Cuantificacin de azcares reductores en las cscaras

de naranja y banano
Quantification of reducing sugars from orange and banana Shell

William Giovanni Cortes Ortiz, Jos Francisco Ibla Gordillo, Lina Mara Caldern Velsquez, Andrs Felipe Herrera
Bueno et Altri.

Resumen

Abstract

n este trabajo se evalu la hidrlisis cida de la

cscara de banano y de naranja para la extraccin de azcares presentes en la biomasa
de dicho material, para ello se cuantific la
cantidad de azcares reductores presentes en
las muestras de cscara de naranja y cscara de banano.

Este proceso inici con un pre-tratamiento fsico de los residuos: lavado y reduccin de las muestras, para luego llevar a
cabo la eliminacin de la lignina (polmero que protege los
azcares presentes en la biomasa ligno-celulsica) presente
en las cscaras de naranja y banano mediante una inmersin
en solucin bsica de NaOH 0,100 M, obteniendo muestras
con presencia de celulosa (bio-polmero compuesto principalmente de glucosa) y carentes de lignina; posteriormente se
llevo a cabo un proceso de hidrlisis cida con una solucin de
H2SO4 al 5,0 N bajo 3 condiciones diferentes de calentamiento
y agitacin con el fin de comparar y encontrar el mtodo ms
efectivo para la separacin o fragmentacin de dicha celulosa
en molculas de glucosa. Luego se realiza el ajuste del pH, para
finalmente determinar los azcares reductores mediante una
tcnica de colorimetra denominada DNS.

n this work the acid hydrolisis of orange and

banana peels was studied to improve the
extraction of reducing sugar present into
biomass of this kind of organic samples. This
process was started with physics pretreatment,
washing and cutting were made and then a reaction with NaOH
0,100 M was done to eliminate the lignin present in each sample.
The result was a samples with cellulose (glucose biopolymer).
Then, the acid hydrolysis was started using aqueous solution of
sulfuric acid 5,0 N, under three different heating and shaking
condition to find the most effective method to break down the
cellulose to glucose. The pH was fixed in all samples to determinate the concentration of reducing sugar by DNS method.

Keywords: Biomass, Colorimetry, DNS, Hydrolysis, Lignin, pH,

Reducing sugars.

Palabras clave: Azcares Reductores, Biomasa, Colorimetra,

DNS, Hidrlisis, Lignina, pH.

Recibido: Febrero 27 de 2013 Aprobado: Noviembre 18 de 2013

Tipo de artculo: Investigacin cientfica y tecnolgica terminada.
Afiliacin Institucional de los autores: Programa de Ingeniera Ambiental, Universidad El Bosque, Bogot, Colombia.
Los autores declaran que no tienen conflicto de inters.

Cuantificacin de azcares reductores en las cscaras de naranja y banano

Introduccin
La biomasa ligno-celulsica de la cual estn compuestos
los residuos de cscara de naranja y banano, tiene una
estructura compleja que consta de dos polmeros de
carbohidratos, la celulosa (35-50%) y la hemicelulosa
(15-25%), y un polmero fenlico; la lignina (20-25%). A
partir de la celulosa y la hemicelulosa, se pueden obtener
unidades monomricas de glucosa, lo que le confiere un
gran potencial a la biomasa ligno-celulsica como materia
prima para la produccin de glucosa que puede ser aprovechada en diversos usos industriales [1], [2].
Se plantean dos tipos de residuos ligno-celulsicos:
cscara de naranja y de banano, por la representatividad
en produccin que tienen a nivel mundial, en donde el
banano producido en Colombia ocupa el lugar diez a
nivel mundial con 2.034.340 Ton. Por parte de los ctricos,
Colombia ocupa el lugar diecisiete en produccin a nivel
mundial con 1.257.839 Ton y de los cuales aproximadamente el 70% es de naranja y el 30% restante representa
la parte de produccin de mandarina y limn. [3]
Adems de la produccin de estas dos frutas, el estudio
surge a partir de la problemtica que abarcan los residuos orgnicos que se generan despus del consumo. En
Colombia se producen 27.500 Ton/da de los cuales el 65%
son residuos orgnicos y en Bogot se producen 6.500
Ton/da de residuos slidos. [4] A partir de la disposicin
de residuos orgnicos, tales como las cscaras de naranja
(Citrus sinensis) y banano (Musa sapientum) se plantea
como alternativa y objetivo de este proyecto la obtencin
de azcares reductores a partir de biomasa ligno-celulsica por medio de la implementacin de hidrlisis cida,
para su posible utilizacin en diversos usos industriales
como por ejemplo la produccin de bioetanol. [4]
El bioetanol es el resultado de la fermentacin de materia
orgnica por medio de la accin de microorganismos.
Este producto puede ser empleado como biocombustible (como alternativa ante el consumo energtico de
combustible fsil en el sector de transporte), adems
se puede utilizar para producir subproductos de industrias como la farmacutica, qumica, cosmtica, licoreras,
entre otras. [5], [6], [7], [8]
Las cscaras con las cuales se trabaj experimentalmente, fueron recolectadas de la plaza de mercado del

