Tema 3 Bases Quimicas 2014

BASES QUIMICAS DE LA
HERENCIA
Ing. GARCIA DIAZ
CONSIDERACIONES
GENERALES
Son molculas complejas mayores que las de casi todas las

protenas.
Poseen C, H,O,N y P.
Fueron aislados por Miescher en 1870, a partir de los ncleos

de clulas del pus.
Deben su nombre al hecho de ser cidos y de haberse

encontrado por primera vez en los ncleos.
CONSIDERACIONES
GENERALES
Por su composicin qumica, los cidos nucleicos se

clasifican en:
Acidos
desoxiribonucleicos
(ADN)
que
se
encuentran residiendo en el ncleo celular y algunos
organelos, y
Acidos ribonucleicos (ARN) que actan en el
citoplasma.
Se conoce con considerable detalle la estructura y

funcin de los dos tipos de cidos.
CONSIDERACIONES
GENERALES
El conocimiento de la estructura de
los cidos nucleicos permiti:
La elucidacin
gentico,
del
cdigo
La determinacin del mecanismo

y control de la sntesis de las
protenas y
El mecanismo de transmisin de
la informacin gentica de la
clula madre a las clulas hijas.
CONSIDERACIONES
GENERALES
A las unidades qumicas que se

unen para formar los cidos
nucleicos
se
les
denomina
nucletidos, y;
Al polmero poli nucletido o cido

nucleico.
Los nucletidos estn formados por:

una base nitrogenada,
un grupo fosfato y,
un azcar; ribosa en caso de
ARN y desoxirribosa en el caso
de ADN.
CONSIDERACIONES
GENERALES
Las bases nitrogenadas contienen la informacin

gentica, los azcares y los fosfatos tienen una funcin
estructural.
CONSIDERACIONES
GENERALES
En el caso del ADN las bases son dos purinas y dos

pirimidinas.
Las purinas son A (Adenina) y G (Guanina).

Las pirimidinas son T (Timina) y C (Citosina) .
En el caso del ARN tambin son cuatro bases, dos

purinas y dos pirimidinas.
Las purinas son A (Adenina) y G (Guanina).

Las pirimidinas son C (Citosina) y U (Uracilo).
CONSIDERACIONES
GENERALES
Las bases se unen al carbono 1' del azcar y el fosfato en el

carbn 5' para formar el nucletido.
CONSIDERACIONES
GENERALES
Los nucletidos se unen para formar el polinucletido por uniones

fosfodiester entre el carbono 5' de un nucletido y el carbono 3' del
siguiente.
CONSIDERACIONES GENERALES
Un dinucletido, donde se unieron un nucletido con la base A con

un nucletido con la base G y el enlace fosfodiester se form entre
el carbono 3 del nucletido con base A y el 5 del nucletido con
base G, se representa simplemente como AG.
Si a este dinucletido se le
agrega otro nucletido en el
carbono 3' y este nucletido
tiene una base T, el
trinucletido resultante se
representar por AGT.
sta es la forma simplificada

en que se acostumbra
representar
los
polinucletidos.
CONSIDERACIONES
GENERALES
ESTRUCTURA DE LOS
POLINUCLEOTIDOS
El ADN est formado por dos cadenas

muy largas de polinucletidos unidas
entre s por puentes de hidrgeno
especficos entre las bases de las dos
cadenas.
La base de una cadena que se une por

los puentes de hidrgeno con la base
de la otra cadena se dice que forman
un par de bases. A se parea con T y G
con C
Las dos cadenas se encuentran

arregladas en una estructura helicoidal
alrededor de un eje comn por lo que
recibe el nombre de doble hlice.
Las bases se encuentran acomodadas

hacia el eje de la doble hlice, mientras
que el azcar y los fosfatos se
encuentran orientados hacia el exterior
de la molcula.
ESTRUCTURA DE LOS
POLINUCLEOTIDOS
Las dimensiones de la hlice, son

las siguientes: dimetro 20
Angstrom y la longitud del paso
34 Angstrom el cual est
constituido por 10 residuos de
nucletidos.
El tamao de la molcula de ADN

de doble hlice se expresa en
miles de bases o kb. La longitud
de 1kb es entonces 0.34 micras.
Una molcula de ADN de un

milmetro de longitud estar
formado de 3 mil kb o sea tres
millones de bases.
ESTRUCTURA DE LOS
POLINUCLEOTIDOS
En los cromosomas estas

molculas se arreglan en
estructuras ms compactas en
las que la doble hlice se
enrolla sobre s misma.
En el caso de las bacterias, la
molcula de ADN de ms de
un milmetro de longitud se
arregla dentro de la bacteria
que slo tiene una longitud de
una micra.
EL CONTEXTO HISTORICO
PREVIO A LA DOBLE HELICE
La contribucin de Mller, por el que gan el Premio Nbel, fue que

