Un modelo matemtico simple para Biopolmero Estructurado

(PHB)
Produccin
Tecnologa de produccin econmica para un polmero biodegradable (poli A
hidroxibutirato, PHB) se requiere con urgencia para reemplazar polmeros
convencionales, que han de desventaja inherente de permanecer en el medio ambiente
siempre. Diversos enfoques se han aplicado para mejorar la productividad y reducir el
costo de produccin, que son considerados como los dos problemas principales
asociados a la produccin industrial de PHB. Una de la Ingeniera Enfoques para mejorar
la productividad PHB Podra ser para disear e implementar cultivos fed-batch basados
en modelos para proporcionar la disponibilidad de nutrientes deseables. En la cintica
presente estudio, de crecimiento y almacenamiento biopolmero intracelular de Ralstonia
eutropha cul de estudiado en un proceso de cultivo por lotes. Se present 19,7 g / L de
biomasa y 10,89 g / L PHB con una productividad de 12:18 g / LAH. El efecto de carbono,
nitrgeno, y fosfatos limitaciones e inhibiciones en lo que el crecimiento de estudiado en
detalle.
Un modelo estructurado con limitaciones de crecimiento tpicos y / o posibles inhibiciones
que luego propuesta. El valor de los parmetros del modelo por minimizacin de la
diferencia que encontraron entre el valor experimental y el modelo de simulacin en todos
los puntos de datos y para todas las variables de proceso. Se utilizaron los valores
ptimos de los parmetros modelo de proceso por lotes para resolver Obtenido por
encima de las ecuaciones diferenciales numricamente. La simulacin de datos obtenidos
de esta manera entonces lo compara con los datos experimentales para establecer la
validez del modelo de proceso por lotes. El modelo propuesto, que luego se compara con
la literatura inform modelos matemticos para reconfirmar su exactitud. Validez
estadstica del modelo desarrollado y modelos histricos para describir la cintica
observada experimentales lo que entonces investigado para reforzar la exactitud de lo
simple modelo desarrollado.
Introduccin
PoliA hidroxibutrico (PHB) es un compuesto de almacenamiento intracelular que
proporciona una reserva de energa en varios microorganismos (1, 2). Las bacterias se
acumulan PHB cuando un nutriente esencial: tal como nitrgeno o fsforo est presente
en la limitacin de concentracin en la presencia de una fuente de carbono en exceso (2).
En algunos microorganismos este polister puede ser acumulado en cantidades de hasta
morethan 80% de la masa total seca (1, 2). El polmero que primero reconocido y
caracterizado por Lemoigne en 1926 (3). Alcaligenes eutrophus (Ralstonia eutropha ahora
renombrado) es el ms ampliamente empleado para la produccin de PHB bacteria
Debido a que puede acumular una gran cantidad de polmero en un medio sencillo (4).
PHB es un termoplstico biocompatible biodegradable y tiene propiedades fsicas
similares a las de los plsticos normales. El uso de PHB como un plstico biodegradable
es deseable porque el eliminacin de plsticos no biodegradables causa problemas