barrio Restrepo, debido a la inadecuada disposicin que

los residuos orgnicos tienen; en donde debido a la falta
de separacin en la fuente por parte de las centrales de
abastos, estos residuos son contaminados con residuos de
tipo industrial como pilas, residuos plsticos, entre otros,
representando una prdida del 90% de materia prima para
la posible realizacin de la produccin de bioetanol. [9]

Procedimiento
El proceso para la determinacin de azcares reductores
en la cscara de banano y naranja se realiz en una serie
de pasos que se mencionan a continuacin:
a. Eliminacin de lignina.
b. Hidrlisis Acida.
c. Determinacin de azcares reductores.

Se tomaron seis muestras dentro de las cuales se asignan

tres de estas, para cada tipo de cscara, definidas como
muestra de naranja, N1, N2, N3 y las cscaras de banano
como B1, B2, B3, respectivamente, las cuales fueron
sometidas a procesos iguales con el fin de garantizar que
los resultados obtenidos correspondan a la cantidad de
azcares presentes en cada una de las muestras.
a. Eliminacin de lignina: Las cscaras de la naranja

y el banano fueron reducidas a un tamao entre 0,3

y 0,5 cm; con la finalidad de facilitar el manejo del
material. Posteriormente se pesaron 50 g para cada
una de las seis muestras y se sumergieron en 100 mL
de una solucin de Hidrxido de Sodio al 0,100 M
para realizar la eliminacin de la lignina durante un
periodo de 24 horas. Despus se filtr cada una de
las muestras y se realiz la separacin del hidrxido
de sodio con lignina y los azcares presentes en las
muestras. [10]
b. Hidrlisis cida: Para las muestras 1 (B1, N1) se

realiz la hidrlisis cida a temperatura ambiente

sin agitacin. Agregando 100 mL de cido sulfrico
(H2SO4) al 5,0 N por cada 50 g de cscara sin lignina.
Para las muestras 2 (B2, N2) se realiz la hidrlisis
cida a una temperatura de 56C con agitacin constante, utilizando la plancha de calentamiento hot
plate-stirrer hp220- a 300 r.p.m. Agregando 100 mL
de cido sulfrico (H2SO4) al 5,0 N por cada 50 g de
cscara sin lignina.

Revista de Tecnologa Journal Technology Volumen 12 Nmero 2 Pgs. 72-76 73

William Giovanni Cortes Ortiz, Jos Francisco Ibla Gordillo, Lina Mara Caldern Velsquez,
Andrs Felipe Herrera Bueno et Altri.