los genes podan mutarse artificialmente.
Bombardeando moscas de la fruta con rayos X, provoc mutaciones

en sus genes y su descendencia era portadora de estas
deformidades.
Al igual que los tomos, las partculas de Mendel deben tener

tambin una cierta estructura interna y podran alterarse por medio de
rayos X.
La mutacin artificial dio inicio a la gentica moderna.
Usando los rayos X, Beadle y Tatum crearon versiones

mutantes del moho del pan llamado Neurospora.
Result que los mutantes no podan fabricar una

determinada sustancia, porque careca de la enzima para
hacerlo.
Los genetistas empezaron a corearlo a media voz: un

gen...una enzima.
Despus lleg la deduccin de Linus Pauling, que una forma

grave de anemia era provocada por un gen modificado.
Los glbulos rojos tomaban forma de hoz, causada por un

defecto en el gen que produce la hemoglobina.
Esto tena sentido poco a poco.
Los genes eran recetas de protenas.
Y las mutaciones eran protenas modificadas por

genes alterados.
Pero el gen segua siendo algo inaccesible y

misterioso.
Su capacidad para especificar recetas de protenas,

induca a pensar que l mismo deba estar hecho de
protena.
Cierto, haba algo ms en los cromosomas: ADN.
ESTRUCTURA DEL ADN:

LA LARGA BUSQUEDA
En 1869, Friedrih Miescher haba aislado ADN, a

partir de vendajes con pus de los soldados
heridos.
Miescher supuso que el ADN era la clave de la

herencia y escribi que podra transportar el
mensaje hereditario:
del mismo modo que las palabras y los
conceptos de todas las lenguas encuentran
expresin en veinticuatro o treinta letras del
alfabeto.
Cmo podra transportar un mensaje en slo

cuatro variedades?
ESTRUCTURA DEL ADN:

LA LARGA BUSQUEDA
Ms tarde, Watson desarrollo la conviccin que

los genes estaban hechos de ADN, y no de
protena.
Para reivindicar su idea viaj a Dinamarca y

despus, a Inglaterra.
Lleg a Cambridge en Octubre de 1951.
Encontr
la
misma
conviccin
sobre
la
importancia del ADN, en otro socio: Francis Crick.
Crick se encontraba concentrado en medir la

viscosidad de las clulas y se dedicaba a aprender
cristalografa en el Cavendish.
ESTRUCTURA DEL ADN:

LA LARGA BUSQUEDA
Crick estaba tambin insatisfecho por la obsesin

imperante por las protenas.
La estructura del gen era la gran incgnita y

sospechaba que el ADN era parte de la respuesta.
En un inicio las cosas no eran as, muchos pensaban

que el principio hereditario estaba en la protena y
no en el AND.
Oswald Avery, M. Mc. Carthy y C. Mac Leod en 1944

abordaron el dilema de aquellos tiempos.
Es el ADN o las protenas las que llevan la

informacin gentica en los cromosomas?
ESTRUCTURA DEL ADN:

LA LARGA BUSQUEDA
Colocaron
neumococos
infecciosos
y
no
infecciosos, estudiaron el rol de las sustancias y
su influencia sobre la transformacin.
Actuando primero con enzimas (para desactivar

las protenas), con alcohol, cloroformo y ter
(para desactivar lpidos), con ribonucleasa (para
desactivas al ARN).
Observaron que los neumococos no infecciosos

terminaban transformndose en neumococos
infecciosos.
ESTRUCTURA DEL ADN:

LA LARGA BUSQUEDA
Cuando atacaron el
extracto
con
desoxiribonucleasa,
ste
perdi
su
capacidad
de
transformar bacterias
no
infecciosas
en
infecciosas.
Esta enzima hidroliza

solo el ADN.
Era la demostracin
que el ADN y los
genes son lo mismo.
ESTRUCTURA DEL ADN:

LA LARGA BUSQUEDA
El inters del ADN, como transmisor de la

informacin gentica, despert con los trabajos de
A. Hershey y M. Chase en 1952 con bacterifagos.
Los bacterifagos
fueron
descubiertos por
Deherelle, y el ciclo de vida fue descrito por Max
Delbrk.
Hershey y Chase marcaron su cpsula con un

istopo radioactivo de azufre y el ADN con un
istopo radioactivo de fsforo.
Luego infectaron una bacteria para determinar

qu parte es infecciosa.
ESTRUCTURA DEL ADN:

