalamiento del biorreactor. La concentracin de oxgeno
disuelto en una suspensin de microorganismos aerobios; depender de la tasa de
transferencia de oxgeno de la fase gaseosa a la lquida, la velocidad en la que el oxgeno
es transportado a las clulas y en la tasa de consumo de oxgeno (OUR) del
microorganismo para su crecimiento y mantenimiento. (Garca, 2009)
Figura 1. Pasos y resistencias para la transferencia de oxigeno de una burbuja al interior de la celula .

La transferencia de masa gas-lquido en un proceso biotecnolgico

est fuertemente influenciada por las condiciones hidrodinmicas
del biorreactor. Estas condiciones son conocidas por ser una
funcin de disipacin de energa que depender de las condiciones
de operacin, las propiedades fisicoqumicas del cultivo, los
parmetros del biorreactor y la presencia de clulas consumidoras
de oxgeno. (Garca, 2009)
Los biorreactores de tanque agitado y de columna de burbujas son Figura 2. El KLa es un factor
ampliamente utilizados en una gran variedad de bioprocesos limitante en el escalamiento
de un proceso que implique
(como el tratamiento de aguas residuales). Estos proporcionan cultivo en biorreactores.
altos valores en la tasa de transferencia de masa y calor. En estos
sistemas un elevado nmero de variables afectan la transferencia de masa, los ms
2

relevantes son la velocidad de agitado, el tipo y nmero de agitadores y la tasa de flujo del
gas utilizado. (Garca, 2009)
La transferencia de oxgeno es a menudo el factor limitante de la velocidad de un
bioproceso aerbico debido a la baja solubilidad del oxgeno en el medio. La medicin y la
prediccin correcta del coeficiente volumtrico de transferencia de masa (KLa), es un paso
crucial en el diseo, operacin y escalamiento de biorreactores. (Garca,2009)
Conocimientos previos
N/A
Objetivos
En la presente practica de determinara el valor del KLa del oxigeno en un biorreactor
aerobio bajo diferentes condiciones, y con el cual se establecer el ndice de capacidad de
aireacin del mismo.

Metodologa
Material y equipo
Biorreactor applikon con control de velocidad de agitacin
Sensor de oxgeno disuelto (OD)
Controlador de flujo de gas
Reactivos y soluciones
Sulfito de sodio (67 mg/L)
Cloruro de cobalto (0.6 mg/L)
Requerimientos de seguridad
Guantes
Disposicin de residuos
N/A
Procedimiento y diseo experimental
1er Paso. Preparacin del reactor.
Llene el reactor a un volumen de trabajo de 3 litros, ajustando el control de temperatura a
30 C. Asegurndose que el sensor de OD este sumergido a la altura correcta. Ajustar el
flujo de aire que se indica en el paso tres, no conectar al reactor hasta completar el paso
dos.
3

2do Paso. Desaireacin qumica.

Se agregan 1.5 ml de la solucin de cloruro de cobalto y 6 ml de la solucin de sulfito de
sodio para desplazar el OD en el reactor, agite a 200 rpm siguiendo la concentracin de
oxigeno cada 20 segundos hasta llegar a cero.
3er Paso. Evaluacin de factores que afectan la transferencia de oxgeno.
Una vez que la concentracin de OD llegue a cero en el paso dos, inicie la aireacin y la
agitacin siguiendo las condiciones que se indican en la siguiente tabla. Registre la
concentracin de OD cada cinco segundos hasta llegar a la saturacin.
Tabla 1.Parmetros para cada anlisis de transferencia de oxgeno y equipo responsable.

Equipo
Equipo 3
Equipo 3
Equipo 5
Equipo 5
Equipo 1
Equipo 1
Equipo 2
Equipo 4

Agitacin
(rpm)
200
300
400
500
300
300
300
500

Aireacin
(Laire/Lreactor/min)
0.9
0.9
0.9
0.9
1.5
0.7
0.5
1.5

Viscosidad
(cP)
1
1
1
1
1
1
1
1.5

Segn las indicaciones anteriores nuestro equipo (equipo 2) realizo el procedimiento con
los parmetros que la tabla indico, el siguiente diagrama de flujo representa el
procedimiento detallado y las pequeas variaciones que realizamos.
Llenar el reactor con agua de la llave
a un volumen de trabajo de 3 L.

