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CONSEJO NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGA -CONCYTSECRETARIA NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGA -SENACYTFONDO NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGA -FONACYTFACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS

Y FARMACIA,
UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA,

INFORME FINAL
ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DE DIEZ ESPECIES NATIVAS COMO
POSIBLES PRESERVANTES DE ALIMENTOS Y FUENTE PARA EL
DESARROLLO DE NUTRICEUTICOS.
Proyecto FODECYT 28-2007.

Armando Cceres Estrada


Investigador Principal

GUATEMALA, 21 DE DICIEMBRE DE 2009.

AGRADECIMIENTOS
La realizacin de este trabajo ha sido posible gracias al apoyo financiero dentro del
Fondo Nacional de Ciencia y Tecnologa (FONACYT), otorgado por la Secretara
Nacional de Ciencia y Tecnologa (SENACYT) y el Consejo Nacional de Ciencia y
Tecnologa (CONCYT).

ii

RESUMEN
Los antioxidantes naturales presentes en los alimentos se consideran preservantes
que se encargan de retardar el deterioro, rancidez o decoloracin por la oxidacin. Su
funcin es la de unirse al agente oxidante, para que ste no este libre para reaccionar con
el resto de los compuestos presentes en los alimentos y por lo tanto evitar la oxidacin. La
presente investigacin fue llevada a cabo con el objetivo de generar informacin qumica
y biolgica de 10 especies nativas usadas como alimento, condimento o medicina para
determinar su posible potencial en la industria alimenticia y farmacutica.
Se recopil informacin cientfica sobre las 12 especies colectadas y evaluadas
(Brosimum alicastrum, Cnidoscolus chayamansa, Cucurbita argyrosperma, Erythrina
berteroana, Fernaldia pandurata, Gliricidia sepium, Litsea guatemalensis, Manilkara
sapota, Piper auritum, Solanum nigrescens, Spondias mombin y Tagetes lucida) y se
prepararon igual nmero de monografas que se incluyen en este informe final, las cuales
pueden ser consultadas para conocer la informacin disponible de cada especie. Se
estudiaron complementariamente otras 12 especies en apoyo a un Seminario de Tesis
Todas las especies colectadas se determinaron botnicamente y se depositaron
muestras en el Herbario CFEH del Laboratorio Farmaya. Se les realiz el anlisis de
control de calidad segn procedimientos estndar, determinndose sus parmetros bsicos
(% de humedad de la materia seca, cenizas totales, % de rendimiento y % de humedad del
extracto seco). Se realiz el tamizaje fitoqumico de los extractos secos de las especies
vegetales, demostrndose la presencia de flavonoides y antocianinas, aceites esenciales,
cumarinas y taninos de varias de las especies evaluadas; sin embargo, ninguna de las
especies analizadas demostr la presencia de antraquinonas.
La actividad antioxidante de las especies fue evaluada mediante cinco parmetros:
cuantificacin de fenoles totales por macro y micromtodo, TDAC por macro y micromtodo y determinacin del poder reductor del hierro. Se realiz un primer ensayo para
determinar actividad antioxidante mediante la emulsin del cido linolico. Se evalu por
TLC la actividad antioxidante por DPPH. Se evalu la aplicacin de la fluorometra al
anlisis de actividad antioxidante mediante el anlisis cuantitativo de quercetina.
Los resultados fueron analizados mediante SPSS, se realiz un anlisis univariado,
por la prueba de t-student a un nivel de confianza del 95% (Luego se emple
cajas de Tukey para una comparacin mltiple. Se realizaron correlaciones para comparar
metodologas y los anlisis descriptivos se realizaron mediante Microsoft Excel 2007.
Mediante las metodologas empleadas para determinar actividad antioxidante, las
especies T. lucida, L. guatemalensis, P. auritum, S. nigrescens, G. septium, Smilax
domingensis, Phlebodium pseudoaureum y Pimenta dioica son las que presentan los
mejores resultados. Las metologas micromtricas presentaron buena correlacin con las
macromtricas, sin embargo, requieren ser optimizadas para su uso rutinario. Se
evidenci que los grupos fitoqumicos caractersticos de las especies con alto rendimiento
de actividad antioxidante deben ser estudiados por su potencial utilizacin como
preservantes y nutricuticos.
iii

ABSTRACT
Natural antioxidants present in food could be considered preservatives which retard
deterioration, rancidness or fading due to oxidative processes. The function of
antioxidants is to attach to oxidative agents, so that this free radical in not able to react
with the rest of components present in food, in order to avoid oxidation. This research
was conducted with the main objective to generate chemical and biological information
on 10 native species used as food, condiment or medicine to determine it possible
potential in food and pharmaceutical industry.
Scientific information on 12 species (Brosimum alicastrum, Cnidoscolus
chayamansa, Cucurbita argyrosperma, Erythrina berteroana, Fernaldia pandurata,
Gliricidia sepium, Litsea guatemalensis, Manilkara sapota, Piper auritum, Solanum
nigrescens, Spondias mombin y Tagetes lucida) was collected, evaluated and
monographies were prepared including the information gathered and generated in the
Project. Another twelve species were studied in support to a Thesis Seminar.
All the collected species were botanically determined, and voucher samples were
deposited in Farmaya Laboratory Herbarium (Herbarium CFEH). The quality control
analysis was performed, determining basic parameters (% of water content in dry matter,
total ashes, yield and % of water content of dry extracts). The phytochemical screening of
dry extracts was performed according to procedures, showing the presence of flavonoids
and anthocyanins, essential oils, coumarins and tannins; nevertheless none of the species
showed antraquinones.
Antioxidant activity of samples was evaluated by five parameters: quantification of
total phenols by macromethod, quantification of total phenols by micromethod, TDAC by
macromethod, TDAC by micromethod and determination of ferric reduction capacity. A
preliminary assay was launched to determine de antioxidant activity by linoleic acid
emulsion. Antioxidant activity by DPPH was evaluated by TLC. It was evaluated the
application of fluorometry to the analysis of antioxidant activity by quantitative
evaluation of quercetin.
Results were analyzed by SPSS using an univariate analysis, by t-student test and a
confidence level of 95% (=0.05). Then Tukey boxes were applied for multiple
comparisons. Correlation was performed to compare among methodologies and
descriptive analysis by Microsoft Excel 2007.
It is concluded that by using the methodologies implemented for evaluating the
antioxidant activity, five species from our study (T. lucida, L. guatemalensis, P. auritum,
S. nigrescens y G. septium) and three from the complementary Seminar (S. domingensis,
P. pseudoaureum y P. dioica) present the best results. The micrometric methodologies
used presented good correlation with macrometric methodologies; nevertheless they still
need to be optimized for routine utilization. It was evident that the phytochemical groups
characteristic of the species with higher yield of antioxidant activity must be studied for
potential utilization as preservatives and nutriceuticals.

iv

BIOGRAFIA ACADEMICA DEL INVESTIGADOR PRINCIPAL


Arnando Cceres Estrada es Qumico Bilogo de la Facultad de CCQQ y Farmacia,
Universidad de San Carlos (USAC), con estudios de Especializacin en Inmunologa en
las Universidades de Wisconsin, Lausanna, Brasilia y del Valle (Colombia) y
entrenamiento en Farmacognosia en la Facultad de Farmacia, USAC y Universidad
Kitasato, Japn.
Desde 1972 es Profesor Titular de Inmunologa e Inmunopatologa, en la Facultad de
CCQQ y Farmacia y desde 2004 es Profesor en las Maestra en Plantas Medicinales
(Universidad de San Carlos) y Fitoterapia (Universidad de Barcelona).
Es Coordinador del Laboratorio de Investigacin de Productos Naturales (LIPRONAT) y
Director de Investigaciones del Laboratorio de Productos Naturales Farmaya S.A.
Ha sido Asesor, Director de Proyectos y Director Ejecutivo del Centro Mesoamericano de
Estudios sobre Tecnologa Apropiada (CEMAT) y ha sido Consultor sobre Desarrollo
Rural, Salud Ambiental y desarrollo del uso ecolgico de plantas medicinales para
diversas instancias nacionales e internacionales, y Director Nacional de la Comisin
Nacional para Aprovechamiento de las Plantas Medicinales (CONAPLAMED) y
Coordinador de la Red Iberoamericana de Productos Fitofarmacuticos (RIPROFITO) del
Programa Iberoamericano de Ciencia y Tecnologa para el Desarrollo (CYTED).
Ha sido asesor o evaluador de proyectos de etnobotnica, agrotecnologa y fitoterapia
para organizaciones no gubernamentales y empresas fitoterpicas de Guatemala,
Honduras, Costa Rica, El Salvador, Nicaragua, Colombia, Per, Mxico y Bolivia.
Ha sido miembro de varias comisiones nacionales e internacionales para la validacin,
produccin, control y equiparacin de la fitoterapia en los servicios de salud, y miembro
de ocho asociaciones cientficas internacionales, del Consejo de Notables del CONCYT y
de la Academia de Ciencias Mdicas, Fsicas y Naturales.
Ha recibido subsidios de investigacin nacionales [Consejo Nacional de Ciencia y
Tecnologa (CONCYT), Direccin General de Investigacin (DIGI) e Instituto de
Investigaciones Qumicas y Biolgicas (IIQB)] e internacionales [Organizacin Mundial
de la Salud (OMS), Sociedad Alemana de Cooperacin Tcnica (GTZ), Organizacin de
las Naciones Unidas parfa el Desarrollo Industrial (ONUDI), Centro Internacional de
Investigaciones para el Desarrollo (CIID), Agencia Japonesa de Cooperacin
Internacional (JICA), Organizacin de los Estados Americanos (OEA) e Institutos
Nacionales de Salud (NIH)].
Ha recibido varios premios nacionales e internacionales, particularmente el Premio Jos
Capote Daz 1989 (Federacin Panamericana de Farmacia y Bioqumica), Premio
Centroamericano Nestl de Pediatra 1992, Medalla de Ciencia y Tecnologa 1998 y
Medalla Universitaria 2000.
Autor de ms de 240 publicaciones y presentaciones en eventos cientficos y varios libros
especializados en el campo de validacin, produccin, fitofarmacia y legislacin de
plantas medicinales y organizador de ms de 80 eventos cientficos nacionales e
internacionales y de transferencia tecnolgica al sector productivo sobre los temas de su
especialidad.
v

OTROS AGRADECIMIENTOS
La realizacin de este trabajo ha sido posible gracias al apoyo logstico y material
del Laboratorio de Productos Naturales Farmaya, S.A.
El Investigador Principal desea agradecer la colaboracin de las siguientes personas
que participaron en alguno de los aspectos de la investigacin:
Investigadores Asociados:
Lic. Karla Lange, MA. Sully Cruz y Dr. Rubn Velsquez
Auxiliares de Investigacin
Licda. Sandra Lima, Brs. Mara del Mar Velsquez, Emilio Gonzalez, Dina Crdova,
Roxana Dardn y Mara Cristina Menndez.
Investigadores Colaboradores:
MSc. Luis Gonzalo Sequeda, Pontificia Universidad Javeriana, Bogot, Colombia.

Foto de grupo (izq a der): Sandra Lima, Sully M. Cruz, Armando Cceres, Mara
Cristina Menndez, Roxana Dardn, Luis Gonzalo Sequeda, Mara del Mar Velsquez.
Faltan: Karla Lange, Rubn Velsquez, Emilio Gonzalez y Dina Crdova

vi

TABLA DE CONTENIDOS
Portada
Agradecimientos
Resumen
Asbstract
Biografa acadmica del investigador principal
Otros agradecimientos
Tabla de contenidos
Lista de ilustraciones (Figuras)
Lista de cuadros
Lista de grtficos
Lista de abreviaturas y dimensionales

i
ii
iii
iv
v
vi
vii
ix
x
xi
xii

PARTE I. INTRODUCCIN
I.1
Introduccin
I.2
Planteamiento del problema
I.2.1
Situacin del problema a nivel global
I.2.2
Antecedentes en Guatemala
I.2.3
Justificaciones del trabajo de investigacin
I.3
Objetivos e Hiptesis
I.3.1
Objetivo general
I.3.2
Objetivos especficos
I.3.3
Hiptesis
I.4
Metodologa
I.4.1
Descripcin del lugar donde se realiz la investigacin
I.4.2
Variables
I.4.3
Indicadores
I.4.4
Estrategia metodolgica
I.4.5
Mtodos
I.4.6
Tcnica estadstica
I.4.7
Instrumentos

1
3
3
3
4
5
5
5
5
6
6
6
6
7
7
13
15

PARTE II. MARCO TERICO


II.1
Oxidaciones biolgicas
II.2
Especies de oxigeno reactivas (EOR) y prooxidantes
II.3
Papel fisiolgico y patolgico de EOR
II.4
Importancia de los antioxidantes y modo de accin
II.5
Bsqueda reciente de antioxidantes en alimentos y vegetales
II.6
Estudios de antioxidantes realizados en Guatemala
II. 7
Tipos de pruebas para actividad antioxidante
II.7.1
Determinacin de fenoles totales mediante el reactivo de Folin-Ciocalteu
II.7.2
Determinacin de la TDAC mediante secuestro de radicales
II.7.3
Poder reductor del hierro
II.7.4
Actividad antioxidante en el sistema de emulsin del cido linolico
II.7.5
Otros mtodos para determinacin de actividad antioxidante
II.8
Seleccin de las especies en estudio

16
18
19
19
21
25
25
26
26
27
27
27
28

vii

PARTE III. RESULTADOS


III.1
Objetivo 1
III.1.1
Actividades realizada y resultados obtenidos
III.2
Objetivo 2
III.2.1
Coleccin de material
III.3
Objetivo 3
III.3.1
Preparacin de extractos
III.3.2
Resultados
III.4
Objetivo 4
III.4.1
Anlisis fitoqumico por TLC
III.5
Objetivo 5
III.5.1
Actividades realizadas y resultados obtenidos
II.5.2
Discusin de resultados
III.6
Objetivo 6
III.6.1
Actividades realizadas y resultados obtenidos
III.7
Socializacin de la informacin
III.7.1
Curso Internacional de Fitoterapia
III.7.2
Seminario: Antioxidantes: Anlisis y Aplicacin

29
29
30
30
34
34
35
36
36
43
43
52
56
56
59
59
59

PARTE IV. CONCLUSIONES


IV.1
Conclusiones
IV.2
Recomendaciones
IV.3
Referencias
IV.4
Anexos
Anexo 1. Brosimum alicastrum Swartz (Moraceae)
Anexo 2. Cnidoscolus chayamansa McVaugh (Euphorbiaceae)
Anexo 3. Cucurbita argyrosperma Huber (Cucurbitaceae)
Anexo 4. Erythrina berteroana Urban (Fabaceae)
Anexo 5. Fernaldia pandurata (A.DC.) Woodson (Apocynaceae)
Anexo 6. Gliricidia sepium (Jacq) Steud. (Fabaceae)
Anexo 7. Litsea guatemalensis HBK (Lauraceae)
Anexo 8. Manikara sapota van Royen (Sapotaceae)
Anexo 9. Piper auritum HBK (Piperaceae)
Anexo 10. Solanum nigrescens Mart. & Gal. (Solanaceae)
Anexo 11. Spondias mombin L. (Anacardiaceae)
Anexo 12. Tagetes lucida Cav.(Asteraceae)
Anexo 13. Resumen y resultados de Seminario de Tesis

61
63
64
70
71
75
78
81
85
88
94
97
100
103
107
112
117

PARTE V
V.1
Informe financiero

122

viii

Lista de Ilustraciones (Figuras)


1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13

Coleccin de muestras botnicas herbario y secado en horno de conveccin


Balanza para % de humedad y mufla para % de cenizas
Fotografa de las 12 especies evaluadas
Mapa de los lugares de colecta de las especies estudiadas
Percolador de acero inoxidable, rotavapor para concentracin, desecadores al
vaco y liofilizador para los exgtractos acuosos
TLC para flavonoides y antocianinas
TLC de antraquinonas
TLC para aceites esenciales.
TLC para cumarinas.
Investigacin cualitativa de taninos
TLC de la actividad antioxidante por la tcnica de DPPH
Procesamiento en tubo de las curvas de calibracin con el cido glico y
Espectrofotmetro para realizar cuantificaciones
Fluormetro

ix

Lista de Cuadros
1
2
3
4
5
6
7
8
9

10
11
12
13
14
15
16
17
18
19

Plantas alimenticias, condimentarias o medicinales nativas escogidas por su


posible accin antioxidante
Lista de monografas farmacopeicas elaboradas
Procedencia de las muestras colectadas y referencia en herbario CFEH
Relacin fresco:seco, % de humedad y % de cenizas de las muestras evaluadas
Rendimiento de solutos extrables en las muestras evaluadas
Tamizaje fitoqumico de extractos secos por TLC.
Resultados prueba macromtrica para taninos
Resultados de la actividad antioxidante en TLC.
Resumen de los valores de los valores de fenoles totales, actividad antioxidante
macromtrico y micromtrico, y poder reductor del hierro. Los resultados se
expresan como mediadesviacin estndar; (valor mnimo-valor mximo).
Contenido de compuestos fenlicos macromtodo de 12 especies en estudio
Contenido de compuestos fenlicos micromtodo de 12 plantas en estudio
TDAC por macromtodo en las doce especies vegetales en estudio
TDAC por micromtodo en las doce especies vegetales en estudio
Poder reductor del hierro en las doce especies vegetales en estudio
Comparacin de los mtodos macromtricos y micromtricos para la
cuantificacin de fenoles totales y TDAC
Descripcin del contenido fitoqumico respecto a los subgrupos determinados
mediante el contenido de fenoles totales macromtrico
Descripcin del contenido fitoqumico respecto a los subgrupos determinados
mediante la TDAC macromtrica.
Coeficiente de determinacin fluormetro Quantech
Concentracin de quercetina por mtodos fluoromtricos

Lista de Grficas
1
2
3
4
5
6

Contenido de fenoles totales macromtodo en las doce especies en estudio


Contenido de fenoles totales micromtodo en las doce especies en estudio
TDAC por mtodos macromtricos de las 12 especies en estudio
TDAC por micromtodo en las 12 especies vegetales en estudio
Poder reductor del hierro en las doce especies vegetales en estudio
Determinacin de la actividad antioxidante en el sistema de emulsin del cido
linolico

xi

Lista de abreviaturas
Abs
ABTS
ADN
AIOR
AO
BHA
BHT
CEMAT
CFEH
CI50
DE50
DPPH
EOR
ESCOP
FRAP
HPLC
HPTLC
IR
LDL
LIPRONAT
OMS
PEO
TDAC
TLC
USAC
USDA
UV

Absorbancia
Acido 2,2-azino-bis (3-etil-benzthiazolino-6-sulfnico)
Acido desoxiribonuclico
Antioxidant inhibition of oxigen radicals (Inhibicin por radicals oxgeno)
Antioxidante
Hidroxilanisol butilado
Dixidroxiltolueno butilado
Centro Mesoamericano de Estudios sobre Tecnologa Apropiada
CEMAT-Farmaya Ethnobotanical Herbarium
Concentracin inhibitoria media (50%)
Dosis efectiva media (50%)
1,1-difenil-2-picrilhidrazilo
Especies de oxgeno reactivas
European Cooperative of Phytotherapy (Cooperativa Europea Fitoterapia)
Ferric reducig ability of plasma (Habilidad reductora del hierro en plasma)
High performance liquid chromatography
High performance thin leyer chromatography
Infrarrojo
Lipoprotenas de baja densidad
Laboratorio de Investigacin de Productos Naturales
Organizacin Mundial de la Salud
Procedimiento estandarizado de operacin
Total antioxidant capacity (Capacidad antioxidante total)
Thin leyer chromatography (Cromatografa en capa fina)
Universidad de San Carlos de Guatemala
United States Department of Agriculture (Departamento de Agricultura)
Ultravioleta

Dimensionales
g
L
cm
g
kg
M
Meq
min
mg
mL

mm
mM
M
mmol
msnm
nm
ppm
rpm
seg

microgramos
microlitros
centmetros
gramos
kilogramos
molar
miliequivalentes
minutos
miligramos
mililtros

xii

milmetros
mini Molar
micro Molar
milimoles
metros sobre el nivel del mar
nanmetros
partes por milln
revoluciones por minuto
segundo

PARTE I.
I.1

INTRODUCCIN

Es cada vez ms evidente que el estrs oxidativo y la presencia constante de los


radicales libres son una importante causa de diversos procesos patolgicos, pudiendo
agravar la enfermedad en curso, originar nuevos efectos que alteren an ms la salud del
paciente o bien deteriorar su calidad de vida. Se ha implicado que estos procesos son
inducidos principalmente por la presencia de los radicales libres, siendo los ms
importantes los superxidos, los hidroxilos, los perxidos y el oxgeno, los cuales
participan directamente en los daos oxidativos a las molculas, organelas y diversas
clulas y tejidos, causando su degeneracin, envejecimiento, prdida de su funcin y otras
formas importante de dao celular (Halliwel, Gutteridge & Cross, 1992; Ching, Hall,
Croft, Beilbt, Rossi & Ghisalberti, 2006).
El inters por la investigacin de los antioxidantes polifenlicos ha incrementado en
la ltima dcada, principalmente por la elevada capacidad que poseen estos compuestos
de secuestrar y neutralizar los radicales libres. Esta propiedad se ha evidenciado en
numerosos estudios que han evaluado la actividad antioxidante in vitro de diversos
compuestos qumicos y productos naturales (Hirayama, Takagi, Hukumoto & Katoh,
1997; Cao & Prior, 1999; Re, Pellegrini, Proteggente, Pannala, Yang & Rice-Evans,
1999; Robards & Antolovich, 1999; Choi et al., 2002; Katalinic, Milos, Kulisic & Jukic,
2006; Stangeland, Remberg & Lye, 2009).
Los compuestos polifenlicos han jugado un papel importante en la prevencin de
varios procesos patofisiolgicos asociados con el estrs oxidativo, tales como el cncer, y
diversas enfermedades neurodegenerativos y cardiovasculares (Havsteen, 2002; Manach,
Salbert, Morand, Rmsy & Jimenez, 2004).
Los radicales libres son especies qumicas muy reactivas que fcilmente conducen a
reacciones incontroladas, resultando en diversas formas de dao oxidativo que son
importantes en las macromolculas biolgicas, tal es el caso del dao a los cidos
nuclicos, protenas y lpidos (Imark, Kneubhl & Bodmer, 2001).
Las dietas con un alto contenido de antioxidantes naturales, como las frutas, los
vegetales y el uso frecuente de las especias usadas como condimento, han sido asociadas
con una disminucin en los ndices y frecuencia de diferentes enfermedades crnicas. Los
antioxidantes naturales fortalecen el sistema antioxidante endgeno, reducen el estrs
1

oxidativo y por consiguiente disminuyen el riesgo de progresin de las enfermedades


crnicas. Hasta ahora, las principales investigaciones se han centrado en el papel de las
vitaminas E y C, -caroteno y compuestos fenlicos vegetales, los cuales han demostrado
tener una importante actividad atrapadora de radicales libres.
Las especies vegetales producen una gran variedad de sustancias antioxidantes que
reaccionan contra los daos moleculares producidos por las sustancias reactivas de
oxgeno, en particular los que contienen grupos fenlicos y los flavonoides (Carvalho,
2004). Muchas de las hierbas y especias condimentaras utilizadas popularmente para
darle sabor a los platillos tradicionales, son una excelente fuente de compuestos fenlicos
reportndose que tienen una buena actividad antioxidante (Shobana & Naidu, 2000;
Dragland, Senoo, Wake, Holte, & Blomhoff, 2003; Hinneburg, Dorman & Hiltunen,
2006; Bonanni, Campanella, Gatta, Gregori & Tomassetti, 2006; Tsai, Tsai, Yu & Ho,
2006).
Los principios responsables de la actividad antioxidante de las especias usadas
como condimento, previenen la oxidacin de los aceites y las grasas. Las sustancias
activas de especias tales como la curcumina (crcuma, Curcuma longa L.), la capsaicina
(pimiento rojo, Capsicum annum L.), el eugenol (clavo, Eugenia caryophyllata Thunb.),
el linalool (cilantro, Coriandrum sativum L.), la piperina (pimienta negra, Piper nigrum
L.), la zingerona (jengibre, Zingiber officinale Roscoe) y el cuminaldehdo (comino,
Cuminum cyminum L.), pueden utilizarse como preservantes de alimentos naturales, y
usualmente contienen aceites esenciales que manifiestan una importante actividad
antioxidante (Shobana & Naidu, 2000; Suhaj, 2006; Chaterjee, Niaz, Gautam, Adhikari,
Variyar & Sharma, 2007).
El presente estudio tuvo como objetivo principal la recoleccin de especies nativas,
la determinacin botnica, el procesamiento agronmico de cada una, la preparacin de
extractos segn las caractersticas de los materiales biolgicos y la evaluacin del
potencial antioxidante de los extractos hidroalcohlicos secos de diez especies vegetales
medicinales, condimentarias y alimenticias seleccionadas por ser nativas de la regin, ser
usadas popularmente por la poblacin guatemalteca, estar ampliamente distribudas en el
pas, pero no haber sido estudiadas previamente por su actividad antioxidante; y, dos
especies que han demostrado anteriormente actividad antioxidante, las que servirn para
validar los procedimientos. Complementariamente se apoyo la actividad de cuatro
estudiantes de la Escuela de Qumica Farmacutica para tener una muestra total de 24
especies colectadas, procesadas y estudiadas.

I.2

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

I.2.1 Situacin del problema a nivel global


Es cada vez ms evidente que el estrs oxidativo y los radicales libres son causa de
diversas patologas, pudiendo agravar la enfermedad en curso, originar nuevos efectos
que alteren an ms la salud del paciente o deteriorar su calidad de vida. Por otra parte los
mecanismos antioxidantes naturales pueden decaer a travs del tiempo, tanto por la edad,
como por causas patolgicas que pueden surgir incluso durante la juventud (inflamacin,
hepatitis, disfunciones renales, hipertensin, artritis, infarto, obesidad, traumatismos,
intervenciones quirrgicas entre otros) o como consecuencia de los hbitos, alimentacin,
vicios y en general, de la calidad de vida.
Se ha implicado que los radicales libres ms importantes son los superxidos,
hidroxilos, perxidos y el oxgeno. Muchas drogas vegetales contienen atrapadores de
radicales los cuales estn ganando importancia en el tratamiento de enfermedades, as
mismo varias especies vegetales han demostrado tener efectivas propiedades
antioxidantes por sus constituyentes fenlicos y otros componentes bioactivos
(Ravishankara, Shrivastava, Padh & Rajani, 2002).
La proteccin que aportan los antioxidantes cuenta con un amplio espectro de
evidencias bsicas, preclnicas y clnicas, convirtindolos en una interesante herramienta
teraputica para la medicina preventiva, con un evidente rol como coadyuvantes en el
tratamiento eficaz de gran diversidad de patologas.
I.2.2 Antecedentes en Guatemala
Las drogas vegetales nativas han sido regularmente estudiadas por sus efectos
farmacolgicos y poco se ha descrito sobre su actividad antioxidante. La diversidad
vegetal del pas ha sido poco estudiada para esta actividad, pudiendo haber entre los
vegetales alimenticios y condimentarios nativos, algunos que tengan esta actividad y que
podran utilizarse como nuevas fuentes de antioxidantes para conservar los alimentos o
mejorar la calidad de vida.
Desde 1996, uno de los grupos de la Facultad de CCQQ y Farmacia de la USAC
que particip en este proyecto, realiza investigaciones sobre la actividad antioxidante en
especies nativas, que sirvieron para establecer procedimientos de extraccin y se evalu
la actividad antioxidante de unas 20 especies vegetales, sobresaliendo la actividad de
Solanum americanum Miller, aunque no existe ninguna publicacin indexada de este
trabajo (Caballeros, 2001; Barahona et al., 2002; Bolaos, 2003; Lima, 2003).
Mediante colaboracin internacional, los otros dos grupos que participa en este
proyecto ha analizado cinco especies vegetales en las que se ha demostrado la actividad
antioxidante y la composicin qumica, habindose generado tres publicaciones en
revistas inexadas que dan cuenta de los resultados (Aquino, Cceres, Morelli & Rastrelli,
2002; Navarro et al., 2003; Piccinelli, Arana, Cceres, di Villa Bianca, Sorrentino &
Rastrelli, 2004).
3

Estos trabajos iniciales inspiraron a unir esfuerzos a los grupos que haban estado
trabajando en la temtica, para aunar esfuerzos y analizar doce especies no estudiadas
previamente y dos usadas como controles que ya dieron actividad positiva en el pasado y
que servirn para validar los procedimientos analticos y comprobar la actividad descrita.
I.2.3 Justificaciones del trabajo de investigacin
I.2.3.1 La investigacin de las propiedades antioxidantes de los productos naturales es
una temtica cada vez de mayor inters mundial por sus posibilidades de aplicacin en la
prevencin de enfermedades crnicas y en el mejoramiento de la calidad de vida.
I.2.3.2 La flora nativa del pas es muy diversa y su aplicacin por la poblacin data de
mucho tiempo, pero no se han estudiado las propiedades antioxidantes de los mismos para
poder aplicarlos en forma cientfica en la prevencin o curacin de enfermedades.
I.2.3.3 Tres laboratorios de la Facultad de CCQQ y Farmacia han implementado
procedimientos que permiten el anlisis bioqumico de la actividad antioxidantes, la
caracterizacin fitoqumica de los componentes de los vegetales y el anlisis por
bioensayos micromtricos de diversas actividades, lo que hace suponer que el aunar
esfuerzos redundar en un trabajo multidisciplinario y de calidad.
I.2.3.4 Existen nuevos procedimientos de anlisis de la actividad antioxidante que pueden
ser implementados en los laboratorios existentes para ampliar el espectro de actividades
evaluadas, modernizar el equipamiento y analizar una cantidad importante de productos
naturales con propiedades antioxidantes.
I.2.3.5 La demostracin de la actividad antioxidante de plantas alimenticias, culinarias o
medicinales nativas del pas podra crear nuevas fuentes para el desarrollo agrcola e
industrial en beneficio de diversos sectores en las cadenas productivas respectivas.
I.2.3.6 La capacitacin de equipos de investigacin en las temticas del proyecto
accesibilizar elementos para el desarrollo de ciencia y tecnologa relevante al pas y
favorecer la formacin de recursos humanos en procedimientos modernos.

I.3

OBJETIVOS E HIPOTESIS

I.3.1 Objetivo general


Generar informacin qumica y biolgica de diez especies nativas usadas como
alimento, condimento o medicina para determinar su posible potencial en la industria
alimenticia y farmacutica.
I.3.2

Objetivos especficos

I.3.2.1 Revisar la informacin qumica y biolgica en diferentes bases de datos y


fuentes especializadas de las especies en estudio
I.3.2.2 Colectar diez especies cultivadas y caracterizar la materia prima (determinacin
botnica, relacin fresco: seco, % de humedad, cenizas).
I.3.2.3 Preparar extractos y determinar el rendimiento de diez especies vegetales no
estudiadas utilizadas como alimenticias, condimentarias o medicinales.
I.3.2.4 Caracterizar los compuestos fenlicos y grupos qumicos ms importantes de las
especies evaluadas mediante ensayos macro y semimicro y TLC.
I.3.2.5 Determinar la actividad antioxidante en extractos de las especies vegetales por
mtodos cromatogrficos y espectrofotomtricos.
I.3.2.6 Establecer procedimientos espectrofluoromtricos para evaluar la actividad
antioxidante.
I.3.3 Hiptesis
Por ser un estudio descriptivo no se requiere de hiptesis. Sin embargo para
realizar los anlisis estadsticos se plantea que no existe diferencia significativa de las
diez especies vegetales en estudio con respecto al parmetro de determinacin de la
actividad antioxidante.

I.4

METODOLOGA

I.4.1 Descripcin del lugar donde se realiz la investigacin


El trabajo se desarroll en nueve localidades de siete departamentos del pas,
donde se llev a cabo la colecta de material biolgico y su localizacin se describe en el
captulo correspondiente p. 28).
El material colectado fue lavado y soreado en el lugar de colecta, luego procesado
en el Laboratorio de Productos Naturales Farmaya (Ave. Centroamrica 18-92 zona 1,
ciudad de Guatemala) y trasladado a los laboratorios de la Facultad de Ciencias Qumicas
y Farmacia de la USAC, en la Ciudad Universitaria zona 12; LIPRONAT, cuyas
coordenadas geogrficas son: N 143505.5, W 0903316.0 y una altura de 1498
msnm y el Laboratorio de Bioensayos del Depto. de Citohistologa cuyas coordenadas
geogrficas son N 143503.3, W 0903315.7 y una altura de 1508 msnm.
Los datos climatolgicos son los siguientes: Temperatura promedio anual: 19.5C;
temperatura mxima: 25.5C, temperatura mnima 15.3C, temperatura mxima absoluta:
31.5C, temperatura mnima absoluta: 9.06C, precipitacin pluvial: 1,198.7 mm/ao;
humedad relativa: 78%; brillo solar por hora: 205.7; radiacin solar: 1.3 cal/cm2/min;
presin atmosfrica: 639.5 mm/Hg; velocidad del viento: 17.7 km/hora.
I.4.2 Variables
I.4.2.1 Variable dependiente:
La composicin de metabolitos secundarios de las especies evaluadas.
I.4.2.2 Variables independientes:
La actividad antioxidante de los distintos extractos obtenidos, evaluada por mtodos
analticos de diferentes principios bioqumicos.
I.4.3

Indicadores

I.4.3.1 Documentos publicados nacional e internacionalmente sobre la informacin


qumica y biolgica de las especies analizadas.
I.4.3.2 Monografias farmacopeicas de doce especies evaluadas.
I.4.3.3 Coleccin de muestras botnicas georeferenciadas depositadas en herbario
CFEH del Laboratorio Farmaya.
I.4.3.4 Relacin fresco-seco, porcentaje de humedad y porcentaje de cenizas totales de
las muestras evaluadas.
I.4.3.5 Diez extractos hidroetanlicos llevados a sequedad y dos macerados
concentrados de las especies evaluadas.
I.4.3.6 Presencia de metabolitos secundarios por ensayos fitoqumicos.
6

I.4.3.7 Concentracin de fenoles totales, inhibicin de la concentracin al 50% de


DPPH por mtodos macro y micromtricos, poder reductor de hierro y
peroxidacin de cido linolico evaluados por mtodo macromtrico.
I.4.3.8 Equipo de determinacin fluoromtrica puesto a punto.
I.4.3.9 Concentracin de quercetina evaluada fluoromtricamente.
I.4.3.10 Listas de participantes en el Curso Internacional de Fitoterapia y en el Taller de
Actualizacin de Antioxidantes, realizados en la USAC
I.4.4

Estrategia metodolgica

I.4.4.1 Colectar informacin relevante y elaborar monografias farmacopeicas de las


especies evaluadas para difundir la informacin obtenida y propiciar su
desarrollo por sectores acadmicos y empresariales.
I.4.4.2 Identificar la presencia de metabolitos secundarios por ensayos fitoqumicos para
establecer la relacin con la actividad antioxidante obtenidos por mtodos
espectrofotomtricos para cada especie evaluada.
I.4.4.3 Determinar la actividad antioxidante en especies evaluadas por mtodos
macromtricos y micromtricos para promover su desarrollo como nutricutico y
potenciar su uso industrial como posible preservantes de alimentos.
I.4.4.4 Establecer nuevos procedimientos para evaluar la actividad antioxidante vegetal.
I.4.4.5 Capacitar personal profesional en los procedimientos analticos y bioensayos
para evaluar la actividad antioxidante y la composicin fitoqumica responsable
de esa actividad.
I.4.5

Mtodos

I.4.5.1 Universo de trabajo:


Mediante criterios etnobotnicos se detectaron unas 90 especies usadas popularmente como especias, alimentos y medicamentos. Con criterios sobre disponibilidad de
material cultivado, de potencial comercializacin en los mercados nacionales, pero sobre
todo basados en la propuesta sobre la investigacin necesaria para valorizar las especies
de la flora subutilizada del pas con potencial econmico (CONAP, 2006), se escogieron
doce especies nativas, usadas como alimento, condimento o medicamento, que no se
hubieran estudiado previamente su capacidad antioxidante, y que por su uso o referencia
podran tener una actividad antioxidante, ya sea para preservar alimentos o para contribuir
a la neutralizacin de radicales libres. Se incluyeron dos especies que han demostrado
actividad en estudios anteriores, con las que se hicieron los estudios de validacin de los
procedimientos y se avanz en su estudio farmacolgico y fitoqumico [T. lucida (Aquino
et al., 2002) y S. americanum (Lima, 2003)].