ecolgicos importantes. Sin embargo, de mucho mayor precio de PHB en comparacin

con el convencional Materiales Plstico ha limitado su uso.
Hasta la fecha diversos mtodos se han utilizado para hacer la produccin de PHB costeeficacia. Para lograr este objetivo la utilizacin de sustrato ms barato (5-8), mejora de los
mtodos de recuperacin de producto (9, 10), la optimizacin de proceso de fermentacin,
y la expresin del opern responsable de la produccin de PHB en otros organismos tales
como: Escherichia coli (11-13 ) son algunas de las tcnicas comunes que se utilizan.
Un enfoque de ingeniera para problema sera tacklethis desarrollar un modelo
matemtico thatwill no slo facilitar la comprensin del sistema, pero as que ayuda en el
diseo del cultivo- fed-batch en nutrientes limitado (s) para mejorar la productividad. This
Will Reducir significativamente la experimentacin laboriosa para optimizar la
productividad. El requisito principal para la bsqueda en el esfuerzo es un robusto
(estructurado) modelo matemtico.
Hay havebeen algunos informes anteriores sobre el modelado de PHB fermentacin
hicieron presentar el comportamiento cintico caracterstica del microorganismo. El
trabajo inicial en el modelado de R. eutropha lo informado por Sonnleitner et al. (14) en la
que los perfiles de fermentacin fueron descritos por funciones dependientes del tiempo
logsticos. En este caso, lo que observ que, al agotamiento de nitrgeno del medios de
comunicacin, el aumento de la biomasa que slo debido a la acumulacin de producto,
PHB. La ecuacin de formacin de producto consisti de crecimiento asociada y trminos
no growthassociated y lo que ms tarde supone que es inhibida por la disponibilidad de
productos de alta (15). Un modelo matemtico que Propuesto por Heinzle y Lafferty (15)
Para Estos hallazgos worin tasa de crecimiento de la cultura que Descrito por una
combinacin de Monod y la cintica sigmoidal:
donde S es la concentracin de sustrato limitante, NH4 +, que se aadi como (NH4)
2SO4.
Ms tarde, se seal lo hizo sustratos por s sola no es el factor limitante fundamental; N /
C, que indica que es un trmino ms amplio que refleja el verdadero impacto en el
crecimiento y formacin de producto por R. eutropha. Sin embargo, el modelo anterior no
incorporar el efecto de un mayor contenido de N / C del caldo de fermentacin en el
crecimiento y la produccin de R. eutropha. Mulchandani et al. (16)
Llev a cabo estudios de inhibicin de sustratos de origen N / C el crecimiento del cultivo
para la fermentacin organotrfico. Propusieron otro modelo (tabla 1), es decir, que
incorpor un trmino para la inhibicin N / C (16). La relacin N / C en Su modelo que, sin
embargo, denota como p
Es as que lo que hizo Sorprendente Mulchandani et al. (16) pasa por alto ciertas
caractersticas importantes de crecimiento y produccin de PHB cintica de la A.
eutrophus. Segn ellos la lnea de productos que tanto el crecimiento y no crecimiento
asociado, pero la estructura del modelo descuid la inhibicin del producto y de un
trmino (KS / (KS + SN)) que actuara como un interruptor de nitrgeno para la produccin
de PHB (Tabla 1 , eq 4).

La tasa de crecimiento de la cultura que supone que siguen una cintica de Monod slo
como oposicin a una combinacin de ambos Monod y la cintica sigmoidal como haba
sido propuesto por Heinzle y Lafferty (15). Raje y Srivastava (17) ms tarde modific la
estructura del modelo propuesto por Heinzle y Lafferty, tomando en cuenta un plazo para
la inhibicin N / C en el crecimiento del componente "activo" de la biomasa (17). Raje y el
modelo Srivastava (17) por lo tanto predecir la produccin de PHB ser al crecimiento
Ambos (dR / dt) y nongrowth- Asociado (k1 (R - R min) - K2P). Al sametime Tambin
incorporan un trmino para la inhibicin del producto en su estructura del modelo.
Utilizaron el modelo ms lotes para simular el cultivo de alimentacin discontinua tomando
el balance de masa alrededor del reactor y las estrategias propuestas de alimentacin
determinado nutriente. Patwardhan y Srivastava entonces reidentificados el mismo
modelo para sus datos experimentales y mejoraron la biomasa y la produccin de PHB
por aplicacin de las estrategias de alimentacin de nutrientes fed-batch (18).
La estructura del modelo propuesto por Mulchandani et al. (16) As lo modificado por
Shahhosseini (19) y se utiliza para el cultivo fedbatch. Dos velocidades de alimentacin de
nutrientes modelo simulado para el cultivo discontinuo alimentado se han diseado y
aplicado por ellos tuvieron como resultado un aumento del 50% y el 150% en la
productividad de PHB, respectivamente, en comparacin con el lote. Sin embargo, el
contenido de PHB mxima final obtenido en el cultivo de alimentacin discontinua que
slo 7,5 g / L. LA
modelo ciberntico para la regulacin coordinada del metabolismo, por lo tanto
stressinduced ha sido desarrollado para predecir el crecimiento y la acumulacin de PHB
en A. eutrophus.
El modelo que basa en la descripcin estructurada de la actividad enzimtica. Este
modelo que de este modo capaz de demostrar la sntesis asociado mixta crecimiento
utilizando la estrategia ptima no lineal (20). El modelo mostr una buena prediccin de la
cintica de fermentacin, pero requiere de parmetros: como el nivel de la enzima inicial y
la saturacin constante de la produccin de la enzima especfica de crecimiento asociada
thatwere supone que se conocen pero no fcilmente comprobable experimentalmente.
Por tanto, un modelo matemtico estructurado ha sido desarrollado para el cultivo mixto
(R. eutropha y bacterias del cido lctico), donde los metabolitos producidos por un
microorganismo fueron asimilados por el otro microorganismo.
Estudios de inhibicin. Los estudios de inhibicin se llevaron a cabo mediante la variacin
de la concentracin del suplente componente inhibitorio, manteniendo la concentracin de
otros componentes de los medios en constante Su valor optimizado. El efecto de
aumentar la concentracin de nitrgeno en el crecimiento de R. eutropha que estudiaron
mediante el control de la tasa de crecimiento inicial en los medios de comunicacin con la
concentracin del nitrgeno que van 12:22-12:45 g / L. "Tiempo corto" experimento lotes
(24 h) se llevaron a cabo en matraces Erlenmeyer de 500 ml que contiene 100 ml de
medio. El nitrgeno
fuente de la que la urea. Despus de la inoculacin con matraces de inculo 5% se
mantuvieron en una incubadora de agitacin (Kuhner Adolf, Alemania) a 30 C y 150 rpm.