LA LARGA BUSQUEDA
Se encontr fsforo
radioactivo
en
las
bacterias, mientras que
el azufre se qued
fuera de las clulas
bacterianas.
Por lo tanto, el ADN y

los genes son lo
mismo, que constituy
una ratificacin al
hallazgo de Avery.
ACIDO DESOXIRRIBONUCLEICO
GENERALIDADES
En los aos 20, el bioqumico Phoebus Levene determin que el

ADN estaba formado por 4 tipos distintos de nucletidos.
Cada nucletido estaba formado por desoxirribosa, fosfato y una

base nitrogenada (A, C, T o G).
El ADN est formado por dos cadenas muy largas de polinucletidos

unidas entre s por puentes de hidrgeno especficos entre las bases
de las dos cadenas.
La base de una cadena que se une por los puentes de hidrgeno

con la base de la otra cadena se dice que forman un par de bases.
A se parea con T y G con C
Las dos cadenas se encuentran arregladas en una estructura
helicoidal alrededor de un eje comn por lo que recibe el nombre de
doble hlice.
Las bases se encuentran acomodadas hacia el eje de la doble

hlice, mientras que el azcar y los fosfatos se encuentran
orientados hacia el exterior de la molcula.
Doble hlice, formada

por cadenas orientadas La estructura se mantiene gracias
a enlaces de hidrgeno entre las
en direcciones opuestas
bases nitrogenadas que se
(antiparalelas).
encuentran orientadas hacia el
interior de las cadenas
GENERALIDADES
As pues la molcula de ADN es un largo filamento de 20

Angstrom de dimetro cuya longitud depende del nmero de
kb, y a su vez depende de la especie.
El rango de tamao va desde 2 micras (5 kb) en el virus SV40,
hasta casi un metro (3 x 106 kb) en cromosomas humanos.
El genoma de E. coli, no tiene extremos, o sea forma un
crculo, y el permetro tiene una longitud de 1.4 mm (4000kb).
GENERALIDADES
Las dimensiones de la hlice, son

las
siguientes:
dimetro
20
ngstrom y la longitud del paso 34
ngstrom el cual est constituido
por 10 residuos de nucletidos.
El tamao de la molcula de ADN

de doble hlice se expresa en miles
de bases o kb. La longitud de 1kb es
entonces 0.34 micras.
Una molcula de ADN de un

milmetro de longitud estar formado
de 3 mil kb o sea tres millones de
bases.
GENERALIDADES
En 1953, los cuatro investigadores del

publicaron sus contribuciones en Nature.
ADN
Watson y Crick en dos notas cortas, una sobre la

estructura y otra sobre el significado biolgico.
Wilkins Gosling y Rosalind Franklin separadamente

en informes breves con fotografas de rayos X.
El modelo propuesto por Watson y Crick se conoce

ahora como la hlice de ADN tipo b.
Este modelo, basado en los datos de Chargaff,

tiene 2 cadenas antiparalelas envueltas en espiral.
FUNDAMENTOS
En 1949, Erwin Chargaff analiz el contenido molar de las bases

de ADN procedente de diversos organismos.
Descubri que en todos los casos [A]=[T] y que [G]=[C], o

[A+G]=[T+C] ([purinas]=[pirimidinas]).
Esta es la llamada ley de Chargaff.
SIGNIFICADO REGLAS DE CHARGAFF
Complementariedad de las bases
ESTRUCTURA
Watson y Crick coincidieron, as lo afirma el primero en su

clebre libro La Doble Hlice, que ello era tambin aplicable
al ADN.
Suponan, que como una macromolcula deba tener el

aspecto helicoidal, propio de las protenas y otras sustancias
complejas.
Una corroboracin eran las fotografas de Maurice Wilkins, y

expuestas por esa misma poca en Npoles.
Los expertos en difraccin de rayos X, todos de Cavendish,

apuntaban a decir que era una molcula helicoidal.
Estos hechos condujeron, a Watson y Crick a pensar que s se

combinan ambos mtodos: construir modelos (Pauling) y usar
la difraccin de rayos X (Wilkins), se podra conocer la
estructura del ADN.
ESTRUCTURA
La solucin aparentemente era fcil, proponer un

modelo y tomar fotos a las muestras de ADN.
Watson supuso que no sera difcil armar el modelo.
Inicio su aventura, por lograr una asociacin con el

Laboratorio de Wilkins para usar sus fotos.
El problema se complico, porque la participacin de

