UNIVERSIDAD DE LAS

FUERZAS ARMADAS ESPE

DEPARTAMENTO DE
CIENCIENCIAS DE LA
VIDA Y
AGROPECUARIA

Ingeniera en
Biotecnologa
BIOLOGA ANIMAL II

Nombre: Cristian Roberto Benalcazar Lpez

Nrc: 4327
Fecha: 08 de Agosto del 2015

TEMA: Anlisis Coproparasitario

1.- OBETIVOS
1.1 Objetivo General:
Analizar parsitos presentes en muestras de heces de animales domsticos mediante la
tcnica de Ritchie y de flotacin.
1.2 Objetivos Especficos:

Realizar una adecuada muestra para la aplicacin de los mtodos Aprendidos en

clases.
Analizar las muestras haciendo uso de los protocolos establecidos.
Comparar los dos mtodos de anlisis y determinar segn los resultados
obtenidos cul de los ellos es el ms confiable.
Observar e identificar los microorganismos que existen en las muestras de heces
usando como referencia las caractersticas de los microorganismos existentes en
cada especie.

2.- MARCO TEORICO

Actualmente las enteroparasitosis presentan en el mundo un importante problema de
salud pblica (Dra. Cabrera, 2013). La Organizacin Mundial de la Salud (OMS) estima
que la ascaridiasis produce cuadros clnicos en 214 millones de personas a nivel mundial
la tricocefalosis en 133 y las uncinarias en 96 millones. En el caso de los protozoarios
enteroparsitos, sirven como ejemplo: la giardiasis con una incidencia de 500.000 nuevos
casos anuales, as como la infeccin por Entamoeba histolytica que afecta
aproximadamente a 50 millones de individuos. (Harada, 2008)
Aunque la mortalidad producida por enteroparasitosis es baja, los nmeros totales a nivel
mundial, alcanzan altas cifras como 90.000 decesos para anquilostomiasis, 60.000 por
ascaridiasis y 70.000 por amibiasis. Fuera de estos lamentables efectos, este grupo de
afecciones motiva infecciones crnicas con efectos negativos e insidiosos en el
crecimiento, nutricin y desarrollo psicofuncional de los nios, con especial repercusin
en nias y mujeres. (Garca, 2006)
El estudio en el laboratorio de muestras fecales de origen humano permite obtener datos
con los cuales determinar la situacin del funcionalismo digestivo, Infecciones
intestinales causadas por bacterias, virus y hongos as como por parsitos intestinales o
de rganos anejos.
De estas posibilidades, el denominado Anlisis Coprolgico Parasitario se centra en la
tercera; es decir, su objetivo es la deteccin, en un paciente concreto, de la existencia de
parasitismo intestinal o de glndulas anejas, pudindose revelar tambin parasitismos
localizados en rganos y sistemas muy alejados del intestino, siempre que los parsitos
productores de los mismos empleen la va fecal del hospedador para eliminar los
elementos que le sirven para su diseminacin por la naturaleza.

El Anlisis Coprolgico Parasitario se basa en la identificacin microscpica, en muestras

fecales del sospechoso, de los elementos parasitarios presentes en ellas. Teniendo esto en
cuenta, se puede decir que, con raras excepciones, un resultado analtico positivo siempre
es indicacin de existencia de parasitismo en el paciente. Pero, por el contrario, un
resultado analtico negativo no descarta la posibilidad de parasitismo, ya que el propio
mtodo analtico conlleva la obtencin, por causas diversas, de falsos resultados
negativos. (Garca, 2006)

Entre las causas determinantes de falsos resultados negativos, existen algunas imputables
a los propios mtodos o tcnicas operativas y otras que se deben a la propia biologa de
los parsitos cuya presencia se trata de demostrar. (Dra. Cabrera, 2013)

Toma de Muestras
Para que la muestra recogida sea adecuada debe impedirse que el paciente ingiera
medicamentos a base de carbn, sales de bario, magnesio, bismuto y purgantes oleosos
Asimismo, debe recomendarse que unas 72 horas antes de la toma de muestra se reduzca
en la dieta las fculas y verduras. Las heces deben recogerse en frascos de cierre
hermtico, limpios y secos, impidiendo la contaminacin con orina, y deben ser remitidas
en su totalidad al laboratorio. (Harada, 2008)
Este examen debe realizarse en dos etapas sucesivas que comprenden:
1. Examen Macroscpico
El anlisis macroscpico deber prestar especial atencin a los siguientes aspectos: a)
Consistencia fecal. b) Presencia de elementos no fecales. c) Presencia de parsitos y
pseudoparsitos. Las heces pueden presentar consistencia homognea o heterognea. Esta
peculiaridad debe indicarse en el informe final, pues puede ser la justificacin de un falso
resultado negativo. En efecto, unas heces lquidas, susceptibles de contener trofozotos
de protozoos, pero remitidas al laboratorio en condiciones inadecuadas sern la causa,
casi segura, del resultado negativo. En las heces pueden aparecer elementos no fecales
como moco o restos de tejido conjuntivo. (MV. Rodrguez Izaguirre, 2011)

2. Examen Microscpico
En este apartado se consideran los mtodos normalmente empleados para la deteccin de
parsitos slo microscpicamente visibles, utilizndose como muestra las porciones
fecales reservadas durante el examen macroscpico. Si bien no existe ninguna tcnica que
permita detectar todas las formas de las distintas especies de parsitos intestinales, s que
deben seguirse une serie de pautas a la hora de la realizacin del examen microscpico.
(Negrete Karen, 2011)

3.- EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS

Muestras:
Heces de bovino
porcino y perro.
Equipos:
Centrifugadora
Microscopio.
Materiales de proteccin personal:
Mandil
guantes.
Reactivos:
Lugol.
ter etlico
Solucin de formaldehdo al 10%.
Materiales e insumos:

2 Vasos plsticos.

2 Gasas.

2 Palos de helado.

Agua destilada.

Solucin glucosada o sulfato de Zinc.

1 Tubos de ensayo.

Pipetas Pasteur.

Porta y cubre objetos.

Organismos:
Parsitos encontrados en las heces fecales.
4.- PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Mtodo de Flotacin
1) Manejar con cuidado las muestras antes de comenzar y tomando en cuenta el
protocolo de bioseguridad.
2) En vaso de plstico colocar 1g de la muestra utilizando los palos de madera.

3) Aadir 10ml de agua destilada.

4) Mezclar la muestra hasta que la solucin est homogeneizada.
5) Filtrar las muestras usando las gasas bien colocadas en un segundo vaso de
plstico.
6) La solucin filtrada ser traspasada a un tubo de ensayo el cual ser taponado y
centrifugado a 3500 rpm
7) Eliminar el sobrenadante.
8) Al precipitado agregar una solucin glucosada hasta que forme un menisco
ayudndose por una pipeta pasteur.
9) Se coloca encima del tubo de ensayo un cubreobjetos observando que este se
encuentre en contacto con la solucin.
10) Esperar 10 minutos.
11) En un portaobjetos colocar una gota de lugol y una gota de agua destilada.
12) Retirar con cuidado los cubreobjetos del tubo y colocarlos sobre el portaobjetos.
13) Observar en el microscopio con lentes 10x y 40x.
14) Anotar resultados.

Mtodo de Ritchie
1) Con el aplicador de madera se coloca aproximadamente 1 gr. De la materia fecal
en el vaso de plstico, se aaden 10 ml de agua destilada.
2) Homogenizar la solucin.
3) En un segundo plstico filtrar la solucin con la ayuda de las gasas.
4) Traspasar el filtrado al tubo de ensayo.
5) Centrifugar por 5 minutos a 3500 rpm.
6) Se decanta el sobrenadante.
7) Se agregan 10 mL de formaldehdo al 10% y 5 mL de ter etlico.
8) Se agita energticamente hasta que la mezcla sea homogenizada.
9) Se centrifuga por 5 minutos a 3500 rpm.
10) Despus de centrifugar se observan 4 capas.
a) ter en la superficie.
b) Un tapn de restos fecales.
c) Formaldehido.
d) Sedimento de elementos parasitarios.
11) Se elimina las tres primeras capas decantando.
12) En un portaobjetos se pone una gota de lugol y una gota de agua destilada.
13) Se introduce la pipeta Pasteur, se extrae con cuidado una gota del sedimento.
14) Se coloca la gota del sedimento en el portaobjetos donde se encuentra la gota del
lugol y posteriormente en la gota de agua.
15) Se cubre con el cubreobjetos.
16) Se observa en el microscopio con objetivos de 10x y 40x.
17) Se anotan los resultados de la observacin.

5.- RESULTADOS

Anlisis de muestra de heces de perro

Muestra de perro en
dilucin con agua.

Centrifugacin de las
muestras

Eliminacin del sobrenadante.

Solucin homognea
de muestra de perro

Solucin saturada de sacarosa

(550ml)

Agregacin de la dilucin a
un tubo de ensayo

Filtracin de la gasa

Adicin de sacarosa al sedimento.

Procedimiento de la muestra de heces perro para la observacin de sus parsitos. Fotos

tomadas por: Sofa Ocaa

Muestras de cerdo
Primer mtodo

Muestra de cerdo
diluida en agua.

