Lineamientos para La Vigilancia Del Diagnostico de La Infeccion Por VIH 2014 PDF

LINEAMIENTOS PARA LA VIGILANCIA DEL
DIAGNSTICO DE LA INFECCIN POR EL VIH/SIDA
DGE-InDRE-RNLSP
2014
P g i n a 1|36
Diagnstico de la infeccin por VIH
PRIMERA EDICIN, 2014
Diagnstico de infeccin por VIH
Este documento fue avalado por los representantes de las instituciones que conforman el
grupo Tcnico Interinstitucional del Comit Nacional de Vigilancia Epidemiolgica
(CoNaVE).
TODOS LOS DERECHOS RESERVADOS CONFORME A LA LEY,

INDRE-SECRETARA DE SALUD
SE PERMITE LA REPRODUCCIN TOTAL O PARCIAL SI SE CITA LA FUENTE:

LINEAMIENTOS PARA LA VIGILANCIA DEL DIAGNSTICO DE LA
INFECCION POR EL VIH/SIDA VERSIN NO. 01. INDRE, 2014.
COLECCIN PUBLICACIONES TCNICAS DEL INDRE:

ISBN: EN PROCESO
Instituto de Diagnstico y Referencia Epidemiolgicos.

Francisco P Miranda 177 bis, Col. Lomas de Plateros Del. lvaro Obregn, C. P. 01480,
Mxico, D. F.
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Tel. (55)53-42-75-50
EDICIN ESTUVO A CARGO DE: DR. JOS ALBERTO DAZ QUIONEZ
EL DISEO ESTUVO A CARGO DE:
IMPRESO EN MXICO. PRINTED IN MEXICO
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SECRETARA DE SALUD
DRA. MERCEDES JUAN LPEZ
SECRETARIA DE SALUD
DR. PABLO KURI MORALES
SUBSECRETARIO DE PREVENCIN Y PROMOCIN DE LA SALUD
DR. CUITLHUAC RUZ MATUS
DIRECTOR GENERAL DE EPIDEMIOLOGA
DRA. MARA EUGENIA JIMNEZ CORONA
DIRECTORA GENERAL ADJUNTA DE EPIDEMIOLOGA
DR. JOS ALBERTO DAZ QUIONEZ
DIRECTOR GENERAL ADJUNTO DEL INDRE
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INSTITUTO DE DIAGNSTICO Y REFERENCIA EPIDEMIOLGICOS

DR. JOS ALBERTO DAZ QUIONEZ
DIRECTOR GENERAL ADJUNTO
DRA. MA. DEL CARMEN GUZMN BRACHO
DIRECTORA DE DIAGNSTICO Y REFERENCIA
QFB. LUCA HERNNDEZ RIVAS
DIRECTORA DE SERVICIOS Y APOYO TCNICO
LIC. DIANA ALEX FLORES ROMERO
SUBDIRECTORA DE OPERACIN
BIOL. NORMA ANGLICA MONTES COLIMA
JEFA DEL DEPARTAMENTO DE BACTERIOLOGA
QBP. IRMA HERNNDEZ MONROY
ASESORA TCNICA DE LA DIRECCIN
M EN C IRMA LPEZ MARTNEZ
JEFA DEL DEPARTAMENTO DE VIROLOGA
M EN C MAYRA GISELA MELNDEZ HERNNDEZ
JEFA DEL DEPARTAMENTO DE PARASITOLOGA
DRA. CLARA GORODEZKY LAUFERMAN
JEFA DEL DEPARTAMENTO DE INMUNOLOGA
M EN C JUDITH ESTVEZ RAMREZ
JEFA DEL DEPARTAMENTO DE CONTROL DE MUESTRAS Y SERVICIOS
DR. JOS ERNESTO RAMREZ GONZLEZ
JEFE DEL DEPARTAMENTO DE BIOLOGA MOLECULAR Y VALIDACIN DE PRUEBAS
QFB. ROBERTO VZQUEZ CAMPUZANO
JEFE DEL DEPARTAMENTO DE ENFERMEDADES EMERGENTES Y URGENCIAS
BIOL. ELVIRA MAYEN PIMENTEL
JEFA DEL LABORATORIO DE VIH
P g i n a 4|36
AUTOR
BIOL. ELVIRA MAYEN PIMENTEL
JEFA DEL LABORATORIO DE VIH
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LINEAMIENTOS PARA LA
VIGILANCIA DEL DIAGNSTICO DE
LA INFECCIN POR EL VIH/SIDA
DGE-InDRERNLSP
2014
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Contenido
INTRODUCCIN .............................................................................................................. 8
ANTECEDENTES DEL LABORATORIO DE VIH/ETS ......................................... 10
EL MARCO LEGAL DEL LABORATORIO ............................................................... 11
OBJETIVOS........................................................................................................................ 12
Objetivo general................................................................................................................ 12
Objetivos especficos ......................................................................................................... 12
ORGANIZACIN DE LA RED NACIONAL DE LABORATORIOS PARA EL
DIAGNSTICO DE VIH ................................................................................................ 13
FUNCIONES DEL LABORATORIO CENTRAL DE REFERENCIA (INDRE)
RGANO RECTOR ......................................................................................................... 13
FUNCIONES DE LOS LABORATORIOS ESTATALES (LESP)............................. 14
FUNCIONES DE LOS LABORATORIOS A NIVEL LOCAL .................................. 15
DEFINICIN OPERACIONAL DE CASO ................................................................. 15
TOMA MANEJO Y ENVO DE MUESTRAS .............................................................. 18
ALGORITMO DE DIAGNSTICO PARA LA DETERMINACIN DE LA
INFECCIN POR EL VIH-1 .......................................................................................... 20
INMUNODIAGNSTICO .............................................................................................. 20
ESTNDARES DE CALIDAD ....................................................................................... 31
PROGRAMA DE EVALUACIN EXTERNA DEL DESEMPEO (PEED) VIH 31
BIBLIOGRAFA ................................................................................................................ 35
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INTRODUCCIN
En los ltimos diez aos, el panorama de las epidemias nacionales de Virus de la
Inmunodeficiencia Humana (VIH) ha presentado una variacin drstica, favorable en la
mayora de los pases, en particular en frica subsahariana. Los pases estn logrando
avances histricos para poner fin a la epidemia de Sndrome de Inmunodeficiencia
Adquirida (SIDA): en 2011, se registraron en el mundo 700,000 casos menos de nuevas
infecciones por el VIH que en el 2001.
Los datos ms recientes indican que se ha logrado una reduccin del 50% en la tasa de
nuevas infecciones por el VIH en 25 pases de ingresos bajos y medianos entre 2001 y 2011.
Ms de la mitad de esos pases se encuentran en frica subsahariana, donde se registra la
mayora de las nuevas infecciones por el VIH. En otros nueve pases, la tasa de nuevas
infecciones por el VIH disminuy de forma considerable: al menos un tercio entre 2001 y
2011.
VIH/SIDA en Mxico
Las estimaciones ms recientes realizadas por el ONUSIDA y el CENSIDA, sealan
tendencias alentadoras para Mxico, ya que durante los ltimos aos se muestra un
comportamiento prcticamente estable de la prevalencia de VIH, mismo que pudiera
conservarse los prximos aos. Para el ao 2011, la prevalencia de infeccin por VIH en
poblacin adulta del pas de 15 a 49 aos, era de 0.24%, lo que implic que para finales del
2011 se estim que en Mxico haban cerca de 147,137 personas viviendo con VIH de este
rango de edad. Mientras que el total de personas viviendo con VIH de todas las edades fue
de 179,478.
Hasta el da de hoy, la epidemia del VIH/SIDA contina concentrada en el pas dentro de
las poblaciones de HSH, las personas que se dedican al trabajo sexual (PTS), especialmente
HTS; as como en las personas que usan drogas inyectables, cuestin que refleja que se ha
podido contener con xito una generalizacin de la epidemia; sin embargo, con base en la
evidencia actual de prevalencias de VIH en estos grupos, la prevencin focalizada deber
continuar siendo los prximos aos un pilar fundamental de la respuesta a esta epidemia,
para reducir las nuevas infecciones en estos grupos poblacionales, as como en otros grupos
vulnerables.
Diagnstico
A nivel mundial, en 1985 se desarrollaron las primeras pruebas para detectar anticuerpos
contra VIH y se comenzaron a utilizar en los productos sanguneos en EEUU y Japn. En
la actualidad, se usan de modo rutinario en los laboratorios de microbiologa clnica y en los
bancos de sangre o centros de transfusiones en varios pases del mundo. La prueba ELISA
(Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay- Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas), ha
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sido el ms utilizado para la deteccin de anticuerpos anti-VIH que el organismo genera