Wilkins implicaba la de Rosalind Franklin, que estaba
lejos de todo control.
Despus de una rpida negociacin, Crick obtuv el

apoyo de Wilkins, y con ello, el acceso a la informacin
sobre la difraccin con rayos X del ADN.
ESTRUCTURA
Volvieron al tema del modelo. Cmo abordarlo, si hasta

entonces no haba ninguna imagen real del ADN.
El temor de Watson se confirmara, sin informacin

qumica habra problemas para construir el modelo.
Para su primer modelo asumieron lo siguiente:
Deba tratarse de una molcula helicoidal, puesto que la

sombra en X de las fotografas as lo sealaban.
Se trataba una molcula que se enroscaba con cierta

regularidad, en torno de un eje central. Las fotos
tambin respaldaban este supuesto.
Interpretacin del patrn difraccin de rayos X del DNA
Rosalind E.
Franklin
Crick
ESTRUCTURA
Deba ser ms de una molcula, tal vez varias, porque

Wilkins sealaba que sus mediciones sobre el dimetro eran
superiores a una sola molcula.
Se asumi que la estructura bsica estaba compuesta por:

un azcar, un grupo fosfato y una base nitrogenada.
Nadie saba en qu orden y cul orientacin tenan.
En 1953, James Watson y Francis Crick combinaron los datos

qumicos y fsicos del ADN, y propusieron un modelo
estructural del ADN.
En este modelo estructural del ADN las dos hebras estn

enrolladas una alrededor de la otra formando una doble
hebra helicoidal.
ESTRUCTURA
Las dos cadenas de polinucletidos se mantienen

equidistantes, al tiempo que se enrollan en torno a un eje
imaginario.
A primeros de los aos 50 Maurice Wilkins y Rosalind Franklin

realizaron los primeros estudios fsicos con el ADN mediante
la tcnica de difraccin de rayos X y observaron que:
(1) la molcula de ADN es una cadena extendida con una
estructura altamente ordenada
(2) la molcula de ADN es helicoidal y tiene 20 de
dimetro
(3) la hlice del ADN est compuesta por dos hebras
helicoidales y
(4) las bases de los nucletidos estn apiladas con los
planos separados por una distancia de 3,4 .
1953. Ao culminante:
J. Watson y F. Crick resuelven la
estructura tridimensional del DNA
(Nature 171: 737-738)
Una estructura tan

bonita tena, por
fuerza, que existir
ESTRUCTURA
Restaba suponer que se

trataba de una molcula
regular pero irregular a la vez.
Cmo explicar esto?
La
molcula
era
regular
porque la unin de un
nucletido
con
otro,
era
uniforme, como si se tratase
de una escalera.
Todas
deban
tener
los
mismos tres componentes:
azcar, radical fosfatado y una
base nitrogenada.
ESTRUCTURA
Pero irregulares, por la diferencia en la secuencia en la que se

unian las bases nitrogenadas.
El paso siguiente, para dar estabilidad a una molcula

helicoidal, debe haber uniones: fuertes.
Supusieron que estas ocurran a travs de enlaces de

hidrgeno y/o con sales (Mg ++)
ESTRUCTURA
El
nico
modelo,
qumicamente viable era el
propuesto
por
Alexander
Todd y sus colaboradores.
Segn este modelo, plano y

no tridimensional, las bases
ocupan la parte exterior de
la molcula, y los radicales
fosfatados la parte interna.
El enlace entre las cadenas

ocurra a travs del fosfato,
cuya carga es negativa y no
de las bases nitrogenadas,
cuyas cargas se desconocan.
ESTRUCTURA
Por ltimo, el modelo que al final consideraron fue uno

que tena tres cadenas.
A pesar que Crick dudaba sobre su estabilidad.
Este modelo era consistente con la teora helicoidal,

planteada por Crick y Cochran, respecto a la hlice a.
Esa teora haba tenido relativo xito, como una

respuesta a los errores del cristalgrafo V. Vand. Se
public en Nature.
La presentacin del modelo helicoidal de triple cadena,

fue expuesto ante Wilkins, Franklin, Gosling del Kings
College.
ESTRUCTURA
La propuesta fue sistematizada en dos partes.
La primera se present la aplicacin de la teora helicoidal a la

estructura del ADN.
Y la segunda, se mostrara el Modelo construido.
Las reacciones fueron ms que adversas. La mayor virulencia

ocurri de parte de Franklin y Gosling, que terminaron por
incomodar a Wilkins.
La primera crtica, era la duda sobre el carcter helicoidal del