Muestra con lugol.

Filtracin de la muestra
diluida.

Colocacin de la dilucin
en un tubo.

Muestra sin lugol.

Muestra luego de
ser centrifugada.

Procedimiento de la muestra de heces cerdo para la observacin de sus parsitos. Fotos

tomadas por: Tania Pachacama

Muestras de cerdo
Primer mtodo

Adicin de
formol a la
muestra.

Centrifugacin
de la muestra

Muestra con
formol y ter

Agitacin de la
solucin
seguida
por centrifugacin

Procedimiento de la muestra de heces cerdo para la observacin de sus parsitos. Fotos

tomadas por: Tania Pachacama

Muestras de vaca

Muestra diluida con 100ml de

agua.

Filtracin de la muestra
diluida con una gasa.

Muestra sin lugol

Muestra con lugol

Disolucin en tubo de
ensayo.

Procedimiento de la muestra de heces vaca para la observacin de sus parsitos. Fotos

tomadas por: Paul Romero

Muestras de la gallina

Muestra diluida en agua.

Filtracin de la
muestra.

Muestra centrifugada

Muestra colocada en un
tubo de ensayo.

Procedimiento de la muestra de heces de la gallina para la observacin de sus parsitos.

Fotos tomadas por: Andrea Pumisacho

REPORTE DE RESULTADOS OBSERVADOS EN EL MICROSCOPIO:

Muestras de perro

Fibras de restos de
alimento

Muestras de vaca

Muestras de vaca con

Huevo operculado de
Fasciola heptica

Residuos vegetales

Muestra identificada con el lente de 40 X

Observacin
Presenta una forma
ovalada
No hay presencia de
divisin celular
Presenta un cubierta fina
Color marrn
Sin presencia de
oprculos, espculas,
tapones.

6. ANLISIS DE LOS RESULTADOS Y DISCUSIN

En esta prctica se realiz el anlisis Coproparasitario de muestras con el objetivo de

analizar las muestras de perro, gallina, cerdo y vaca las cuales se sospechaban tener
infecciones parasitarias. Segn la bibliografa revisada se esperaba encontrar huevos de
protozoos y helmintos los cuales son los ms comunes en este tipo de mamferos.
Segn la Universidad de Madrid (2002), el examen coprolgico consiste en el estudio de
las formas parasticas eliminadas con las heces, sean estos huevos, larvas o adultos. Su
observacin se ve influenciada por varios factores que derivan del propio parasito como
el sexo, nmero de ejemplares, edad, momento de ciclo biolgico, etc., del hospedador
depende mucho el estado inmunitario, mediacin, alimentacin recibida, etc., y de la
propia tcnica de recoleccin o el proceso de la muestra. (Negrete Karen, 2011)
Los animales

tanto silvestres como domsticos estn expuestos a numerosos

microorganismos tales como bacterias, virus, Rickettsias, micoplasmas, clamidias,

hongos y parsitos. Los parasitos gastrointestinales son generalmente producidas por
helmintos (nematodos, cestodos) y protozoarios. (Curtis, Schnek, 2008)
Cuando los parsitos se alojan en el aparato digestivo, una proporcin de ellos, o las
larvas, o los huevos son eliminados con las heces. Como la cantidad que se elimina en
cada defecacin puede ser variable, y si hay poco nmero de parsitos en el intestino,
lgicamente tambin sern escasos en las muestras que se tomen, no siempre que una
muestra sale negativa se puede descartar la infeccin. Por esta razn se toman entre dos
a tres muestras de heces, en das distintos. De esta manera es ms segura la infeccin.
(Negrete Karen, 2011)
Para la identificacin de las muestras atraves del mtodo de flotacin se utiliz una
solucin de sacarosa que tuvo una densidad de 1.25-1.27 g/ml (Sixtos, 2012).
El mtodo de flotacin se deja en reposo entre (15-20) min los lquidos pueden impregnar
los huevos y estos tienden a caer al fondo, mientras que en el procedimiento mencionado
por Sixtos, (2012) lo factible es de (10-20) min, lo que estos dos conceptos justifican la
ausencia de parsitos en la prctica.
Desacuerdo a las caractersticas morfolgicas y la presencia en estos tipos de rumiantes,
se presume que es un trematodo platelminto que afecta a la mayora de los mamferos
denominado fasciola heptica en estadio de huevo. (Junquera, 2015)

Fasciolosis es una zoonosis causada por el trematodo Fasciola heptica, que afecta a
animales vertebrados herbvoros (vacas, ovejas, cabras, entre otros) y a humanos. La
infeccin se adquiere debido a la ingesta de diversos vegetales acuticos crudos, algunos
terrestres, o agua contaminados con metacercarias, la forma infectante. (Junquera, 2015)

7.- CONCLUSIONES

Mediante el adecuado uso de los protocolos establecidos se analiz las tres

muestras de heces, es importante, ya que se evita la contaminacin con parasitos
del medio en el que nos rodeaba, as como para un mayor diagnostico en las
muestras analizadas.