No se ajust el control de temperatura

ya que sera muy tardado sin embargo
se asegur que el sensor de OD
estuviera sumergido a la altura
correcta.

Agregar 1.5 ml de la solucin de

cloruro de cobalto y 6 ml de la
solucin de sulfito de sodio para
desplazar el OD en el reactor.

Agitar a 200 rpm siguiendo la

concentracin de oxigeno cada 20 o
10 segundos dependiendo de las
condiciones hasta llegar a cero.

Ajustar el flujo de aire para el caso

de cada equipo (1.5 L/min) pero an
sin
conectarlo
al
reactor.
Posteriormente se ajusto el flujo a
las condiciones de la tabla 2.

A partir de que llegue a cero iniciar

la aireacin y la agitacin siguiendo
las condiciones que indica la tabla 1
y con el flujo que se haba
establecido.

Registrar la concentracin de OD
cada veinte segundos hasta llegar
a la saturacin (valor de OD igual
a 5)

Resultados y clculos
Grafica de la concentracin, el porcentaje de OD en funcin del tiempo (considerando
como 100% la concentracin de OD en la saturacin), desde la desaireacin qumica hasta
la saturacin en cada una de las condiciones evaluadas. Sobreponga las lneas en una sola
grfica
Tabla 2. Condiciones para llegar a la saturacin

Equipo

Agitacin
(rpm)

Aireacin
(Laire/Lreactor/min)

Viscosidad
(cP)

Flujo de gas
(L/min)

Equipo 3
Equipo 3
Equipo 5
Equipo 5
Equipo 1
Equipo 1
Equipo 2
Equipo 4

200
300
400
500
300
300
300
300

0.9
0.9
0.9
0.9
1.5
0.7
0.5
1.5

1
1
1
1
1
1
1
15

2.7
2.7
2.7
2.7
4.5
2.1
1.5
2.7

Figura 3. Curva de concentracin del porcentaje de oxgeno en funcin del tiempo

100

% OD

80
60
40
20
0
-150

-20

50

250

450

650

850

1050

1250

Tiempo (s)
300 rpm 4.5 flujo

300 rpm 2.1 flujo

300 rpm 1.5 flujo

200 rpm 2.36 flujo

300 rpm 2.36 flujo

500 rpm

400 rpm

500 rpm

Como se puede observar existe una gran relacin entre el tiempo que tarda la desairacin
qumica con las rpm y la viscosidad del liquido, observamos que las pruebas de 300 rpm
flujo de 1.5 y con la de 500 rpm flujo 2.7 ya que existe una diferencia entre estas dos
pruebas de 150 segundos.

Considerando la siguiente ecuacin

Donde el valor a condiciones de laboratorio es es igual a 10 mg/L y es el valor de OD en

el seno del lquido, la ecuacin anterior es una recta de 1

vs t (h) con

pendiente igual a - . Calcular el para cada una de las condiciones evaluadas.

Se obtiene el grafico sustituyendo en el eje de las ordenadas la ecuacin 1

correspondiente con cada evaluacin en funcin del tiempo y la misma herramienta de

Excel entrega la ecuacin de la recta y obtenemos la pendiente que es igual al valor de la
para cada evaluacin.
Tabla 3. Valores de obtenidos de las diferentes condiciones

Valor

0.00091
0.00037
0.00041
0.00066
0.00078
0.00208
0.0012
0.00185

Equipo Movimiento
(rpm)
1
1
2
3
3
4
5
5

300
300
300
200
300
300
400
500

Viscosidad Flujo de
Aireacin
(cP)
aire
(Laire/Lreactor/min)
(L/min)
1
4.5
1.5
1
2.1
0.7
1
1.5
0.5
1
2.7
0.9
1
2.7
0.9
15
2.7
1.5
1
2.7
0.9
1
2.7
0.9