como respuesta a la infeccin.
Las pruebas para deteccin de anticuerpos contra el VIH se divide en: pruebas de tamizaje o
presuntivas, las cuales poseen una alta sensibilidad y buena especificidad, y las pruebas
confirmatorias, cuya caracterstica es la alta especificidad.
Las pruebas para la deteccin de anticuerpos pueden clasificarse de la siguiente manera,
segn su generacin: pruebas de primera generacin, que usan lisados virales como antgeno
y que se acompaan de alta frecuencia de falsos positivos; pruebas de segunda generacin,
que usan protenas recombinantes del VIH, pptidos sintticos o ambos como antgenos;
pruebas de tercera generacin, que usan pptido/protena recombinantes; y pruebas de
cuarta generacin, que se basan en la deteccin simultnea de anticuerpos y complejos
inmunes antgeno P24/anticuerpo y tienen una alta sensibilidad y especificidad.
Los tamizajes para VIH son altamente sensibles, detectan mnimas cantidades de
anticuerpos, por lo que pequeas interferencias de sustancias similares podran conducir a
un resultado falso positivo, cuya probabilidad es mayor cuando ms baja es la prevalencia del
VIH en la poblacin estudiada. Por ello, es obligatorio que los exmenes con resultados
positivos sean repetidos para reafirmar la positividad. Cuando la positividad se repite, se
confirman los resultados con otras tcnicas de alta especificidad, usualmente con tcnicas de
inmunoblot o Inmunofluorescencia indirecta (IFI). Adems, se debe solicitar una segunda
muestra de sangre para confirmar la identidad del paciente y evitar posibles equivocaciones
en la manipulacin de las muestras de sangre o suero que conduzcan a confusin de los
resultados de una persona y otra.
Internacionalmente se ha establecido un periodo de 3 meses despus de adquirido el virus
como periodo de tiempo en que la mayora de las personas desarrollan anticuerpos antiVIH
detectables por el examen. A este tiempo se le denomina perodo de ventana y es el que
transcurre desde que una persona adquiere el VIH hasta que el organismo crea los
anticuerpos, suficientes para ser detectados por el examen.
El presente documento establece los lineamientos de operacin para la vigilancia basada en
el laboratorio de la infeccin por VIH, incluyendo las funciones por niveles; la toma,
manejo y envo de muestras; la metodologa para el anlisis de muestras (mtodos
convencionales); evaluacin del desempeo as como los estndares de calidad.
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ANTECEDENTES DEL LABORATORIO DE VIH/ETS

El laboratorio de Enfermedades de Transmisin Sexual (ETS) se cre en el ao de 1985 en
las instalaciones del entonces llamado Instituto de Salubridad y Enfermedades Tropicales
(ISET), en respuesta a la necesidad de crear un laboratorio dedicado al diagnstico y
control de las enfermedades transmitidas sexualmente (ETS). Inicialmente el laboratorio
solo realizaba el diagnstico para algunas de las llamadas ETS clsicas como son la sfilis y
la gonorrea. En el ao de 1987 debido a la epidemia originada por la infeccin por el virus
de la inmunodeficiencia humana (VIH), se incluyeron los mtodos de diagnstico
presuntivo y confirmatorio para la deteccin de la infeccin.
En el ao de 1997 el laboratorio de ETS dependiente del Instituto Nacional de
Diagnstico y Referencia Epidemiolgicos (InDRE) se convirti en el departamento de
VIH y otras ETS, en ese mismo ao el laboratorio de VIH del InDRE se estableci como
Laboratorio Nacional de Referencia que realizaba la confirmacin de los diagnsticos
efectuados por los Laboratorios Estatales de Salud Pblica (LESP), laboratorios
pertenecientes a hospitales o clnicas, Servicios Coordinados de Salud, Centros Estatales de
la Transfusin Sangunea, Centros de Salud en el D.F. y otras dependencias como el
Instituto Mexicano del Seguro Social (IMSS), Instituto de Seguridad y Servicios Sociales
(ISSSTE), Ejrcito, Marina, Pemex, etc. Por otra parte se han ofrecido a los LESP cursos
de capacitacin, capacitaciones en servicio, supervisiones y asesoras.
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Figura 1. Se muestra la distribucin de la RNLSP para el inmunodiagnstico por laboratorio de

VIH, actualizado al ao 2010. Pruebas realizadas en la RNLSP para VIH, en negro se sealan los
estados que no participan en la red, en rojo los que realizan una prueba, en amarillo dos pruebas y en
verde los que realizan tres.
EL MARCO LEGAL DEL LABORATORIO

1. Ley General de Salud, Mxico. Nueva Ley publicada en el Diario Oficial de la
Federacin el 7 de febrero de 1984. ltima reforma publicada DOF 07/06/2012.
2. Reglamento Interior de la Secretaria de Salud. Mxico. Publicado en el Diario
Oficial de la Federacin el 19 de enero de 2004. ltima reforma publicada en el
DOF del 10 de enero de 2011
a. Reforma aplicable: DECRETO que reforma, adiciona y deroga diversas
disposiciones del Reglamento Interior de la Secretara de Salud. DOF 2 de
febrero de 2010.
3. Norma Oficial Mexicana NOM-017-SSA2-2012, Para la vigilancia epidemiolgica,
publicada en el Diario Oficial de la Federacin el 19 de febrero de 2013.
http://dof.gob.mx/nota_detalle.php?codigo=5288225&fecha=19/02/2013.
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4. Secretara de Salud. Programa Sectorial de Salud 2013-2018. Diario Oficial de la