Para las muestras 3 (B3, N3) se realiz la hidrlisis

cida a una temperatura de 68C con agitacin constante, utilizando la plancha de calentamiento hot
plate-stirrer hp220- a 300 r.p.m. Agregando 100 mL
de cido sulfrico (H2SO4) al 5,0 N por cada 50 g de
cscara sin lignina. Las seis muestras se dejaron reaccionar durante 30 minutos.
Despus de cada uno de los procedimientos anteriores
se realiz una filtracin con el fin de separar la solucin
de cido sulfrico con hidrxido de sodio. [11], [12]

metro, y se realiz la curva de calibracin; seguido a esto

se tomaron 1000 L de cada una de las 6 muestras y se le
adicionaron 1000 L de DNS, luego se agreg 10 mL de
agua destilada y se llevaron a bao de mara, a continuacin se trasladaron al espectrofotmetro y se cuantific el
azcar presente en cada una de las muestras.

Resultados
Figura 1. Curva de calibracion de glucosa
1,200

la determinacin de azcares reductores se aplic

el mtodo de colorimetra DNS (Acido 3,5 dinitrosaliclico) usando el espectrofotmetro -Thermo
spectronic- se realiz la cuantificacin de los azcares
presentes en cada una de las seis muestras, para lo
cual se cre una curva de calibracin a partir de una
solucin de glucosa (2,002 g/L), la cual est representada en la figura 1.

1,000

Inmediatamente despus se procedi a realizar la neutralizacin de las muestras, ya que el medio se encontraba
con un pH de 2, adicionando 10.5 g de carbonato de
sodio (NaCO3) por cada 100 mL de muestra.
Posteriormente se procede a realizar el mtodo DNS
con la curva de calibracin, el cual se realiza de la
siguiente forma:
Para la curva de calibracin se toman seis muestras
de la solucin patrn que se llevaron al espectrofotmetro, en la primera muestra se toman nicamente
1000 L de agua destilada, en la segunda muestra
se diluyen 200 L de solucin patrn en 800 L de
agua destilada, en la tercera muestra se diluyen 400
L de solucin patrn en 600 L de agua destilada,
en la cuarta se diluyen 600 L de solucin patrn en
400 L de agua destilada, en la quinta se diluyen 800
L de solucin patrn en 200 L de agua destilada y
en la sexta se agrega 1000 L de la solucin patrn.

Absorbancia

c. Determinacin de azcares reductores: Para

y= 3,590E-01x - 5,297E-03
R2= 9,818E-01

0,800
0,600
0,400
0,200
0,000
0,000

0,500

1,000

1,500

2,000

2,500

3,000

3,500

Concentracin g/L

Tabla 1. Cuantificacin de azcares reductores en las

cscaras de naranja y banano

Muestras

Absorbancia

Concentracin * Fd (g/L)

B1
B2
B3
N1
N2
N3

1,383
0,989
1,250
1,434
0,900
2,136

38,77
27,72
35,04
40,20
25,23
59,88

Discusin

A cada una de estas diluciones se les adiciona 1000

L de DNS y 10 mL de agua destilada.

Al aplicar la tcnica DNS, se pudo determinar que la mayor

cantidad de azcares se encuentran en las cscaras de
naranja, pues su valor ms alto se report en la muestra
N3 (ver tabla 1), es decir, esta muestra contena 59,88 g/L
de glucosa. Sin embargo, la cantidad de azcares que se
reportaron en las muestras de banano son significativamente altas a las reportadas por Hoyos y Prez (2003)
[7], con un valor de 38,77 g/L de azcares reductores
mostrados en la tabla 1.

Posterior a la realizacin de las diluciones, estas se llevaron

a bao de mara para que el DNS reaccionara con el azcar
de las muestras. Luego se introdujeron en el espectrofot-

La concentracin de azcares reductores que se obtuvieron muestran un valor alto, debido a que el tiempo que
permanecieron las muestras sumergidas en Hidrxido de

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Cuantificacin de azcares reductores en las cscaras de naranja y banano