Figura 4. Representacin de los datos obtenidos por parte del equipo 1 a 300 rpm y flujo aire de 4.5
0
-0.1 0
-0.2

100

200

300

400

500

600

700

800

900

KLa

-0.3
-0.4
-0.5
-0.6
-0.7
-0.8
-0.9

y = -0.00091x - 0.09760
R = 0.95226

Tiempo (s)

Figura 5. Representacin de los datos obtenidos por parte del equipo 1 a 300 rpm y flujo aire de 2.1
0
-0.1 0

100

200

300

400

500

600

700

800

-0.2

KLa

-0.3
-0.4
-0.5
-0.6
-0.7
-0.8

y = -0.00037x - 0.39656
R = 0.35929

Tiempo (s)

Figura 5. Representacin de los datos obtenidos por parte del equipo 2 a 300 rpm y flujo aire de 1.5
0
-0.1 0

100

200

300

400

500

600

700

800

900

1000

-0.2

KLa

-0.3
-0.4
-0.5
-0.6
-0.7
-0.8
-0.9
300 rpm y 1.5 flujo

Tiempo (s)
Lineal (300 rpm y 1.5 flujo)

y = -0.00041x - 0.30808
R = 0.29087

Figura 7. Representacin de los datos obtenidos por parte del equipo 3 a 200 rpm y flujo aire de 2.7
0.2
0.1
0

KLa

-0.1 0
-0.2

200

400

600

800

1000

1200

1400

-0.3
-0.4
-0.5
-0.6
-0.7
-0.8

y = -0.00066x + 0.080
R = 0.964

Tiempo (s)

Figura 8. Representacin de los datos obtenidos por parte del equipo 3 a 300 rpm y flujo aire de 2.7
0
-0.1 0

100

200

300

400

500

600

700

800

900

-0.2

KLa

-0.3
-0.4
-0.5
-0.6
-0.7
-0.8
-0.9

y = -0.00078x - 0.129
R = 0.807

Tiempo (s)

Figura 9. Representacin de los datos obtenidos por parte del equipo 4 a 300 rpm y flujo aire de 2.7
0
0

50

100

150

200

250

300

350

400

-0.2

-Kla

-0.4
-0.6
-0.8
-1

Tiempo [s]

y = -0.00208x - 0.22381
R = 0.86563

Figura 10. Representacin de los datos obtenidos por parte del equipo 5 a 400 rpm y flujo aire de 2.7
0

KLa

-0.2

100

200

300

400

500

600

-0.4
-0.6
-0.8
-1

y = -0.00120x - 0.22881
R = 0.92599

Tiempo (S)

Figura 11. Representacin de los datos obtenidos por parte del equipo 5 a 500 rpm y flujo aire de 2.7
0
-0.1 0

50

100

150

200

250

300

350

-0.2
-0.3
KLa

-0.4
-0.5
-0.6
-0.7
-0.8
-0.9
-1

Tiempo (S)

y = -0.00185x - 0.25500
R = 0.90898

Preguntas
Cules son las etapas de transferencia de oxgeno en un biorreactor?

Este fenmeno ocurre en 3 etapas. Primero las molculas de gas se transfieren a la

superficie del lquido, resultando en condiciones de saturacin o de equilibrio en la
interface. La velocidad de trasferenciaes muy rpida y la pelcula de gas-lquido es muy
fina, estimada de, por lo menos, tres molculas de espesor. En la segunda etapa las
molculas de oxgeno atraviesa esta pelcula por difusin molecular. En la tercera, el
oxgeno se dispersa en el lquido por difusin y conveccin.
El efecto de la turbulencia en el mecanismo de la transferencia de oxgeno es crtico. En
condiciones de reposo o de flujo laminar, la masa de oxgeno transferida es controlada por
la difusin molecular a travs de la pelcula que permanece constante (etapa 2).
10

En condiciones de turbulencia, se produce una ruptura de la pelcula y la masa de oxgeno

transferida es controlada por la velocidad de renovacin de la pelcula. Esta velocidad de
renovacin de la interface puede definirse como la frecuencia a la cual un lquido de
concentracin Cs (concentracin de saturacin del gas en el lquido mg/l) est siendo
reemplazado por un lquido de concentracin CL (Concentracin de oxgeno en el lquido
mg/l)
Considerando la pregunta anterior, Cmo se define el ?
El podemos decir entonces que es definida como el coeficiente de transferencia de
masa de Oxgeno (OTR) en fase lquida. Donde A ser en rea de la burbuja.
Para condiciones de Equilibrio Discontinuo, con flujo estacionario o semiestacionario, la
ecuacin puede expresarse:

= =

As que es el coeficiente global de trasferencia de oxigeno (h-1), y usualmente ser

empleado para caracterizar equipo de aeracin, y donde V es el volumen del lquido, m3
Como se infiere la ecuacin 1

= ?

Para procesos en lote la ecuacin es la siguiente:

Despejando e integrando obtenemos:

Y as obtenemos la ecuacin:
1

11

Graficar el valor de obtenido en funcin de las rpm (solo aquellos valores con el mismo
flujo de aireacin y viscosidad), ajustar con regresin lineal los datos y obtenga la ecuacin
de la recta. Cul es el efecto de la velocidad de agitacin en el ? Basndose en la
literatura, Cmo influye el tipo de rgimen de mezclado?

Tabla 4. Valores de obtenido en funcin de las rpm

Flujo
aireacin
(L/min)

Viscosidad
(cP)
2.7
2.7
2.7
2.7

1
1
1
1

Valor KLa

rpm

0.00066
0.00078
0.0012
0.00185

200
300
400
500

Figura 12. Valores de graficados obtenidos en funcin de las rpm

0.002

KLa

0.0015
0.001
0.0005
0
150

200

250

300

350
rpm

400

450

500

y = 4E-06x - 0.000
R = 0.918

Existen diferentes tipos de agitadores cuyas finalidades son:

Dispersar el aire en la solucin de nutrientes.
Obtener una temperatura y una concentracin de nutrientes uniforme en todo el
recipiente.
Suspender los microorganismos y nutrientes slidos.
Dispersar lquidos inmiscibles presentes.
Los agitadores rotativos son los ms comnmente utilizados en fermentaciones. El
mezclado de las fases se debe al movimiento de rotacin de un mvil de agitacin, unido a
un eje conectado a un motor elctrico (Scriban, 1985).

12

Entre este tipo de agitadores se encuentran: los mviles de agitacin de gasto radial (las
turbinas Rushton y de paletas encorvadas, los agitadores Spin, de ancla y la paleta), los de
gasto axial (las hlices marinas, de doble flujo y de grandes paletas delgadas y el agitador
de cinta helicoidal) y los de gasto radial y axial (la turbina con paletas inclinadas) (Scriban,
1985).
La turbina de Rushton es el tipo de agitador ms empleado, consta de varias paletas
sujetas a un eje central (4,6 u 8) y el dimetro de esta, es normalmente entre el 30 y el
50% del dimetro del tanque. Se utiliza para la agitacin de lquidos viscosos. La accin de
corte de este tipo de agitador facilita la transferencia de oxgeno al disminuir la
coalescencia de las burbujas (Scriban, 1985; Fieldson, 1988).
Las turbinas de paletas curvas producen el mismo tipo de accin que las Rushton; cuando
la viscosidad del fluido que se agita aumenta, como en el caso de algunas fermentaciones
(antibiticos, polisacridos) se utilizan agitadores de rgimen radial, como el de paletas
grandes, rectangulares o los de ancla; el agitador Spin deriva de este ltimo tipo y est
constituido por cuatro paletas verticales dispuestas en soportes perpendiculares con
libertad de rotacin sobre ellas mismas, en el curso de la fermentacin su posicin angular
es ajustada automticamente a una en la que se logre el menor consumo de energa
posible; con este tipo de agitador se logra reducir el tiempo de mezclado de medios con
viscosidad elevada y, adems, permite una buena transferencia de oxgeno. Las hlices de
paletas grandes delgadas se utilizan para fluidos viscosos ya que pueden utilizarse junto
con un agitador de rgimen radial (turbina Rushton) ambas colocadas sobre el mismo eje
(Scriban, 1985).
Graficar el valor de obtenido en funcin del flujo de aireacin (solo aquellos valores
con rpm y viscosidad), ajustar con regresin lineal los datos y obtenga la ecuacin de la
recta. Cul es el efecto del flujo de aireacin en la ? Basndose en la literatura,
Cmo influye el tipo de difusores que se utilizan en los biorreactores?
Tabla 5. Valores de obtenido en funcin del flujo de aireacin