Federacin DOF: 12/12/2013.
5. Plan Nacional de Desarrollo 2013-2018. Diario Oficial de la Federacin, DOF:
20/05/2013, www.dof.gob.mx
6. Secretara de Salud. Programa de Accin Especfico 2007-2012. Sistema Nacional
de Vigilancia Epidemiolgica, primera edicin 2008.
7. Norma Oficial Mexicana NOM-010-SSA2-1993, para la Prevencin y Control de
la infeccin por virus de la inmunodeficiencia humana.
8. Norma Oficial Mexicana NOM-003-SSA2-1993, para la Disposicin de Sangre
Humana y sus Componentes con fines Teraputicos.
9. Norma Oficial Mexicana NOM-166-SSA1-1997, para la Organizacin y
Funcionamiento de los Laboratorios Clnicos.
10. Norma Oficial Mexicana NOM-087- ECOL-SSA1-2002, proteccin AmbientalSalud Ambiental-Residuos Biolgico Infeccioso-clasificacin y especificaciones de
manejo.
OBJETIVOS
Objetivo general
Generar informacin bsica para apoyar las actividades del programa de enfermedades de
transmisin sexual y promover la cooperacin entre la red, para la realizacin del
diagnstico de VIH.
Objetivos especficos
1. Generar informacin oportuna y confiable, mediante la utilizacin del algoritmo de
diagnstico para la infeccin por el VIH.
2. Generar servicios de diagnstico confiables y de calidad, mediante la participacin
en el programa de evaluacin externa del desempeo (PEED).
3. Incrementar el desempeo tcnico de los recursos humanos de la RNLSP mediante
la capacitacin continua y especfica a las necesidades particulares de cada
laboratorio.
4. Demostrar la competencia tcnica, fomentando la cultura de calidad y mejora
continua de los procesos.
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ORGANIZACIN DE LA RED NACIONAL DE LABORATORIOS PARA EL

DIAGNSTICO DE VIH
Est constituida por tres niveles: nacional, estatal y local. El nivel nacional est representado
por el laboratorio de VIH localizado en el InDRE, el nivel estatal est constituido por los
LESP, los cuales son uno por cada entidad federativa de la Republica Mexicana. El nivel
local est integrado por los laboratorios ubicados en los centros de salud, en hospitales
generales o regionales y en las cabeceras jurisdiccionales. En cada estado puede haber tantos
laboratorios locales como sean necesarios para resolver las necesidades de diagnstico en
apoyo a la vigilancia epidemiolgica y a las actividades de salud pblica de cada uno de los
estados. Los laboratorios de nivel local apoyan el diagnstico de enfermedades de
importancia epidemiolgica y se integran en redes especficas de diagnstico. La
coordinacin de la RNLSP la efecta el InDRE, que interacciona con los LESP, y stos a
su vez, son los enlaces funcionales entre los laboratorios del nivel local y el InDRE. Los
laboratorios de apoyo al Sistema Nacional de Vigilancia Epidemiolgica (SINAVE) se
deben coordinar con los de la RNLSP en el nivel correspondiente. En la figura 1 se muestra
la distribucin de LESP de la red de diagnstico de la infeccin VIH.
FUNCIONES DEL LABORATORIO CENTRAL DE REFERENCIA (InDRE)

rgano rector
El laboratorio de VIH es el de referencia nacional para los laboratorios del SINAVE y es el
rgano normativo para el diagnstico de la infeccin por el virus de la inmunodeficiencia
humana (VIH). Sus funciones son:
Efectuar la determinacin serolgica de anticuerpos para el diagnstico de la infeccin

por VIH.
Consolidar el algoritmo de referencia y los criterios de interpretacin de los
resultados.
Realizar las pruebas de control de calidad en el diagnstico serolgico, a toda la
RNLSP. Una parte del control de calidad de la red se realiza con el total de las
muestras biolgicas positivas y el 10% de las negativas.
Transferir la tecnologa estandarizada a todos los laboratorios que integran la red
nacional.
Verificar las caractersticas operativas de los estuches comerciales, como apoyo para la
seleccin de los estuches y reactivos de la RNLSP.
Preparar y enviar los paneles de eficiencia a todos los LESP participantes.
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Capacitar en servicio al personal de la red que se dedica al diagnstico de la infeccin

por VIH, con la finalidad de que estos recursos humanos capacitados presten un
servicio eficiente y de calidad.
Implementar y adecuar las nuevas tecnologas de diagnstico en apoyo al algoritmo de
referencia.
Desarrollar investigacin aplicada en apoyo a la vigilancia epidemiolgica.
Generar informacin de orden nacional la cual se integrar al informe nacional.
Realizar la funcin de rector de la RNLSP en materia de diagnstico, investigacin y

desarrollo tecnolgico, en la vigilancia epidemiolgica, con la finalidad de tomar
decisiones en el control de la enfermedad que incidan en la formulacin y orientacin
del programa nacional de salud.
FUNCIONES DE LOS LABORATORIOS ESTATALES (LESP)

Participar en las actividades de vigilancia epidemiolgica mediante la realizacin de
las pruebas de diagnstico con estuches comerciales verificados o metodologa
estandarizada en el laboratorio de VIH del InDRE, en donde el personal de los
LESP han recibido capacitacin.
Proporcionar a otras instituciones de salud los formatos y lineamientos establecidos
en el InDRE para la toma y envo de muestras al LESP, y as poder garantizar una
muestra de calidad para el LESP correspondiente.
Referir muestras al InDRE para la realizacin de pruebas generales, especializadas y
de referencia, as como para control de calidad.
Referir al InDRE en cantidad suficiente el 100% de las muestras positivas, y el 10%
de las muestras negativas que son utilizadas para el control de calidad y la
conformacin del banco de sueros.
Proporcionar supervisin y asesora a los laboratorios locales correspondientes.
Promover la utilizacin adecuada de las pruebas de diagnstico y la interpretacin de
los resultados mediante la capacitacin realizada en el curso impartido por el
InDRE, con el compromiso de que esta sea dinmica y de acuerdo a las tendencias y
necesidades de la RNLSP.
Asegurar la estabilidad y la confiabilidad del diagnstico de VIH mediante la
implementacin de un programa de control de calidad, as como la participacin en
el programa a travs de los PEED, dos veces por ao.
Capacitar a los integrantes de la red estatal de laboratorios en el diagnstico de la
infeccin por el VIH.
Elaborar y llevar a cabo los programas operativos y de control de calidad en los
laboratorios locales para el diagnstico de la infeccin por el VIH.
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Participar en la elaboracin y actualizacin de los manuales tcnicos referentes al

diagnstico y temas especializados (bioseguridad, manejo de residuos peligrosos
biolgico-infecciosos, etc.) para su uso en el mbito estatal y local.
FUNCIONES DE LOS LABORATORIOS A NIVEL LOCAL

Realizar las pruebas mnimas para diagnstico de la infeccin por el VIH, que
requieren nicamente de equipo bsico de laboratorio (ELISA o pruebas rpidas).
Referir muestras al LESP de su entidad para control de calidad y para la realizacin
de las pruebas generales y especializadas o de referencia que no se realicen en el
laboratorio local.
Notificar al rgano normativo jurisdiccional correspondiente los casos de VIH
confirmados y/o indeterminados para su correspondiente seguimiento.
Cumplir con el programa de control de calidad que establece el LESP
correspondiente.
DEFINICIN OPERACIONAL DE CASO