Sodio (NaOH) para la eliminacin de lignina fue de 24

horas, en cambio en la investigacin realizada por Hoyos y
Prez el tiempo que permanecieron sumergidas las muestras fue de 15 min, por lo tanto se infiere que el tiempo
es un factor importante en la eliminacin del polmero de
las cscaras. De la misma manera durante la hidrlisis se
extrajo mayor cantidad de azcares presentes en las muestras. Para el caso de las cscaras de banano, el resultado
obtenido por Hoyos y Perez (2003) [7] fue de 20 g/L en
comparacin a la cantidad de azcares en las tres muestras
de cscara de banano que fueron superiores. (ver tabla
1). Realizando un anlisis a los resultados obtenidos en la
cuantificacin de azcares de las diferentes muestras, se
pudo observar que las mayores cantidades de azcar se
encontraron en las muestras N1, N3, B1 y B3 (tabla 1). Para
las muestras B2 y N2 la diferencia de concentracin no es
significativa con respecto a las otras, lo cual indica que en
este caso la hidrlisis no es ms eficiente al incrementar
la temperatura o generar agitacin, por lo cual se infiere
que el proceso fue producto de la reaccin de la materia
prima y los compuestos presentes y la temperatura y la
agitacin no funcionan como catalizadores significativos
en la reaccin.
Comparando los datos obtenidos de la concentracin de
azcares reductores en las cscaras de banano con los
resultados de otra investigacin realizada por Hoyos y
Prez [7], que obtuvo un valor de 20 g/L en relacin al
resultado obtenido en la muestra B3 fue de 35,04 g/L, por
lo tanto se puede inferir que se obtuvo mayor cantidad
de azcares reductores debido a que las muestras permanecieron sumergidas en la solucin de NaOH durante 24
horas para la eliminacin de la lignina, lo cual facilit la
obtencin de dichos azcares.
Si se quisiera producir glucosa en masa o en mayores
cantidades a partir de biomasa ligno-celulosica, la diferencia de concentracin no justifica que se lleve a cabo
el mtodo utilizado en las muestras B3 y N3, ya que este
mtodo requiere agitacin e incrementar la temperatura
de la muestra en el proceso de hidrlisis (lo que implica
un gasto de energa), lo cual incrementara en gran
medida el costo de produccin de glucosa, en contraposicin al mtodo utilizado en las muestras B1 y N1,
en las cuales la hidrlisis se llev a cabo a temperatura
ambiente y sin agitacin, evitando dicho sobrecosto en
trminos de energa.

Conclusiones
En el estudio realizado se evidencia que el tiempo es un
factor determinante durante la eliminacin de lignina en
las cscaras de banano, ya que durante las pruebas se
obtuvo una eliminacin efectiva del polmero, lo cual en
comparacin con el estudio realizado [10], la obtencin
de los azcares reductores fue mayor.
En este estudio se evidencia que las cscaras de naranja
tienen mayor cantidad de azcares reductores con
respecto a las cscaras de banano en las condiciones
metodolgicas usadas en este trabajo.

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del Valle),. Vol. II, nm. 1, 2005, pp. 47-55.

Los Autores
William Giovanni Corts Ortiz
Licenciado en Qumica y Magister en Ciencias Ambientales con experiencia en anlisis cromatogrficos;
enfoca sus estudios en el aprovechamiento de residuos agroindustriales con el fin de obtener materias
primas para la obtencin de diferentes productos qumicos.

Jose Francisco Ibla Gordillo

Qumico de la Universidad Nacional de Colombia, cPhD en Ciencias Qumica de la Universidad
Nacional de Colombia en el rea de Termodinmica de soluciones de sistemas biolgicos. Experiencia
en manejo de residuos industriales y procesos a altas presiones y temperaturas.

Calderon Velasquez Lina Maria

Bachiller Acadmico del Colegio La Presentacin de Ocaa, Premio en las Olimpiadas de Matemticas
de la Universidad El Bosque en el ao 2011. Curso Intensivo de Ingles en la misma universidad.

Herrera Bueno Andres Felipe

Bachiller Acadmico del Colegio Instituto Henao y Arrubla, medalla mejor ICFES y medalla honorifica
Pedro Nel Mateus promocin 2008. Seleccionado por la beca Quiero Estudiar Universidad de los
Andes, 2009. Curso Intensivo En Ingles, Universidad Pedaggica Nacional, Bogot D.C, 2011.

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