ADN, no haba pruebas suficientes.
Tampoco era sensato dar por cierto que los enlaces del
fosfato se dieran con sales (Mg ++).
ESTRUCTURA
Si era cierto, el clculo de agua en esa molcula

resultaba ridculo. La verdadera molcula deba
contener agua por lo menos 10 veces ms.
El modelo helicoidal de tres cadenas, con una

repeticin cristalogrfica cada 28 , unidas por
enlaces bivalentes de Mg ++, era irreal.
Resulto un fiasco, y una tragedia para Cavendish.
Se le ordeno a Crick concentrarse en la medicin

de las protenas y lograr su doctorado.
Watson tuvo que virar a su viejo trabajo con los

fagos y evitar cualquier insinuacin con el ADN.
ESTRUCTURA
Del Kings College, Cavendish no recibira ni la ms

mnima referencia: Cero colaboracin.
Las malas noticias no terminaban all, haban ciertos

indicios que tanto Wilkins como Pauling, estaban en la
pista correcta del ADN...era solo cuestin de tiempo.
Watson insisti en el ADN, pero a travs del ARN, a fin

que Wilkins no pudiera reclamar derecho alguno. Su
escaso conocimiento en cristalografa retard el proceso.
Con ayuda de los cristalografos de Cavendish, logr

reunir algunas fotos, muy malas, de difraccin de rayos X
del ARN. Con ellas trato de analizar el patrn y la
naturaleza helicoidal del ARN.
ESTRUCTURA
Watson tuvo que reconocer que el contenido de agua,

ahora era importante, como la disposicin de la molcula
en si. Tuvo que aproximarse a las matemticas y la
qumica, que tanto haba rehuido.
Crick solo participaba marginalmente del esfuerzo,

infringir la prohibicin poda ser fatal en su caso.
El estudio del fago T4, resulto siendo clave porque

aportaba datos interesantes sobre la irregularidad de la
molcula.
De este modo, poda albergar ms agua en su interior y

su volumen por tanto sera mayor.
Quedaba por resolver el problema del enlace de Mg++, se

requeran anlisis que solo poda dar el Kings College.
ESTRUCTURA
La buena noticia la trajo el hijo de Pauling. Su padre no

estaba centrado en el ADN, sino en las hlices a de la
queratina.
Las cuales se enroscaban, y ello concordaba con la teora

general de Crick, cuyas ecuaciones nunca fueron exactas.
Con ayuda de Kreisel, logro corregir su expresin

matemtica y acert...el logro fue publicado en Nature.
Watson descubri la importancia de los hallazgos de

Chargaff, respecto a la proporcionalidad de las bases. Tal
vez, la molcula estaba en una posicin errada, y si poda
haber regularidad.
Las bases A=T deban ser iguales C=G, pero Cmo?
ESTRUCTURA
Sus dudas se acrecentaban, y

fue Crick concentrado en sus
tesis doctoral, el que descubri
el error.
Despus de comprobar una y

otra vez sus ecuaciones, pens
que las cadenas no podan
exponer hacia afuera las bases
nitrogenadas.
Deban estar orientadas hacia

adentro, pero no explicaba la
forma en que ellas establecan
enlaces.
ESTRUCTURA
Luego, descartando la tercera cadena, poda tener mayor

estabilidad y a la vez, contener diez veces ms agua.
Crick, descubri escrutando el bosquejo de la ltima foto

de Rosy del ADN, que haba un final feliz.
Si se inverta una de las cadenas, frente a cada Adenina, se

ubicara una Timina, y a cada Citosina una Guanina.
Los enlaces seran hidrgeno entre las bases, en la primera

con dos enlaces y en la segunda con tres.
La paradoja estaba resuelta. El modelo b del ADN era una

molcula
helicoidal,
bicatenaria,
con
regularidad
cristalogrfica cada 20 , dando una vuelta completa cada
32 , y puentes de hidrgeno entre sus bases, con una
orientacin invertida entre s.
ESTRUCTURA
FACTORES ESTRUCTURALES
Cuando se calienta un ADN de doble hebra (forma

nativa) se rompen las fuerzas de unin entre las dos
hebras y acaban por separarse.
Por tanto, el ADN desnaturalizado es de una sola

hebra.
La transicin entre el estado nativo y el desnaturalizado

se conoce como desnaturalizacin.
En determinadas condiciones, una disolucin de ADN

monocatenario (desnaturalizado), puede volver a formar
el ADN nativo (de doble hebra).
Este proceso recibe el nombre de renaturalizacin del