Todos los experimentos se realizaron por duplicado y se extrajeron muestras en al

intervalo de 2 h. La tasa de crecimiento especfico para cada experimento que determina
a partir de las mediciones de densidad ptica a 600 nm.
El efecto de la variacin de concentracin de carbono que de una manera similar
Determinado. La concentracin de fructosa que variaba desde 8 hasta 90 g / L mientras
se mantiene otros componentes a su valor ptimo.
Del mismo modo la inhibicin por fosfato que comprueba entre el intervalo de
concentracin desde 2,8 hasta 60,0 g / L, manteniendo de nuevo los otros componentes
en sus valores ptimos.
Mtodos Analticos. La densidad ptica (DO) de la suspensin de clulas adecuadamente
diluido a 600 nm lo que se mide en un espectrofotmetro UVIKON 930 (Kontron
Instruments, EE.UU.). Concentracin de masa celular que Determinado por parcela
estndar de 600 nm OD y la masa celular seca. El sobrenadante obtenido por
centrifugacin (centrfuga Sorvall RC5B) del caldo de cultivo a 10.000 rpm (8944? G)
durante 10 min a 4 C que se usa para sustratos residuales
Anlisis. El sedimento celular obtenido despus de la centrifugacin y se sec lo utiliza
para el anlisis PHB (23). Contenido de PHB en las clulas secas que determin por
cromatografa de gases (cromatgrafo de gases Nucon 5765, Aimil, India) con cido
benzoico como patrn interno; 40 mg de clulas secas que se disolvi en 2 ml de 1,2dicloroetano (DCE) y 2 ml de propanol y se acidific 200 il de patrn interno. La digestin
de las clulas que lleva a cabo en al incubador a 100 C durante 2 h. PHB lo que
convierte as a
el ster proplico del cido hidroxibutrico (HBA). Despus de enfriar a temperatura
ambiente, se aadi 4 ml de agua destilada, y la mezcla se agit durante lo 20-30 s. La
fase ms pesada (DCE-propanol), que se inyecta en la columna del cromatgrafo de gas
(2% Reoplex en Chromosorb).
Fructosa residuales que estima por el mtodo del cido dinitrosaliclico (DNS) (24). El
contenido de nitrgeno amoniacal residual que Determinado .Segn el mtodo Kjeldahl
(25). Fosfato residual en los medios de comunicacin lo
Determinado por un mtodo descrito en la literatura (26).
Biomasa residual (R, g / L), que define como la biomasa total (g / L) menos concentracin
de PHB (g / L).
Optimizacin del modelo y de Procedimiento Simulacin.
El programa de optimizacin para las estimaciones de los parmetros del modelo para la
bsqueda directa de la funcin multivariable que basa en el mtodo original de
Rosenbrock (27) y los programas informticos descritos por Volesky y Votruba (28).
Comparacin de la bondad de ajuste. El modelo propuesto y el modelo fueron reportados
estructurado Comparado bondad Hanes de ajuste mediante la prueba F para la igualdad