Desacuerdo a la bibliografa de resultados obtenidos entre las dos tcnicas se

podra decir Ritchie es ms efectiva, pero debido a falta de parasitos en las
muestras no puedo concluir mucho al respecto.

Se logr identificar

un posible huevo de parasito en una muestra de vaca

utilizando el mtodo de flotacin sin lugol, por lo que se determina que el animal
tiene una infestacin ligera de fasciola heptica.

En las muestras de gallina, cerdo y perro no se logr distinguir ningn tipo de

parasitos

9. CUESTIONARIO:

1.

Enumere los factores de los cuales depende la presencia de parsitos en

una muestra

Hay varios factores de los que depende de la cantidad de muestra usada si se usan
mtodos como la observacin directa no se vern muchos, pero si se recurre mtodos de
concentracin aumentan las posibilidades de presencia de parasitos en la muestras.
(Ausina, 2006)
Entre los ms comunes tenemos:

Infestacin directa y grave del animal por uno o ms parasitos

Ingestin de medicamentos previo a la recoleccin de las muestras
Las medidas de higiene ya que la muestra puede contagiarse de parasitos o
bacterias que se encuentran en el medio

2.

Tiempo de transporte de la muestra al laboratorio, pues debe ser en un mnimo

de tiempo.
Muestras almacenadas y conservadas de manera inapropiada

Investigue por qu es mejor el mtodo de Ritchie?

Porque esta tcnica se la realiza en dos fases sucesivas partiendo de un volumen de heces,
para despreciar los restos vegetales y grasas, que pueden interferir en la visualizacin
microscpica este mtodo se asocia la metodologa fsica con la accin disolvente de
reactivos qumicos, es rpido y de fcil ejecucin (Ausina, 2006). Unas ventajas que tiene
este mtodo es concentrar y no deformar las formas parasitarias, permitiendo el transporte
y almacenamiento de la materia fecal procesada antes de ser examinada, se usa cuando se
necesita una tcnica para determinacin de frecuencia y evaluacin de tratamiento
(Garca, 2006)
3.

Investigue a fondo sobre las complicaciones causadas por uno de los

parsitos encontrados en las muestras de la prctica.

La paramfistomiasis es una enfermedad parasitaria, ocasionado por trematodos de la

familia Paramphistomidae, afectando al tracto digestivo de los rumiantes domsticos
como lo son los bovinos, estos alteran la digestin la utilizacin de los alimentos,
produciendo bajas notorias en la productividad lo cual refleja perdidas econmicas.
La fasciola heptica, un gusano trematodo, causa mayor dao en su estadio juvenil cuando
esta emigra a travs del tejido heptico para penetrar en los conductos hepticos
destruyendo tejidos del hgado y provocando hemorragias, la inflamacin de los tejidos
provoca fibrosis, anemia, hipoproteinemia, edema, emaciacin y muerte celular.
(Junquera, 2015).

Bibliografa
Ausina, V. &. (2006). Tratado SEIMC de enfermedades infecciosas y microbiologa clnica.
Madrid, Espaa: Ed. Mdica Panamericana.
Dra. Cabrera, M. J. (2013). Mtodos de estudio de las enteroparasitosis. Mxico DC.

Garca, P. F. (2006). Microbiologa Clnca Prctica. Cdiz: Imprenta Repeto.

Harada, C. (28 de Junio de 2008). MTODO DE CONCENTRACIN POR SEDIMENTACIN
RITCHIE. Obtenido de Parasitologa General:
https://para1.wordpress.com/2008/06/21/metodo-de-concentracion-por-sedimentacionritchie/
Junquera, P. (27 de june de 2015). Fasciola heptica o duela del hgado. Retrieved. Obtenido de
http://parasitipedia.net/index.php?option=com_content&view=article&id=190&Itemid=
278
MV. Rodrguez Izaguirre, L. A. (2011). La Paramfistomiasis y su tratamiento. lima:
Universidad Nacional Mayor de San Marcos.
Negrete Karen, P. (. (12 de Diciembre de 2011). Parasitologa Veterinaria, Tcnicas de
diagnstico coprolgico. Obtenido de Bacteriologa-Blogspot:
http://karenpaterninanegrete.blogspot.com/2011/12/parasitologia-veterinaria-tecnicasde.html