ADN.
Cuando el ADN renaturalizado se forma a partir de

molculas de ADN de distinto origen, o entre una
molcula de ADN y otra de ARN, la renaturalizacin se
conoce como hibridacin.
DESNATURALIZACIN
DEL ADN
Cuando se rompen las fuerzas

de unin entre las dos hebras
del ADN, stas acaban por
separarse.
Por
tanto,
el
ADN
desnaturalizado es de una sola
hebra.
La transicin entre el estado

nativo y el desnaturalizado se
conoce
como
desnaturalizacin.
La forma ms corriente de desnaturalizar el ADN es por

calentamiento.
Otro agente desnaturalizante es el pH elevado porque

cambia la carga de algunos grupos que forman parte de
los puentes de hidrgeno.
En agua destilada, con una fuerza inica muy reducida,

se produce la separacin de las hebras.
Este fenmeno se debe a que en agua muy pura, la fuerte

repulsin entre las cargas negativas de los grupos fosfato
no es contrarrestada por los correspondientes contraiones
(Na+, Mg+2).
La grfica que representa la medida de A260 en

funcin de la temperatura se llama curva de fusin del
ADN:
1.- La A260 permanece constante hasta temperaturas
bien por encima de las fisiolgicas. En este intervalo, la
molcula est en forma de doble hebra.
2.- El aumento de A260 tiene lugar en un estrecho
rango de temperaturas (6-8 C), que se inicia cuando
comienzan a romperse las uniones entre las bases en
varios segmentos de la molcula.
3.- La A260 mxima es

aproximadamente un 37%
mayor que el valor inicial, y
corresponde al estado en
que las dos hebras estn
completamente separadas.
Un parmetro muy til para

caracterizar la evolucin de
la fusin es la temperatura
a la que el aumento de la
A260 ha llegado a la mitad
de su camino.
Esta temperatura se llama

temperatura de fusin (Tm).
Se ha comprobado que la Tm
aumenta con el contenido de
G+C (Figura de la derecha).
Como el par de bases G-C

est unido por tres puentes de
hidrgeno, se requiere una
temperatura ms alta para
desnaturalizarlo.
Porcentaje G + C
100
80
60
40
20
70 80 90 100 110
Temperatura de fusin (desnaturalizacin)
Los reactivos que incrementan la

solubilidad de las bases (como el
etanol) disminuyen la Tm, ya que
reducen
la
interaccin
hidrofbica que las mantiene
unidas.
Se deduce que tanto los puentes

de
hidrgeno
como
las
interacciones
hidrofbicas
cooperan para formar una
estructura estable.
Si se reduce o elimina cualquiera

de estas interacciones, la
estabilidad disminuye y la Tm es
menor.
RENATURALIZACIN DEL ADN
Una
disolucin
de
ADN
desnaturalizado puede ser tratada de
forma que recupere su configuracin
nativa.
El proceso se llama renaturalizacin,

y se obtiene un ADN renaturalizado.
Para
que
tenga
lugar
la
renaturalizacin deben cumplirse dos
requisitos:
La concentracin salina debe ser alta ([NaCl] entre 0,15 y

0,5 M) para eliminar la repulsin entre los grupos fosfato de
las dos hebras.
La temperatura deber ser lo suficientemente elevada para

romper los puentes de hidrgeno, y lo suficientemente baja
como para estabilizar los apareamientos correctos entre las
bases de hebras distintas.
La temperatura ptima de renaturalizacin es de unos 20 a

25 C por debajo de la Tm.
La renaturalizacin es un fenmeno de unin al azar, y

por tanto la molcula de ADN renaturalizada no contiene
las hebras originales.
Si mezclamos un ADN marcado con el istopo 15N con

otro que contenga el istopo normal 14N y los
desnaturalizamos, durante la renaturalizacin se forman
3 tipos de molculas de doble hebra:
25% con 14N en las dos hebras,
un 25% con 15N en las dos hebras y
un 50% con una hebra 14N y otra 15N.
un
HIBRIDACIN DEL ADN
Cuando el ADN renaturalizado se

forma a partir de molculas de
ADN de distinto origen la
renaturalizacin se conoce como
hibridacin.
Una caracterstica es que no slo

se puede producir entre dos ADN
distintos, sino tambin entre ADN
y ARN, siempre que sus
secuencias de nucletido sean
complementarias
ACIDO RIBONUCLEICO
GENERALIDADES
El ARN es un filamento de una

sola cadena, no forma doble
hlice.
La presencia de un oxgeno en
la posicin 2' de la ribosa
impide que se forme la doble
cadena de la manera en que se
forma en el ADN.
El filamento de ARN se puede

enrollar
sobre
s
mismo
mediante la formacin de pares
de bases en algunas secciones
de la molcula.
ACIDO RIBONUCLEICO
GENERALIDADES
Es el AN ms abundante en la clula, y puede

purificarse fcilmente. Una clula tpica contiene 10
veces ms ARN que ADN. El azcar presente en el
ARN es la ribosa.
Esto indica que en la posicin 2' del anillo del azcar

hay un grupo hidroxilo (OH) libre.
Por este motivo, el ARN es qumicamente inestable, de