Se considera como una persona seropositiva a VIH:
Aqulla que presente dos resultados de pruebas de tamizaje de anticuerpos positivos
y prueba suplementaria positiva, incluyendo personas asintomticas que nieguen
prcticas de riesgo.
No se considera a la persona como infectada si:
Slo una de las pruebas de tamizaje realizadas result positiva, o
Tiene dos resultados de pruebas de tamizaje positivas, pero la prueba suplementaria
es negativa.
En el caso de presentar dos resultados de pruebas de tamizaje positivos, pero la
prueba suplementaria indeterminada, deber considerarse como posiblemente
infectado y as se informar, recomendndose repetir las pruebas de laboratorio
(pruebas de tamizaje y confirmatoria) cada tres meses y al cabo de doce meses un
resultado repetidamente indeterminado se considerar como negativo.
Estado de la infeccin por VIH en nios menores de 18 meses
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Las pruebas de tamizaje y suplementaria reactivas no son diagnsticas en este grupo de

edad, debido a la posibilidad de que los anticuerpos presentes sean de origen materno; para
hacer el diagnstico en este grupo se requiere que cumplan con lo siguiente:
Nios menores de 18 meses hijos de madre infectada, que tienen resultados
positivos de cultivo viral, RT-PCR, antgeno p24, prueba de western blot para IgA
o carga viral; o que cumplen con los criterios clnicos del SIDA en menores de 18
meses.
Se considerar que una persona es un caso de SIDA, cuando cumpla la siguiente
definicin:
Sin evidencia de laboratorio de infeccin por VIH, ya que la prueba no se realiz o
sus resultados son indeterminados, y en ausencia de otra causa de inmunosupresin
o inmunodeficiencia y alguno de los siguientes diagnsticos comprobados por
microscopa, histopatologa o cultivo, que son criterios para establecer el diagnstico
de caso de SIDA (vase lista A del cuadro 1).
Cuando las pruebas de laboratorio para VIH son positivas.
Uno o ms de los siguientes diagnsticos comprobados por microscopa o cultivo
(vase lista B del cuadro 1).
Uno o ms de los siguientes diagnsticos realizados de manera presuntiva no
comprobados por microscopa o cultivo (vase lista C del cuadro 1).
Asimismo, se considerar caso de SIDA a toda persona con infeccin por el VIH
que presente un recuento de linfocitos T CD4 = o <200 clulas/L,
independientemente de que presente o no los sntomas de una o varias
enfermedades oportunista.
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Cuadro 1. Categoras clnicas por enfermedades asociadas al SIDA, segn circunstancia del
diagnstico.
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TOMA MANEJO Y ENVO DE MUESTRAS

Es importante una correcta identificacin de la muestra, cada una de ellas, debe estar
rotulada de la siguiente forma.
1. Clave o nombre (cuando se trata de nios infectados por transmisin vertical o
neonatal.)
2. Fecha de extraccin de la muestra
3. Edad
4. Gnero
5. Otro dato segn sea el caso
La muestra de suero o plasma (ver cuadro 2 y 3) en volumen apropiado (mnimo de 1 mL),
deber de acompaarse del formato REMU-F-12, del resumen de historia clnica y de la
solicitud de estudio.
La falta de alguno de estos documentos causar rechazo. Se notificar al usuario y contar
con un periodo de 7 das para enviar la contestacin del documento enviado, de no ocurrir
as se rechazar la muestra definitivamente.
La muestra no deber estar contaminada o contener alguna sustancia que interfiera
con las pruebas y ocasione un resultado errneo. Si llegar a suceder, la muestra ser
rechazada de manera definitiva y se notificar al usuario va Fax.
El diagnstico serolgico de VIH seguir el algoritmo. Los resultados sern
emitidos para diagnstico en 9 das, para referencia en 9 das y para control de
calidad en 4 das.
En casos especiales, si la muestra no cumple con los criterios de calidad biolgica
pero el usuario considera que es de alto valor, debe notificarlo al laboratorio de VIH
por escrito en la solicitud o formato y aceptar que el resultado debe ser interpretado
con cautela, quedando el laboratorio del InDRE libre de toda responsabilidad legal
que corresponda a la emisin de dicho resultado.
El envo de las muestras debe realizarse a la brevedad posible despus de haberse obtenido
la muestra y no ms de siete das despus de haberse tomado. El tubo con la muestra de
suero o plasma se empaquetar bien en un recipiente con doble cubierta y cerrado
hermtico, envindose de inmediato; protegida de la luz solar y del calor excesivo, as como
mantenida a temperatura entre 2 a 8 C, en el caso de utilizar refrigerantes estos no deben
de estar en contacto directo con la muestra. En el caso de las dependencias de la Secretara
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de Salud, la muestra se enva al LESP correspondiente. Para otras instituciones el envo se

efectuar de acuerdo con los procedimientos que determine el nivel estatal o federal.
En el caso de envi al InDRE se cuenta con los lineamientos y el instructivo para la toma y
envo de muestras biolgicas para diagnstico y control de calidad que se localizan en las
siguientes direcciones electrnicas:
http://www.cenavece.salud.gob.mx/indre/interior/intd_manuales.html
http://www.cenavece.salud.gob.mx/indre/interior/tomayrecepcion.html
Cuadro 2. Toma y manejo de muestras clnicas
Infeccin por VIH, fase inicial de la infeccin asintomtica o sintomtica
Tipo
Suero o plasma
N de muestras y cantidad Una muestra de 1 mL de suero o plasma
Momento de recoleccin
Al momento de la sospecha, con un ayuno mnimo de 8 horas
Contenedor
Tubo de plstico hermticamente cerrado y rotulado
Conservacin
Conservar a temperatura de 2 a 8 C en refrigeracin o a -24
C en congelador
Transporte
Enviar con refrigerante a una temperatura entre 2 a 8 C
Observacin
Referir al laboratorio estatal
Tipo de
muestra
Suero
Plasma
Cuadro 3. Tcnicas inmunoserolgicas

Mtodo
Medio/contenedor
Tiempo
/forma de envo
En ayunas por
Enviar un mililitro Al momento
venopuncin
a temperatura
de la sospecha
en tubos sin
entre 2 a 8 C
anticoagulante
En ayunas por
1 mL enviar o
Al momento
venopuncin con
refrigerante de 2 a de la sospecha
anticoagulante:
8 C
y en ayuno
EDTA o heparina
Tcnica
ELISA para Ac.
ELISA para
Ac/Ag
confirmatoria WB
ELISA para Ac.
ELISA para
Ag/Ac
confirmatoria WB
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ALGORITMO DE DIAGNSTICO PARA LA DETERMINACIN DE LA

INFECCIN POR EL VIH-1
Desde el momento en que el VIH penetra al organismo empieza a proliferar en forma
continua, se pueden distinguir tres fases evolutivas de la infeccin: la fase inicial que se
conoce como precoz o aguda, la fase intermedia crnica y la fase final de crisis o de SIDA.
La destruccin de los linfocitos CD4 producir una inmunosupresin severa que favorece la
aparicin de la mayora de las infecciones oportunistas.
La fase inicial, independientemente de su mecanismo de transmisin, puede guardar
relacin con la dosis infectante, la virulencia de la cepa del VIH y la capacidad de respuesta
del sujeto. El VIH se disemina e invade muchos tejidos, especialmente el tejido linfoide y
los ganglios linfticos. El paciente puede o no tener sintomatologa; por lo general existe un
cuadro de sndrome mononuclesico al que no se le presta demasiada atencin. A las 2 a 6
semanas del contagio se detecta el antgeno del VIH (antgeno p24), el cultivo viral se torna
positivo y existen muchos linfocitos CD4 infectados; progresivamente van apareciendo los
anticuerpos circulantes entre 4 a 12 semanas y la inmunidad celular y el antgeno p24
desaparecen.
Fase crnica, tiene una duracin variable estimada en aos y en ella persiste la proliferacin
viral, aunque a baja concentracin. Se estima que uno de cada 10,000 linfocitos CD4
circulantes estara infectado, pero solo en el 10% de ellos existir replicacin y los pacientes
suelen ser asintomticos. Aunque existen variaciones individuales, se estima que en 10 aos
el 50% de los adultos y el 80% de los nios habrn evolucionado a estadios ms avanzados,
aunque la evolucin de la enfermedad puede verse afectado por otros factores.
Fase final, se caracteriza por un incremento en la replicacin del VIH, que podra
producirse en 1 de cada 10 linfocitos CD4 y que se asocia clnicamente con profundas
alteraciones del estado general del paciente (sndrome de desgaste), la aparicin de
infecciones oportunistas letales, de modo que se dice que el infectado por el VIH tiene
SIDA y el pronstico en cuanto a la sobrevivencia es variable.
INMUNODIAGNSTICO
El inmunodiagnstico se basa en la deteccin de anticuerpos y antgeno del virus de la
inmunodeficiencia humana VIH, por tanto los resultados que se emiten, deben de ser
confiables y con una alta especificidad, para ello es importante seleccionar el o los mtodos
apropiados que se emplean, as como la interpretacin de los resultados.
El diagnstico se realiza en suero o plasma del individuo del cual se obtiene una muestra de
sangre perifrica por venopuncin aproximadamente de 2 a 3 mililitros de sangre total
obtenindose despus de la centrifugacin como mnimo un mililitro de suero o plasma.
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La muestra de suero o plasma, debe mantenerse siempre en refrigeracin entre 2 a 8 C