de varianzas, .Segn el mtodo empleado por Edwards (29). El valor F-test Calculado
como lo OL donde 2 es la varianza ms grande, igual al error de la suma de cuadrados de
ajuste a la funcin L a los datos / FL; fL es el grado de libertad de OL; OS 2 es la varianza
ms pequea, igual al error de la suma de cuadrados de ajuste a la funcin S a datos /
FS; y f S es el grado de libertad del sistema operativo.
La probabilidad de que el valor observado de F resulta de variaciones aleatorias (varianza
mayor o menor varianza) fue entonces determina a partir de las tablas estadsticas (30).
Resultados y discusin
Cintica de crecimiento de lotes de R. eutropha en un laboratorio Escala biorreactor.
Cintica de lote del eutropha R. bajo limitacin de nitrgeno que de estudiar en un 7-L,
LF-1523 Bioingeniera (Bioingeniera AG, Suiza) biorreactor Contiene 4 L de medios de
comunicacin. El experimento discontinuo lo que hizo por duplicado, y los valores medios
de la biomasa, PHB, y los nutrientes residuales se muestran en la Figura 1. Un total de
55% PHB (P / X), que se acumul en el perodo de cultivo completo (60 h). Aunque
durante los primeros aos la produccin de PHB fase exponencial algunos lo observado,
sobre todo es lo que acumula en las ltimas etapas de crecimiento. Despus de una fase
de retardo de aproximadamente 10 horas, la biomasa aument a 19,7 g / L en 60 horas.
Durante este perodo, doce y cuarenta y nueve g / L de nitrgeno que consume fuera de
un valor inicial de 0,535 g / L, mientras que aproximadamente 30 g / L de fructosa lo
metaboliza. Slo 0,89 g / L de fosfato que consume durante el perodo de cultivo
completo. La sntesis de PHB, producto de inters, se inici despus de 15 h y alcanz
una concentracin final de 10,89 g / L hacia el extremo (60 h)
El rendimiento global (YP / S) de PHB a la fructosa que 0,27 g / g y la productividad de
12:18 g / LAH lo obtiene. La tasa de crecimiento especfico mxima para el cultivo durante
la fase exponencial temprana que encontr para ser 00:22 h-1, que luego disminuy
gradualmente a cero durante las ltimas etapas de la fermentacin Cuando la produccin
de PHB, que en su mximo.
Estudios de inhibicin. Los estudios se llevaron a cabo para verificar la inhibicin sustratos
variando la concentracin del sustrato limitante para comprobar su efecto inhibidor sobre
el crecimiento, manteniendo la concentracin de otros componentes en sus valores
ptimos. Los estudios de inhibicin se llevaron a cabo mediante la variacin de la
concentracin de nitrgeno doce y veintids-12:45 g / L, manteniendo otros componentes
a su valor optimizado. Los experimentos se llevaron a cabo durante un perodo de slo 24
h (fase de crecimiento activo) y se extrajeron muestras cada 2 h. Una parcela de ln (X /
X0) vs tiempo lo trazan para cada concentracin de nitrgeno tomado y tasa de
crecimiento especfico (i) que calcul para cada concentracin.
La tasa de crecimiento especfico que Observado a aumentar a medida que el contenido
de nitrgeno que se increment hasta un valor mximo de 12:26 h-1 a una concentracin
de nitrgeno que obtiene de 00:57 g / L. A partir de entonces una disminucin constante
en el valor de lo Observado en El aumento del contenido de nitrgeno. El valor se
convirti en casi cero por encima de 7,0 g / l de nitrgeno (Figura 2).

Por lo tanto, lo que hizo Observado El aumento del contenido de nitrgeno condujo a la
inhibicin del crecimiento de bacterias en.
Del mismo modo para la fructosa, la tasa mxima de crecimiento especfico (00:28 h-1) lo
que obtiene a 40 g / L. Inhibicin total lo que obtiene a una concentracin de fructosa de
80 g / L (Figura 3).
Finalmente, el efecto de la variacin de la concentracin de fosfato en el crecimiento que
investig mediante la variacin de la concentracin de fosfato en el rango de 2,8 a 60 g / L
(Figura 4). Una tasa de crecimiento especfico mxima de 0.253 h-1 a una concentracin
de fosfato que obtiene de 4,0 g / L. Se observ que, en fosfato concentraciones
superiores a 20 g / L, la inhibicin de crecimiento completo (I) 0) ocurri.
Para dar cuenta de la inhibicin en la cintica de crecimiento de la cultura, expresiones
matemticas (NCA 3-5) para la inhibicin como elegidos por Mulchardoni et al. (16) fueron
tomadas en el presente estudio. En el pasado, Mulchandani et al (16) por lo tanto, haba
tomado las estructuras de modelos anteriores para tener en cuenta para la inhibicin de
cultivo en la produccin de PHB de R. eutropha. Dado que el mecanismo molecular de la
inhibicin no se entiende claramente, lo anterior tres ecuaciones emprica del modelo se
tomaron en esta investigacin por lo que cuenta para la inhibicin de R. eutropha. SIN
EMBARGO, el modelo EQ 4 indica que las clulas son de hecho capaces de crecer
indefinidamente y la inhibicin completa slo se producir a una concentracin infinita de
inhibidor. Los datos experimentales de este estudio indican que la tasa de crecimiento
especfico se convierte en cero en un valor mximo de sustratos la concentracin. POR
LO TANTO apropiado por la ecuacin 4 curva no fue considerado.
El valor del parmetro de modelo en, Sm, m y A para las otras dos ecuaciones se
determinaron ajustando los datos de inhibicin de sustrato a las ecuaciones 3 y 5
utilizando una tcnica de regresin no lineal. La Figura 5 muestra la comparacin de la
tasa de crecimiento especfico vs patrn de sustrato para los dos modelos alongwith los
datos experimentales (variando la concentracin de carbono). Como se muestra, de los
dos modelos, slo el 3 eq que capaz de ajustar los datos razonablemente bien.
La misma tendencia lo obtenido con los datos de inhibicin de fosfatos y concentraciones
de nitrgeno aproximadamente.
Por lo tanto, para describir la cintica de inhibicin (con respecto a C, N, y P)
Matemticamente, el modelo eq 3 Propuesto por Luong lo utiliza (31). Los valores de la
tasa de crecimiento especficas a cada concentracin de componente inhibidor Obtenidos
(fructosa, nitrgeno y fosfato) probaron lo que luego se usa para trazar un grfico entre ln
(1 - II / III) vs loge S. Estos grficos fueron utilizados posteriormente para la estimacin de
Los valores finales de los parmetros a y Sm (Tabla 2). El tipo de relacin entre la I y S,
que se indica por la magnitud de una constante. Una cada inicial lenta en la tasa de
crecimiento seguido de una rpida disminucin a cero se produce cuando a> 1, segn lo
observado en el caso de la fructosa y estudios de inhibicin de fosfato en esta
investigacin. Esta grfica cncava significa dass die sustratos suplente no causa la
inhibicin de inmediato. Hasta una concentracin sustratos particular los aumentos de las
tasas de crecimiento especficas; Afterthat concentracin comienza a disminuir a una tasa

ms lenta primero y luego la tasa de disminucin se hace muy rpido hasta que se
convierte en cero. Cuando un aproxima a la unidad, la tasa de crecimiento sigue una
relacin lineal (31). Esto se observ en el caso de la inhibicin de nitrgeno. La forma de
la curva (Figura 2) por lo tanto indica una inhibicin lineal por encima de un umbral de
concentracin. Este tipo de inhibicin (Aunque emprica en la naturaleza), que por lo
tanto, visto para la fermentacin de zumo de uva etanol por la levadura, donde, encima de
un cierto nivel de etanol inhibe la tasa de crecimiento especfica (32). Los valores Sm
indican la concentracin de los sustratos respectivement que causara la inhibicin
completa del crecimiento. Se encontr en todos los tres casos hicieron los valores Sm
obtenidos fueron mucho mayores que las concentraciones thatwere siendo utilizados en el
experimento. Aunque la bsqueda de altas concentraciones no se alcanzara Cuando la
fermentacin real se lleva a cabo, siendo este valor Sm que incorpor en las ecuaciones
del modelo con el fin de dar cuenta de los sustratos de inhibicin Cuando el modelo es
Furtherwirt
extrapolado de fed-batch o el cultivo continuo de la produccin de PHB.
Modelado. El desarrollo del modelo matemtico basado en lo que los supuestos
siguientes:
(1) Biomasa (X) se compone de dos componentes (R y P): el componente catalticamente
activo (R) se compone de protenas y cidos nucleicos, y la PHB producto (P) es un
componente inerte.
(2) la fructosa y el nitrgeno son el sustrato limitante que afectan el crecimiento y la
produccin de PHB.
(3) La temperatura (30 C) y pH (7.0) del caldo de cultivo se mantiene constante durante
la fermentacin.
Modelo de lote. La cintica de lote en condiciones de cultivo optimizados que utilizan para
el desarrollo del modelo.
Biomasa (X) lo que supone que es estructurado, que tiene dos
componentes (R y P) como sigue:
La tasa especfica de crecimiento (i) del microorganismo que expresa como una funcin
de dos limitacin de nutrientes (nitrgeno y fructosa) concentracin por una relacin
sigmoidal (15):
Con base en los estudios realizados Anteriormente se encontr lo que hizo la presencia
de cualquier nutriente en la concentracin inhibitoria Disminucin del valor total de la tasa
de crecimiento especfico (i), y un plazo de inhibicin de sustratos (3) Por tanto, lo aade
a completar la expresin de crecimiento especfico tasa (i) (7).
Por lo tanto, la ecuacin diferencial general para el crecimiento de la biomasa en el
reactor que

En el modelo actual, el trmino inhibicin en la ecuacin de la tasa de crecimiento

especfico que Expresado como una funcin de carbono y la concentracin de nitrgeno
independiente de simpatia a diferencia de la relacin C / N Mencionado en las obras
anteriores (16, 17). Esto se hizo Debido a que es difcil mantener una relacin especial C /
N A lo largo del experimento, ya que requerira la alimentacin de dos de los nutrientes
continuamente. Ms encima, para la produccin de PHB,
La alimentacin de nitrgeno no puede llevarse a cabo en las ltimas etapas requeridas
Cuando comienza la fase de acumulacin de PHB (3).
Por lo tanto, la inhibicin de lo expresado en funcin de ambos nutrientes, y su efecto
sobre la tasa de crecimiento especfico agrupado que asegur tomando Ambos trminos
en la ecuacin de la tasa de crecimiento (eq 8).
Limitacin y la inhibicin debido a los fosfatos no fue considerado en la ecuacin del
modelo (eq 7), ya que tendra innecesariamente complicado la estructura del modelo.
Ms encima, la concentracin de fosfato Usualmente toma (4,0 g / L) en el cultivo de lotes
es significativamente menor que el valor Sm (18,9 g / L) que se encuentra en esta
investigacin. Ms encima, no mucho encuentra lo fosfatos que consumen durante el
curso de la fermentacin, como se puede ver en este trabajo e investigaciones literatura
anterior, as (18).
La formacin de producto lo observ tanto en el crecimiento y fases estacionarias. As, al
alto contenido de nitrgeno acumulacin de producto de concentracin lo bajo, mientras
que a concentraciones bajas de nitrgeno se acumularon grandes cantidades de
producto.
El trmino no-crecimiento asociado de la sntesis de producto se supone que es una
funcin de los sustratos limitantes de la biomasa residual, R, y del producto, P. Por lo
tanto la tasa de formacin de producto que represent para contener el crecimiento y el
componentes no asociados al crecimiento:

Se ha informado por Heinzle y Lafferty (15) lo hizo en el alto contenido de PHB en las
clulas de la tasa de sntesis de PHB disminuye, lo que ellos describieron como inhibicin
del producto. Para dar cuenta de la inhibicin del producto Haban presentado una
relacin lineal descrito por la ecuacin siguiente:

donde d que la interseccin con el eje de ordenadas y k lo que la pendiente. Un valor

negativo de d indicaron la inhibicin del producto.
Por lo tanto, en el presente estudio es decir, un grfico que dibujado entre (rp / P) y (X /
P). La interseccin con el eje de ordenadas en el grfico dio el valor de d a ser 0,139 y el
valor de k Obtenidos a partir de la pendiente que resulta ser 0.0012. Estos valores indican
claramente thatthere lo que ninguna inhibicin del producto.

Tasa de utilizacin de fructosa que supone que es debido al crecimiento de R, formacin

de P y Mantenimiento (MS1, proporcional a R).

YR / S es el rendimiento de biomasa activa con respecto a la fructosa,

YP / S es el rendimiento de producto con respecto a la fructosa.
A partir de las ecuaciones 9 y 11, se deduce
El nitrgeno que se consume debido al crecimiento de la biomasa catalticamente activo
(R) y para las funciones de mantenimiento de la clula. La tasa de absorcin de nitrgeno
especfico (Q S2) lo que representa por la ecuacin siguiente:
Optimizacin de los parmetros del modelo. Para la estimacin ptima de los parmetros
del modelo, una tcnica de regresin no lineal asistido por un programa de ordenador (28,
33, 34) que se usa para reducir al mnimo las desviaciones entre las predicciones del
modelo y los resultados experimentales de proceso por lotes. Para el clculo de las
predicciones del modelo, el sistema de ecuaciones diferenciales del modelo (NCA 6-16),
que resuelve utilizando al programa de integracin basado en el de Runge-Kutta
Mtodo de cuarto orden. El programa de optimizacin para la bsqueda directa del
mnimo de la funcin multivariable que basa en el mtodo original de Rosenbrock (27).
Los criterios de minimizacin utilizados en el programa que donde SSWR darstellt suma
del cuadrado de Residuos pesado; iyj representan el nmero de puntos de datos
experimentales y nmero de variables, respectivamente; m y n son el nmero total de
nmero variable y total de puntos de datos experimentales, respectivamente; Wj es el
peso de cada uno (el valor mximo de cada variable (fructosa, 40; biomasa, 8,7; PHB,
10,89; nitrgeno, 0535)) Variable; y ij es la diferencia entre el modelo y el valor
experimental (ymodel - yexpt).
Los valores de los parmetros optimizados se dan en la Tabla 3. Las ecuaciones del
modelo (ecuaciones 6-16) descrito anteriormente se simularon en el equipo utilizando los
valores ptimos de los parmetros del modelo. Una comparacin del modelo de
simulacin (smoothline) y los datos experimentales (puntos) se muestra en la Figura 1. El
acuerdo entre el modelo de simulacin y de los puntos de datos experimentales se refleja
claramente.
Modelo de Evaluacin. R. eutropha es eminentemente adecuado para los estudios
cinticos, debido a que crece en el nivel de oxgeno disuelto suficiente sin produccin
significativa de productos de desecho metablicos secundarios (35, 36). El modelo
propuesto lo que en comparacin con el modelo de ecuaciones propuestas por Raje y
Srivastava (17) y por Mulchandani et al. (Tabla 1). Esto se logr mediante la identificacin
los parmetros del modelo mediante el uso de las ecuaciones del modelo de cada modelo
y los datos experimentales de este estudio. Los valores de los parmetros del modelo

(Tabla 3) se obtuvieron de esta manera y los resultados simulados obtenidos a partir de

dos estudios se compararon (Figura 6).
SIN EMBARGO, lo que visto que cuando las ecuaciones modelo propuesto por
Mulchandani et al. fueron utilizados para la simulacin de los datos experimentales de
este estudio, un ajuste apropiado de lo que no obtiene. Es decir, el modelo Mulchandani
No era capaz de explicar la cintica de los datos experimentales.
As, este modelo de estructura que no utiliza para ms comparaciones. Ms encima, el
modelo propuesto por Raje y Srivastava (17) lo que el modelo integral ms reciente
contiene todas las caractersticas de crecimiento y produccin cintica de R. eutropha
propuesto antes. Por lo tanto, cont con los Trminos de inhibicin del producto propuesto
por Heinzle y Lafferty (15) y el efecto de la relacin N / C en la tasa de crecimiento
especfico (como propone Mulchandani et al.
(16)). As, por ms trabajo Esta estructura modelo que utiliza. Los resultados de la
simulacin obtenidos pueden verse en la Figura 6. El modelo propuesto proporciona una
descripcin excelente para la acumulacin de PHB, la biomasa, y el consumo de
sustratos. Por el contrario, el modelo propuesto por Raje y Srivastava (17), que slo capaz
de predecir la cintica de fructosa y nitrgeno razonablemente bien. La acumulacin
dinmica de productos y la biomasa no podra predecirse razonablemente bien. El modelo
Raje y Srivastava (17) tena un plazo de inhibicin en la ecuacin de acumulacin de
producto, pero no se observa inhibicin del producto
en los datos experimentales por lotes como se observ en el presente estudio. Por lo
tanto, los datos experimentales mostraron un aumento continuo en la acumulacin de
producto en comparacin con los valores predichos obtenidos por el modelo de la
literatura, que simula un valor constante de PHB y, en etapas posteriores, una ligera
disminucin de modo. As ecuacin de acumulacin de biomasa lo que una combinacin
de ambos
Monod y la cintica sigmoidal, pero una parcela de I vs. S con los datos experimentales
para todo el sustrato mostr slo un comportamiento sigmoidal. De ah que el modelo que
de nuevo incapaz de explicar los datos cinticos de biomasa observada literatura.
Comparacin de la bondad de ajuste de los dos modelos a los datos experimentales, que
hizo uso de la prueba F para la igualdad de la varianza de confor midad con el mtodo
empleado por Edwards (29). El valor de O2 Obtenido a partir del modelo propuesto
(0.747) Cul significativamente ms bajo que el del modelo Raje y Srivastava (17)
(11:43) Cuando la cintica global de fermentacin PHB lo considerado.
Se ofrece el modelo propuesto para la mejora en el ajuste a los datos en comparacin con
el modelo de la literatura. Por lo tanto, lo que decidi realizar la prueba F para la igualdad
de varianzas entre el modelo propuesto y la literatura modelo.
Las tablas F tabulados para 0:05 y 0,1 niveles de significacin con un fL [numerador] de 1
y FS [denominador] de 4 indican un valor de 7,71 y 4,54 respectivamente. Dado que el