forma que en una disolucin acuosa se hidroliza
fcilmente.
En el ARN la base que se aparea con la A es U, a

diferencia del ADN, en el cual la A se aparea con T.
ACIDO RIBONUCLEICO
TIPOS DE ARN
Existen varios tipos de ARN cada uno con funcin

distinta.
Los que forman parte de las subunidades de los

ribosomas se les denomina ARN ribosomal (rARN),
Los ARN que tienen la funcin de transportar los

aminocidos activados, desde el citosol hasta el lugar de
sntesis de protenas en los ribosomas; se les conoce por
ARN de transferencia (tARN) y.
ACIDO RIBONUCLEICO
TIPOS DE ARN
los ARN que son portadores de la

informacin gentica y la transportan
del genoma (molcula de ADN en el
cromosoma) a los ribosomas son
llamados ARN mensajero (mARN).
El tamao de las molculas de ARN

es mucho menor que las del ADN.
En el caso de E. coli va de menos de

100 nucletidos en los tARN hasta
casi 4000 (4kb) en rARN.
ACIDO RIBONUCLEICO
TIPOS DE ARN: MENSAJERO(ARN m)
ARN mensajero) es un poli ribonucletido constituido por una

nica cadena sin ninguna estructura de orden superior. Su masa
molecular suele ser elevada.
Este ARN se sintetiza en el ncleo celular y pasa al citoplasma

transportando la informacin para la sntesis de protenas.
La duracin de los ARNm en el citoplasma celular es de escasos

minutos siendo degradados rpidamente por enzimas especficas
ACIDO RIBONUCLEICO
TIPOS DE ARN: MENSAJERO(ARNm)
Su peso molecular es alto y contiene nicamente los nuclotidos A,

U, G y C.
Adems de contener codificada la secuencia de una protena,

contiene seales para la iniciacin
(codn AUG, que codifica al
aminocido metionina) y
terminacin de la sntesis
(codones UAA, UAG o
UGA).
El ARN mensajero (ARNm)

se sintetiza sobre un molde
de ADN y sirve de pauta
para la sntesis de protenas
(traduccin).
ACIDO RIBONUCLEICO
TIPOS DE ARN: RIBOSOMICO (ARNr)
El ARN ribosmico (ARNr) est presente

en los ribosomas, orgnulos
intracelulares implicados en la sntesis de
protenas.
Se conocen 3 4 tipos distintos de ARNr.
Su estructura secundaria y terciaria

presenta un plegamiento complejo que le
permite asociarse tanto a las protenas
integrantes de los ribosomas como a
otros ARNr y participar en el proceso de
sntesis proteica.
Se representa el ARNr de 16S y la

molcula de la Figura inferior
corresponde a un ARNr de 5S.
ACIDO RIBONUCLEICO
TIPOS DE ARN: TRANSFERENTE (ARNt)
Las molculas de ARN transferente (ARNt) tienen entre 75 y 90

nucletidos, y su peso molecular es de unos 25000 dalton.
Constituyendo el 15% del total del ARN de la clula.
Se conocen unos 60 ARN distintos, y se encuentran en todas las

clulas.
Intervienen en la sntesis de protenas, ya que van unidos a un aa.

Transporta los aminocidos para la sntesis de protenas.
Est formado por una sola cadena, aunque en ciertas zonas se

encuentra replegada y asociada internamente mediante puentes
de hidrgeno entre bases complementarias.
Se sintetiza en el ncleo y sale hacia el citoplasma para realizar su

funcin. En el ARNt podemos distinguir un brazo aceptor de
aminocidos abierto y un bucle anticodon.
ACIDO RIBONUCLEICO
TIPOS DE ARN: TRANSFERENTE (ARNt)
ACIDO RIBONUCLEICO
TIPOS DE ARN: HETEROGENEO NUCLEAR
(ARNhn)
Es un ARN de alto peso molecular,

tambin
conocido
como
transcrito
primario del ARN, ya que es el ARN
recin sintetizado por la ARN polimerasa
en el proceso de trascripcin.
En el molde de ADN aparece de color

azul, la ARN-polimerasa de color celeste,
y el transcrito primario de ARN de color
amarillo.
En clulas procariotas, el transcrito primario acta directamente como
molde para la sntesis de protenas.
En el ncleo de las clulas eucariotas acta como precursor de los dems

tipos de ARN que se encuentran en el citoplasma.
La fragmentacin del ARN para formar otros tipos de ARN constituye la

maduracin o procesamiento del ARN.
ACIDO RIBONUCLEICO
TIPOS DE ARN: PEQUEO NUCLEAR
(ARNsn)
El ARN pequeo nuclear (ARNsn) est presente en el ncleo, y es