rpm

Viscosidad
(cP)
300
300
300
300

1
1
1
1

Kla

0.00041
0.00037
0.00078
0.00091

Flujo
aireacin
(L/min)
0.5
0.7
0.9
1.5

13

Figura 13. Valores de graficados obtenidos en funcin del flujo de aireacin

0.001
0.0009
0.0008
0.0007
KLa

0.0006
0.0005
0.0004
0.0003
0.0002
0.0001
0
0

0.2

0.4

0.6

0.8

Flujo aireacin (L/min)

1.2

1.4

1.6

y = 0.00055x + 0.00012
R = 0.78326

Una de las razones principales por las que la disponibilidad del oxgeno en el medio de
cultivo es limitada, est relacionada con su baja solubilidad en soluciones acuosas de
nutrientes. Para superar este inconveniente y evitar que la transferencia de oxgeno sea el
paso controlador para el crecimiento microbiano, vindose afectado el cultivo y el
bioproceso (Garca-Ochoa et al., 2010), se emplean como alternativas convencionales
cambios en la velocidad de agitacin o en el flujo de aireacin o en los sistemas de
distribucin de aire.
Los sistemas de distribucin del aire o tipos de difusores hacen que se incremente la
transferencia de oxigeno por que regulan el rea de contacto entre las fases liquido gas
dependiendo del diseo del difusor, por ejemplo el uso de microburbujeadores que
suministran el oxgeno en burbujas de gas de menor dimetro, incrementando el rea de
contacto entre ste y el medio lquido, favoreciendo as la velocidad de transferencia de
oxgeno (Deckwer y Schumpe, 1993) tambin este sistema comparacin con otros
sistemas de dispersin de gases, producen un menor estrs mecnico sobre las clulas
generando condiciones adecuadas para su cultivo.

Conclusiones
El estudio de los factores que afectan la transferencia de oxgeno en cualquier tipo de
sistema de un biorreactor es fundamental para obtener una optimizacin durante el
desarrollo y produccin de microrganismos. El estudio y entendimiento de Kla, la
viscosidad y la aeracin nos aproxima a que el diseo de los biorreactores, y los
bioprocesos sean mejor aprovechados e ideales para el ambiente de microrganismos
14

Bibliografa.
Garcia F. Gmez E., Bioreactor scale-up and oxygen transfer rate in microbial processes:
An overview. Elsevier; Biotecnology advances, Spain. (2009).

Garca-Ochoa F., Gmez E., Santos V., Merchuk J. 2010. Oxygenuptakerate in

microbialprocesses: Anoverview. BiochemicalEngineeringJournal. 49(3):289-307.
Deckwer W. D., Schumpe A. 1993. Improved Tools forbubblecolumn reactor
design and scale-up. ChemicalEngineeringProcess. 48 (5): 889-911.
Scriban Rene.1985.Biotecnologia, El Manual Moderno, Mxico, 168-2016,233.
Fieldson Gregory. 1988. Fermenter Agitation. Tomado el 2 de marzo de 2015 de:
http://www.esb.ucp.pt/~bungah/ferment/fermentb.htm.

15