valor F calculado (15:29) lo ms grande que los valores tabulados, se puede concluir que
el modelo propuesto es diferente de la Raje y Srivastava
Modelo (17) a las 00:05 y 12:10 niveles de probabilidad y es mejor para ajuste de los
datos experimentales de este estudio.
Se observ que el modelo propuesto ayud a proporcionar una descripcin matemtica
de los resultados experimentales obtenidos. La tasa de crecimiento de la cultura podra
explicarse en funcin de Tanto la inhibicin y la limitacin de los principales nutrientes. El
modelo desarrollado es una herramienta simple pero muy til para entender el
comportamiento de la microbiana R. sistema eutropha. El modelo se puede extrapolar
Adems al cultivo discontinuo alimentado por teniendo en cuenta la dilucin debido a la
alimentacin de nutrientes (s). Esto se puede entonces utilizar para la simulacin de
varias estrategias de alimentacin por lotes para la mejora de la productividad.
La verificacin experimental de modelo basado cultivos discontinuos alimentados
ayudara en la prestacin de un enfoque ms lgico cultivos fed-batch. Esto minimizara la
experimentacin para aumentar el rendimiento y la productividad de la acumulacin de
PHB.
Era de inters para ampliar an ms la aplicabilidad del modelo propuesto a los datos de
la literatura. POR LO TANTO, la aplicabilidad del modelo propuesto Examinado qu
representa la cintica de lote de R. eutropha informado por Mulchandani et al. (16). Los
resultados de simulacin se presentan en la Figura 7. El modelo propuesto Descrito
realizar adecuadamente la observacin experimental de crecimiento y formacin de
producto de R. eutropha segn lo informado por Mulchandani et al. (16). Esto refuerza
an ms la validez
Estructura propuesta del modelo.
Conclusin
El cultivo de lotes de R. eutropha cont con una biomasa de 19.7 g / L, 10,9 g / L de PHB
y una productividad de 00:18 g / LAH.
Un nuevo modelo matemtico para la acumulacin de PHB sobre lo propuesto basado en
investigaciones detalladas de sustratos limitaciones e inhibiciones por las fuentes de
carbono, nitrgeno y fsforo. El modelo propuesto lo Comparado estadsticamente con el
otro inform modelos estructurados / no estructurados para la produccin de PHB. La
Suma de los cuadrados de error entre los perfiles de las modelos cinticos y los datos
experimentales (de este estudio) lo menos cuando se utilizaron los parmetros estimados
por el modelo como propuesta Comparado Para Raje y el modelo Srivastava (17). Esta
mostraron claramente que el modelo que podr proyecta instalar
los datos de una manera mucho mejor. La bondad del criterio de aceptacin (F-test) y la
comparacin visual de los perfiles de las modelos por lotes y datos experimentales
indicaron que el modelo propuesto que poder explicar la cintica experimentales

observados mucho mejor. El modelo se puede extrapolar a ms cultivos fed-batch,

tomando en cuenta las tasas de dilucin y varios de alimentacin de nutrientes
Las estrategias pueden ser diseados para alta biomasa y la produccin de PHB. Se
espera que las mismas ecuaciones del modelo se pueden volver a identificarse para otras
cepas de R. eutropha para proporcionar una descripcin matemtica del sistema como se
ha demostrada en esta investigacin de modo.