Cuadro 1. Plantas alimenticias, condimentarias o medicinales nativas escogidas por su


posible accin antioxidante
Familia
Anacardiaceae
Apocynaceae
Euhorbiaceae
Fabaceae
Fabaceae
Lauraceae
Moraceae
Piperaceae
Sapotaceae
Cucurbitaceae
Asteraceae
Solanaceae

Especie
Spondias mombin
Fernaldia pandurata
Cnidoscolus chayamansa
Erythrina berteroana
Gliricidia sepium
Litsea guatemalensis
Brosimum alicastrum
Piper auritum
Manilkara sapota
Cucurbita argyrosperma
Tagetes lucida
Solanum americanum

Nombre comn
Jocote de agosto
Loroco
Chaya
Pito
Madrecacao
Laurel
Ramn, ujushte
Santa Mara
Chicozapote
Pepitoria
Pericn
Hierba mora

rgano
fruto
inflorescencia
hojas
flor
flor
hoja
fruto
hoja
fruto
semilla
hoja
hojas

Principales usos
Alimento
Condimento/alimento
Alimento
Alimento/colorante
Alimento
Condimento/medicina
Alimento/medicina
Condimento/medicina
Alimento
Alimento
Medicina/condimento
Alimento/medicina

Fuente: Seleccionado de propuesta de CONAP, 2003

I.4.5.2 Obtencin de material vegetal (delimitacin de la Poblacin):


Se recopil la informacin de cada especie, particularmente los estudios biolgicos,
qumicos, frmacolgicos y otras informaciones que se consideraron relevantes, para la
documentacin de las doce especies a estudiar. El material vegetal provino de
poblaciones cultivadas en condiciones especficas o bien en rea bajo manejo, el cual fue
determinado por un asistente (Laboratorio Farmaya) y confirmado por un botnico
(Herbarios BIGU).
El modelo de muestreo fue de tipo estratificado, preferencial y por conveniencia.
Los estratos (asociaciones vegetales homogneas por cultivo) fueron definidos por
contactos previos y por coordinacin con los productores. Conforme a la naturaleza de la
parte a estudiar para cada especie se obtuvo una muestra representativa de 1,000 g de
material vegetal; 250 g de material fue identificado y guardado como muestra de voucher
de cada poblacin, y los 750 g restantes fueron sometidos a las pruebas de laboratorio
(extraccin, estudio fitoqumico y evaluacin de actividad antioxidante). Las muestras
fueron procesadas conforme a tcnicas convencionales de secado y molienda. El
almacenamiento, embalaje y transporte se realiz conforme a los principios aceptados de
buenas prcticas de cultivo y de manejo poscosecha.
I.4.5.3 Preparacin de extractos crudos de cada especie:
Cuando por la naturaleza del rgano consumido y las caractersticas del material fue
necesaria una extraccin en fresco, se procedi con este material homogenizado en una
licuadora y etanol al 95%, se filtr y concentr en rotavapor. Los materiales que se
utilizaron secos, se procesaron de la siguiente manera: Pesar 500 g del material vegetal
seco y colocar hmedo en un percolador, agregar el disolvente y realizar una percolacin
durante 5 das con recambios diarios del disolvente hasta que la extraccin sea

exhaustiva; el menstruo extrado se reconcentr a presin reducida a una temperatura


inferior a los 45C en un rotavapor con recuperacin del disolvente.
I.4.5.4 Caracterizacin qumica:
Se hizo por pruebas convencionales de tamizaje fitoqumico (escala semimicro,
usando pruebas especficas para caracterizar flavonoides, antocianinas, antraquinonas,
cumarinas, aceites voltiles, taninos, polifenoles) y mediante TLC, usando para la
visualizacin y caracterizacin de los metabolitos reactivos cromgenos universales
(vainillina-H2SO4 y anisaldehdo) y especficos para grupos funcionales (que en general
son los mismos que para el tamizaje semimicro).
I.4.5.4.1 Investigacin de flavonoides y antocianinas (ensayos macro y semimicro):
extraer 3 g de material pulverizado con 10 mL de metanol al 80%, filtrar y concentrar.
Enfriar a temperatura ambiente y triturar el residuo con 15 mL de ter de petrleo hasta
que la extraccin sea incolora. Disolver el residuo en 30 mL de metanol al 80%, filtrar y
dividir en 5 tubos:
Tubo 1: agregar 0.5 mL de H2SO4 concentrado.
Tubo 2: agregar 3 a 5 gotas de FeCl3 al 10% (p/v).
Tubo 3: agregar 0.5 mL de HCl y calentar en bao de Mara por 5 min (leucoantocianina).
Tubo 4: agregar Magnesio metlico y 0.5 mL de HCl concentrado.
Tubo 5: agregar un lcali a un extracto acuoso.
Tubo 6: agregar solucin de cido brico en anhdrido actico.
Tubo 7: testigo.
Evaluar las reacciones, cambios de color y/o formacin de precipitado comparados con el
testigo. Desarrollo inmediato de color flavonas y flavonoles (amarillo a rojo),
flavanonoles (rojo a magenta), flavanonas (rojo, magenta, violeta, azul), isoflavonas
(amarillo); isoflavononas, chalconas y auronas no dan coloracin.
TLC: Extraer 1 g de material pulverizado con 10 mL de metanol por 5 min en bao de
Mara a 60C; filtrar y aplicar sobre cromatoplacas de silicagel 60 F254. Como estndar
usar solucin de flavonoides (quercetina, rutina, cido clorognico, hipersido) al 0.05%
en metanol (10 L). Fase mvil: acetato de etilo-cido frmico-cido actico glacial-agua
(100:11:11:27), n-butanol-cido actico-agua (40:10:50); acetato de etilo-cido frmicocido actico glacial-etilmetilcetona-agua (50:7:3:30:10). Deteccin: Sin tratamiento
qumico: UV 254 nm fluorescencia, zonas azules o amarillas. UV 365 nm, dependiendo
de la estructura, fluorescen amarillo, azul o verde.
Reactivo de Productos Naturales (NP/PEG). Fluorescencia intensa en UV-365 nm.
Solucin 1: solucin metanlica al 1% de difenilboriloxietilamina (NP).
Solucin 2: solucin etanlica al 5% de polietilenglicol 4000 (PEG). Aplicar a la placa
vapores de amoniaco para intensificar el color de las manchas.
I.4.5.4.2 Investigacin de cumarinas (ensayos semimicro): Medir 5 mL de extracto
metanlico; agregar 1 mL de agua destilada hirviendo. Con un capilar aplicar 2 manchas
9

en papel filtro; a una mancha agregar 1 gota de KOH 0.5N. Observar en luz UV de 365
nm (fluorescencia azul o verde: positivo).
TLC: A 1 g de muestra adicionar 10 mL de metanol y calentar 30 min en bao de Mara;
filtrar y evaporar hasta 1 mL. Aplicar 20 L en una cromatoplaca de slica gel 60 F254.
Usar como estndar canela en metanol al 1% (umbeliferona, cido p-cumrico,
cumarina). Fase mvil: tolueno-acetato de etilo (93:7); tolueno-ter (1:1 saturado con
10% de cido actico, 50 mL de tolueno y 50 mL de ter se mezclan por 5 min con 50 mL
de cido actico al 10%, se filtra, se descarta la fase de abajo y se usa la mezcla de
tolueno-ter). Deteccin: Sin tratamiento qumico UV 254 nm fluorescencia. UV 365 nm
todas las cumarinas muestras una intensa fluorescencia azul o verde-azul. Solucin
etanlica de KOH al 5-10%. UV-365 nm fluorescencia azul o verde.
I.4.5.4.3 Investigacin de taninos (ensayos macro y semimicro): Extraer 10 g de material
vegetal pulverizado con 30 mL de etanol o metanol al 80%, filtrar y evaporar a sequedad.
Aadir 25 mL de agua caliente al residuo y agitar con varilla y dejar enfriar. Agregar 1
mL de solucin de NaCl al 10% y filtrar. Adicionar 3 mL del filtrado a 4 tubos de ensayo:
Tubo 1: testigo.
Tubo 2: agregar 4 a 5 gotas de solucin de gelatina al 1% (p/v).
Tubo 3: agregar 4 a 5 gotas de gelatina-sal (1% de gelatina y NaCl al 10%).
Tubo 4: agregar 3 a 4 gotas de solucin de FeCl3 al 10% (p/v). Observar la formacin de
precipitado y/o cambio de coloracin. Con FeCl3: grisceo-negro: catecol; negro-azulado:
pirogalol.
I.4.5.4.4 Investigacin de aceites voltiles por TLC:
Mtodo A: Extraer 1 g de material vegetal pulverizado con 10 mL de diclorometano
agitando por 15 min. Filtrar y evaporar en bao de Mara (60C) a sequedad. Disolver en
1 mL de tolueno y aplicar 20-50 L en cromatoplaca de silicagel 60 F254.
Mtodo B: Pesar 10-50 g de material vegetal y destilar con arrastre de vapor por 1 hora.
Recolectar el aceite en xileno. Diluir la solucin de aceite en xileno con tolueno 1:5 o si
es muy concentrada 1:10 y aplicar 5 L (1:10) en cromatoplaca de silicagel 60 F254.
Estndar: solucin de tolueno 1:30 de mentol, timol, anisaldehdo, anetol, 1,8-cineol (3
L). Fase mvil: tolueno-acetato de etilo (93:7).
Deteccin: anisaldehdo-H2SO4, vanillina- H2SO4. Zonas azules verdes, rojas y cafs en
visible.
I.4.5.5 Evaluacin de la actividad antioxidante:
I.4.5.5.1 Mtodo de TLC: Aplicar 10 L de muestra y 5 L del estndar antioxidante
cido glico y cido ascrbico (1 mg/ml) en una placa cromatogrfica de silica gel 60F254.
Colocar la placa en una cmara de vidrio saturada previamente con acetato de etilo:cido
actico:cido frmico:agua (100:11:11:26). Secar y asperjar con DPPH (1 mg/mL en
metanol). Resultados: Los extractos con actividad antioxidante presentan decoloracin del
DPPH en las bandas respectivas.
10

I.4.5.5.2 Mtodo colorimtrico: DPPH es un radical libre utilizado para evaluar la


actividad atrapadora de radicales de un compuesto o extracto vegetal (Ravishankara et al.,
2002). Se prepar una serie de cuatro tubos de reaccin por ensayo. Al primer tubo que es
el blanco del control se le agreg 1 mL de una solucin tampn de acetato y 2 mL de
metanol. Al segundo tubo control, se le agreg 1 mL de tampn de acetato, 1.5 mL de
metanol y 0.5 mL de solucin metanlica de DPPH (0.0219 % p/v). Al tercer tubo, blanco
del ensayo, se le agreg 1 mL de tampn de acetato, 1.9 mL de metanol, 0.1 mL de
extracto de la muestra. Al cuarto tubo, ensayo, se le agrega 1 mL de tampn de acetato,
1.4 mL de metanol, 0.1 mL del extracto y 0.5 mL de solucin de DPPH. Se agit en
vortex por 30 seg e incub a temperatura ambiente por 30 min. Se realiz la lectura de la
absorbancia en un espectrofotmetro (517 nm) contra el blanco respectivo. Se calcula el
portentaje de disminucin de la abs causado por el extracto (Abs b controlAbs e)/Abs
control * 100 = % dis Abs. Se grafica la concentracin del extracto (eje x) vrs % dis Abs
(eje y). Se interpola el valor de CI50, que es la concentracin del extracto requerida para
disminuir un 50% la absorbancia de DPPH (Lima, 2003).
I.4.5.5.3. Mtodo micromtrico: Se usaron microplacas nuevas de 96 pozos de fondo
plano preparadas bajo luz indirecta, tratando de proteger la reaccin de la luz que puede
degradar la vitamina C. Con pipetas automticas se prepar una serie de pozos que
contienen: muestra, metanol y solucin de DPPH 500 M. Se pes aproximadamente 0.1
g de extracto seco, se diluy en 6 mL de metanol y se agit vigorosamente hasta diluir
completamente el extracto. Antes de realizar la curva de lectura se realiza una lectura
directa del extracto, as: Pozo 1, blanco control, se agreg 50 L de metanol; Pozo 2,
control, se agreg 150 L de solucion de DPPH; Pozo 3, blanco ensayo 1, se agreg 50
L de muestra; Pozo 4, ensayo 1, se agreg 50 L de muestra y 150 L de solucion de
DPPH; Pozo 5, blanco ensayo 2, se agreg 15 L de muestra y 35 L de metanol; Pozo 6,
ensayo 2, se agreg 15 L de muestra, 35 L de metanol y 150 L de solucion de DPPH.
Se calcul el % de inhibicin del 70 y 10% y se realiz la curva de lectura; si se obtienen
valores mayores se realizan diluciones del extracto y con cada una se realiza la lectura
directa hasta obtener % de inhibicin adecuados y luego se realiza la curva de lectura con
la dilucin que presente el % de inhibicin adecuado. Se prepar una curva de lectura con
8 pozos de reaccin utilizando para cada pozo el blanco respectivo. La muestra y
reactivos para cada pozo siguen las siguientes proporciones: Pozo 1, 50 L de muestra y
150 de solucion de DPPH; pozo 2, 45 L de muestra, 5 L de metanol y 150 L de
solucion de DPPH; pozo 3 40 L de muestra, 10 L de metanol y 150 L; pozo 4, 35 L
de muestra, 15 de metanol y 150 L de solucion de DPPH; pozo 5, 30 L de muestra, 20
L de metanol y 150 L de solucin de DPPH; pozo 6, 25 L de muestra, 25 L de
metanol y 150 L de solucion de DPPH; pozo 7, 20 L de muestra, 30 de metanol y 150
L de solucion de DPPH; pozo 8, 15 L de muestra , 35 L de metanol y 150 L de
solucion de DPPH; a cada pozo se le hace el respectivo blanco el cual incluye la misma
cantidad de muestra y metanol. La microplaca se agita en un vortex para placas durante
30 seg y se incuba a temperatura ambiente protegidos de la luz durante 30 min. Se lee en
un fotmetro de microplacas a una longitud de onda de 490 nm. Para calcular el
porcentaje de inhibicin de cada pozo de reaccin se utiliza la siguiente frmula:
(Absorbancia del controlAbsorbancia del ensayo)/ Absorbancia del control*100. Con los
valores de % de inhibicin de la curva de lectura (Y) y la concentracin aproximada (X)
se realiza la regresin lineal y se calcula el valor de r2, el cual debe ser preferiblemente lo
11

mas cercano a 1 para tomar como vlida la curva realizada, de lo contrario se deber
realizar nuevamente el ensayo, hasta obtener un valor de r2 adecuado.
I.4.5.5.4. Actividad reductora de Fe+3 a Fe+2: Fue utilizado el mtodo descrito en 1986 por
Oyaizu. A 2 ml de extracto (en concentraciones de 50 a 500 ug de extracto seco/ml) se le
adicionaron 2 ml de amortiguador de fosfatos (0.2 M pH 6.6) y 2 ml de ferrocianuro de
potasio al 1%. La mezcla fue incubada durante 20 min a 50C y se agregaron 2 ml de
cido tricloroactico. Se centrifug a 3000 rpm durante 10 min. Fue separado el sobrenadante y 2 ml fueron homogenizados con 0.5 ml de cloruro frrico al 0.1%. Las lecturas
Abs fueron determinadas a 700 nm. El mismo procedimiento fue llevado a cabo con los
estndares (cido glico y cido ascrbico) con la nica diferencia que el rango de
determinacin fue de 5 a 500 g/ml (Duh, Yen, Du & Yen, 1997).
I.4.5.5.5. Determinacin de la activad antioxidante en el sistema de emulsin del cido
linolico. Se determina la actividad antioxidante como el grado de inhibicin de la
peroxidacin del cido linolico. A una solucin de 10 ml de cido linolico (11.7 g/L en
99.8% de etanol) y 10 ml de amortiguador de fosfatos (200 mM, pH 7.0) le fue agregado
5 ml de muestra de las especies vegetales en estudio (100 g de extracto seco/ml). El total
del volumen fue ajustado a 25 ml con agua desmineralizada. Esta mezcla fue incubada a
40C. En diferentes das fue medido el grado de oxidacin. Para esto fueron agregados 10
ml de etanol al 75%, 0.2 ml de solucin acuosa de tiocinato de amonio al 30%, 0.2 ml de
muestra (mezcla en incubacin) y 0.2 ml de solucin de FeCl3 (20 mM en 3.5% HCl), fue
agitado en vrtex durante 3 min. Los valores de absorbancia de la mezcla fueron
determinados a 500 nm para obtener el contenido de peroxidacin. El estndar utilizado
fue BTH (Parras, Martnez-Tom, Jimnez & Murcia, 2006).
I.4.5.6 Determinacin de los compuestos fenlicos:
I.4.5.6.1 Mtodo macromtrico: Se prepar una curva patrn con 4 mL de cido glico
disuelto en agua en concentraciones de 0.625-6.25 g/L. Se agreg un blanco con 8.0
mL de agua, 0.8 mL de reactivo de Folin-Ciocalteu y 1.6 mL de Na2CO3 al 10%. Se
preparan dos tubos de muestra, al primer tubo se agreg 3.95 mL de agua, 0.4 mL de
reactivo de Folin-Ciocalteu, 0.8 mL de Na2CO3 al 10% y 50 L de muestra; al segundo
tubo se agreg 3.90 mL de agua, 0.4 mL de reactivo Folin-Ciocalteu, 0.8 mL de Na2CO3
al 10% y 100 L de muestra. Se mezclaron bien y se calentaron de 90-100C por 1 min.
Se realiza la lectura espectrofotomtrica de la absorbancia a 765 nm. Utilizando una curva
patrn se calcul la concentracin de compuestos fenlicos totales expresados como
equivalentes de cido glico/g de peso seco (Lima 2003).
I.4.5.6.2 Mtodo micromtrico: Se prepara una curva patrn con 4 mL de cido glico
disuelto en agua en concentraciones entre 0.21 y 8.5 M. En una placa de 96 micropozos
se coloca el blanco de reaccin en el primer pozo con 25 L de agua, en los siguientes 7
pozos se coloca la curva patrn de cido glico, 25 L de cada estndar (0.21, 1.06, 2.13,
4.25, 6.38, 8.50 M), los siguientes pozos se coloca 25 L de los extractos, a todos los
pozos se agrega 50 L de reactivo de Folin y 200 L de Na2CO3 700 mM. Se mezcla bien
la placa y se incuba 30 min a temperatura ambiente. Se realiza la lectura en el
luminmetro de microplacas a 630 nm. Utilizando una curva patrn se calcula la
12

concentracin de compuestos fenlicos totales expresados como equivalentes de cido


glico/g de peso seco (Waterhouse, 2007).
I.4.5.7 Procedimientos para uso del fluormetro: Colocar el filtro de emisin de fluorescencia correspondiente a 515 nm y el de excitacin de fluorescencia a 490 nm. Se prepara
una curva patrn con solucin de quercetina 1% peso:volumen, a las concentraciones 0.01
g/mL, 0.005 g/mL y 0.0025 g/mL, volumen mnimo de lectura 2 mL. Se preparan
diluciones 1:200 de los extractos metanlicos y macerados en etanol de las especies a
investigar. Se traspaza la dilucin a las cubetas del fluormetro y se realiza la lectura por
duplicado. Utilizando una curva patrn se calcula la concentracin de quercetina en g/mL
(Daz & Heinzen, 2006).
I.4.6 Tcnica estadstica
I.4.6.1 Diseo de anlisis
I.4.6.1.1 Tipo de estudio: Experimental de una fase
I.4.6.1.2 Diseo estadstico factorial de dos factores: parmetro de determinacin de la
actividad antioxidante y especie vegetal en estudio.
I.4.6.1.3 Factores:
- Parmetro de determinacin de la actividad antioxidante: Cuantificacin de fenoles
totales por macromtodo mediante Folin-Ciocalteu (a1); cuantificacin de fenoles totales
por micromtodo mediante Folin-Ciocalteu; (a2), determinacin de la TDAC por
macromtodo mediante DPPH (a3), determinacin de la TDAC por micromtodo
mediante DPPH (a4); determinacin del poder reductor del hierro (a5)
- Especies vegetales en estudio: Tagetes lucida (b1); Litsea guatemalensis (b2); Piper
auritum (b3); Solanum nigrescens (b4); Gliricidia sepium (b5); Erythrina berteroana
(b6); Fernaldia pandurata (b7); Brosimum alicastrum (b8); Cnidoscolus chayamansa
(b9); Manilkara zapota (b10); Spondias mombin (b11); y, Cucurbita pepo (b12)
Se realizaron 60 tratamientos (cinco niveles del primer factor por doce niveles del
segundo factor) que se establecieron por la combinacin de los dos factores mencionados
anteriormente.
Cada uno de los extractos obtenidos fue determinado en cada parmetro ocho
veces (4x2) para los cinco parmetros antes mencionados. Estos ltimos fueron tabulados
y expresados de la siguiente forma:
- Cuantificacin de fenoles totales macromtrico expresado como g equivalentes de
cido glico/mg de extracto seco.
- Cuantificacin de fenoles totales micromtrico expresado como g equivalentes de
cido glico/mg de extracto seco.

13

- Determinacin de la TDAC macromtrica el cual determina un valor de CI50 de DPPH


expresado como mg de extracto seco.
- Determinacin de la TDAC micromtrica: el cual determina un valor de CI50 de DPPH
expresado como mg de extracto seco.
- Determinacin del poder reductor del hierro expresado como g de extracto seco
equivalentes de acido glico necesarios para reducir el 20% de hierro.
Los resultados obtenidos mediante la determinacin de la actividad antioxidante en
el sistema de emulsin del cido linolico no fueron incluidos en el anlisis estadstico
antes descrito debido a que no era comparable con el resto de los parmetros de medicin
por haberse realizado solamente una determinacin, motivo por el cual los resultados se
presentan mediante estadstica descriptiva.
I.4.6.2 Anlisis estadstico: Los resultados fueron analizados mediante el paquete
estadstico SPSS para Windows 11.5, se realiz un anlisis univariado, las diferencias de
grupo fueron evaluadas utilizando la prueba de t-student con un nivel de confianza del
95% ( = 0.05). Luego se emplearon cajas de Tukey para una comparacin mltiple. Para
comparar las metodologas macromtricas y micromtricas se realizo una correlacin y
los resultados fueron expresados en porcentajes. Los anlisis estadsticos descriptivos
fueron llevados a cabo mediante Microsoft Excel 2007.

14

I.4.7

Instrumentos

I.4.7.1 Equipo:
Las instituciones participantes aportaron el siguiente equipo:
I.4.7.1.1 El LIPRONAT est equipado para realizar secado (horno de conveccin),
molienda, extraccin (percoladores, neocleavenger, Soxhlet), concentracin (rotavapores
Buchi, liofilizador Labconco, enfriadores, desecadores, hornos) y anlisis (potencimetro,
balanzas analticas y de humedad, asperjadores, espectrofotmetro UV-Vis y
computadora).
I.4.7.1.2 El Laboratorio de Bioensayos del Departamento de Citohistologa de la Escuela
de Qumica Biolgica est equipado para determinar actividad antioxidante por ensayos
micromtricos (microcolormetro fotmetro de microplacas, luminmetro, incubadora,
balanzas analticas y fluormetro).
I.4.7.1.3 El Departamento de Bioqumica de la Escuela de Qumica Biolgica, est
equipado para realizar extractos macerados (balanza con agitador magntico, equipo de
nitrgeno gaseoso, cmaras de refrigeracin), anlisis macromtricos para determinacin
de actividad antioxidante utilizando mtodos espectrofotomtricos UV/Vis.
I.4.7.1.4 El Laboratorio de Productos Naturales Farmaya aport el material de su Centro
de Informacin especializado, los contactos de su red de proveedores rurales, secadores
solares y de conveccin, herbario, incubadoras, rotavapores, autoclave, balanza de
humedad, mufla para cenizas y campana microbiolgica, adems de la materia vegetal
utilizada para obtener los extractos.
I.4.7.2 Materiales:
Para la mayora de procedimientos que se desarrollaron en el proyecto cada una de
las instituciones participantes tena la cristalera (vasos de precipitar, pipetas, matraces,
refrigerantes), los materiales (guantes, puntas plsticas descartables, microplacas) y los
reactivos (disolventes, estndares, medios de cultivo) necesarios que fueron repuestos o
complementados con el material adquirido con los fondos del proyecto.

15

PARTE II. MARCO TEORICO


II. 1. Oxidaciones biolgicas:
Un radical libre es toda especie capaz de existir independientemente (de ah el
nombre de libre) que contiene uno o ms electrones no emparejados, esto es, un electrn
impar en una rbita. Entre ellos se encuentra el tomo de hidrgeno (H) el cual es el
radical libre ms simple; el triclorometilo (CCl3) consiste en un radical centrado en un
carbono y que se forma durante el metabolismo del disolvente tetracloruro de carbono en
el hgado, contribuyendo a los efectos txicos de este disolvente; el superxido (O2-)
radical centrado en el oxgeno con reactividad limitada; el hidroxilo (OH) que consiste
en un radical centrado en el oxgeno sumamente reactivo el cual ataca todas las molculas
presentes en el organismo; el peroxilo y alcoxilo (RO2 y RO) que son radicales
centrados en el oxgeno y formados durante la degradacin de los perxidos orgnicos y
tambin pueden mencionarse los xidos de nitrgeno (NO, NO2), el NO se forma in
vivo a partir del aminocido L-arginina y el dixido de nitrgeno se produce cuando el
xido ntrico reacciona con el oxgeno y se encuentra en el aire contaminado y en el humo
de la materia orgnica en combustin (Frst, 1998; Lima, 2003).
Para que una molcula sea estable, todos sus electrones deben hallarse compensados
por protones. La molcula que tiene uno o varios electrones no apareados es inestable y
tiende a buscar molculas estables para formar combinaciones con ellas y saturar sus
electrones. Este proceso se denomina oxidacin y puede dar lugar a una reaccin en
cadena daina en el organismo (Halliwel, Gutteridge & Cross, 1992).
Por esto los radicales libres deben ser inactivados, en caso contrario, su reactividad
qumica puede daar varios tipos de macromolculas celulares, incluyendo protenas,
carbohidratos, lpidos y cidos nucleicos, resultando en dao celular (Frst, 1998).
En el organismo humano se generan radicales libres como por ejemplo el radical
superxido O2-. Este puede generarse por accidentes qumicos, ya que muchas molculas
en el organismo reaccionan directamente con el O y dan lugar a superxido. Entre ellas se
encuentran las catecolaminas (i.e. adrenalina y dopamina), los tetrahidrofolatos y algunas
sustancias de las cadenas de transporte de electrones mitocondriales y del retculo
endoplsmico. La generacin de perxido es una consecuencia inevitable de de la
existencia en el organismo de molculas que requieren oxgeno. Sin embargo, tambin
puede fabricarse superxido en forma deliberada. Por ejemplo, las clulas fagocitarias
16

(neutrfilos, monocitos, macrfagos y eosinfilos) que defienden al organismo frente a


bacterias, virus y hongos, generan grandes cantidades de superxido como parte del
mecanismo de eliminacin de los organismos extraos. Sin embargo, puede llegar a sufrir
errores: existen varias enfermedades (como la artritis reumatoide o la enfermedad
inflamatoria intestinal) en las que hay una activacin fagocitaria excesiva. Esta activacin
inadecuada de los fagocitos provoca lesiones de los tejidos, a las que contribuyen los
radicales de O (Halliwel et al., 1992; Lima 2003).
La mayor parte del superxido experimenta una reaccin no enzimtica o catalizada
por la superxido dismutasa para introducir H2O2. El H2O2 no tiene electrones no
emparejados, por lo que no es un radical. Su estructura molecular se parece a la del agua.
Forma parte de varias enzimas oxidasas in vivo, entre ellas las oxidasas de los aminocidos y la xantina oxidasa. El H2O2 puede regular la expresin de algunos genes por
medio de un mecanismo directo o bien un mecanismo indirecto de la subunidad
inhibitoria procedente del factor de transcripcin del gen NF-B existente en el
citoplasma (Halliwel et al., 1992).
Otro radical fisiolgico es el xido nitroso, NO, que lleva a cabo muchas funciones
fisiolgicas tiles como la regulacin de la presin arterial y la sealizacin intercelular,
pero en cantidad demasiado elevada puede ser txico. Al parecer, la produccin excesiva
de xido nitroso es un importante mecanismo de lesin mstica en varias enfermedades,
entre ellas la inflamacin crnica, el accidente cerebrovascular y el choque sptico
(Halliwel et al., 1992).
La reactividad depende del radical y de los que le sea presentado. Si se encuentran
dos radicales libres, pueden unir sus electrones no emparejados y formar un enlace
covalente. De esta forma, el hidrgeno atmico forma hidrgeno diatmico. As tambin,
existe una reaccin muy rpida del xido nitroso con oxgeno para formar un producto no
txico, el peroxinitrito (Halliwel et al., 1992).
Cuando un radical libre reacciona con un no radical, se produce un radical nuevo y
se pone en marcha una reaccin en cadena. Como la mayor parte de las molculas
biolgicas no son radicales, la generacin de radicales reactivos como el hidroxilo suele
iniciar suele iniciar reacciones en cadena. Por ejemplo el ataque de los radicales reactivos
a las cadenas laterales de los cidos grasos de las membranas y a las lipoprotenas puede
restar hidrgeno, dejando un radical centrado en el carbono, con lo que se inicia el
proceso de la peroxidacin lipdica (Halliwel et al., 1992).
Cuando la generacin de hidroxilo ocurre cerca del ADN, el radical ataca tanto al
azcar deoxirribosa como a las bases purina y pirimidina, dando lugar a una amplia
variedad de productos. En el ADN de los tejidos humanos se encuentran niveles bajos de
estos productos y sus cantidades son mayores en el ADN de las clulas cancerosas, lo que
podra deberse a la mayor formacin de radical hidroxilo en los tumores (Halliwel et al.,
1992).
Un radical libre es una especie qumica con uno o ms electrones desapareados en
su orbital externo, por lo cual constituye una molcula altamente inestable. Entre los
17

radicales libres ms importantes, estn los derivados del oxgeno: el anin superxido, el
H2O2, el radical hidroxilo y el O singulete. Por sus propiedades oxidantes, los radicales
libres reaccionan rpidamente con casi cada tipo de molcula biolgica hallada en forma
libre o formando parte de las diferentes estructuras celulares de los seres vivientes, tales
como: glucdos, fosfolpidos, aminocidos, nuclotidos, cidos grasos, lipoprotenas y
membranas celulares.
Las fuentes ms comunes de generacin de radicales libres son: las radiaciones
(UV, X, IR), el metabolismo (ejercicio extenuante, bebidas alcohlicas, drogas,
adriamicina y pptidos -amiloides), las sustancias qumicas ambientales (ozono,
nitrgeno, productos de combustin, tabaco, hidrocarburos halogenados y metales
pesados) y las infecciones (bacterianas, vricas, parasitarias y priones). En la actualidad se
reconoce que alrededor de 60 patologas pueden estar relacionadas con el aumento de
radicales libres, particularmente aquellas de tipo crnico y degenerativo.
II.2 Especies de oxigeno reactivas (EOR) y prooxidantes
Las EOR estn implicadas en numerosos eventos fisiopatolgicos como
envejecimiento, cncer, aterosclerosis y diabetes. Los antioxidantes naturales de frutas y
vegetales proveen proteccin substancial que retrasa el proceso de dao oxidativo
causado por EOR (Kamath & Rajini 2006).
Los prooxidantes son sustancias endgenas o exgenas que tienen la capacidad de
oxidar algunas molculas blanco, ya sea directamente por abstraer electrones o
indirectamente produciendo intermediarios qumicos altamente reactivos. Los radicales
libres representan una clase de dichas entidades cuya reactividad deriva de la presencia de
electrones desapareados en su estructura atmica, pero que son capaces de existir
independientemente por un breve intervalo de tiempo. EOR es un trmino colectivo que
incluye todas las formas reactivas de oxgeno, tanto las especies radicales y no radicales
que participan en el inicio o en la propagacin de reacciones en cadenas.
El ozono es una forma txica del oxgeno que oxida a protenas, cidos nucleicos y
lpidos; el oxigeno individual es muy reactivo, aunque no contiene pares de electrones
desapareados por lo que no es un radical libre; se forma in vivo por activacin enzimtica,
mediante reacciones fisicoqumicas, como en las de transferencia de energa,
descomposicin trmica de endoperxidos y dioxetanos, o por la reaccin del ozono con
los fluidos corporales. El oxgeno individual induce efectos genotxicos, carcingenos y
mutagnicos por su accin en cidos grasos poliinsaturados (Cui, Luo, Xu & Murthy,
2004; Carvalho, 2004).
El superxido es un radical aninico formado por la reduccin de oxgeno
molecular a travs de la aceptacin de un electrn. El hidroperxido, que es inestable a
pH fisiolgico, se disocia en superxido. In vivo, es producido por las cadenas
transportadoras de electrones en la mitocondria y microsomas, principalmente importante
en el tejido cerebral. El anin superxido no atraviesa las membranas celulares, por lo que
no es muy reactivo contra los constituyentes celulares. El H2O2 es relativamente inactivo,
pero si atraviesa fcilmente las membranas celulares (Cui et al., 2004). El radical
18

hidroxilo, tiene accin directa en regiones cercanas a su lugar de formacin, por su corta
vida media, pero es el miembro ms reactivo de la familia EOR, y puede daar
severamente a diferentes tipos de molculas, incluyen las protenas, cidos nucleicos y
lpidos (Carvalho, 2004). Los radicales perxidos se producen durante la peroxidacin de
lpidos, aunque esta puede ser til en algunos procesos biolgicos.
Hay otras formas de EOR que contienen nitrgeno o cloro, adems de oxgeno. El
NO2 y el NO son radicales libres con un nmero impar de electrones. El NO2 es un
oxidante fuerte, mientras que el NO acta como agente reductor dbil. Aunque se ha
discutido el papel del NO como agente vasodilatador y e hiperpolarizador de clulas
endoteliales (Cui et al., 2004).
II.3 Papel fisiolgico y patolgico de EOR
Evidencia sugiere que EOR participan en la defensa del organismo contra cuerpos
extraos y actan como moduladores de procesos biolgicos internos, incluyendo seales
de transduccin, transcripcin o muerte celular programada. La seal de transduccin se
puede describir como el proceso mediante los componentes celulares reciben informacin
de otros componentes y de afuera de la clula. La exposicin ambiental a radiacin inicia
sealizacin a travs del factor de necrosis tumoral alfa y otros factores que requeridos
para la activacin del receptor de quinasas (Cui et al., 2004).
Por su alta reactividad qumica, los niveles de EOR mayores a los requerimientos
celulares, pueden daar indiscriminadamente la integridad funcional y estructural, por
medio de modificacin celular del ADN, protenas y lpidos, o iniciando una cadena de
reacciones que pueden extender el dao oxidativo a estas molculas. Aunque las clulas
tienen una variedad de mecanismo de defensa y de sistemas reparadores ante EOR, no
siempre son suficientes. El estrs oxidativo puede relacionarse con el desequilibrio entre
la produccin de prooxidantes/radicales libres y la defensas antioxidantes. El estrs
oxidativo severo se ha implicado con enfermedades degenerativas, como aterosclerosis,
diabetes, isquemia, enfermedades inflamatorias, cncer, enfermedades neurolgicas,
hipertensin, enfermedades oculares, enfermedades pulmonares y enfermedades
hematolgicas (Cui et al., 2004).
II.4 Importancia de los antioxidantes y modo de accin:
El exceso de EOR es generalmente inactivado por molculas antioxidantes
endgenas y exgenas que tienen la habilidad que a concentraciones muy bajas pueden
retrasar o inhibir la oxidacin de un sustrato. Pueden actuar removiendo o disminuyendo
las concentraciones locales de uno o ms de los participantes de una reaccin, tales como
el oxgeno, EOR, iones metlicos, que catalizan la oxidacin, o al interferir con una
cadena de reacciones. Tambin pueden realzar las defensas antioxidantes del organismo.
Los antioxidantes intervienen en cualquiera de los siguientes pasos: Iniciacin,
propagacin o finalizacin de los procesos oxidativos (Cui et al, 2004; Carvalho, 2004).
Los antioxidantes se pueden clasificar de acuerdo a su naturaleza qumica y su
modo de accin:
19

Enzimas antioxidantes que actan sobre EOR, luego degradado a formas menos
dainas.

Antioxidantes preventivos, que actan al unirse a promotores oxidantes y metales de


transicin.

Antioxidantes que atrapan o rompen cadenas.

El aumento del consumo de frutas y vegetales se ha asociado a la proteccin contra


varias enfermedades, incluyendo cncer y enfermedades cardio y cerebrovasculares
(Serrano, Goi & Saura-Calixto, 2007). Esta asociacin es usualmente atribuida a los
antioxidantes, tales como la vitaminas C y E, carotenoides, licopenos y flavonoides que
previenen el dao de radicales libres (Du Toit, Volsteedt & Apostolides, 2001). En frutas
y vegetales abundan los flavonoides y otros compuestos polifenlicos con capacidad
antioxidante que, auque no constituyen parte del sistema antioxidante endgeno, lo
refuerzan.
La aplicacin de antioxidantes como el cido ascrbico para mantener los valores
nutricionales y la calidad de los productos alimenticios se ha practicado por dcadas en la
industria alimenticia, la cual pretende el control de la oxidacin lipdica para evitar su
enranciamiento. Otros agentes antioxidantes en alimentos son los compuestos fenlicos
los cuales tienen propiedades qumicas nicas dentro de las que destaca la formacin de
radicales de baja energa a travs de hbridos de resonancia estable. Entre los compuestos
fenlicos sintticos usados como preservante en alimentos destacan hidroxilanisol
butilado (BHA), dixidroxiltolueno butilado (BHT), propil galato (PG), octal galato (OG)
y dodecil galato (DG). Sin embargo, dichos compuestos han mostrado ser txicos o causa
de efectos adversos por lo cual su uso como aditivos en comidas es regulado y controlado
(Sin, Wong, Mak, Sze & Yao, 2006).
Los derivados polifenlicos en general, y las proantocianidinas inhiben la accin
nociva de los radicales libres y se encuentran involucrados en la gnesis de diversos
procesos patolgicos, sus aplicaciones clnicas son variadas. Se ha recomendado una
dosis diaria de 50 mg de proantocianidinas para propsitos generales de salud.
Algunos ejemplos de antioxidantes especficos son pimentol en todas las especias;
galato, biflorin isomero del eugenol y acetato de eugenilo en el clavo de olor; carnasol,
acido carnsico, rosmanol, rosmaridifenol, rosmadial y rosmariquinona, y varios steres
de metil y etil de estas sustancias en el romero y salvia; diarilheptanoides, gingerol y
zingerona en el jengibre; curcumina y tetradehidrocurcumina en la crcuma, la cual ha
sido extensamente estudiada por sus propiedades antioxidantes, como antiinflamatoria,
inmunomoduladora, antiteratognica y por su potencial como agente para la quimoprevencin del cncer del tracto gastrointestinal (Miquel, Bernd, Sempere, Daz-Alpieri
& Ramrez, 2002; Sharma, Gescher & Steward, 2005).
Los flavonoides, tales como quercetina y sus derivados que ha mostrado
propiedades antioxidantes (Glen, Makris & Kefalas, 2007), cido ferulico, piperina,
feruperina amida fenlica en pimienta negra, la cual se visualiza con potencial como
20

preservante, especialmente la pimienta verde fresca, por el alto contenido de compuestos


fenlicos (Chaterjee et al., 2007); timol y cimenol en aceite esencial de Origanum
algerianum; derivados de cidos fenlicos, flavonoides, tocoferoles, acido rosmarnico y
cineol en organo, especias secas como albahaca, estragn, laurel, enebro, perejil, ans,
hinojo, mejorana, tomillo, las cuales mostraron actividad antioxidante (Bonanni,
Campanella, Gatta, Gregori & Tomasetti, 2006; Tsai, Tasi, Yo & Ho, 2006).
Estudios epidemiolgicos han demostrado una asociacin inversa entre el aumento
de la ingesta de antioxidantes y la reduccin de la morbilidad y mortalidad por
enfermedades degenerativas. Los antioxidantes inhiben la lipoperoxidacin limitando la
aterosclerosis y sus manifestaciones clnicas, tales como el infarto de miocardio. Otros
efectos cardioprotectores asociados a la accin de antioxidantes son la inhibicin de la
adhesin de monocitos, proteccin contra los efectos citotxicos de la LDL oxidada e
inhibicin de la activacin de plaquetas. Adems, los antioxidantes protegen contra la
disfuncin endotelial asociada con la aterosclerosis, preservando la actividad del NO
derivado del endotelio.
Ensayos en animales han demostrado que los derivados polifenlicos son bien
tolerados y carecen de efectos secundarios. La evidencia clnica tiende a sostener la
efectividad de las proantocianidinas en el tratamiento de la insuficiencia venosa y otras
patologas asociadas con la alteracin de la reologa sangunea y la fragilidad capilar. Se
ha reportado que la administracin de 200 mg/da de proantocianidinas en tratamientos de
5 semanas, mejora la agudeza visual y la capacidad de visin nocturna en personas con
los trastornos visuales respectivos.
II.5 Bsqueda reciente de antioxidantes en alimentos y vegetales
Estudios recientes demuestran que varios extractos vegetales ejercen accin
antioxidante. A partir de la perspectiva del valor potencial de los antioxidantes se buscan
sustancias naturales con potente actividad antioxidante y baja toxicidad. Actualmente se
ha incrementado el inters en la investigacin cientfica e industrial de hierbas y especias
por su potente actividad antioxidante y antimicrobiana, las cuales superan a muchos de
los actuales antioxidantes naturales y sintticos. De acuerdo a la base de datos de
fitoqumica USDA 2003 el nmero de antioxidantes en plantas con elevado contenido de
antioxidantes son frijol de soya, t, hinojo, organo, cebolla, tomillo, nuez, guayaba,
coco, y otras plantas menos conocidas (Suhaj, 2006).
Varios estudios han demostrado que los compuestos fenlicos contenidos en el vino
tinto y presentes en los extractos secos de Vitis vinifera L., eran capaces de inhibir in
vitro la oxidacin de las LDL humanas. Se ha determinado el contenido de flavonoides
quercetina, kempferol, miricetina, apigenina y luteolina en diversos alimentos y se
comprob que la ingesta de flavonoides result estar significativamente asociada en
forma inversa con la mortalidad por enfermedad coronaria y adems mostr una relacin
inversa con la incidencia de infarto de miocardio (Morales, Figueroa & Bustamante,
2003).

21

Las hierbas y especias son antioxidantes naturales importantes. Su actividad


antioxidante ha sido atribuida a la presencia de compuestos fenlicos polares y aceites
esenciales (Demo, Petrakis, Kefalas & Boskou, 1999). El extracto metanlico de la
corteza de la raz de Hemidesmus indicus R.Br es atrapador de radicales superxidos,
radicales de xido ntrico, radicales hidroxilo e inhibidor de la peroxidacin lipdica
(Ravishankara et al., 2002). Los alcaloides tambin han demostrado actividad
antioxidante tal es el caso de la eritrinalina de las flores y vainas de Erythrina lysistemon
Hutch. (Juma & Majinda, 2004).
En un estudio de 195 drogas vegetales analizadas por el mtodo del tiocianato, 22
especies mostraron actividad antioxidante ms alta que el -tocoferol entre las cuales se
mencionan Dryopteris crassirhizoma Naikai, Tussilago frfara L., Siegesbeckia
orientalis L., Punica granatum L., Scutellaria barbata D. Don., Terminalia chebula
Retzus, Asiasarum heterotropoides F. Maekawa, Mentha arvensis L., Artemisia capillaris
Thunb., Crocus sativa L., Syzygium aromaticum (L.) Merr. et Perry y Uncaria kawakamii
Hayata (Carvalho, 2004).
En un estudio de 104 vegetales, frutas, bebidas y aceites consumidas en Italia se
demostr por tres mtodos que tienen actividad antioxidante, sobresaliendo la actividad
de espinaca, pimientos, esprragos y diversas bayas (Pellegrini et al., 2003). El estudio de
las hierbas medicinales y culinarias usadas en Noruega demuestra que las actividades
antioxidantes mas potentes se encuentra en el organo (Origanum vulgare L.), salvia
(Salvia officinalis L.), menta (Mentha piperita L.), tomillo (Thymus vulgaris L.), melisa
(M. officinalis) y clavo (S. aromaticum) (Dragland, Senoo, Wake, Holte & Blomhoff,
2003), as como varias especies de las familias Rosaceae, Ericaceae, Asteraceae y
Punicaceae (Halvorsen et al., 2002).
En la infusin de 70 plantas medicinales usadas en Croacia se estim la actividad
antioxidante por la reduccin frrica y los fenoles totales, demostrndose una variacin
muy amplia entre los valores y que los mejores resultados se obtuvieron con la infusin
de Melissa officinalis L. (Katalinic, Milos, Kulisic & Jukic, 2006). En un estudio de 10
especies medicinales usadas en Portugal se encontr que M. officinalis, Hypericum
undulatum Schousb. ex Willd., Laurus nobilis L. y Lavandula pedunculata L. poseen
altos valores de actividad antioxidantes e inhibidores de la acetilcolinesterasa (Ferreira,
Proena, Serralheiro & Arajo, 2006).
En un estudio sobre plantas medicinales realizado en Corea, todos los flavonoides
analizados mostraron una accin dosis-dependiente de la inhibicin de la peroxidacin
del cido linolico, siendo las ms relevantes la corteza de Morus alba L. y las hojas de
Saururus chinensis (Lour.) Baill. (Choi et al., 2002). Otros estudios realizados en China
demuestran que la mayor actividad antioxidante se obtuvo en extractos con etanol al 95%,
situacin que puede mejorarse con el uso de ultrasonido (Liu, Wu, Weng & Tseng, 2005).
Diversos estudios han demostrado que los extractos polares especialmente etanlicos y
semipolares son ms activos que los extractos lipoflicos (Maiga, Malterud, Diallo &
Paulsen, 2006; Marawah et al., 2007).

22

En extractos acuoso-metanlicos preparados de siete especies de Lamiceas de


amplio uso como condimento en Europa, se investig el efecto de la acidificacin en su
composicin qumica y actividad antioxidante. El tratamiento con HCl 1.2 N en 50%
metanol aparentemente mejor el potencial antioxidante de los extractos en general,
aunque hubo excepciones. El tratamiento no aument la FRAP de los extractos de
Ocimum basilicum L., ni la habilidad depuradora de radicales DPPH de O. vulgare y S.
officinalis; el contenido de fenoles por Folin-Coicalteau de O. basilicum no aument con
el tratamiento cido (Koar, Dorman & Hiltunen, 2005)
El extracto etanlico de la nuez de Anacardium occidentale L. mostr actividad
antioxidante en distintos sistemas de ensayos, actividad atribuida a su composicin
fenlica, que contribuye significativamente en la actividad; por lo que es de inters en la
industria alimenticia y farmacutica, en donde se postula que puede utilizarse como una
fuente econmica de antioxidantes naturales (Kamath & Rajini, 2006).
El extracto metanlico de las hojas de Cinnamomum verum J. Presl. contiene un
nmero de compuestos antioxidantes que pueden atrapar efectivamente especies reactivas
de oxgeno incluyendo radicales hidroxilo as como otros radicales libres en condiciones
in vitro (Mathew & Abraham, 2006).
En un estudio realizado en 4 especies de Haplopappus chilenas se demostr que el
extracto metanlico presenta actividad antioxidante por mtodos de TLC (Vogel et al.,
2005). En 15 especies de la cuenca del Amazonas se demostr una correlacin del
contenido fenlico con la actividad antioxidante particularmente de Byrsonima crassifolia
(L.) HBK (Silva, Souza, Rogez, Rees & Larondelle, 2007).
En la revisin de literatura realizada posteriormente a la presentacin del proyecto,
se puso en evidencia que esta lnea de investigacin es de especial inters en todo el
mundo, particularmente en asociacin con el uso de alimento nuevos y convencionales,
as como en la prevencin de procesos patolgicos crnicos en los que existe un
mecanismo degenerativo atribuible a un proceso oxidativo. Algunos de los ejemplos ms
recientes se ilustran en los siguientes artculos.
En Ecuador se evaluaron 17 frutas de amplio consumo por sus compuestos
fenlicos solubles totales y por su actividad antioxidante, usando tres mtodos diferentes
(DPPH, FRAP y ABTS). Por el contenido de fenoles totales medido por el mtodo de
Folin-Ciocalteau evaluados en 100 g de equivalente de cido glico (GAE), se
diferenciaron tres grupos, unos con valores bajos (<100 mg GAE/100 g), otros con
valores medios (200-500 mg GAE/100 g) y otros con valores altos (>1,000 mg GAE/100
g). Los valores mas altos se encontraron en los frutos de Rubus glaucus Berth.
(2,167835 mg GAE/100 g), epicarpio de Prunus serotina var. capuli (1,494385 mg
GAE/100 g) y frutos de Passiflora mollisima L. (1,010198 mg GAE/100 g). Por estudios
espectrofotomtricos se demostr que las dos primeras especies contienen antocianinas,
mientras que la tercera no (Vasco, Ruales & Kamal-Eldin, 2008).
Basados en la medicina tradicional de Tailandia se ha demostrado la actividad hipocolesterolmica de las hojas de Moringa oleifera Lam., sin embargo para aumentar la
23

utilidad clnica es necesario evaluar la actividad antioxidante, hipolipidemica y antiateroesclertica. Con esas premisas se evalu el extracto acuoso por el mtodo de DPPH y por
el efecto inhibitorio de la oxidacin de LDL inducido por Cu2+ por modelos in vitro, as
como un efecto en los niveles de colesterol, sustancia reactivas del cido tiobarbitrico
(TBARS) y formacin de placas de conejos alimentados con una dieta de colesterol. Se
demostr una CI50 de depuracin de radicales de DPPH de 78.150.92 g/ml, prolongacin del tiempo de formacin de placas e inhibicin de TBARS, en experimentos tanto
in vitro como in vivo. En conejos alimentados con una dieta hipercolesterolmica, redujo
significativamente los niveles de colesterol y la formacin de placa ateroesclertica,
indicando que posee actividad antioxidante, hipolipidmica y antiateroesclertica, con
potencial en la prevencin de enfermedades cardiovasculares (Chumark et al., 2008).
Ultimamente se ha asociado el estrs oxidativo y el cambio en el metabolismo de
los lpidos en el desarrollo y severidad de la diabetes, as como la relacin que tienen
algunos metabolitos secundarios vegetales en las actividades antioxidantes que podran
mejorar el estrs oxidativo en la diabetes. Un estudio reciente evalu el efecto de un
extracto acuoso de las hojs de Annona squamosa L. en las enzimas antioxidantes y el
perfil de lpidos de ratas albinas Wistar como modelo de diabetes tipo 2 no dependiente
de insulina. La diabetes se indujo con estreptozotocina y los animales se trataron con 350
mg/kg de extracto y luego del experimento se practic una necropsia para su estudio
posterior. Los resultados sugieren claramente que el extracto poseen una actividad
antioxidante demostrada por aumento de la actividad de las enzimas depuradoras,
catalasa, superoxido dismutasa, glutatin reductasa, glutatin transferasa y disminucin
de los niveles de malonaldehido en los diferentes tejidos animales. La administracin del
extracto tambin mejor los perfiles de lpidos de los grupos tratados, indicando que los
niveles altos de triglicridos y de colesterol total asociados con la diabetes pueden
manejarse significativamente con el uso del extracto (Gupta et al., 2008).
La actividad antioxidante de tubrculos de Pueraria mirifica Airy Shaw et
Suvatabhandu de Tailandia y de P. lobata (Willd.) Ohwi de China fueron evaluadas por el
ensayo de DPPH, mostrando que el extracto tiene una actividad antioxidante menor que
-tocoferol, sin embargo las isoflavonas (puerarina y daidzeina) tienen una actividad
antioxidante mayor que -tocoferol, esta correlacin se da nicamente con puerarina, ya
que no se presenta la misma correlacin con daidzeina, daudzina y genistein
(Cherdshewasart & Sutjit, 2008)
En frutas y vegetales usados en Uganda se evalu si las comidas tradicionales
poseen suficiente actividad antioxidante como para prevenir el estrs oxidativo y por
consiguiente combatir enfermedades. Por el mtodo de FRAP se demostr una gran
variabilidad desde la ms alta, la semilla de Syzygium cuminii (L.) Skeels (72.313.5
mmol/100 g de peso fresco), hasta la mas baja, la fruta de Cucurbita mxima Lam.
(0.090.05 mmoles/100 g de peso fresco). Se evalu la TDAC por da de porciones en
tres dietas ugandesas, encontrndose que la mayor actividad se encontr en P. granatum,
Canarium schweinfurthii Engl., Psidium guajava L., Mangifera indica L. y Cyphomandra
betacea (Cav.) Sendth., con valores entre 8.91 y 3.00 mmol/porcin (Stangeland,
Remberg & Lye, 2009).

24

El efecto antioxidante se evalu en tres diferentes bebidas consideradas funcionales,


particularmente diseadas para mejorar el desempeo y funcin del organismo, as como
por poseer importante actividad antioxidante. Usando una prueba basada en clulas, el
estudio investig el potencial de las bebidas funcionales para inactivar radicales de
aniones superoxido reactivos generados por clulas inflamatorias, y el efecto en el
metabolismo basal de estas clulas (potencial antioxidante y antiinflamatorio), as mismo
se evalu el potencial de inactivar aniones radicales de suproxido exgeno libres en un
ensayo libre de clulas. Los resultados demuestran que la bebida compuesta por extractos
de Hibiscus sabdariffa L., Sambucus nigra L., epicarpio de Citrus limonum (L.) Burm y
Citrus sinensis L., botones de Rosa rugosa L. y partes areas de Aspalathus linearis
(Burm. F.) R. Dahlgren (Dartsch, Kler & Kriesl, 2009).
II.6 Estudios de antioxidantes realizados en Guatemala
Desde 1996, el Departamento de Bioqumica de la Escuela de Qumica Biolgica en
colaboracin con la Unidad de Investigacin y Estudios Integrales sobre Alimentos
Autctonos de la Regin (UNIAR), ambas de la Facultad de CCQQ y Farmacia de la
USAC, han realizado ms de 12 investigaciones sobre la actividad antioxidante en
especies vegetales y jugos frutales (Barahona et al., 2002; Bolaos, 2003). En estos
estudios se establecieron los procedimientos para evaluar la actividad antioxidante por
medio de la reaccin con DPPH, la determinacin de los niveles de vitamina C por HPLC
y la cuantificacin de polifenoles por el mtodo de Folin-Ciocaltau, evaluados por
estectrofotometra. Se estudiaron los procedimientos de extraccin ms eficientes, se
optimizaron los mtodos para el tamizaje de la actividad antioxidante de extractos
vegetales y se evalu la actividad antioxidante de unas 20 especies vegetales entre frutas
y hierbas comestibles, sobresaliendo la actividad de Solanum americanum Miller
(Caballeros, 2001; Lima, 2004).
En el marco de proyectos de cooperacin internacional, diversos vegetales
obtenidos en el interior del pas y procesados en LIPRONAT y en el Laboratorio de
Bioensayos, se han investigado en la Universidades de Salerno, Italia y en la Universidad
de Granada, Espaa. En un primer estudio se encontr que el extracto etanlico de
Tagetes lucida Cav. (pericn) y sus flavonoles tienen actividad antioxidante superior al toxoferol (Aquino et al., 2002); en cinco especies usadas en el Caribe guatemalteco para
el tratamiento de diversas enfermedades infecciosas, tres (Acalypha guatemalensis Pax &
Hoffm., Ocimum micranthum Willd. y Smilax spinosa Mill.) presentaron una actividad
significativa evaluada en tres modelos de antioxidacin y peroxidacin lipdica (Navarro
et al., 2003); y en el tercero, el extracto etanlico de la raz de Valeriana prionophylla
Standl. y sus lignanos, demostraron actividad antioxidante y vaso-relajante (Piccinelli et
al., 2004).
II.7 Tipos de pruebas para actividad antioxidante
Existe una variedad de pruebas para evaluar la actividad antioxidante que son
empleados en la investigacin de nuevas sustancias de extractos vegetales activos, los
cuales presentan metodologas y procedimientos diversos, que se pueden agrupar en 4
tipos bsicos:
25

Secuestro de radicales libres

Inhibicin de reacciones de oxidacin y autooxidacin

Medida de potencial de oxido reduccin

Resonancia magntica nuclear de spin de electrones.

Dentro de los mtodos para analizar antioxidantes sintticos en los alimentos y los
mtodos ms empleados para cuantificare antioxidantes en aceite comestible y productos
relacionados estn TLC y HPLC-PDA (Sin et al., 2006). Serrano et al. (2006)
demostraron que los procedimientos fisiolgicos in vitro tienen mayor capacidad que los
procedimientos qumicos, concluyendo que los mtodos qumicos la determinacin de la
capacidad antioxidante puede ser menospreciada.
II.7.1 Determinacin de fenoles totales mediante el reactivo de Folin-Ciocalteu
El procedimiento de Folin-Ciocalteu es un ensayo a base de transferencia de
electrones e indica capacidad reductora, la cual ha sido normalmente utilizada para
estimar el contenido de fenoles en materiales biolgicos. El mtodo original de FolinCiocalteu fue desarrollado en 1927 y utilizado originalmente para anlisis de tirosina en
el cual ocurra una oxidacin de fenoles por molibdato producindoese un producto
coloreado entre 745-750 nm (Phipps et al., 2007).
Este es un mtodo simple, sensible y preciso y puede ser utilizado en la caracterizacin y estandarizacin de muestras botnicas. Sin embargo, la reaccin es lenta y
ocurre a pH cido por lo que este factor puede disminuir su especificidad. El ensayo no se
encuentr estandarizado y depende de las condiciones en que sea realizado. Puede sufrir
una gran cantidad de interferencias (particularmente por azcares, aminas aromticas,
dixidos de sulfuro, cido ascrbico, etc.) y debe realizarse la correccin para sustancias
interferentes. Algunas sustancias inorgnicas como la hidracina, cloruro de hidroxiamonio, sulfato de amonio, sulfato de hierro, sulfato de manganeso, nitrito de potasio,
metabisulfato de sodio, fosfato de sodio, sulfito de sodio y otros pueden reaccionar con el
reactivo de FC y provocar una aparente concentracin de fenoles (Phipps et al., 2007).
II.7.2 Determinacin de la TDAC mediante secuestro de radicales
Entre los mtodos que existen para determinar actividad antioxidante, se encuentran
aquellos que se basan en la habilidad de actuar como recolectores de radicales.
Normalmente emplean radicales estables en solucin siendo el ejemplo ms conocido el
DPPH. Una solucin del radical tiene coloracin azul y absorbe a la luz visible (517 nm)
y cuando es secuestrado por el antioxidante, la solucin sufre una decoloracin, de este
modo es posible evaluar la actividad antioxidante de una determinada sustancia
comparada cuantitativamente con patrones de antioxidantes comerciales y/o naturales
como BHA, BHT y -tocoferol. Los resultados de los ensayos depende las condiciones
de reaccin y el el caso de las plantas se ha documentado que pueden presentarse reaccin
intensa debida a los compuestos coloreados polifenlicos (Caballeros, 2001).

26

Una revisin reciente indica que si bien es una prueba confiable y ampliamente
difundida, se han demostrado incongruencias aun entre los mismos autores y
procedimientos, sugirindose protocolos mas estrictos que tomen en cuenta la
sensibilidad de los espectrofotmetros y la sensibilidad del DPPH a la luz, pH y
solubilidad del compuesto (Sharma & Bhat, 2009)
Un mtodo fcil y econmico es el cromatogrfico usando placas de TLC y como
revelador el DPPH el cual se observa decolorado en la zonas que muestren actividad
antioxidante (Vogel et al., 2005).
II.7.3 Poder reductor del hierro
Se ha reportado una correlacin directa entre la actividad antividad antioxidante y el
poder reductor de ciertos extractos vegetales. La presencia de reductantes (antioxidantes)
en los extractos provodan la reduccin de hierro (III) a hierro (II). La cantidad de hierro
(II) del complejo ferroso puede ser medida mediante la formacin de azul Perl de Prusia a
700 nm. Se ha reportado que las habilidades reductoras de las especies vegetales contra el
Fe3+ incrementan cuando se incrementa la concentracin de la especie. Generalmente las
especies reductoras contienen electrones donantes que les confieren la habilidad de
reduccin (Kosem, Han & Moongkarndi, 2007).
II.7.4 Actividad antioxidante en el sistema de emulsin del cido linolico
La peroxidacin lipdica provoca el desarrollo de rancidez y mal olor,
considerndose el primer mecanismo cualitativo de deterioro de alimentos lipdicos y
aceites. Las sustacias antioxidantes poseen la habilidad de proporcionar estabilidad a los
alimentos y calidad. Mediante el mtodo del tiocianato es determinado el porcentaje de
inhibicin de la peroxidacin lipdica con respecto al tiempo a una longitud de onda de
500 nm. Los extractos vegetales pueden exhibir actividad antioxidante efectiva a cierta
concentracin y poseer habilidad para detener la peroxidacin lipdica. Los compuestos
fenlicos y otros compuestos qumicos presentes en los extractos pueden suprimir la
peroxidacin lipdica a travs de diferentes mecanismos qumicos, incluyendo quelacin
de radicales libres, transferencia de electrones, adicin de radicales o recombinacin de
radicales (Mathew & Abraham 2006).
II.7.5 Otros mtodos para determinacin de actividad antioxidante
Otros mtodos que se pueden mencionar incluyen instrumentacin para medir
quimioluminiscencia (Hirayama et al., 1997), espectrofluorometra (Pellegrini et al.,
2003) y electroforesis capilar (Carvalho, 2004). Con fines de tamizaje en gran escala, se
ha propuesto el mtodo de AIOR que usa radicales peroxilo para desencadenar la
disminucin de la flourescencia inducida por uroporfirina; este mtodo tiene buena
linearidad y precisin (Ching, Hall, Croft, Beilby, Rossi & Ghisalberti, 2006)
Recientemente se ha descrito un mtodo fcil, rpido y barato que consiste en el uso
del bromuro de 3-(4,5-dimetilthiazol.2-il)-2,5-difeniltetrazolio (MTT), esta es una tcnica
micromtrica, que vira al violeta formazn por los extractos vegetales con actividad
antioxidante. Este mtodo se realiza en microplacas de 96 pozos, usando volmenes de 50
27

l de MTT a razn de 0.2 mg/ml, la formacin de un color azul-prpura puede


cuantificarse en un colormetro (Muraina, Suleiman & Eloff, 2009).
II.8 Seleccin de las especies en estudio
En Guatemala desde 1980 investigadores del CEMAT y de la Facultad de CCQQ y
Farmacia han realizado encuestas etnobotnicas para conocer las plantas de uso medicinal
en el pas, habiendo establecido una base de datos que indica que ms de 600 especies
vegetales son usadas con esos fines (Girn, Freire, Alonzo & Cceres, 1991; Girn &
Cceres, 1994). De ellas, unas 200 especies se han estudiado por su actividad
antibacteriana (Cceres, Cano, Samayoa & Aguilar, 1990; Cceres, Alvarez, Ovando &
Samayoa, 1991), antifngica (Cceres, Lpez, Girn & Logemann, 1991), antriprotozoo
(Cceres et al., 1998), diurtica (Cceres, Girn & Martnez, 1987), antiinflamatoria
(Cceres et al., 1992) y antiagregante plaquetaria (Villar, Calleja, Morales & Cceres,
1997).
Para seleccionar las muestras de estudio se analizaron las bases de datos y la
propuesta de investigaciones necesarias para valorizar las especies de la flora subutilizada
del pas con potencial econmico (CONAP, 2006), escogindose 10 especies nativas no
estudiadas previamente que por su uso o referencia podran tener una actividad
antioxidante, ya sea para preservar alimentos o para contribuir a la neutralizacin de
radicales libres.

28

PARTE III. RESULTADOS


III.1 OBJETIVO 1.
Revisar la informacin qumica y biolgica en diferentes bases de datos y fuentes
especializadas de las especies en estudio.
III.1.1 Actividades realizadas y resultados obtenidos
III.1.1.1 Se revis la literatura existente en bases de datos electrnicas, revistas, herbarios
y centros de informacin pblicos y privados, de las 10 especies del estudio, as como de
las dos especies que haban demostrado actividad antioxidante en estudios previos y que
se usaron para validar los procedimientos.
III.1.1.2 Se abrieron o enriquecieron carpetas con la informacin obtenida de cada una de
las especies, las cuales se incorporaron al centro de informacin de Laboratorio Farmaya
para futuras consultas.
III.1.1.5 La informacin obtenida fue analizada y los elementos mas relevantes sirvieron
para elaborar las monografas farmacopeicas de las doce especies evaluadas (Cuadro 2),
la que contiene la informacin recopilada y se presentan en los Anexos 1-12 usando el
formato sugerido por la OMS (1999) y ESCOP (2003), y el cual ha sido usado
previamente por el equipo participante para preparar monografas de plantas nativas
(Cceres, 2006).
Cuadro 2. Lista de monografas farmacopeicas elaboradas
Nombre cientifico
Brosimum alicastrum Swartz
Cnidoscolus chayamansa McVaugh
Cucurbita argyrosperma L.
Erythrina berteroana Urban
Fernaldia pandurata (ADC) Woodson
Gliricidia sepium (Jacq) Steud.
Litsea guatemalensis Mez.
Manilkara zapota (L.)
Piper auritum HBK.
Solanum nigrescens Mart & Gal.
Spondias mombin L.
Tagetes lucida Cav.

Nombre comn
Ramn
Chaya
Pepitoria
Pito
Loroco
Madre cacao
Laurel
Chichozapote
Santa Mara
Hierba mora
Jocote de agosto
Pericn

Fuente: FODECYT 28-2007

29

Droga vegetal
Fruto
Hoja
Semilla
Flor
Inflorescencia
Flor
Hoja
Fruto
Hoja
Hoja
Fruto
Hojas y flores

Pginas Referecias Foto


4
16
si
3
12
si
3
7
si
4
19
si
3
10
si
5
23
si
3
8
si
3
9
si
3
9
si
4
18
si
5
20
si
5
16
si

III.2

OBJETIVO 2.

Colectar 12 especies cultivadas y caracterizar la materia prima (determinacin


botnica, relacin fresco:seco, % de humedad, cenizas).
III.2.1 Coleccin de material
Se colectaron muestras botnicas de todas las especies en lugares de crecimiento
silvestre bajo manejo o cultivo, se obtuvo la georeferencia del lugar de colecta (latitud y
longitud), se prensaron las muestras entre papel peridico, se secaron prensadas en papel
peridico y se montaron con las tcnicas botnicas especficas, dndoles un nmero de
referencia segn la secuencia del herbario CFEH (Cuadro 3, Figura 1).
Cuadro 3. Procedencia de las muestras colectadas y referencia en herbario CFEH
Nombre comn
B. alicastrum
C. chayamansa
C. argyrosperma
E. berteroana
F. pandurata
G. glabra
L. guatemalensis
M. achras
P. auritum
S. nigrescens
S. mombin
T. lucida

Procedencia
Petn
Samayac, Suchitepquez
Salam, Baja Verapaz
Jutiapa Km 73
Guastatoya, El Progreso
Samayac, Suchitepquez
Tecpn, Chimaltenango
Finca San Jose, San Bernardino
Samayac, Suchitepquez
San Bartolome, Sacatepquez
Samayac, Suchitepquez
Cabrican, Quetzaltenango

Latitud

Longitud

1433'09" N
1506'19" N

9127'65" NO
9019'50" O

14o5230
1433'49" N

90o1105
9127'38" WO

1433'27" N
1433'15" N
14o3623
1433'10" N

9128'30" WO
9128'09" WO
90o4045
9127'962" WO

No. herbario
1019
1041
1046
1028
1023
233
965
1042
1012
1037
1040
119

Fuente: FODECYT 28-2007

Se obtuvo suficiente materia vegetal, el follaje de preferencia en floracin y el resto


segn la droga vegetal, cuando el material estaba muy sucio se lav con agua potable y
agua clorinada, se escurri y se sec en secadores solares o de conveccin en el
Laboratorio Farmaya (Figura 1).
Figura 1. Coleccin de muestras botnicas, herbario y secado en horno de conveccin

Fuente: FODECYT 28-2007

30

Para la caracterizacin fsica de la droga vegetal, se calcul el rendimiento de la


relacin de materia fresca a materia seca, se midi el contenido de humedad (%) en una
balanza y el contenido de cenizas (%) en una mufla (Figura 2, Cuadro 4). La relacin
fresco:seco vari de la ms baja 100:15.8 (G. glabra) a la mas alta 100:29.3 (S.
nigrescens). El porcentaje de humedad estuvo dentro de los rangos aceptados internacionalmente (4.9-9.6%), lo que garantiza una buena calidad de la materia prima y una
vida media larga al almacenarse. Respecto al contenido de cenizas, no existe una norma
estndar, ya que este contenido depender de cada droga vegetal; en este caso, la mayora
estuvo entre los rangos medios (3.2-9.1%), aunque algunos dieron valores ligeramente
elevados, como P. auritum (10.3) y F. pandurata (10.2%).
Figura 2. Balanza para % de humedad y mufla para % de cenizas

Fuente: FODECYT 28-2007

Cuadro 4. Relacin fresco:seco, % de humedad y % de cenizas de las muestras evaluadas


Nombre comn
B. alicastrum
C. chayamansa
C. argyrosperma
E. berteroana
F. pandurata
G. glabra
L. guatemalensis
M. achras
P. auritum
S. nigrescens
S. mombin
T. lucida

Relacin fresco:seco
100:28.5
100:22.4
100:16.1
100:22.2
100:15.8

100:26.6
100:29.3

Fuente: FODECYT 28-2007

31

% humedad
8.4
4.7
NA
7.6
4.9
7.5
9.5
NA
7.1
7.8
NA
9.6

% cenizas
3.2
3.2
NA
9.1
10.2
7.4
3.1
NA
10.3
7.2
NA
7.1

La informacin sobre la localizacin de los lugares de colesta de las muestras se


complement con una fotografa digital de cada especie (Figura 3) y se prepar un mapa
con los lugares de colecta de cada especie (Figura 4). En trminos generales la obtencin
de las muestras fue relativamente fcil, ya que la mayora se obtuvieron de desarrollos
agrcolas bien establecidos, sin embargo en algunas se dificult su obtencin en el
momento adecuado, ya sea por desconocimiento del momento de su fenologa especfica
o bien porque no se obtena una muestra botnica del producto que se obtuvo. Sin
embargo, se obtuvieron todas las muestras satisfactoriamente.
Figura 3. Fotografa de las 12 especies evaluadas

Fernaldia pandurata

Gliricidia sepium

Brosimum alicastrum

Cnidoscolus chayamansa

Spondias mombin

Cucurbita argyrosperma

Litsea guatemalensis

Fuente: FODECYT 28-2007

32

Erythrina berteroana

Manilkara sapota

Solanum nigrescens

Tagetes lucida

Piper auritum

Figura 4. Mapa de los lugares de colecta de las especies estudiadas

Fuente: FODECYT 28-2007

Todas las muestras secas fueron identificadas y luego sometidas a anlisis de


control de calidad microbiolgico-sanitario; cuando las muestras tuvieron algn
parmetro que sobrepas los niveles aceptados, fueron reprocesadas por aspercin con
etanol 70% y luego secadas en un horno de bombillas o de conveccin con flujo
horizontal. Del material procesado se emiti un certificado de control de calidad por el
Laboratorio Farmaya, se etiquet, almacen en bolsas plsticas y se transport al
LIPRONAT para su anlisis.
Complementariamente a los objetivos del proyecto, se apoy el Seminario de
Tesis Determinacin y cuantificacin de la actividad antioxidante de especies nativas y
su posible fuente para el desarrollo de nutricuticos, realizado por los estudiantes de la
Escuela de Qumica Farmacutica Dina Crdova, Roxana Dardn, Emilio Gonzlez,
Mara Cristina Menndez, asesorados por M.A. Sully M. Cruz y presentado el 24 de junio
de 2009. En este Seminario se colectaron y analizaron por procedimientos similares 12
especies nativas cuyo listado y un resumen de los resultados se presenta en el Anexo 13.
33

III.3 OBJETIVO 3.
Preparar extractos y determinar el rendimiento de 12 especies vegetales no
estudiadas que son utilizadas como alimenticias, condimentarias o medicinales.
III.3.1 Preparacin de extractos
El porcentaje de rendimiento es un parmetro utilizado para saber la cantidad de
metabolitos extraibles de cada planta. Se ve afectado por ciertos factores como la
naturaleza de los metabolitos, el disolvente utilizado y el proceso de extraccin. Diez de
los 12 extractos se prepararon por percolacin en etanol al 95% seguida de concentracin
con recuperacin del disolvente por rotavapor (Figura 5). Los rendimientos en la
extraccin y obtencin del extracto seco se muestran en el Cuadro 5.
Figura 5. Percolador de acero inoxidable, rotavapor para concentracin, desecadores al
vaco y liofilizador para los extractos acuosos

Fuente: FODECYT 28-2007

34

Cuadro 5. Rendimiento de solutos extrables en las muestras evaluadas


Especie vegetal
Brosimum alicastrum
Cnidoscolus chayamansa
Cucurbita pepo
Erythrina berteroana
Fernaldia pandurata
Gliricidia sepium
Litsea guatemalensis
Manilkara zapota
Piper auritum
Solanum nigrescens
Spondias mombin
Tagetes lucida
Promedio DE

Peso de materia
seca (g)
200
200
50
200
200
150
200
NA
200
200
NA
200

Peso extracto
seco (g)
45.70
15.30
1.56
24.90
16.50
52.42
41.50
NA
28.80
37.20
NA
14.20

Rendimiento Humedad extracto


(%)
seco (%)
22.85
0.502
7.70
4.78
3.13
10.87
12.50
0.507
8.30
8.7
34.95
7.5
20.70
17.89
NA
NA
20.70
17.9
18.60
19.8
NA
NA
7.10
12.55
15.659.66

Fuente: FODECYT 28-2007. NA: No Aplica

III.3.2 Resultados
En el Cuadro 5 puede observarse que el promedio de rendimiento de slidos
extrables de las plantas evaluadas es de 15.63%, donde la flor de G. sepium tiene el
porcentaje ms alto de rendimiento con 34.95%, luego el fruto de B. alicastrum con
22.85% y las hojas de L. guatemalensis y P. auritum ambas con 20.7%; los rendimientos
ms bajos los dieron las hojas de C. chayamansa (7.70%) y semillas de C. argyrosperma
(3.13%). Estos rendimientos indican que estas especies podran tener un potencial
interesantes, ya que este factor indica que estas especies tendpian un mejor
comportamiento y rendimiento a nivel industrial, toda vez que para la fabricacin de
productos naturales se busca obtener un buen rendimiento del extracto, utilizando la
menor cantidad de planta posible, lo que incidir dirfecdtamente en los costos de
produccin.
El valor de la desviacin estndar es de 9.66, el cual se debe a que cada planta
presenta diferente rendimiento debido a variables como la naturaleza de sus metabolitos,
los que pueden ser polares o apolares y son extraidos segn la polaridad del disolvente
utilizado. En este caso se utiliz etanol como disolvente, el cual extrate metabolitos tanto
polares como apolares. Tambin debe tomarse en cuenta la epoca de colecta, lo que
influye en la cantidad de metabolitos.
En el caso de los extractos de M. zapota y S. mombin se realiz una maceracin
cintica por que por ser frutas no fue posible su extraccin por percolacin. Adems se
prepararon muestras liofilizadas de estos extractos pero al tratar de reconstituirlas con el
disolvente de cada prueba presentaban un precipitado que actuaba como interferente por
lo que se decidi realizar el macerado con etanol al 95%.

35

III.4 OBJETIVO 4
Caracterizar los compuestos fenlicos y grupos qumicos ms importantes de las
especies evaluadas mediante ensayos macro y semimicro y TLC.
III.4.1 Anlisis fitoqumico por TLC
El anlisis fitoqumico se bas en la deteccin cualitativa de los metabolitos
secundarios poseedores, dentro de su estructura qumica, de uno o ms grupos fenlicos,
entre los metabolitos ms importantes se encontraron flavonoides, antocianinas,
antraquinonas, taninos, cumarinas y monoterpenos.
III.4.1.1 Determinacin de flavonoides y antocianinas: En la prueba de flavonoides y
antocianinas, las muestras de P. auritum, F. pandurata y G. sepium presentaron la mayor
cantidad de bandas, con 5 cada una; les siguen los extractos de T. lucida, L.
guatemalensis, E. berteroana y S. nigrescens con 4 bandas cada una (Figura 6).
Los Rfs obtenidos para los estndares de comparacin fueron 0.95 para la
quercetina, 0.45 para rutina, 0.71 para el hiprosido, y 0.63 para el cido clorognico.
Figura 6. TLC para flavonoides y antocianinas.

10

11

12

Fuente: FODECYT 28-2007


1. Pericn
5. Ramn
9. Madrecacao
A. Rutina

2. Laurel
6. Pito
10. Chico
B. Quercetina

3. Sta. Mara
7. Loroco
11. Jocote
C. Hipersido

4. Chaya
8. Hierbamora
12. Pepitoria
D. Ac. Clorognico

Ninguna de las especies present un Rf similar al de quercetina, cido clorognico e


hipersido usados como estndares; C. chayamansa y S. mombin presentaron Rf similares
al de rutina, por lo que podemos deducir que existen flavonoides similares a este
compuesto en estas especies. Como puede observarse en la Figura 6 existe una alta
diversidad de estos componentes en los extractos analizados.
36

Los extractos de M. zapota y C. argyrosperma no presentaron flavonoides bajo


estas condiciones de fase mvil y revelador.
III.4.1.2 Determinacin de antraquinonas: En la prueba de antraquinonas todas las
especies dieron negativo para la tcnica de TLC, ya que las bandas de color rojo que se
detectaron eran producidas por la presencia de clorofila no de antraquinonas como tal
(Figura 7). Este hallazgo se confirm con una prueba macromtrica cualitativa especfica
para antraquinonas usando el reactivo de Brntrager, la que se realiz con todos los
extractos y tambin mostr resultados negativos para todas las muestras.
Figura 7. TLC de antraquinonas.

Fuente: FODECYT 28-2007


1. Pericn
5. Ramn
9. Madrecacao
A. Extracto de Sen

2. Laurel
6. Pito
10. Chico

3. Sta. Mara
7. Loroco
11. Jocote

10

11

12

4. Chaya
8. Hierbamora
12. Pepitoria

III.4.1.3. Monoterpenos: Para la deteccin cualitativa de monoterpenos se utiliz la


metodologa de TLC para aceites esenciales, ya que la mayora de los comonentes de los
aceites esenciales de estas especies estn constituidos por monoterpenos.
T. lucida y C. argyrosperma fueron las especies que presentaron una mayor
cantidad de bandas. De ambas especies se esperaban estos resultados, ya que el extracto
de la primera es conocido por su contenido de aceites esenciales (Bichi et al., 1997),
mientras que la semilla de la segunda especie se sabe que es rico en aceites fijos
(Applequist, Avula, Schaneberg, Wang & Khan, 2006).
Los extractos de B. alicastrum, E. berteroana, F. pandurata, M. zapota y S. mombin
no evidenciaron la presencia de aceites esenciales bajo las condiciones utilizadas de fase
mvil y revelador (Figura 8).

37

Figura 8. TLC para aceites esenciales.

10

11

12

Fuente: FODECYT 28-2007


1. Pericn
5. Ramn
9. Madrecacao
A. Limoneno

2. Laurel
6. Pito
10. Chico
B. Citral

3. Sta. Mara
7. Loroco
11. Jocote

4. Chaya
8. Hierbamora
12. Pepitoria

Los Rfs de los estndares utilizados fueron de 0.53 para el citral y 0.60 para el de
limoneno, que son los que generalmente se usan para esta determinacin. Ninguno de los
Rfs de las especies analizadas coincidi con los mostrados por los estndares. El anlisis
por cromatografa de gases podra ayudar a caracterizar estos aceites esenciales, aunque
no se realiz por no ser un obetivo directo de estye proyecto.
III.4.1.4. Cumarinas: Para la determinacin de la presencia de cumarinas tambin se us
una tcnica de TLC. La muestra de T. lucida fue la que present la mayor cantidad de
bandas con 4 manchas.
Las especies que presentaron bandas con fluorescencia roja fueron consideradas
como negativas, ya que en este caso la coloracin la otorga la presencia de clorofila, por
este motivo las manchas que presentaron P. auritum, C. chayamansa, E. berteroana y S.
nigrescens se consideraron negativas para la presencia de cumarinas de acuerdo a la
tcnica de TLC (Figura 9).
Los Rfs de los estndares utilizados para estas pruebas fueron de 0.09 para
umbeliferona, de 0.09 para cido p-cumrico y 0.48 para cumarinas.
38

T. lucida y F. pandurata presentaron Rfs similares a los Rfs de umbeliferona y


cido p-cumrico. Ninguna muestra de las plantas analizadas present similitud con el Rf
del estndar especfico de cumarinas. Las muestras de M. zapota, S. mombin y C.
argyrosperma no presentaron cumarinas bajo las condiciones utilizadas en esta prueba.
Figura 9. TLC para cumarinas.

10

11

12

Fuente: FODECYT 28-2007


1. Pericn
5. Ramn
9. Madrecacao
A. Cumarina

2. Laurel
6. Pito
10. Chico
B. Umbeliferona

3. Sta. Mara
7. Loroco
11. Jocote
C. cido p-cumrico

4. Chaya
8. Hierbamora
12. Pepitoria

Por lo resultados anteriormente presentados se cumple con los objetivos del


proyecto como es la caracterizacin fitoqumica de los extractos secos, demostrndose la
presencia de flavonoides y antocianinas, aceites esenciales y cumarinas de varias de las
especies evaluadas; sin embargo, ninguna de las especies analizadas demostr la
presencia de antraquinonas.
En el Cuadro 6 se resumen los resultados del tamizaje por TLC de las pruebas de
flavonoides y antocianinas, antraquinonas, aceites esenciales y cumarinas.

39

Cuadro 6. Tamizaje fitoqumico de extractos secos por TLC.


Muestra
Ideal

Identificacin

Estndares

Tagetes lucida
Litsea guatemalensis

Flavonoides Antocianinas

Antraquinonas

Fase Mvil: Acetato de etilo-c. frmicoc. actico- agua


Revelador: NP/PEG

Fase Mvil: acetato de etilometanol- agua


Revelador: KOH 5% etanlico

Fase Mvil: tolueno-acetato


de etilo
Revelador: Vainillina-H2SO4

Fluorescencia amarilla, azul o verde en


365 nm

Antraquinonas: zonas rojas en


visible y fluorescencia roja en UV
365 nm
Antronas: zonas amarillas en
visible y fluorescencia amarilla en
UV 365 nm

Zonas azules, verdes, rojas,


violetas y cafs en visible.

Fluorescencia azul o verde a


365 nm

Citral:
0.53, azul-violeta;
Limoneno: 0.60, azul;

Umbeliferona: 0.09, azul;


c. p-cumrico: 0.09, azul;
Cumarinas: 0.48, verde.

0.12, 0.20, 0.29,Violeta;


0.36, Azul; 0.47, Violeta
0.20,Violeta; 0.30, Azul;
0.35, Violeta
0.06, Verde; 0.24,Violeta;
0.39, Violeta
0.11, 0.17, Verde;
0.29, 0.41, Violeta

0.09, Celeste; 0.30, Verde;


0.59, 0.94, Celeste

Quercetina: 0.95, amarilla;


Rutina: 0.45, amarilla;
Hiprosido: 0.71, amarilla;
cido clorognico: 0.63, verde.

0.49, 0.68, Amarilla; 0.77, 0.92, Verde

Hojas de sen:
0.38, 0.97 Roja

0.89, Amarilla

0.45, Azul; 0.65, 0.80, 0.86, Amarilla. 0.23, Celeste; 0.83, Celeste
0.38, 0.49, 0.65, Amarilla;
0.74, 0.78, Verde.

No detectadas

Cnidoscolus chayamansa

0.45, 0.54, 0.62, Amarilla.

No detectadas

Brosimum alicastrum

0.54, Verde; 0.94, Azul.

Erythrina berteroana

0.23, 0.29, 0.38, 0.77, Amarilla.

Manilkara zapota
Spondias mombin

0.25, Azul; 0.43, Amarilla;


0.55, Verde;0.68, Azul; 0.94, Azul.
0.18, 0.29, 0.42, Amarilla; 0.57, Verde
0.29, 0.48, 0.77, Amarilla;
0.91, 0.97, Verde.
No detectadas
0.32, 0.45, 0.54, Amarillo.

0.76, Amarilla; 0.83, Roja;


0.89, Amarilla; 0.97, Roja.
0.83, Roja; 0.89, Amarilla;
0.97, Roja.
0.82, Celeste;
0.98, Roja.
0.98, Roja
0.92, Amarilla;
0.98, Roja.
No detectadas
0.30, Celeste; 0.97, Roja.

Cucurbita angyrosperma

No detectadas

0.95, Roja

Solanum nigrescens
Gliricidia sepium

Cumarinas
Fase Mvil: tolueno-acetato
de etilo
Revelador: KOH 5%
etanlico

Piper auritum

Fernaldia pandurata

Aceites esenciales

Fuente: FODECYT 28-2007.

40

No detectadas
No detectadas

0.08, Verde; 0.38, Rojo.


0.15, Rojo;
0.33, Rojo; 0.38, Rojo.
0.15, Rojo;
0.33, Rojo; 0.39, Rojo.
0.08, Morado;
0.18, Rojo; 0.35, Verde.
0.38, Rojo.

0.21, Verde.

0.09, Celeste;
0.17, Rojo; 0.21, Rojo.
0.38, Rojo.

0.11, Violeta

0.15, Morado.

No detectadas
No detectadas
0.15, 0.20, 0.27, 0.33,
Violeta; 0.76, Rojo.

No detetctadas
No detectadas

No detectadas

No detectadas

III.4.1.5 Taninos: Para la deteccin de taninos se utiliz un mtodo macromtrico


cualitativo segn los procedimientos estndar (Solis et al., 2004). Estos utilizan cloruro de
sodio, gelatina y cloruro frrico, que se basan en la presencia o ausencia de precipitado,
ya que los taninos se identifican por ser capaces de precipitar las protenas (Figura 10).
Figura 10. Investigacin cualitativa de taninos

Fuente: FODECYT 28-2007

Como se observa en el Cuadro 7 solamente L. guatemalensis dio un resultado


positivo para taninos bajo las condiciones descritas por las tres pruebas macromtricas; el
extracto de E. berteroana dio positivo nicamente por la prueba de FeCl3 al 10%.
Cuadro 7. Resultados prueba macromtrica para taninos.
Muestra
Brosimum alicastrum
Cnidoscolus chayamansa
Cucurbita argyrosperma
Erythrina berteroana
Fernaldia pandurata
Gliricidia sepium
Litsea guatemalensis
Manilkara zapota
Piper auritum
Solanum nigrescens
Spondias mombin
Tagetes lucida

Gelatina 1%
+
-

Gelatina-Sal
+
-

FeCl3 10%
+
+
-

Resultado
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Positivo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo

Fuente: FODECYT 28-2007

III.4.1.6 Actividad antioxidante: Una de las pruebas ms importantes del laboratorio de


fitoqumica fue la demostracin de la actividad antioxidante por TLC, ya que los
resultados nos dan una idea global sobre el comportamiento de cada especie en las dems
pruebas de actividad antioxidante, aunque es una prueba cualitativa mostr datos
importantes al inhibir el DPPH que es utilizado como revelador en este caso (Figura 11).
41

Figura 11. TLC de la actividad antioxidante por la tcnica de DPPH

Fuente: FODECYT 28-2007


1. Pericn
5. Ramn
9. Madrecacao
A. cido glico (1mg/ml)

2. Laurel
6. Pito
10. Chico
B. cido glico 1/80

1
0

1
1

1
2

3. Sta. Mara
7. Loroco
11. Jocote
C. Acido ascrbico (1mg/ml)

4. Chaya
8. Hierbamora
12. Pepitoria
D. Acido ascrbico 1/12

Como se puede observar en el Cuadro 8, las especies ms promisorias basndose


solamente en esta prueba seran T. lucida y L. guatemalensis, ya que presentaron la mayor
inhibicin de DPPH comparadas con las otras especies. Son de mencionar los hallazgos
en P. auritum y S. nigrescens que tuvieron una inhibicin aceptable. Para que las especies
fueran comparables unas con otras, todos los extractos aplicados en la placa
cromatogrfica se encontraban en la misma concentracin de 1 mg/ml. Como estndares
se utilizaron cidos glico y ascrbico a diferentes concentraciones. Los extractos de C.
chayamansa, M. zapota, S. mombin y C. argyrosperma no presentaron inhibicin de
DPPH en las condiciones utilizadas de concentracin, fase mvil y revelador.
Cuadro 8. Resultados de la actividad antioxidante en TLC.
Muestra
Estndar: cido glico (1mg/ml)
Estndar: cido glico 1/80
Estndar: Acido ascrbico (1mg/ml)
Estndar: Acido ascrbico 1/12
Brosimum alicastrum
Cnidoscolus chayamansa
Cucurbita angyrosperma
Erythrina berteroana
Fernaldia pandurata
Gliricidia sepium
Litsea guatemalensis
Manilkara zapota
Piper auritum
Solanum nigrescens
Spondias mombin
Tagetes lucida

Nmero de bandas
1
1
1
1
1
0
0
2
2
3
5
0
2
4
0
3

Fuente: FODECYT 28-2007

42

Intensidad
+++
+
+++
+
+
+
+
+
+++
++
++
+++

Resultado
Positivo
Positivo
Positivo
Positivo
Positivo
Negativo
Negativo
Positivo
Positivo
Positivo
Positivo
Negativo
Positivo
Positivo
Negativo
Positivo

III.5 OBJETIVO 5
Determinar la actividad antioxidante en extractos de las especies vegetales por
mtodos cromatogrficos y espectrofotomtricos.
III.5.1 Actividades realizadas y resultados obtenidos
III.5.1.1 Se revis la literatura existente en bases de datos electrnicas, revistas y centros de
informacin pblicos y privados, sobre las metodologas usadas para evaluar la actividad
antioxidante por mtodos macromtricos y micromtricos. Se abrieron o enriquecieron
carpetas con la informacin obtenida de cada una de las especies para futuras consultas
III.5.1.2 Se establecieron los procedimientos macromtricos para la evaluacin de la
actividad antioxidante, particularmente en el Departamento de Bioqumica de la Facultad
de CCQQ y Farmacia, donde se hicieron las curvas de calibracin para cada procedimiento
y una vez validados los procedimientos se hicieron las determinaciones especficas de cada
anlisis (Figura 12).
Figura 12. Procesamiento en tubo de las curvas de calibracin con el cido glico y
Espectrofotmetro para realizar cuantificaciones

Fuente: FODECYT 28-2007

III.5.1.3 Se analizaron las doce especies vegetales en estudio, que incluy la determinacin
de TDAC utilizando el reactivo DPPH, el contenido de fenoles totales mediante la reaccin
de Folin-Ciocalteu, poder reductor del hierro y peroxidacin de cido linoleico. Despus de
los anlisis realizados se estableci que las especies vegetales en estudio presentan
diferencias significativas en los diferentes parmetros de medicin de actividad
antioxidante. En la Cuadro 9 se muestran los promedios, desviaciones estndar, mnimos y
mximos de los distintos parmetros de actividad antioxidante (fenoles totales
macromtodo, fenoles totales micromtodo, TDAC macromtodo, TDAC micromtodo y
poder reductor del hierro). Los resultados fueron analizados mediante un anlisis
univariado por la prueba de t-student a un nivel de significancia (=0.05). Esta prueba
revel que existen diferencias significativas (p<0.05) entre las diferentes especies
vegetales. Estas diferencias fueron establecidas en cada uno de los diferentes parmetros en
estudio.
43

Cuadro 9. Resumen de los valores de los valores de fenoles totales, actividad antioxidante macromtrico y micromtrico, y poder
reductor del hierro. Los resultados se expresan como mediadesviacin estndar; (valor mnimo-valor mximo)
PARMETRO DE MEDICIN
ESPECIE VEGETAL
Tagetes lucida (pericn)
Litsea guatemalensis (laurel)
Piper auritum (santa Mara)
Solanum nigrescens (hierba mora)
Gliricidia sepium (madre cacao)
Erytrhrina berteroana (pito)
Fernaldia pandurata (loroco)
Brosimum alicastrum (ramn)
Cnidoscolus chayamansa (chaya)
Manilcara zapota (chico zapote)
Spondias mombin (jocote de agosto)
Cucurbita pepo (pepitoria)

Fenoles totales
macromtodo

Fenoles totales
micromtodo

Actividad antixidante
total macromtodo

Actividad antixidante
total micromtodo

Poder reductor del


hierro

133.1912.30
(116.06-146.35)
104.2426.12
(70.45-139.55)
81.114.33
(74.93-85.75)
51.8672.63
(49.38-54.57)
49.943.48
(44.89-54.75)
15.860.82
(14.95-16.96)
44.953.41
(39.63-47.83)
17.280.66
(16.13-18.13)
75.559.99
(65.57-90.77)
23.064.48
(19.05-30.67)
3.531.40
(1.93-5.08)
6.2663.20
(2.24-10.31)

273.2520.67
(253.24-300.93)
217.3248.48
(176.89-293.96)
99.7414.40
(84.82-114.93)
88.453.80
(84.46-94.04)
313.5318.91
(286.00-334.22)
66.651.45
(65.175-68.87)
34.662.39
(31.167-37.33)
88.5283.90
(81.86-91.54)
253.713.36
(249.76-256.89)
47.391.18
(45.74-48.75)
52.872.54
(49.71-56.16)
7.500.14
(7.24-7.66)

0.020.00
(0.02-0.03)
0.050.01
(0.04-0.07)
0.140.07
(0.04-0.22)
0.220.04
(0.17-0.19)
0.470.12
(0.28-0.55)
1.080.12
(0.91-1.21)
1.140.29
(0.83-1.45)
1.270.15
(1.12-1.41)
1.080.58
(0.89-2.42)
1.950.06
(1.84-2.02)
13.420.59
(13.12-13.84)
18.651.17
(16.83-19.74)

0.020.00
(0.02-0.02)
0.040.00
(0.04-0.05)
0.260.02
(0.223-0.28)
0.160.00
(0.16-0.18)
0.310.02
(0.29-0.34)
0.740.05
(0.68-0.78)
0.650.04
(0.59-0.69)
1.260.20
(1.03-1.49)
1.190.08
(1.10-1.31)
1.430.29
(1.09-1.82)
10.090.44
(9.43-10.66)
6.790.29
(6.33-7.05)

35.733.14
(31.01-40.15)
66.752.81
(62.89-70.55)
77.862.15
(75.55-82.30)
155.842.12
(152.92-159.97)
208.291.82
(205.15-211.29)
327.831.46
(325.87-329.99)
343.001.67
(343.22-348.34)
315.261.10
(313.28-317.03)
544.672.22
(541.28-547.25)
528.171.96
(524.33-530.21)
745.562.47
(742.26-748.99)
818.761.37
(816.77-820.95)

Fuente: FODECYT 28-2007

Anlisis univariado t-student; = 0.05, nivel de confianza del 95%; valor P = valor de la probabilidad <0.05
Expresado como g equivalentes de cido glico/mg de extracto seco.
IC50= inhibicin de la concentracin de DPPH al 50% expresado como expresado como mg de extracto seco
4
Expresado como g de extracto seco equivalentes de acido glico necesarios para reducir el 20% de hierro.

44

III.5.1.3.1 Fenoles totales, la Grfica 1 compara el contenido de fenoles totales macromtodo con las doce especies. Puede observarse que T. lucida, L. guatemalensis, P. auritum
y C. chayamansa, son las especies que presentan los valores ms altos y que S. mombin es
quien presenta el menor contenido. Despus de efectuar el anlisis univariado, se procedi
a realizar una comparacin mltiple a travs de la preuba de Tukey ( = 0.05) para cada
parmetro de medicin, tomando en cuenta la doce distintas especies vegetales.
Grfica 1. Contenido de fenoles totales macromtodo en las doce especies en estudio1,2.

1
3

2
Prueba de Tukey (=0.05)
Fenoles totales como g equivalentes de cido glico/mg de extracto seco
Especies vegetales: 1. T. lucida, 2. L. guatemalensis, 3. P. auritum, 4. S. nigrescens, 5. G. sepium, 6. E. berteroana,
7. F. pandurata, 8. B. alicastrum, 9. C. chayamansa, 10. M. zapota, 11. S. mombin, 12. C. argyrosperma

En el Cuadro 10 se distinguen seis subgrupos de especies vegetales de acuerdo al


contenido de fenoles totales macromtrico. Los tres subgrupos con mayor contenido de
fenoles estn integrados por T. lucida (subgrupo 6), L. guatemalensis (susbgrupo 5) y P.
auritum con C. chayamansa (subgrupo 4).
Cuadro 10. Contenido de compuestos fenlicos macromtodo de 12 especies en estudio1,2.
Especie vegetal
S. mombin
C. pepo
E. berteroana
B. alicastrum
M. zapota
F. pandurata
G. sepium
S. nigrescens
C. chayamansa
P. auritum
L. guatemalensis
T. lucida
Significancia

n
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8

1
3.53
6.27
15.86
17.27

Subgrupos
4

15.86
17.27
23.06
44.95
49.94
51.87
75.56
81.11
104.32

0.13

0.92

0.94

0.99

1.00

133.19
1.00

Fuente: FODECYT 28-2007 1Comparacin por la prueba de Tukey, = 0.05 2Fenoles totales como equivalentes de

cido glico/mg de extracto seco.

45

En la Grfica 2 y Cuadro 11 se observan los resultados del contenido de fenoles


totales por la metodologa micromtrica. Mediante esta metodologa pueden diferenciarse
ocho subgrupos, siendo los que muestras mayor contenido de fenoles: G. septium
(subgrupo 8), T. lucida y C. chayamansa (subgrupo 7), L. guatemalensis (subgrupo 6) y P.
auritum (subgrupo 5).
Grfica 2. Contenido de fenoles totales micromtodo en las doce especies en estudio1,2.

1
3

2
Prueba de Tukey (=0.05)
Fenoles totales como g equivalentes de cido glico/mg de extracto seco
Especies vegetales: 1. T. lucida, 2. L. guatemalensis, 3. P. auritum, 4. S. nigrescens, 5. G. sepium, 6. E. berteroana,
7. F. pandurata, 8. B. alicastrum, 9. C. chayamansa, 10. M. zapota, 11. S. mombin, 12. C. argyrosperma

Cuadro 11. Contenido de compuestos fenlicos micromtodo de 12 plantas en estudio1,2


Especie vegetal

n
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8

C. argyrosperma
F. pandurata
M. zapota
S. mombin
E. berteroana
S. nigrescens
B. alicastrum
P. auritum
L. guatemalensis
C. chayamansa
T. lucida
G. sepium
Significancia

217.32
253.71
273.26
0.07

0.58

0.49

0.30

0.97

Comparacin por la prueba de Tukey, = 0.05


Fenoles totales como equivalentes de cido glico/mg de extracto seco.

Fuente: FODECYT 28-2007


2

Subgrupos
1
2
3
4
5
7.51
34.66 34.66
47.39 47.39
52.87 52.87
66.65 66.65
88.45 88.45
88.53 88.53
99.74

46

1.00

0.47

313.19
1.00

En la Grfica 3 y Cuadro 12 puede visualizarse la TDAC por mtodos


macromtricos de las especies en estudio. Al igual que en la determinacin de fenoles
macromtrica, las especies pueden categorizarse en seis subgrupos. El primer subgrupo
est integrado por las especies T. lucida, L. guatemalensis, P. auritum, S. nigrescens y G.
sepium. Entre estas cuatro especies no se observan diferencias significativas y este
hallazgo puede indica que las cuatro especies son las que poseen la mayor TDAC.
Grfica 3. TDAC por mtodos macromtricos de las 12 especies en estudio 1,2.

1
3

2
Prueba de Tukey (=0.05)
Fenoles totales como g equivalentes de cido glico/mg de extracto seco
Especies vegetales: 1. T. lucida, 2. L. guatemalensis, 3. P. auritum, 4. S. nigrescens, 5. G. sepium, 6. E.
berteroana, 7. F. pandurata, 8. B. alicastrum, 9. C. chayamansa, 10. M. zapota, 11. S. mombin, 12. C.
argyrosperma

Cuadro 12. TDAC por macromtodo en las doce especies vegetales en estudio 1,2.
Especie vegetal
T. lucida
L. guatemalensis
P. auritum
S. nigrescens
G. sepium
E. berteroana
F. pandurata
B. alicastrum
C. chayamansa
M. zapota
S. mombin
C. argyrosperma
Significancia

n
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8

Subgrupos
3

2
0.03
0.05
0.14
0.22
0.47

0.47
1.08

1.57
1.95
13.42

0.55

0.11

0.40

0.77

1.00

1
Comparacin por la prueba de Tukey, = 0.05
TDAC: valor de inhibicin de la concentracin de DPPH al 50% (IC50) expresado como mg de extracto seco.

Fuente: FODECYT 28-2007


2

1.08
1.14
1.27
1.57

47

18.65
1.00

III.5.1.3.2. La TDAC fue medida mediante la metodologa micromtrica que se presenta


en la Grfica 4 y Cuadro 13. Por esta metodologa son distinguibles cinco subgrupos. El
primero de ellos est integrado por las mismas especies que integran el primer subgrupo
de categorizado en la metodologa macromtrica, que son: T. lucida, L. guatemalensis, P.
auritum, S. nigrescens y G. sepium. Nuevamente se confirma que estas cuatro especies
son las que poseen la mayor TDAC y que entre ellas no existen diferencias significativas.
Grfica 4. TDAC por micromtodo en las 12 especies vegetales en estudio 1,2.

1
3

2
Prueba de Tukey (=0.05)
Fenoles totales como g equivalentes de cido glico/mg de extracto seco
Especies vegetales: 1. T. lucida, 2. L. guatemalensis, 3. P. auritum, 4. S. nigrescens, 5. G. sepium, 6. E.
berteroana, 7. F. pandurata, 8. B. alicastrum, 9. C. chayamansa, 10. M. zapota, 11. S. mombin, 12. C.
argyrosperma

Cuadro 13. TDAC por micromtodo en las doce especies vegerales en estudio 1,2.
Especie vegetal
T. lucida
L. guatemalensis
P. auritum
S. nigrescens
G. sepium
F. pandurata
E. berteroana
C. chayamansa
B. alicastum
M. zapota
S. mombin
C. argyrosperma
Significancia

n
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8

1
0.023
0.043
0.164
0.258
0.311

Subgrupos
3

0.651
0.738
1.200
1.260
1.430
6.792
0.111

0.999

0.390

1.000

10.093
1.000

1
Comparacin por la prueba de Tukey, = 0.05
Actividad antioxitante total: valor de inhibicin de la concentracin de DPPH al 50% (IC50) expresado como
mg de extracto seco.

Fuente: FODECYT 28-2007


2

48

III.5.1.3.3. En el Grfico 5 y Cuadro 14 pueden observarse los resultados obtenidos


mediante la metodologa macromtrica para determinar el poder reductor del hierro.
Como puede observarse esta metodologa no fue til para realizar una comparacin
ptima entre las especies. De acuerdo a los resultados obtenidos para esta metodologa es
necesario realizar una mayor cantidad de repeticiones a las realizadas para encontrar
grupos comparable, pues con lo obtenido se observa que existe diferencia significativa
entre cada una de ellas. Sin embargo, tambin puede mostrarse que las especies con
mayor poder reductor fueron T. lucida (subgrupo 1), L. guatemalensis (subgrupo 2), P.
auritum (subgrupo 3), S. nigrescens (subgrupo 4) y G. sepium (subgrupo 5).
Grfica 5. Poder reductor del hierro en las doce especies vegetales en estudio 1,2.

1
3

2
Prueba de Tukey (=0.05)
Fenoles totales como g equivalentes de cido glico/mg de extracto seco
Especies vegetales: 1. T. lucida, 2. L. guatemalensis, 3. P. auritum, 4. S. nigrescens, 5. G. sepium, 6. E.
berteroana, 7. F. pandurata, 8. B. alicastrum, 9. C. chayamansa, 10. M. zapota, 11. S. mombin, 12. C.
argyrosperma

Cuadro 14. Poder reductor del hierro en las doce especies vegetales en estudio 1,2.
Especie vegeral
T. lucida
L. guatemalensis
P. auritum
S. nigrescens
G. sepium
B. alicastrum
E. berteroana
F. pandurata
M. zapota
C. chayamansa
S. mombin
C. argyrosperma
Significancia

n
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8

1
35.73

10

11

12

66.75
77.86
155.84
208.29
315.26
327.83
346.00
528.18
544.67
745.56
1

1
Comparacin por test de Tukey, = 0.05
Poder reductor del hierro expresado como g de extracto seco equivalentes de acido glico necesarios para reducir el 20% de hierro.

Fuente: FODECYT 28-2007


2

Subgrupos
6
7

49

818.75
1

En el Cuadro 15 se muestra la correlacin entre las metodologas macromtrica y


micromtrica empleadas para la cuantificacin de fenoles totales y la determinacin de
TDAC. Como se puede observarse en cuanto a las metodologas para determinar TDAC
la correlacin es ptima, sin embargo para ambos parmetros de determinacin (fenoles y
TDAC) no se logr una excelente correlacin.
Cuadro 15. Comparacin de los mtodos macromtricos y micromtricos para la
cuantificacin de fenoles totales y TDAC
Variables en comparacin

Correlacin (%)

Interpretacin

Contenido de fenoles totales macro y micromtodo

64.43%

Buena

Actividad antioxidante total macro y micromtodo

91.10%

ptima

Fuente: FODECYT 28-2007

En el Cuadro 16 se presentan los subgrupos determinados mediante la prueba de


Tukey para el contenido de fenoles macromtrico y el tamizaje fitoqumico realizado para
todas las especies vegetales. Puede observarse que las especies de los subgrupos 5 y 6
poseen en comn la presencia de flavonoides y antocianinas, aceites voltiles y
cumarinas. En el subgrupo 4 se muestra en comn la presencia de aceites voltiles y en el
subgrupo 3 las cumarinas estn presentes en las tres especies.
Cuadro 16. Descripcin del contenido fitoqumico respecto a los subgrupos
determinados mediante el contenido de fenoles totales macromtrico
Flavonoides y
Antocianinas

Taninos

Aceites
voltiles

S. mombin
C. pepo
E. berteroana

+
-

B. alicastrum

M. zapota
S. nigrescens
G. sepium
F. pandurata
P. auritum
C. chayamansa
L. guatemalensis
T. lucida

+
+
+
+

+
-

+
+
+
+
+
+

Especie vegetal

Cumari Antraquinas
nonas

TDAC
TLC

Subgrupo

0
0
+

1
1
2

+
+
+
+
+
+

0
++
+
+
++
+++
+++

2
3
3
3
4
4
5
6

Fuente: FODECYT 28-2007

A continuacin se describen los subgrupos propuestos mediante la prueba de


Tukey para la TDAC macromtrica y el tamizaje fitoqumico realizado para todas las
especies vegetales. Como puede observarse las especies comprendidas en el subgrupo 1
muestran en comn la presencia de aceites voltiles y cumarinas.

50

Cuadro 17. Descripcin del contenido fitoqumico respecto a los subgrupos


determinados mediante la TDAC macromtrica.
Especie vegetal

Flavonoides y
Antocianinas

Taninos

Aceites
voltiles

Cumarinas

Antraquinonas

TDAC
TLC

Subgrupo

T. lucida
L. guatemalensis
P. auritum
S. nigrescens
G. sepium
E. berteroana
F. pandurata
B. alicastrum
C. chayamansa
M. zapota
S. mombin
C. argyrosperma

+
+
+
+
+
-

+
-

+
+
+
+
+
+
+

+
+
+
+
+
+
+
+
-

+++
+++
++
++
+
+
+
+
-

1
1
1
1
1
2
3
3
3
4
5
6

Fuente: FODECYT 28-2007

III.5.1.3.4. En el Grfico 6 se muestran los resultados obtenidos para la determinacin de


la actividad antioxidante en el sistema de emulsin del cido linolico. Como se puede
observar los resultados entre las especies vegetales son semejantes y no se pueden estimar
diferencias entre las mismas debido a que solamente fue realizada una determinacin de
cada una de las especies durante quince das. Con respecto al estndar utilizado (BHT)
puede observarse una considerable disminucin de la oxidacin entre el da 1 y el da 3.
Grfica 6. Determinacin de la actividad antioxidante en el sistema de emulsin del
cido linolico

51

Los antioxidantes son sustancias que previenen el dao de los radicales libres y que
pueden ser ingeridos de forma exgena a travs de la ingesta frecuente de vegetales y
frutas. stos tambin pueden ser llamados nutricuticos o sustancias que pueden ser
nutrimentos y que tienen capacidad de potenciar y/o coadyuvar con el sistema inmune
para proteger contra ciertas enfermedades y tener capacidad de modificar una funcin. Es
conocido que muchos de estos antioxidantes pueden ser potenciales preservantes al
prevenir ciertos procesos de oxidacin (Vinson, Su, Zubizk & Bose, 2001). En el presente
estudio fueron incluidas 12 especies vegetales que se evaluaron mediante diferentes
parmetros de medicin para determinacin de actividad antioxidante como posibles
nutricuticos y preservantes.
Se pudo observar que las 12 especies vegetales muestran diferencias significativas
en los diferentes parmetros de medicin de la actividad antioxidante, presentndose
distintos subgrupos en cada parmetro de medicin. Se logr determinar que las especies
T. lucida, L. guatemalensis, P. auritum, S. nigrescens y G. sepium son las que presentan
los mejores rendimientos con los distintos parmetros de medicin.
III.5.2 Discusin de resultados.
Fueron evaluados los parmetros de fenoles totales y TDAC mediante metodologas
macromtricas y micromtricas. Para el contenido de fenoles totales macromtodo se
evidenci que existen seis subgrupos, mientras que para la metodologa micromtrica se
observan ocho subgrupos. De acuerdo a la correlacin llevada a cabo entre ambas
metodologas, esta es buena (64.43%), sin embargo, debera ser excelente la correlacin
para que los resultados fueran comparables.
Durante el proceso de implementacin de la metodologa micromtrica se evidenci
que concentraciones por encima de 1 mg/ml no son detectables, perdindose la linealidad
de las lecturas y que esta metodologa es til para detectar cantidades muy pequeas (<1
mg/ml). La metodologa micromtrica presenta buena reproducibilidad interda y en el
mismo da (CV<15%) (FDA, CDER & CVM, 2001). Sin embargo existen factores
importantes como la longitud de onda en la que fueron ledas las muestras, ya que el
mtodo establece la lectura a longitud de onda de 765 nm (Waterhouse, 2001), pero por
carecer de este filtro se realiz la lectura a 630 nm lo cual significa interferencia de otras
sustancias que emiten color a esta longitud de onda, por lo cual se recomienda que en
futuros anlisis se adquiera el filtro respectivo para minimizar interferencias.
Por otro lado la direccin de la transmisin de la luz con la que se realizan las
lecturas en un fotmetro de microplacas es vertical por lo que la presencia de partculas
de mayor tamao, como ocurre en el caso de los macerados etanlicos interfiere con la
transmitancia de luz, caso que no ocurre en el espectrofotmetro utilizado en el mtodo
macromtrico, en el cual el haz de luz es horizontal en la porcin superior del volumen
del analito ha determinar, con lo que la sedimentacin o precipitacin de partculas no
interfiere con dicho haz de luz, para lo cual se recomienda trabajar con mayores
diluciones que minimicen el efecto de interferencia por tamao de partcula. Ambos
factores son los principales responsables en que casi un 35% de las mediciones no
correlacionen con respecto a la metodologa macromtrica, sin embargo son modificables
52

y permite aplicar el mtodo micromtrico, el cual adems de representar un ahorro


econmico al utilizar menor volumen de muestra y reactivos, tambin representa un
ahorro de tiempo al permitir la lectura simultanea de 80 analitos simultneamente.
Con respecto a la TDAC pudo demostrarse que tanto la metodologa macromtrica
como la micromtrica presentan un grupo lder en compuestos antioxidantes lipoflicos o
hidroflicos el cual est integrado por T. lucida, L. guatemalensis, P. auritum, S.
nigrescens y G. sepium. Entre ambas metodologa existe una ptima correlacin
(91.10%), la cual es mejorable, sin embargo al punto en que qued implementada la
prueba y en que fueron evaluadas las muestras, los resultados son semejantes y
comparables. Ambas metodologas poseen buena reproducibilidad interda y en el mismo
da (CV<15%) (2).
Por las razones anteriormente descritas se procedi a realizar las inferencias con
respecto a los resultados obtenidos mediante las metodologas macromtricas para el
contenido de fenoles totales y TDAC. Ambas metodologas poseen en comn que han
sido optimizadas mediante distintos trabajos de investigacin para poder desarrollarse en
las condiciones del pas (Caballeros, 2001; Lima, 2003). Adems, puede evidenciarse que
ambas metodologas macromtricas distinguen seis subgrupos, que se desplazan de
diferente forma de acuerdo al parmetro, pero distinguen el mismo patrn. Esto evidencia
que los extractos con mayor actividad antioxidante generalmente son ricos en compuestos
polifenlicos lo cual se relaciona con estudios previos (Caballeros, 2001, Khknen,
Hopia & Heinonen, 2001).
Los compuestos fenlicos poseen una importante accin en la estabilizacin de la
oxidacin lipdica, han sido asociados con la actividad antioxidante y se ha sugerido que
tienen efecto inhibitorio sobre la mutagnesis y la carcinognesis (Ortiz, Snchez,
Barragan, Murillo & Mendez, 2007).
Las especies estudiadas con mayor contenido de compuestos fenlicos en esta
investigacin fueron T. lucida y L. guatemalensis. Se pudo evidenciar que ambas especies
poseen en comn la presencia de flavonoides, aceites voltiles y cumarinas. Los
flavonoides son compuestos de dos anillos fenlicos ligados a un anillo pirano y
generalmente son compuestos pigmentados que al consumirlos se obtiene de ellos
propiedades antiinflamatorias, antimicrobianas, antitrombticas, antialrgicas, antitumorales y antioxidantes. La actividad antioxdiante de los flavonoides resulta de la
combinacin de sus propiedades quelantes de hierro y secuestradoras de radicales libres,
adems de la inhibicin de las oxidasas, evitando as la formacin de EOR y de
hidroxiperxidos orgnicos. Aunado a esto, se ha reportado que tambin inhiben enzimas
involucradas indirectamente en los procesos oxidativos (Prez 2003; Escamilla, Cuevas &
Guevara, 2009).
Ambas especies anteriormente mencionadas poseen un alto potencial de ser
utilizadas como pigmentos naturales por la presencia de flavonoides que adems,
proporcionan actividad antioxidante exgena e inhiben procesos oxidativos. En base a los
hallazgos obtenidos de este primer tamizaje antioxidante, resulta apremiante continuar
con las investigaciones referentes a los flavonoides de ambas especies.
53

Con respecto a las cumarinas comunes a T. lucida y L. guatemalensis, puede


mencionarse que estas sustancias constituyen un grupo muy amplio de principios activos
fenlicos que se encuentran en las plantas medicinales. Como grupo, su inters
farmacolgico no es muy grande, sin embargo se conocen sus efectos sobre el sistema
vascular y su utilidad en el tratamiento de algunas alteraciones de la piel (Carretero,
2000).
Ambos grupos de compuestos, flavonoides y cumarinas se encuentran por lo tanto
ntimamente relacionados con los resultados obtenidos a travs de la determinacin de
fenoles totales y ambos grupos estn involucrados en la obtencin de los altos resultados
de este parmetro de medicin de actividad antioxidante.
Como se pudo evidenciar, las especies con mayor TDAC fueron T. lucida, L.
guatemalensis, P. auritum, S. nigrescens y G. sepium. Entre ellas no existen diferencias
significativas con respecto a este parmetro y pueden considerarse como el grupo lite de
especies vegetales con TDAC lipoflica. Estas cinco especies poseen en comn la
presencia de aceites voltiles y cumarinas. La presencia de aceites voltiles cuya
naturaleza es en su mayora lipoflica, coincide con la clase de sustancias antioxi-dantes
evaluadas en este parmetro. Como ya se ha descrito, la presencia de los compuestos
polifenlicos, como las cumarinas, posee un efecto sobre la TDAC de la especie.
En relacin a T. lucida, puede mencionarse que los resultados coinciden con
estudios previos que han descrito que el aceite esencial de dicha especie posee actividad
antioxidante y contienen trans-anetol y estragol (Aquino et al., 2002), compuestos
ampliamente utilizados como saborizantes y aromatizantes en las industrias de alimentos
y bebidas alcohlicas; adems, son utilizados en perfumes, jabones y detergentes y como
precursores en sntesis orgnica para formulaciones farmacuticas (Muoz et al., 2007).
Por ser L. guatemalensis una especie nativa de Guatemala, no se cuenta con
estudios previos relacionados con la actividad antioxidante del aceite esencial,
flavonoides, taninos y de las cumarinas de esta especie, que permitan ampliar su
informacin sobre potencial antioxidante, constituyndose ste en el primer hallazgo
sobre actividad antioxidante de esta especie en el cual se indica la potencial utilidad de
los flavonoides, taninos, aceites voltiles y cumarinas de dicha especie.
La familia Piperaceae a la que pertenece P. auritum ha sido ampliamente estudiada,
sin embargo, muy escasos estudios demuestran su actividad antioxidante. Probablemente
la actividad de esta especie se encuentre relacionada al contenido de cumarinas, ms que
al aceite esencial. Un estudio previo indica que el aceite esencial de esta especie no posee
actividad antioxidante que sea comparable con la Vitamina E y adems evidencia
ausencia de compuestos polifenlicos en el aceite esencial (Garca Ros, Leyva, Martnez
& Stachenko, 2007).
Otro de los parmetros de actividad antioxidante en estudio fue el poder reductor
del hierro. Este parmetro no mostr patrones agrupados, por lo que no se logr hacer
comparaciones y asociaciones entre las especies en estudio para este parmetro. Sin
embargo, puede observarse que las especies vegetales con mayor poder reductor fueron T.
54

lucida, L. guatemalensis, P. auritum, S. nigrescens y G. sepium, aunque de acuerdo a esta


metodologa entre ellas existe una diferencia significativa, probablemente es necesario
realizar un mayor nmero de determinaciones o bien analizar mayores concentraciones de
las especies que poseen menor actividad en esta metodologa, para que puedan
establecerse asociaciones. Resulta necesario mejorar la optimizacin de este parmetro de
medicin de la actividad antioxidante.
La reduccin de hierro es un parmetro que posee un costo reducido y que puede
ser un mtodo que proporcione una visualizacin del comportamiento antioxidante de las
especies vegetales. Las propiedades reductoras de las especies son generalmente
asociadas con la presencia de reductones, los cuales poseen actividad antioxidante por el
rompimiento de la cadena de los radicales libres por medio de la donacin de tomos de
hidrgeno (Mathew & Abraham, 2006). La presencia de reductones (antioxidantes) en los
extractos dan por resultado la reduccin de hierro (III) a hierro (II) (Kosem et al., 2007).
Algunos autores han asociado a los polifenoles como sustancias con la capacidad de
realizar el papel de reductores (Kaur & Arora, 2008).
El ltimo parmetro utilizado para estimar TDAC fue el sistema de emulsin del
cido linolico. Por este parmetro no se pudo concluir debido a que solamente se realiz
una determinacin. Adems es necesario optimizar correctamente esta prueba debido a
que no se lograron observar resultados que coincidan con los hallazgos obtenidos
mediante las metodologas optimizadas.
Puede concluirse de forma general que las especies vegetales con mayor actividad
antioxidante fueron T. lucida, L. guatemalensis, P. auritum, S. nigrescens y G. sepium y
que es necesario realizar posteriores estudios sobre los grupos fitoqumicos caractersticos
de estas especies para que puedan ser utilizados como potenciales nutricuticos y
preservantes.

55

III.6

OBJETIVO 6
Establecer procedimientos espectrofluoromtricos para evaluar la actividad antioxidante.

III.6.1 Actividades realizadas y resultados obtenidos


III.6.1.1 Se revis la literatura existente en bases de datos electrnicas, revistas y centros de
informacin sobre las aplicaciones para evaluar la actividad antioxidante por medio de
mtodos fluoromtricos analizndolos con las opciones de equipos ofrecidos en el mercado
local.
III.6.1.2 Se adquiri el fluormetro QuantechTM (Figura 13) por ser el equipo que mejor se
adapt a a las condiciones tcnicas, necesidades analticas y disponibilidad financiera. Dicho
equipo al presentar variedad de filtros de emisin y excitacin permite adems otras
aplicaciones para futuros estudios de determinacin de actividad antioxidante, tales como el
anlisis de vitaminas A, C y E, que generalmente se hace en equipos mas sofisticados.
Figura 13. Fluormetro Quantech

Fuente: FODECYT 28-2007

56

III.6.1.3 Se estableci un mtodo para la cuantificacin de la concentracin de quercetina en


las especies vegetales en estudio, por ser un flavonoide cuyo efecto antioxidante se ha
demostrado en varios estudios y porque emite fluorescencia que puede ser detectada por
medio de los filtros disponibles actualmente (filtro de emisin 515 nm y filtro de excitacin
490 nm) (Daz & Heinzen, 2006).
III.6.1.4 Se puso a punto el equipo y se realizaron 5 curvas patrn utilizando diluciones de
quercetina a diferentes concentraciones 0.5, 0.25 y 0.125 mg/mL, obteniendo los coeficientes
de determinacin respectivos (Cuadro 18). Considerndose para el caso de este equipo en
particular un rango de coeficientes de determinacin vlidos entre 0.75 a 1.0 para poder
procesar la curva estndar como vlida. Adems se introdujo como muestras desconocidas
soluciones de quercetina con concentracin de 0.75 mg/mL como control interno para
identificar la exactitud en la medicin, determinndose un coeficiente de variacin de 2.85.
Cuadro 18. Coeficiente de determinacin fluormetro Quantech
Da de medicin

Coeficiente de determinacin

1
2
3
4
5

1.0
0.95
1.0
1.0
1.0

Valor de control interno (g/mL)


(quercetina 0.75 mg/mL)
0. 75
0. 79
0. 75
0. 74
0. 78

Fuente: FODECYT 28-2007

III.6.1.5 Basados en estos estudios preliminares se determin la concentracin de quercetina en


las especies vegetales investigadas (Cuadro 19) para lo cual se realiz una dilucin 1:2000 de
los extractos etanlicos o macerados etanlicos de las especies investigadas, obtenindose las
concentraciones que se muestran en el Cuadro z.
Cuadro 19. Concentracin de quercetina por mtodos fluoromtricos
Especie

Concentracin de
quercetina (mg/mL)
5 0.00
3,200 30.84
110 5.32
520 5.92
160 3.4
70 0.35
1,800 11.78
25 0.85
2,790 20.34
2,180 42.33
25.9 1.2
1,070 19.65

Brosimum alicastrum
Cnidoscolus chayamansa
Cucurbita argyrosperma
Erythrina berteroana
Fernaldia pandurata
Gliricida sepium
Litsea guatemalensis
Manilkara sapota
Piper auritum
Solanum americanum
Spondias mombin
Tagetes lucida
Fuente: FODECYT 28-2007

Segn la tcnica fluoromtrica se pudo identificar que las especies que presentan mayor
concentracin de quercetina son C. chayamansa, P. auritum, S. americanum, L. guatemalensis
y T. lucida.
57

L. guatemalensis y T. lucida son dos de las especies que han presentado mayor actividad
antioxidante tanto por cuantificacin de fenoles totales como por determinacin de la TDAC
por DPPH. Otros estudios han demostrado que la mayor parte de la capacidad antioxidante de
frutas y vegetales es proporcionada por su contenido en vitamina C, E, carotenos y diferentes
polifenoles, as como propiedades farmacol-gicas de algunas especies han sido relacionadas
directamente con la presencia de polifenoles, especialmente flavonoides, reportndose en
algunos estudios que existe relacin entre quercetina y la actividad antioxidante de especies
vegetales (Diaz & Heinzen, 2006).
Los efectos en la salud de los polifenoles en la dieta han acaparado la atencin de los
nutricionistas en los ltimos aos. Los beneficios de los polifenoles, especialmente los
flavonoides incluyen actividad antioxidante, anticncer y efectos anti-inflamatorios entre
otros. Estudios experimentales soportan fuertemente el papel de los polifenoles en la
prevencin de enfermedad cardiovascular, especialmente al limitar el desarrollo de la lesin
ateromatosa al inhibir la oxidacin de lipoprotenas de baja densidad (Ferrazzano, Amato,
Ingenito, de Natale & Pollio, 2009). Otros estudios han determindo que existe mayor efecto
protector para la oxidacin al combinar -tocoferol y quercetina que la combinacin mostrada
por alfa tocoferol y cido ascrbico (Pineda, Salucci, Lzaro, Maiani & Ferro-Luzzi, 1999).
Segn tamizaje fitoqumico ninguna especie vegetal manifest presencia de quercetina
por cromatografa en capa fina, la discrepancia de resultados se puede deber a varios factores,
entre ellos el hecho que no se pueden comparar mtodos cualitativos y cuantitativos, adems
que la concentracin de los estndares en la de medicin de quercetina por mtodos
fluoromtricos se utilizaron menores concentraciones que las utilizadas en el tamizaje
fitoqumico, esto aunado al hecho de que pueden existir otras sustancias que emitan
fluorescencia a la longitud de onda utilizada para la determinacin de quercetina que puedan
interferir en la determinacin.

58

III.7 SOCIALIZACION DE LA INFORMACION


III.7.1 Curso Internacional de Fitoterapia
Como una actividad conjuntaentre la Comisin Asesora de Productos Naturales
(CAPRONAT) del Ministerio de Salud Pblica y Asistencia Social, el Departamento de
Farmacognosia y Fitoqumica de la Escuela de Qumica Farmacutica de la Facultad de
CCQQ y Farmacia, Universidad de San Carlos, la Asociacin de Pequea Industria
Farmacutica (APIFAR) y el Consejo Nacional de Ciencia y Tecnologa (CONCYT) se
organiz el III Curso Internacional de Fitoterapia y III Simposio Internacional de Calahuala
del 18-22 de mayo de 2009. El curso estuvo dirigido a personal de salud trabajando en el uso
clnico y profilctico de productos naturales medicinales, siendo los temas principales:
Inmunomoduladores, antioxidantes y sedantes naturales
El curso tuvo como objetivos: Actualizar los conocimientos basados en la evidencia
sobre el uso clnico de los productos naturales; presentar experiencias nacionales sobre la
investigacin clnica de productos fitoterpicos, y, difundir resultados de investigaciones
nacionales recientes sobre el uso de productos naturales.
Al evento asistieron ms de 200 participantes entre profesionales, estudiantes y pblico
en general, se presentaron 10 conferencias, dos foros y 30 carteles. En el campo especfico de
los antioxidantes, se present una conferencia magistral por el MSc. Luis Gonzalo Sequeda y
otra sobre la presentacin preliminar de los resultados del presente proyecto; se presentaron 10
carteles sobre artculos recientes sobre antioxidantes publicados en las revistas ms relevantes.
Al final del evento se entreg un CD conteniendo las conferencias y foros presentados.
III.7.2 Seminario: Antioxidantes: Anlisis y aplicaciones
Aprovechando la presencia del seminario fue llevado a cabo en el marco del proyecto,
el da jueves 21 de mayo del 2009. Tuvo una duracin de dos horas con 30 min. A dicha
actividad asistieron ms de 20 profesionales de las carreras de Qumica Farmacutica,
Qumica Biolgica, Qumica, Biologa y Nutricin.
La agenda estuvo integrada por una conferencia y tres ponencias. La primera
conferencia fue dictada por MSc. Luis Gonzalo Sequeda Castaeda de la Pontificia
Universidad Javeriana de Bogot, Colombia, quin expuso el tema Antioxidantes y mtodos
analticos. En dicha conferencia realiz una revisin sobre las diversas metodologas que se
utilizan para la determinacin de la actividad antioxidante explicando el principio de las
pruebas, ventajas y desventajas.
Posteriormente se present la ponencia del Dr. Rubn Velsquez y la MA. Julieta
Salazar de Ariza titulada Estudios sobre plantas comestibles nativas de Mesoamrica. En
dicha ponencia fueron presentados los diversos estudios que la UNAIR ha desarrollado con
respecto al tema de actividad antioxidante de las plantas autctonas. Esta ponencia permiti
visualizar el enfoque bioqumico y nutricional del papel de los antioxidantes en las plantas
comestibles.

59

Las ltimas dos ponencias fueron presentadas por estudiantes de las carreras de Qumica
Biolgica y Qumica Farmacutica. El tema de las ponencias fue Efecto del procesamiento y
almacenamiento sobre la actividad antioxidante de plantas comestibles de hoja y Uso de
extractos de frutas como antioxidante en productos cosmticos tipo emulsin. Ambas
ponencias versaron sobre los resultados preliminares que se han obtenido en los trabajos de
tesis y seminario de los estudiantes.
La serie de conferencias propiciaron a que se formularan preguntas y se discutieran
diferentes temas abordados por los conferencistas, as como facilit el alcance de nuevos
conocimientos sobre el tema de los antioxidantes a los profesionales que se dedican
principalmente al la docencia universitaria.

60

PARTE IV.
IV.1

CONCLUSIONES

1. Se colect y revis la literatura disponible sobre las especies vegetales y las tcnicas
analticas, contrndose que de las especies escogidas, de 2 se encontraron ms de 20
referencias sobre los usos y propiedades medicinales, pero de 4 se encontraron menos de
10 referencias y con informacin nicamente etnobotnica y muy poca informacin
farmacolgica y toxicolgica. Basados en la informacin colectada y analizada, se
prepararon las monografas farmacopicas de las doce especies en estudio (Anexos 1-12),
aunque solamente de tres de ellas la informacin es amplia y suficiente.
2. Se colectaron 10 especies no estudiadas previamente y dos que haban demostrado
actividad antioxidante anteriormente, encontrndose que la relacin fresco:seco vari de la
ms baja 100:15.8 (G. glabra) a la mas alta 100:29.3 (S. nigrescens). El porcentaje de
humedad estuvo dentro de los rangos aceptados internacionalmente (4.9-9.6%), lo que
garantiza una buena calidad de la materia prima y una vida media larga al almacenarse.
Del contenido de cenizas no existe una norma estndar, ya que este contenido depende de
cada droga vegetal; la mayora estuvo entre los rangos medios (3.2-9.1%), aunque algunos
dieron valores ligeramente elevados, como P. auritum (10.3%) y F. pandurata (10.2%).
3. Se prepararon extractos secos de las especies colectadas, encontrndose que el promedio
de rendimiento de slidos extrables fue de 15.639.66%, siendo la flor de G. sepium la
que dio el porcentaje ms alto (34.95%) y la semilla de C. argyrosperma la del porcentaje
mas bajo (3.13%). En el caso de los extractos de M. zapota y S. mombin se realiz una
maceracin cintica por que por ser frutas no fue posible su extraccin por percolacin.
4. Se caracterizaron los grupos fenlicos y grupos qumicos ms importantes, demostrndose una alta diversidad qumica en la presencia de flavonoides, antocianinas,
cumarinas y monoterpenos en los extractos de varias especies, aunque en pocos casos los
Rfs coincidieron con los controles estndar utilizados; nicamente L. guatemalensis
demostr la presencia de taninos por los tres mtodos. Ninguno de los extractos demostr
la presencia de antraquinonas, lo que se confirm por una prueba cualitativa.
5. Se demostr una actividad antioxidante importante por la tcnica cualitativa de NPPH en
TLC en cuatro especies (L. guatemalensis, T. lucida, P. auritum y S. nigrescens)

61

6. Las metodologas macro y micromtricas para la cuantificacin de fenoles totales


correlacionaron en un 64.43%; lo cual indica que en la metodologa micromtrica deben
mejorarse y optimizarse las condiciones de ensayo para lograr una mejor correlacin. La
correlacin entre las metodologas macro y micromtrica para la determinacin de la
TDAC fue de 91.10%, lo que es una correlacin ptima que permiti obtener resultados
semejantes y comparables para este parmetro de medicin en las doce especies vegetales
en estudio.
7. Los extractos secos de las especies T. lucida, L. guatemalensis, P. auritum, S. nigrescens y
G. sepium son las que presentan los mejores rendimientos de la actividad antioxidante,
fenoles totales y TDAC con los distintos parmetros de medicin. Se determin que varias
de ellas son ricas en flavonoides, cumarinas y monoterpenos, lo que les confiere adems
un alto potencial de ser utilizadas como pigmentos vegetaqles y aromas naturales.
8. Se logr implementar la metodologa macromtrica para la determinacin del poder
reductor de hierro. A pesar de que esta metodologa debe ser optimizada, pudo
determinarse que las especies vegetales que presentaron mayor contenido de fenoles
totales y TDAC son las mismas que muestran mayor poder reductor. La determinacin de
TDAC mediante el sistema de emulsin del cido linolico no aport los datos esperados.
9. Se puso en evidencia el inters de profesionales y estudiantes sobre el tema de
antioxidantes y sus aplicaciones en el tratamiento de enfermedades crnicas y en
mejoramiento de la calidad de vida en diversas patologas, as como el posible
aprovechamiento como preservantes de alimentos y condimentos.
10. Los resultados del proyecto se vieron considerablemente magnificado por la actividad de
cuatro estudiantes de la Escuela de Qumica Farmacutica a quienes se apoy en la
realizacin de su Seminario de Tesis, quienes estudiaron otras 12 especies nativas no
estudiadas previamente con los mismos procedimientos desarrollado en el proyecto, en
donde se demostr que tres especies (S. domingensis, P. dioica y P. pseudoaureum) tienen
una importante actividad antioxidante con una compleja composicin de compuestos
fenlicos que justifican plenamente su actividad.

62

IV.2

RECOMENDACIONES

1.

Continuar con la deteccin etnobotnica y la validacin etnofarmacolgica de las especies


nativas con potencial de aprovechamiento para incrementar el conocimiento que se tiene
sobre nuestra flora local.

2.

Mantener la investigacin bibliogrfica y cientfica de las especies de inters para


documentar su uso y propiedades y poder proponer monografas ms completas.

3.

Realizar estudios del rendimiento fresco:seco y del % de cenizas en drogas vegetales de


diferentes procedencias para poder establecer los valores normales y contribuir a dictar
una norma al respecto.

4.

Aprovechar las drogas vegetales que tienen alto rendimiento de materia extrable, ya que
estas podran tener un aprovechamiento mas rentable en la industria de los extractos
naturales.

5.

Dada la alta diversidad de molculas en los extractos analizados, se recomenda mantener


las investigaciones fitoqumicas en estas especies para aportar datos que permitan su
explotacin agropindustrial

6.

Continuar perfeccionando la tcnica de TLC para el tamizaje rpido de la actividad


antioxidante de extractos vegetales por la tcnica de NPPH.

7.

En general la correlacin entra la tcnica macro y micromtrica fue muy buena, aunque
deber optimizarse la tcnica micromtrica para la evaluacin de fenoles totales para que
la correlacin sea ptima entre ambas tcnicas.

8.

Realizar estudios de fraccionamiento bioguiado con las especies T. lucida, L.


guatemalensis, P. auritum, S. nigrescens, G. sepium, S. domingensis, P. dioica y P.
pseudoaureum para determinar las sustancias y concentraciones presentes de los grupos
fitoqumicos caractersticos de estas especies que pueden ser utilizados como potenciales
nutricuticos y preservantes.

9.

Optimizar la metodologa para determinacin de poder reductor, evaluar mayores


concentraciones de los extractos, as como mayor cantidad de repeticiones. Implementar y
optimizar la metodologa para estimar TDAC mediante el sistema de emulsin del cido
linolico. Evaluar diferentes concentraciones de cada uno de los extractos antes de
realizar las determinaciones a travs del tiempo y la conveniencia de utilizar o no
sustancias emulsificantes.

10. Realizar eventos en forma sistemtica para socializar las investigaciones que sobre
antioxidantes realizan profesores y estudiantes de diversas reas de las ciencias de la
salud, tanto para

63

IV.3

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Vinson, J., Su, X., Zubizk, L. & Bose, P. (2001). Phenol antioxidant quantity and quality in
foods: Fruits. Journal of Agriculture and Food Chemistry, 49, 5315-5421.
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Analytical Chemistry, I1.1.1-I1.1.8.
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capacity in blueberries after illumination with UV-C. Food Chemistry, 117, 426-431.
WHO (1999). WHO Monographs on Selected Medicinal Plants 1, 287 p.

69

IV.4 ANEXOS

70

Anexo 1.

Brosimum alicastrum Swartz (Moraceae)

I.

DENOMINACIN, SINNIMOS Y EQUIVALENCIAS

1.

Denominacin: Fruto, hojas, semillas de B. alicastrum

2.

Sinnimos:

Alicastrum brownei Kuntz


Brosimum bernadetteae Woodson
Brosimum gentlei Lundell
Brosimum latifolium Standl
Brosimum terrabanum Pittier
3.

Nombres vulgares:

Ujusht, ujushte blanco, masico, ox (Maya); ramn, ramn


blanco, carpomo (Hon., Gua.) ojite, ojoche, nazareno (Mx.), ajah, tsotash, ash, mo, muj
(Chia.); apomo (Sin.), juan diego, (Oax.); masiquilla (Hon.) leche mara, confitura, ramn de
vaca o de Bestia (Rep. Dom.); iximch, mojo, mueco, ujo, nuez de pan, tsotz-ax, ax, mo,
tacoite. (Gua.), maseco (Gua., Hon.), bread nuttre (Jam.).
II.

DESCRIPCIN BOTNICA

rbol de tamao mediano o alto; a veces mide 30 m de altura con un tronco de 1 m de


dimetro, la corona es ancha y densa, la corteza es de color grisceo, hojas cortas-pecioladas,
coriceas, color verde brillante cuanto estn frescas, glabras, enteras, oblongo-elpticas o
elpticas, de 7-14 cm de largo y 3-5.5 cm de ancho, acuminadas o cortamente acuminadas,
algunas veces, agudas, obtusas o agudas en la base, nervaduras laterales en 14 pares; flores de
1 cm de dimetro, pednculo corto, fruto amarillo o anaranjado, de unas 1.5 cm de dimetro,
conteniendo una semilla nica de 12 mm de dimetro (1).
III. DATOS AGROTECNOLGICOS
1.

Distribucin y hbitat:

Bosques hmedos, que se encuentran sobre los 1,000 m en su mayor parte pero se puede
encontrar en los 300 m desde Mxico hasta Brasil. Se encuentra en los departamentos de Petn
Alta Verapaz, Izabal, Escuintla, Guatemala, Retalhuleu Quich, Huehuetenango, Baja
Verapaz, el sur Mxico y Honduras, Salvador y al oeste de las Indias (1). Son rboles de clima
clido que se cultivan hasta 800 m de altura. Se adaptan a climas semihmedos, hmedos y
hasta semiridos. Crecen bien en suelos calizos y rocosos (2). Necesita de una precipitacin
pluvial de 2100-4300 mm anuales y temperaturas entre los 21 y 25C (3).
IV.

USOS ETNOMDICOS O TRADICIONALES

Corteza: Tratamiento de problemas ginecolgicos, como infertilidad, y para regular la


menstruacin (4).
Frutos: Aumentan la leche
la bronquitis (6).

(5)

. En Yucatn se utiliza el jugo diluido en agua contra el asma y

71

Hojas: Las hojas son muy solicitadas para hacer cocimientos con ellas y tomarlo, a fin de
hacer aumentar la secrecin de la leche en las mujeres que estn criando es decir se considera
un buen galactogogo (5). Para clarificar, limpiar o liberar la sangre de sustancias o humores que
daan, especialmente cuando padece de erisipela, sfilis o granos difciles de erradica o sea,
para librar de una infeccin se toma en forma de tisana o puede ser con la corteza (4). Las
infusiones de las hojas son utilizadas en tos y dolores de rin (7).
Ltex: El ltex diluido en agua es empleado en el asma y la bronquitis (10). En Guatemala se
toma el ltex para aliviar desrdenes estomacales (7,8); diluido ayuda en la extraccin de
dientes (7). Tambin se ha empleado como sustituto de la leche humana (8).
Semilla: Se han utilizado como galactogenas (6,9).
Cenizas: La lea produce una ceniza de muy buena calidad para leja, que usan las mujeres,
ellas dicen que con esa agua de leja la suciedad de la ropa se desprende muy bien y rpido y
que no se consume mucha agua para lavar, ni jabn (10).
Sin especificar la parte: Tratamiento para afecciones respiratorias, tuberculosis
es utilizada en remedios populares para cncer de tero y actividad sedante (7).

(4)

. La planta

Uso en combinacin con otros ingredientes: En afecciones del rin, las hojas se emplean
en infusin junto con el cabello de maz y chete; Adems se usa en mordeduras de serpiente,
diabetes, punzada de aire y para bajar de peso. Se le considera balsmico emenagogo y
galactagogo (4).
Otros usos: En Mxico adems de tener usos curativos, se utiliza en los rituales y las prcticas
mgicas. Las semillas se ponen dentro de las sonajas de los adivinos (4); los cakchiqueles lo
utilizaban como alimento o en ceremonias; son comestibles cocinadas y majadas en forma de
harina, y tostadas para preparar una bebida similar al chocolate (2). De la pulpa del fruto se
hacen mermeladas. La semilla es comestible y usada desde pocas de los mayas para sacar
harina para hacer tortillas; tostadas se comen y semejan el sabor de las castaas y hervidas son
substituto de la papa (8). Si adems de purificar la sangre, se requiere aumentarla se agrega
Juglans major, canela, Citrus limon, brasil, cebada, hojas de tomate y raz de malva (4). Junto
con la jicama cimarrona es smbolo del hambre y los aos malos en las profecas. En la
huasteca potosina se le da uso ritual en la danza de ojos que tienen lugar al finalizar el periodo
de Todos Santos (4).
Contra la bilis, se cuecen las hojas de Fraxinus uhdei, cogollos de Mentha piperita, Salvia
officinalis y Verbena carolina, se agrega canela, limn, Tanacetum parthenium, Guazuma
ulmifolia, Oriza sativa, Buddleja sessiliflora, Rosmarinus officinalis y B. alicastrum (4).
Usos etnoveterinarios: Las hojas, tallitos y semillas se utilizan como forraje en la dieta del
ganado vacuno aumenta la produccin de leche, tambin puede ser utilizado para cabras,
ovejas, cerdos (2), mulas, caballos (11).
V.

DROGA VEGETAL

1.

Denominacin: Fruto de B. alicastrum

2.

Definicin: Fruto seco y molido.

3.
Obtencin: Su poca de floracin es en otoo (6). Se reproduce por semillas, que pierden
rpidamente su poder germinativo. Puede dar 50-75 kg de frutos por ao. Para forraje puede
72

podarse 2-3 veces al ao aprovechando el 25-50%. De su follaje en plantaciones intensivas,


pueden producir 10-15 ton de hojas/ha en cada corte (2).
4.
Descripcin macroscpica: Fruto es de color amarillo o anaranjado, esfrico,
aproximadamente de 1.5 cm de dimetro. La semilla tiene 1.2 cm de dimetro. Las hojas son
elpticas de 7-14 cm de largo, coriceas, de color verde brillante (12). Las semillas tiene un
cubierta papircea y consta de dos cotiledones verdes, gruesos y feculentos; la radcula es
saliente y encorvada sobre uno de sus cotiledones (6).
5.

Descripcin microscpica de la droga: No refiere.

6.
Composicin qumica: Las semillas contienen aceites esenciales, grasas, resinas, cera,
muclago, almidn, albmina, dextrina, glucosa y azcares (8,13). Se ha demostrado que tiene
protenas, aminocidos (triptofano) (2,8), hierro, vitaminas (10), grasa y alcaloides. Se ha descrito
la presencia del compuesto glenoideo 1-4, 2,6-dimetoxi benzoquinona (4).
7.

Monografa de control de calidad:

7.1

Identificacin:

7.1.1 Descripcin macroscpica: No refiere.


7.1.2 Descripcin microscpica: No refiere.
7.1.3 Caractersticas organolpticas: No refiere
7.2

Ensayos:

7.2.1 Caractersticas fisicoqumicas:


Materia extraa: No debe contener ms del 10%.
rganos ennegrecidos o deteriorados: No debe contener ms del 10%.
Partes de otras plantas: No debe presentar.
Insectos o larvas: No debe presentar.
Partculas de tierra, arena, piedras y otra materia extraa: No debe presentar.
Humedad: Por mtodo gravimtrico cuando la materia seca vegetal contiene sustancias
voltiles no debe contener ms del 10% (14).
Cenizas totales: Por incineracin en mufla a 700-750C, no debe pasar el 9% (10).
7.2.2 Anlisis microbiolgico: El producto en cualquiera de sus presentaciones no contendr
microorganismos patgenos o sus toxinas.
Coliformes totales: Menor al 104 NMP de coliformes totales.
Coliformes fecales: Menor al 103 NMP de coliformes fecales.
Escherichia coli: Menor al 102 NMP de E. coli.
Recuento de mohos y levaduras: Mximo 1x104 UFC/mL. (14).
7.2.3 Contaminantes qumicos o biolgicos: El producto no deber contener contaminantes
qumicos o biolgicos en cantidades que sobrepasen los lmites mximos aceptados por la
unidad sanitaria respectiva (15).
8.

Ficha tcnica de seguridad y eficacia:

No hay referencias.

73

VI.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.

REFERENCIAS
Standley, P.C, & Steyermark J. (1946) Flora of Guatemala. Fieldiana: Botany 24(6), 493p.
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Universitarias del Valle de Guatemala, 155p.
Roig, T.J. (1991) Plantas Medicinales, Aromticas o Venenosas de Cuba, Editorial Cientfico- Tcnica, La
Habana, Segunda Edicin, 548 p.
Martnez, M. (1992) Las Plantas Medicinales de Mxico, Ediciones Botas, Mxico, 656 p.
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Universitarias del Valle de Guatemala, 155p.
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Aguilar, J. & Aguilar, M. (1992) rboles de la Biosfera Maya, Peten. Centro de Estudios Conservacionistas
(CECON) Escuela de Biologa. FCQF. USAC, Guatemala, 272 p.
Centro de Estudios Conservacionistas (1984) Plantas Comestibles y Txicas de Guatemala, Facultad de
Ciencias Qumicas y Farmacia, Segunda Edicin, Guatemala, 30p.
Morton, J.F. (1981) Atlas of Medicinal Plants of Middle America. Springfield, Charles C. Thomas, 1420 p.
Departamento de Control de Calidad; Laboratorio de Productos Fitoteraputicos, Farmaya, S.A. 2007.
Certificados de Control de Calidad de Materia Prima Vegetal. Guatemala
Ministerio de Economa (1989). Comisin Guatemalteca de Normas. Productos Fitoteraputicos. Pericn
desecado para t o infusin. Propuesta COGUANOR NGO 6 074:89

74

Anexo 2.

Cnidoscolus chayamansa McVaugh (Euphorbiaceae)

I.

DENOMINACIN, SINNIMOS Y EQUIVALENCIAS

1.

Denominacin: Hojas tiernas de C. chayamansa

2.

Sinnimos:

3.

Nombres vulgares:

Chaya (Gua.; Mx.) (1); chaykol, xchay (Quintana Roo) (2);


chacha, mansa, chay, chaya, chaya col, kiki-chay (Centro
Amrica) (3); chicasquil (CR) (3).
II. DESCRIPCIN BOTNICA
Arbusto hasta de 3 m de altura, con los tallos numerosos con ltex abundante. Las hojas tienen
como 5 picos y pelillos irritantes al tacto. Las flores son blancas y en racimos unisexuales (2).
Los pecolos usualmente son ms cortos que las hojas. Hojas palmeadas hasta de 22 cm de
ancho, con pelos irritantes en los bordes (4); son glabras excepto en los mrgenes.
Inflorescencias de 2-5 cm, anchas, con pednculos de 10-25 cm de largo, flores numerosas,
pistiladas de 6-7 mm de largo, tubulares por abajo, 10 estambres (5).
III. DATOS AGROTECNOLGICOS
1.

Distribucin y habitat:

Nativa de Yucatn, introducida en Cuba y en el sur de la Florida (3). Habita en climas clido y
semiclido desde el nivel del mar hasta los 700 m (2).
IV.

USOS ETNOMDICOS O TRADICIONALES

Para tratar infeccin urinaria, dolor de estmago, riones o cualquier infeccin interna (6).
Hojas: La decoccin de las hojas es tomada varias veces al da como laxante y diurtico (3). En
Mexico se utiliza para el dolor de riones, se preparan las hojas en decoccin y se administra
oralmente. De igual manera se emplea en casos de diabetes y convalecencias, as como cuando
hay ausencia de leche en los pechos de las seoras (2). Entre las poblaciones adultas de
mexicano-americanos se dice que ayuda a la digestin, es antitusiva, descongestionante y
mejora la memoria (7).
Otros usos: La raz y el fruto con todo y semilla se comen cocidos, tambin se comen el fruto
y las hojas tiernas con verduras (8).
Sin especificar la parte: Se utiliza para tratar el colesterol en la sangre y como medio para
combatir el alcoholismo (2).
Aplicacin tpica: De manera externa se aplica junto con el ltex para reventar nacidos, en
Tabasco (2).
V.

DROGA VEGETAL

1.

Denominacin: La droga vegetal est constituida por hojas de C. chayamansa.

2.

Definicin: Parte area de la planta (hojas).


75

3.

Obtencin: No refiere.

4.

Descripcin macroscpica: No refiere.

5.
Descripcin microscpica de la droga: Por un mtodo enzimtico y tcnicas UV-Vis
se cuantificaron los glicsido cianognicos, encontrndose valores de 0.790.2 g de HCN
equivalente; por HPTLC se identific este glicsido como linamarina (9). Se determin la
presencia de flavonoides, tales como kaempferol-3-O-glicsido y quercetin-3-O-glicsido (10).
6.
Composicin qumica: Las hojas frescas contienen protena, fibra, carbohidratos,
calcio, fsforo, hierro carotenos, tiamina, riboflavina, niacina y cido ascrbico (3).
7.

Monografa de control de calidad:

7.1. Identificacin:
7.1.1. Descripcin macroscpica: No refiere
7.1.2. Descripcin microscpica: No refiere
7.1.3. Caractersticas organolpticas: No refiere
7.2

Ensayos:

7.2.1
Caractersticas fisicoqumicas:
Materia extraa: No debe contener ms del 10%.
rganos ennegrecidos o deteriorados: No debe contener ms del 10%.
Partes de otras plantas: No debe presentar.
Insectos o larvas: No debe presentar.
Partculas de tierra, arena, piedras y otra materia extraa: No debe presentar.
Humedad: Por mtodo gravimtrico cuando la materia seca vegetal contiene sustancias
voltiles: No debe contener ms del 10% (11).
Cenizas totales: Por incineracin en mufla a 700-750C, no debe pasar el 9% (11).
7.2.2
Anlisis microbiolgico: El producto en cualquiera de sus presentaciones no
contendr microorganismos patgenos o sus toxinas.
7.2.2.1 Coliformes totales: Menor al 104 NMP de coliformes totales.
7.2.2.2 Coliformes fecales: Menor al 103 NMP de coliformes fecales.
7.2.2.3 Escherichia coli: Menor al 102 NMP de E. coli.
7.2.2.4 Recuento de mohos y levaduras: Mximo 1x104 UFC/mL (11).
7.2.3

Contaminantes qumicos o biolgicos:

El producto no deber contener contaminantes qumicos o biolgicos en cantidades que


sobrepasen los lmites mximos aceptados por la unidad sanitaria respectiva (12).
8. Ficha tcnica de seguridad y eficacia:
8.1

Datos farmacolgicos

8.1.1 Estudios farmacolgicos in vitro: Los fenoles totales y la actividad antioxidante se


determin en material crudo y cocido, habiendo una alta correlacin entre la actividad

76

antioxidante y los fenoles totales; la coccin disminuy la actividad antioxidante y la prdida


de flavonoides (10).
8.1.2 Estudios farmacolgicos in vivo: No refiere
8.2

Datos de seguridad clnica

8.2.1. Estudios de toxicidad aguda: No refiere


VI.

REFERENCIAS

1.

Aguilar, A., Camacho, J.R., Chino, S., Jcquez, P. & Lpez, M.E. (1994) Herbario Medicinal del Instituto
Mexicano del Seguro Social. Informacin etnobotnica. IMSS, Mxico. p. 253.
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3. Morton, J. (1981) Atlas of Medicinal Plants of Middle America. Springfield, Charles C. Thomas Publisher,
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5. Standley, P.C. & Williams, L. (1961) Flora of Guatemala. Fieldana: Botany 24(6), 60.
6. Guevara, C.I. (2001) Plantas Medicinales utilizadas por los Itzaes San Jos Petn. Asociacin Bioitza,
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7. Loera, J.A., Black, S.A., Markides, K.S., Espino, D.V. & Goodwin, J.S. (2001) The use of herbal medicine
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8. Rojas, T. & Sanders, W. (1989) Historia de la Agricultura poca Prehispanica Siglo XVI. Primera Edicin.
Mxico. p. 266.
9. Kuti, J.O. & Konoru, B. (2006) Cyanogenic glucosides content in two edible leaves of tree spinach
(Cnidoscolus spp.). Journal of Food Composition and Analysis 19, 556-561.
10. Kuti, J.O. & Konoru, B. (2004) Antioxidant capacity and phenolic content in leaf extracts of tree spinach
(Cnidoscolus spp.). Journal of Agriculture and Food Chemistry 52, 117-121.
11. Departamento de Control de Calidad; Laboratorio de Productos Fitoteraputicos, Farmaya, S.A. (2007)
Certificados de Control de Calidad de Materia Prima Vegetal. Guatemala.
12. Ministerio de Economa (1968). Comisin Guatemalteca de Normas. Productos Fitoteraputicos. Pericn
desecado para t o infusin. Propuesta COGUANOR NGO 6 074.

77

Anexo 3.

Cucurbita argyrosperma Huber (Cucurbitaceae)

I.

DENOMINACIN, SINNIMOS Y EQUIVALENCIAS

1.

Denominacin: Semillas de C. argyrosperma

2.

Sinnimos:

Cucurbita argyrosperma Pang.


3.

Nombres vulgares:

Pepitoria, saquil; pipin, shaquila, chihua (Gua.); calabaza


de pepita gruesa, tinu (mixteco), calabaza chompo, tzompo
(Mex.); ka, xka, xtop (maya); chihua (Yucatan); xka, xtop
(San Lus Potos); kalam (tenek), pipin (Sal., Nic.),
cushaw (USA), calabaza, babaskil imai, alimai, vavuli, bajchi, arota, cherota, arota, haal, aali,
calabaza caliente, calabaza de aguas, calabaza pinta; tecomata, saladota, chuma, calabaza
criolla, calabaza tapona, calabaza pipiana, pepita gruesa (Mx.). (1)
II.

DESCRIPCIN BOTNICA

Tiene un habito rastrero o trepador, los tallos son rgidos angulosos y surcados, las hojas
profundamente lobadas pero no palmatifidas con el lbulo terminal pinnatifido, redondea-do a
agudo; margen denticulado a inciso; usualmente con manchas blancas o plateadas a lo largo de
las venas. Indumento (pecolos y venas primarias de las lminas por abajo) suave y cortante
pubescente a piloso. El receptculo en las flores estaminadas es ancha-mente campanulado,
ligeramente constreido justo debajo de los spalos; raramente surcados o slo ligeramente
foliceos; la corola est formada de ptalos agudos a acuminados, algunas veces obtusos;
margen entero, aunque algo ondulado o doblado; los filamentos son glabros, gradualmente
angostndose desde la base hasta el pice; el pednculo es rgido, anguloso o no excepto en el
punto de unin con el fruto, liso o costado. Frecuentemente muy engrosado, tornndose
cilndrico, claviforme o subgloboso.
La forma y tamao del fruto es variable 14-50 cm de largo, 14-25 cm de dimetro, globoso,
ovoide, piriforme o claviforme, estos ltimos rectos o encorvados en la porcin ms delgada o
angosta; estilo raramente persistente; la superficie del fruto generalmente lisa, sin costillas,
algunas veces con excrecencias leosas que parecen extenderse o escurrirse desde el
pednculo hacia el pice del fruto. Comnmente el color del fruto es blanco con franjas
reticuladas verdes o verde con manchas y franjas irregulares blancas o crema, algunas veces
totalmente blancos o verde oscuro, tornndose de color amarillo o pardo claro al madurar o
algunas veces anaranjados, raramente bicolores. La pulpa del fruto es ligeramente fibrosa a
muy fibrosa. De color blanco-verdoso, amarillo plido o anaranjado claro, algunas veces con
un tinte verde oscuro a negro en las placentas;
Las semillas son elpticas a lanceoladas, planas a ms o menos infladas o tumescentes, algunas
veces hasta 35 mm de largo; testa delgada (<1 mm de grueso), rgida. El color de las semillas
es usualmente blancas, algunas veces blanco opacas, pardas o bronceadas; mrgenes del
mismo color que el centro de la semilla o poco ms obscuros, algunas veces amarillento a
dorado, nada muy ligeramente fibrilloso, o azul-grisceo-verdoso (1).

78

III. DATOS AGROTECNOLGICOS


1.

Distribucin y habitat:

En Petn, Baja Verapaz, Quich, Chimaltenango y Escuintla, a elevaciones de 0 a 1400 msnm.


A la vez esta especie se encuentra distribuida desde los Estados Unidos de Norteamrica hasta
Nicaragua (2). Habitan en clima clido desde el nivel del mar hasta 1,200 msnm (3).
Generalmente cultivada en regiones tropicales y subtropicales no muy hmedas ni muy secas;
formas espontneas en el centro-sur de Mxico y a lo largo de las costas del Pacifico de
Mxico y Centroamrica (1).
IV.

USOS ETNOMDICOS O TRADICIONALES

Frutos: Para quemaduras se emplea la pulpa en fresco de frutas maduras y se coloca en las
zonas afectadas, lo mismo para cicatrizar llagas del seno (3).
Hojas: Para curacin de granos o erupciones cutneas se estrujan y aplican las hojas (3).
Semillas: En Guerrero, Sonora y Yucatn las semillas se utilizan para eliminar parsitos
intestinales. Tambin en caso de hemorroides, se pone el aceite de las semillas crudas y
descascaradas (3).
Toda la planta: Es estimulante del apetito (3).
Otros usos: Las semillas se utilizan en diversas preparaciones culinarias y en cierta clase de
mazapn. En Guatemala se prepara un dulce hecho con las semillas tostadas y un jarabe de
azcar llamado pepitoria. Se emplean en preparaciones culinarias indgenas como el aiguashte,
alguashte, aiguate o guasote, que es comn ver sobre el atol de maz o dentro de tamales o
guisos de iguana. Se preparan refrescos con semillas molidas (4).
V.

DROGA VEGETAL

1.

Denominacin: Cucurbita argyrosperma semilla.

2.

Definicin: Consiste en material vegetal pulverizado.

3.

Obtencin: No refiere.

4.

Descripcin macroscpica: No refiere.

5.

Descripcin microscpica de la droga: No refiere.

6.
Composicin qumica: En cuatro accesiones, el rendimiento del extracto lipoflico es
de 24.48-43.0 %, con una composicin de cido palmtico de 13.52-21.08%, cido esterico
de 6.33-10.44% y cido linolico de 35.67-47.68% (5). Contiene aminocidos raros metacarboxifenilalanina y cucurbitita (3).
7.

Monografa de control de calidad:

7.1.

Identificacin:

7.1.1. Descripcin macroscpica: No refiere.


7.1.2. Descripcin microscpica: No refiere.
7.1.3. Caractersticas organolpticas: No refiere

79

7.2

Ensayos:

7.2.1 Caractersticas fisicoqumicas:


- Materia extraa: No debe contener ms del 10%.
- rganos ennegrecidos o deteriorados: No debe contener ms del 10 %.
- Partes de otras plantas: No debe presentar.
- Insectos o larvas: No debe presentar.
- Partculas de tierra, arena, piedras y otra materia extraa: No debe presentar.
- Humedad: Por mtodo gravimtrico cuando la materia seca vegetal contiene sustancias
voltiles: No debe contener ms del 10% (5).
- Cenizas totales: No debe contener ms del 10%
7.2.2 Anlisis microbiolgico:
El producto en cualquiera de sus presentaciones no contendr microorganismos patgenos o
sus toxinas.
- Coliformes totales: Menor al 104 NMP de coliformes totales.
- Coliformes fecales: Menor al 103 NMP de coliformes fecales.
- Escherichia coli: Menor al 102 NMP de E. coli.
- Recuento de mohos y levaduras: Mximo 1x104 UFC/mL (5).
7.2.3 Contaminantes qumicos o biolgicos:
El producto no deber contener contaminantes qumicos o biolgicos en cantidades que
sobrepasen los lmites mximos aceptados por la unidad sanitaria respectiva (6).
8. Ficha tcnica de seguridad y eficacia:
No refiere.
VI.
1.

2.
3.
4.
5.

6.
7.

REFERENCIAS
Lira, R. (1995) Estudios Taxonmicos y Econogeogrficos de las Curcurbitaceae Latinoamericanas de
Importancia Econmica. Systematic and Ecogeogaphic Sudies on CropGenepoles. International Plant
Genetic Resources Institute, Rome, Italy. p. 281
Ayala, H. (1999) Agrobiodiversidad de Guatemala Riqueza Nativa Estrategia Nacional para la conservacin
y uso sostenible de la biodiversidad. Editorial Semiprensa. Guatemala, p. 85.
Argueta, A. (1999) Atlas de las Plantas de la Medicina Tradicional Mexicana. Instituto Nacional Indigenista
Mxico, p583.
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Applequist, W.L., Avula, B., Schaneberg, B.T., Wang, Y.H. & Khan, I.A (2006) Comparative fatty acid
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Composition and Analysis 19, 606-611.
Departamento de Control de Calidad; Laboratorio de Productos Fitoteraputicos, Farmaya, S.A. (2007)
Certificados de Control de Calidad de Materia Prima Vegetal. Guatemala.
Ministerio de Economa (1989). Comisin Guatemalteca de Normas. Productos Fitoteraputicos. Pericn
desecado para t o infusin. Propuesta COGUANOR NGO 6 074:89

80

Anexo 4.

Erythrina berteroana Urban (Fabaceae)

I.

DENOMINACIN, SINNIMOS Y EQUIVALENCIAS

1.

Denominacin: hojas, corteza y flores de


E. berteroana

2.

Sinnimos:

E. carnea Griseb., no Ait. (1)


E. corallodendron Griseb., no L.
E. neglecta Krukoff & Moldenke (2)
3.

Nombres vulgares:

Pito, miche, machetillos, palo de pito (Gua.); coralillo, tzint (quecch); tzite (quich) (3);
brucal (Haiti); bucare (Cuba, PR); pion de cerca, pion de pito (Cuba); bucayo enano,
machete (PR), cresta de gallo, gallito, parnu, pernilla de casa (Pan.), elequeme (Nic.); mata
caiman, peronio, pion de Peronilla (Col.); pion de Espaa (RD); pitn (Sal, Hon. y Gua.);
poro, poro de cerca (CR) (4); pito, quilite, poro de montaa (Sal.) (5); coralbean (ingls) (6);
colorin (Mx.) (7).
II.

DESCRIPCIN BOTNICA

rbol de 10 m de alto, armado abundante de espinas fuertes. La flor es de color rojo y


alargada. El fruto es muy constreido entre las semillas, arqueado o ensortijado o muy
retorcido cuando est maduro. La semilla es roja escarlata. Tronco con pequeos aguijones;
hojas subcoriceas, la pinna terminal de forma rmbico-ovada (3).
III. DATOS AGROTECNOLGICOS
1.

Distribucin y hbitat:

Desde el sur de Mxico y las Antillas, hasta Amrica del Sur. En Costa Rica frecuente en la
Vertiente del Pacifico (6). En Costa Rica se encuentra a elevaciones bajas a medianas, con
climas de secos a muy hmedos propagada y plantada comnmente como postes vivos en las
cercas. En Guatemala se encuentra de 0-2000 msnm (8). Ms comn a 1000 msnm, en Petn,
Alta Verapaz, Zacapa, Chiquimula, Jutiapa, Santa Rosa, Escuintla, Guatemala,
Chimaltenango, Solol, Retalhuleu, Quetzaltenango, Huehuetenango. Sur de Mxico,
Honduras y El Salvador hasta Panam, Indias Occidentales, Colombia (3).
IV.

USOS ETNOMDICOS O TRADICIONALES

Insomnio, agilizar el parto, dolor de muelas, fuego en el estmago, fuego en la boca, dolor de
vientre, esterilidad en la mujer, nervios (9).
Hojas: Las hojas cocidas, se utilizan para darse baos en la cabeza, bueno para el insomnio y
el dolor de cabeza (5). En Guatemala se utilizan las hojas y flores bajo la almohada para inducir
el sueo (4). Las hojas y la corteza se utilizan por su accin como hipntica, purgante y
diurtica. Las hojas se consideran emenagogas (1).
Corteza: La decoccin de la corteza se utiliza para el dolor de muelas y el fuego en el
estmago y la boca (9). En Veracruz se utiliza en los piquetes de animales ponzoosos, para lo
81

cual se elabora una maceracin con la corteza y las hojas, se puede tomar en fresco o como
cataplasma (7).
Flores: Se ingieren y sirven para el insomnio (9). La decoccin de las flores es sedante y sirve
como remedio para el nerviosismo, hemorragias y disentera (4,10). Se utilizan para las
afecciones del pecho (1).
Toda la planta: Las hojas y las ramitas tiernas, as como los botones de las flores pueden
comerse como verduras, pero se debe cambiar el agua decoccin por lo menos dos veces para
eliminar los agentes txicos (11).
Uso en combinacin con otros ingredientes: Los cogollos de pito e izote junto con las hojas
de siguapate, se preparan en decoccin y son tiles para agilizar el parto. Para la esterilidad y
el dolor de vientre, se prepara la decoccin de la corteza de pito, junto con cedro, liquidmbar,
jiote, guacamaya, semillas de culantro de castilla, clavos, alhucema, romero, ans, pimienta
gorda, organo y canela (9).
Sin especificar la parte: Los indios Cuna de Panam la emplean como remedio para
problemas femeninos (4). En Oaxaca esta planta se emplea para la tosferina.
Otros usos: Dicen que las hojas colocadas de bajo de la almohada, inducen el sueo, la
corteza produce un tinte amarillo para colorear tejidos (12).
V.

DROGA VEGETAL

1.

Denominacin: Hojas, corteza y flores de E. berteroana.

2.

Definicin: Parte area de la planta (hojas y flores) y la corteza.

3. Obtencin: Se ha observado con hojas de abril a diciembre, con flores de noviembre a


marzo y con frutos todo el ao (7).
4.

Descripcin macroscpica: No refiere

5.

Descripcin microscpica de la droga: No refiere.

6. Composicin qumica: La raz contiene flavonoides, la corteza y la hoja alcaloides y


flavonoides (5). Tanto las hojas como las semillas contienen alcaloides isoquinolnicos
(erisodina, erisovina, eritroidina (13,14,15). Las semillas presentan alcaloides isoquinolnicos
(erisoline, esisonina, erisopina, erisotina (14,15), alcaloides 11-hidroxi isoquinolinicos (14),
erisotrina (13), oxido de eritrartine (15), eritratidine (13); eritroidina, alpha: 8-ox (14). Compuestos
de la corteza: Flavanona, Iso: 2-5-7-trihidroxi-3metoxi-4-prenil: flavonoide (16), sigmoidin B
3-Metil ether Flavonoid (16,17). Compuestos de la envoltura de la raiz: Sigmoidina B 3 metil
eter flavonoide Rootbar (18).
7.

Monografa de control de calidad:

7.1

Identificacin:

7.1.1 Descripcin macroscpica: No refiere.


7.1.2 Descripcin microscpica: No refiere.
7.1.3 Caractersticas organolpticas: No refiere.

82

7.2 Ensayos
7.2.4 Caractersticas fisicoqumicas:
- Materia extraa: No debe contener ms del 10%.
- rganos ennegrecidos o deteriorados: No debe contener ms del 10%.
- Partes de otras plantas: No debe presentar.
- Insectos o larvas: No debe presentar.
- Partculas de tierra, arena, piedras y otra materia extraa: No debe presentar.
- Humedad: Por mtodo gravimtrico cuando la materia seca vegetal contiene sustancias
voltiles: No debe contener ms del 10%.
- Cenizas totales: Por incineracin en mufla a de 700-750C, no debe pasar el 9% (10).
7.2.2 Anlisis microbiolgico:
- Coliformes totales: Menor al 104 NMP/mL de coliformes totales.
- Coliformes fecales: Menor al 103 NMP/mL de coliformes fecales.
- Escherichia coli: Menor al 102 NMP/mL de E. coli.
- Recuento de mohos y levaduras: Mximo 1x104 ufc/mL (19)
7.2.3 Contaminantes qumicos o biolgicos: El producto no deber contener contaminantes
qumicos o biolgicos en cantidades que sobrepasen los lmites mximos aceptados por la
unidad sanitaria respectiva (15).
8. Ficha tcnica de seguridad y eficacia:
Actividad antimicrobiana y toxicidad: los extractos acuosos y etanlicos de raz, corteza y hoja
no manifestaron actividad inhibitoria en los cultivos de S. aureus y E. coli (5).
8.1 Propiedades farmacodinmicas
8.1.1 Toxicidad
Presenta principios txicos:
Erysodina (HCL)- DL50 oral en ratn: 155 mg/Kg. de m.c.
Erysopina (HCL) DL50 oral en ratn: 18 mg/Kg. de m.c.
DL50 subcutnea en ratn: 76 mg/Kg de m.c.
Erysothiopina (Na)- DL50 Subcutnea en ratn: 76 mg/Kg. de m.c.
Erythralina (HBr)- DL50 oral en ratn: 80 mg/Kg de m.c.
DL50 subcutnea en ratn: 92 mg/Kg de m.c.
Erythramina (HBr)- DL50 sub cutnea en ratn: 104 mg/Kg. de m.c.
Beta-Erythroidina- DL50 intraperitoneal en ratn: 24 mg/Kg de m.c.
DL50 intravenosa en conejo: 8.6 mg/Kg. de m.c.
Adems posee eritrocoraloidina (1).
Partes Txicas: Semillas, corteza y vainas (1)
Sntomas: Produce hipnosis, parlisis, incoordinacin y puede causar la muerte (1)
VI.
1.
2.
3.

REFERENCIAS
Alfonso, H.A., Tablada Prez, R., Quesada Pastor, N., Carballo Velsquez, N., Acosta Pedroso, B. &
Snchez, L.M. (2000) Plantas Txicas. La Habana, Editorial Capitn San Lus, p.155
Garca, M. (1992) Flora Medicinal de Colombia. Tomo I. Bogot. Tercer Mundo. p. 559.
Standley, P.C. & Williams, L. (1961) Flora of Guatemala. Fieldana: Botany 24(5), 253.
83

4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.

15.
16.
17.

18.
19.

Morton, J. (1981) Altas of Medicinal Plants of Middle America. Springfield, Charles C. Thomas, pp. 316317.
Mena, G. (1994) Obtencin y aprovechamiento de extractos vegetales de la flora salvadorea. San Salvador,
Editorial Universitaria, p. 559.
Holdriage, L.R., Poveda, L.J. & Jimnez, Q. (1997) rboles de Costa Rica. Volumen I. Editorial Centro
Cientfico Tropical, San Josr, p. 522.
Witsberger, D., Current, D. & Archer, E. (1982) rboles del Parque Deininger. Ministerio de Educacin,
Direccin de Publicaciones, San Salvador, p. 336.
Argueta, A. Cano Asseleih, L.M. & Rodarte, M.E. (1994) Atlas de Plantas de la Medicina Tradicional.
Editorial Instituto Tradicional Mexicana, Mxico, p. 497.
House, P., Torres, C., Lagos-Witte, S., Meja, T., Ochoa, L. & Rivas, M. (1995) Plantas Medicinales
Comunes de Honduras. Litografa Lpez S. de R.L, Tegucigalpa. p. 555.
Morton, J.F. (1994) Pito (Erythrina berteroana) and chipiln (Crotalaria longirostrata), (Fabaceae), two
soporific vegetables of Central America. Economic Botany 48, 130-138,
Centro de Estudios Conservacionistas (1984) Plantas Comestibles y Txicas de Guatemala. Guatemala. p.77
Nelson, C. (1986). Plantas Comunes de Honduras, Tomo II. Tegucigalpa, Editorial Universitaria, p. 484.
Soto-Hernandez, M. & Jackson, A.H. (1993) Studies of alkaloids in foliage of Erythrina berteroana and E.
poeppigiana: Detection of Beta-erythroidine in goats milk. Phytochemical Analysis 4, 97-99.
Chawla, A.S., Jackson, A.H. & Ludgate, P (1982) Erythrina alkaloids. Part 6. Isolation and characterisation
of alkaloids from Erythrina berteroana seeds and leaves: Formation of oxoerythroidines. Journal of the
Chemical Society Perkin Transactions 1, 2903-2907
Hernandez, M.S. & Jackson, A.H. (1994) Erythrina alkaloids: isolation and characterisation of alkaloids
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of Helichrysum nitens and from the stem bark of Erythrina berteroana. Progres in Clinical Biology
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Maillard, M., Gupta, M.P. & Hostettmann, K. (1987) A new antifungal prenylated flavanone from Erythrina
berteroana. Planta Medica 53, 563-564.
Departamento de Control de Calidad; Laboratorio de Productos Fitoteraputicos Farmaya, S.A. (2007)
Certificados de Control de Calidad de Materia Prima Vegetal. Guatemala.

84

Anexo 5.

Fernaldia pandurata (A.DC.) Woodson

I.

DENOMINACIN, SINNIMOS Y EQUIVALENCIAS

1.

Denominacin: Inflorescencia de F. pandurata

2.
Sinnimos:
Amblyanthera pandurata
Echites pandurata (A.DC.) en D.C.
Echites pinguifolia Standl.
Urechites karwinskii Muell. Arg.
3.
Nombres vulgares:
Loroco
II.

DESCRIPCIN BOTNICA

Hierba trepadora, pequea o grande, densamente puberulenta o cortamente aterciopeladapilosa en todas partes. Hojas, membranosas, en peciolos de 1-2 cm de largo, oblongo 1.5-8 cm
de ancho, cortamente acuminadas, las hojas de truncadas, usualmente muy densas y
suavemente pilosas en el envs. Flores de 8-18 en la inflorescencia, brcteas ovaladas, de 1-2
mm de largo. Cliz con lbulos ovalados, agudos y obtusos, de 2-3 mm de largo. Corola
blanca internamente, verduzca exteriormente y glabra, el tubo de 20-22 mm de largo, la
garganta ampliamente campanulado-cnica, de 9-12 mm de largo, de 7-9 mm de ancho, los
lbulos ciliados, de 10-13 mm de largo, densamente velludo-aracnoides en la base (1).
III. DATOS AGROTECNOLGICOS
1.

Distribucin y hbitat:

Se encuentra bien distribuido en Guatemala y El Salvador, en regiones calientes y secas. Crece


fcilmente entre el maz. Tambin se encuentra en Honduras, Nicaragua y Costa Rica. Crece
desde el nivel del mar hasta los 1000 m y prefiere suelos arcillosos (2). En Guatemala se
encuentra en los departamentos de Izabal, Zacapa, Chiquimula, Jutiapa. (1). Las flores del
loroco son dbiles al manejo y susceptibles al deterioro, sobre todo en zonas clidas y en horas
del da (2).
IV.

USOS ETNOMDICOS O TRADICIONALES

Las flores y yemas florales se comen cocidas en tamalitos de carne o arroz (3,4,5) y se usa como
un saborizante agradable en las comidas (6).
V.

DROGA VEGETAL

1.

Denominacin: Fernaldia pandurata

2.

Definicin: No refiere

3.

Obtencin: No refiere

4.
Descripcin macroscpica: La raz es fibrosa y posee sustancias con ciertas
caractersticas alcaloides. El tallo es una enredadera delgada (tipo liana), dbil y pubescente,
tiene una base leosa que persiste. Las hojas son oblongas, elpticas, opuestas, bastantes
85

acuminadas, con bordes externos un poco ondulados, con dimensiones de 4-22 cm de largo y
de 1.5-12 cm de ancho. La inflorescencia se da en racimos y cada uno de ellos posee de 10 a
32 flores, dando un promedio de 25 por racimo. El fruto es un folculo cilndrico, alargado,
recto o curvado hacia adentro pudiendo alcanzar hasta 34 cm de longitud y entre 5-6 mm de
dimetro. Dentro de cada folculo pueden hallarse desde 25 hasta 190 semillas, dependiendo
de su longitud, encontrndose diferentes tipos de tamao; cuando tierno es de color verde y
luego maduro es caf oscuro. La semilla tiene un dimetro entre 2-3 mm. Posee gran cantidad
de pelos algodonoso en el extremo, que facilitan su dispersin por el viento (7).
5. Descripcin microscpica de la droga: No refiere
6. Composicin qumica: 100 g de hojas frescas contienen 79 g humedad, 1.65 g cenizas;
8.25 g protena; 1.94 g fibra cruda; 7.23 g total de carbohidratos, 421 mg. calcio; 63 mg
fsforos; 11.61 mg hierro; 8.52 caroteno; 0.23 mg. timina; 0.35 mg. riboflavina; 1.74 mg.
niacina y 274 mg cido ascrbico (8).
Las flores machacadas contienen fibra cruda, nitrgeno, calcio, fsforo, hierro, carotenos,
tiamina, niacina, y cido ascrbico (9).
7. Monografa de control de calidad:
7.1 Identificacin:
7.1.1 Descripcin macroscpica: No refiere
7.1.2 Descripcin microscpica: No refiere
7.1.3 Caractersticas organolpticas: No refiere
7.2 Ensayos:
7.2.4 Caractersticas fisicoqumicas:
Materia extraa: No debe contener ms del 10%.
rganos ennegrecidos o deteriorados: No debe contener ms del 10 %.
Partes de otras plantas: No debe presentar.
Insectos o larvas: No debe presentar.
Partculas de tierra, arena, piedras y otra materia extraa: No debe presentar.
Humedad: Por mtodo gravimtrico cuando la materia seca vegetal contiene sustancias
voltiles: No debe contener ms del 10% (10).
7.2.5 Anlisis microbiolgico: El producto en cualquiera de sus presentaciones no contendr
microorganismos patgenos o sus toxinas.
Coliformes totales: Menor al 104 NMP/mL de coliformes totales.
Coliformes fecales: Menor al 103 NMP/mL de coliformes fecales.
Escherichia coli: Menor al 102 NMP/mL de E. coli.
Recuento de mohos y levaduras: Mximo 1x104 ufc/mL (10).
7.2.5 Contaminantes qumicos o biolgicos: El producto no deber contener contaminantes
qumicos o biolgicos en cantidades que sobrepasen los lmites mximos aceptados por la
unidad sanitaria respectiva (10).

86

8.

Ficha tcnica de seguridad y eficacia:

8.1. Estudios de toxicidad:


El Departamento de Farmacologa y Qumica Federal de Santa Catarina, Florianpolis, Brasil,
estudio extractos del rizomas cultivado en Minas Gerais, Brasil, donde se utiliza como un
tratamiento efectivo para las mordeduras de serpientes. Encontraron que los extractos crudos
la accin de la bradicinina en teros aislados de ratas, y se asumi que existen tres posibles
compuestos (posiblemente terpenos) que varan en actividad que producen el efecto y dan
credibilidad a la prctica local (9). Las races son consideradas muy txicas y han sido
empleadas algunas veces para matar animales nocivos (3,4,5).
IV.

REFERENCIAS

1.
2.

Standley, P.C. & Steryermark, J.A. (1946) Flora of Guatemala. Fieldiana: Botany 24(4), 493 pp.
FAO (1993) Valor Nutritivo y Usos en Alimentacin Humana de Algunos Cultivos Autoctonos
Subexplotados de Mesoamerica, Chile p.155.
3. Nelson, C.H. (1986) Plantas Comunes de Honduras. Tegucigalpa, Editorial Universitaria, pp. 380.
4. Ronquillo, F.A., Melgar, M.R., Carrillo, J.E. & Martnez, A.B. (1988) Especies vegetales de uso actual y
potencial en alimentacin y medicina de las zonas semiridas del norodiente de Guatemala. Cuadernos de
Investigacin DIGI No. 7-88, pp. 213-215.
5. Pll, E. de (1983) Plantas comestibles y txicas de Guatemala. CECON Serie Documentos Ocasionales #1.
Guatemala, CECON, pp. 60.
6. Ayala, H. (1999) Agrobiodiversidad de Guatemala. Guatemala, Ed. Serviprensa, pp. 85.
7. Loroco; www.centa.gob.sv/uploads/documentos/loroco.pdf
8. Duke, J.A. & Atchley, A.A. (2000) Handbook of Proximate Analysis Tables of Higher Plants. Boca Raton,
CRC Press, p. 74.
9. Morton, J.F., Alvarez, E. & Quinez, C. (1990). Loroco, Fernaldia pandurata (Apocynaceae) a popular
edible flower of Central America. Economic Botany 44, 301-310.
10. Departamento de Control de Calidad; Laboratorio de Productos Fitoteraputicos, Farmaya, S.A. (2007)
Certificados de Control de Calidad de Materia Prima Vegetal. Guatemala.

87

Anexo 6.

Gliricidia sepium (Jacq) Steud. (Fabaceae)

I.

DENOMINACIN, SINNIMOS Y EQUIVALENCIAS

1.

Denominacin:

Hojas, Semillas, Races, Tallo, Flores de Gliricidia sepium.


2.

Sinnimos:

Galedupa pungam Blanco.


Lonchocarpus maculatus (HBK) DC.
Lonchocarpus sepium (Jacq.) DC.
Gliricidia lambii Fern.
Gliricidia maculata (HBK) Walp.
Gliricidia maculata (HBK) Steud.
Gliricidia sepium (Jacq.) Steud.
Gliricidia sepium (Jacq.) Griseb.
Gliricidia sepium (Jacq.) Steudel. G. maculata (HBK) Urb.
Gliricidia maculata var multijuga Michelin in Donell Smith.
Millettia luzonensis A. Gray.
Robinia hispida L.; Robinia sepium Jacq.; Robinia variegata Schlecht.;
Robinia maculata HBK
3.

Nombres vulgares:

Acacia, desnudo florecido, madrecacao, matarratn, pion florido (Col.); madriado, sangre de
drago (Cos.); amor y celos, bien vestido, florezco, pion amoroso, pion florido (Cub.); palo
de hierro, sangre de drago (Sal.); kante, kansim, masera negra, madriado, matasarna, sacyab,
yaite (Gua.); lengua de perico, cahuanandre, cacahuanano, cacahua-nantl (Mx.);
cacahuananche (Nic.); balo, bala, madera negra (Pan.); raborratn (Ven.); cocoite, cochito,
sayab, sacyab, sayuiab (Mex); cacante (Filipinas); quick stock (Jam.).
II.

DESCRIPCIN BOTNICA

rbol de 10 m de alto, copa extendida, bien ramificado, siempre verde, tronco de 30 cm de


dimetro, corteza caf oscuro; ramas puberulentas de jvenes, luego glabras. Hojas deciduas,
alternas, imparipinnadas, 2-15 foliolos, foliolos opuestos, obovado-elpticos, de color verde
claro, pice acuminado, base redondeada u obtusa con raquilla de 4 mm. de largo, glabras,
lustrosas 5.5-6 cm largo, 2.2-3 mm (1). Flores en racimos, 5-10 cm de largo, densamente
floreados de 4-5 mm de largo, corola de 1.5-10 cm, de color rosado a blanco; largo,
estandarte encorvado con el pice dirigido hacia abajo, anchamente ovados con pice escotado
de color morado con una angosta mancha amarilla de la base al centro, por la cara inferior o
envs blanco; carinas blancas unguiculadas, con el pice morado, glabro y algo aplanado,
estpite glabro verde, manchado de morado en el pice; cliz puberulento o glabro, verde
cilndrico. Vaina caf oscuro, glabra, plana, 10-22 cm de largo; fruto aplanado con los bordes
salientes 11-13 cm largo, 1.5-1.8 cm ancho con dos valvas con el exocarpo amarillo-plido,
subleoso; semillas lenticulares, comprimidas generalmente 8 en cada fruto, de caf oscuro de
1 cm de largo (1,2).

88

III. DATOS AGROTECNOLGICOS


1. Distribucin y hbitat:
Nativo de Amrica tropical, crece en laderas hasta 1,600 msnm, introducido y cultivado en
todo el mundo tropical. Se ha descrito en la mayora de regiones clidas del pas (3). Crece en
laderas y se siembra en cercos por su caracterstica de brotn (4). Naturalizado en todo el
Caribe. En Cuba se encuentra en todas las provincias, utilizado como cercos vivos y en
jardines como ornamental (5).
En Guatemala se encuentra en laderas y matorrales secos o hmedos o en bosques naturales, a
menudo en pastos o a lo largo de los caminos. Se extiende de Mxico a Panam. Se introdujo
en las Antillas, donde se est convirtiendo en una especie naturalizada. Tambin se ha
introducido en frica y Asia y se ha naturalizado en las Filipinas. Se ha plantado en el sur de
Florida y en Amrica del Sur, hasta Brasil (6).
IV.

USOS ETNOMDICOS O TRADICIONALES

Hojas: En el estado de Yucatn (Mxico) las hojas se usan como antihistamnicas,


antipirticas, diurticas y para facilitar el parto. En Guatemala el cocimiento de las hojas se
emplea para currar el tifo exantemtico. La hoja fresca o cocida se aplica tpicamente sobre el
imptigo y otras enfermedades de la piel. En El Salvador las hojas en emplasto se aplican para
granos y erisipelas y al preparar una infusin con las hojas excelente expectorante. En
Colombia las hojas se emplean emenagogas. Las hojas mediante decoccin se usan como
baos en algunas afecciones epidrmicas (7). Con las hojas se hacen cataplasmas para aliviar
el calor en el estmago. Se realizan baos u oral para aliviar calentura o calentura de
estmago (8).
Por su uso popular, los datos experimentales que demuestran actividad antifngica y antiinflamatoria y la falta de toxicidad al aplicarse tpicamente, las hojas y corteza estn indicadas
en el tratamiento de diversas afecciones de la piel, como abscesos, llagas raspones y tinea. La
administracin oral de las hojas contribuye a mejorar la tos rebelde (3). Para aliviar la artritis se
cocinan las hojas y se hacen frotaciones en las partes afectadas. Las hojas se muelen, luego se
fren y se hacen cataplasmas que se aplican en los puos (9). Al baar a los nios en el agua
donde se han hervido las hojas se curan los granos en la cabeza y cuerpo, se utiliza para curar
los hongos que afectan los pies, mazamorra o yuyos (10); las hojas en infusin son utilizadas
como pectorales, y segn informacin colombiana, el machacado se emplea para curar la
erisipela, como emplasto (11); Unas hojas colocadas dentro del sombrero evitan la insolacin.
En Colombia las hojas se emplean como insecticidas (7). Se utilizan como cerco vivo. Las
hojas se utilizan mezcladas con tabaco para curar la sarna y tambin para curar heridas (12).
Corteza: En Guatemala se usa contra el empeine o imptigo, y con queso u otro cebo para
matar ratones (7).
Flores: Las flores se comen fritas (13) o sancochadas, preparadas en tortas de huevo (10).
Races: El cocimiento de las races se toma para aliviar el dolor de garganta, afecciones del
rin, ictericia y edema (7).
Jugo: El jugo de la planta se utiliza para estimular el crecimiento de cabello (7).

89

Toda la planta: El cocimiento de las hojas y corteza se usa para tratar afecciones
gastrointestinales (diarrea, dolor de estomago, tifoidea), respiratorias (resfriado, fiebre, flemas)
y de la piel (erupciones, erisipela, imptigo, gangrena, granos, jiote, gonorrea, quemaduras,
picaduras de insectos, lceras), paludismo y paperas. Se les atribuye propiedad
antihistamnica, antimalrica, antisptica, cicatrizante, diurticas, expectorante y febrfuga.
Las semillas, corteza y las hojas son usadas por su efecto raticida (7).
Uso en combinacin con otros ingredientes: Para la lepra se mezclan con quina, jocote,
jiote, matilisguate, guachipilin, se cocinan y se hacen fomentos, lavados y baos (9) Con
Annona squamosa se utiliza para resfriados y con Ocimum sanctum tambin se utiliza para
resfriados (14).
Sin especificar la parte: Contra el jiote, como rodenticida y como desinflamatorio (15).
Otros usos: Entre los nahuas, esta especie se usa en el tratamiento de la quemada o
netlatilli, que tiene su origen a causa de una discusin o ria en el seno de una familia donde
recientemente se ha tenido un parto. Es un caso caliente, por lo tanto, si hay golpes o discusin
puede producirse la quemada en la nueva madre o en quienes hayan discutido. Los sntomas
son falta de apetito, manchas cenizas, se adelgaza y no se quiere tocar el agua. El tratamiento
consiste en efectuar baos con kun-kuite o palo de corral y otra planta llamada tepochote. El
agua que va a ocuparse para el bao debe ser trada del pozo la maana en que se va emplear.
Esto se realiza durante siete das todas las maanas (16).
Otras afecciones tratadas con esta especie son dolor de cabeza, dispela y para parsitos, y se
le atribuyen propiedades diurticas y antihistamnicas (16). En Panam, se usa para sarnas,
hongos, urticaria, correcamino e infecciones cutneas (7).
La flor, hoja, corteza o los tallos: se cocinan y se hacen baos diarios, para aliviar el
salpullido, granos, dispela y rasquia. La corteza por ser madera dura y pesada se utiliza
como combustible. La madera tiene un acabado liso y es apropiada para muebles (17).
V.

USOS ETNOVETERINARIOS

Zumo: Las bestias suelen ramonear las hojas que estn a su alcance, el zumo de stas se usa
para combatir la neumatosis conocida como torzn de las caballeras (7).
Hojas: Parecen tener actividad abortiva para el ganado vacuno (7). Las hojas se usan
ampliamente como forraje; es muy rico en protenas (18-28%) (18), las hojas y ramas pequeas
se usan para ahuyentar los piojos de las gallinas (piojillo de las aves), tambin estregndolo el
cogollo cura a los perros con sarna y ahuyenta las pulgas (10).
Flores: Son una fuente de alimento para las abejas productoras de miel (17).
Races: En Nicaragua y Costa Rica se considera muy eficiente en la destruccin de la taltuza y
otros pequeos roedores, para los cuales las races constituyen un veneno mortfero. Las hojas
son peligrosas para los caballos, pero se dice que no causan dao al ganado vacuno y cabrio
(7)
.
Toxicidad para los animales: El follaje presenta cierta toxicidad para el caballo, cerdos,
conejos y aves; se ha notado una inhibicin del crecimiento de conejos y aves an con
cantidades pequeas. Se han alimentado cerdos con 15% de hojas sin efectos secundarios (19).
El extracto acuoso de semillas no es txico a peces dorados; la canavinina es txica a
90

mamferos, la L-canavanina induce ciertos cambios hematolgicos y anormalidades


sexolgicas en manos que asemejan el lupus eritematoso sistmico. El extracto
hidroalcohlico de partes areas no coagula el semen ni tiene actividad espermicida. La
corteza, raz y semillas son txicas a ratones pero no a ratas, se acostumbra hacer una masa de
maz como veneno para roedores; se dice que la corteza y hojas son txicas a caballos,
vacunos y cabras. La DL50 del extracto etanlico por va intraperitoneal en ratn es 0.75 g/kg
(3)
.
VI.

DROGA VEGETAL

1.

Denominacin: Gliricidia sepium (Jacquin) Steudel, folia, rama

2.

Definicin: No refiere.

3.

Obtencin: Las flores brotan en enero y febrero (10).

4.

Descripcin macroscpica: No refiere.

5.

Descripcin microscpica de la droga: No refiere.

6.
Composicin qumica: El tamizaje fitoqumico de las hojas indica la presencia de
alcaloides no cuaternarios, saponinas, esteroles insaturados, flavoides y polifenoles. Las hojas
y corteza contienen flavonoides (2-o-metisepiol, 7,3,4trihidroflavona, sepiol, robinetina),
carbohidratos (pinol), cumarinas y cidos o-cumarnico y meliltico. El anlisis proximal de
100 g de hojas frescas contiene: 52 caloras, agua (84.7 g), protenas (2.4 g) grasas (0.5 g),
carbohidratos totales (11.9 g), fibra (1.3 g), cenizas (0.5 g), calcio (17 mg), fsforo (34 mg),
hierro (0.8 mg), tiamina (0.14 mg), riboflavina (0.08 mg), niacina (1.0 mg) y cido ascrbico
(12 mg) (19).
Todo el rbol es rico en flavonoides, compuestos que se sabe tienen mltiples actividades
farmacolgicas. La corteza contiene taninos y triterpenos. La mdula contiene isoflavinas, una
isoflavina fenlica y gliricidina, sepinol y gliricidol (9). La raz contiene triterpenos (15). Se ha
reportado adems: astragalina, 2,7-dihidroxi-3-metoxiisoflavano, gliricidina, (-)siomucronulatol, robinina, sepinol, sepiol y trifolina, canavanina, pinitol y sacarosa (7). El
duramen contiene flavonoides (isoflavanes, 2 butin (flavona), isoflavan fenlico, isoflavana
(gliricidin 6 alfa), dihidroflavanol (sepiol 7a), gliricidol, isomucronulatol, robinetina) y B
hidroxidihidrochalcona (glicidol 9 alfa). Las flores contienen flavonoides (gastragalina,
robinina, sepinol, trifolina) y carbohidratos. Las semillas contienen canavanina, con una
potente actividad inhibidora del crecimiento de varios organismos (3).
7.
7.1

Monografa de control de calidad:


Identificacin:

7.1.1. Descripcin macroscpica: No refiere.


7.1.2. Descripcin microscpica: No refiere.
7.1.3. Caractersticas organolpticas: No refiere.
7.2. Ensayos:
7.2.1. Caractersticas fisicoqumicas:
Materia extraa: No debe contener ms del 10%.
rganos ennegrecidos o deteriorados: No debe contener ms del 10 %.
91

Partes de otras plantas: No debe presentar.


Insectos o larvas: No debe presentar.
Partculas de tierra, arena y otros considerados como materia extraa: No debe presentar.
Humedad: Por mtodo gravimtrico cuando la materia seca vegetal contiene sustancias
voltiles: No debe contener ms del 10% (20).
Cenizas totales: Por incineracin en mufla a 700-750C, no debe exceder el 9% (10).
7.2.2. Anlisis microbiolgico: El producto en cualquiera de sus presentaciones no contendr
microorganismos patgenos o sus toxinas.
Coliformes totales: Menor al 104 NMP de coliformes totales.
Coliformes fecales: Menor al 103 NMP de coliformes fecales.
Escherichia coli: Menor al 102 NMP de E. coli.
Recuento de mohos y levaduras: Mximo 1x104 ufc/mL (20).
7.2.3. Contaminantes qumicos o biolgicos: El producto no deber contener contaminantes
qumicos o biolgicos en cantidades que sobrepasen los lmites mximos aceptados por la
unidad sanitaria respectiva (21).
8.

Ficha tcnica de seguridad y eficacia:

8.1

Datos farmacolgicos

8.1.1 Estudios farmacolgicos in vitro: Por una tcnica de difusin se determin que los frutos
poseen actividad contra S. aureus y las hojas y la raz contra S. pyogenes. Se demostr que la
raz, corteza y flores poseen actividad contra P. aeruginosa (22). La tintura de la corteza y hojas
no inhibe enterobacterias patgenas ni C. albicans. La decoccin de las hojas es activa contra
el M. canis y T. mentagrophytes, con CIM de 100-200 mg y actividad fungicida y fungisttica.
La maceracin etanlica de las hojas es activa contra N. gonorrohea y un espectro de
inhibicin de un 80% de cepas patgenas (7).
8.1.2 Estudios farmacolgicos in vivo: La actividad antiinflamatoria de un extracto de etanolagua (1:1) fue demostrada en el modelo de induccin de edema en la pata de ratas, al ser
administrado por va oral a dosis de 0.375 mg/kg. Al mismo extracto se le evalu la actividad
diurtica en ratas por va intraperitoneal a dosis de 0.185 mg/kg, obtenindose resultados
positivos. Estudios de farmacolgia experimental demuestran que el extracto hidroalcohlico
de la corteza tiene actividad pero no tiene actividad analgsica, antimicrobiana,
anticonvulsivante, antiviral, antilevaduras (C. albicans y C. neoformans) e hipoglucemiante (3).
8.2

Datos de seguridad clnica

Las races, corteza y semillas de este rbol son venenosas. Las hojas tambin pueden ser
txicas para los humanos, a pesar de que en algunas partes del trpico, se utilizan para
consumo humano. Posiblemente el proceso de coccin anula la toxicidad (17).
8.2.1 Estudios de toxicidad aguda: Los extractos clorofrmicos y metanlicos demostraron
actividad contra las larvas de Artemia salina, con valores de LC50 de 777 y 465 ug/mL
respectivamente. Siendo el extracto metablico con mayor actividad se realiz la prueba de
toxicidad despus de 24 horas de incubacin contra las larvas de A. salina demostrando una
LC50 de 427 g/mL (23).

92

VII. REFERENCIAS
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.

Garca, N. (1992) Flora Medicinal de Colombia. Tomo I. Bogot, Tercer Mundo, p. 559.
Standley, P.C. & Williams, L. (1961) Flora of Guatemala. Fieldana: Botany 24 (5), 265.
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desecado para t o infusin. Propuesta COGUANOR NGO 6 074:89
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93

Anexo 7.

Litsea guatemalensis HBK (Lauraceae)

I.

DENOMINACIN, SINNIMOS Y EQUIVALENCIAS

1.

Denominacin:

Hojas de Litsea guatemalensis HBK


2.

Sinnimos:

Litsea guatemalensis Mez.


3.

Nombres vulgares:

Laurel, Laurelillo, Spac-tz, Sufricalla, Zit-zuch,


Aguarel (Gua.) (1)
II.

DESCRIPCIN BOTNICA

Es un rbol pequeo de hasta 6 m de alto, ramas delgadas, cafs. Hojas coriceas, pecolos 1.5
cm de largo, elptico-lanceoladas, 8 cm de largo, agudas en la base, lustrosas, glabras. Flores
axilares, pednculo simple, solitarias, 15 mm de largo, 5-11 flores; brcteas de involucro
deciduo; filamentos glabros (1).
III. DATOS AGROTECNOLGICOS
1.

Distribucin y habitat:

Nativo de Guatemala, crece en forma endmica en bosques abiertos de pino y matorrales de


1,500-3,150 msnm. En Guatemala se ha descrito en Chimaltenango, Guatemala, Jalapa,
Sacatepquez y Solol (2).
IV.

USOS ETNOMDICOS O TRADICIONALES

Se le atribuye propiedad aromtica, antisptica, astringente, balsmica, carminativa,


emenagoga, emoliente, estimulante, espasmoltica, febrfuga y pectoral. Las hojas tienen un
amplio uso como condimento (3).
Hojas: El cocimiento o infusin de las hojas por va oral se usa para el tratamiento de
afecciones respiratorias y gastrointestinales (clico), carencia de leche en la madre e
hinchazn. Tpicamente se usa en lavados y baos para cansancio, lceras, piernas hinchadas
y epilepsia; en sahumerios se usa para parlisis y en gargarismos para la inflamacin de la
garganta (3).
Uso en combinacin: Como antisptico con eucalipto, romero y tomillo; como digestivo con
hierbabuena, hinojo y pericn; y como emenagogo con borraja, manzanilla y ruda (4).
V.

DROGA VEGETAL

1.

Denominacin: Litsea guatemalensis HBK

2.

Definicin: Hoja seca y molida.

3.
Obtencin: Se recolecta en los campos de crecimiento silvestre en regiones fras y
montaosas del Altiplano del pas. Florea de febrero a junio, las hojas y flores se colectan
hacia finales de la floracin y se secan a la sombra (4).
94

4.

Descripcin macroscpica: No refiere.

5.

Descripcin microscpica de la droga: No refiere.

6.
Composicin qumica: El tamizaje fitoqumico indica en las hojas la presencia de
alcaloides cuaternarios y no cuaternarios, saponinas, esteroles insaturados, cardenlidos,
bufadienlicos, flavonoides, leucoantocianinas, quercitina, estilbina, taraxon y aceite esencial
que contiene limoneno y citral (2). El aceite esencial contiene 1,8-cineol (26.8%), -terpineol
(14.5%) y linalool (10.8%) (5). Las hojas contienen carotenos (8,300 g) y riboflavina (0.85
g) (6).
7.

Monografa de control de calidad:

7.1. Identificacin:
7.1.1. Descripcin macroscpica: No refiere
7.1.2. Descripcin microscpica: No refiere
7.1.3. Caractersticas organolpticas: No refiere
7.2.

Ensayos:

7.2.1. Caractersticas fisicoqumicas:


Materia extraa: No debe contener ms del 10%.
rganos ennegrecidos o deteriorados: No debe contener ms del 10%.
Partes de otras plantas: No debe presentar.
Insectos o larvas: No debe presentar.
Partculas de tierra, arena, piedras y otra materia extraa: No debe presentar.
Humedad: Por mtodo gravimtrico cuando la materia seca vegetal contiene sustancias
voltiles: No debe contener ms del 10% (7).
Cenizas totales: Por incineracin en mufla a 700-750C, no debe pasar el 9% (7).
7.1.1 Anlisis microbiolgico: El producto en cualquiera de sus presentaciones no contendr
microorganismos patgenos o sus toxinas.
Coliformes totales: Menor al 104 NMP de coliformes totales.
Coliformes fecales: Menor al 103 NMP de coliformes fecales.
Escherichia coli: Menor al 102 NMP de E. coli.
Recuento de mohos y levaduras: Mximo 1x104 UFC/mL. (7).
7.2.3

Contaminantes qumicos o biolgicos:

El producto no deber contener contaminantes qumicos o biolgicos en cantidades que


sobrepasen los lmites mximos aceptados por la unidad sanitaria respectiva (8).
8.

Ficha tcnica de seguridad y eficacia

8.1

Datos Farmacolgicos

8.1.1 Estudios farmacolgicos in vitro: La tintura de hojas no tiene actividad contra


enterobacterias, pero tiene moderada actividad contra C. albicans, E. floccosum y M. canis. El
extracto etanlico presenta actividad insecticida contra hormigas (3).
8.1 .2 Estudios farmacolgicos in vivo: No refiere.

95

8.2

Datos de seguridad clnica

8.2.1. Estudios de toxicidad aguda: No refiere


VII. REFERENCIAS
1.
2.
3.
4.

5.
6.
7.
8.

Standley, P.C. & Steyermark, J. (1946) Flora of Guatemala. Fieldiana: Botany 24(6), p. 493.
Cceres, A. (1996) Plantas de Uso Medicinal. Primera Edicin. Editorial Universitaria. p.239.
Cceres, A. (2006) Vademcum Nacional de Plantas Medicinales. Editorial Universitaria, Guatemala, p.
262.
Centro Mesoamericano de Estudios sobre Tecnologa Apropiada (CEMAT) y Laboratorio y Droguera de
Productos Fitofarmacuticos FARMAYA, S.A. 1990. Fichas Populares sobre Plantas Medicinales. Segunda
Edicin. Guatemala. p. 98.
Vallverd, C., Villa, R., Cruz, S.M., Cceres, A. & Caigueral, S. (2005) Composition of the essential oil
from leaves of Litsea guatemalensis. Flavour and Fragrance Journal 20, 415-418.
Duke, J.A. & Atchley, A.A. (1986) Handbook of Proximate Analysis Tables of Higher Plants. Boca Raton,
CRC Press, pp. 99 (389 p)
Departamento de Control de Calidad; Laboratorio de Productos Fitoteraputicos, Farmaya, S.A. (2007)
Certificados de Control de Calidad de Materia Prima Vegetal. Guatemala.
Ministerio de Economa (1989). Comisin Guatemalteca de Normas. Productos Fitoteraputicos. Pericn
desecado para t o infusin. Propuesta COGUANOR NGO 6 074:89

96

Anexo 8.

Manikara sapota van Royen (Sapotaceae)

I.

DENOMINACIN, SINNIMOS Y EQUIVALENCIAS

1.

Denominacin: Fruto de M. sapota.

2.

Sinnimos:

Manikara achras Mill. Fosberg.


3.

Nombres vulgares:

Chico, Chicozapote (Guatemala); mui, tzaput


(Quiche), zapote blaco, zapote colorado, sapodilla (1).
II.

DESCRIPCIN BOTNICA

rbol de 20-40 m de alto, con abundante resina lechosa. Hojas siempre verdes, agrupadas en
rosetas al final de las ramas, verde oscuro, lisas, lanceoladas, brillantes, de 12 cm de largo y 4
cm de ancho. Flores solitarias, pequeas, blancas parcialmente encerradas en un cliz caf
verdoso. Frutas ovales o redondas, hasta 10 cm de ancho, cscara delgada con una costra caf,
gomosa y astringente cuando tierna; al madurar es jugosa, amarillenta, ms o menos granulosa
y dulce. Semillas agrupadas en el centro, 2.5 cm de largo, duras, brillantes, planas, ovales,
negras, con un gancho blanco en un extremo (2).
III. DATOS AGROTECNOLGICOS
1.

Distribucin y hbitat:

Nativo del sur de Mxico y Amrica Central. Introducido a las Antillas, sur de la Florida, las
Filipinas y a todos los pases tropicales de Asia y frica. En Guatemala se cultiva hasta los
1,200 msnm en Petn, Alta Verapaz, Baja Verapaz, Suchitepquez y Retalhuleu (3).
IV.

USOS ETNOMDICOS O TRADICIONALES

Frutos verdes: Se usa para problemas pulmonares (3).


Frutos maduros: Es muy apetecido. De la goma se extrae el chicle o goma de mascar (3).
Semillas: Se usan para expulsar clculos biliares, renales y para sanar picaduras de animales
ponzoosos. Se les atribuyen propiedades diurticas (3). Pueden ser txicas y producir dolor
abdominal y vmito (3).
Corteza: Se les atribuyen propiedades febrfugas. La madera es conocida por su fortaleza y
durabilidad (3). Por la gran cantidad de taninos que contiene, puede emplearse como
astringente para combatir las diarreas y la disentera. Adems la sustancia roja acta como
antisptico del tubo digestivo, impidiendo el desarrollo de bacterias patgenas (2).
Raz: Emenagoga (3).
Ltex: Es usado por las comadronas rama de Nicaragua para el dolor de estmago y el dolor
postparto (4).
Toda la planta: La infusin de corteza y hojas se usa para tratar reumatismo, resfros,
influenza, leucorrea, hipertensin e insomnio. En las afecciones gastrointestinales la decoccin
97

de frutas verdes y hojas se usa para tratar diarrea y disentera, inflamacin intestinal e
inapetencia (3).
V.

DROGA VEGETAL

1.

Denominacin: Fruto de M. sapota

2.

Definicin: Fruto fresco.

3.
Obtencin: La cosecha se realiza manualmente, recolectando los frutos cuando han
alcanzado su madurez fisiolgica en el rbol. La fruta no debe ser expuesta al sol o a la lluvia
(5)
.
4.

Descripcin macroscpica: No refiere.

5.

Descripcin microscpica de la droga: No refiere.

6.
Composicin qumica: La corteza contiene bastante cantidad de taninos, malato de
potasio y cal, sustancia roja, goma, fosfatos de calcio, magnesio y hierro, sulfatos y cloruros
de potasio, una sustancia semejante a la zaponina: la patina y adems de una abundante
cantidad de una sustancia semejante a la goma elstica. Las semillas contienen, adems, una
sustancia resinosa y una materia grasa (3).
El principal producto es el ltex. El chicle contiene resina, goma elstica, azcar, goma,
almidn, materia colorante y sales (6). La zapotina es un alcaloide antitrmico o sudorfico, por
lo que es til en las enfermedades con fiebre: paludismo, fiebre tifoidea y viruela entre otros,
especialmente si al cocimiento se le agrega una pequea cantidad de alcohol que aumenta su
actividad, pues favorece la disolucin de la zapotina (2).
7.

Monografa de control de calidad:

7.1. Identificacin:
7.1.1 Descripcin macroscpica: Fruto redondo de color caf claro. Sus hojas son verde
oscuro brillante por la parte de encima por la parte de abajo, verde opaco, la forma de la hoja
es lanceolada, flores solitarias en las axilas de las hojas (6-8).
7.1.2 Descripcin microscpica: No refiere.
7.1.3 Caractersticas organolpticas: Fruto globoso, de 5-7 cm de dimetro, de color moreno
oscuro, con 4 5 semillas deprimidas, negras y brillantes. Pulpa de sabor dulce; de olor
agradable (6-8).
7.2 Ensayos:
7.2.6 Caractersticas fisicoqumicas:
Materia extraa: No debe contener ms del 10%.
rganos ennegrecidos o deteriorados: No debe contener ms del 10%.
Partes de otras plantas: No debe presentar.
Insectos o larvas: No debe presentar.
Partculas de tierra, arena, piedras y otra materia extraa: No debe presentar.
Humedad: Por mtodo gravimtrico cuando la materia seca vegetal contiene sustancias
voltiles: No debe contener ms del 10% (9).
Cenizas totales: Por incineracin en mufla a 700-750C, no debe pasar el 9% (9).
98

7.2.2 Anlisis microbiolgico: El producto en cualquiera de sus presentaciones no contendr


microorganismos patgenos o sus toxinas.
Coliformes totales: Menor al 104 NMP de coliformes totales.
Coliformes fecales: Menor al 103 NMP de coliformes fecales.
Escherichia coli: Menor al 102 NMP de E. coli.
Recuento de mohos y levaduras: Mximo 1x104 UFC/mL (9).
7.2.3. Contaminantes qumicos o biolgicos: El producto no deber contener contaminantes
qumicos o biolgicos en cantidades que sobrepasen los lmites mximos aceptados por la
unidad sanitaria respectiva (8).
8.

Ficha tcnica de seguridad y eficacia:

8.1

Datos farmacolgicos

8.1.1 Estudios farmacolgicos in vitro: No refiere


8.1.2 Estudios farmacolgicos in vivo: No refiere
8.2

Datos de seguridad clnica

8.2.1 Estudios de toxicidad aguda: No refiere


VI.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.

REFERENCIAS
Standley, P.C. & Williams, L. (1961) Flora of Guatemala. Fieldana: Botany 24, 223.
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Mxico, p. 266.
Departamento de Control de Calidad; Laboratorio de Productos Fitoteraputicos Farmaya, S.A. (2007)
Certificados de Control de Calidad de Materia Prima Vegetal. Guatemala.

99

Anexo 9.

Piper auritum HBK (Piperaceae)

I. DENOMINACIN, SINNIMOS Y EQUIVALENCIAS


1.

Denominacin: Hojas de P. auritum

2.

Sinnimos:

Piper auritum Kunth


3.

Nombres vulgares:

Santa Mara, cordoncillo, hoja de jute, juniapra; xaclipur


(Quecch), obet (Cobn); caa de oro (Quetzaltenango), (Gua.)
kolk, anisillo imperial, hoja de la estrella, estrella, hinojillo,
monca blanca (Cos.); omequelite, acoyo, coyoquelite, acoyo cimarrn; jinat, jina, jinan,
xalcuahuitl (Mx.). (2)
II.

DESCRIPCIN BOTNICA

Arbusto herbceo de 2.5-5 m de alto con tallos gruesos. Hojas alternas enteras. Limbos
cartceos con puntos traslcidos, de elptico aovados a aovados, de 15-50 cm de largo y de 831 cm de ancho, de agudos a acuminados en el pice, inequilteros y profunda-mente
acorazonados en la base, con las venas pennadas, hasta ms all del medio, ms o menos
pubescente en la cara superior con pelos cortos, la pubescencia es especialmente conspicua a
lo largo del margen de las hojas jvenes; pubescentes debajo especialmente en las venas o a
veces aterciopeladas. Flores en espigas delgadas, opuestas a las hojas y ms cortas que estas;
pednculos comnmente ms cortos que los alados pecolos. Estambres de 2 a 6; filamentos
cortos; anteras 2-loculares. Ovario sesil; estigmas de 2 a 5. Fruto pequeo subgloboso (1,2).
III.

DATOS AGROTECNOLGICOS

1. Distribucin y hbitat:
Es la especie ms dispersada del gnero, se encuentra casi en todas las bajas tierras a lo largo
de Amrica Central (2). Es Nativa del sureste de Mxico y Colombia, cultivada y naturalizada
en Cuba y sureste de Florida (3). Crece en macizos aislados, en los sitios frescos y frtiles,
desde la orilla del mar hasta una altitud de 1.200 m. Es silvestre desde Mxico hasta
Colombia, y a menudo se le encuentre en patios, jardines y en sitios sombreados y hmedos,
en la Amrica Central y Colombia (4).
IV.

USOS ETNOMDICOS O TRADICIONALES

Hojas: Las hojas frescas aplicadas en la frente se emplean para aliviar el dolor de cabeza,
puestas sobre heridas, evitan la inflamacin (4). En Cuba las hojas de esta planta se usan como
emoliente. En Mxico las usan para sazonar los tamales y en Costa Rica las aplican frescas a
la frente para aliviar el dolor de cabeza. Se le atribuyen propiedades diaforticas, diurticas y
estimulantes; empleada en el tratamiento de anginas, erisipelas, fiebres, gota y reumatismo; las
hojas soasadas so aplicadas a las llagas (1).
Se usa para curar lceras en la boca, irritacin de la piel, dolor abdominal, indigestin, diarrea,
dolor de cabeza y problemas urinarios (5). En Mxico, la infusin de la mitad de una hoja
puede ser tomada despus de las comidas como estomquico. La decoccin de la hoja se ha
100

empleado como sudorfica, diurtica y estimulante en casos de fiebre, erisipelas, gota y


anginas. El extracto de las hojas sirve como anestsico local, y la decoccin de la hoja se ha
utilizado en el tratamiento de la gonorrea (6).
Para la sarna se maceran las hojas y se colocan sobre la piel, tambin pueden cocinarse y
realizar baos, durante 3 4 das. Contra el dolor de cabeza se ponen las hojas sobre la cabeza
(7)
. En Honduras se ha reportado su uso para calmar dolores, dolores de muelas, debilidad,
inflamaciones, calentura, descomposturas y hemorragia de heridas (8).
Semillas: Las semillas son machacadas para usarse como estimulante de la digestin (6).
Uso en combinacin con otros ingredientes: Las hojas maceradas en aceite de almendras
con la ayuda de calor se emplean para curar los clicos del hgado (4).
Otros usos: Se consume crudo como ensalada. Se agrega a los frijoles como condimento, a las
enchiladas o a los tamales, con lo que adquieren un sabor particular.
V.

DROGA VEGETAL

1.

Denominacin: Piper auritum HBK; hojas

2.

Definicin: hojas secas y molidas.

3.

Obtencin: No refiere.

4.

Descripcin macroscpica: No refiere.

5.

Descripcin microscpica de la droga: No refiere.

6.
Composicin qumica: La hoja contiene aceite esencial: safrol (70-85% del aceite
esencial), elemicina, eugenol y miristicina, borneol, acetato de borneol, -cadineno, canfeno,
acadina-1-4-dieno, -bisaboleno, -borboneno, cariofileno; diterpenos, tranfitol; fenlicos:
aurantiamida I y II; esteroides: -sitosterol; bencenoides: cido piperoico; flavonoides
derivado de flavona; alcanos n-hexadecano, nonan-2-ona; heterociclos oxigenados: cido
piperocromanoico y piperocromenoico. La planta entera contiene alcaloides: aporfina, aceite
esencial (0.47-0.58%): cefaradiona A y B (3). 1,8 cineol, cido benzoico, linalool, mireceno,
miristicina, safrol, -pineno, -pineno, cariofileno (9).
7. Monografa de control de calidad:
7.1

Identificacin:

7.1.1. Descripcin macroscpica: No refiere.


7.1.2. Descripcin microscpica: No refiere.
7.1.3. Caractersticas organolpticas: No refiere.
7.2.

Ensayos:

7.2.1. Caractersticas fisicoqumicas:


Materia extraa: No debe contener ms del 10%.
rganos ennegrecidos o deteriorados: No debe contener ms del 10 %.
Partes de otras plantas: No debe presentar.
Insectos o larvas: No debe presentar.
Partculas de tierra y otros considerados como materia extraa: No debe presentar.
101

Humedad: Por mtodo gravimtrico cuando la materia seca vegetal contiene sustancias
voltiles: No debe contener ms del 10% (10).
Cenizas totales: Por incineracin en mufla a 700-750C, no debe pasar el 9% (10).

7.2.2. Anlisis microbiolgico: El producto en cualquiera de sus presentaciones no contendr


microorganismos patgenos o sus toxinas.
Coliformes totales: Menor al 104 NMP de coliformes totales.
Coliformes fecales: Menor al 103 NMP de coliformes fecales.
Escherichia coli: Menor al 102 NMP de E. coli.
Recuento de mohos y levaduras: Mximo 1x104 ufc/mL. (10).
Contaminantes qumicos o biolgicos: El producto no deber contener contaminantes
qumicos o biolgicos en cantidades que sobrepasen los lmites mximos aceptados por la
unidad sanitaria respectiva (11).
8.

Ficha tcnica de seguridad y eficacia:

8.1. Datos farmacolgicos


8.1.1 Estudios farmacolgicos in vitro: No refiere.
8.1.2 Estudios farmacolgicos in vivo: El extracto acuoso (decoccin) liofilizado de hoja
fresca, se administr por va oral (5 g/Kg/da) por 5 das, a 20 ratones NGP ambos sexos; el
control se realiz con agua destilada (0.5 mL) en 20 ratones con las mismas caractersticas.
Tuvieron un perodo de observacin de das ms al terminar la administracin del tratamiento
y del control. Durante el ensayo, no se present mortalidad ni signos de toxicidad en los
parmetros evaluados. No se dispone de informacin que documente la seguridad de su uso en
nios, durante el embarazo o la lactancia (3).
8.2

Datos de seguridad clnica

8.2.1. Estudios de toxicidad aguda: No refiere


VI.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.

REFERENCIAS
Roig, J.T. (1988) Plantas Medicinales Aromticas o Venenosas de Cuba. Editorial Cientfico-tcnica La
Habana, p. 548.
Standley, P.C. & Williams, L.O. (1961) Flora of Guatemala. Fieldana: Botany 24(3), 432.
Germosn, L. (2005) Farmacopea Vegetal Caribea. Editorial Universitaria, UNAN-Len. Len, Nicaragua.
p.486.
Nuez, E. (1986) Plantas Medicinales de Costa Rica y su Folclore. Segunda Edicin. Editorial de la
Universidad de Costa Rica. Costa Rica. p.318.
Alonso, C., Lara, F., Esquivel, B. & Mata, R. (1999) Plantas Medicinales de Mxico. Universidad Nacional
Autnoma de Mxico, Mxico, p. 177.
Morton, J. (1981) Atlas of Medicinal Plants of Middle America. Charles C. Thomas Publisher. Springfield.
p. 1420.
Ocampo, R., Villalobos, R., Cifuentes, M. (1997) Productos No Maderables del Bosque en Baja Salamanca,
Costa Rica. CATIE, Costa Ria. p.117
House, P.R. Torres, C., Lagos-Witte, S., Meja, T., Ochoa, L. & Rivas, M. (1995) Plantas Medicinales
Comunes de Honduras. Litografa Lpez S. de R.L., Tegucigalpa, p. 353.
Duke, J.A., Bogenschutz-Godwin, M.J., du Cellier, J. & Duke, P.A.K (2003) CRC Handbook of Medicinal
Spices. CRC Press, Boca Raton, p. 251-253.

102

Anexo 10.

Solanum nigrescens Mart. & Gal. (Solanaceae)

I. DENOMINACIN, SINNIMOS Y EQUIVALENCIAS


1.

Denominacin: Hojas y frutos de S. nigrescens.

2.

Sinnimos:

Solanum douglasii Dunal.


Solanum oligospermum Bitter. (3)
3.

Nombres vulgares:

Hierba mora, quilete, macuy, chichiquelite, (Gua) (1), hierba


mora negra, ix pakgcha tantisiktsi, mustuluk (Mx) (2).
II.

DESCRIPCIN BOTNICA

Es de 0.5-3 m de alto; tallo piloso. Hojas en pares o solitarias de diferentes tamaos, forma
similar, enteras o dentadas, lanceoladas, 3-18 cm. de largo, pice acuminado, base atenuada.
Peciolo 5-35 mm de largo; inflorescencia internodal, racemiforme; pednculos 1-3 cm. de
largo; cliz 1-1.5 mm de largo, lobulado; corola blanca o lila, mancha obscura en la base;
filamentos ciliados; anteras 3-4 mm de largo; (3) 5 estambres que en conjunto forman un cono
de 2-3 mm de largo. Flor bisexual; cliz 5 lobulado, de 1 a 1.25 mm de largo, ligeramente
acrescente, deflexo, verde; ovario glabro. Fruto globoso, negro, en baya de 4-7 mm de
dimetro; semilla 1-1.5 mm de largo (3).
III. DATOS AGROTECNOLGICOS
1.

Distribucin y hbitat:

Planta herbcea. Es una especie de distribucin cosmopolita y nativa de Centroamrica. Se


encuentra en Guatemala, al sureste de Mxico y Costa Rica (4). Sus lugares de origen se han
ubicado en el sureste de Estados Unidos de Amrica, Chile y Argentina. Est presente en
climas clido, semiseco y templado desde el nivel del mar hasta los 3000 m. Se encuentra
asociada a vegetacin perturbada de bosque tropical perennifolio, matorral xerfilo, bosques
de encino, de pino y mixto de pino-encino (5).
IV.

USOS ETNOMDICOS O TRADICIONALES

Hojas: Flujo vaginal, la hoja madura cortada al final o despus de la fructificacin en


decoccin o aplicacin local en lavados vaginales (6). Para quemaduras, lceras y tumores se
pueden aplicar cataplasmas con las hojas frescas y machacadas o el polvo resultante de la raz
molida. En la disipela y los erisemas, el fruto se aplica a manera de cataplasma o la planta
molida se pone en todo el cuerpo para quitar las erupciones y el enrojecimiento de la piel. Para
granos en el cuerpo, que son protuberancias de la piel dolorosas y con pus, las hojas se fren
con cebo o se meten en alcohol y se pone en el grano (5).
Jugo: En dolores de ojos y odos se usa el jugo de la planta en gotas aplicndolo directamente.
Untado en la frente y en las sienes sirve contra el dolor de cabeza (5).
Sin especificar parte: Se recomienda para problemas de piel tales como alferecia, eczemas,
erisipela y moretones. Es empleada con mayor frecuencia para el tratamiento de chincoal: se
103

dan baos con el cocimiento de toda la planta. Tambin se emplea en heridas; en las cuales se
aplican cataplasmas con las hojas de esta planta. Para limpiar las heridas se hierven las ramas
y hojas o se usa toda la planta molida y se pone diariamente, hasta que cicatrice la herida (5).
En casos de reumatismo, se dan baos con el cocimiento de las ramas o frotaciones con la
extraccin alcohlica de las ramas. Contra la tos, se toma el cocimiento de toda la planta. Este
mismo en aplicacin tpica se emplea para alergias en la piel; aplicando como fomento se usa
en hinchazones o cuando hay calentura. Usado en baos de asiento sirve para tratar las
hemorroides, este mismo cocimiento se deja enfriar para baar al enfermo y bajarle la
calentura (5). Suele emplearse en trastornos digestivos como bilis, dolor de estmago,
estreimiento de bebes recin nacidos, para el hgado, en la inflamacin estomacal por alcohol
y en lceras estomacales (5).
Otros usos son para problemas de bronconeumona, catarro y pulmn; en inflamacin de
vientre y de rin; cuando hay calor del cuerpo; contra mordida de coyote, piquete de hormiga
o de insecto, tiricia y contra el susto. Se menciona su utilidad como cicatrizante, excitante,
tnico y vulnerario y para usarlo como enjuague de pelo (5). Se usa para bajar la calentura; se
hierve un rollo de la planta en agua y se baa al enfermo cuando el agua est fra (2). Por su
contenido de sales minerales es buen reconstituyente, por lo que se recomienda en el
tratamiento de anemia y debilidad del organismo (7).
Otros: Las hojas se comen en caldo o fritas con huevo; es una hierba que se consume en
grandes cantidades en Guatemala y es frecuente encontrarla en los mercados, se acostumbra
comerla en la convalecencia y recuperacin de diversas enfermedades (8).
V. DROGA VEGETAL
1.

Denominacin: Solanum nigrescens Mart. & Gal

2.

Definicin: hojas y frutos.

3.

Obtencin: No refiere.

4.

Descripcin macroscpica: No refiere.

5.

Descripcin microscpica de la droga: No refiere.

6. Composicin qumica: El tamizaje fitoqumico demostr alcaloides, esteroides


policclicos insaturados, saponinas, azcares 2-desoxigenados, taninos, cardenlidos, cido
mlico, riboflavina, tiamina, cido ascrbico y sales minerales (1). La actividad fungicida se
atribuye a la cantalosaponina (9).
7.

Monografa de control de calidad:

7.1 Identificacin:
7.1.1 Descripcin macroscpica: No refiere.
7.1.2 Descripcin microscpica: No refiere.
7.1.3 Caractersticas organolpticas: No refiere
7.2 Ensayos:
7.2.1 Caractersticas fisicoqumicas:
Materia extraa: No debe contener ms del 10%.
104

rganos ennegrecidos o deteriorados: No debe contener ms del 10%.


Partes de otras plantas: No debe presentar.
Insectos o larvas: No debe presentar.
Partculas de tierra, arena, piedras y otra materia extraa: No debe presentar.
Humedad: Por mtodo gravimtrico cuando la materia seca vegetal contiene sustancias
voltiles: No debe contener ms del 10% (10).
Cenizas totales: Por incineracin en mufla a 700-750C, no debe pasar el 9% (10).

7.2.2 Anlisis microbiolgico: El producto en cualquiera de sus presentaciones no contendr


microorganismos patgenos o sus toxinas.
Coliformes totales: Menor al 104 NMP de coliformes totales.
Coliformes fecales: Menor al 103 NMP de coliformes fecales.
Escherichia coli: Menor al 102 NMP de E. coli.
Recuento de mohos y levaduras: Mximo 1x104 UFC/mL. (10).
7.2.3 Contaminantes qumicos o biolgicos: El producto no deber contener contaminantes
qumicos o biolgicos en cantidades que sobrepasen los lmites mximos aceptados por la
unidad sanitaria respectiva (10).
8.

Ficha tcnica de seguridad y eficacia:

8.1. Datos farmacolgicos:


8.1.1
Experimentos in vitro: Estudios realizado en Guatemala demuestran que la decoccin
de las hojas de ambas especies presentan actividad antibitica. La decoccin posee actividad
contra P. aeruginosa, S. aureus y S. pyogenes (11,12) pero no contra V. cholerae (13). Estudios
del espectro de inhibicin de cepas de 20 pacientes demuestran que el extracto metanlico
inhibi el 50% de las cepas de S. aureus, 20% de las de S. typhi y 15% de las de P.
aeruginosa. El mejor disolvente para la actividad antibitica es el etanol (14). Estudios
antimictico demuestran que la decoccin y la maceracin hidroalcohlica de las hojas de
tiene actividad contra C. albicans (15).
8.1.2
Experimentos in vivo: La infusin de las hojas no tiene actividad hipoglice-miante en
un modelo en rata (16), ni es es espasmoltica frente a acetilcolina en dosis de 640 mg y frente a
cloruro de bario en dosis de 320-640 mg, de donde se deduce que inhibe el espasmo por
mecanismos muscarnicos y musculotrpicos (17). Estudios prelimi-nares indican que la
decoccin de hojas tiene actividad inmunomoduladora en ratones medida por un aumento en
la poblacin de linfocitos y en los ttulos de anticuerpos sricos (18).
8.2. Datos sobre seguridad clnica:
8.2.1. Toxicidad aguda: La -solanina tiene una DL50 de 42 mg/Kg por va intraperitoneal (16).
Los principios txicos se atribuyen a la solanina y solanidina; los sntomas de intoxicacin
son: vmitos, diarrea, dolores de cabeza y estmago, dificultad para ver y hablar, debilidad,
sudoracin, fro, alteracin del pulso, alucinaciones e inconciencia (1).
VI. REFERENCIAS
1.
2.
3.

Cceres, A. (1996) Plantas de Uso Medicinal. Primera Edicin. Editorial Universitaria. p.239.
Martnez, M. (1992) Las Plantas Medicinales de Mxico, Ediciones Botas, Mxico, 656 pp.
Standley, P.C. & Williams, L. (1961) Flora of Guatemala. Fieldana: Botany 24(10), 105

105

4.
5.
6.
7.
8.
9.

10.
11.

12.

13.

14.
15.

16.

17.

18.

Linares, E., Flores Peafiel, B., Byre, R. (1988) Seleccin de Plantas Medicinales de Mxico. Editorial
Limusa, Mxico, p. 50.
FAO (1993) Valor Nutritivo y Usos en Alimentacin Humana de Algunos Cultivos Autoctonos
Subexplotados de Mesoamerica, Chile p155
Argueta, A., Cano Asseleih, L.M. & Rodarte, M.E. (1994) Atlas de Plantas de la Medicina Tradicional.
Editorial Instituto Tradicional Mexicana, Mxico, p. 497.
Germosn, L. (2005) Farmacopea Vegetal Caribea. Segunda Edicin. Editorial Universitaria, UNANLen. Len, Nicaragua. p.486.
Cceres, A. & Aragn, A. (1994) Vademcum Fitoteraputico del Departamento de San Marcos.
Guatemala. p. 44.
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B.W. (1994) An antifungal compound from Solanum nigrescens. Journal of Ethnopharmacology 43, 173177.
Departamento de Control de Calidad; Laboratorio de Productos Fitoteraputicos, Farmaya, S.A. (2007)
Certificados de Control de Calidad de Materia Prima Vegetal. Guatemala.
Cceres, A., Girn, L.M. & Martnez, A.M. (1987) Screening of antimicrobial activity of plants popularly
used in Guatemala for the treatment of dermatomucosal diseases. Journal of Ethnopharmacology 20, 223237.
Cceres, A. Alvarez, A.V., Ovando, A.E. & Samayoa B (1991) Plants used in Guatemala for the treatment
of respiratory diseases screening of 68 plants against Gram positive bacteria. Journal of
Ethnopharmacology 31, 193-208.
Espaa, S.M., Cceres, A, & Velez de Marsicovtere (1994) Plants used in Guatemala for the treatment of
gastroin-testinal disorders. V. Vibriocidal activity of five American plants used to treat diarrhea.
Fitoterapia 65:273-274.
Ramrez, O. (1988) Espectro de inhibicin de Bacterias Patgenas por Extractos Vegetales. (Tesis),
Guatemala. Facultad de Ciencias Qumicas y Farmacia, USAC, p. 49.
Girn, L.M., Aguilar, G.A., Cceres, A. & Arroyo, G.L. (1988) Anticandidal activity of plants used for the
treatment of vaginitis in Guatemala and clinical trial of a Solanum nigrescens preparation. Journal of
Ethnopharmacology 22, 307-313.
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nigrescens Mart & Gal (Macuy, Quilete o Hierba Mora) Guatemala (Tesis) Facultad de Ciencias Qumicas
y Farmacia, USAC, p.41.
Cruz, A.M.A. (1990 Estudios farmacolgicos de la actividad antiespasmdica in vitro de Medicago sativa
L. (alfalfa), Linux usitatisismum L. (Linaza), Jazminum grandiflora L. (Jazmin), Citrus medica L. (Cidra) y
Solanum nigrescens Mart & Gal. (Quilete). Guatemala. (Tesis), Facultad de Ciencias Qumicas y Farmacia,
USAC, p. 63.
Lara, R., Sandoval, H., Jimnez, M., de la Roca, D., Guzmn, A., Dubn, D., Meneses, M., Arvalo, C. &
Cceres, A. (1991) Determinacin de la actividad inmunomoduladora de los extractos de zarzaparrilla,
quilete y pericn. IV Congreso Nacional de Microbiologa, Guatemala, pp. 88.

106

Anexo 11.

Spondias mombin L. (Anacardiaceae)

I.

DENOMINACIN, SINNIMOS Y EQUIVALENCIAS

1.

Denominacin: Fruto de S. mombin.

2.
Sinnimos:
Spondias purpurea L. (1,3).
Spondias lutea L. (1).
Spondias rodlkoferi Donn. Smith (1).
Spondias brasiliensis Mart. (2).
Spondias myrobalanus L. (2).
Spondias aurantiaca Schum & Thonn (2).
Spondias axillaris Roxb (3).
Spondias cythera Tussac (3).
Spondias dubia A. Rich (3).
Spondias graveolens Macfadyen (3).
Spondias lucida Salisb (3).
Spondias nigrescens Pitt (3).
Spondias pseudomyrobaslanus Tussac (3).
Spondias radlkoferi J.D. Smith (3).
Spondias venulosa (Engler) Engler (3).
Spondias zansee G. Don (3).
3.

Nombres vulgares:

Hobo (Col., Ecu.). Jobo (Col., Ven.). Jobo de castilla, jobo colorado (Col.) (1,4). Jobo arisco (1),
jocote, jocote jobo, poc (quecch), jobo jocote, kinim (Petn) (7). Ubos, uvos, shungu, tobo de
la montaa (Per); tapereb caja, cajamirin (Bra.) (4). Ciruela, ciruela amarilla, ciruela
campechana, ciruelo, ciruelo de hueso grande, ciruelo rojo cimarrn, fondura, cua-puat, cuaspua (cora), maxpy, obo (mixe), catan (tepehua), cuauhxonat (nahua), scatan, shipa (totonaco),
abal, huh, kankan-aba (maya), abal, abal ak, abalil kaax, abal soots, juujub, kabal, kaan
abal, kaankan abal, kiinil, kinil abal, xkiinil, xokat (maya), knim, knim te (tenek) (5).
Acaja, acaj, ajuela, binbish-sheshon (phipibo). caja, caja mirin y tapereba (Bra.). Canyarana,
cansa boca, ciruela de cerdo, ciruela amarilla, ciruela del maraon, cancharana, hobo, jocote
(nahuatl). Rompe, ushum, uvo, xukoom y sheshon (arahuaca). Tronador, tsiyoroqui y
metsoqui (ashninka). Tapareba, ciruela agria, diji (ese eja) y lopo (piro, yine), sheson (shipibo
conibo), ubo, mope (6). Jocote de corroncha, jocote jobo, jobo (Sal.), ciruela amarilla (Mx.),
jocote jobo (Gua.), ciruela de monte, jocote, jocote jobo (Hon., Nic.), Hogplum (ingles) (8).
II.

DESCRIPCIN BOTNICA

Un rbol, algunas veces 20 m de alto o ms grande, el tronco frecuente 60 cm en dimetro,


recto, alto, la corteza plido gris-caf, moderadamente suave o con fisuras verticales, la copa
angosta o ancha y dispersa, foliolos 5-9 pares, peciolados, oblongos o ovado oblongos, muy
oblicuo en la base, glabro o dispersamente corto-piloso, especialmente sobre los nervios;
flores fragantes, blancas, en vistosas panculas grandes; ptalos 3 mm de largo, fruto ovoide,
amarillo comnmente 3-4 cm de largo (8).

107

III. DATOS AGROTECNOLGICOS


1.

Distribucin y hbitat:

Se encuentra distribuida desde Mxico hasta Brasil y Per, no pasa de 1500 msnm (1). Se
encuentra en bosques hmedos o lluviosos a menudo cerca de riachuelos, comunes en segundo
crecimiento, mas comnmente a 600 m o menos; desde el sureste de Mxico, hasta los
trpicos de Sur Amrica y del Viejo Mundo, probablemente introducido. En Guatemala se ha
descrito en Petn, Alta Verapaz, Izabal, Zacapa, Chiquimula, Huehuetenango, Quetzaltenango,
Suchitepquez, Retalhuleu y San Marcos (5).
Originaria de los trpicos americanos, habita en climas clido y semiclido, desde 0 hasta los
1500 msnm. Esta asociada a bosques tropicales caducifolio y perennifolio (5).
IV.

USOS ETNOMDICOS O TRADICIONALES

Hojas: En Veracruz se utilizan el frote de las hojas para tratar salpullido (10). El zumo de las
hojas frescas o el cocimiento cargado constituye un remedio domstico contra el sapillo o aftas
de los nios. Las hojas usadas externo o internamente, segn los casos, son tambin tiles
contra las fiebres biliosas, la constipacin del vientre, los dolores de estmago, las
constipaciones complicaciones consecuentes a los partos, y para varias enfermedades de los
ojos y la laringe (11). La infusin de las hojas se utiliza en el tratamiento de la diarrea, infeccin
vaginal, estomacal y dermatitis (4).
Corteza: Es utilizada para tratar la diarrea (12). En Puebla se utiliza el cocimiento de la corteza
para el dolor de estmago (10). Las hojas y corteza son astringentes muy poderosos. Los
Tikunas toman una decoccin de la corteza para aliviar el dolor y prevenir el sangrado
excesivo durante la menstruacin (13). La decoccin se refiere como anticonceptivo y en la
curacin de infecciones vaginales y estomacales (4). Es la parte ms empleada, se prepara
hervida se bebe como agua de uso durante tres das para el sarampin o dolor de estmago (5).
Para usarla como antisptico, la corteza se deja secar al sol junto con las hojas, esto se muele y
se le agrega agua hervida ms un poco de sal de mar y con la ayuda de un pao se ponen gotas
en los ojos o se aplica en las heridas. Para la dentadura se mastica la corteza, se hacen buches,
despus la saliva se escupe. Para el ombligo salido la forma de uso es la siguiente: se marca el
pie de un beb en el tallo del ciruelo al nacer el sol, as cuando la planta encarna el ombligo
se mete; y se coloca sobre el ombligo un poco de resina de la misma planta y se aprieta con
fajerito. La corteza seca y pulverizada, se pone sobre la mordedura de la serpiente (5).
Frutos: Tienen propiedades balsmicas, por ello se dice que son calientes (14). En Veracruz se
maceran los frutos y luego se aplican sobre la piel para tratar inflamaciones (10,15). En medicina
tradicional, se utiliza en el tratamiento de erisipelas e hinchazones y como antiespasmdico y
oftlmico; ingeridos en grandes cantidades, son vmitos (4). En Morelos se utiliza el
cocimiento del fruto y las semillas para la diarrea (10). En Cuba se utilizan los frutos como
emticos o emetocatrticos, tomados en gran cantidad. El macerado de la pulpa de los frutos
es til contra ascitis y uretritis (11).
Flores: Son aromticas y cuyo macerado, adems de refrigerante, es reconocidamente
ventajoso para combatir las diarreas de la primera infancia (11).
Toda la planta: Los cogollos de los pices de las ramas de estos rboles del trpico y
subtrpico, se comen crudos, con o sin sal; se dice que contrarrestan la anemia (16).
108

Cscara: Es aromtica, astringente y emtica, constituyendo un buen vomitivo en los casos de


fiebres biliosas y paldicas, goza de reputacin como astringente, antidiarreico,
antidisentrico, antihelmntico, antiblenorrgico y antihemorroidal, siendo esta propiedad
atribuida tambin a la raz (4,11).
Uso en combinacin con otros ingredientes: Se hierven las hojas ms tiernas junto con hojas
de limn y de te limn para la tos (17). Se utiliza para empacho, enfermedad del aparato
digestivo, que afecta principalmente a nios entre los 2 y 6 aos. Su tratamiento consiste en
administrar infusiones de diversas plantas como hierbabuena, rnica, raz de ciruelo o anona o
mezclas con otras hierbas, adems de suministrar purgantes, sales y cenizas (5).
Parte sin especificar: En Nayarit, Veracruz y Yucatn es comn el uso de jobo para quitar el
salpullido. Tambin se le emplea en ronchas y sarna y en algunos trastornos de tipo digestivo
como diarrea. Dolor de estmago y latido (5).
Grupos indgenas mexicanos la usan preparada en t para la disentera, que se conoce con los
nombres de pujo o diarrea con moco y la clasifican en disentera blanca, negra o roja. Adems
se usa para resfro o calor; consumir alimentos descompuestos o sucios; comer frutas verdes,
cidas o agrias; tomar agua cruda; cuando hay enfriamiento del cuerpo o por corajes, sustos,
malpasadas, etc. Se presentan principalmente en nios entre 5 y 14 aos. Los sntomas son:
palidez desgano, tristeza, decaimiento, mareos, fiebre, dolor e inflamacin del estmago,
clicos, sed y resequedad de la piel, pujo y escalofros (5).
Uso etnoveterinario: Es un alimento de la fauna silvestre. Se utiliza en alimentacin de
vacunos, cerdos y peces, tambin es una planta melfera (4).
V.

DROGA VEGETAL

1.

Denominacin: Frutos de S. mombin

2.

Definicin: Fruto fresco.

3.
Obtencin: Produce flor durante la estacin seca, especialmente en agosto y septiembre
en la regin de Manaus; el fruto esta maduro entre diciembre y febrero, aunque se encuentra
algunos frutos maduros en cualquier poca del ao (9). La fruta se cosecha cuando madura en
el rbol, se toma suave y el color cambia de verde hacia un tono amarillento. La fruta puede
ser cosechada cuando est todava dura y verde, logrando un buen sabor en el proceso de
maduracin. Sin embargo, el mejor sabor se obtiene cuando est madura en el rbol. Se
cosecha a mano o se colectan las frutas cadas.
4.

Descripcin macroscpica: No refiere.

5.

Descripcin microscpica de la droga: No refiere.

6.
Composicin qumica: En las hojas y tallos se han identificado los compuestos
fenilicos cido clorognico, geranin, galoill-geranin y se detectaron saponinas presentes en las
hojas (15).
7.

Monografa de control de calidad:

7.1

Identificacin:

7.1.1 Descripcin macroscpica: No refiere.


7.1.2 Descripcin microscpica: No refiere.
109

7.1.3 Caractersticas organolpticas: No refiere.


7.2

Ensayos:

7.2.1 Caractersticas fisicoqumicas:


Materia extraa: No debe contener ms del 10%.
rganos ennegrecidos o deteriorados: No debe contener ms del 10%.
Partes de otras plantas: No debe presentar.
Insectos o larvas: No debe presentar.
Partculas de tierra, arena, piedras y otra materia extraa: No debe presentar.
Humedad: Por mtodo gravimtrico cuando la materia seca vegetal contiene sustancias
voltiles: No debe contener ms del 10%
Cenizas totales: Por incineracin en mufla a 700-750C, no debe pasar el 9% (18).
7.2.3 Anlisis microbiolgico: El producto en cualquiera de sus presentaciones no contendr
microorganismos patgenos o sus toxinas.
Coliformes totales: Menor al 104 NMP de coliformes totales.
Coliformes fecales: Menor al 103 NMP de coliformes fecales.
Escherichia coli: Menor al 102 NMP de E. coli.
Recuento de mohos y levaduras: Mximo 1x104 UFC/mL (18).
7.2.4 Contaminante: No deber contener contaminantes qumicos o biolgicos en cantidades
que sobrepasen los lmites mximos aceptados por la unidad sanitaria (18).
8.

Ficha tcnica de seguridad y eficacia:

8.1

Datos farmacolgicos

8.1.1 Estudios farmacolgicos in vitro: Presenta un amplio espectro antibacteriano al


evaluarse un extracto etanlico y un extracto acuoso, frente a 10 especies de bacterias, para las
que se obtuvo una respuesta antibitica positiva (5). Varios extractos etanlicos preparados de
las hojas y tallos, as como una fraccin cromatogrfica aislada mostraron actividad antiviral
frente a los virus Coxsavkie B2 y Herpes simplex 1 (5).
Las actividades relajantes del msculo liso y estimulante del tero se observaron en extractos
acuosos de hojas, que fueron evaluados en rganos aislados de cobayos y conejos la primera, y
en teros aislados de cobayos la segunda. Un extracto acuoso de corteza present actividad
estimulante del tero aislado de ratas (5). Un extracto de las hojas frescas, evaluado frente a
sangre total humana, a la concentracin de 50% present actividad hemosttica (5). Otras
actividades dieron resultados negativos como la actividad anticonvulsivamente de un extracto
etanlico (al 70%) preparado de frutos frescos, y una actividad antioxitcica evaluada con un
extracto acuoso de hojas en ratones y ratas (5).
8.1.2 Estudios farmacolgicos in vivo: El extracto etanlico desengrasado de la corteza
redujo la inflamacin podal de la rata inducida por la carragenina (19). Las hojas han
demostrado actividad sedante y un efecto antidopaminrgico en modelos en ratones y ratas (20).
8.2

Datos de seguridad clnica

8.2.1 Estudios de toxicidad aguda: Se calcul el valor de la dosis letal media de un extracto
acuoso de hojas, evaluado en ratones hebras, por la va intraperitoneal, que fue de 1.863 g/kg.
Extractos acuosos de las hojas, evaluados en ratones por la va intraperitoneal y en cobayos
110

por la va intragstrica, presentaron un efecto abortivo a las dosis de 750 mg/kg en el primero
y 20 ml/animal de los extractos para el segundo. Martnez indica que puede llegar a ser daina
la especie si se consume en exceso (5).
VI.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.

REFERENCIAS
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antiepileptic and antipsychotic effects of Spondias mombin L. (Anacardiaceae) in mice and rats. Journal of
Ethnopharmacology 103, 166-175.

111

Anexo 12.

Tagetes lucida Cav. (Asteraceae)

I.

DENOMINACIN, SINNIMOS Y EQUIVALENCIAS

1.

Denominacin: Hojas, semillas, races, tallo y flores

2.

Sinnimos:

Tagetes florida Swart


Tagetes shiedeana Lees
3.

Nombres vulgares:

Pericn, liy, ia, jolomocox, uc, hierba de San Juan, anisillo


(Gua.), curucumn, flor de Santa Mara, hierba ans, periquillo,
yiauhtli. (Mx.).(1)
II.

DESCRIPCIN BOTNICA

Es una hierba erecta perenne, glabra, comnmente de 30-75 cm de altura, fuertemente


aromtica, crece a partir de una base corta gruesa y leosa, mimosamente ramificada arriba;
hojas opuestas, ssiles lineales u oblongo-lanceoladas, 5-10 cm de largo, obtusa o agudas en la
base, finamente dentadas, con numerosas y pequeas glndulas esparcidas; con cimas densas o
abiertas planas en la copa, involucr cilndrico, 9-10 mm de largo, filarios de 5-7, tubulados en
el pice, con numerosas glndulas pequeas y esparcidas; flores del radio femeninas,
comnmente 3 flabeliformes, estigma bifurcado, sin pubescencia; aquenios de 6-7 mm de
longitud, estriados; papus escamoso de 5-6, dos de ellos setiformes de 3 mm de largo, los
cortos dos una tercera parte de longitud, oblongos, obtusos (1).
III. DATOS AGROTECNOLGICOS
1.

Distribucin y hbitat:

Originaria de Mesoamrica, crece en campos abiertos y a orillas de bosques de pino y encino,


algunas veces en laderas rocosas secas, asociada principalmente con gramneas, de 1,0002,000 msnm. Se distribuye desde el Nor-occidente de Mxico hasta Honduras.
En el pas se distribuye principalmente en el altiplano central y occidental del pas, en los
departamentos de Chimaltenango, Guatemala, Huehuetenango, Quetzaltenango, el Quich,
Sacatepquez, San Marcos y Petn, aunque en este ltimo departamento parece haber error
debido al nombre comn, ya que de acuerdo a las condiciones climticas necesarias para esta
planta es poco probable que crezca en forma silvestre en Petn (2).
IV.

USOS ETNOMDICOS O TRADICIONALES

Hojas: Diarrea, disentera, flatulencia, parasitismo intestinal, dolor de estmago, indigestin,


inflamacin nuseas, vmitos, malaria, para aliviar el parto, dolor menstrual, tratar anemia,
inflamacin de ojos, mordedura de escorpin, hepatitis, paludismo, etc. Se le atribuyen
propiedades antiespasmdicas, antispticas, antidiarreicas, antiinflamatorias, carmativas,
diurticas y febrfugas (2).
Hojas y flores: Se emplean en gastralgia; apagadas, se agregan un manojo a dos tazas de agua
hirviendo, se tapa, se deja reposar, se cuela y se administra caliente por va oral, se no
112

prolongar el tratamiento durante un periodo superior a 3 das consecutivos. Popularmente se le


considera una planta abortiva (3). Hojas y flores apagadas por va oral ayuda aliviar el dolor de
estmago, (un manojo de hojas y flores en 2 tazas de agua hirviendo, tapar, dejar reposar,
colar y tomar bien caliente) (4).
Toda la planta En Mxico se la planta entera se usa para tratar la diarrea (5).
Sin especificar la parte: La planta en polvo ha sido utilizada para tratar malaria (6).
Otros usos: El humo de las hojas y flores se utiliza para ahuyentar mosquitos (4,6).
En los pases de clima templado se utiliza las flores y la planta entera como planta ornamental
en jardines. Diarrea (5).
V.

DROGA VEGETAL

1.

Denominacin: Tagetes lucida Cav.

2.

Definicin: Flores y hojas desecadas de la planta.

3.
Obtencin: Se recomienda realizar la cosecha en poca de plena floracin, en la que se
ha comprobado que se obtiene el mayor contenido de aceite esencial y otros componentes
qumicos de inters (3).
4.
Descripcin macroscpica: De acuerdo a la taxonoma de la planta: hierba perenne,
glabra, hojas ssiles, oblongo lanceoladas con margen dentado (7).
5.
Descripcin microscpica de la droga: La estructura microscpica de las hojas
muestra hojas enteras o fragmentos hojas aserradas, con caras superior e inferior que presentan
numerosas glndulas de color amarillo brillante y clulas de parnquima. Las flores enteras o
fragmentos de flores, color amarillo naranja ligulado, presentando un cliz con numerosas
glndulas, un ovario unilocular o uniovular sostenido por papus membranoso y otro
filamentoso. Presentan numerosos grnulos de poln equinados (7).
6.
Composicin qumica: Las hojas y flores contienen: aceite esencial (limoneno, 16.5%;
-ocimeno, 14%; -cariofileno, 28%; mirceno, 4-5%, alilanisol, esdragol, ter metilico de
eugenol, tagedona, dihidrotagetona, tetrahidrotagetona, inalol), alcaloides cuaternarios,
flavoloides (quercetagetina, patuletina), saponinas, taninos, leucoantocia-nias, acido galico,
poliacetilenos, gliccidos cianogenicos, cumarinas, derivados de tiofeno, pliacetilenos,
goma, dextrina, grasas, pectina, tres resinas aciditas, taninos y sales minerales (4,6). Contiene
alcaloides, las hojas y tallos mostraron depresin en el sistema nervioso central y poca
actividad hipotensora (4,6). Tambin presenta otras aceites esenciales como Estragole
fenilpropanoide, adems de flavonoides (patuletin-3-arabinosil-galactosido, quercetagetin-3O-arabinosil-galactosido, rhamnetina, Iso: 3-oarabinosil-galactosido y rhamnetina, Iso: 7-O-D-glucosido) (8).
7.
Monografa de control de calidad: El producto debe estar constituido por las flores y
hojas desecadas enteras, molidas en forma gruesa o picadas en forma fina. Debe proceder de
materia prima que no est alterada, adulterada o contaminada. No debe contener insectos en
cualquiera de sus formas de desarrollo ni otras impurezas que denoten un deficiente estado
higinico sanitario (7).

113

7.1. Identificacin:
7.1.1 Descripcin macroscpica: Color: hojas verdes y flores amarillas. Olor: dulce,
agradable, suave (9).
7.1.2 Descripcin microscpica: No refiere.
7.1.3 Caractersticas organolpticas: Olor: aromtico fuerte a ans; Sabor: aromtico, algo
picante; aspecto: hojas y flores enteras, polvo grueso o partculas grandes (7).
7.2 Ensayos:
7.2.5 Caractersticas fisicoqumicas:
Materia extraa: No debe contener ms del 10%.
rganos ennegrecidos o deteriorados: No debe contener ms del 10%.
Partes de otras plantas: No debe presentar.
Insectos o larvas: No debe presentar.
Partculas de tierra, arena, piedras y otra materia extraa: No debe presentar.
Humedad: Por mtodo gravimtrico cuando la materia seca vegetal contiene sustancias
voltiles: No debe contener ms del 10% (14).
Cenizas totales: Por incineracin en mufla a 700-750C, no debe pasar el 9% (10).
7.2.6 Anlisis microbiolgico: El producto en cualquiera de sus presentaciones no contendr
microorganismos patgenos o sus toxinas.
Coliformes totales: Menor al 104 NMP de coliformes totales.
Coliformes fecales: Menor al 103 NMP de coliformes fecales.
Escherichia coli: Menor al 102 NMP de E. coli.
Recuento de mohos y levaduras: Mximo 1x104 UFC/mL. (10).
7.2.7 Contaminantes qumicos o biolgicos: El producto no deber contener contaminantes
qumicos o biolgicos en cantidades que sobrepasen los lmites mximos aceptados por la
unidad sanitaria respectiva (10).
8.

Ficha tcnica de seguridad y eficacia:

8.1. Datos farmacolgicos:


8.1.1. Estudios in vitro: Se ha reportado que relaja in vitro la musculatura lisa intestinal y
traqueal, en este ltimo tejido antagoniza en un patrn no competitivo a histamina, en menor
medida a serotonina, pero no a acetilcolina; in vivo produce hipotensin arterial. En mecnica
respiratoria slo la menor dosis (10 mg/Kg IV) produjo cambios compatibles con
broncodilatacin: Aumento del flujo areo traqueal, el volumen ventilatorio y el volumen
respiratorio minuto, disminucin de la presin transpulmonar, la resistencia pulmonar y
aumento de la adaptabilidad pulmonar, pero nicamente el aumento de volumen ventilatorio
fue estadsticamente significativo (8).
Estudios antibacterianos in vitro demuestran que la maceracin etanlica de las hojas flores es
activa contra enterobacterias (E. coli enteropatgena (ECEP), S. dysenterie, S. flexneri, S.
typhi y S. pyogenes y poco activa contra N. gonorrhoea. El extracto acuoso es activo contra
ECEP, S. enteritidis, S. typhi, S. dysenteriae, S. flexneri, S. pneumoniae y S. pyogenes. El
estudio del espectro de inhibicin del extracto alcohlico demostr inhibicin de 60% de
cepas de P. auruginosa y 15% de cepas de S. typhi. El tamizaje de la actividad vibriocida in
114

vitro demostr que la maceracin hidroalcohlica inhibe V. cholerae, la mayor actividad se


extrajo con n-hexano y la CIM es de 10 mg. Estudios de la actividad antifngica demuestran
que la maceracin hidroalcohlica de hojas y flores inhibe el crecimiento C. albicans, C.
krusei, C. parapsilosis y C. stellatoidea con una CIMD de 1-2 mg (12). Las hojas han mostrado
actividad contra nematodos (12). En un estudio contra once cepas de bacterias y C. albicans,
por medio de extractos de acetato de etilo en donde se aislaron 5,5,4 trimetroxiflavona
(C18H16O), el cual presento actividad antimicrobiana en las once bacterias estudiadas pero no
en C. albicans (13).
El aceite esencial ha demostrado actividad repelente contra Sitophilus zeamais con una dosis
de 0.065 L/cm2 (14).
8.1.2 Estudios in vivo: Presenta actividad antibacteriana in vivo contra la infeccin producida
por S. dysenteriae 1; en crnea de cobayo, similar a la obtenida con el antibitico de referencia
(cloranfenicol al 1%), (prepararon extractos al 10% de hojas de tagetes lucida, utilizando
etanol al 95%. Luego se concentro el extracto hasta llevarlo a sequedad con una temperatura
de 70C, Asimismo se cultivo la cepa de S. dysenteriae 1, en agar sangre y luego en medio
lquido (HBI), posteriormente se inoculo a nueve cobayos 0.1 ml del medio conteniendo S.
dysenteriae 1, en cada ojo, y el tratamiento para aliviar estas infecciones se aplico, una vez al
da, a cada ojo asignado al azar; dichos tratamientos estuvieron constituidos por ungentos al
10% formulados a base de las plantas en estudio, el vehiculo utilizado en la preparacin de
dichos ungentos (vaselina slida) un antibitico de referencia (cloranfenicol al 1%) (12).
Diversos extractos de hojas tienen actividad espasmolitica in vitro en ratas, la DE50 es de 1.88
g para el extracto bencnico. En un modelo experimental en conejos el extracto acuoso
produce cambios compatibles con broncodilatacin: disminuye levemente la presin
transpulmonar, aumenta la adaptabilidad dinmica, produce leve taquicardia cada de la
presin venosa central, leve taquicnea, incremento de flujo areo traqueal, pero no en forma de
dosis dependiente. Estudios preliminares indican que la decoccin de hojas tiene cierta
actividad inmunomoduladora en ratones, medida por un aumento en la poblacin de linfocitos
y en los ttulos de anticuerpos sricos (15).
El extracto acuoso reduce significativamente la inmovilidad y aumenta el nado sin afectar la
conducta escalatoria en el modelo del nado forzado en rata a dosis de 10 mg/kg/da,
demostrndose as la actividad antidepresiva (16).
8.2

Datos de seguridad clnica

8.2.1 Toxicidad aguda: La infusin no es txica hasta 50 g/Kg (6). Popularmente se le atribuye
propiedad abortiva. La DL50 de los extractos con actividad espasmoltica por va oral es mayor
a 100 mg/Kg de peso. El extracto alcohlico provoca en algunas personas sntomas
cardiovasculares. El -tertienilo puede ser fototxico en presencia de la luz ultravioleta
cercana y producir una fotodermatitis por un mecanismo que no depende de la peroxidacin
lipdica de membrana (4).
VI. REFERENCIAS:
1.
2.

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115

Cav. en

3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.

12.
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15.

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Ethnopharmacology 120, 271-281.

116

Anexo 13. Resumen y resultados del Seminario Determinacin y cuantificacin de la


actividad antioxidante de especies nativas y su posible fuente para el desarrollo de
nutricuticos
El Seminario de Tesis fue realizado por los estudiantes Dina Crdova, Roxana Dardn,
Emilio Gonzlez y Mara Cristina Menndez de la Escuela de Qumica Farmacutica,
asesorados por M.A. Sully M. Cruz y presentado el 24 de junio de 2009.
Tuvo como objetivo determinar y cuantificar la actividad antioxidante presentada por
extractos secos de 12 especies nativas de Guatemala, y realizar el tamizaje fitoqumico de
los metabolitos secundarios de cada extracto. Las plantas fueron colectadas en diferentes
puntos del pas (Tabla 1, Figura 1), y posteriormente se sometieron a pruebas
fisicoqumicas para evaluar la calidad de la materia vegetal. Se realiz el proceso de
extraccin por medio de percolacin o maceracin, de acuerdo a la parte estudiada. Se
utiliz etanol a diferentes concentraciones como disolvente, dicha concentracin fue
determinada de acuerdo al ensayo de slidos totales. Se realiz el respectivo tamizaje
fitoqumico para evaluar la presencia de metabolitos secundarios que se relacionan con la
actividad antioxidante (flavonoides, antocianinas, taninos, cumarinas, aceites voltiles y
antraquinonas), as como se determin la TDAC por TLC en donde se evidenci la
intensidad de decoloracin provocada por sustancias antioxidantes sobre el revelador.
Tabla 1. Recoleccin de material vegetal e identificacin botnica
Nombre cientfico

Nombre
comn

Parte
utilizada

Annona cherimolla

Anona

Fruto

Annona purpurea

Anona

Fruto

Annona reticulata

Anona

Fruto

Chamaedorea
tepejilote

Pacaya

Inflorescencia

Cucurbita pepo

Gicoy

Fruto

Lippia graveolens

Organo

Hojas

Neurolaena lobata

Tres Puntas

Hojas

Ocimum micranthum

Albahaca de
Monte

Hojas

Phlebodium
pseudoaureum

Calahuala

Hojas

Pimenta dioica

Pimienta
gorda

Fruto

Smilax domingensis

Zarzaparrilla

Hojas

Yucca elephantipes

Izote

Inflorescencia

Fuente: Datos Experimentales

Coordenadas
geogrficas

Nmero de
Herbario*

Lat. 1436'9.72'' N
Long. 9040'12.47'' O

1013

Procedencia
San Bartolom
Milpas Altas
Sacatepquez
Samayac,
Suchitepquez
Asuncin Mita,
Jutiapa
Salam, Baja
Verapaz
San Juan,
Sacatepquez
Samayac,
Suchitepquez
Samayac,
Suchitepquez
Samayac,
Suchitepquez
San Jos
Pinula,
Guatemala
Salam, Baja
Verapaz
Samayac,
Suchitepquez
San Juan,
Sacatepquez

Lat. 1433'49.3'' N
Long. 9127'28.2'' WO
Lat. 1419'58'' N
Long. 8942'34'' WO
Lat. 1506'05'' N
Long. 9019'7'' O
Lat. 1443'09'' N
Long. 9038'25'' O
Lat. 1433'05'' N
Long. 9128'15'' WO
Lat. 1433'37'' N
Long. 9128'17'' WO
Lat. 1433'07'' N
Long. 9127'14'' WO

1047

Lat. 1432'41.5'' N
Long. 9024'47.4'' O

1039

Lat. 1506'10'' N
Long. 9019'30'' O
Lat. 1433'37'' N
Long. 9128'15'' WO
Lat. 1443'14.1'' N
Long. 9038'34.53'' O

* Herbario del Laboratorio de Productos Naturales Farmaya S.A.

117

1052
1051
1045

1083
482
723

1050
662
1046

Figura 1. Fotografas de las especies vegetales involucradas en la investigacin

Annona cherimolla

Lippia graveolens

Neurolaena lobata

Chamaedorea tepejilote

Annona purpurea

Pimenta dioica

Phlebodium pseudoaureum

Yucca elephantipes

118

Annona reticulata

Ocimum micranthum

Smilax domingensis

Cucurbita pepo

Los anlisis de cuantificacin realizados para evaluar la capacidad antioxidante fueron,


el contenido de fenoles totales por el reactivo Folin Ciocalteu y la TDAC por medio del
reactivo de DPPH, tanto en tcnica macromtrica como micromtrica. El segundo mtodo
determina la TDAC basada en la capacidad de las sustancias antioxidantes de secuestrar
radicales libres por el reactivo de DPPH.
El mejor disolvente de extraccin fue de 95% para tres especies, 70% para dos
especies y 50% para tres especies (Tabla 2). El mayor rendimiento de extraccin fue
Pimenta dioica (24.3%).
Tabla 2. Pruebas fisicoqumicas realizadas en la materia vegetal
Nombre cientfico
Annona cherimolla
Annona purpurea
Annona reticulata
Chamaedorea tepejilote
Cucurbita pepo
Lippia graveolens
Neurolaena lobata
Ocimum micranthum
Phlebodium pseudoaureum
Pimenta dioica
Smilax domingensis
Yucca elephantipes

Humedad
(%)1
N/A
N/A
N/A
7.93
N/A
5.45
5.87
8.43
6.25
7.35
8.50
6.75

Cenizas
totales (%)2
N/A
N/A
N/A
3.56
N/A
4.46
3.76
4.86
3.40
4.30
4.45
4.78

Prueba de mejor disolvente


Slidos totales
Mejor solvente de
(%)
extraccin
N/A
Etanol 95%
N/A
Etanol 95%
N/A
Etanol 95%
1.67
Etanol 95%
N/A
Etanol 95%
2.56
Etanol 95%
0.49
Etanol 70%
2.06
Etanol 95%
1.78
Etanol 50%
2.45
Etanol 50%
3.45
Etanol 70%
4.84
Etanol 50%

* Fuente: Datos Experimentales 1 Valores aceptables de humedad: <10 %. N/A: no aplica 2 Valores aceptables de cenizas totales: < 5 %.

Smilax domingensis, Pimenta dioica y Phlebodium pseudoaureum fueron las especie


que presentaron la mayora de grupos qumicos clasificados como grupos fenlicos
(flavonoides y antocianinas, taninos, aceites voltiles y antraquinonas), y por lo tanto las
que presentan mayor actividad antioxidante (Table 3), tanto en ensayos macromtricos
como micromtricos (Figura 2), y son las especies ms promisorias para ser utilizadas
como fuente para el desarrollo de nutricuticos de acuerdo a los resultados de actividad
antioxidante.
Cucurbita pepo, Annona purpurea y Annona cherimolla presentaron menor contenido
de compuestos fenlicos en el ensayo de cuantificacin de fenoles totales y menor
actividad antioxidante total, tanto en ensayos macromtricos como micromtricos. En
ambos ensayos los extractos macerados de las frutas evaluadas no presentaron una
actividad antioxidante significativa.

119

Tabla 3. Resultados de tamizaje fitoqumico y determinacin de actividad antioxidante


Determinacin de Actividad Antioxidante
Antraquinonas
(CCF)

Flavonoides y
Antocianinas
(CCF)
Taninos
(Ensayo
Macromtrico)
Aceites
voltiles
(CCF)
Cumarinas
(CCF)

Tamizaje Fitoqumico
Actividad
antioxidante
por TLC
Intensidad

Smilax domingensis

+++

Pimenta dioica

++

Phlebodium pseudoaureum

++

Ocimum micranthum

Lippia graveolens

Neurolaena lobata

Yucca elephantipes

Chamaedorea tepejilote

Annona reticulata

Annona cherimolla

Annona purpurea

Cucurbita pepo

Determinacin de Fenoles Totales


Ensayo
macromtrico
g Eq. de cido
glico/g de
extracto seco
287.7790
3.7047
152.5086
2.6528
119.1882
1.4559
55.6269
1.4916
55.3112
1.0619
47.5177
5.1141
33.4626
0.7642
30.0294
0.8269
20.1598
0.8641
12.3034
0.4721
11.0343
4.3120
9.2649 3.4507

*Fuente: Datos Experimentales

Ensayo
micromtrico
g Eq. de cido
glico/g de
extracto seco
184.2921
0.4170
75.8995
0.1572
74.2898
0.6542
33.8389
0.0685
28.5436
0.0342
28.1131
0.0785
15.5431
0.1031
13.4067
0.0836
11.0933
0.3737
9.3812 1.7969
7.5726 0.6534
4.3455 1.6820

Promedio +
Promedio +
desviacin
desviacin
estndar
estndar
Valor de p:=1.40 E-17

120

TDAC usando DPPH


Ensayo
macromtrico

Ensayo
micromtrico

mg de extracto
seco

mg de extracto
seco

0.0158
0.0085 0.0005
0.0001
0.0160
0.0158 0.0003
0.0001
0.0516
0.0406 0.0021
0.0004
0.1253
0.1213 0.0028
0.0022
0.1369
0.1277 0.0036
0.0011
0.2679
0.1615 0.0154
0.0083
1.0005
1.0332 0.0104
0.0260
1.1553
1.1620 0.0190
0.0194
2.2261
2.1333 0.0203
0.0248
4.8637
4.4265 0.1774
0.1847
5.0862
5.0881 0.2925
0.2924
7.5350
7.5351 0.2335
0.2335
Promedio +
Promedio +
desviacin
desviacin
estndar
estndar
Valor de p= 8.26 E-9

Figura 2. Grficas que muestran la actividad antioxidante de las especies


Contenido de fenoles totales en g equivalentes de cido glico/g de extracto seco.
Grfica 1: Mtodo macromtrico
Grfica 2: Mtodo micromtrico

TDAC (macromtrico) en mg de extracto seco necesario para inhibir 50 % del reactivo de DPPH.
Grfica 3: Especies con mayor actividad
Grfica 4: Especies con menor actividad

TDAC (micromtrico) en mg de extracto seco necesario para inhibir 50% del Reactivo de DPPH.
Grfica 5: Especies con mayor actividad
Grfica 6: Especies con menor actividad

Guatemala, 21 de diciembre de 2009


f.____________________________
Lic. Armando Cceres Estrada
Investigador Principal

Vo.Bo. __________________________
Dr. Oscar Cobar Pinto, Decano
Representante Legal Institucin
121

V.1

INFORME FINANCIERO

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