desde su obtencin hasta la llegada al laboratorio.
La muestra debe venir acompaada del Formato nico de Envo de Muestras (REMU-F12) debidamente requisitado, sin datos alterados o sobre escritos por otro lado, indicar la
gravedad del paciente si es necesario.
Las muestras que no cumplan con los requisitos establecidos en el Manual para la Toma,
Envo de Recepcin de Muestras (REMU-MA-01), sern rechazadas.
Se debe sealar que la muestra para el diagnstico de la infeccin por VIH debe de
etiquetarse con una CLAVE y no con nombre, con la finalidad de guardar la
confidencialidad.
De acuerdo a la Norma Oficial Mexicana NOM-010-SSA-1993, para la vigilancia
epidemiolgica, prevencin y control del VIH/SIDA, las pruebas para descartar o confirmar
un caso probable, en los primeros das de haber iniciado el contacto con el virus de la
inmunodeficiencia humana VIH-1, son el uso de dos pruebas serolgicas presuntivas con
capacidades diferentes y una confirmatoria.
La RNLSP utiliza el formato de ELISA, esta tcnica se basa en la identificacin de los
anticuerpos de la clase IgG, que se encuentran en el suero o plasma de individuos infectados
con el virus de la inmunodeficiencia humana. Las pruebas presuntivas tienen una
sensibilidades del 100% y una especificidad de 99.9% o mayores, sin embargo es necesario
confirmar el resultado positivo con una tcnica altamente sensible.
La prueba confirmatoria es la Inmunoelectrotrasferencia (Western-Blot). El algoritmo de
diagnstico se realiza en un diseo en serie que permite incrementar la especificidad, con
este diseo los resultados falsos negativos son poco probables, el resultado positivo se debe
confirmar por tcnicas especficas como la inmunoelectrotranferencia.
El algoritmo de referencia del laboratorio de VIH utiliza como pruebas presuntivas las
siguientes:
Plataforma automatizada por quimioluminiscencia. Inmunodiagnstico de tercera
generacin, se basa en el principio de puenteo inmunomtrico, los pocillos recubiertos con 4
antgenos recombinantes derivados del VIH-1 core, HIV-1 de envoltura y VIH-2
envoltura, implica una reaccin en dos fases. En la primera fase, los anticuerpos presentes
en la muestra, anti HIV-1, se fijan al antgeno recombinante en los pocillos. En la segunda
fase, se aaden antgenos recombinantes marcados con peroxidasa de rbano picante (HRP)
como conjugado. El conjugado HRP fijado se identifica mediante una reaccin
quimioluminicente. La HRP fijada en el conjugado cataliza la oxidacin del derivado
luminol produciendo luz. El agente de transferencia de electrones (una acetanilida
sustituida) aumenta el nivel de luz producida y prolonga su emisin. Las seales de luz son
P g i n a 21|36
ledas por el sistema automatizado. La cantidad de conjugado HRP fijado es directamente

proporcional a la concentracin de anti-HIV1+2 presente. El uso de estos antgenos
recombinantes mejora la especificidad de la prueba evitando reaccin cruzada con las
protenas de clulas humanas.
El estuche para determinar Ag/Ab. Inmunodiagnstico de cuarta generacin, que permite
reducir el periodo de ventana se basa en el principio de sndwich de un solo paso, los
pocillos estn recubiertos con VIH-1 gp160, pptido VIH-1 ANT70, pptido VIH-2 env
(aminocidos 592-603) y anti VIH-1 p24 y cada pocillo contiene una esfera que es una
mezcla Ag-VIH y de anticuerpos VIH unida a peroxidasa de rbano (HRP) que acta
como conjugado, mientras que la tetrametilbencidina (TMB) y el perxido de hidrogeno
actan como sustrato. Si se detectan anticuerpos VIH-1 y/o VIH-2 en la muestra, se forma
un complejo antgeno de fase solida/anti-VIH/antgeno enzimticamente marcado. Si se
detecta antgeno VIH-1 en la muestra, se forma un complejo anticuerpo de fase
slida/antgeno VIH/anticuerpo enzimticamente marcado. Una vez terminada la prueba,
la coloracin indica la presencia de anticuerpos frente al VIH o de antgenos VIH, mientras
que una coloracin dbil o ausencia indica que no se han detectado anticuerpos o antgenos
de VIH.
Los mtodos en formato de ELISA, requieren de incubadora para mantener una
temperatura constante de 37 C, lavador para microplacas de ELISA, lector para placas
ELISA con filtros de 450 nm y entre 620-650 nm, micropipetas multicanales y uni canal de
volumen variable, adems de todo el material requerido que no est incluido en los estuches
de diagnstico, o bien utilizar un equipo automatizado para placas de ELISA.
Como prueba confirmatoria se utiliza el estuche de Western-Blot, que est diseado para
detectar anticuerpos humanos de la clase IgG anti HIV-1 en suero o plasma mediante
inmunoelectrotransferencia para confirmar una respuesta positiva.
Para la inmunoelectrotransferencia (Western-Blot), se utiliza un agitador basculante,
bomba de vaco y micropipetas de un solo canal, o bien equipo automatizado (Auto-Blot
3000).
Los procedimientos se deben realizar como lo indican los insertos para cumplir con la
validacin de cada corrida. Cabe sealar que el inmunodiagnstico de VIH cuenta con
suero de referencia internacional.
El algoritmo de referencia del InDRE para el diagnstico de la infeccin por el VIH se
deriva del modelo de rbol de decisiones en donde las muestras que ingresan tienen una
probabilidad a priori de ser reactivas o no y depende del servicio solicitado es decir, una
muestra referida para control de calidad se espera tenga mayor certeza diagnstica ya que la
probabilidad a priori de ser reactiva es mayor que en una muestra que es referida para
diagnstico o referencia.
Es importante considerar los mtodos a utilizar, as como el orden de realizacin (serie), el
momento de la toma de muestra y la interpretacin apropiada.
P g i n a 22|36
Los mtodos actualmente validados son: los de ELISA y los parmetros para determinar la
confiabilidad de un mtodo son: sensibilidad (S), especificidad (E) y valor predictivo (VP),
estos ltimos parmetros dependen de la prevalencia de la infeccin.
Los laboratorios de la RNLSP deben tener disponibles al menos dos pruebas de formato
diferente. Estas son seleccionadas de acuerdo a la complejidad del laboratorio, su
infraestructura y la formacin profesional de su personal operativo.
La ejecucin de dos pruebas inmunoserolgicas no garantiza un resultado definitivo, ya que
se pueden presentar algunas situaciones que es necesario conocer y resolver. El valor umbral,
valor crtico o valor de corte, es el punto C en la escala de medicin (densidad ptica o
razn S/Co; en donde S es la densidad ptica de la muestra estudiada y Co es el valor de
corte) que clasifica la muestra como positiva o negativa, este valor proporciona un sentido
simple y prctico para interpretar el resultado: el valor Yi etiqueta al individuo como libre de
la infeccin si Yi < Co, y con la enfermedad si Yi > C. Sin embargo, esta regla de decisin
presenta una regin de incertidumbre o zona gris, en la que los valores no determinan si es
positivo o no y se reportan como no concluyente (resultado indeterminado). La zona de
incertidumbre se determina en absorbancia como C 10%, y de 0.9 a 1.1 para la razn S/Co.
Estos valores estn descritos en el inserto del equipo de diagnstico utilizado. Un ejemplo
de situaciones especiales sera:
Cuadro 4. Algoritmo de tres pruebas interpretacin en serie, resultados esperados y su
interpretacin
MTODO
RESULTADOS
ELISA 1
Positivo
Negativo
Positivo
Negativo
ELISA 2
Positivo
Negativo
Negativo
Positivo
WB
Positivo
Negativo
Indeterminado
Indeterminado
Interpretacin
Positivo
Negativo
Indeterminado
Indeterminado
a. Situacin caso discordante:

Decisin en el laboratorio:
Repetir la prueba con la misma muestra.
Referir a referencia, LESP o InDRE.
Solicitar nueva muestra, en tres meses
Decisin del mdico
P g i n a 23|36
No considerar como infectado
Explicar al paciente que las pruebas de laboratorio tienen limitaciones

analticas.
b. Situacin: caso no concluyente (indeterminado, zona gris):

Los valores de densidad ptica se sitan muy cerca del punto de corte ( 10%), el
resultado no debe considerarse positivo o negativo, se debe reportar como
indeterminado o zona gris.
Decisin en el laboratorio:
Repetir la prueba con la misma muestra
Referir a referencia, LESP o InDRE
Solicitar nueva muestra en tres meses
Decisin del mdico:

No considerar como positivo o negativo
Explicar al paciente que las pruebas serolgicas tienen limitaciones analticas.
Es importante mencionar que las muestras a procesar deben de estar a temperatura

ambiente una vez terminado el uso de las mismas se deben regresar a refrigeracin. Las
muestras se pueden conservar hasta una semana entre 2 a 8 C. En caso de almacenaje
prolongado, las muestras se debern conservarse a menos 20 C. La calidad de la muestra se
puede ver seriamente afectada por contaminacin microbiana o por ciclos de
congelacin/descongelacin, y este hecho se refleja en la produccin de resultados errneos.
Confirma caso resultado positivo: el laboratorio reportar este resultado. En este momento
se da por terminado el algoritmo. NO se realizar ninguna otra prueba.
Negativo: el laboratorio reportar el resultado En este momento se da por terminado el
algoritmo. NO se realizar ninguna otra prueba.
Indeterminado: el laboratorio reportar este resultado. En este momento se da la indicacin
de que se contina el seguimiento y que cada tres meses se toma nueva muestra.
P g i n a 24|36
Nota: Las pruebas que se realicen en muestras de personal con riesgo laboral y que resulten
negativas, este resultado se tomar como basal, y se les dar seguimiento por un ao seis
meses.
Terminado el algoritmo. Para sta prueba se utiliza el equipo automatizado Vitros ECi,
El resultado de la 1 ELISA se calcula como una seal normalizada sobre el valor de corte.
Resultado= Seal de la muestra del test/valor de corte
Un resultado 1.0 indica una muestra reactiva y la posible presencia de anti-HIV 1+2
Un resultado <0.9 indica una muestra no reactiva
Un resultado 0.9 indica una muestra dudosa o en zona gris
Resultado por programa de la 2 ELISA. La placa se coloca al lector, se le pone el programa
para realizar la lectura a 450 nm y 620-700 nm como referencia (longitud de onda doble), se
toma en cuenta el valor de corte, obtenido de la lectura por programa (DO/VC).
Resultados
Calculo por programa
Los clculos los realiza el programa
CN= Absorbancia del control negativo
CP1= Absorbancia del control positivo anti-VIH-1
CP2= Absorbancia del control positivo anti-VIH-2
CP3= Absorbancia del control positivo antgeno VIH-1
Criterios para los valores
CN debe ser <0.250. Eliminar cualquier valor CN >0.250
Determinar el promedio del valor (CNx) de los controles restantes
CN debe ser <= 1.4 CNx. Eliminar cualquier CN > 1.4 CNx y calcular de nuevo el CNx
CN debe ser >= 0.6 CNx. Eliminar cualquier CN<0.6 CNx y calcular de nuevo el CNx
Repetir los pasos 3 y 4 hasta que no se hallen los valores aberrantes.
Validez del anlisis
Un anlisis es vlido si
Quedan ms de la mitad de los controles negativos;
CP1 CNx >= 0.600;
CP2 CNx >=0.600 (si se utiliza)
CP3 CNx >=0.400 (si se utiliza)
Valor del punto de corte
P g i n a 25|36
Si el anlisis es vlido, calcular el valor del punto de corte CNx + 0.100

Una muestra es reactiva si la absorbancia de la muestra es >= al valor del punto de corte.
Una muestra es no reactiva si la absorbancia de la muestra es < al valor del punto de corte.
Calcular el valor del punto de corte:
Punto de corte = CNx + 0.100 = 0.091 + 0.100 = 0.191
Un resultado reactivo indica que la muestra analizada contiene anticuerpos anti-VIH-1,
anti-VIH-2, anti-VIH-1 grupo O y/o antgeno VIH-1 o que contiene un factor de
reaccin inespecfico.
Las muestras obtenidas como reactivas debern ser analizadas por duplicado.
Solo si las muestras resultan de nuevo reactivas en una o ambas pruebas debern ser
consideradas como reactivas a anti-VIH-1 y pasarn a la prueba confirmatoria.
Resultado prueba confirmatoria inmunoelectrotransferencia WB. Validacin, lectura e
interpretacin de los resultados.
La banda de control interno anti-IgG debe estar presente con un color fuerte.
Permite validar la adicin de la muestra, los reactivos, as como el progreso correcto
del procedimiento de prueba. La ausencia o la intensidad dbil de la coloracin de la
banda de control interno anti-IgG indican que la muestra o los reactivos no se
dispensaron o que no se sigui el procedimiento de la prueba.
Control positivo: estn presentes todas las bandas correspondientes a las protenas
virales y la banda control.
Control negativo: no debe aparecer ninguna protena viral y nicamente est
presente la banda control.
Lectura:
La presencia de anticuerpos anti-protenas constituyentes de HIV-1 en las muestras
controladas se demuestra por la aparicin de la coloracin de las bandas especficas (azulprpura). Su posicin corresponde a las masas moleculares de las protenas vricas
enumeradas en el siguiente cuadro:
P g i n a 26|36
DENOMINACIN GENOMA
NATURALEZA
GP 160
ENV
GP 110/120
ENV
P 68/66
P 55
POL
GAG
P 52/51
GP 41
POL
ENV
P 40
GAG
P 34/31
P 24/25
P 18/17
POL
GAG
GAG
Glicoprotena
precursora de GP
110/120 y GP 41
Glicoprotena de
envoltura
Transcriptasa inversa
Precursor de las
protenas del ncleo
Transcriptasa inversa
Glicoprotena
transmembrana
Precursor de las
protenas del ncleo
Endonucleasa
Protena del ncleo
Protena del ncleo
ASPECTO EN LA
INMUNOTRANSFERENCIA
Banda con bordes difusos
Banda con bordes difusos

Banda clara
Doblete
Banda clara
Banda difusa
Banda clara
Banda clara
Banda clara
A veces, un doblete
Interpretacin
INTERPRETACIN
POSITIVO
INDETERMINADO
CRITERIOS OMS*
CRITERIOS CRSS**
2 ENV +/- GAG +/- POL
1 ENV + (1 GAG o POL)
1ENV +/- GAG +/- POL
GAG + POL
GAG +POL
GAG
GAG
POL
POL
ENV
NEGATIVO
Sin bandas
Sin bandas
Bandas no clasificadas
Bandas no clasificadas
*Criterio de la Organizacin Mundial de la Salud
**Criterio Consortium for Retrovirus Serology Standarization
Nota:
Los resultados indeterminados pueden reflejar una de las siguientes alternativas:
seroconversin, infeccin por HIV-2 o reaccin cruzada debida a otros retrovirus.
La contaminacin con un suero positivo puede dar lugar a un perfil positivo o
indeterminado.
El criterio de OMS se utiliza para la lectura de las tiras de Western blot.
P g i n a 27|36
En la RNLSP se utilizan 15 estuche con diferente formato, para el inmunodiagnstico de

VIH que se encuentran distribuidos como se muestra en la figura 2.
ESTUCHES VIH UTILIZADOS EN RNLSP

Western Blot Accutrack
4.9%
Accutrack
Anti-HIV 1 +2 VITROS ECI Ortho
2.4%
2.4%
AxSym Abbott Ag/Ab Combo
4.9%
Beckman Coulter ACCESS
2.4%
Vironostika HIV Uni-Form 11 plus O

14.6%
VIH 1/2 Stat-Pack Chembio

4.9%
BIO RAD Genescreen HIV 1/2
26.8%
UNI-GOLD HIV LICON

2.4%
SFD HIV 1/2 PA. Bio Rad Fujirebio
4.9%
New Lav Blot Bio Rad

7.3%
ImmunoComb II HIV
2.4%
HIV SIEMENS Read Pack
2.4%
Genie II Bio Rad
2.4%
BIO RAD Genescreen HIV 1/2 Versin 2

14.6%
Figura 2. Muestra en porcentaje, los equipos diagnsticos utilizados por la RNLSP para el
inmunodiagnstico por laboratorio para el VIH. El algoritmo para diagnstico de VIH,
detecta anticuerpos frente al virus. Estos se desarrollan en la mayora de las personas entre
los 3 y 6 meses posteriores al momento de la infeccin.
P g i n a 28|36
Tabulador: 1A5520001
Tabulador: 1A5520002
El algoritmo de referencia (InDRE) para el diagnstico de la enfermedad de VIH se realiza

en serie, la muestra de suero o plasma, se pasa a una primera prueba (1 ELISA), despus
de obtener el resultado reactivo, se pasa a una 2 prueba (2 ELISA) y la tercer prueba es la
confirmatoria (Western-Blot), y se realiza en muestras que tienen las dos pruebas tamiz
reactivas, y a las que tienen una de las dos ELISAS reactiva.
El algoritmo para la vigilancia epidemiolgica se diferencia con el de diagnstico, porque en
este no se realiza la prueba confirmatoria.
Los mtodos actualmente validados son: ELISA, Inmunoelectrotransferencia (WB) y
pruebas rpidas. Los parmetros para determinar la confiabilidad de un mtodo son:
Sensibilidad (S), Especificidad (E) y Valor predictivo (VP). Estos ltimos dependen de la
prevalencia de la infeccin.
P g i n a 29|36
Es deseable que en los laboratorios de la RNLSP tengan disponible al menos dos pruebas
de formato diferente. Las pruebas son seleccionadas de acuerdo a la complejidad del
laboratorio, la infraestructura y la formacin profesional de los operativos.
La ejecucin de dos o ms pruebas inmunoserolgicas no garantiza un resultado definitivo,
se pueden presentarse algunas situaciones que es necesario conocer y resolver, por ejemplo:
1ELISA
2ELISA
Western-Blot
Interpretacin
a.
Positivo
Positivo
Positivo
Positivo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Positivo
Negativo
Indeterminado
Indeterminado
Negativo
Positivo
Indeterminado
Indeterminado
Situacin caso discordantes:
Laboratorio:
Referir al laboratorio de referencia, LESP o InDRE
Solicitar nueva muestra en 3 meses
Mdico
No considerar como infectado
Explicar al paciente que las pruebas de laboratorio tienen limitaciones y que se da
seguimiento
b.
Situacin caso no concluyente (indeterminado, zona gris)
Los valores de densidad ptica se sitan muy cerca del punto de corte ( 10%), el resultado
no debe considerarse positivo o negativo, sino indeterminado.
Laboratorio:
Referir al laboratorio de referencia, LESP o InDRE
Solicitar nueva muestra en 3 meses
Mdico
No considerar como positivo o negativo
Explicar al paciente que las pruebas de laboratorio tienen limitaciones analticas
P g i n a 30|36
ESTNDARES DE CALIDAD
El tiempo mximo para el reporte de resultados hasta finalizar con el algoritmo depende del
servicio solicitado: para diagnstico y referencia son 9 das hbiles, para control de calidad
son 4 das hbiles.
Criterios de aceptacin y rechazo

1. La muestra de suero o plasma en volumen apropiado (mnimo de 1 mL) deber
acompaarse del formato REMU-F-12, del resumen de historia clnica y de la
solicitud del estudio.
2. La falta de alguno de estos documentos causa rechazo. Se notificar al usuario y
contar con un periodo de 7 das para enviar la contestacin del documento enviado,
de no ocurrir as se rechazar definitivamente.
3. La muestra no deber estar contaminada o contener alguna sustancia que interfiera
con las pruebas y ocasione un resultado errneo. Si sucede, la muestra ser rechazada
de manera definitiva y se notificar al usuario.
4. En casos especiales, si la muestra no cumple con los criterios de calidad biolgica
pero el usuario considera que la muestra es de alto valor deber notificarlo al
laboratorio de VIH por escrito en la solicitud o formato y aceptar que el resultado
debe ser interpretado con cautela, quedando el laboratorio del InDRE libre de toda
responsabilidad legal.
Captura de datos y resultados
La captura de los datos en la plataforma InfoLab InDRE se realiza de acuerdo a la
capacitacin recibida por el departamento de recepcin de muestras.
PROGRAMA DE EVALUACIN EXTERNA DEL DESEMPEO (PEED) VIH

El InDRE genera informacin de orden nacional, integrando y siendo rector de la RNLSP,
en materia de diagnstico, investigacin y desarrollo tecnolgico para la vigilancia
epidemiolgica, para la toma de decisiones en el control de enfermedades y la formulacin y
orientacin de los programas nacionales de salud.
En este sentido en el instituto, uno de los compromisos es que el InDRE y la RNLSP
generen informacin confiable y oportuna para la toma de decisiones en apoyo de la
vigilancia epidemiolgica y los Programas Nacionales de Salud, en apego a la normativa
vigente y las buenas prcticas de laboratorio.
Desde el ao de 1999 el InDRE inici un programa de control de calidad en el que la red
enva el 100% de las muestras positivas y un 10% de las muestras negativas de VIH. En el
P g i n a 31|36
2002 la RNLSP se incorpor al Programa Caminando a la Excelencia para evaluar el

desempeo de los estados respecto a los programas prioritarios de la salud y fomentar su
desarrollo. En el ao 2003 se inici el programa de evaluacin del desempeo a travs de
paneles de eficiencia. En el 2008 se otorg la liberacin diagnstica a los laboratorios
estatales que cumplieron con el desempeo solicitado. El marco analtico de la red para el
inmuodiagnstico del VIH en el 2010 estaba conformado por 28 laboratorios, de los cuales
23 realizan una prueba, 6 dos pruebas y 5 realizan la prueba confirmatoria.
Envo de paneles de eficiencia

El Departamento de Enfermedades Emergentes y Urgencias del InDRE se encarga de
producir el panel de sueros y embalar el panel en condiciones ptimas para su envo.
El panel de sueros se elabora por procedimientos estandarizados. Consiste de 5 muestras
reactivas uno para el marcador del virus de la inmunodeficiencia humana VIH-1 y muestras
negativas para los marcadores virales analizados en el tamizaje.
Los sueros se caracterizan con las pruebas del algoritmo diagnstico del InDRE (ELISA,
ELISA y WB) y con los estuches comerciales disponibles actualmente en el mercado
nacional y que ha sido probada su eficacia diagnstica en el laboratorio de VIH del InDRE.
La coordinacin de la RNLSP se encarga de la logstica del envo y seguimiento de los
paneles a todos los laboratorios participantes.
El envo del primer panel ser la segunda semana de marzo del ao en curso, y el segundo
envo ser en la segunda semana del mes de septiembre del mismo ao.
a. El jefe del departamento elabora los reportes de resultados y los enva a los
participantes.
b. Mantiene la confidencialidad de los laboratorios participantes mediante una clave
nica.
Envo de resultados PEED VIH al InDRE

Los resultados deben ser registrados en el formato especial de reporte, el cual se integra en
la papelera propia del panel. Es necesario leer cuidadosamente el instructivo de llenado.
Una copia electrnica del formato requisitado deber ser enviada va electrnica al jefe del
departamento antes de la fecha establecida.
El formato impreso y firmado en original, deber ser enviado por oficio a la Direccin
General del InDRE.
P g i n a 32|36
Informe de resultados PEED VIH a la RNLSP

Los resultados sern expresados en resultados concordantes y resultados falsos positivos y
falsos negativos los cuales se presentarn en cuadros y grficos, con las cifras globales e
individuales.
Se realizar un informe preliminar con los resultados de concordancia por participante ser
enviado a cada participante cuatro semanas despus de la entrega de resultados a InDRE.
El objetivo de este informe preliminar es recibir comentarios y aclaraciones por parte de la
RNLESP.
El informe final detallado se dar cuatro semanas despus el envo del informe preliminar.
El listado de reactivos evaluados se enviara de manera anual a los laboratorios de la red.
Caractersticas de equipos comerciales

Equipos disponibles
Especificaciones tcnicas
P g i n a 33|36
Cuadro 6. Equipos utilizados en RNLSP, las caractersticas operativas son informacin del
inserto
P g i n a 34|36
BIBLIOGRAFA
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World Health Organization. Laboratory Biosafety Manual3rd ed. Geneva: WHO
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P g i n a 36|36

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LINEAMIENTOS PARA LA VIGILANCIA DEL

DIAGNSTICO DE LA INFECCIN POR EL VIH/SIDA

PRIMERA EDICIN, 2014

Diagnstico de infeccin por VIH

TODOS LOS DERECHOS RESERVADOS CONFORME A LA LEY,

SE PERMITE LA REPRODUCCIN TOTAL O PARCIAL SI SE CITA LA FUENTE:

COLECCIN PUBLICACIONES TCNICAS DEL INDRE:

Instituto de Diagnstico y Referencia Epidemiolgicos.

EDICIN ESTUVO A CARGO DE: DR. JOS ALBERTO DAZ QUIONEZ

EL DISEO ESTUVO A CARGO DE:

IMPRESO EN MXICO. PRINTED IN MEXICO

INSTITUTO DE DIAGNSTICO Y REFERENCIA EPIDEMIOLGICOS

sido el ms utilizado para la deteccin de anticuerpos anti-VIH que el organismo genera

ANTECEDENTES DEL LABORATORIO DE VIH/ETS

Figura 1. Se muestra la distribucin de la RNLSP para el inmunodiagnstico por laboratorio de

EL MARCO LEGAL DEL LABORATORIO

4. Secretara de Salud. Programa Sectorial de Salud 2013-2018. Diario Oficial de la

ORGANIZACIN DE LA RED NACIONAL DE LABORATORIOS PARA EL

FUNCIONES DEL LABORATORIO CENTRAL DE REFERENCIA (InDRE)

Efectuar la determinacin serolgica de anticuerpos para el diagnstico de la infeccin

Capacitar en servicio al personal de la red que se dedica al diagnstico de la infeccin

Desarrollar investigacin aplicada en apoyo a la vigilancia epidemiolgica.

Generar informacin de orden nacional la cual se integrar al informe nacional.

Realizar la funcin de rector de la RNLSP en materia de diagnstico, investigacin y

FUNCIONES DE LOS LABORATORIOS ESTATALES (LESP)

Participar en la elaboracin y actualizacin de los manuales tcnicos referentes al

FUNCIONES DE LOS LABORATORIOS A NIVEL LOCAL

DEFINICIN OPERACIONAL DE CASO

Las pruebas de tamizaje y suplementaria reactivas no son diagnsticas en este grupo de

TOMA MANEJO Y ENVO DE MUESTRAS

de Salud, la muestra se enva al LESP correspondiente. Para otras instituciones el envo se

Cuadro 3. Tcnicas inmunoserolgicas

ALGORITMO DE DIAGNSTICO PARA LA DETERMINACIN DE LA

La muestra de suero o plasma, debe mantenerse siempre en refrigeracin entre 2 a 8 C

ledas por el sistema automatizado. La cantidad de conjugado HRP fijado es directamente

a. Situacin caso discordante:

Decisin del mdico

No considerar como infectado

Explicar al paciente que las pruebas de laboratorio tienen limitaciones

b. Situacin: caso no concluyente (indeterminado, zona gris):

Decisin del mdico:

Es importante mencionar que las muestras a procesar deben de estar a temperatura

Si el anlisis es vlido, calcular el valor del punto de corte CNx + 0.100

Banda con bordes difusos

En la RNLSP se utilizan 15 estuche con diferente formato, para el inmunodiagnstico de

ESTUCHES VIH UTILIZADOS EN RNLSP

Vironostika HIV Uni-Form 11 plus O

VIH 1/2 Stat-Pack Chembio

UNI-GOLD HIV LICON

New Lav Blot Bio Rad

BIO RAD Genescreen HIV 1/2 Versin 2

El algoritmo de referencia (InDRE) para el diagnstico de la enfermedad de VIH se realiza

Situacin caso discordantes:

Situacin caso no concluyente (indeterminado, zona gris)

Criterios de aceptacin y rechazo

PROGRAMA DE EVALUACIN EXTERNA DEL DESEMPEO (PEED) VIH

2002 la RNLSP se incorpor al Programa Caminando a la Excelencia para evaluar el

Envo de paneles de eficiencia

Envo de resultados PEED VIH al InDRE

Informe de resultados PEED VIH a la RNLSP

El listado de reactivos evaluados se enviara de manera anual a los laboratorios de la red.

Caractersticas de equipos comerciales

acute HIV infection. J Clin Microbiol. 2012; 50(6); 1874. Doi