de pequeo tamao.
Est implicado en los procesos de maduracin del ARNhn.
En este proceso, el ARNsn se asocia a protenas formando

ribonucleoprotenas pequeas nucleares (RNPsn) que
encargan de eliminar los intrones (aquellos fragmentos
transcrito primario de ARN que no aparecen en el molde
ARNm).
Cuando las RNPsn se unen al precursor del ARNm para eliminar

los intrones se forma un complejo ARN-protena de gran tamao,
visible al microscopio electrnico, y que recibe el nombre de
espliciosoma (spliceosome).
A continuacin se muestra el proceso de maduracin, as como

una micrografa electrnica de un espliciosoma.
las
se
del
de
ACIDO RIBONUCLEICO
PRIMER BIOPOLIMERO
Es muy probable que el ARN fuese el primer biopolmero.
En un ambiente similar al que debi existir en la Tierra primitiva

pudieron formarse espontneamente cadenas cortas de ARN, pero no
de ADN o protenas. Adems, se conocen casos en los que las
molculas de ARN se cortan y empalman por sitios especficos, en
ausencia de protenas.
Estas molculas de ARN reciben el nombre de ribozimas (Figura de la

derecha).
Las ribozimas presentan actividad cataltica en ausencia de protenas

y participan en el corte y empalme de molculas precursoras de ARN
que darn lugar al ARNr.
A continuacin se muestra de forma esquemtica el ciclo cataltico de

una ribozima.
ACIDO RIBONUCLEICO
PRIMER BIOPOLIMERO
Estos primitivos mecanismos de maduracin del ARN contribuyeron

probablemente a que se consiguiera con xito la primera sntesis de
protena dirigida por una cadena de polinucletidos (un gen).
En una etapa posterior, a partir del ARN se formara el ADN, que

llegara a convertirse en un depsito ms seguro de la informacin
gentica, ya que es qumicamente ms estable.
ACIDO RIBONUCLEICO
PRIMER BIOPOLIMERO

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BASES QUIMICAS DE LA

Ing. GARCIA DIAZ

Son molculas complejas mayores que las de casi todas las

Fueron aislados por Miescher en 1870, a partir de los ncleos

Deben su nombre al hecho de ser cidos y de haberse

Por su composicin qumica, los cidos nucleicos se

Se conoce con considerable detalle la estructura y

La determinacin del mecanismo

A las unidades qumicas que se

Al polmero poli nucletido o cido

Los nucletidos estn formados por:

Las bases nitrogenadas contienen la informacin

En el caso del ADN las bases son dos purinas y dos

Las purinas son A (Adenina) y G (Guanina).

En el caso del ARN tambin son cuatro bases, dos

Las purinas son A (Adenina) y G (Guanina).

Las bases se unen al carbono 1' del azcar y el fosfato en el

Los nucletidos se unen para formar el polinucletido por uniones

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sta es la forma simplificada

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La base de una cadena que se une por

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Las bases se encuentran acomodadas

Las dimensiones de la hlice, son

El tamao de la molcula de ADN

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La contribucin de Mller, por el que gan el Premio Nbel, fue que

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Al igual que los tomos, las partculas de Mendel deben tener

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Result que los mutantes no podan fabricar una

Los genetistas empezaron a corearlo a media voz: un

Despus lleg la deduccin de Linus Pauling, que una forma

Los glbulos rojos tomaban forma de hoz, causada por un

Esto tena sentido poco a poco.

Los genes eran recetas de protenas.

Y las mutaciones eran protenas modificadas por

Pero el gen segua siendo algo inaccesible y

Su capacidad para especificar recetas de protenas,

Cierto, haba algo ms en los cromosomas: ADN.

ESTRUCTURA DEL ADN:

En 1869, Friedrih Miescher haba aislado ADN, a

Miescher supuso que el ADN era la clave de la

Cmo podra transportar un mensaje en slo

ESTRUCTURA DEL ADN:

Ms tarde, Watson desarrollo la conviccin que

Para reivindicar su idea viaj a Dinamarca y

Lleg a Cambridge en Octubre de 1951.

Crick se encontraba concentrado en medir la

ESTRUCTURA DEL ADN:

Crick estaba tambin insatisfecho por la obsesin

La estructura del gen era la gran incgnita y

En un inicio las cosas no eran as, muchos pensaban

Oswald Avery, M. Mc. Carthy y C. Mac Leod en 1944

Es el ADN o las protenas las que llevan la

ESTRUCTURA DEL ADN:

Actuando primero con enzimas (para desactivar

Observaron que los neumococos no infecciosos

ESTRUCTURA DEL ADN:

Esta enzima hidroliza

ESTRUCTURA DEL ADN: